一种用于丝状真菌显微形态观察的制片方法

摘要

本发明涉及一种用于丝状真菌显微形态观察的制片方法，其步骤如下：首先在水琼脂培养平板上挖取一个凹槽，移除凹槽内的培养基；再将一块尺寸小于凹槽的水琼脂培养基块放置在凹槽内，挑取待鉴定真菌培养物接种于位于凹槽内的水琼脂培养基块朝上的一面，然后将无菌盖玻片盖于水琼脂培养基块上；盖上培养皿盖，密封后于室温下培养，培养结束后取出盖玻片，制作成真菌的观察玻片。本发明的方法制作丝状真菌的菌体观察玻片简单易操作，可以根据不同菌种的生长周期，采用连续取片的方式，获得不同发育时期菌体观察玻片，保证了丝状真菌物种鉴定工作的准确性。

权利要求

1.一种用于丝状真菌显微形态观察的制片方法，其特征在于包括如下步骤：首先在水琼脂培养平板上挖取一个凹槽，移除凹槽内的培养基；再将一块尺寸小于凹槽的水琼脂培养基块放置在凹槽内，挑取待鉴定真菌培养物接种于位于凹槽内的水琼脂培养基块朝上的一面，然后将无菌盖玻片盖于水琼脂培养基块上；盖上培养皿盖，密封后于室温下培养，培养结束后取出盖玻片，制作成真菌的观察玻片；其中所述的凹槽为方形，其大小为1.6 ×

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1.6 cm ；水琼脂培养基块的大小为0.4 × 0.4 cm ；无菌盖玻片大小为1.8 × 1.8 cm。

2.如权利要求1所述的制片方法，其特征在于所述的水琼脂培养平板的制备方法如下:在1000 ml蒸馏水中加入15克琼脂粉后， 121℃,98.1kPa灭菌，最后倒入无菌培养皿中冷却。

说明书

一种用于丝状真菌显微形态观察的制片方法

技术领域

[0001] 本发明属于真菌学研究领域，具体涉及一种用于丝状真菌显微形态观察的制片方法。

背景技术

[0002] 长期以来，对丝状真菌的生物学鉴定主要是以菌体的形态特征为依据，因此，获得较好的菌体显微形态观察玻片对于准确鉴别丝状真菌种类就至关重要。目前，制作丝状真菌观察玻片的传统方法的步骤如下：首先用挑针直接挑取培养基上的真菌培养物，置于载玻片上；然后小心地将挑取的菌丝体用挑针分散开，盖上盖玻片。但此方法存在以下几个明显的缺点：(1)由于传统制片方法极易出现菌体重叠，难以获得观察效果较好的玻片，即使技术娴熟的操作人员也需要大量制片，才能获得符合观察要求的观察玻片；(2)在挑片过程中，真菌孢子在载孢体上的自然着生状态极易遭到人为破坏，因此，传统挑片法获得的观察玻片往往难以反映真菌的产孢方式与类型，而此项特征正是丝状真菌分类中最为关键的鉴别要素；(3)挑片获得的观察玻片中，菌体往往处于发育后期，通过挑片的方法几乎不可能获得发育早期的菌体，这对研究真菌不同发育阶段菌体形态特征十分不利。因此，在丝状真菌鉴定领域就需要建立一种新的制片方法。

发明内容

[0003] 本发明的目的是提供一种用于丝状真菌显微形态观察的制片方法，即针对传统制片方法的严重缺陷而建立的一种新的制片方法，便于更加全面、精确地观察丝状真菌的显微形态特征，以保证菌种鉴定工作的准确性，从而弥补现有技术的不足。

[0004] 本发明的方法，其步骤如下：首先在水琼脂培养平板上挖取一个凹槽，移除凹槽内的培养基；再将一块尺寸小于凹槽的水琼脂培养基块放置在凹槽内，挑取待鉴定真菌培养物接种于位于凹槽内的水琼脂培养基块朝上的一面，然后将无菌盖玻片盖于水琼脂培养基块上；盖上培养皿盖，密封后于室温下培养，培养结束后取出盖玻片，制作成真菌的观察玻片。

[0005] 上述的水琼脂培养平板的制备方法如下：在1000ml蒸馏水中加入15克琼脂粉后，121℃，98.1kPa灭菌，最后倒入无菌培养皿中冷却。

[0006] 上述的凹槽为方形，其大小为1.6×1.6cm2。

[0007] 上述的水琼脂培养基块的大小为0.4×0.4cm2。

[0008] 上述的无菌盖玻片大小为1.8×1.8cm2。

[0009] 本发明的方法制作丝状真菌的菌体观察玻片简单易操作，可以根据不同菌种的生长周期，采用连续取片的方式，获得不同发育时期的菌体观察玻片，保证了丝状真菌物种鉴定工作的准确性。

具体实施方式