一种复方氨基酸中间体总氨基酸含量测定方法

摘要

一种复方氨基酸中间体总氨基酸含量测定方法，精密量取复方氨基酸注射液样品nml，加水25ml，混合均匀；用浓度为0.1mol/L的氢氧化钠或0.1mol/L的盐酸溶液调整步骤一完成后的混合溶液PH值到7.0；在步骤二完成后的混合液中加入预先调制的PH值为9.0的甲醛溶液10ml；再用浓度为0.1mol/L的氢氧化钠滴定液将步骤三完成后的混合液滴定至PH＝9.0；所消耗的氢氧化钠滴定液的体积即为α-氨基氮所消耗的体积，每1ml浓度为0.1mol/L的氢氧化钠滴定液相当于1.401mg的α-氨基氮，再根据α-氨基氮推算出氨基酸总含量。本发明操作简单，检测速度快，一般从取样到检测完毕只需10分钟左右。

权利要求

1.一种复方氨基酸中间体总氨基酸含量测定方法，其特征在于，由以下步骤组成：步骤一：取复方氨基酸注射液样品n ml，加水25ml，混合均匀；

步骤二：用浓度为0.1mol/L的氢氧化钠或0.1mol/L的盐酸溶液调整步骤一完成后的混合溶液pH值到7.0；

步骤三：在步骤二完成后的混合液中加入预先调制的pH值为9.0的甲醛溶液10ml；

步骤四：再用浓度为0.1mol/L的氢氧化钠滴定液将步骤三完成后的混合液滴定至PH＝9.0，记录滴定液消耗的体积；

步骤五：步骤四所消耗的氢氧化钠滴定液的体积即为α-氨基氮所消耗的体积，每1ml浓度为0.1mol/L的氢氧化钠滴定液相当于1.401mg的α-氨基氮，再根据α-氨基氮推算出氨基酸总含量，计算公式如下：其中：F—氢氧化钠滴定液的实际摩尔浓度与标准摩尔浓度比，V—消耗氢氧化钠滴定液的体积（ml），

a—复方氨基酸注射液处方中的标准α-氨基氮含量(mg/ml)，n—取样量（ml），

所述复方氨基酸注射液样品n ml，1≤n≤3，n取整数。

2.根据权利要求1所述一种复方氨基酸中间体总氨基酸含量测定方法，其特征在于：步骤三中所述甲醛溶液的浓度为：37.0%-40.0%单位：g/ml。

说明书

一种复方氨基酸中间体总氨基酸含量测定方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种复方氨基酸中间体总氨基酸含量测定方法。

背景技术

[0002] 现有氨基酸含量检测均采用专门的氨基酸分析仪或高效液相色谱仪，先对复方氨基酸溶液进行适当处理，在适宜的温度及PH值条件下，经过适宜的色谱柱在一定比例的流动相带动下，经梯度洗脱分离，再用专门的检测器检测峰面积。另取相应的氨基酸对照品制成相应浓度的对照品溶液，同法测定，用外标法按峰面积比计算各种氨基酸的含量(也可采用内标法进行分离检测)。

[0003] 此方法作为法定检测通用方法，可检测出每一种具体氨基酸的含量，一般用于成品出厂前的检验和法定检验，但不适用于氨基酸输液的中间体控制用，因为此方法有以下缺点：

[0004] 1)、操作复杂，检测周期长，从取样到单次检测出结果2小时以上，有的品种还需要多次分离检测，检测时间也延长了生产时间，对于无菌制剂来说，可能因生产时间长而导致微生物大量繁殖，不利于氨基酸输液药品生产及质量控制；

[0005] 2)、检测所需的对照品及其它化学试剂价格昂贵，检测成本高；

[0006] 3)、系统误差较大，检测精度不高，对生产中的含量控制没有指导价值。

发明内容

[0007] 本发明针对复方氨基酸输液配料过程中间体含量控制，提供一种复方氨基酸中间体总氨基酸含量测定方法，利用药品中的每种氨基酸均有“α-氨基”这一共性，通过选择性化学反应后进行中和滴定，再根据中和剂的消耗量计算氨基酸含量。

[0008] 本发明的上述目的是通过这样的技术方案来实现的：一种复方氨基酸中间体总氨基酸含量测定方法，由以下步骤组成：

[0009] 步骤一：取复方氨基酸注射液样品nml，加水25ml，混合均匀；

[0010] 步骤二：用浓度为0.1mol/L的氢氧化钠或0.1mol/L的盐酸溶液调整步骤一完成后的混合溶液pH值到7.0；

[0011] 步骤三：在步骤二完成后的混合液中加入预先调制的pH值为9.0的甲醛溶液10ml；

[0012] 步骤四：再用浓度为0.1mol/L的氢氧化钠滴定液将步骤三完成后的混合液滴定至PH＝9.0，记录滴定液消耗的体积；

[0013] 步骤五：步骤四所消耗的氢氧化钠滴定液的体积即为α-氨基氮所消耗的体积，每1ml浓度为0.1mol/L的氢氧化钠滴定液相当于1.401mg的α-氨基氮，再根据α-氨基氮推算出氨基酸总含量，计算公式如下：

[0014]

[0015] 其中：F—氢氧化钠滴定液的实际摩尔浓度与标准摩尔浓度比，[0016] V—消耗氧化钠滴定液的体积(ml)，

[0017] a—复方氨基酸注射液处方中的标准α-氨基氮含量(mg/ml)，

[0018] n—取样量(ml)。

[0019] 所述复方氨基酸注射液样品nml，1≤n≤3，n取整数。

[0020] 步骤三中所述甲醛溶液的浓度为：37.0％-40.0％单位：g/ml。

[0021] 本发明一种复方氨基酸中间体总氨基酸含量测定方法的有益效果如下：

[0022] 1、操作简单，检测速度快，一般从取样到检测完毕只需10分钟左右；

[0023] 2、所有的试剂均为常用试剂，价格低廉，检测成本低；

[0024] 3、本方法适用范围广，所有复方氨基酸输液都可采用；

[0025] 4、检测精度相对较高，对生产过程有很强的指导作用。

[0026] 5、终点的判断还可用指标剂法替代。

具体实施方式

[0027] 工作原理：氨基酸为两性物质，含—NH2(碱性)和—COOH(酸性)，当甲醛在碱性(PH＝9)环境下与氨基酸混合时，选择性地与其中α位上的—NH2发生亲核加成反应而显现出酸性，然后用氢氧化钠与—COOH发生酸碱中和反应，通过反应物消耗的当量数来计算氨基酸含量。

[0028] 实施例1：

[0029] 复方氨基酸注射液3AA中间体总氨基酸含量测定法：

[0030] 精密量取本品3ml，加水25ml混匀，用浓度为0.1mol/L的氢氧化钠或0.1mol/L的盐酸溶液调整pH值到7.0，然后加预先调整pH值为9.0的甲醛溶液10ml，再用0.1mol/L的氢氧化钠滴定液滴定至pH值到9.0即得。此次消耗氢氧化钠滴定液的体积(ml)即为α-氨基氮所消耗的体积。总氨基酸含量计算公式为：

[0031]

[0032] F—氢氧化钠滴定液的实际摩尔浓度与标准摩尔浓度比，

[0033] V—消耗氧化钠滴定液的体积(单位：ml)，

[0034] 公式中4.711为复方氨基酸注射液3AA标准规定的α-氨基氮含量(单位：mg/ml)，

[0035] 公式中3为复方氨基酸注射液3AA的取样量(单位：ml)。

[0036] 如果氢氧化钠滴定液的实际浓度为0.1012mol/L，所消耗的氢氧化钠滴定液的体积为9.8ml，即得α-氨基酸总量为其标示量的98.31％。