一种盐酸吉西他滨冻干组合物及其制备方法

摘要

本发明涉及一种盐酸吉西他滨冻干组合物及其制备方法，用于解决目前的盐酸吉西他滨冻干制剂稳定性差、生产周期长的技术问题。本发明的盐酸吉西他滨冻干组合物，由盐酸吉西他滨、环糊精或环糊精衍生物、冻干赋形剂和pH调节剂组成，其重量配比为1:0.2~0.55:0.2~0.7:0.01~0.1。本发明的有益效果是，由于在盐酸吉西他滨的冻干组合物中加入适量的增溶剂环糊精或环糊精衍生物，可增加盐酸吉西他滨的溶解性，保证制剂具有良好的重构性和稳定性，缩短了药品生产周期，降低了能耗，便于贮存和运输，为临床用药提供了安全保障。

权利要求

1.一种盐酸吉西他滨冻干组合物，其特征在于由盐酸吉西他滨、环糊精衍生物、冻干赋形剂和pH调节剂组成，其重量配比为1:0.2~0.55:0.2~0.7:0.01~0.1，其中所述环糊精衍生物选自磺丁基醚-β-环糊精和羟丙基-β-环糊精。

2.根据权利要求1所述的盐酸吉西他滨冻干组合物，其特征在于所述冻干赋形剂选自甘露醇、山梨醇、乳糖、海藻糖、葡萄糖、蔗糖中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的盐酸吉西他滨冻干组合物，其特征在于所述pH调节剂为醋酸钠。

4.根据权利要求1所述的盐酸吉西他滨冻干组合物，其特征在于由盐酸吉西他滨、羟丙基-β-环糊精、甘露醇和醋酸钠组成，其重量配比为1: 0.4: 0.4:0.06。

5.根据权利要求1~4中任意一项所述的盐酸吉西他滨冻干组合物的制备方法，其特征在于包含如下步骤：（a）将盐酸吉西他滨、环糊精衍生物、冻干赋形剂和pH调节剂加入水中溶解；

（b）调pH，过滤除菌；

（c）冷冻干燥制成无菌粉末状药物组合物；

（d）密封容器。

6.根据权利要求5所述的盐酸吉西他滨冻干组合物的制备方法，其特征在于步骤（b）中调pH至2.7~3.3。

7.根据权利要求5所述的盐酸吉西他滨冻干组合物的制备方法，其特征在于步骤（c）中冷冻干燥分为预冻、一次干燥、二次干燥三个阶段：预冻阶段：将板层温度先以约0.8℃/min的速率从室温降至到-25℃，并在此温度下维持1~3小时；

一次干燥阶段：开启真空泵，以每小时升高2.0~3.0℃的升温速度升温至-15℃，维持

4~8小时；

二次干燥阶段：以每小时升高8.0~12.0℃的升温速度升温至25℃，维持4~6小时。

8.根据权利要求7所述的盐酸吉西他滨冻干组合物的制备方法，其特征在于预冻阶段的维持时间为2小时。

9.根据权利要求7所述的盐酸吉西他滨冻干组合物的制备方法，其特征在于一次干燥阶段升温速度为每小时2.5℃，维持时间为6小时。

10.根据权利要求7所述的盐酸吉西他滨冻干组合物的制备方法，其特征在于二次干燥阶段升温速度为每小时10℃，维持时间为5小时。

说明书

一种盐酸吉西他滨冻干组合物及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及药物制剂领域，具体涉及一种盐酸吉西他滨冻干组合物及其制备方法。

背景技术

[0002] 盐酸吉西他滨(gemcitabine hydrochloride)是嘧啶类抗肿瘤药物，化学名为2-脱氧-2，2-二氟脱氧胞苷盐酸盐（β-异构体），其抗肿瘤的作用机制是其在体内磷酸化激活，成为活性代谢产物，在细胞内掺入DNA，阻止肿瘤细胞由G1期向S期的进展。注射用盐酸吉西他滨(商品名Gemzar)由礼来公司开发，1996年首先在美国上市，适应症为治疗局部晚期或已转移的非小细胞肺癌和胰腺癌。

[0003] 由于盐酸吉西他滨胃肠刺激作用较大，临床上主要采用注射方式给药，由于注射用冻干制剂与注射液相比稳定性具有明显的优势，因此上市产品采用冻干制剂形式。

[0004] 关于盐酸吉西他滨冻干制剂，现有技术中公开情况如下：

[0005] 1998年，礼来公司首次在美国医药管理局网站公布了其上市产品注射用盐酸吉西他滨的产品说明书，并公开了产品的配方：每瓶含200mg盐酸吉西他滨（以自由碱表示），200mg甘露醇和12.5mg醋酸钠，制备成无菌冻干粉末。

[0006] 2009年10月28日江苏奥赛康药业有限公司公开了中国专利CN200910032906.0，该专利要求保护一种盐酸吉西他滨冻干粉针剂，由盐酸吉西他滨、甘露醇和醋酸钠组成。

[0007] 2009年12月23日 山东 罗欣药 业股 份有 限公司 公开 了中 国专 利CN200910305291.4，该专利同样要求保护包含盐酸吉西他滨、甘露醇和醋酸钠组成的冻干产品。

[0008] 以上技术均以盐酸吉西他滨作为活性成分，甘露醇作为冻干保护剂，醋酸钠作为pH调节剂，处方较简单。随着吉西他滨在临床应用和生产中各种问题的出现，现有技术出现了一些对上述处方改进的制剂技术。

[0009] 2008年12月04日，常州安孚立德药业技术有限公司申请了中国专利CN200810183092.6，在该专利中要求保护一种可用于注射的冻干组合物，包含下列重量比的组分：盐酸吉西他滨或吉西他滨：聚合物：蛋白质为0.1～20:0.00～50:0.00～20。该组合物可延长吉西他滨的血清半衰期，改善盐酸吉西他滨体内降解过快的情况，从而提高疗效，并降低毒性。

[0010] 2012年1月4日，上海西迪制药有限公司申请了中国专利CN201110265460.3，该专利保护一种盐酸吉西他滨冻干制剂，由盐酸吉西他滨、冻干保护剂和抗氧化剂组成，其中，加入抗氧化剂的目的在于进一步提高药物的稳定性。

[0011] 2011年8月10，海南锦瑞制药股份有限公司申请的中国专利CN201110086103.0，公开了如下冻干组合物组方及配比：盐酸吉西他滨20～30份、甘露醇5～9份、醋酸钠3～10份、乳糖5～9份。该组方的优良效果在于，加入一定比例的乳糖，可提高制剂的稳定性，并可加快冻干速度，缩短工艺周期。

[0012] WO2005014010公开了一种含吉西他滨和环糊精的液体制剂，其中环糊精优选磺丁基醚-β-环糊精，盐酸吉西他滨和环糊精的优选摩尔比为1:0.1～1:2，该组合物是利用环糊精的包合作用，提高药物的溶解度以及稳定性，该制剂组合物在pH4～9的条件下盐酸吉西他滨的溶解度可大于40mg/ml，与未加入环糊精的吉西他滨溶液相比溶解度有所提高，由于环糊精的包合作用，该组合物稳定性提高，可一定程度上解决溶液制剂放置不稳定的问题。

[0013] 但是，该组合物仍然存在以下缺陷，众所周知，溶血性反应是环糊精常见的不良反应，试验证明在静脉注射途径下，环糊精浓度达到0.02mol/L即会出现轻微的溶血现象，在0.04mol/L时出现明显的溶血，按照包合的最佳配比，即，以盐酸吉西他滨与环糊精摩尔比为1:1的比例制备药物组合物，盐酸吉西他滨环糊精包合物按正常剂量使用已十分接近发生溶血反应的范围，产生溶血反应的风险大大增加，而采用盐酸吉西他滨和环糊精摩尔比为1:2的比例制备包合物，则出现明显的溶血反应。此外，由于环糊精市场价格较高，使用过多环糊精大大提高了产品成本。

[0014] 鉴于以上，现有技术中缺少一种性能优良的盐酸吉西他滨冻干组合物，不仅可以具有较好的质量稳定性和安全性，还能够具有较低的制造成本和高生产效率的制备工艺。

发明内容

[0015] 本发明的目的之一是提供一种改进的盐酸吉西他滨冻干组合物，与现有技术相比，所述组合物具有良好的质量稳定性和安全性，并且可以大大缩减制备该组合物所用的时间，及降低工艺成本及能耗。

[0016] 本发明所述盐酸吉西他滨冻干组合物，由盐酸吉西他滨、环糊精或环糊精衍生物、冻干赋形剂和pH调节剂组成，其重量配比为1:0.2～0.55:0.2～0.7:0.01～0.1。

[0017] 优选地，本发明所述的环糊精或环糊精衍生物选自磺丁基醚-β-环糊精（SBE-β-CD）或羟丙基-β-环糊精（HP-β-CD）。

[0018] 优选地，本发明所述冻干赋形剂选自甘露醇、山梨醇、乳糖、海藻糖、葡萄糖、蔗糖中的一种或多种。

[0019] 优选地，本发明所述pH调节剂为醋酸钠。能够起到pH调节作用的其它弱碱性物质也可替代醋酸钠。

[0020] 进一步优选地，所述的盐酸吉西他滨冻干制剂中盐酸吉西他滨、羟丙基-β-环糊精、甘露醇、醋酸钠的重量配比为1:0.4:0.4:0.06。

[0021] 本发明是通过以下原理实现的：

[0022] 现有技术中，环糊精或环糊精衍生物一般作为制剂学上常用的增溶剂，常规的使用方法是采用环糊精或环糊精衍生物对药物进行包合，从而达到增加难溶性药物溶解度的技术效果。以这种方法进行增溶，药物与环糊精或环糊精衍生物的摩尔比一般在1:1左右，例如WO2005014010中所述的盐酸吉西他滨包合物，盐酸吉西他滨与磺丁基醚-β-环糊精的摩尔比例为1:0.1～2.0。可见，只有当环糊精或环糊精衍生物的摩尔份数至少在药物的摩尔份数的0.1倍以上时，才能显示出包合作用效果，而理想的药物包合作用效果应采用的最佳比例是药物和环糊精或环糊精包合物的摩尔配比为1:1左右。

[0023] 然而，发明人在研究中惊奇的发现，在盐酸吉西他滨冻干组合物中加入少量的环糊精，具体而言，是指加入摩尔份数为小于0.1倍药物摩尔份数的环糊精或环糊精衍生物，即可大大提高盐酸吉西他滨冻干组合物的溶解性，普通水溶液中盐酸吉西他滨的溶解度一般为40mg/ml左右，而加入了摩尔份数为盐酸吉西他滨0.03～0.09倍（相当于重量为盐酸吉西他滨重量的0.2～0.55倍）的环糊精或环糊精衍生物，冻干药物组合物复溶后，盐酸吉西他滨的溶解度达到80mg/ml左右。

[0024] 经发明人分析认为，本发明冻干组合物是利用环糊精或其衍生物结构中的羟基与盐酸吉西他滨结构式中的N、O等原子形成氢键，从而增加了盐酸吉西他滨的溶解度的原理制备得到的，因此，本发明突破了原有利用环糊精或环糊精衍生物包合作用的技术局限，技术具有独创性。

[0025] 将这种增溶原理应用于盐酸吉西他滨冻干组合物的制备，具有以下优良技术效果：

[0026] 1、可节省环糊精或环糊精衍生物的用量，降低生产成本，提高生产效率：与形成包合作用相比，可减少90%的环糊精或其衍生物的用量，降低了产品的制造成本，而辅料用量的减小也意味着冻干过程效率的提高。

[0027] 2、可避免产生溶血作用的风险，提高产品安全性：由于加入的环糊精或环糊精衍生物的比例明显降低，因此，复溶后进行溶液输注时环糊精或环糊精衍生物的浓度远低于0.02mol/L，避免了溶血反应的产生。

[0028] 3、缩短了制备工艺时间，提高了生产效率：由于冻干工艺中加入了环糊精或其衍生物，可减小溶剂用量一倍以上，这意味着冻干时间的大幅缩短，生产效率大幅提高。

[0029] 4、提高产品稳定性：本发明的研究显示，本发明所提供的盐酸吉西他滨冻干药物组合物，其质量稳定性与现有技术相比，也有明显提高，产品在两年内质量稳定。

[0030] 本发明的另一目的是提供该盐酸吉西他滨冻干组合物的制备方法。

[0031] 所述盐酸吉西他滨冻干组合物的制备方法为：

[0032] （a）将盐酸吉西他滨、环糊精或环糊精衍生物、冻干赋形剂和pH调节剂加入水中溶解；

[0033] （b）调pH，过滤除菌；

[0034] （c）冷冻干燥制成无菌粉末状药物组合物；

[0035] （d）密封容器。

[0036] 其中，步骤（b）中的调pH至2.7～3.3。

[0037] 其中，步骤（c）中冷冻干燥分为预冻、一次干燥、二次干燥三个阶段：

[0038] 预冻阶段：将板层温度先以约0.8℃/min的速率从室温降至到-25℃，并在此温度下维持1～3小时；

[0039] 一次干燥阶段：开启真空泵，以每小时升高2.0～3.0℃的升温速度升温至-15℃，维持4～8小时；

[0040] 二次干燥阶段：以每小时升高8.0～12.0℃的升温速度升温至25℃，维持4～6小时。

[0041] 优选地，本发明提供的盐酸吉西他滨冻干组合物的制备方法预冻阶段的维持时间为2小时。

[0042] 优选地，本发明提供的盐酸吉西他滨冻干组合物的制备方法一次干燥阶段升温速度为每小时2.5℃，维持时间为6小时。

[0043] 优选地，本发明提供的盐酸吉西他滨冻干组合物的制备方法二次干燥阶段升温速度为每小时10℃，维持时间为5小时。

[0044] 采用本发明所述的盐酸吉西他滨冻干组合物的制备方法，可以将盐酸吉西他滨冻干组合物的冻干时间由40小时缩短至22小时，降低能耗，且生产效率明显提高。具体实施例

[0045] 以下通过实施例进一步说明本发明，这些实施例不应作为本发明的限制。

[0046] 实施例1：盐酸吉西他滨冻干粉针制备（盐酸吉西他滨、HP-β-CD、甘露醇和醋酸钠的重量配比为1:0.45:0.45:0.05；盐酸吉西他滨和HP-β-CD摩尔比为1:0.08）[0047] 处方

[0048]盐酸吉西他滨 228g
HP-β-CD 100g
甘露醇 100g
醋酸钠 12.5g
注射用水加至 2500ml
共制成 1000瓶

[0049] 按处方称取原辅料，加入冷却至25℃的注射用水，用量为80%，溶解并搅拌均匀，用1mol/L盐酸或1mol/L氢氧化钠溶液调pH3.0，经中间体检查合格后，加注射用水定容至全量；溶液经0.45μm 、0.22μm的微孔滤膜过滤后送至灌装间，灌装于西林瓶中，半压塞、装盘、置冻干箱中，关闭箱门，开机，将板层温度先以约0.8℃/min的速率从室温降至到-25℃，并在此温度下维持2小时，开启真空系统，以每小时升高2.5℃的升温速度升温至-15℃，维持6小时，继续以每小时升高10.0℃的升温速度升温至25℃，维持5小时，停真空泵，通入氮气，压塞、放气、出箱，用铝塑组合盖轧口，经质检合格后包装，即得。

[0050] 冻干时间合计22小时，与普通冻干产品生产工艺相比生产效率提高了45%。

[0051] 实施例2：盐酸吉西他滨冻干粉针制备（盐酸吉西他滨、HP-β-CD、葡萄糖和醋酸钠的重量配比为1:0.22:0.45:0.05；盐酸吉西他滨和HP-β-CD摩尔比为 1:0.04）[0052] 处方

[0053]盐酸吉西他滨 228g
HP-β-CD 50g
葡萄糖 100g
醋酸钠 12.5g
注射用水加至 2500ml
共制成 1000瓶

[0054] 称取处方量的原辅料，方法同实施例1制得注射用盐酸吉西他滨粉针剂。

[0055] 实施例3：盐酸吉西他滨冻干粉针制备（盐酸吉西他滨、HP-β-CD、乳糖和醋酸钠的重量配比为1:0.22:0.45:0.05；盐酸吉西他滨和HP-β-CD摩尔比为1:0.04 ）[0056] 处方

[0057]盐酸吉西他滨 228g
HP-β-CD 50g
乳糖 100g
醋酸钠 12.5g
注射用水加至 2500ml
共制成 1000瓶

[0058] 称取处方量的原辅料，方法同实施例1制得注射用盐酸吉西他滨粉针剂。

[0059] 实施例4：盐酸吉西他滨冻干粉针制备（盐酸吉西他滨、HP-β-CD、海藻糖和醋酸钠的重量配比为1:0.22:0.45:0.01；盐酸吉西他滨和HP-β-CD摩尔比为 1:0.04）[0060] 处方

[0061]盐酸吉西他滨 228g
HP-β-CD 50g
海藻糖 100g
醋酸钠 2.0g
注射用水加至 2500ml
共制成 1000瓶

[0062] 称取处方量的原辅料，方法同实施例1制得注射用盐酸吉西他滨粉针剂。

[0063] 实施例5：盐酸吉西他滨冻干粉针制备（盐酸吉西他滨、HP-β-CD、山梨醇和醋酸钠的重量配比为1:0.22:0.68:0.05；盐酸吉西他滨和HP-β-CD摩尔比为1:0.04 ）[0064] 处方

[0065]盐酸吉西他滨 228g
HP-β-CD 50g
山梨醇 150g
醋酸钠 12.5g
注射用水加至 2500ml
共制成 1000瓶

[0066] 称取处方量的原辅料，方法同实施例1制得注射用盐酸吉西他滨粉针剂。

[0067] 实施例6：盐酸吉西他滨冻干粉针制备（盐酸吉西他滨、SBE-β-CD、甘露醇和醋酸钠的重量配比为1:0.22:0.45:0.09；盐酸吉西他滨和SBE-β-CD摩尔比为1:0.03）[0068] 处方

[0069]盐酸吉西他滨 228g
SBE-β-CD 50g
甘露醇 100g
醋酸钠 20g
注射用水加至 2500ml
共制成 1000瓶

[0070] 称取处方量的原辅料，方法同实施例1制得注射用盐酸吉西他滨粉针剂。

[0071] 实施例7：盐酸吉西他滨冻干粉针制备（盐酸吉西他滨、SBE-β-CD、蔗糖和醋酸钠的重量配比为1:0.55:0.22:0.05；盐酸吉西他滨和SBE-β-CD摩尔比为1:0.09）[0072] 处方

[0073]盐酸吉西他滨 228g
SBE-β-CD 120g
蔗糖 50g
醋酸钠 12.5g
注射用水加至 2500ml
共制成 1000瓶

[0074] 称取处方量的原辅料，方法同实施例1制得注射用盐酸吉西他滨粉针剂。

[0075] 实施例8：盐酸吉西他滨冻干粉针制备（盐酸吉西他滨、HP-β-CD、甘露醇和醋酸钠的重量配比为1:0.45:0.22:0.09；盐酸吉西他滨和HP-β-CD摩尔比为 1:0.08）[0076] 处方

[0077]盐酸吉西他滨 228g
HP-β-CD 100g
甘露醇 50g
醋酸钠 20g
注射用水加至 2500ml
共制成 1000瓶

[0078] 称取处方量的原辅料，方法同实施例1制得注射用盐酸吉西他滨粉针剂。

[0079] 此外，为了体现本发明的盐酸吉西他滨冻干组合物的优良效果，发明人制备了对比例1的产品和按照现有技术制备了下述对比例2～6的产品。

[0080] 对比例1：与实施例1相同处方的盐酸吉西他滨注射液的制备

[0081] 盐酸吉西他水溶液的制备，取盐酸吉西他滨228g，HP-β-CD100g，甘露醇100g，醋酸钠12.5g，用2200ml0.9%氯化钠注射液溶解，用1mol/L盐酸或1mol/L氢氧化钠溶液调pH3.0，经中间体检验合格后，0.9%氯化钠注射液定容至2500ml，然后趁热除菌过滤、装于10ml的安瓿瓶中，封口。

[0082] 对比例2：盐酸吉西他滨水溶液的制备

[0083] 按照专利WO2005014010中实施例2的方法制备盐酸吉西他滨水溶液。称取盐酸吉西他滨15g，SBE-β-CD 107.5g，混匀，加入到100ml水中直到有少量剩余，加入NaOH(1.0 M)，调pH至5.5，除菌过滤，分装于10ml安瓿瓶中，封口。

[0084] 对比例3：盐酸吉西他滨冻干粉针的制备

[0085] 按照专利201110086103.0中实施例1的方法制备盐酸吉西他滨冻干粉针。称取228g盐酸吉西他滨、30g醋酸钠、90g乳糖和90g甘露醇。85％的注射用水搅拌使完全溶解；
使溶液温度控制在38℃，调节 pH2.7～3.3，补充注射用水至4000ml，混合均匀，加入药用活性炭，搅拌吸附，脱炭，中间体检测合格后，药液经0.22μm除菌过滤，灌装1000瓶，3个小时内将搁板温度恒速降至-50℃，制品温度达-30℃后，继续保温5小时。冷肼温度快速降至-50℃以下，箱内真空度达10pa。用2.5个小时将搁板温度恒速缓慢升至-3℃，保温8.5小时。2个小时内搁板温度恒速升至40℃，待制品温度达37℃后，继续保温7小时。检查真空度变化情况，结束整个冻干过程，全压塞，出箱，用铝塑组合盖轧口，即得。冻干过程耗时
28小时。

[0086] 对比例4：盐酸吉西他滨水溶液的制备

[0087] 按照专利200610044675.1中实施例1的方法制备盐酸吉西他滨水溶液。取盐酸吉西他滨228mg(含吉西他滨200mg)，用6ml注射用水溶解，加入0.09g氯化钠，再加入0.5N氢氧化钠，调节pH为4.5，上述溶液加热至30～40℃，使析出的结晶溶解完全，用注射用水定容至10ml。然后趁热除菌过滤、装于10ml的安瓿中，封口。

[0088] 对比例5：盐酸吉西他滨冻干粉针制备

[0089] 按照专利200910032906.0中实施例1的方法制备冻干粉针称取228g甘露醇与22.8g醋酸钠，加80％量注射用水，溶解并搅拌均匀，再加入228g盐酸吉西他滨，溶解并搅拌均匀，用0.1mol/L盐酸或0.1mol/L氢氧化钠溶液调pH至2.7，经中间体检查合格后，加注射用水定容至6000ml。经0.22μm的微孔滤膜过滤至澄明，灌装于25ml西林瓶中，将装盘待冻干样品置冻干箱中，关闭箱门，开机，打开循环泵、压缩机和板冷阀，利用导热油使制品温度下降，3小时后制品温度达到-30℃，然后继续冷冻，1.5小时后使制品温度达到-40℃左右时，关闭板冷阀，开启电加热和掺冷阀自动设置，保持该制品温度9.5小时，开启冷凝器阀，使冷凝器阀1小时后温度达到-45℃时，开启真空系统，当前箱真空达到20Pa以下时，开始升温升华干燥，经10小时使得最后的干燥温度为30℃，保持该温度15小时，至关闭中隔阀前箱真空无显著破坏后，压塞，出箱，用铝塑组合盖扎口，经质检合格后包装，即得。冻干过程耗时40小时。

[0090] 对比例6：盐酸吉西他滨冻干粉针制备

[0091] 按照专利CN201110265460.3中实施例5的方法制备冻干粉针。首先将0.25g焦亚硫酸氢钠用适量注射用水溶解于玻璃容器中，过滤后加入228g盐酸吉西他滨、175g甘露醇和适量注射用水，搅拌使其完全溶解，再补加注射用水至总体积为5000ml，然后搅拌使混合均匀，最后过滤，分装，按对比例5操作进行冷冻干燥，即得。

[0092] 发明人在制备实施例1和对比例3、5、6的冻干产品时发现，若采用本发明方案的冻干程序（22h）来制备对比例3、5的冻干产品，对比例3、5的冻干产品均无法成型。工艺参数如表1。

[0093] 表1 冻干制剂的工艺比较

[0094]预冻最低温度 干燥温度 冻干时间 注射水用量
实施例1 -25℃ 25℃ 22h 2500ml
对比例3 -50℃ 37℃ 28h 4000ml
对比例5、6 -45℃ 30℃ 40h 6000ml

[0095] 与对比例3、5、6相比，实施例1的冻干时间较短，且干燥温度接近室温，最低预冻温度较高，注射水用量较少，这些因素可以大大缩短冻干周期，降低生产成本，更适于工业生产。

[0096] 本发明人长期致力于盐酸吉西他滨组合物的研究，为了获得稳定性好的制剂，发明人进行了稳定性研究。

[0097] 实验例1：本发明冻干产品稳定性试验：

[0098] （1）实施例1产品与对比例1的稳定性比较

[0099] 实施例1是按照本发明技术方案制备的盐酸吉西他滨的冻干粉针，对比例1按照本发明实施例1的处方制备的盐酸吉西他滨的溶液注射剂，比较二者的稳定性。

[0100] 采用HPLC测定样品，以杂质的总含量（相对于100%活性成分的%不纯度）为评价指标，杂质总含量小于0.2%为合格。

[0101] 色谱条件：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；磷酸二氢钠溶液（磷酸二氢钠7.8g，加水溶解并稀释至1000ml，磷酸调节pH4.2）-0.2%庚烷磺酸钠甲醇溶液=（40:60）为流动相；检测波长为270nm。结果见表2。

[0102] 表2 本发明冻干粉针/水溶液的杂质总含量测定结果

[0103]

[0104] 由上述结果可知，实施例1无论在25℃ 60%RH还是40℃ 75%RH的加速条件下放置6个月，杂质总含量均明显低于对比例1，说明相同处方的冻干制剂稳定性优于溶液剂。

[0105] （2）实施例1～8与对比例2～6的稳定性比较

[0106] 对比例2～6是按照现有技术方案制备的盐酸吉西他滨的水溶液或冻干粉针制剂，以便将现有技术方案提供的制剂与本发明提供的组合物（实施例1～8）进行稳定性比较。

[0107] 按照对比例1所述的稳定性试验条件，采用高效液相测定样品，以杂质的总含量为评价指标，结果见表3和表4。

[0108] 表3 各实施例和对比例的杂质总含量（%）测定结果（25℃ 60%RH）[0109]0月 1月 2月 3月 6月
实施例1 0.013 0.016 0.027 0.028 0.030
实施例2 0.016 0.018 0.022 0.030 0.031
实施例3 0.018 0.021 0.030 0.031 0.035
实施例4 0.014 0.018 0.025 0.029 0.032
实施例5 0.013 0.017 0.026 0.030 0.034
实施例6 0.014 0.019 0.028 0.031 0.033
实施例7 0.019 0.026 0.034 0.036 0.041
实施例8 0.020 0.025 0.033 0.038 0.047
对比例2 0.050 0.057 0.063 0.081 0.098
对比例3 0.034 0.032 0.074 0.097 0.110
对比例4 0.052 0.056 0.079 0.098 0.115
对比例5 0.024 0.064 0.102 0.148 0.182
对比例6 0.053 0.059 0.069 0.091 0.101

[0110] 表4 各实施例和对比例的杂质总含量（%）测定结果（40℃ 75%RH）[0111]0月 1月 2月 3月 6月
实施例1 0.017 0.024 0.032 0.054 0.092
实施例2 0.015 0.024 0.037 0.042 0.084
实施例3 0.018 0.025 0.034 0.051 0.094
实施例4 0.016 0.022 0.031 0.048 0.093
实施例5 0.015 0.025 0.033 0.056 0.097
实施例6 0.017 0.026 0.035 0.059 0.099
实施例7 0.016 0.023 0.034 0.071 0.101
实施例8 0.019 0.027 0.035 0.102 0.118
对比例2 0.051 0.087 0.149 0.213 0.382
对比例3 0.019 0.029 0.044 0.059 0.125
对比例4 0.054 0.112 0.272 0.345 0.701
对比例5 0.022 0.028 0.039 0.060 0.157
对比例6 0.018 0.025 0.031 0.046 0.115

[0112] 结论：25℃、60%RH的加速条件6个月相当于冷藏条件下保存2年，由表3可知本发明组合物（实施例1～8）以及按照现有技术组成制备的水溶液和冻干粉针（对比例2～6）在冷藏条件下2年内均符合规定，且实施例1～8稳定性明显优于对比例2～6。

[0113] 40℃、75%RH的加速条件6个月相当于阴凉处保存2年，由表4可知本发明实施例1～8组合物在阴凉处保存2年内的稳定性高于对比例2～6，对比例2和4的制剂杂质总含量已超出0.2%限度，放置2年产品不稳定。

[0114] 实验例2：配伍稳定性试验

[0115] 盐酸吉西他滨临床使用的推荐药物浓度为3～7 mg/ml，下述试验通过将本发明的冻干粉针与氯化钠和葡萄糖溶液配伍，考察其配伍稳定性状况。

[0116] 按照实施例1的方法制备盐酸吉西他滨冻干粉针，将盐酸吉西他滨与0.9%氯化钠及5%葡萄糖注射液进行配伍稳定性试验，盐酸吉西他滨的浓度分别为3mg/ml和7mg/ml，结果见表5和6。

[0117] 表5 实施例1冻干粉针（3mg/ml）配伍稳定性试验结果

[0118]

[0119] 表6 实施例1冻干粉针（7mg/ml）配伍稳定性试验结果

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