黄芪作为青贮饲料添加剂及其在制备青贮饲料中的应用

摘要

本发明公开了黄芪作为青贮饲料添加剂及其在制备青贮饲料中的应用。本发明所提供的制备青贮饲料的方法，包括如下步骤：在青贮原料中添加黄芪或/和黄芪提取物后进行厌氧发酵，得到青贮饲料；所述黄芪提取物是用水从黄芪中提取出来的水溶性物质。本发明制备的青贮饲料具有下述至少一种特性：1)粗蛋白含量高于对照；2)氨态氮与总氮的比值低于对照；3)中性洗涤纤维含量低于对照；4)酸性洗涤纤维含量低于对照；5)pH值低于对照。

权利要求

1.制备青贮饲料的方法，包括如下步骤：在青贮原料中添加黄芪提取物或/和黄芪后进行厌氧发酵，得到青贮饲料；所述黄芪提取物是从黄芪中提取出来的水溶性物质；

所述青贮原料的含水量为60%-75%；所述黄芪提取物或/和黄芪的添加量以黄芪干重计，是所述青贮原料质量的0.25%-0.5%。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述青贮饲料具有下述至少一种特性：

1）粗蛋白含量高于对照；

2）氨态氮与总氮的比值低于对照；

3）中性洗涤纤维含量低于对照；

4）酸性洗涤纤维含量低于对照；

5）pH值低于对照；

所述对照为经过如下方法制备的饲料：除不加所述黄芪或/和黄芪提取物外，其它条件均与权利要求1所述的方法相同。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述青贮原料为豆科牧草。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述豆科牧草为红豆草属牧草。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述红豆草属牧草为下述至少一种：小花红豆草（Onobrychis micrantha Schrenk）、红豆草（Onobrychis viciaefolia Scop）和美丽红豆草（Onobrychis pulchella Schrenk）。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述青贮饲料具有下述至少一种特性：

1）粗蛋白含量高于对照；

2）氨态氮与总氮的比值低于对照；

3）中性洗涤纤维含量低于对照；

4）酸性洗涤纤维含量低于对照；

5）pH值低于对照；

所述对照为经过如下方法制备的饲料：除不加所述黄芪或/和黄芪提取物外，其它条件均与权利要求3所述的方法相同。

7.由权利要求1或3或4或5所述方法制备的青贮饲料。

8.黄芪在制备青贮饲料添加剂中的应用，所述青贮饲料添加剂的活性成分为黄芪提取物或/和黄芪；

所述黄芪提取物是用水从黄芪中提取出来的水溶性物质；

其中，青贮原料的含水量为60%-75%；所述黄芪提取物或/和黄芪的添加量以黄芪干重计，是所述青贮原料质量的0.25%-0.5%；

所述青贮饲料添加剂为青贮饲料发酵促进剂。

9.青贮饲料添加剂在制备青贮饲料中的应用，所述青贮饲料添加剂的活性成分为黄芪提取物或/和黄芪；

所述黄芪提取物是从黄芪中提取出来的水溶性物质；

其中，青贮原料的含水量为60%-75%；所述黄芪提取物或/和黄芪的添加量以黄芪干重计，是所述青贮原料质量的0.25%-0.5%；

所述青贮饲料添加剂为青贮饲料发酵促进剂。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述青贮饲料为豆科牧草青贮饲料。

11.根据权利要求10所述的应用，其特征在于：所述豆科牧草青贮饲料为红豆草属青贮饲料。

12.根据权利要求11所述的应用，其特征在于：所述红豆草属青贮饲料为以下述至少一种作为青贮原料制备的青贮饲料：小花红豆草（Onobrychis micrantha Schrenk）、红豆草（Onobrychis viciaefolia Scop）和美丽红豆草（Onobrychis pulchella Schrenk）。

说明书

黄芪作为青贮饲料添加剂及其在制备青贮饲料中的应用

技术领域

[0001] 本发明涉及一种中草药型青贮饲料生物添加剂及应用，特别涉及黄芪作为青贮饲料添加剂及其在制备青贮饲料中的应用。

背景技术

[0002] 青贮是解决青饲料不易贮藏的一个有效而经济的措施。但是，自然状态下青饲料的缓冲值高，可溶性碳水化合物含量低，自然状态下青贮比较困难。为此，国内外都在研究怎样运用添加剂，提高青贮饲料的品质，加快青贮的发酵速度。近年来，国内外学者对青贮饲料添加剂做了大量的研究，从单一添加剂来看主要有铵类化合物、有机酸类、尿素和生物防腐剂等，这些添加物的作用都具有抑制微生物活动的作用，并且提高青贮饲料营养品质，但许多产品由于成本高不能广泛被应用。目前在畜禽疾病的预防与治疗中向饲料中添加抗生素、激素、化学合成药比较常见，虽然其效果明显，但常常在产品中有残留，危害消费者健康，三致(致癌、致畸、致突变)现象严重，同时易产生抗药性。为了得到高效、安全、无公害的畜产品，在畜禽饲料中添加中草药成为一种新趋势，但目前国内外对中草药的研究水平都非常低，所应用的中草药存在着剂型单一、质量粗糙、用药量大、成本高、使用不方便等缺点。中药粗粉在使用过程中存在着只能混饲使用，尤其在集约化养殖的情况下使用非常不方便，从而大大限制了中草药在防治动物疾病方面的规模化应用，并且中草药制剂的年产量也非常有限，根本满足不了实际需要。

[0003] 黄芪产于我国华北、东北和西北地区，前苏联、朝鲜和蒙古也有分布。黄芪中含有多糖、单糖、黄酮甙、叶酸、胆碱、多种氨基酸、黏液质、甜菜碱、纤维素及硒、硅等物质，其味甘、性微温、无毒，其作用主要是补虚作用，其次还有增强免疫功能、增强机体耐缺氧及应激能力、促进机体代谢、改善心功能、降压作用、保肝作用、调节血糖及抑制病毒等作用。

发明内容

[0004] 本发明所要解决的技术问题是将黄芪或/和黄芪提取物作为青贮饲料添加剂(中草药添加剂)与青贮原料共同发酵制备青贮饲料。

[0005] 为解决上述技术问题，本发明提供了如下四个技术方案。

[0006] 本发明所提供的第一个技术方案是制备青贮饲料的方法，该方法包括如下步骤：在青贮原料中添加黄芪或/和黄芪提取物后进行厌氧发酵，得到青贮饲料。

[0007] 其中，所述青贮原料为制作青贮饲料的原料，即青饲料(也叫青绿饲料、绿饲料)，是指可以用作饲料的植物新鲜茎叶，主要包括天然牧草、栽培牧草、田间杂草、菜叶类、水生植物、嫩枝树叶等。所述青贮饲料是将青饲料在厌氧的条件下进行发酵得到的饲料。黄芪，又名黄耆，为豆科草本植物蒙古黄芪、膜荚黄芪的根。

[0008] 上述制备青贮饲料的方法中，所述青贮原料可为豆科牧草，如红豆草属牧草；进一步，所述红豆草属牧草可为下述至少一种：小花红豆草(Onobrychis micrantha Schrenk)、红豆草(Onobrychis viciaefolia Scop)和美丽红豆草(Onobrychis pulchella Schrenk)。

[0009] 上述方法制备的青贮饲料可具有下述至少一种特性：

[0010] 1)粗蛋白含量高于对照；

[0011] 2)氨态氮与总氮的比值低于对照；

[0012] 3)中性洗涤纤维含量低于对照；

[0013] 4)酸性洗涤纤维含量低于对照；

[0014] 5)pH值低于对照；

[0015] 所述对照为经过如下方法制备的饲料：除不加所述黄芪或/和黄芪提取物外，其它条件(青贮原料和发酵条件)均与上述方法相同。

[0016] 具有上述至少一种特性的青贮饲料可采用如下含水量的青贮原料、如下添加量的黄芪或黄芪提取物进行制备：所述青贮原料的含水量可为60％-75％，如65％-70％或70％；所述黄芪或黄芪提取物的添加量以黄芪干重计，是含水量为60％-75％(或65％-70％或70％)青贮原料的质量的0.25％-0.5％。

[0017] 所述厌氧发酵的温度可为15-30℃，所述厌氧发酵的时间可为30-90天，如30-45天、30天或45天。

[0018] 本发明所提供的第二个技术方案是黄芪在制备青贮饲料添加剂中的应用。

[0019] 所述青贮饲料添加剂的活性成分可为下述1)或2)：

[0020] 1)活性成分含有黄芪提取物或/和黄芪；

[0021] 2)活性成分为黄芪提取物或/和黄芪；

[0022] 所述黄芪提取物是用水从黄芪中提取出来的水溶性物质。

[0023] 本发明所提供的第三个技术方案是制备上述青贮饲料添加剂的方法。该方法包括制备所述青贮饲料添加剂的活性成分的步骤；其中，所述活性成分按照下述A)或B)的方法制备：

[0024] A)将黄芪粉碎，得到活性成分；

[0025] B)将黄芪用水提取，收集水溶性物质，得到活性成分。

[0026] 本发明所提供的第四个技术方案是青贮饲料添加剂在制备青贮饲料中的应用；所述青贮饲料添加剂的活性成分为下述1)或2)：

[0027] 1)活性成分含有黄芪提取物或/和黄芪；

[0028] 2)活性成分为黄芪提取物或/和黄芪；

[0029] 所述黄芪提取物是用水从黄芪中提取出来的水溶性物质。

[0030] 其中，所述青贮饲料可为豆科牧草青贮饲料，如红豆草属青贮饲料；进一步，所述红豆草属青贮饲料可为以下述至少一种作为青贮原料制备的青贮饲料：小花红豆草(Onobrychis micrantha Schrenk)、红豆草(Onobrychis viciaefolia Scop)和美丽红豆草(Onobrychis pulchella Schrenk)。

[0031] 上述青贮饲料添加剂具体可为青贮饲料发酵促进剂。所述青贮饲料发酵促进剂是一种在发酵前加入青贮原料中，与所述青贮原料一起进行厌氧发酵从而促进发酵的青贮饲料添加剂。

[0032] 实验证明，将黄芪或/和黄芪提取物作为青贮饲料添加剂与青贮原料共同发酵，能够促进乳酸菌生长繁殖和提高青贮饲料的发酵品质，所制备的青贮饲料，与不加黄芪或/和黄芪提取物的对照相比，其粗蛋白含量升高，和/或氨态氮与总氮的比值降低，和/或中性洗涤纤维含量降低，和/或酸性洗涤纤维含量降低，和/或pH值降低。将黄芪或/和黄芪提取物作为青贮饲料添加剂，按照以黄芪干重计是含水量为60％-75％(或65％-70％或70％)青贮原料质量的0.25％-0.5％的添加量，加入含水量为60％-75％(或65％-70％或70％)的青贮原料中，制备的青贮饲料贮藏期可达180-360天。

[0033] 本发明不仅对青贮饲料品质有所改善，还能使畜禽(如奶牛)通过采食加有中草药添加剂的青贮饲料，提高其生产性能，预防和防治畜禽常见疾病的发生，以减少抗生素的大量使用，生产相对绿色和有机的畜禽产品。

具体实施方式

[0034] 下面以红豆草(Onobrychis viciaefolia Scop)作为青贮原料为例，阐明本发明的技术方案。

[0035] 实施例1、黄芪提取物作为青贮饲料添加剂制备红豆草青贮饲料

[0036] 一、青贮饲料添加剂的制备

[0037] 取中药黄芪20g(干重)，加入100g水，浸过中药液面，放置4℃冰箱内24h后，以文火煮沸30min，过滤后，再加入100g水，文火煮沸30min后，再次过滤。将2次过滤后药液混合，在文火上浓缩至20ml，即得到100％中药原液，该100％中药原液即为青贮饲料添加剂。

[0038] 二、青贮饲料添加剂对乳酸菌生长的影响

[0039] 青宝II号天然乳酸菌饲料添加剂(陕西中瑞生物有限公司(2005)外饲准字096号)作为试验用乳酸菌。实验用培养基为MRS液体，以及固体培养基。将青宝II号天然乳酸菌饲料添加剂接种到MRS固体培养基上37℃培养48小时，加少量生理盐水吹刮菌苔成菌5
悬液，再用生理盐水将菌液配成含10cfu/mL的液体，作为实验用菌液。

[0040] 用MRS培养基将步骤一的青贮饲料添加剂稀释至1％、0.5％、0.25％、0.125％四个浓度，同时设MRS培养基对照，取0.1ml实验用菌液转接入灭菌的培养皿中，然后倒入不同中药浓度的20mL培养基，37℃厌氧培养48h后计数，以平均菌落数计算出每毫升培养液中的活菌数。每个浓度按以上方法重复2-3次，各次试验的均数为最后的结果数据。以“药物试验菌落均数”与“MRS对照菌落均数”之比D/C值做为判定增菌作用的指标，D/C值大于1说明对乳酸菌有促进作用，越大于1其促进作用越强。实验结果如表1所示：

[0041] 表1.青贮饲料添加剂对乳酸菌生长的影响

[0042]

[0043] 结果表明0.5％-0.25％是促进乳酸菌生长的最佳浓度范围。

[0044] 三、黄芪提取物作为青贮饲料添加剂制备红豆草青贮饲料及其效果检测[0045] 1、制备红豆草青贮饲料

[0046] 将步骤一的青贮饲料添加剂按照以黄芪干重计是红豆草鲜草的0.5％和0.25％的比例添加到红豆草中进行青贮，制备红豆草青贮饲料，具体方法如下：

[0047] 取在结荚前期刈割的红豆草(Onobrychis viciaefolia Scop)鲜草(含水量为70％)，然后在切碎机上把草切成3-5cm长度，得到青贮原料。将该青贮原料均分为三组，分别为黄芪I(黄芪0.5％)、黄芪II(黄芪0.25％)和对照组。上述三组的青贮饲料添加剂添加量如下：黄芪I按照10kg鲜草(含水量70％)中添加0.05kg干重计黄芪标准添加步骤一的青贮饲料添加剂；黄芪II按照10kg鲜草(含水量70％)中添加0.025kg干重计黄芪标准添加步骤一的青贮饲料添加剂；对照不添加任何物质。

[0048] 然后按照上面所述的添加量制得200ml水溶液喷洒到6.6kg红豆鲜草(含水量为70％)中，再将鲜草放到聚丙烯袋中，用真空封口机封口，在室温条件下(25-38℃)进行青贮发酵。实验重复三次，每次实验上述三组每组设21袋。放在室温条件下，然后在青贮0、
1、3、5、7、15、30、45天以及开封(青贮45天后开封)后1、3、5、7天取样，进行实验室分析，主要分析pH值、干物质、粗蛋白、氨态氮、可溶性糖、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、乳酸菌和真菌数量。

[0049] 其中各种分析方法如下：

[0050] 1)干物质的测定

[0051] 干物质：除去植物自由水和结合水所剩的部分为植物干物质。试验方法采用烘箱干燥法。将样品称重记下重量，在烘箱中65℃干燥48h直到恒重，并记录所称的重量以计算干物质(DM)含量。

[0052] 2)pH值的测定

[0053] 开启青贮后称取20g样品，加入180ml蒸馏水，搅拌均匀后用组织捣碎机(JLL350-B型多功能搅拌机，顺德市科顺塑料电器实业有限公司，杭州)搅拌1min。四层纱布和滤纸过滤，用pH测定仪(雷磁S-3C精密计，上海精密科学仪器有限公司)测定滤液的pH值(玉柱等，2008)。

[0054] 3)氨态氮/总氮值的测定

[0055] 采用苯酚-次氯酸钠比色法(Broderick等，1980)。

[0056] 苯酚试剂：将0.15g亚硝基铁氰化钠(Na2Fe(CN)5·NO·2H2O，297.95，化学纯(25g))溶解在1.5L蒸馏水中，再加入33ml(90％w/v)苯酚溶液或29.7g结晶苯酚(C6H5O，94.11，Phenol A.R.，500g，分析纯)，定容到3L后贮存在棕色的玻璃试剂瓶中。

[0057] 次氯酸钠试剂：将15g NaOH(Sodium hydroxide A.R.40，500g，分析纯)溶解在2L蒸馏水中，再加入113.6g Na2HPO4·7H2O(di-Sodium hydrogen phosphate，anhydrous，
141.96+126，500g，分析纯)，加热并不断搅拌至完全溶解。冷却后加入150ml 5.25％的次氯酸钠或44.1ml含8.5％活性氯的次氯酸钠溶液(NaClO，Sodium hypochlorite solution，74.44，分析纯，(500ml)，活性氯不低于7％)并混匀，定容到3L，最后将经滤纸过滤的滤液贮藏于棕色试剂瓶中待用。

[0058] 标准铵溶液：称取0.6607g经100℃24h烘干的(NH4)2SO4(Ammonuim sulfate A.R.，132.14，化学纯，(500g))溶于蒸馏水中，并定容至100ml，配制成100mmol/L的铵贮备液。将上述贮备液稀释配制成1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mmol/L五种不同浓度梯度的标准液。

[0059] 操作步骤：

[0060] 1：向每支试管中加入50μl稀释适当倍数的样本液或标准液，空白为50μl蒸馏水；

[0061] 2：向每支试管中加入2.5ml的苯酚试剂，摇匀；

[0062] 3：再向每支试管中加入2ml次氯酸钠试剂，并混匀；

[0063] 4：将混合液在95℃水浴中加热显色反应5分钟；

[0064] 5：冷却后，630nm波长下701分光光度计比色，记录吸光度值并计算。

[0065] 4)有机酸的测定

[0066] 采用高效液相色谱SHIMADZE-10A测定乳酸和挥发性脂肪酸(乙酸、丙酸和丁酸)。色谱柱：Shodex Rspak KC-811 S-DVB gel Column 30×8mm；检测器：SPD-M10AVp；流动相：
3mmol/L高氯酸；流速：1ml/min；柱温：50℃；检测波长：210nm；进样量：5μl(许庆方等，
2007)。

[0067] 5)粗蛋白(CP)的测定

[0068] 采用凯式定氮法(杨胜，1999；张丽英，2002)。

[0069] 称取0.5000g干燥的样品放入消煮管中，加入硫酸钾和硫酸铜混合物作为催化剂，硫酸钾和硫酸铜的混合比例为10∶1，加入10ml浓硫酸于420℃下进行消煮。消化至颜色变为清亮蓝色。配制40％NaOH，1％的硼酸吸收液和0.1M盐酸溶液，对0.1M盐酸溶液进行滴定校正。用全自动定氮仪(FOSS公司全自动凯氏定氮仪)进行测定。

[0070] 实验步骤如下：1、样品称重：称取0.5g左右干燥样品，记下重量W，然后全部移入消化管；3、消化：向消化管中加入10ml浓硫酸和3g左右的CuSO4.5H2O和K2SO4混合催化剂(其质量比为CuSO4.5H2O∶K2SO4＝1∶10)，将其放入消化炉中420℃消化1个小时左右直到样品呈淡绿色透明状；4、用全自动定氮仪(FOSS公司全自动凯氏定氮仪)进行测定。

[0071] 6)中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)的测定

[0072] 中性洗涤纤维(NDF)：采用ANKOM2000纤维仪(美国ANKOM公司)进行。具体步骤：1.样品在60℃烘箱中干燥48-72h直到恒重并粉碎，准确称取粉碎样品(通过40目标准铜筛)0.5g左右，装入已烘干称重的纤维袋中，封口并置于纤维仪。2.加入室温的中性洗涤剂100ml和数滴十氢化萘(消泡剂)以及0.5g无水亚硫酸钠。3.纤维仪测定。

[0073] 酸性洗涤纤维(ADF)：采用ANKOM2000纤维仪进行。具体步骤：1.样品在60℃烘箱中干燥48-72h直到恒重并粉碎，准确称取粉碎样品(通过40目标准铜筛)0.5g左右，装入已烘干称重的纤维袋中，封口并置于纤维仪。2.加入室温的酸性洗涤剂100ml和数滴十氢化萘(消泡剂)以及0.5g无水亚硫酸钠。3.纤维仪测定。

[0074] 7)可溶性碳水化合物(WSC)的测定

[0075] 采用蒽酮-硫酸法(Owens et al.，1999)。

[0076] 在浓硫酸溶液中，可溶性碳水化合物先脱水为糖醛或羟基糖醛，再与蒽酮反应生成蓝绿色化合物。其颜色与含糖量成正比，吸收峰波长为640nm。

[0077] 蒽酮-硫酸溶液：0.4g蒽酮溶于100ml 88％硫酸溶液(84份体积的97％浓硫酸与16分体积的水混合)中，放入冰箱或冷水中冷却备用，临用时配制。

[0078] 糖标准溶液：准确称取0.25g蔗糖，以80％乙醇溶解，定容至250ml，稀释为40-100微克/毫升的浓度。

[0079] 工作曲线的绘制：于两组干燥试管中，每组分别注入0.0、10.0、20.0、40.0、60.0、80.0微克(不可超过80微克)蔗糖标准溶液。加水调整各试管溶液均为2.00毫升，放冷水中冷却2min，各试管中加入6.00ml蒽酮-硫酸溶液，摇匀，迅速放入冷水中冷却2分钟。
放入沸水中5分钟显色，完毕后，取出，用流水冷却至室温。以2.00ml蒸馏水按上述操作所得空白液为参比，与640nm波长下，用1cm比色皿，测定各管溶液吸光度，绘制工作曲线。

[0080] 试验操作步骤：

[0081] 1：称取磨碎样品0.5克，用少量80％乙醇冲入带塞试管中，使体积在7ml左右，盖上塞子，置于80℃水浴中提取30min，取出冷却后转入50ml容量瓶中，稀释至刻度，摇匀后静置，取上层清液稀释合适倍数到2ml，置于100℃水浴中5min作待测液。

[0082] 2：640nm下比色测定，按工作曲线所述步骤，测定沸水显色后溶液的吸光度。用标准曲线获得每2ml待测液中的微克数，再计算出可溶性碳水化合物(WSC)的含量。

[0083] 乳酸菌和真菌数量：采用平皿计数方法测定。步骤：1.采样：以无菌操作称取样品10g，放入含有90ml灭菌稀释液的玻璃塞三角瓶中，置振荡器上，振荡30min，即为1∶10的稀释液。3.用灭菌吸管吸取稀释液1ml，注入含有9ml灭菌生理盐水的带塞试管中，置微型混合器上震荡均匀，使微生物分散开，此液为1∶100稀释液。4.按上述操作顺序作10倍递增稀释液，每稀释一次，换用一支1ml灭菌吸管，根据对样品情况的估计，选择三个合适稀释度，分别在作10倍稀释的同时，吸取1ml稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度作两个平皿，然后将凉至45℃左右的MRS培养基注入平皿中，充分混合，放入37℃的培养箱内培养3天后开始观察计数。6.计算：通常选择菌落数的30-100个之间的平皿计数，同稀释度的2个平皿的菌落平均数乘以稀释倍数，即为每克样品中所含乳酸菌数。

[0084] 真菌的数量统计与乳酸菌的数量统计方法类似，真菌的数量统计所用的培养基是孟加拉红培养基，先将培养基倒入灭菌的培养皿中，等到冷却凝固之后，再用灭菌的移液管吸取200ul加入培养基上面，用涂棒涂均即可，然后放入28℃的培养箱中培养3天后开始观察计数。计算方法与乳酸菌一样。

[0085] 数据用SPSS 17.0软件及综合评判法进行分析，综合评价青贮饲料添加剂对青贮发酵过程中的pH值、粗蛋白、氨态氮、可溶性糖、干物质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、乳酸菌和真菌数量的影响。实验结果如表2、表3和表4所示：

[0086] 表2青贮饲料添加剂对红豆草青贮发酵过程的影响

[0087]

[0088]

[0089] 注：各列数值后面的英文字母表示差异显著程度，具有至少一个相同字母的处理间在0.05水平无显著差异，没有相同字母的处理间在0.05水平有显著差异。

[0090] 表3青贮饲料添加剂对有氧稳定性的影响

[0091]

[0092]

[0093] 注：时间为开封后的时间；各列数值后面的英文字母表示差异显著程度，具有至少一个相同字母的处理间在0.05水平无显著差异，没有相同字母的处理间在0.05水平有显著差异。

[0094] 表4青贮饲料添加剂对微生物的影响

[0095]

[0096] 注：各列数值后面的英文字母表示差异显著程度，具有至少一个相同字母的处理间在0.05水平无显著差异，没有相同字母的处理间在0.05水平有显著差异；乳酸菌和真菌的单位均是cfu/g。

[0097] 从上表结果表明，青贮后第1、7和45天各处理组的粗蛋白均显著高于对照组；青贮第5和15天黄芪0.5％处理组的粗蛋白含量显著高于对照组；青贮第3天和30天处理组的粗蛋白含量与对照组没有显著差别。开封后第1、5天黄芪0.5％和黄芪0.25％处理组的粗蛋白均显著高于对照组。开封后第7天黄芪0.5％处理组的粗蛋白含量显著高于对照组。青贮后第5天开始黄芪0.5％处理组的氨态氮/总氮均显著低于对照，青贮第1、7、45天黄芪0.25％处理组的氨态氮/总氮均显著低于对照；开封后3、5、7天黄芪0.5％处理组的氨态氮/总氮均显著低于对照组；开封后黄芪0.25％处理组的氨态氮/总氮在5、7天显著低于对照组。

[0098] 青贮第3天和第5天黄芪0.5％处理组的pH值显著低于对照组，青贮第7、30、45