一种红龙镇痛药物组合物及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种红龙镇痛药物组合物及其制备方法和应用。该组合物由以下原料药制成：乙醇提取物40-55重量份、水提取物25-45重量份、药材细粉12-28重量份。本发明采用新的提取制备方法，对配方中的药材选用不同的溶剂进行分开提取，对配方中一些矿物药、有毒性的药材进行了长时间的煎煮，保证了矿物药材中的药效成分能够被充分的提取出来且降低了有毒性的药材的毒性。本发明的方法制备的药物制剂在保留原制剂药效的前提下，可实现吸收快，有效成分集中到达病灶部位，起效快，生物利用度高。同时通过本发明制备的组合物制备的制剂与原红龙镇痛片制剂相比，提高了疗效。

权利要求

1.一种红龙镇痛药物组合物，其特征在于，由如下重量份的原料制成：

乙醇提取物40-55重量份、水提取物40-55重量份、药材细粉12-28重量份；

所述的乙醇提取物是按照如下方法制得的：取印度獐牙菜50-80重量份、红花50-80重量份、金腰草10-18重量份、川西小黄菊50-80重量份、马尿泡9-18重量份、波棱瓜子9-18重量份共6味药材混合，加入体积浓度50-90%的乙醇溶液回流提取2-4次，每次加体积浓度50-90%的乙醇的量是6味药材总重量的6-14倍，提取1-5h，滤过，合并药液得乙醇提取物液，减压浓缩至50℃相对密度为1.28-1.35的稠膏，干燥，粉碎，得乙醇提取物；

所述的水提取物是按照如下方法制得的：取铁棒锤10-18重量份、唐古特乌头50-80重量份、珍珠母28-42重量份、龙骨90-135重量份、泉华9-18重量份混合，按5味药材总重量的6-14倍量加水煎煮提取1-3h，再加入石花9-18重量份、短穗兔耳草50-80重量份，并加入石花、短穗兔耳草2味药材总重量的6-14倍量水，再煎煮提取2-4次，煎煮2-4h，滤过，合并滤液，减压浓缩至50℃相对密度为1.28-1.35的稠膏，干燥，粉碎，得水提取物；

所述的药材细粉是按照如下方法制得的：取安息香9-18重量份、熊胆粉3-10重量份2味药材，10℃－30℃粉碎，过80-200目筛，得药材细粉。

2.如权利要求1所述的一种红龙镇痛药物组合物，其特征在于，由如下原料制成：

乙醇提取物48.5g、水提取物47.3g、药材细粉19.6g；

所述的乙醇提取物是按照如下方法制得的：取印度獐牙菜67.0g、红花67.0g、金腰草

14.0g、川西小黄菊67.0g、马尿泡13.5g、波棱瓜子13.5g共6味药材混合，加入体积浓度

75%的乙醇溶液回流提取2次，每次加体积浓度75%的乙醇的量是6味药材总重量的8倍，提取3h，滤过，合并药液得乙醇提取物液，减压浓缩至50℃相对密度为1.33的稠膏，干燥，粉碎，得乙醇提取物；

所述的水提取物是按照如下方法制得的：取铁棒锤14.0g、唐古特乌头67.0g、珍珠母

35.0g、龙骨112.0g、泉华13.5g混合，按5味药材总重量的10倍量加水煎煮提取2h，再加入石花13.5g、短穗兔耳草67.0g，并加入石花、短穗兔耳草2味药材总重量的10倍量水，再煎煮提取2次，第一次煎煮3h，第二次按7味药材总重量的8倍量水加入，煎煮2h，滤过，合并滤液，减压浓缩至50℃相对密度为1.33的稠膏，干燥，粉碎，得水提取物；

所述的药材细粉是按照如下方法制得的：取安息香13.0g、熊胆粉6.6g，10℃－30℃粉碎，过120目筛，得药材细粉。

3.权利要求1或2所述的一种红龙镇痛药物组合物，其特征在于，加入常规辅料，按照常规工艺制备成药学上可接受的任何一种剂型。

4.如权利要求1所述的一种红龙镇痛药物组合物的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）取印度獐牙菜50-80重量份、红花50-80重量份、金腰草10-18重量份、川西小黄菊50-80重量份、马尿泡9-18重量份、波棱瓜子9-18重量份共6味药材混合，加入体积浓度50-90%的乙醇溶液回流提取2-4次，每次加体积浓度50-90%的乙醇的量是6味药材总重量的6-14倍，提取1-5h，滤过，合并药液得乙醇提取物液，减压浓缩至50℃相对密度为

1.28-1.35的稠膏，干燥，粉碎，得乙醇提取物；

（2）取铁棒锤10-18重量份、唐古特乌头50-80重量份、珍珠母28-42重量份、龙骨

90-135重量份、泉华9-18重量份混合，按5味药材总重量的6-14倍量加水煎煮提取1-3h，再加入石花9-18重量份、短穗兔耳草50-80重量份，并加入石花、短穗兔耳草2味药材总重量的6-14倍量水，再煎煮提取2-4次，煎煮2-4h，滤过，合并滤液，减压浓缩至50℃相对密度为1.28-1.35的稠膏，干燥，粉碎，得水提取物；

（3）取安息香9-18重量份、熊胆粉3-10重量份2味药材，10℃－30℃粉碎，过80-200筛，得药材细粉；

（4）将步骤（1）制得的乙醇提取物、步骤（2）制得的水提取物和步骤（3）制得的药材细粉混合，即得红龙镇痛药物组合物。

5.如权利要求2所述的一种红龙镇痛药物组合物的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）取印度獐牙菜67.0g、红花67.0g、金腰草14.0g、川西小黄菊67.0g、马尿泡13.5g、波棱瓜子13.5g共6味药材混合，加入体积浓度75%的乙醇溶液回流提取2次，每次加体积浓度50-90%的乙醇的量是6味药材总重量的8倍，提取3h，滤过，合并药液得乙醇提取物液，减压浓缩至50℃相对密度为1.33的稠膏，干燥，粉碎，得乙醇提取物；

（2）取铁棒锤14.0g、唐古特乌头67.0g、珍珠母35.0g、龙骨112.0g、泉华13.5g混合，按5味药材总重量的10倍量加水煎煮提取2h，再加入石花13.5g、短穗兔耳草67.0g，并加入石花、短穗兔耳草2味药材总重量的10倍量水，再煎煮提取2次，第一次煎煮3h，第二次按7味药材总重量的8倍量水加入，煎煮2h，滤过，合并滤液，减压浓缩至50℃相对密度为

1.33的稠膏，干燥，粉碎，得水提取物；

（3）取安息香13.0g、熊胆粉6.6g，10℃－30℃粉碎，过120目筛，得药材细粉；

（4）将步骤（1）制得的乙醇提取物、步骤（2）制得的水提取物和步骤（3）制得的药材细粉混合，即得红龙镇痛药物组合物。

6.如权利要求1或2所述的一种红龙镇痛药物组合物在制备治疗偏头痛、血管神经性头痛的药物中的应用。

说明书

一种红龙镇痛药物组合物及其制备方法和应用

技术领域

[0001] 本发明涉及一种药用组合物及其制备方法和应用，特别涉及一种红龙镇痛药物组合物及其制备方法和应用。

背景技术

[0002] 偏头痛，也称为血管神经性头痛，是一种临床常见的慢性神经血管性疾患，其发病率高，各国报道的年患病率，女性为3.3％～32.6％，男性为0.7％～16.1％。偏头痛可发生于任何年龄，首次发病多于青春期。偏头痛严重影响患者的生活质量，2001年世界卫生组织将严重偏头痛定为最致残的慢性疾病，类同于痴呆、四肢瘫痪和严重精神病。偏头痛发病机理复杂，至今尚未明确；治疗以药物为主，可分为急性期治疗和预防性治疗。急性期治疗常用药物有非甾体抗炎药、巴比妥类镇静药、阿片类镇痛药及曲马多；预防性治疗药物有：β受体阻滞剂、钙离子通道阻滞剂、抗癫痫剂、抗抑郁剂、非甾体抗炎药及其他种类的药物。上述药物疗效虽肯定，但易出现毒副作用、成瘾性等不良反应，患者依从性较差。而传统藏医药治疗偏头痛有独特优势。经典藏药红龙镇痛片处方来源于云丹嘉措的《藏医临床札记》；醒脑开窍，通络止痛，用于治疗瘀阻脑络所引起的偏头痛、血管神经性头痛，临床应用证实疗效显著，且未见明显不良反应。

[0003] 红龙镇痛片标准编号：WS-10659（ZD-0659）-2002-2011Z。红龙镇痛片由龙骨112.0g、印度獐牙菜67.0g、红花67.0g、金腰草14.0g、川西小黄菊67.0g、铁棒锤14.0g、唐古特乌头67.0g、熊胆粉6.6g、泉华13.5g、波棱瓜子13.5g、马尿泡13.5g、石花13.5g、短穗兔耳草67.0g、安息香13.0g、珍珠母35.0g组成。具有醒脑开窍、通络止痛的功效。用于瘀阻脑络所引起的偏头痛，血管神经性头痛。为藏医古验方，收载于云丹嘉措的《藏医临床札记》，一百多年的临床应用证明，对偏头痛、血管性头痛效果良好，备受患者青睐。红龙镇痛片传统制备方法为：红花、川西小黄菊、铁棒锤、唐古特乌头、波棱瓜子、金腰草加水煎煮三次，第一次2h，第二、三次各1h，合并煎液，滤过，浓缩至相对密度为1.38～1.38（20℃）的稠膏；其余龙骨等九味粉碎成细粉，与稠膏混匀，干燥、粉碎、过筛，用稀乙醇制成颗粒，干燥，加入淀粉，硬脂酸镁适量，压制成1000片，即得。

[0004] 现有技术关于红龙镇痛药物的制备方法采用小部分药材进行提取，大部分药材直接粉碎入药，直接粉碎入药的药材有效成分释放缓慢，严重影响到药物有效成分的吸收利用，同时因为原药材细粉入药，也影响到卫生学不合格的问题，同时由于大部分药材不经过提取，也影响到其制剂的发展。

发明内容

[0005] 本发明的目的在于公开一种用特定方法制成的红龙镇痛药物组合物，本发明的另一目的还在于公开该组合物的制备方法和应用。

[0006] 本发明的技术方案如下：

[0007] 一种红龙镇痛药物组合物，由如下重量份的原料制成：

[0008] 乙醇提取物40-55重量份、水提取物40-55重量份、药材细粉12-28重量份； [0009] 所述的乙醇提取物是按照如下方法制得的：取印度獐牙菜50-80重量份、红花50-80重量份、金腰草10-18重量份、川西小黄菊50-80重量份、马尿泡9-18重量份、波棱瓜子9-18重量份共6味药材混合，加入体积浓度50-90%的乙醇溶液回流提取2-4次，每次加体积浓度50-90%的乙醇的量是6味药材总重量的6-14倍，提取1-5h，滤过，合并药液得乙醇提取物液，减压浓缩至50℃相对密度为1.28-1.35的稠膏，干燥，粉碎，得乙醇提取物； [0010] 所述的水提取物是按照如下方法制得的：取铁棒锤10-18重量份、唐古特乌头
50-80重量份、珍珠母28-42重量份、龙骨90-135重量份、泉华9-18重量份混合，按5味药材总重量的6-14倍量加水煎煮提取1-3h，再加入石花9-18重量份、短穗兔耳草50-80重量份，并加入石花、短穗兔耳草2味药材总重量的6-14倍量水，再煎煮提取2-4次，煎煮2-4h，滤过，合并滤液，减压浓缩至50℃相对密度为1.28-1.35的稠膏，干燥，粉碎，得水提取物； [0011] 所述的药材细粉是按照如下方法制得的：取安息香9-18重量份、熊胆粉3-10重量份2味药材，10℃－30℃粉碎，过80-200目筛，得药材细粉。

[0012] 根据本发明优选的，一种红龙镇痛药物组合物，由如下重量份的原料制成： [0013] 乙醇提取物48.5g、水提取物47.3g、药材细粉19.6g；

[0014] 所述的乙醇提取物是按照如下方法制得的：取印度獐牙菜67.0g、红花67.0g、金腰草14.0g、川西小黄菊67.0g、马尿泡13.5g、波棱瓜子13.5g共6味药材混合，加入体积浓度75%的乙醇溶液回流提取2次，每次加体积浓度75%的乙醇的量是6味药材总重量的8倍，提取3h，滤过，合并药液得乙醇提取物液，减压浓缩至50℃相对密度为1.33的稠膏，干燥，粉碎，得乙醇提取物；

[0015] 所述的水提取物是按照如下方法制得的：取铁棒锤14.0g、唐古特乌头67.0g、珍珠母35.0g、龙骨112.0g、泉华13.5g混合，按5味药材总重量的10倍量加水煎煮提取2h，再加入石花13.5g、短穗兔耳草67.0g，并加入石花、短穗兔耳草2味药材总重量的10倍量水，再煎煮提取2次，第一次煎煮3h，第二次按7味药材总重量的8倍量水加入，煎煮2h，滤过，合并滤液，减压浓缩至50℃相对密度为1.33的稠膏，干燥，粉碎，得水提取物； [0016] 所述的药材细粉是按照如下方法制得的：取安息香13.0g、熊胆粉6.6g，10℃－30℃粉碎，过120目筛，得药材细粉。

[0017] 本发明的一种红龙镇痛药物组合物的原料中可加入常规辅料，按照常规工艺制备成药学上可接受的任何一种剂型，包括片剂、胶囊、浓缩丸、滴丸、颗粒剂、凝胶等。所述辅料包括溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂、润滑剂、基质等。 [0018] 一种红龙镇痛药物组合物的制备方法，步骤如下：

[0019] （1）取印度獐牙菜50-80重量份、红花50-80重量份、金腰草10-18重量份、川西小黄菊50-80重量份、马尿泡9-18重量份、波棱瓜子9-18重量份共6味药材混合，加入体 积浓度50-90%的乙醇溶液回流提取2-4次，每次加体积浓度50-90%的乙醇的量是6味药材总重量的6-14倍，提取1-5h，滤过，合并药液得乙醇提取物液，减压浓缩至50℃相对密度为1.28-1.35的稠膏，干燥，粉碎，得乙醇提取物；

[0020] （2）取铁棒锤10-18重量份、唐古特乌头50-80重量份、珍珠母28-42重量份、龙骨90-135重量份、泉华9-18重量份混合，按5味药材总重量的6-14倍量加水煎煮提取1-3h，再加入石花9-18重量份、短穗兔耳草50-80重量份，并加入石花、短穗兔耳草2味药材总重量的6-14倍量水，再煎煮提取2-4次，煎煮2-4h，滤过，合并滤液，减压浓缩至50℃相对密度为1.28-1.35的稠膏，干燥，粉碎，得水提取物；

[0021] （3）取安息香9-18重量份、熊胆粉3-10重量份2味药材，10℃－30℃粉碎，过80-200目筛，得药材细粉；

[0022] （4）将步骤（1）制得的乙醇提取物、步骤（2）制得的水提取物和步骤（3）制得的药材细粉混合，即得红龙镇痛药物组合物。

[0023] 根据本发明优选的，一种红龙镇痛药物组合物的制备方法，步骤如下： [0024] （1）取印度獐牙菜67.0g、红花67.0g、金腰草14.0g、川西小黄菊67.0g、马尿泡13.5g、波棱瓜子13.5g共6味药材混合，加入体积浓度75%的乙醇溶液回流提取2次，每次加体积浓度75%的乙醇的量是6味药材总重量的8倍，提取2h，滤过，合并药液得乙醇提取物液，减压浓缩至50℃相对密度为1.33的稠膏，干燥，粉碎，得乙醇提取物； [0025] （2）取铁棒锤14.0g、唐古特乌头67.0g、珍珠母35.0g、龙骨112.0g、泉华13.5g混合，按5味药材总重量的10倍量加水煎煮提取2h，再加入石花13.5g、短穗兔耳草67.0g，并加入石花、短穗兔耳草2味药材总重量的10倍量水，再煎煮提取2次，第一次煎煮3h，第二次按7味药材总重量的8倍量水加入，煎煮2h，滤过，合并滤液，减压浓缩至50℃相对密度为1.33的稠膏，干燥，粉碎，得水提取物；

[0026] （3）取安息香13.0g、熊胆粉6.6g，10℃－30℃粉碎，过120目筛，得药材细粉； [0027] （4）将步骤（1）制得的乙醇提取物、步骤（2）制得的水提取物和步骤（3）制得的药材细粉混合，即得红龙镇痛药物组合物。

[0028] 本发明的一种红龙镇痛药物组合物在制备治疗偏头痛、血管神经性头痛的药物中的应用。

[0029] 本发明重量份和体积份的关系为g/ml或kg/L。

[0030] 本发明与现有技术相比，有益效果如下：

[0031] 1、本发明的特点是以药效活性为指导，充分考虑药物成分的性质、不同的临床病症需要，以及用药对象的顺应性和生理情况等，采用新的提取制备方法，同时，本发明根据配方中的药材所含化学成分的理化性质，选用不同的溶剂进行分开提取，对配方中一些矿物药材进行了长时间的煎煮，保证了矿物药材中的药效成分能够被充分的提取出来，提高了药品的疗效。

[0032] 2、有毒性的药材铁棒锤经长时间提取，毒性成分双酯型生物碱水解生成单酯型和脂肪 型生物碱，起到减毒的作用，从而降低了药品的毒性，增加了药品的安全性。 [0033] 3、与传统制剂相比，本发明的方法制备的药物制剂在保留原制剂药效的前提下，可实现吸收快，有效成分集中到达病灶部位，起效快，生物利用度高。同时通过本发明的制备的组合物制备的制剂与原红龙镇痛片制剂相比，提高了疗效。

具体实施方式

[0034] 下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。实验例中所使用的红龙镇痛新制剂是用本发明实施例1方法制备的红龙镇痛药物组合物制成的。

[0035] 实施例1、红龙镇痛药物组合物胶囊的制备

[0036] 乙醇提取物48.5g、水提取物47.3g、药材细粉19.6g；

[0037] 按照如下方法制备而成：

[0038] （1）取印度獐牙菜67.0g、红花67.0g、金腰草14.0g、川西小黄菊67.0g、马尿泡13.5g、波棱瓜子13.5g共6味药材混合，加入体积浓度75%的乙醇溶液回流提取2次，每次加体积浓度75%的乙醇的量是6味药材总重量的8倍，提取3h，滤过，合并药液得乙醇提取物液，减压浓缩至50℃相对密度为1.33的稠膏，干燥，粉碎，得乙醇提取物； [0039] （2）取铁棒锤14.0g、唐古特乌头67.0g、珍珠母35.0g、龙骨112.0g、泉华13.5g混合，按5味药材总重量的10倍量加水煎煮提取2h，再加入石花13.5g、短穗兔耳草67.0g，并加入石花、短穗兔耳草2味药材总重量的10倍量水，再煎煮提取2次，第一次煎煮3h，第二次按7味药材总重量的8倍量水加入，煎煮2h，滤过，合并滤液，减压浓缩至50℃相对密度为1.33的稠膏，干燥，粉碎，得水提取物；

[0040] （3）取安息香13.0g、熊胆粉6.6g，10℃－30℃粉碎，过120目筛，得药材细粉； [0041] （4）将步骤（1）制得的乙醇提取物、步骤（2）制得的水提取物和步骤（3）制得的药材细粉混合，即得红龙镇痛药物组合物；按照常规工艺，加入常规辅料，制成胶囊，即得。 [0042] 实施例2、红龙镇痛药物组合物颗粒的制备

[0043] 乙醇提取物45.6g、水提取物46.2g、药材细粉18.8g；

[0044] 按照如下方法制备而成：

[0045] （1）取印度獐牙菜60.0g、红花60.0g、金腰草17.0g、川西小黄菊60.0g、马尿泡13.5g、波棱瓜子11.5g共6味药材混合，加入体积浓度60%的乙醇溶液回流提取2次，第一次加入的量是6味药材总重量的10倍，提取3h，第二次加入的量是6味药材总重量的8倍，提取2h，滤过，合并药液得乙醇提取物液，减压浓缩至50℃相对密度为1.34的稠膏，干燥，粉碎，得乙醇提取物；

[0046] （2）取铁棒锤17.0g、唐古特乌头70.0g、珍珠母30.0g、龙骨100.0g、泉华17g混合，按5味药材总重量的10倍量加水煎煮提取3h，再加入石花15.5g、短穗兔耳草63.0g，并加入石花、短穗兔耳草2味药材总重量的10倍量水，再煎煮提取3次，第一次煎煮3h，第二次按7味药材总重量的6倍量水加入，煎煮2h，第三次按7味药材总重量的8倍量水 加入，煎煮1h，滤过，合并滤液，减压浓缩至50℃相对密度为1.32的稠膏，干燥，粉碎，得水提取物；

[0047] （3）按原料药组成配比取安息香12.0g、熊胆粉6.6g，10℃－30℃粉碎，过120目筛，得药材细粉；

[0048] （4）将步骤（1）制得的乙醇提取物、步骤（2）制得的水提取物和步骤（3）制得的药材细粉混合，即得红龙镇痛药物组合物；按照常规工艺，加入常规辅料，制成颗粒剂，即得。 [0049] 实施例3、红龙镇痛药物组合物滴丸的制备

[0050] 乙醇提取物48.5g、水提取物47.3g、药材细粉19.6g；

[0051] 按照如下方法制备而成：

[0052] 步骤（1）-（3）同实施例1；

[0053] （4）将步骤（1）制得的乙醇提取物、步骤（2）制得的水提取物和步骤（3）制得的药材细粉混合，即得红龙镇痛药物组合物；按照常规工艺，加入常规辅料，制成滴丸，即得。 [0054] 实施例4、红龙镇痛药物组合物浓缩丸的制备

[0055] 乙醇提取物45.6g、水提取物46.2g、药材细粉18.8g；

[0056] 按照如下方法制备而成：

[0057] 步骤（1）-（3）同实施例2；

[0058] （4）将步骤（1）制得的乙醇提取物、步骤（2）制得的水提取物和步骤（3）制得的药材细粉混合，即得红龙镇痛药物组合物；按照常规工艺，加入常规辅料，制成浓缩丸，即得。 [0059] 实施例5、红龙镇痛药物组合物片剂的制备

[0060] 乙醇提取物48.7g、水提取物45.8g、药材细粉19.6g；

[0061] 按照如下方法制备而成：

[0062] （1）取印度獐牙菜67.0g、红花67.0g、金腰草14.0g、川西小黄菊67.0g、马尿泡13.5g、波棱瓜子13.5g共6味药材混合，加入体积浓度80%的乙醇溶液回流提取2次，第一次加入的量是6味药材总重量的10倍，提取3h，第二次加入的量是6味药材总重量的8倍，提取2h，滤过，合并药液得乙醇提取物液，减压浓缩至50℃相对密度为1.31的稠膏，干燥，粉碎，得乙醇提取物；

[0063] （2）取铁棒锤14.0g、唐古特乌头67.0g、珍珠母35.0g、龙骨112.0g、泉华13.5g混合，按5味药材总重量的10倍量加水煎煮提取3h，再加入石花13.5g、短穗兔耳草67.0g，并加入石花、短穗兔耳草2味药材总重量的8倍量水，再煎煮提取2次，第一次煎煮3h，第二次按7味药材总重量的8倍量水加入，煎煮2h，滤过，合并滤液，减压浓缩至50℃相对密度为1.32的稠膏，干燥，粉碎，得水提取物；

[0064] （3）按原料药组成配比取安息香13.0g、熊胆粉5.6g，10℃－30℃粉碎，过120目筛，得药材细粉；

[0065] （4）将步骤（1）制得的乙醇提取物、步骤（2）制得的水提取物和步骤（3）制得的药材细粉混合，即得红龙镇痛药物组合物；按照常规工艺，加入常规辅料，制成片剂，即得。 [0066] 实施例6、一种红龙镇痛药物组合物凝胶剂的制备

[0067] 乙醇提取物46.7g、水提取物45.8g、药材细粉18.6g；

[0068] 按照如下方法制备而成：

[0069] 步骤（1）-（3）同实施例5；

[0070] （4）将步骤（1）制得的乙醇提取物、步骤（2）制得的水提取物和步骤（3）制得的药材细粉混合，即得红龙镇痛药物组合物；按照常规工艺，加入常规辅料，制成凝胶剂，即得。 [0071] 下述实验例用于进一步说明但不限于本发明。实验例中所使用的红龙镇痛药物组合物是用本发明方法实施例1制备的红龙镇痛药物组合物。

[0072] 实验例1、乙醇提取物工艺研究实验

[0073] 一、不同提取溶剂的筛选

[0074] 称取印度獐牙菜20.1g、红花20.1g、金腰草4.2g、川西小黄菊20.1g、马尿泡4.05g、波棱瓜子4.05g共6味药材共计72.6g，混合置1000mL圆底烧瓶中，共取4份做如下工艺：

[0075] 工艺一（水）：加入8倍量水回流提取2次，每次2h，滤过，滤液浓缩至约100g，称定重量，称取约相当于5g药材的浓缩液，测定干膏，剩余液体干燥，测定獐牙菜苦苷含量，计算总提取量。

[0076] 工艺二（体积浓度40%乙醇）：加入8倍量40%乙醇回流提取2次，每次2h，滤过，滤液浓缩至约100g，称定重量，称取约相当于5g药材的浓缩液，测定干膏，剩余液体干燥，测定獐牙菜苦苷含量，计算总提取量。

[0077] 工艺三（体积浓度75%乙醇）：加入8倍量75%乙醇回流提取2次，每次2h，滤过，滤液浓缩至约100g，称定重量，称取约相当于5g药材的浓缩液，测定干膏，剩余液体干燥，测定獐牙菜苦苷含量，计算总提取量。

[0078] 工艺四（体积浓度90%乙醇）：加入8倍量90%回流提取2次，每次2h，滤过，滤液浓缩至约100g，称定重量，称取约相当于5g药材的浓缩液，测定干膏，剩余液体干燥，测定獐牙菜苦苷含量，计算总提取量。结果见表1。

[0079] 表1不同提取溶剂獐牙菜苦苷提取量比较

[0080]

[0081] 注：印度獐牙菜药材中獐牙菜苦苷含量：0.70%。

[0082] 结论：上述实验结果显示，用水提取，獐牙菜苦苷含量较低，选用40%乙醇提取，獐牙菜苦苷含量稍高，而75%乙醇和90%乙醇獐牙菜苦苷含量较高，差异较小，为保证药物中有效成分能最大限度的提取出来，同时也能够节约生产成本，优选采用体积浓度75%乙醇进行提取。

[0083] 二、正交试验优选加醇量、提取时间和提取次数

[0084] 采用正交试验法，选定加醇量、提取时间和提取次数作为考察的三个因素，各取三个水平，设计见下表2：

[0085] 表2因素水平表

[0086]

[0087] *注：实验室中的提取时间是由提取次数确定，提取时间由前往后依次进行。 [0088] 称取印度獐牙菜20.1g、红花20.1g、金腰草4.2g、川西小黄菊20.1g、马尿泡4.05g、波棱瓜子4.05g共6味药材共计72.6g，混合置1000mL圆底烧瓶中，共取9份，按正交表顺序进工艺试验研究，结果如下表3：

[0089] 表3 L9（34）正交试验设计表及结果

[0090]

[0091] 由上表可以看出，各因素作用主次为A>C>B，最佳工艺参数为A2B2C2。采取以8倍量体积浓度75％乙醇回流提取2次，每次提取2h。

[0092] 验证试验

[0093] 采用优选得到的工艺（加水8倍量，提取2次，每次2h），按配方配比称取药材印度獐牙菜100.5g、红花100.5g、金腰草21g、川西小黄菊100.5g、马尿泡20.25g、波棱瓜子20.25g，共计363g置烧瓶中，重复上述提取工艺，结果见下表4。

[0094] 表4正交验证试验结果

[0095]

[0096] 结论：验证结果与正交试验基本一致，说明提取工艺条件稳定，可行。 [0097] 实验例2、水提取工艺研究实验

[0098] 采用正交试验对提取时间、加水量和提取温度作为考察的三个因素，各取三个水平，设计见下表5：

[0099] 表5水煎煮正交试验表设计

[0100]

[0101] *注：实验室中的加水量和提取时间均是由提取次数确定，加水量和提取时间由前往后依次进行。

[0102] 试验方法

[0103] 称取铁棒锤2.8g、唐古特乌头13.4g、珍珠母13.4g、龙骨22.4g、泉华2.7g、石花2.7g、短穗兔耳草13.4g 7味药材，每份共计64.4g，共计称取9份，按正交表顺序加水煎煮，提取液滤过，减压浓缩并定容至100ml量瓶中，精密量取25ml液体，用水饱和的正丁醇萃取
2次，每次25ml，合并正丁醇液，干燥至恒重，计算正丁醇萃取量。结果如下表6： [0104] 表6正交试验设计表及结果

[0105]

[0106] 结果分析

[0107] 由正交试验结果极差R分析可知：各因素作用主次为A>C>B，在设定的条件下，提取时间对提取影响最大，提取时间为主要因素，应选最优水平C2，提取次数C2，C3差异较小，从节约能源考虑可以选择C2。提取时间影响因素较小，故选择B2。综上所述。确定的最佳提取工艺为加水煎煮2次，第一次加10倍量水，煎煮3h，第二次，加8倍量水，煎煮2h。 [0108] 验证试验

[0109] 采用优选得到的工艺（第一次加10倍量水，煎煮3h，第二次加8倍量水，煎煮2h），按配方配比称取取铁棒锤14.0g、唐古特乌头67.0g、珍珠母35.0g、龙骨112.0g、泉华
13.5g、石花13.5g、短穗兔耳草67.0g，共计322g置烧瓶中，重复上述提取工艺，结果见下表
7。

[0110] 表7正交验证试验结果

[0111]

[0112] 结论：验证结果与正交试验基本一致，说明提取工艺条件基本稳定。 [0113] 实验例3、不同煎煮时间对毒性成分的影响

[0114] 铁棒锤药材含有乌头碱毒性成分，乌头碱经长时间的煎煮会遭到破坏，本次试验考察了不同的煎煮时间对乌头碱含量的影响，取铁棒锤50g，置1000ml圆底烧瓶中，加500ml水煎煮，连续煎煮6h，从2h起开始取样25ml，然后在补加25ml水，以后每1h取样一次。测定乌头碱含量，见过见表8。

[0115] 表8不同煎煮时间对乌头碱含量的影响

[0116]

[0117] 结论：以上数据显示，乌头碱的含量随着煎煮时间的增加，其含量逐渐减小，说明煎煮时间越长乌头碱的破坏程度越大，其毒性也越小。鉴于上述情况，在煎煮的时候将铁棒锤药材先加水煎煮2~3h，再与其余药材合并后继续煎煮。

[0118] 实验例4、热板法镇痛试验

[0119] 1、试验药物及材料

[0120] SPF级昆明种小鼠，雌性，体重18-22g，山东大学实验动物中心提供，合格证号：scxk(鲁)20090001。恒温水浴锅、不锈钢桶、秒表。阳性药：正天丸，华润三九医药股份有限公司，批号：1109007H。受试药：红龙镇痛片组，给予红龙镇痛片（青海金诃藏药药业股份有限公司，批号：20110521），试验组，给予实施例1所得红龙镇痛药物组合物。 [0121] 2、试验方法

[0122] 取体重20±2g雌性小鼠，以小鼠舔足为痛阈指标，采用55±0.5℃热板对小鼠痛阈值进行筛选，痛阈值小于5s或大于30s者弃之不用。将痛阈值在5-30s内小鼠随机分为4组，每组10只，共40只，分别为空白对照组、阳性药组（正天丸组）、红龙镇痛片组、试验组。
灌胃给药0.3g生药/kg体重，相当于临床人用量10倍，连续给药5天，每次给药30min后测定小鼠的痛阈值。

[0123] 数据结果以 表示，采用SPSS17.0软件对数据进行单因素方差分析及LSD多组两两比较分析。

[0124] 3、试验结果见表9、表10。

[0125] 表9受试药品对小鼠热板致痛的影响（ n=10）

[0126]

[0127] 表10受试药品对小鼠热板致痛的影响（ n=10）

[0128]

[0129] 注：*与空白组相比，P<0.05；#与阳性药组相比，P<0.05

[0130] 表9、表10结果显示：与空白对照组相比，红龙镇痛片组、试验组小鼠热板反应潜伏期显著延长。与阳性药组相比，给药第1天，试验组小鼠热板反应潜伏期显著延长（P<0.05）。

[0131] 结论：提示红龙镇痛片、实施例1所得红龙镇痛药物组合物对小鼠热刺激痛觉反应有明显的抑制作用，并且实施例1所得红龙镇痛药物组合物对中枢镇痛作用较红龙镇痛片效果好。

[0132] 实验例5、醋酸扭体法镇痛试验

[0133] 1、试验药物及材料

[0134] SPF级昆明种小鼠，雌雄兼用，体重18-22g，山东大学实验动物中心提供，合格证号：scxk(鲁)20090001。0.6%醋酸(天津市科密欧化学试剂有限公司，生产批号：20110715)、注射器、秒表。阳性药：正天丸，华润三九医药股份有限公司，批号：1109007H。
受试药：红龙镇痛片组，给予红龙镇痛片（青海金诃藏药药业股份有限公司，批号：
20110521），试验组，给予实施例1所得红龙镇痛药物组合物。

[0135] 2、试验方法

[0136] 取体重20±2g小鼠，随机分为4组，每组10只，分别为空白对照组、阳性药组（正天丸组）、红龙镇痛片组、试验组。灌胃给药0.3g生药／kg体重，相当于临床人用量10倍，连续灌胃给药5天，末次灌胃给药30min后腹腔注射0.6%醋酸溶液，每只0.2ml，即可测定小鼠扭体反应的潜伏期和15min内扭体次数。

[0137] 数据结果以 表示，采用SPSS17.0软件对数据进行单因素方差分析及LSD多组两两比较分析。

[0138] 3、试验结果见表11。

[0139] 表11对醋酸致小鼠扭体反应的影响（ n=10）

[0140]

[0141] 注：*与空白组相比，P<0.05；**与空白组相比，P<0.01

[0142] 扭体镇痛率=（空白对照组平均扭体次数-给药组平均扭体次数）/空白对照组平均扭 体次数×100%

[0143] 表11结果显示：与空白对照组相比，阳性药及红龙镇痛片组、试验组醋酸致小鼠15分钟内扭体次数显著降低，均有统计学差异（p<0.01）；而与空白对照组相比，各组小鼠扭体反应潜伏期有延长趋势，但无统计学差异（P>0.05）。

[0144] 结论：红龙镇痛片、实施例1所得红龙镇痛药物组合物对醋酸致小鼠扭体反应具有明显的抑制作用，且实施例1新制剂的外周镇痛作用较红龙镇痛片好。

[0145] 实验例6、抗炎试验

[0146] 1、试验药物及材料

[0147] SPF级昆明种雄性小鼠，体重18-22g，山东大学实验动物中心提供，合格证号：scxk(鲁)20090001。二甲苯（天津市广成化学试剂有限公司批号：20110502）、0.25mL注射器，直径9㎜打孔器。阳性药：正天丸，华润三九医药股份有限公司，批号：1109007H。受试药：红龙镇痛片组，给予红龙镇痛片（青海金诃藏药药业股份有限公司，批号：20110521），试验组，给予实施例1所得红龙镇痛药物组合物。