复合茯砖茶水提物及应用

摘要

一种复合茯砖茶水提物，是取茯砖茶敲碎后与青蒿和薄荷叶混合，再浸泡于蒸馏水中，边加热边搅拌，至温度为70-100℃，并保持10-30分钟，静置，冷却至室温，过滤而得，可视腹泻的程度经口服来达到治疗细菌性腹泻的效果。

权利要求

1.一种复合茯砖茶水提物，其特征在于：该水提物是按每288g茯砖茶加10g青蒿和

2g薄荷叶的比例，取茯砖茶敲碎，与青蒿和薄荷叶混合，再按每3g茯砖茶、青蒿和薄荷叶加

8-30ml蒸馏水的比例，将混合后的茯砖茶、青蒿和薄荷叶浸泡于蒸馏水中，再边加热边搅拌，至温度为70-100℃，保持10-30分钟，静置，冷却至室温，过滤，所得茶汁即为复合茯砖茶水提物；

上述茯砖茶是指按照传统生产工艺生产并经2-10年贮存的陈年老茶。

2.如权利要求1所述的复合茯砖茶水提物在制备治疗由大肠杆菌O157引起的动物腹泻药物中的应用。

说明书

复合茯砖茶水提物及应用

技术领域

[0001] 本发明涉及食品生物技术领域，尤指一种复合茯砖茶水提物及其在制备治疗细菌性腹泻药物中的作用。

背景技术

[0002] 茯砖茶早期称“湖茶”，因在伏天加工，又称“伏茶”，是所有茶类中生产加工周期最长、工艺最复杂、最独特的黑茶。茯砖茶以3～4级黑毛茶为原料，通过筛分、汽蒸、渥堆、称茶、蒸茶、压制、包装、发花、干燥、检验等工序精制而成。“渥堆”是茯砖茶生产中的关键工序，能形成茯砖茶特有的色香味。黑茶能改善人体的胃肠道功能。这在民间早就得到了证实，《本经逢源》称：“姜茶治痢——不问赤白、冷热用之皆宜”、“合醋治泻痢甚效”，用老茶(存放几十年的黑茶)熬煮成浓汁，辅之以姜片，红糖喝下，一般不到两个时辰便药到病除。

[0003] 抗生素的发明是人类的一大进步，但是随着抗生素滥用现象越来越严重，出现了很多不可避免的问题，甚至出现了无药可医的超级细菌。人们期待着开发出更多具有抗药性低、毒副作用小的抗感染、抗病毒新药。茶叶源于天然，对自然界中几乎所有的病原菌都有一定的抑制能力，已经证明其对多种微生物的生长有明显的抑制作用，对于不同的细菌，茶叶表现出不同的抑菌效果。很多学者利用茶叶或茶叶中提取的活性成分如茶多酚、茶皂苷等对食源性细菌、肠道菌、口腔源性细菌、皮肤源性菌等进行抑菌实验，取得了较好的效果。

发明内容

[0004] 本发明所要解决的技术问题是：针对上述现有技术的不足，提供一种采用纯植物提取物制成的复合茯砖茶水提物，同时还提供该复合茯砖茶水提物在细菌性腹泻中的治疗作用，可减少抗生素的使用，降低食源性病原微生物的耐药性。

[0005] 为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案是：一种复合茯砖茶水提物，是按每288g茯砖茶加10g青蒿和2g薄荷叶的比例，取茯砖茶敲碎，与青蒿和薄荷叶混合，再按每
3g茯砖茶、青蒿和薄荷叶加8-30ml蒸馏水的比例，将混合后的茯砖茶、青蒿和薄荷叶浸泡于蒸馏水中，再边加热边搅拌，至温度为70-100℃，并于70-100℃保持10-30分钟，静置，冷却至室温，过滤，所得茶汁即为复合茯砖茶水提物。

[0006] 上述用到的茯砖茶是指按照传统生产工艺生产并经2-10年贮存的陈年老茶。

[0007] 本发明制得的复合茯砖茶水提物在细菌性腹泻中具有治疗作用，给药方式为口服给药。其中，细菌性腹泻是指由大肠杆菌O157，沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、或肠炎耶尔逊氏菌引起的动物腹泻。

[0008] 下面以药效学试验来具体说明本发明的复合茯砖茶水提物在治疗细菌性腹泻中的作用。

[0009] 以本发明水提物治疗大肠杆菌O157感染所致的细菌性腹泻为例进行说明。

[0010] 昆明种SPF小鼠200只，雌雄各半，体重18-22g。适应性喂养后随机分为5组：正常组(a组)、模型组(b组)、茶汁低剂量组(c组)、茶汁中剂量组(d组)、茶汁高剂量组(e组)，每组40只，分别按照低剂量组为1g/kg/day，中剂量组为10g/kg/day，高剂量组为20g/kg/day的量给低、中、高剂量组小鼠灌胃相应剂量茶汁3d后，此3组和模型组小鼠灌胃大肠杆菌O157:H7菌液造模，大肠杆菌O157:H7购自中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌种编号为21530。选择能使小鼠感染E.coli O157:H7但不致死的剂量为攻毒菌液，攻毒途径为经口灌胃，每只小鼠攻毒OD600＝1.0菌液0.4mL。攻毒后3h无菌取各组小鼠粪便标本，以E.coli O157试剂盒检测粪便中E.coli O157，证实攻毒小鼠已感染。

[0011] 模型复制后每日定时一次性给低、中、高剂量组小鼠灌胃相应剂量茶汁，给模型组灌胃生理盐水，灌胃量均为0.4mL/只，正常组不做任何处理。实验期间各组小鼠自由饮水和采食，连续10d后处死。

[0012] 每组取10只小鼠检测外周血细胞发现，感染大肠杆菌O157:H7的小鼠血小板明显降低，而灌胃中、高剂量茯砖茶的小鼠血小板含量提高，甚至恢复到正常水平，且呈明显的量效关系。对小鼠的血生化检测发现，与模型组相比，灌胃低、中、高剂量茶汁的小鼠血清甘油三酯下降；灌胃中、高剂量茶汁小鼠血小板计数升高，血清中AST、Scr和BUN降低；灌胃中剂量茶汁血清总蛋白和白蛋白升高。

[0013] 每组10只小鼠取胃组织、十二指肠、回肠、及结肠的标本，制成病理切片。镜下观察，可知，模型组小白鼠造模后，胃组织病理变化主要表现为水肿，胃腺萎缩，表层细胞脱落(参见图2b)。肾单位损伤表现为肾小管细胞坏死，病变肾小球细胞液化坏死，空泡化。毛细血管内可见中性粒细胞和单核细胞浸润(参见图1b)。十二指肠和回肠充血水肿现象明显，固有层和粘膜下层有明显的炎症水肿，炎症细胞呈局灶性或弥漫性浸润，并且有绒毛断裂、脱落现象(参见图3b、及图4b)。结肠肠壁增厚，黏膜下充血，肠腺减少，大量炎症细胞浸润至固有层甚至肌层(参见图5b)。通过灌胃复合茯砖茶水提物后，灌食低剂量茶汁组的小鼠各靶器官的损伤较模型组小鼠稍有好转(参见图1c、图2c、图3c、图4c、及图5c)；中、高剂量组的大部分小鼠的肾脏组织正常，肾小管和肾小球组织结构完好。胃、肠组织炎症、水肿消退，十二指肠和回肠绒毛基本恢复正常，极个别有局限性炎症反应(参见图1d-图1e、图2d-图2e、图3d-图3e、图4d-图4e、及图5d-图5e)。由此可见，中、高剂量的复合茯砖茶水提物能有效修复大肠杆菌O157引起的病理损伤。

[0014] 每组10只小鼠分别检测免疫功能，用免疫器官称重的方法检测免疫器官指数，用碳廓清的方法检测单核巨噬细胞功能，用血凝法检测血清溶血素指数，用免疫组化法检测+ +肠粘膜上CD4T细胞和CD8T细胞的表达。结果表明，与模型组相比，灌胃中、高剂量茶汁+ +
的小鼠胸腺指数增高，血清溶血素抗体滴度提高，肠道黏膜上CD4 和CD8 分子表达显示其+ +
CD4T细胞和CD8T细胞数量增多。三个剂量茶汁组小鼠单核-巨噬细胞功能提高。通过从非特异性免疫功能、体液免疫功能以及肠道局部免疫功能三方面检测模型小鼠的免疫功能证明复合茯砖茶水提物能有效提高感染大肠杆菌O157的模型小鼠的免疫功能。

[0015] 从血液学检测、病理学检测以及免疫功能检测三方面均证实，茯砖茶复合物能有效缓解模型小鼠的感染症状，保护因感染而受损的肝、肾功能，提高外周血中血小板计数，修复胃肠道和肾脏等主要靶器官的损伤，提高免疫功能。如此，本发明的复合茯砖茶水提物能恢复因感染大肠杆菌O157:H7而受损的肝肾功能，提高外周血血小板计数；能防止并修复胃肠道黏膜和肾脏的病理变化，保护靶器官；提高免疫功能；并能调整肠道菌群，帮助恢复肠道的微生态平衡。附图说明：

[0016] 图1是显微镜下放大40倍的肾病理切片图。

[0017] 其中：a表示正常组，b表示模型组(A区示病变肾小球细胞液化坏死，空泡化)，c表示低剂量组，d表示中剂量组，e表示高剂量组。

[0018] 图2是显微镜下放大10倍的胃病理切片图。

[0019] 其中：a表示正常组，b表示模型组(B区示胃底腺腺体间隙明显增宽，有水肿)，c表示低剂量组，d表示中剂量组，e表示高剂量组。

[0020] 图3是显微镜下放大10倍的十二指肠病理切片图。

[0021] 其中：a表示正常组，b表示模型组(C区示模型组小鼠十二指肠充血水肿现象明显，并且有绒毛断裂、脱落)，c表示低剂量组，d表示中剂量组，e表示高剂量组。

[0022] 图4是显微镜下放大10倍的回肠病理切片图。

[0023] 其中：a表示正常组，b表示模型组(D区示模型组小鼠回肠绒毛断裂、脱落并且有大量炎症细胞浸润)，c表示低剂量组，d表示中剂量组，e表示高剂量组。

[0024] 图5是显微镜下放大10倍的结肠病理切片图。

[0025] 其中：a表示正常组，b表示模型组(E区示模型组小鼠结肠固有层大量炎症细胞浸润)，c表示低剂量组，d表示中剂量组，e表示高剂量组。具体实施方式：

[0026] 实施例1

[0027] 取按传统生产工艺生产并经8年贮存的陈年茯砖茶288kg敲碎，与10kg青蒿和2kg薄荷叶混合，浸泡于2000l蒸馏水中，边加热边搅拌，至温度为85℃，保持20分钟，静置，冷却至室温，过滤，所得茶汁即为复合茯砖茶水提物。

[0028] 实施例2

[0029] 取按传统生产工艺生产并经2年贮存的陈年茯砖茶288kg敲碎，与10kg青蒿和2kg薄荷叶混合，浸泡于3000l蒸馏水中，边加热边搅拌，至温度为100℃，保持10分钟，静置，冷却至室温，过滤，所得茶汁即为复合茯砖茶水提物。

[0030] 实施例3

[0031] 取按传统生产工艺生产并经10年贮存的陈年茯砖茶288kg敲碎，与10kg青蒿和2kg薄荷叶混合，浸泡于800l蒸馏水中，边加热边搅拌，至温度为70℃，保持30分钟，静置，冷却至室温，过滤，所得茶汁即为复合茯砖茶水提物。