一种用于治疗缺血性中风的中药组合物及其制备方法和用途

摘要

本发明涉及一种用于治疗缺血性中风的中药组合物，其特征是以土鳖虫、三七、黄芪、川芎、熟大黄、桃仁依一定比例配比，经提取，浓缩，干燥，加制剂辅料按常规方法制成相应的制剂。本发明组合物治疗缺血性中风具有良好效果，高效，无毒，使用方便。

权利要求

1.一种用于治疗中风的中药组合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料药制成的：三七200～300份 土鳖虫200～300份 黄芪250～350份 川芎200～300份熟大黄50～150份 桃仁50～150份；

该组合物的制备工艺含有如下步骤：

a、取川芎，加入乙醇回流提取2～4次，每次0.5～2小时，滤过，滤液浓缩成浸膏，以倍他环糊精包结，备用；

b、取土鳖虫，粉碎，加水煮沸，待冷至35～45℃，调节pH1.0～3.0，加入0.5～2％胃蛋白酶，保温1～3小时，调节pH7.0～9.0，加入0.5～2％胰蛋白酶，保温3～6小时，煮沸，滤过，滤液浓缩成浸膏，备用；

c、取三七，粉碎成粗粉，加60～80％乙醇提取1～2次，每次0.5～2小时，滤过，药渣再加入黄芪、熟大黄、桃仁，加60～80％乙醇提取2～4次，每次0.5～2小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩成浸膏，与b中浸膏合并，干燥；

d、干浸膏粉碎，加入倍他环糊精包结物及适量辅料，制成相应的制剂。

2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料药制成的：三七250份土鳖虫250份黄芪300份川芎250份熟大黄100份桃仁100份；该组合物的制备工艺含有如下步骤：a、取川芎，加入乙醇回流提取3次，每次1小时，滤过，滤液浓缩成浸膏，以倍他环糊精包结，备用；

b、取土鳖虫，粉碎，加水煮沸，待冷至40℃，调节pH1.5～2.0，加入1％胃蛋白酶，保温

2小时，调节pH7.5～8.0，加入1％胰蛋白酶，保温4小时，加热煮沸，滤过，滤液浓缩成浸膏，备用；

c、取三七，粉碎成粗粉，加70％乙醇提取1小时，滤过，药渣加入黄芪、熟大黄、桃仁，加

70％乙醇提取2次，每次1小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩成浸膏，与b中浸膏合并，减压干燥；

d、干浸膏粉碎，加入倍他环糊精包结物及适量辅料，制成相应的制剂。

3.根据权利要求1或2所述的中药组合物，其特征在于制备成胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂。

4.权利要求1或2中任一所述的中药组合物在制备用于抗凝、溶栓药物中的应用。

5.权利要求1或2中任一所述的中药组合物在制备用于治疗缺血性中风药物中的应用。

说明书

一种用于治疗缺血性中风的中药组合物及其制备方法和用

途

技术领域

[0001] 本发明涉及一种治疗缺血性中风的中药组合物及其制备方法和用途。属于中药领域。

背景技术

[0002] 缺血性脑中风是脑血管疾病的主要类型，约85％的脑中风是缺血性的，引起缺血性脑中风的原因主要是脑血管阻塞及脑部血液循环障碍，患者面临的最大的问题是再发作和其他缺血性事件的发生，是一种危害人民健康，威胁生命的常见病和多发病。西医治疗药物溶栓药如链激酶、尿激酶等，时间窗短，易导致出血并发症，特别是并发颅内出血；钙离子拮抗剂如尼莫地平、西比林和脑益嗪等应用范围较窄，且有不良反应如心律失常、尿潴留等发生。中药降纤、溶栓类药物如蛇毒、水蛭素、地龙蚓激酶等提取率极低，且有极大副反应；扩张血管类药物如银杏叶提取物、三七总皂苷等虽然有一定的效果，但疗效难以让人满意。

[0003] 本品处方土鳖虫、三七、黄芪、川芎、熟大黄、桃仁等中药组成，为治疗缺血性中风的一有效方剂，为使本方更好的应用于临床，拟将其开发成质量稳定、使用方便的新药。本处方为中药小复方，药味较少，各药味的有效部位明确，本课题组采用独有技术仿生酶解技术，将土鳖虫中蛋白质酶解成小分子的肽类成分，能直接被机体吸收利用，最大限度的发挥疗效，提高生物利用度，而且减小了不良反应发生率，安全可靠；其余药材根据起效成分的性质，采用与之适合的工艺制备，在保留有效成分的前提下，最大程度的发挥各药味的作用，增强疗效，同时达到了去粗取精，降低得膏率，满足中药新药的质量的要求。从中医中药中寻求治疗缺血性中风的安全有效的药物和制剂是一种趋势，也符合临床诊治的需要。

发明内容

[0004] 本发明的第一目的在于提供一种更有效的，副作用小的，价格低廉的，无污染的，具有协同作用的治疗缺血性中风的中药组合物；

[0005] 本发明的第二目的是提供该药物高效制剂的制备方法及其治疗缺血性中风的应用。

[0006] 本发明目的第一目的是这样实现的：

[0007] 发明人提供一种中药组合物，该药物组合物原料药的用量是经过发明人大量试验总结得出的，各原料药用量在下述范围都有较好的疗效：

[0008] 三七200～300份 土鳖虫200～300份 黄芪250～350份 川芎200～300份[0009] 熟大黄50～150份 桃仁50～150份。

[0010] 经过优选，其最佳配方是由下述重量份的中药原料药制成的药剂：

[0011] 土鳖虫250份 三七250份黄芪300份 川芎250份 熟大黄100份 桃仁100份。

[0012] 本发明药物可将这些原料药研成粉末混合均匀冲服或泡服，但为了使该药物各原料药更好的发挥药效，优选对这些原料药进行酶解或醇提，然后浓缩，干燥，采用中药制剂常规方法制备成片剂、胶囊剂或滴丸剂，但是这不能限制本发明的保护范围。

[0013] 本发明的第二目的是提供上述治疗缺血性中风的中药组合物的制备方法。本领域技术人员可以方便地将本发明配合适当的辅料，制备成各种常规制剂。本发明根据各药材的有效成分的性质，为便于患者服用，减少服用剂量，通过对原料药材采用现代的提取方法提取有效成分，能更好的发挥药效，提高原料药材的生物利用率，更容易被人体吸收。本发明的制备工艺按下述步骤进行：

[0014] a、取川芎，加入乙醇回流提取2～4次，每次0.5～2小时，滤过，滤液浓缩成浸膏，以倍他环糊精包结，备用；

[0015] b、取土鳖虫，粉碎，加水煮沸，待冷至约35～45℃，调节pH1.0～3.0，加入0.5～2％胃蛋白酶，保温1～3小时，调节pH7.0～9.0，加入0.5～2％胰蛋白酶，保温3～6小时，煮沸，滤过，滤液浓缩成浸膏，备用；

[0016] c、取三七，粉碎成粗粉，加60～80％乙醇提取1～2次，每次0.5～2小时，滤过，药渣再加入黄芪、熟大黄、桃仁，加60～80％乙醇提取2～4次，每次0.5～2小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩成浸膏，与b中浸膏合并，干燥；

[0017] d、干浸膏粉碎，加入倍他环糊精包结物及适量辅料，制成相应的制剂。

[0018] 进一步优选制备工艺为：

[0019] a、取川芎，加入乙醇回流提取3次，每次1小时，滤过，滤液浓缩成浸膏，以倍他环糊精包结，备用；

[0020] b、取土鳖虫，粉碎，加水煮沸，待冷至约40℃，调节pH1.5～2.0，加入1％胃蛋白酶，保温2小时，调节pH7.5～8.0，加入1％胰蛋白酶，保温4小时，加热煮沸，滤过，滤液浓缩成浸膏，备用；

[0021] c、取三七，粉碎成粗粉，加70％乙醇提取1小时，滤过，药渣加入黄芪、熟大黄、桃仁，加70％乙醇提取2次，每次1小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩成浸膏，与b中浸膏合并，减压干燥；

[0022] d、干浸膏粉碎，加入倍他环糊精包结物及适量辅料，制成相应的制剂。

[0023] 以上各组成中，重量是以生药计算的，在本发明中，若重量以克为单位，该组成可制成药物制剂1000剂，所述1000剂指，制成的成品药物制剂1000剂，如制成胶囊制剂1000粒、片剂1000片。

[0024] 以上组成是按照重量份作为配比的，在生产时可按照相应的比例增大或减少，如大规模生产可以以公斤或以吨为单位，小规模生产也可以以克为单位，重量可以增大或减少，但各组成之间的生药材重量配比比例不变。

[0025] 以上各组成中的单味中药，可以单独或同时被适当的具有相同药性、功效的中药替换，替换后的中药制剂其药物作用不变。

[0026] 本发明是在中医经验方的基础上，经过大量的试验所得到的制剂。本发明的优点是组方合理，药物毒副作用低，克服了以往西药的毒副作用大的缺点及中药治疗缺血性中风疗效低或常用虫类药、动物药、毒性较强的植物药的缺点。

[0027] 本发明中药组合物可以在制备用于治疗缺血性中风的药物中应用。

[0028] 有益效果

[0029] 为进一步验证本发明中药组合物对缺血性中风的治疗作用，发明人进行了动物药效学实验：

[0030] 一、对小鼠全脑缺血的影响

[0031] 1.动物种属、来源

[0032] ICR小鼠，SPF级，雌雄各半，体重18-22g，购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司，许可证号：SCXK(沪)2008-0016；

[0033] 2.主要仪器及器械

[0034] BS210S精密电子天平(0.1mg～10g)，德国赛多利斯(sartorius)；

[0035] FEJ-200电子天平(0.1～200g)，福州富日衡之宝电子有限公司；

[0036] CELLtac α型血球分析仪，日本NIHON KOHDEN公司；

[0037] Safire2多功能酶标仪，瑞士TECAN公司；

[0038] ALC-V8动物呼吸器，上海奥尔科特医疗仪器公司；

[0039] T25组织分散器，德国IKA公司；

[0040] SYC智能超级恒温水浴，巩义市英峪予华仪器厂；

[0041] DHG-9053A型电热恒温干燥箱，上海医用恒温设备厂。

[0042] 3.剂量设置与分组

[0043] ICR小鼠60只，雌雄各半，体重18-22g，随机分为6组，每组10只，分别为：(1)对照组(0.5％CMC-Na)，(2)阳性药血塞通胶囊0.05g/kg，(3)阳性药活血通脉胶囊0.5g/kg，(4)本品高剂量1.2g/kg，(5)本品中剂量0.6g/kg，(6)本品低剂量0.3g/kg。

[0044] 4.试验方法

[0045] 小鼠按上述方案分组连续预防给药7天，最后1次给药30min后，清醒状态下耳后断头，5min取脑，用冰冷的生理盐水制备10％的脑匀浆。按试剂盒说明书测定脑组织中丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)水平。

[0046] 5.结果

[0047] 本品3个剂量组均可显著降低小鼠全脑缺血后脑组织中LDH水平(P＜0.05，P＜0.01)，同时高、中剂量组也能明显降低脑组织中MDA水平(P＜0.05，P＜0.01)。(表.1)[0048] 表.1对小鼠全脑缺血后脑组织中LDH和MDA水平的影响(N＝10， )[0049]

[0050] #P＜0.05，##P＜0.01，与对照组比较。

[0051] 二、对大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型的影响

[0052] 1.动物种属、来源

[0053] SD大鼠，SPF级，雌雄各半，体重180-220g，购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司，许可证号：SCXK(沪)2008-0016；

[0054] 2.剂量设置与分组

[0055] SD大鼠106只，雌雄各半，体重180-220g，随机分为7组，分别为：(1)空白对照组(0.5％CMC-Na)，(2)模型组(0.5％CMC-Na)，(3)阳性药血塞通胶囊0.04g/kg，(4)阳性药活血通脉胶囊0.4g/kg，(5)本品高剂量0.8g/kg，(6)本品中剂量0.4g/kg，(7)本品低剂量0.2g/kg。对照组10只大鼠，其余各组每组16只大鼠。

[0056] 3.大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型的制备

[0057] 各组大鼠连续灌胃给药7天，末次给药后用10％水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠(3.5mL/kg.bw)，仰卧固定，颈正中切口，分离、结扎右侧颈总动脉近心端、颈外动脉及其分支动脉。分离右侧颈内动脉，沿颈内动脉向下分离翼颚动脉，根部结扎该分枝。在颈外动脉近端备线，颈内动脉远端及颈总动脉放置动脉夹，颈总动脉分叉处靠颈外动脉侧切口，插入尼龙鱼线，其深度为18-20mm，线栓进入颈内动脉，入颅至大脑前动脉，阻断大脑中动脉所有血流来源。撤掉动脉夹，扎紧备线，用止血钳闭合皮肤。假手术组除不插线外，其余步骤同上。缺血2h后，迅速拔出鱼线再灌注，扎紧血管，缝合皮肤，动物放回笼饲养。

[0058] 4.结果评价

[0059] 以大鼠行为评分、脑水肿及脑缺血范围为指标，观察受试药对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用。

[0060] (1)神经行为评分

[0061] 于脑缺血再灌注后24h进行行为评分。参考文献，评分标准为：0分：正常，无明显神经损伤症状；1分：不能完全伸展对侧前爪；2分：向外侧转圈；3分：行走时向对侧倾倒；4分：不能自发行走，有意识障碍。

[0062] (2)脑组织含水量测定

[0063] 脑缺血再灌注后24h，神经行为评分完毕，将大鼠快速断头取脑(去掉嗅球、小脑和低位脑干)，用滤纸吸干表面残血，称其湿重。待染色观察完毕，将脑组织置120℃烤箱内48小时，恒重后称干重，按以下公式计算脑组织含水量：脑组织含水量(％)＝(湿重-干重)/湿重×100％。

[0064] (3)脑缺血范围的测定

[0065] 脑缺血再灌注后24h，将大鼠快速断头取脑(去掉嗅球、小脑和低位脑干)，-20℃速冻10min后切成厚约2mm冠状脑片(5～6片)，立刻置于1％TTC溶液中，37℃孵育40分钟。缺血区呈现白色，非缺血区呈现红色。根据染色分离缺血区和非缺血区，分别称重，并计算缺血区重量占整个脑组织的百分比(％)，计算缺血抑制率(％)[(模型组缺血范围-治疗组缺血范围)/模型组缺血范围*100]。

[0066] 5.结果

[0067] (1)对神经行为的影响

[0068] 与假手术组相比，模型组动物出现明显的向外侧转圈、行走时向对侧倾倒等神经功能损伤症状，行为评分显著高于假手术组(P＜0.01)。与模型组相比，本品高、中剂量组可明显减轻大鼠的行为评分(P＜0.05)。本品低剂量组虽有部分改善，但作用不显著。由此提示本品能明显改善大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经功能症状，结果见表2。

[0069] 表2.对大鼠脑缺血再灌注损伤行为评分的影响

[0070]

[0071]

[0072] **P＜0.01，与假手术组比较；#P＜0.05，与模型对照组比较。

[0073] (2)对脑组织含水量的影响

[0074] 与假手术组相比，模型组动物脑组织含水量显著升高(P＜0.01)，出现明显水肿。与模型组相比，本品高剂量组可明显减轻大鼠的脑组织含水量(P＜0.05)。本品中、低剂量组虽有部分改善，但作用不显著，结果见表3。

[0075] 表3.对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织含水量的影响

[0076]

[0077] **P＜0.01，与假手术组比较；#P＜0.05，与模型对照组比较。

[0078] (3)对脑缺血范围的影响

[0079] 染色结果显示，假手术组未见明显梗死区域，模型组动物脑缺血范围百分比为20.8％，与模型组相比，本品高、中、低剂量组对脑缺血范围的抑制率(％)分别为44.7、
42.8和39.4％，改善作用明显(P＜0.05)。提示本品在本试验中对大鼠脑缺血再灌注损伤所致脑细胞坏死有明显的减轻，对神经细胞有一定保护作用。结果见表4。

[0080] 表4.对大鼠脑缺血再灌注损伤脑缺血范围的影响

[0081]

[0082]

[0083] **P＜0.01，与假手术组比较；#P＜0.05，与模型对照组比较。

具体实施方式

[0084] 下面列举实施例，进一步说明本发明，各实施例仅用于说明本发明，并不限制本发明：

[0085] 实施例1

[0086] 土鳖虫250g 三七250g 黄芪300g 川芎250g

[0087] 熟大黄100g 桃仁100g

[0088] 以上六味，取川芎，加入95％乙醇温浸提取2小时，滤过，药渣备用，滤液减压回收乙醇，加入倍他环糊精包合；取三七，粉碎成最粗粉，加入60％乙醇，浸泡过夜，回流提取1小时，滤过，三七药渣加入川芎提取后的药渣及黄芪、熟大黄、桃仁药材，加60％乙醇提取二次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，加乙醇使含醇量达80％，静置12小时，滤过，滤液减压回收乙醇，备用；取土鳖虫，粉碎过80目筛，加水加热煮沸15分钟，待冷至约40℃，以稀盐酸调节pH1.5～2.0，加入胃蛋白酶(以每1g含胃蛋白酶活力3000单位计)2.5g，保温酶解1小时，以20％氢氧化钠溶液调节pH7.5～8.0，加入胰蛋白酶(以每
1mg含胰蛋白酶活力2500单位计)2.5g，保温酶解3小时，加热煮沸15分钟，离心，上清液减压浓缩，静置冷藏(2～10℃)12小时，离心，上清液与上述备用浸膏合并，减压干燥，干浸膏粉碎，加入倍他环糊精包合物、二氧化硅，并加淀粉至总量，混匀，填装胶囊，制成1000粒，即得。

[0089] 实施例2

[0090] 三七300g 土鳖虫300g 黄芪350g 川芎300g

[0091] 熟大黄150g 桃仁150g

[0092] 以上六味，取川芎，加入乙醇回流提取2次，每次0.5小时，滤过，滤液浓缩成浸膏，以倍他环糊精包结，备用；取土鳖虫，粉碎，加水煮沸，待冷至约45℃，调节pH1.0～3.0，加入2％胃蛋白酶，保温3小时，调节pH9.0，加入2％胰蛋白酶，保温6小时，煮沸，滤过，滤液