具有抗肿瘤活性的γ-丁内酯聚酮类化合物

摘要

本发明涉及医药技术领域，是从海洋动物海绵中分离到的具有抗肿瘤活性的γ-丁内酯聚酮类新化合物simplexolides A和B及其制备方法和用途。体外抗肿瘤试验表明，化合物simplexolides A和B对人结肠癌细胞HCT-116和SW480具有明显的抑制活性，因此可用于制备抗肿瘤药物。本发明为研制抗肿瘤药物提供了新的先导化合物，为开发利用我国海洋药用资源提供了科学依据。

权利要求

1.一种γ-丁内酯聚酮类化合物，其化学结构式如下：

其立体构型为3S,4S,5E或3S,4R,5Z,其中，立体构型为3S,4S,5E的γ-丁内酯聚酮类化合物为simplexolide A，立体构型为3S,4R,5Z的γ-丁内酯聚酮类化合物为simplexolide B。

2.权利要求1所述化合物的制备方法，步骤如下：

1）制备简易扁板海绵提取物浸膏

将干燥粉碎后的简易扁板海绵用甲醇按常规渗漉提取，得提取液，将提取液减压浓缩得提取物浸膏；

2）分离纯化

（1）将上述提取物浸膏分散于水中成混悬液，将混悬液依次用正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分别浓缩萃取液，得到正己烷提取浸膏、二氯甲烷提取浸膏、乙酸乙酯提取浸膏和正丁醇提取浸膏； （2）将 二 氯 甲 烷 提 取 浸 膏 经 减 压 柱 色 谱，以 二 氯 甲 烷 :甲 醇=50:1,25:1,15:1,5:1,2:1,1:1为溶剂梯度洗脱，根据TLC显色合并相似流份，得到4个组分Fr.1～Fr.4； （3）对 组 分 Fr.1再 次 进 行 减 压 柱 色 谱，以 石 油 醚：乙 酸 乙 酯=50:1,20:1,10:1,5:1,3:1,1:1为溶剂梯度洗脱，根据TLC显色合并相似流分，得4个组分Fr.11～Fr.14； （4）将组分Fr.13反复进行正、反相硅胶柱色谱、凝胶柱色谱，再用高效液相纯化，高效液相纯化条件为95%甲醇/水，流速2.0ml/min，保留时间17.0min，得化合物simplexolide A和组分Fr.131； （5）将组分Fr.131进一步用高效液相纯化，高效液相纯化条件为85%乙腈/水，流速

2.0ml/min，保留时间66.9min，得化合物simplexolide B。

3.权利要求1所述化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

说明书

具有抗肿瘤活性的γ-丁内酯聚酮类化合物

技术领域

[0001] 本发明涉及医药技术领域，是一种从海洋动物海绵中分离到的具有抗肿瘤活性的γ-丁内酯聚酮类化合物simplexolides A和B及其制备方法和用途。

背景技术

[0002] 海绵是一种生活在低温、高压、高盐、缺少阳光环境下的低等多细胞动物，常含有许多结构罕见有具有较强生物活性的代谢产物。能够为天然药物的研究提供潜在资源。简易扁板海绵(Plakortis simplex)属寻常海绵纲(Demospongiae)同骨海绵目(Hamosclerophorida)多板海绵科(Plakinidae)海绵。已从该属海绵中分离得到了大量的聚酮类次生代谢产物，其中最具特色的是聚酮类环状过氧化物(Rahm F，Hayes P.Kitching W Metabolites from marine sponges of the genus Plakortis，Heterocycles 2004，64，523-575)。但至今未见从该属海绵中分离到具有抗肿瘤活性的γ-丁内酯聚酮类化合物simplexolides A和B的报道。

发明内容

[0003] 本发明提供一种从中国南海西沙海域的简易扁板海绵中分离到的新的γ-丁内酯聚酮类化合物，其化学结构式如下：

[0004]

[0005] 其立体构型为3S，4S，5E或3S，4R，5Z。

[0006] 当立体构型为3S，4S，5E时，为化合物simplexolide A，当立体构型为3S，4R，5Z时，为化合物simplexolide B。

[0007] 化合物simplexolides A和B的制备方法如下：

[0008] 1.制备简易扁板海绵提取物浸膏

[0009] 将干燥粉碎后的简易扁板海绵(Plakortis simplex)用甲醇按常规渗漉提取，得提取液，将提取液减压浓缩得提取物浸膏；

[0010] 2.分离纯化

[0011] 1)将上述提取物浸膏分散于水中成混悬液，将混悬液依次用正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分别浓缩萃取液，得正己烷提取浸膏、二氯甲烷提取浸膏、乙酸乙酯提取浸膏和正丁醇提取浸膏；

[0012] 2)将二氯甲烷提取浸膏经减压柱色谱，以二氯甲烷∶甲醇＝50∶1，25∶1，15∶1，5∶1，2∶1，1∶1为溶剂梯度洗脱，根据TLC显色合并相似流份，得到4个组分Fr.1～Fr.4；

[0013] 3)对组分Fr.1再次进行减压柱色谱，以石油醚∶乙酸乙酯＝50∶1，20∶1，10∶1，5∶1，3∶1，1∶1为溶剂梯度洗脱，根据TLC显色合并相似流分，得到4个组分Fr.11～Fr.14；

[0014] 4)将组分Fr.13反复进行正、反相硅胶柱色谱、凝胶柱色谱，再用高效液相纯化，高效液相纯化条件为95％甲醇/水，流速2.0ml/min，得化合物simplexolide A和组分Fr.131；

[0015] 5)将组分Fr.131进一步用高效液相纯化，高效液相纯化条件为85％乙腈/水，流速2.0ml/min，保留时间66.9min，得到化合物simplexolide B。

[0016] 经鉴定，化合物simplexolides A和B都为γ-丁内酯聚酮类新化合物。

[0017] 体外抗肿瘤试验表明，化合物simplexolides A或B对人结肠癌细胞HCT-116均具有抑制活性，因此可用于制备抗肿瘤药物。

[0018] 本发明为研制新的抗肿瘤药物提供了新的先导化合物，为开发利用中国的海洋药用生物资源具有重要意义。

具体实施方式

[0019] 现结合实施例对本发明作详细描述。

[0020] 实施例1.制备化合物simplexolides A和B

[0021] 1.制备简易扁板海绵提取物浸膏

[0022] (1)制备提取液：

[0023] 取干燥粉碎后的简易扁板海绵(Plakortis simplex)2.0kg，分别用15L甲醇渗漉提取4次，每次渗漉3天，合并提取液；

[0024] (2)制备提取物浸膏

[0025] 减压浓缩上述提取液，得到提取物浸膏500g；

[0026] 2.分离纯化

[0027] 1)将上述提取物浸膏分散于水中成混悬液，将混悬液依次用正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分别浓缩萃取液，得正己烷提取浸膏105g；二氯甲烷提取浸膏41g；乙酸乙酯提取浸膏1.2g和正丁醇提取浸膏22g；

[0028] 2)将二氯甲烷提取浸膏经减压柱色谱，以二氯甲烷∶甲醇＝50∶1，25∶1，15∶1，5∶1，2∶1，1∶1为溶剂梯度洗脱，根据TLC显色合并相似流份得到4个组分Fr.1～Fr.4；

[0029] 3)对组分Fr.1再次进行减压柱色谱，以石油醚∶乙酸乙酯＝50∶1，20∶1，10∶1，5∶1，3∶1，1∶1为溶剂梯度洗脱，根据TLC显色合并相似流分得到4个组分Fr.11～Fr.14；

[0030] 4)将组分Fr.13反复进行正、反相硅胶柱色谱、凝胶柱色谱，再用高效液相纯化，高效液相纯化条件为95％甲醇/水，流速2.0ml/min，得化合物simplexolide A 21.7mg和组分Fr.131。

[0031] 5)将组分Fr.131进一步用高效液相纯化，高效液相纯化条件为85％乙腈/水，流速2.0ml/min，保留时间66.9min，得到化合物simplexolide B 8.3mg。

[0032] 结构鉴定

[0033] 按常规经NMR、HRESIMS、CD、IR等多种现代光谱技术，以及运用化学方法Mosher反应确定了simplexolides A和B的化学结构及立体构型，simplexolide A的立体构型为3S，4S，5E，simplexolide B的立体构型为3S，4R，5Z。

[0034] simplexolide A：无 色 油 状； IR(KBr)vmax3451，2960，2927，2873，1763，1655，1464，1412，1378，1343，1290，1248，1210，1182，1119，1103，-1 +
1090，1071，1014，980，958，926，885，800cm ；HRESIMS m/z 305.2094[M+Na](calcd for C17H30O3Na，305.2093).CD 光 谱 (c 1.1mg/mL，CH3CN)，193nm(Δε-0.65)，
1 13
222nm(Δε0.84).H NMR(CDCl3，600MHz)和 C NMR(CDCl3，150MHz)数据见表1。

[0035] simplexolide B：Colorless oil； IR(KBr)vmax3439，2962，2930，2874，1758，1655，1460，1400，1379，1341，1280，1250，1208，1165，1111，-1 1 13
1063，1023，972，954，916，879，799cm ；HNMR(CDCl3，500MHz)and C NMR(CDCl3，125MHz)+
data，see Table1and 2；HRESIMS m/z 305.2095[M+Na](calcd for C17H30O3Na，305.2093).
1 13
CD spectrum(c 0.5mg/mL，CH3CN)，196nm(Δε+5.16).HNMR(CDCl3，600MHz) 和 C NMR(CDCl3，150MHz)数据见表1。

[0036] 表1.Simplexolides A和B的1H和13C核磁共振数据表

[0037]

[0038]

[0039] 体外抗肿瘤活性实验