本发明涉及一种百合种球脱毒的方法，特征是，包括以下步骤：（1）将感病百合种球进行低温处理；（2）剥去感病百合种球的外层鳞片，将鳞茎盘放入培养箱中进行预处理；（3）预处理后的鳞茎盘再经光照和黑暗交替处理28~30天，每经15~16小时的光照后经7~8小时黑暗处理，光照处理温度为38±1℃，光照强度为1500~2000Lux，黑暗处理温度为25±1℃；（4）选择生长正常的鳞茎盘，剥取0.8~1.2cm的茎尖接于分化培养基上培养14~16天，培养温度为25±2℃，光照强度为1500~2000Lux，光照周期为11~12小时/天，形成带有小鳞茎的新苗。本发明采用多种脱毒方式的有机结合，提高了脱毒手段的实际操作性，对于技术推广和普及有实际意义。
1.一种百合种球脱毒的方法，其特征是，包括以下步骤：
（2）选芽长为4~8cm的感病百合种球，剥去外层鳞片，留3~5个内层鳞片的鳞茎盘，将鳞茎盘放入培养箱中进行预处理，预处理条件为：光照强度1500~2000Lux，温度35~40℃，处理时间2~3天；
（3）预处理后的鳞茎盘再经光照和黑暗交替处理28~30天，每经15~16小时的光照后经7~8小时黑暗处理，光照处理温度为38±1℃，光照强度为1500~2000Lux，黑暗处理温度为25±1℃；
（4）病毒唑处理：选择生长正常的鳞茎盘，剥取0.8~1.2cm的茎尖接于分化培养基上培养14~16天，培养温度为25±2℃，光照强度为1500~2000Lux，光照周期为11~12小时/天，形成带有小鳞茎的新苗；所述分化培养基的成份为：MS培养基+6-BA 0.5~1.0mg/L+NAA
2.如权利要求1所述的百合种球脱毒的方法，其特征是：所述MS培养基的成份包括：大 量 元 素 为：（1）NH4NO3，1.65g/L；（2）KNO3，1.90g/L；（3）KH2PO4，0.17g/L；（4）MgSO4·7H2O，0.37g/L；（5）CaCl2·2H2O，0.44g/L；
微量元素为：（1）MgSO4·4H2O，22.3mg/L；（2）H3BO3，6.2mg/L；（3）ZnSO4·7H2O，8.6mg/L；
（4）KI，0.83mg/L；（5）Na2MoO4·2H2O，0.25g/L；（6）CuSO4·5H2O，0.025mg/L；（7）CoCl2·6H2O，
0.025mg/L；（8）FeSO4·7H2O，27.8mg/L；（9）Na2-EDTA，37.3mg/L；
有机成分为：（1）肌醇，100mg/L；（2）烟酸，0.5mg/L；（3）L-甘氨酸，2mg/L；（4）维生素B6，0.5mg/L；（5）维生素B1，0.1mg/L；
百合种球脱毒的方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种百合种球进行脱毒的方法，属于花卉栽培生产技术领域。
背景技术
[0002] 百合为百合科百合属，重要切花，栽培品种多，种植面积日益扩大。我国百合切花的商品化栽培历史较短，总体生产水平和技术落后于荷兰、美国和日本等国家，目前主要依靠进口种球进行生产。百合种球价格昂贵，易感染病毒，特别是经多带自繁以后，病毒积累、蔓延，加之缺乏严格的植物病毒检疫控制技术，只是病毒在百合体内积累和蔓延，由于缺乏脱毒优质种源，国内自繁种球病毒感染率高到80%，一般发病率在40%~50%，二代种球的带毒率在90%以上，由此造成百合种性退化、植株生长势衰弱、产量下降、品质变劣等一系列问题。病毒对百合造成的危害是严重的，成为制约百合产业健康法杖的瓶颈之一。采用生物、物理、化学方法等途径来防止病毒危害收效甚微，给百合产业造成巨大的经济损失。
发明内容
[0003] 本发明的目的是克服现有技术中存在的不足，提供一种百合种球脱毒的方法，操作简单、对仪器设备要求低，便于推广。
[0004] 按照本发明提供的技术方案，所述百合种球脱毒的方法，特征是，包括以下步骤：
[0005] （1）将感病百合种球在4~8℃处理45~50天；
[0006] （2）选芽长为4~8cm的感病百合种球，剥去外层鳞片，留3~5个内层鳞片的鳞茎盘，将鳞茎盘放入培养箱中进行预处理，预处理条件为：光照强度1500~2000Lux，温度35~40℃，处理时间2~3天；
[0007] （3）预处理后的鳞茎盘再经光照和黑暗交替处理28~30天，每经15~16小时的光照后经7~8小时黑暗处理，光照处理温度为38±1℃，光照强度为1500~2000Lux，黑暗处理温度为25±1℃；
[0008] （4）病毒唑处理：选择生长正常的鳞茎盘，剥取0.8~1.2cm的茎尖接于分化培养基上培养14~16天，培养温度为25±2℃，光照强度为1500~2000Lux，光照周期为11~12小时/天，形成带有小鳞茎的新苗；所述分化培养基的成份为：MS培养基+6-BA 0.5~1.0mg/L+NAA0.2~0.5mg/L+病毒唑5~6mg/ml。
[0009] 所述MS培养基的成份包括：
[0010] 所述大量元素为：（1）NH4NO3，1.65g/L；（2）KNO3，1.90g/L；（3）KH2PO4，0.17g/L；（4）MgSO4·7H2O，0.37g/L；（5）CaCl2·2H2O，0.44g/L；
[0011] 所述微量元素为：（1）MgSO4·4H2O，22.3mg/L；（2）H3BO3，6.2mg/L；（3）ZnSO4·7H2O，8.6mg/L；（4）KI，0.83mg/L；（5）Na2MoO4·2H2O，0.25g/L；（6）CuSO4·5H2O，0.025mg/L；（7）CoCl2·6H2O，0.025mg/L；（8）FeSO4·7H2O，27.8mg/L；（9）Na2-EDTA，37.3mg/L；
[0012] 所述有机成分为：（1）肌醇，100mg/L；（2）烟酸，0.5mg/L；（3）L-甘氨酸，2mg/L；（4）维生素B6，0.5mg/L；（5）维生素B1，0.1mg/L；
[0013] 并附加蔗糖30g/L；琼脂 12g/L。
[0014] 本发明采用多种脱毒方式的有机结合，从很大程度上提高了脱毒手段的实际操作性，对于技术推广和普及有实际意义。单一的脱毒技术活难以完全脱除病毒，或需要较长的时间，2种或3种脱毒技术的组合使用正成为生产无毒百合苗的首选。
具体实施方式
[0015] 下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。
[0016] 本发明所使用的分化培养基选择MS培养基作为基本培养基，以NAA和6-BA作为调控的生长激素。
[0017] 所述MS培养基的成份包括：
[0018] 所述大量元素为：（1）NH4NO3，1.65g/L；（2）KNO3，1.90g/L；（3）KH2PO4，0.17g/L；（4）MgSO4·7H2O，0.37g/L；（5）CaCl2·2H2O，0.44g/L；
[0019] 所述微量元素为：（1）MgSO4·4H2O，22.3mg/L；（2）H3BO3，6.2mg/L；（3）ZnSO4·7H2O，8.6mg/L；（4）KI，0.83mg/L；（5）Na2MoO4·2H2O，0.25g/L；（6）CuSO4·5H2O，0.025mg/L；（7）CoCl2·6H2O，0.025mg/L；（8）FeSO4·7H2O，27.8mg/L；（9）Na2-EDTA，37.3mg/L；
[0020] 所述有机成分为：（1）肌醇，100mg/L；（2）烟酸，0.5mg/L；（3）L-甘氨酸，2mg/L；（4）维生素B6，0.5mg/L；（5）维生素B1，0.1mg/L；
[0021] 所述蔗糖为30g/L；
[0022] 所述琼脂为12g/L。
[0023] 实施例一：一种百合种球脱毒的方法，包括以下步骤：
[0024] （1）将感病百合种球在4℃处理50天；
[0025] （2）选芽长为4cm的感病百合种球，剥去外层鳞片，留3个内层鳞片的鳞茎盘，将鳞茎盘放入培养箱中进行预处理，预处理条件为：光照强度1500Lux，温度35℃，处理时间3天；
[0026] （3）预处理后的鳞茎盘再经光照和黑暗交替处理28天，每经15小时的光照后经7小时黑暗处理，光照处理温度为37℃，光照强度为1500Lux，黑暗处理温度为24℃；
[0027] （4）病毒唑处理：选择生长正常的鳞茎盘，剥取0.8cm的茎尖接于分化培养基上培养14天，培养温度为24℃，光照强度为1500Lux，光照周期为11小时/天，形成带有小鳞茎的新苗；所述分化培养基的成份为：MS培养基+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L+病毒唑5mg/mL。
[0028] 经试验证明，在百合种球组织培养过程中使用现有技术单一的茎尖培养脱毒技术的成活率为60%，脱毒率为30%，而本实施例将三种脱毒技术结合的成活率可达80%，脱毒率达78%。
[0029] 实施例二：一种百合种球脱毒的方法，包括以下步骤：
[0030] （1）将感病百合种球在8℃处理45天；
[0031] （2）选芽长为8cm的感病百合种球，剥去外层鳞片，留5个内层鳞片的鳞茎盘，将鳞茎盘放入培养箱中进行预处理，预处理条件为：光照强度2000Lux，温度40℃，处理时间2天；
[0032] （3）预处理后的鳞茎盘再经光照和黑暗交替处理30天，每经16小时的光照后经8
