地西他滨组合物及其制备方法和其在药用冻干制剂中的应用、成品及制备方法

摘要

本发明属于医药领域，特别是涉及地西他滨的制备领域，更为具体的说是涉及地西他滨组合物及其制备方法和其在药用冻干制剂中的应用、成品及制备方法。本发明的目的在于提供一种同时满足加快地西他滨在制剂过程中的溶解速，提高地西他滨制剂成品稳定性，制剂成品中无有机溶剂残留等多种要求的地西他滨组合物及其制备方法。本发明采用微粉化的地西他滨为原料，以磷酸二氢钾及氢氧化钠为辅料，采用超声溶解原料的方法先将主药溶解成为乳状，避免了有机溶剂的使用，从而防止有机溶剂在药物制剂成品中的残留，大大提高了制剂在临床使用中的安全性；同时也避免了在冻干制剂生产中，有机溶剂对冻干设备的损伤。

权利要求

1.地西他滨组合物，其特征是所述地西他滨组合物是以微粉化的地西他滨为主药，以磷酸二氢钾和氢氧化钠组成的辅料溶液为溶解液形成的乳状组合物；所述微粉化的地西他滨粒径为10~50μm；所述辅料溶液中磷酸二氢钾的浓度为0.06mol/L~0.08mol/L，氢氧化钠的浓度为0.03 mol/L ~0.05 mol/L；

所述地西他滨组合物是由以下步骤制备得到的：

（a）将原料药地西他滨微粉化处理；

（b）将处方量的磷酸二氢钾和氢氧化钠溶解于水溶液，得到辅料溶液；

（c）将步骤 b中得到的辅料溶液降温至２～８℃，量取待混合原料药重量 20~50倍的辅料溶液，加入步骤 a中得到的原料药，２～８℃低温水浴超声，至均一乳状，即得。

2.一种制备如权利要求 1所述的地西他滨组合物的方法，其特征是由以下步骤组成：（a）将原料药地西他滨微粉化处理；

（b）将处方量的磷酸二氢钾和氢氧化钠溶解于水溶液，得到辅料溶液；

（c）将步骤 b中得到的辅料溶液降温至２～８℃，量取待混合原料药重量 20~50倍的辅料溶液，加入步骤 a中得到的原料药，２～８℃低温水浴超声，至均一乳状，即得。

3.权利要求 1所述的地西他滨组合物在制备药用冻干制剂中的应用。

4.一种以权利要求 1所述的地西他滨组合物为中间体的冻干制剂。

5.一种以权利要求 1所述的地西他滨组合物为中间体的冻干制剂的制备方法，其特征是由以下步骤组成：（1）将原料药地西他滨微粉化处理；

（2）将处方量的磷酸二氢钾和氢氧化钠加入至全量 60%~90%体积的注射用水中，搅拌溶解，得辅料溶液；

（3）将步骤（2）中得到的辅料溶液降温至 2~8℃，量取待混合原料药重量 20~50倍的辅料溶液，加入步骤（1）得到的微粉化处理的原料药地西他滨，在 2~8℃的温度条件下低温水浴超声，至溶液呈均一乳状；

（4）将步骤（3）中得到的乳状地西他滨组合物逐渐加入至剩余的辅料溶液中，搅拌，至完全溶解，补注射用水至全量，搅拌均匀，得冻干前制剂溶液；

（5）检测中间体合格后，灌装，冻干，得最终冻干制剂。

说明书

地西他滨组合物及其制备方法和其在药用冻干制剂中的应

用、成品及制备方法

[0001] 技术领域

[0002] 本发明属于医药领域，特别是涉及地西他滨的制备领域，更为具体的说是涉及地西他滨组合物及其制备方法和其在药用冻干制剂中的应用、成品及制备方法。

[0003] 背景技术

[0004] 地西他滨(Decitabine)，化学名为4-氨基-1-(2-脱氧-β-D-赤型-呋喃核糖)-1,3，5-三嗪-2(1H)-酮，CAS号2353-33-5，是一种核苷类似物。地西他滨属于DNA甲基转移酶抑制剂，其作用机理为地西他滨磷酸化后直接与DNA结合抑制DNA甲基转移酶，引起DNA低甲基化和细胞分化凋亡。体外地西他滨抑制DNA甲基化浓度下不引起DNA合成抑制，地西他滨在肿瘤细胞诱导的低甲基化，在严格控制细胞分化和增殖后可能会恢复正常功能。

[0005] 地西他滨首次合成于1964年，由SuperGen公司研发并由MGI PHARMA公司上市，商品名Dacogen，为注射剂，规格50mg。2006年4月和5月由欧洲EMEA和美国FDA批准上市，2008年获得国家食品药品监管局(SFDA)批准，免临床试验直接上市，主要用于治疗原发性和继发性骨髓增生异常综合症(MDS)的罕见病。

[0006] 地西他滨略溶于水，在水中的溶解度较低。地西他滨在水溶液中稳定性很差，极易发生降解，转化为无活性的同分异构体形式。地西他滨水溶液在室温条件下放置时，有关物质激增，因此地西他滨的制备过程中必须低温配制和保存，并且要尽量缩短灌装前的放置时间。所以地西他滨制剂制备的关键过程在于加快地西他滨原料在水溶液中的溶解速度，并尽量减少水溶液状态的放置时间。

[0007] 为了解决地西他滨溶解溶解速度慢，以及为了提高溶液稳定性，现有公知技术提出了多种解决该问题的技术方案，多采用先将地西他滨利用有机溶剂溶解，再和水混溶形成制剂水溶液的制备工艺，利用此制备工艺制备地西他滨冻干制剂会带来多方面的问题及安全隐患。首先有机溶剂的引入会造成成品制剂中含有较多的有机溶剂残留，而有机溶剂对人体毒性很大，会造成一系列的身体毒性；其次，冻干前制剂溶液中含有有机溶剂，会对冻干设备造成较大损害，而且在冻干过程中会导致主药随有机溶剂带出，影响药物制剂的成型性。

[0008] 美国专利2006128653提到利用环糊精将地西他滨包裹后从而减少与水环境的接触，此制备工艺不但繁琐，而且环糊精具有溶血及肾毒性的副作用，临床安全风险较高；中国专利CN101966157提供了一种地西他滨缓释微球的制备工艺，该工艺中采用多种载体材料，并使用了多种有机溶剂，根据原料的不稳定性，临床使用上具有较多不安全因素。

[0009] 中国专利CN101361718、CN102106831、CN10231922等专利提供了多种地西他滨冻干制剂制备的工艺，但是均使用了有机溶剂，用量从0.3~4.0%至5~80%不等，有机溶剂的使用给人体带来极大的副作用及身体毒害，不适宜于临床安全使用。中国专利CN101623267提供一种地西他滨与其他辅料直接分装的无菌粉末，但是由于地西他滨在水中溶解困难，临床使用时不能及时溶解，造成使用困难。

[0010] 中国专利CN101843592提供了一种地西他滨冻干粉针的制备方法，该制备工艺中未使用有机溶剂，但在制备过程中使用了活性炭进行脱碳处理，但是我们多次试验发现活性炭对于主药地西他滨具有较大的吸附作用，降低了主药含量，影响质量；此外其采用的常规溶解主药的方法，在生产许可条件下根本不能完全溶解原料。专利CN101637458虽然未采用有机溶剂，但为了提高地西他滨的溶解性，同时为了达到制剂溶液浓度，该发明引入额外的葡萄糖或乳糖等辅料，增大了制剂的安全性风险。

[0011] 发明内容

[0012] 本发明的目的在于提供一种新的地西他滨组合物、及其制备方法和在冻干制剂中的应用、成品及制备方法，从而同时满足加快地西他滨在制剂过程中的溶解速，提高地西他滨制剂成品稳定性，制剂成品中无有机溶剂残留等多种要求。

[0013] 为了实现上述发明目的，本发明公开了以下技术方案：

[0014] 地西他滨组合物，以微粉化地地西他滨为主药，以磷酸二氢钾和氢氧化钠组成的辅料溶液为溶解液形成的乳状组合物。

[0015] 所述微粉化地地西他滨粒径为10~50μm。

[0016] 所述辅料溶液中磷酸二氢钠的浓度为0.06mol/L~0.08mol/L，氢氧化钠的浓度为0.03 mol/L ~0.05 mol/L。

[0017] 并且进一步地，本发明提供了一种地西他滨组合物的方法，包括以下步骤：

[0018] a)将原料药地西他滨微粉化处理；

[0019] b)将处方量的磷酸二氢钾和氢氧化钠溶解于水溶液，得到辅料溶液；

[0020] c)将步骤b中得到的辅料溶液降温，量取待混合原料药重量20~50倍的辅料溶液，加入步骤a中得到的原料药，低温水浴超声，至均一乳状，即得。

[0021] 所述步骤c中将步骤b中得到的辅料溶液降温至2~8℃。

[0022] 所述步骤c中在2~8℃的温度条件下，低温水浴超声。

[0023] 本发明提供的地西他滨制剂新型制备工艺采用微粉化的地西他滨为原料，以磷酸二氢钾及氢氧化钠为辅料，采用超声溶解原料的方法先将主药溶解成为乳状，与传统的直接以地西他滨为原料相比，极大地缩短了制剂配制时间，减少了地西他滨与水的接触时间，有效减少了地西他滨在制剂过程中特别是在水中发生的降解，提高了产品品质。

[0024] 同时，作为本发明所公开地西他滨组合物的应用，本发明进一步公开了地西他滨组合物在制备药用冻干制剂中的应用。

[0025] 同时本发明还公开了含有本发明所公开的地西他滨组合物的冻干制剂。

[0026] 进一步地，本发明还公开了上述含有地西他滨组合物的冻干制剂的制备方法，包括以下步骤：

[0027] i.将原料药地西他滨微粉化处理；

[0028] ii.将处方量的磷酸二氢钾和氢氧化钠加入至全量60%~90%体积的注射用水中，搅拌溶解，得辅料溶液；

[0029] iii.将步骤（2）中得到的辅料溶液降温至2~8℃，量取待混合原料药重量20~50倍的辅料溶液，加入步骤（1）得到的微粉化处理的原料药地西他滨，在2~8℃的温度条件下低温水浴超声，至溶液呈均一乳状；

[0030] iv.将步骤（3）中得到的乳状地西他滨组合物逐渐加入至剩余的辅料溶液中，搅拌，至完全溶解，补注射用水至全量，搅拌均匀，得冻干前制剂溶液；

[0031] v.检测中间体合格后，灌装，冻干，得最终冻干制剂。

[0032] 本发明所公开的技术方案，采用超声溶解原料的方法先将主药溶解成为乳状，然后再加入辅料溶液中全溶，获得制剂溶液。按照此工艺获得的制剂溶液，不但大大缩短了主药在不含有机溶剂的水中的溶解时间，而且有效防止了地西他滨的降解，冻干后获得不含有机溶剂的地西他滨冻干制剂的稳定性更好。

[0033] 综上所述，采用本发明所公开的技术方案后，避免了有机溶剂的使用，从而防止有机溶剂在药物制剂成品中的残留，大大提高了制剂在临床使用中的安全性；同时也避免了在冻干制剂生产中，有机溶剂对冻干设备的损伤，改造的制备工艺简单可行，减少了生产成本，适合产业化生产。

[0034] 具体实施方式

[0035] 下面通过具体的实施例来说明本发明，在以下的实施例中，未详细描述的各种过程与方法是本领域中公知的常规方法。应该正确理解的是：本发明的实施例是为了说明本发明而说出，而不是对本发明的限制，所以，在本发明的方法前提下对本发明的简单改造也属于本发明的保护范围。

[0036] 本发明中微粉化地地西他滨是采用目前医药领域中常用的微粉化技术获得，根据进一步制剂的要求不同，可以使用打粉机、气流粉碎机等成熟的微粉化技术获得。

[0037] 以下实施例中，所采用高效液相色谱的检测条件为：

[0038] 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱（250 mm×4.6 mm,5 μm)；

[0039] 流动相：0.03mol/L磷酸二氢钾（用4mol/L氢氧化钠溶液调节pH值为6.8）；

[0040] 检测波长：220nm；

[0041] 流速：2ml/min；

[0042] 柱温：15℃±2℃；

[0043] 进样量：5μl。

[0044] 实施例1

[0045] （一）本发明公开方法样品的制备

[0046] a)量取60ml 50℃的注射用水，加入磷酸二氢钾0.68g，氢氧化钠0.116g，搅拌溶解，得到辅料溶液；

[0047] b)将辅料溶液降温至2~8℃，量取10ml的辅料溶液，加入处方量的微粉化粒径为50μm地西他滨原料0.5g，2~8℃条件下低温水浴超声，超声约4分钟时溶液成均一的乳状溶液；

[0048] c)将主药乳状溶液加至辅料溶液中，搅拌至主药完全溶解，补注射用水至100ml全量，搅拌均匀，得冻干前制剂溶液；

[0049] d)检测中间体合格后，灌装，冻干，得最终冻干制剂成品。

[0050] 成品经高效液相色谱检测得其含量100.1%，总杂质为0.79%，最大单杂0.32%[0051] （二）对照制剂的制备（参考专利CN101637458公开技术）

[0052] 量取80ml室温的注射用水，加入磷酸二氢钾0.68g，氢氧化钠0.116g，搅拌溶解，得到辅料浓溶液；将辅料溶液降温至2~8℃，加入处方量的未经过微粉化处理地西他滨0.5g，在低温条件下机械搅拌（500rpm）3小时，主药仍未完全溶解，最终溶液浑浊，补注射用水至全量，过滤灌装，冻干，得最终冻干制剂成品。

[0053] 成品含量测定为67.8%，有关物质总杂质为3.28%，最大单杂2.31%。

[0054] 实施例2

[0055] （一）本发明公开方法样品的制备

[0056] a)量取80ml 60℃的注射用水，加入磷酸二氢钾0.68g，氢氧化钠0.116g，搅拌溶解，得到辅料溶液；

[0057] b)将辅料溶液降温至2~8℃，量取20ml的辅料溶液，加入处方量的微粉化粒径为50μm地西他滨原料0.5g，低温水浴超声，超声约3min时溶液成均一的乳状溶液；

[0058] c)将主药乳状溶液加至辅料溶液中，搅拌至主药完全溶解，补注射用水至100ml全量，搅拌均匀，得冻干前制剂溶液；

[0059] d)检测中间体合格后，灌装，冻干，得最终冻干制剂成品。

[0060] 成品经高效液相色谱检测得其含量100.2%，总杂质为0.59%，最大单杂0.26%。含量及有关物质检测方法同实施例1。

[0061] （二）对照制剂的制备（参考专利CN101637458公开技术）

[0062] 量取60ml室温的注射用水，加入磷酸二氢钾0.68g，氢氧化钠0.116g，搅拌溶解，得到辅料溶液；将辅料溶液降温至2~8℃，加入未经过微粉化处理地西他滨0.5g，在低温条件下机械搅拌（500rpm）3小时，主药仍未完全溶解，最终溶液浑浊，补注射用水至全量，过滤后加入活性炭搅拌，过滤除碳，灌装冻干，得最终冻干制剂成品。

[0063] 冻干前制剂溶液脱碳前含量测定为65.4%，脱碳后含量52.3%，冻干成品有关物质总杂质为4.04%，最大单杂2.65%，该工艺不能满足基本的生产工艺要求。

[0064] 成品经高效液相色谱法检测得其含量100.1%，总杂质为0.74%，最大单杂0.35%。

[0065] 实施例3

[0066] （一）本发明公开方法样品的制备

[0067] a)量取90ml 50℃的注射用水，加入磷酸二氢钾0.68g，氢氧化钠0.116g，搅拌溶解，得到辅料溶液；

[0068] b)将辅料溶液降温至2~8℃，量取25ml的辅料溶液，加入处方量的微粉化粒径为10μm地西他滨原料0.5g，2~8℃条件下低温水浴超声，超声约2分钟时溶液成均一的乳状溶液；

[0069] c)将主药乳状溶液加至辅料溶液中，搅拌至主药完全溶解，补注射用水至100ml全量，搅拌均匀，得冻干前制剂溶液；

[0070] d)检测中间体合格后，灌装，冻干，得最终冻干制剂成品。

[0071] 成品经高效液相色谱检测得其含量100.0%，总杂质为0.49%，最大单杂0.23%，无有机残留，含量及有关物质检测方法同实施例1。

[0072] （二）对照制剂的制备（参考专利CN102319222公开技术）

[0073] 量取60ml室温的注射用水，加入磷酸二氢钾0.68g，氢氧化钠0.116g，搅拌溶解，得到辅料浓溶液；将辅料溶液降温至2~8℃，称取未经过微粉化处理地西他滨0.5g，加入1ml的无水乙醇分散均匀，然后将主药乙醇溶液加至2~8℃的辅料溶液中，搅拌约4~5min主药完全溶解，过滤，灌装冻干，得最终冻干成品。

[0074] 中间体脱碳前含量测定为99.8%，冻干成品有关物质总杂质为0.87%，最大单杂0.46%，有机残留0.45%，有机溶剂残留量按照中国药典2010版附录中的方法进行检查。

[0075] 实施例4

[0076] （一）本发明公开方法样品的制备

[0077] 1、量取60ml 50℃的注射用水，加入磷酸二氢钾0.68g，氢氧化钠0.116g，搅拌溶解，得到辅料溶液；

[0078] 2、将辅料溶液降温至2~8℃，量取20ml的辅料溶液，加入处方量的微粉化粒径为40μm地西他滨原料0.5g，2~8℃条件下低温水浴超声，超声约5分钟时溶液成均一的乳状溶液；

[0079] 3、将主药乳状溶液加至辅料溶液中，搅拌至主药完全溶解，补注射用水至100ml全量，搅拌均匀，得冻干前制剂溶液；

[0080] 4、检测中间体合格后，灌装，冻干，得最终冻干制剂成品。

[0081] 成品经高效液相色谱检测得其含量为99.8%，总杂质为0.69%，最大单杂0.37%，含量及有关物质检测方法同实施例1。

[0082] 实施例5

[0083] 1、量取80ml 50℃的注射用水，加入磷酸二氢钾0.68g，氢氧化钠0.116g，搅拌溶解，得到辅料溶液；

[0084] 2、将辅料溶液降温至2~8℃，量取20ml的辅料溶液，加入处方量的微粉化粒径为30μm地西他滨原料0.5g，2~8℃条件下低温水浴超声，超声约4分钟时溶液成均一的乳状溶液；

[0085] 3、将主药乳状溶液加至辅料溶液中，搅拌至主药完全溶解，补注射用水至100ml全量，搅拌均匀，得冻干前制剂溶液；

[0086] 4、检测中间体合格后，灌装，冻干，得最终冻干制剂成品。

[0087] 成品经高效液相色谱检测得其含量为99.9%，总杂质为0.64%，最大单杂0.32%，含量及有关物质检测方法同实施例1。

[0088] 实施例6

[0089] 1、量取80ml 50℃的注射用水，加入磷酸二氢钾0.68g，氢氧化钠0.116g，搅拌溶解，得到辅料溶液；

[0090] 2、将辅料溶液降温至2~8℃，量取20ml的辅料溶液，加入处方量的微粉化粒径为20μm地西他滨原料0.5g，2~8℃条件下低温水浴超声，超声约3分钟时溶液成均一的乳状溶液；

[0091] 3、将主药乳状溶液加至辅料溶液中，搅拌至主药完全溶解，补注射用水至100ml全量，搅拌均匀，得冻干前制剂溶液；

[0092] 4、检测中间体合格后，灌装，冻干，得最终冻干制剂成品。

[0093] 成品经高效液相色谱检测得其含量为99.9%，总杂质为0.62%，最大单杂0.28%，含量及有关物质检测方法同实施例1。

[0094] 实施例7 不同粒径原料制备冻干制剂对比

[0095] 以下所涉及的降解产物II的结构式如下：

[0096]

[0097] 本发明参考实施例3中的地西他滨制备过程，使用微粉化后不同粒径和未微粉化的地西他滨原料进行冻干样品的制备，并对原料溶解过程及冻干成品进行含量和有关物质的检测。实验结果见表1：

[0098] 表1 不同粒径和未微粉化地西他宾原料制备样品对比

[0099]

[0100] 通过以上对不同粒径和未微粉化的地西他滨原料的溶解及冻干成品有关物质的测定，我们可以得知10~50μm粒径的原料不但溶解迅速，制备过程更加简单可行，成品的有关物质保持在较低水平，而未微粉化的地西他滨在溶解过程中相当困难，由于不能全部的打散，形成乳状溶液，所以成品含量低，有关物质因制备时间较长而增长明显。

[0101] 实施例8 稳定性考察

[0102] 将本发明中实施例3中所获得的样品在2~8℃及25℃下进行溶液稳定性考察，由于2~8℃的温度下，4℃具有代表性，所以在本实施例中以4℃作为实验温度，代表2~8℃的效果。实验结果见表2：

[0103] 表2 2~8℃及25℃溶液稳定性考察结果

[0104]

[0105] 结论：根据2~8℃及25℃溶液稳定性考察数据可以得知，通过本发明制备的样品在远低于控制限度之下（降解产物Ⅱ＜1.5%，总杂＜3%），性质稳定。

[0106] 进一步地，对通过本发明实施例3中公开方法得到的样品、对照样品及原研样品进行40℃加速考察，具体稳定性结果见表3：

[0107] 表3 40℃加速实验稳定性考察结果