一种高通量筛选细胞在三维基质中生长迁移行为的装置及方法

摘要

一种高通量筛选细胞在三维基质中生长迁移行为的装置及方法，它涉及生物学领域，电动载物台的下方设置有物镜，电动载物台的上方设置有培养室平皿，培养室平皿内底部设置有载玻片，载玻片上覆盖有聚二甲基硅氧烷薄层，聚二甲基硅氧烷薄层上涂有细胞悬浮液层，细胞悬浮液层两侧设置有胶条，胶条上覆盖有盖玻片。它克服了现有二维研究无法提供细胞在三维状态生长及迁移等重要行为信息的不足，提供一种高通量三维筛选新装置及方法，不仅实时监测细胞在三维状态的各种行为，而且能高通量筛选不同基质、不同因子对细胞在三维状态的生长及迁移等重要行为的同时，方便、高效、高通量的筛选各类基质对细胞行为的影响，并且该装置价格低廉、结构简单。

权利要求

1.高通量筛选细胞在三维基质中生长迁移行为的装置，其特征在于它的筛选装置包含载玻片(1)、聚二甲基硅氧烷薄层(2)、盖玻片(3)、胶条(4)、物镜(5)、电动载物台(6)和培养室平皿(7)，电动载物台(6)的下方设置有物镜(5)，电动载物台(6)的上方设置有培养室平皿(7)，培养室平皿(7)内底部设置有载玻片(1)，载玻片(1)上覆盖有聚二甲基硅氧烷薄层(2)，聚二甲基硅氧烷薄层(2)上涂有细胞悬浮液层，细胞悬浮液层两侧设置有胶条(4)，胶条(4)上覆盖有盖玻片(3)。

2. 高通量筛选细胞在三维基质中生长迁移行为的方法，其特征在于采用权利要求1所述的高通量筛选细胞在三维基质中生长迁移行为的装置，具体筛选方法为：（1）先用聚5

二甲基硅氧烷覆盖载玻片表面并在通风橱中静置形成疏水界面，取50μl浓度为10 cell �1ml 的细胞悬液与等体积基质混匀；

（2）用微量移液器取10-20μl混合液，将细胞混合液依次均匀点至载玻片样品观察区域形成矩阵，以5×5矩阵为例，观察区域为1.5cm，样品直径1.2mm，样品间距为3mm，单个样品高度为0.5mm，或者根据研究所需量身定制样品观察区从而形成数量不等的样品矩阵；

（3）将矩阵静置凝结，盖上盖玻片，然后置于配备电动载物台的显微镜下，通过电动载物台及物镜定义每个矩阵点所在位置，通过自动照相系统每隔一定时间间隔获取图像，从而获得细胞在各种三维基质中的生长、迁移状态，并高通量筛选各种细胞外基质对细胞生长、迁移行为的影响。

说明书

一种高通量筛选细胞在三维基质中生长迁移行为的装置及

方法

技术领域

[0001] 本发明涉及生物学领域，具体涉及一种高通量筛选细胞在三维基质中生长迁移行为的装置及方法。

背景技术

[0002] 细胞的生长及迁移是众多重要细胞生物学过程如个体发育、组织修复、器官再生、癌症恶性转移的重要步骤，细胞在二维的生长及迁移等行为与三维状态有很大差异。目前，研究细胞的生长及迁移的装置多是在二维平面装置上进行，研究表明，在三维状态培养的细胞产生极化，且形成葡萄状克隆，但是在二维状态培养的细胞却无此特征。此外，细胞在体内状态都是以三维形式存在，细胞外的各种基质及环境都会影响细胞的生长及迁移等行为。因此细胞在三维状态的生长及迁移等更接近于细胞在体内的状态。目前尚无一种高通量筛选三维状态下细胞生长及迁移等行为的装置。

发明内容

[0003] 本发明的目的是提供一种高通量筛选细胞在三维基质中生长迁移行为的装置及方法，它克服了现有二维研究无法提供细胞在三维状态生长及迁移等重要行为信息的不足，提供一种高通量三维筛选新装置及方法，该装置不仅实时监测细胞在三维状态的各种行为，而且能高通量筛选不同基质、不同因子对细胞在三维状态的生长及迁移等重要行为的同时，方便、高效、高通量的筛选各类基质对细胞行为的影响，并且该装置价格低廉、结构简单。

[0004] 为了解决背景技术所存在的问题，本发明采取以下技术方案：它的筛选装置包含载玻片1、聚二甲基硅氧烷薄层2、盖玻片3、胶条4、物镜5、电动载物台6和培养室平皿7，电动载物台6的下方设置有物镜5，电动载物台6的上方设置有培养室平皿7，培养室平皿7内底部设置有载玻片1，载玻片1上覆盖有聚二甲基硅氧烷薄层2，聚二甲基硅氧烷薄层2上涂有细胞悬浮液层，细胞悬浮液层两侧设置有胶条4，胶条4上覆盖有盖玻片3。

[0005] 它的筛选方法为：（1）先用聚二甲基硅氧烷覆盖载玻片表面并在通风橱中静置形5 �1
成疏水界面，取50μl细胞悬液(浓度为10 cell ml )与等体积基质混匀；

[0006] （2）用微量移液器取10-20μl混合液，将细胞混合液依次均匀点至载玻片样品观察区域形成矩阵，以5×5矩阵为例，观察区域为1.5cm，样品直径1.2mm，样品间距约为3mm，单个样品高度约为0.5mm，也可根据研究所需量身定制样品观察区从而形成数量不等的样品矩阵；

[0007] （3）将矩阵静置凝结，盖上盖玻片，然后置于配备电动载物台的显微镜下，通过电动载物台及物镜定义每个矩阵点所在位置，通过自动照相系统每隔一定时间间隔获取图像，从而获得细胞在各种三维基质中的生长、迁移等状态，并高通量筛选各种细胞外基质对细胞生长、迁移等行为的影响。

[0008] 本发明具有以下有益效果：它克服了现有二维研究无法提供细胞在三维状态生长及迁移等重要行为信息的不足，提供一种高通量三维筛选新装置及方法，该装置不仅实时监测细胞在三维状态的各种行为，而且能高通量筛选不同基质、不同因子对细胞在三维状态的生长及迁移等重要行为的同时，方便、高效、高通量的筛选各类基质对细胞行为的影响，并且该装置价格低廉、结构简单。

[0009] 附图说明：

[0010] 图1为本发明的结构示意图；

[0011] 图2为本发明中载玻片的结构示意图。

[0012] 具体实施方式：

[0013] 参照图1-2，本具体实施方式采取以下技术方案：它的筛选装置包含载玻片1、聚二甲基硅氧烷薄层2、盖玻片3、胶条4、物镜5、电动载物台6和培养室平皿7，电动载物台6的下方设置有物镜5，电动载物台6的上方设置有培养室平皿7，培养室平皿7内底部设置有载玻片1，载玻片1上覆盖有聚二甲基硅氧烷薄层2，聚二甲基硅氧烷薄层2上涂有细胞悬浮液层，细胞悬浮液层两侧设置有胶条4，胶条4上覆盖有盖玻片3。

[0014] 它的筛选方法为：（1）先用聚二甲基硅氧烷覆盖载玻片表面并在通风橱中静置形5 �1
成疏水界面，取50μl细胞悬液(浓度约10 cell ml )与等体积基质混匀；

[0015] （2）用微量移液器取10-20μl混合液，将细胞混合液依次均匀点至载玻片样品观察区域形成矩阵，以5×5矩阵为例，观察区域为1.5cm，样品直径1.2mm，样品间距约为3mm，单个样品高度约为0.5mm，也可根据研究所需量身定制样品观察区从而形成数量不等的样品矩阵；

[0016] （3）将矩阵静置凝结，盖上盖玻片，然后置于配备电动载物台的显微镜下，通过电动载物台及物镜定义每个矩阵点所在位置，通过自动照相系统每隔一定时间间隔获取图像，从而获得细胞在各种三维基质中的生长、迁移等状态，并高通量筛选各种细胞外基质对细胞生长、迁移等行为的影响。

[0017] 本具体实施方式克服了现有二维研究无法提供细胞在三维状态生长及迁移等重要行为信息的不足，提供一种高通量三维筛选新装置及方法，该装置不仅实时监测细胞在三维状态的各种行为，而且能高通量筛选不同基质、不同因子对细胞在三维状态的生长及迁移等重要行为的同时，方便、高效、高通量的筛选各类基质对细胞行为的影响，并且该装置价格低廉、结构简单。