三环吲唑化合物、制备方法和含有它的药物组合物

摘要

三环吲唑化合物和它的药学上可接受的酸加成盐、其用途、用于制备它们的方法和中间体以及含有它们的药物组合物。所述三环吲唑化合物具有下述通式(I)：其中R1、R2、L1、L2、X1、X2、X3、X4、X5、Y、W、m和n具有在说明书中阐述的含义

权利要求

1.通式(I)的三环吲唑化合物和它与药学上可接受的有机酸和无机酸的加成盐：其中

Y是CH或N；

W是CH或N；

条件是，Y和W中的至少一个是氮原子；

X1和X3可以独立地是σ键、含有1-5个碳原子的二价烷基链，其中所述烷基链的氢原子可以任选地被下述取代基取代：一个或多个卤素原子、一个或多个C1烷基；

X4可以是含有1-5个碳原子的二价烷基链，其中所述烷基链的氢原子可以任选地被下述取代基取代：一个或多个卤素原子、一个或多个C1烷基；

X2和X5可以独立地是σ键或含有1-4个碳原子的二价烷基链，其中所述烷基链的氢原子可以任选地被下述取代基取代：一个或多个卤素原子、一个或多个C1烷基，且X2和X5中的至少一个不同于σ键；

L1和L2可以独立地是σ键或π键；

R1可以独立地是H、OH、卤素、C1烷基、NRiRii；

R2可以独立地是H、OH、卤素、C1烷基、NRiRii；

m和n可以独立地是1-3；

Ri和Rii是H。

2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，X1可以是含有1-3个碳原子的二价烷基链，其中所述烷基链的氢原子可以任选地被下述取代基取代：一个或多个卤素原子或一个或多个C1烷基。

3.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，X3可以是σ键、含有1-3个碳原子的二价烷基链，其中所述烷基链的氢原子可以任选地被下述取代基取代：一个或多个卤素原子或一个或多个C1烷基。

4.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，X4可以是含有1-3个碳原子的二价烷基链，其中所述烷基链的氢原子可以任选地被下述取代基取代：一个或多个卤素原子或一个或多个C1烷基。

5.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，X2和X5可以是含有1-3个碳原子的二价烷基链，其中所述烷基链的氢原子可以任选地被下述取代基取代：一个或多个卤素原子或一个或多个C1烷基。

6.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，L1和L2可以都是σ键或都是π键。

7.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，R1可以独立地是H、OH、F、Cl、C1烷基和NRiRii基团。

8.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，R2可以独立地是H、OH、F、Cl、C1烷基和i iiNRR 。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的化合物，其特征在于，与选自下述的药学上可接受的有机酸或无机酸形成所述药学上可接受的有机酸或无机酸的加成盐：草酸、马来酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、琥珀酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、盐酸、磷酸和硫酸。

10.一种用于制备在前述权利要求1-9中的任一项中定义的式(I)三环吲唑化合物的方法，其特征在于，它包括：(1b)使式(IV)的酰胺其中

R1、L1、L2、X4和m具有在前述权利要求1-8中的任一项中定义的含义，与式(V)的化合物缩合

其中

R2、X1、X2、X3、X5、W、Y和n具有在前述权利要求1-8中的任一项中定义的含义，且Q是选自下述的离去基团：卤素原子、甲磺酸根基团和甲苯磺酸根基团，得到通式(I)的三环吲唑化合物。

11.一种用于制备在前述权利要求1-9中的任一项中定义的式(I)三环吲唑化合物的方法，其特征在于，它包括：(1a)使式(II)的胺其中

X1、X2、X4、X5、Y、L1、L2、R1和m具有在前述权利要求1-8中的任一项中定义的含义，与式(III)的化合物缩合其中

X3、R2和n具有在前述权利要求1-8中的任一项中定义的含义，且Q是选自下述的离去基团：卤素原子、甲磺酸根基团和甲苯磺酸根基团，得到通式(I)的三环吲唑衍生物。

12.式(II)的中间体：

其中

X1、X2、X4、X5、Y、L1、L2、R1和m具有在前述权利要求1-8中的任一项中定义的含义。

13.式(IV)的中间体：

其中

R1、X4和m具有在前述权利要求1-8中的任一项中定义的含义，L1和L2是σ键，

条件是，

当R1是H时，X4不同于CH2CH2。

14.一种药物组合物，其包含有效量的至少一种式(I)三环吲唑化合物或其与药学上可接受的有机酸或无机酸的盐以及至少一种药学上可接受的赋形剂其中Y、W、X1、X2、X3、X4、X5、L1、L2、R1、R2、m和n具有在前述权利要求1-8中的任一项中定义的含义。

15.通式(I)的三环吲唑化合物或其与药学上可接受的有机酸或无机酸的盐用于制备药物的用途，其中Y、W、X1、X2、X3、X4、X5、L1、L2、R1、R2、m和n具有在前述权利要求1-8中的任一项中定义的含义，所述药物用于治疗选自下述的病理状态：中枢神经系统障碍，胃肠道系统的平滑肌障碍，心血管系统的平滑肌障碍，和眼病理学。

16.根据权利要求15的用途，其中所述中枢神经系统障碍选自睡眠障碍、精神分裂症和焦虑。

17.根据权利要求15的用途，其中所述胃肠道系统的平滑肌障碍选自肠易激综合征、慢性便秘、腹泻和功能性消化不良。

18.根据权利要求15的用途，其中所述心血管系统的平滑肌障碍选自高血压、心肌缺血、脑缺血、偏头痛、血栓形成和血小板聚集。

19.根据权利要求15的用途，其中所述眼病理学选自青光眼。

说明书

三环吲唑化合物、制备方法和含有它的药物组合物

技术领域

[0001] 本发明涉及新的三环吲唑化合物、用于制备它们的方法和中间体、含有它的药物组合物及其应用。

[0002] 具体地，本发明涉及对5-HT2A受体具有选择性亲和力的新的三环吲唑化合物，其可用于治疗涉及5-HT2A受体的一些病理学，例如，中枢神经系统的一些障碍以及胃肠道系统或心血管系统的平滑肌的障碍。对所述受体的活性也可用于调节眼内压，并从而用于治疗青光眼。

背景技术

[0003] 2A血清素受体（5-HT2A）是一种与G蛋白偶联的受体，其存在于许多物种中，且广泛地分布于人体中。没有完全清楚由受体活化产生的信号的传递过程。已知，该受体的活化（经由与它偶联的G蛋白）会导致诸如磷脂酶C（引起磷脂酰肌醇二磷酸酯的水解和肌醇三磷酸酯的生产）或磷脂酶A2（其导致花生四烯酸的释放）等不同酶的活化。此外，所述受体2+
应答会导致钙离子（Ca ）流入细胞中和诸如蛋白激酶C等功能蛋白的活化。所述受体存在于中枢神经系统中、血管和胃肠道平滑肌细胞中和血小板中。

[0004] 国际专利公开WO2008061688描述了对5-HT2受体具有选择性活性的2-烷基-吲唑化合物，和关于不同的受体亚型，与5-HT2C受体相比具有对5-HT2A受体的优先亲和力的化合物。

[0005] 已知其它化合物具有对5-HT2A受体的优先亲和力，例如，用于治疗帕金森病精神病的处于III期临床试验中的哌马色林（pimavanserin）（ACP-103），和用于治疗失眠的处于III期临床试验中的依利色林（SR46349）和volinanserin（M100907）。

[0006] 5-HT2A受体涉 入中枢 神经系 统的一 些障碍，例如，睡 眠障碍（PopaD. 等 人 ,J Neurosci.2005;25(49):11231-11238）、 精 神 分 裂 症（Kapur S 等人 ,Am J Psychiatry.1996;153:466-476） 和 焦 虑（Van Oekelen D 等 人 ,Life Sci.2003;72(22):2429-2449）以及胃肠道系统（Briejer MR等人,Neurogastroenterol Motil.1997;9(4):231-237） 或 心 血 管 系 统（Nagatomo T 等 人 ,Pharmacol Ther.2004;104(1):59-81）的平滑肌障碍。

[0007] 此外，具有5-HT2A受体选择性亲和力的化合物可以有效地调节眼内压，并从而有效地治疗诸如青光眼等病理学（Jesse A.May等人,J Pharmacol Exp Ther.2003;306（1）:301-309）。

[0008] 国际专利公开WO2006050803公开了二环或三环吲唑化合物和它们的盐，它们用于在有用植物的培养物中选择性地抗击有害植物，或用于调节植物的生长。

发明内容

[0009] 现在，申请人已经令人惊讶地发现了对5-HT2A受体具有选择性亲和力的新的三环吲唑酰胺化合物。

[0010] 进一步，申请人已经发现，与5-HT2A受体相比，所述新的三环吲唑酰胺化合物对5-HT2c受体具有远远更低的选择性亲和力。

[0011] 该生物活性显著不同于已知的三环吲唑化合物的生物活性，例如不同于在上述国际专利公开WO 2006050803中描述的生物活性。

[0012] 此外，本发明的化合物的结构显著不同于具有对5-HT2A受体的优先亲和力的已知化合物。

[0013] 本发明的新的三环吲唑化合物可以用于治疗涉及5-HT2A受体的一些病理学，例如中枢神经系统的一些障碍（诸如睡眠障碍、精神分裂症和焦虑），以及胃肠道系统的平滑肌障碍（诸如肠易激综合征（IBS）、慢性便秘、腹泻和功能性消化不良）或心血管系统的平滑肌障碍（诸如高血压、心肌缺血、脑缺血、偏头痛、血栓形成和血小板聚集）。对所述受体的活性也可用于调节眼内压，并从而用于治疗青光眼。

[0014] 因此，本发明的第一个方面涉及通式(I)的三环吲唑化合物和它与药学上可接受的有机酸和无机酸的加成盐：

[0015]

[0016] 其中

[0017] Y是CH或N；

[0018] W是CH或N；

[0019] 条件是，Y和W中的至少一个是氮原子；

[0020] X1和X3可以 独立 地是σ键、含有1-5个 碳原 子的二 价烷 基链、羰基、-CO-(CH2)1-4-或-(CH2)1-4-CO-型二价烷酰基链，其中所述烷基和烷酰基链的氢原子可以任选地被下述取代基取代：一个或多个卤素原子、一个或多个C1-3烷基、一个或多个C1-3烷氧基；

[0021] X4可以是含有1-5个碳原子的二价烷基链、羰基、-CO-(CH2)1-4-或-(CH2)1-4-CO-型二价烷酰基链，其中所述烷基和烷酰基链的氢原子可以任选地被下述取代基取代：一个或多个卤素原子、一个或多个C1-3烷基、一个或多个C1-3烷氧基；

[0022] X2和X5可以独立地是σ键或含有1-4个碳原子的二价烷基链，其中所述烷基链的氢原子可以任选地被下述取代基取代：一个或多个卤素原子、一个或多个C1-3烷基、一个或多个C1-3烷氧基；

[0023] L1和L2可以独立地是σ键或π键；

[0024] R1可以独立地是H、OH、卤素、CN、C1-3烷基、C1-3烷氧基、NRiRii、NO2、CF3、CONRiiiRiv、v vi vii viii ix x xi xiiSO2R、OCF3、N(R )SO2R 、C(NR )N(R R)、N(R )C(O)R ；

[0025] R2可以独立地是H、OH、卤素、CN、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3羟基烷基、C1-3氨基烷i ii iii iv v vi vii viii ix x xi xii基、NRR 、NO2、CF3、CONR R 、SO2R、OCF3、N(R )SO2R 、C(NR )N(R R)、N(R )C(O)R ；

[0026] m和n可以独立地是1-3；

[0027] Ri、Rii、Riii、Riv、Rv、Rvi、Rvii、Rviii、Rix、Rx、Rxi、Rxii可以独立地是H或C1-3烷基。

[0028] 药学上可接受的酸的典型实例是：草酸、马来酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、琥珀酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、盐酸、磷酸和硫酸。

[0029] 根据本发明的一个优选的实施方案，在上面的通式(I)中，X1可以是羰基、含有1-3个碳原子的二价烷基链、-CO-(CH2)1-3-或-(CH2)1-3-CO-型二价烷酰基链，其中所述烷基和烷酰基链的氢原子可以任选地被下述取代基取代：一个或多个卤素原子或一个或多个C1-3烷基。

[0030] 根据本发明的一个甚至更优选的实施方案，在上面的通式(I)中，X1可以是-CO-、-CH2-或-(CH2)3-。

[0031] 根据本发明的一个优选的实施方案，在上面的通式(I)中，X3可以是σ键、含有1-3个碳原子的二价烷基链、-CO-(CH2)1-2-型二价烷酰基链，其中所述烷基和烷酰基链的氢原子可以任选地被下述取代基取代：一个或多个卤素原子或一个或多个C1-3烷基。

[0032] 根据本发明的一个甚至更优选的实施方案，在上面的通式(I)中，X3可以是σ键、-(CH2)2-、-CO-CH2-或-CH2CF2-。

[0033] 根据本发明的一个优选的实施方案，在上面的通式(I)中，X4可以是含有1-3个碳原子的二价烷基链、-CO-(CH2)1-2-或-(CH2)1-2-CO型二价烷酰基链，其中所述烷基和烷酰基链的氢原子可以任选地被下述取代基取代：一个或多个卤素原子或一个或多个C1-3烷基。

[0034] 根据本发明的一个甚至更优选的实施方案，在上面的通式(I)中，X4可以是-(CH2)2-、-(CH2)3-、-CH2-CO-或-CO-CH2-。

[0035] 根据本发明的一个优选的实施方案，在上面的通式(I)中，X2和X5可以是含有1-3个碳原子的二价烷基链，其中所述烷基和烷酰基链的氢原子可以任选地被下述取代基取代：一个或多个卤素原子或一个或多个C1-3烷基。

[0036] 根据本发明的一个甚至更优选的实施方案，在上面的通式(I)中，X2可以是-(CH2)2-或-(CH2)3-，且X5可以是-CH2-或-(CH2)2-。

[0037] 根据本发明的一个优选的实施方案，在上面的通式(I)中，L1和L2可以都是σ键或都是π键。

[0038] 根据本发明的一个优选的实施方案，在上面的通式(I)中，R1可以独立地是H、OH、i ii iii iv vF、Cl、CN、C1-3烷基、C1-3烷氧基、NRR 基团、NO2、CF3、CONR R 基团、SO2R 和OCF3。

[0039] 根据本发明的一个甚至更优选的实施方案，在上面的通式(I)中，R1可以独立地是H、OH、F、CN、CF3和CONH2。

[0040] 根据本发明的一个优选的实施方案，在上面的通式(I)中，R2可以独立地是H、OH、i ii iii ivF、Cl、CN、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3羟基烷基、C1-3氨基烷基、NRR 、NO2、CF3、CONR R 、v
SO2R、OCF3。

[0041] 根据本发明的一个甚至更优选的实施方案，在上面的通式(I)中，R2可以独立地是H、OH、F、CH2OH、CH2NH2、CONH2；

[0042] 根据本发明的一个优选的实施方案，在上面的通式(I)中，m是1，且n可以是1或2。

[0043] 本发明的第二个方面涉及一种用于制备下述物质的方法：(i)通式(I)的三环吲唑化合物，和任选地，(ii)所述化合物与药学上可接受的无机酸和有机酸的酸加成盐。

[0044] 因此，在其第一个实施方案中，本发明的方法的特征在于，它包括：(1b)使式(IV)的酰胺衍生物

[0045]

[0046] 其中

[0047] R1、L1、L2、X4和m具有前面关于式(I)化合物所述的含义，与式(V)的衍生物缩合[0048]

[0049] 其中

[0050] R2、X1、X2、X3、X5、W、Y和n具有前面关于式(I)化合物所述的含义，且

[0051] Q是选自下述的离去基团：卤素原子、甲磺酸根基团（mesylate group）(CH3SO3-)-和甲苯磺酸根基团（tosylate group）(p-MePhSO3)，

[0052] 得到通式(I)的三环吲唑化合物。

[0053] 优选地，Q是氯原子、溴原子或甲磺酸根基团。

[0054] 进一步，当W是氮原子时，本发明的方法的特征在于，它包括：(1a)使式(II)的胺[0055]

[0056] 其中

[0057] X1、X2、X4、X5、Y、L1、L2、R1和m具有前面关于式(I)化合物所述的含义，[0058] 与式(III)的衍生物缩合

[0059]

[0060] 其中

[0061] X3、R2和n具有前面关于式(I)化合物所述的含义，且

[0062] Q是选自下述的离去基团：卤素原子、甲磺酸根基团(CH3SO3-)和甲苯磺酸根基团-(p-MePhSO3)，

[0063] 得到通式(I)的三环吲唑衍生物。

[0064] 优选地，Q是溴原子或甲磺酸根基团。

[0065] 如果需要的话，使通式(I)的三环吲唑衍生物与药学上可接受的有机酸或无机酸反应，得到其酸加成盐。

[0066] 可以在有碱存在下通过常规技术进行所述缩合步骤(1b)。例如，在有碱存在下，使式(IV)的酰胺衍生物与式(V)化合物反应，其中Q优选地是氯原子、溴原子或甲磺酸根基团。碱的典型实例是氢化钠。

[0067] 优选地，在有稀释剂存在下，在-20℃至溶剂沸腾温度的温度，进行所述缩合步骤(1b)0.5-48小时的时间。优选地，所述温度是在0℃至溶剂沸腾温度的范围内。优选地，所述反应时间是1-24小时。

[0068] 通常，使用的稀释剂是极性的非质子溶剂。合适的极性的非质子溶剂的实例是N,N-二甲基甲酰胺或四氢呋喃。

[0069] 还可以优选地在有碱存在下通过常规技术进行所述缩合步骤(1a)。例如，可以优选地在有碱存在下，使式(II)的胺与式(III)化合物反应，其中Q优选地是溴原子或甲磺酸根基团。碱的典型实例是钾、钠或铯的碳酸盐或碳酸氢盐。

[0070] 优选地，在有稀释剂存在下，在室温(20℃)至160℃的温度，进行所述缩合步骤(1a)1-72小时的时间。优选地，所述反应温度是在室温(20℃)至100℃的范围内。优选地，所述反应时间是12-48小时。

[0071] 通常，使用的稀释剂是质子极性溶剂或非质子极性溶剂。质子极性溶剂的适当实例是醇，诸如乙醇。极性的非质子溶剂的适当实例是丙酮或N,N-二甲基甲酰胺。

[0072] 通过诸如快速色谱法和结晶等常规技术，可以纯化在所述缩合步骤(1b)或(1a)中得到的化合物。

[0073] 可以使通过所述缩合步骤(1b)或(1a)得到的通式(I)的三环吲唑衍生物与药学上可接受的有机酸或无机酸反应，以形成其酸加成盐。

[0074] 通过常规技术，可以形成通式(I)的三环吲唑化合物与药学上可接受的有机酸或无机酸的酸加成盐。

[0075] 例如，它可以如下进行：首先将式(I)化合物溶解在稀释剂中，然后用目标酸的有机溶液或水溶液处理如此得到的溶液。

[0076] 稀释剂的典型实例是：乙醇、异丙醇、乙酸乙酯和二乙醚。然后可以通过常规技术分离得到的盐，且如果适用的话，通过结晶进行纯化。

[0077] 式(II)和(IV)的一些中间体是新的，它们因此构成本发明的另一个方面。

[0078] 因此，在另一个方面，本发明涉及式(II)的中间体化合物：

[0079]

[0080] 其中

[0081] X1、X2、X4、X5、Y、L1、L2、R1和m具有前面关于式(I)化合物所述的含义；

[0082] 在另一个方面，本发明涉及式(IV)的中间体化合物：

[0083]

[0084] 其中

[0085] R1、L1、L2、X4和m具有前面关于式(I)化合物所述的含义，

[0086] 条件是，

[0087] 当R1是H且L1和L2是π键时，X4不同于CH2CH2或CH2CH2CH2，和

[0088] 当R1是H且L1和L2是σ键时，X4不同于CH2CH2。

[0089] 通过常规方法，例如如在方案1中所述，可以制备式(II)的胺以及式(IV)的三环衍生物。

[0090] 方案1

[0091]

[0092] 所述合成方案提供了借助于式(VII)的烷化剂烷基化式(VI)的吲唑-羧酸酯-
衍生物作为第一步，其中Q1表示选自下述的离去基团：卤素原子、甲磺酸根基团(CH3SO3)-
和甲苯磺酸根基团(p-MePhSO3)，且P1表示选自下述的末端胺的保护基：氨基甲酸9-芴基甲基酯（9-fluorenylmethyl carbamate）(Fmoc),氨基甲酸叔丁基酯（tert-butyl carbamate）(Boc)和N-亚苄基胺。优选地，Q1是氯原子、溴原子或甲磺酸根基团。

[0093] 接着，去除保护基P1，使得到的伯胺与所述酯基团发生分子内反应，得到式(IV)的环胺。

[0094] 后者通过与式(IX)的烷化剂反应而烷基化，其中Q2表示选自下述的离去基团：卤- -素原子、甲磺酸根基团(CH3SO3)和甲苯磺酸根基团(p-MePhSO3)，且P2表示选自下述的末端胺的保护基：氨基甲酸9-芴基甲基酯(Fmoc)和氨基甲酸叔丁基酯(Boc)。优选地，Q2是氯原子、溴原子或甲磺酸根基团。

[0095] 接着，去除保护基P2，以形成式(II)的胺衍生物。

[0096] 通过上述的合成方案，可以制备在下面表1中例示的化合物。

[0097] 表1

[0098]

[0099]

[0100] 可能受益于具有对5-HT2A受体的选择性亲和力的新的式(I)三环吲唑化合物治疗的病理状态的典型实例是：中枢神经系统的一些障碍，例如，睡眠障碍
(Popa D.等 人,J Neurosci.2005;25(49):11231-11238)、精 神 分 裂症(Kapur S 等人 ,Am J Psychiatry.1996;153:466-476) 和 焦 虑 (Van Oekelen D 等 人 ,Life Sci.2003;72(22):2429-2449)以 及 胃 肠 道 系 统 的 平 滑 肌 障 碍(Briejer MR等人,Neurogastroenterol Motil.1997;9(4):231-237)或心血管系统的平滑肌障碍
(Nagatomo T等人,Pharmacol Ther.2004;104(1):59-81)。此外，所述药物组合物可以有效地调节眼内压，并从而有效地治疗诸如青光眼等病状(MayJA等人,J Pharmacol Exp Ther.2003;306(1):301-309)。

[0101] 本发明的另一个方面涉及，上述的通式(I)的三环吲唑化合物或其与药学上可接受的有机酸或无机酸的盐用于制备药物的用途，所述药物用于治疗选自下述的病理状态：中枢神经系统障碍、胃肠道系统或心血管系统的平滑肌障碍和眼病理学。

[0102] 更具体地，本发明涉及上述的通式(I)的三环吲唑化合物或其与药学上可接受的有机酸或无机酸的盐用于制备药物的用途，所述药物用于治疗选自下述的中枢神经系统障碍：睡眠障碍、精神分裂症和焦虑。

[0103] 本发明也涉及上述的通式(I)的三环吲唑化合物或其与药学上可接受的有机酸或无机酸的盐用于制备药物的用途，所述药物用于治疗选自下述的胃肠道系统的平滑肌障碍：肠易激综合征(IBS)、慢性便秘、腹泻和功能性消化不良。

[0104] 本发明也涉及上述的通式(I)的三环吲唑化合物或其与药学上可接受的有机酸或无机酸的盐用于制备药物的用途，所述药物用于治疗选自下述的心血管系统的平滑肌障碍：高血压、心肌缺血、脑缺血、偏头痛、血栓形成和血小板聚集。

[0105] 本发明也涉及上述的通式(I)的三环吲唑化合物或其与药学上可接受的有机酸或无机酸的盐用于制备药物的用途，所述药物用于治疗青光眼。

[0106] 本发明另外涉及一种用于治疗病理状态的方法，所述病理状态选自中枢神经系统障碍、胃肠道系统或心血管系统的平滑肌障碍和眼病理学，所述方法包括：给有此需要的患者施用治疗有效量的至少一种如上所述的式(I)三环吲唑化合物或其与药学上可接受的有机酸或无机酸的盐。

[0107] 具体地，可以用本发明的方法治疗的中枢神经系统障碍是睡眠障碍、精神分裂症和焦虑。

[0108] 可以用本发明的方法治疗的胃肠道系统的平滑肌障碍是肠易激综合征(IBS)、慢性便秘、腹泻和功能性消化不良。

[0109] 可以用本发明的方法治疗的心血管系统的平滑肌障碍是高血压、心肌缺血、脑缺血、偏头痛、血栓形成和血小板聚集。

[0110] 可以用本发明的方法治疗的眼病理学是青光眼。

[0111] 本发明的另一个方面涉及一种药物组合物，其包含有效量的至少一种如上所述的式(I)三环吲唑化合物或其与药学上可接受的有机酸或无机酸的盐和至少一种惰性的药学上可接受的赋形剂。

[0112] 优选地，本发明的药物组合物制备成合适的剂型，所述剂型包含有效量的至少一种如上所述的式(I)三环吲唑化合物或其与药学上可接受的有机酸或无机酸的盐和至少一种惰性的药学上可接受的赋形剂。

[0113] 因此，本发明的另一个方面涉及前述药物组合物用于治疗选自下述的病理状态的用途：中枢神经系统障碍诸如睡眠障碍、精神分裂症和焦虑，胃肠道系统的平滑肌障碍诸如肠易激综合征(IBS)、慢性便秘、腹泻和功能性消化不良，或心血管系统的平滑肌障碍诸如高血压、心肌缺血、脑缺血、偏头痛、血栓形成和血小板聚集，和眼病理学诸如青光眼。

[0114] 合适的剂型的实例是：用于口服给药的片剂、胶囊剂、包衣片剂、颗粒剂、溶液和糖浆剂；用于局部给药的溶液、发膏剂和软膏剂；用于透皮给药的含药贴剂；用于直肠给药的栓剂；以及可注射的无菌溶液。

[0115] 其它合适的剂型是缓释剂型以及基于脂质体的剂型，它们用于口服、注射或透皮给药。

[0116] 所述剂型还可以含有其它常规成分，例如：防腐剂、稳定剂、表面活性剂、缓冲剂、用于调节渗透压的盐、乳化剂、甜味剂、着色剂、芳香剂等。

[0117] 如果特定治疗要求需要的话，本发明的药物组合物可以含有其它药理学活性成分，所述活性成分的同时给药是有用的。

[0118] 式(I)的三环吲唑化合物或其可药用酸加成盐在本发明的药物组合物中的量，可以随已知因素在宽范围内变化，所述因素例如病理类型、疾病严重程度、患者的体重、剂型、所选择的给药途径、每天给药的次数和所选择式(I)三环吲唑化合物的效力。然而，本领域技术人员可以以容易且常规的方式确定最佳的量。

[0119] 通常，式(I)的三环吲唑化合物或其可药用酸加成盐在本发明药物组合物中的量，应当例如确保0.0001-100mg/kg/天的给药水平。优选地，所述给药水平为0.001-50mg/kg/天，甚至更优选地为0.01-10mg/kg/天。

[0120] 通过药物化学家所熟知的技术，包括混合、制粒、压制、溶出、灭菌等，可以制备本发明的药物组合物的剂型。

[0121] 下面的描述意图进一步解释本发明，而不是限制本发明。

附图说明

[0122] 图1的图显示了试验化合物在腹膜内给药以后对小鼠头颤搐（head twitch）实验的影响，所述实验根据下文所述的实验C的规程。在Y轴上报告了在腹膜内施用X轴所示化合物以后的头颤搐的次数。

[0123] 实验部分

[0124] 1H-NMR光谱法:a)Varian Gemini 200(200MHz)b)Brucker 300Avance(300MHz)；内部标准品=三甲基硅烷[(s)=单峰;(d)=双峰;(t)=三重峰;(q)=四重峰;(qn)=五重
峰;(sxt)=六重峰;(spt)=七重峰;(bs)=宽单峰;(bd)=宽双峰;(dd)=双双峰;(dt)=双
三重峰;(tt)=三三重峰;(m)=多重峰;J=偶合常数；δ=化学位移(按ppm计算)]。

[0125] 实施例1

[0126] 2-({1-[2-(4-氟苯基)乙基]哌啶-4-基}甲基)-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮盐酸盐

[0127] 1a)2-(2-氯乙基)-2H-吲唑-3-甲酸甲酯

[0128] 将1-溴-2-氯乙烷(70ml;0.84mol)缓慢地加入在室温搅拌的1H(2H)-吲唑-3-甲酸甲酯(20g;0.084mol)、碳酸铯(24.4g;0.177mol)在乙腈(600ml)中的悬浮液中。将所述反应混合物在搅拌下在相同温度保持3天，然后通过过滤去除固体。通过减压蒸发来去除溶剂。使用8:2比例的己烷:乙酸乙酯混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化如此得到的粗化合物。

[0129] 如此得到大约10g 2-(2-氯乙基)-2H-吲唑-3-甲酸甲酯。

[0130] 1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ:3.9-4.1(m,5H);5.24(t,J=6.0Hz;2H);7.2-7.4(m,2H);7.79(d;J=9.0Hz;1H);8.02(d;J=9.0Hz;1H)。

[0131] 1b)2-(2-叠氮基乙基)-2H-吲唑-3-甲酸甲酯

[0132] 将叠氮化钠(8.8g;0.135mol)加入在强搅拌下在室温的2-(2-叠氮基乙基)-2H-吲唑-3-甲酸甲酯(9g,0.038mol)在二甲基亚砜(DMSO)(100ml)中的溶液中。

[0133] 然后如下处理反应混合物：将它冷却至室温，用水(100ml)稀释它，并用乙酸乙酯(3x 100 ml)萃取它几次。用水(3x 25 ml)、然后用饱和NaCl溶液(30ml)洗涤收集到一起的有机相，并在结束时，用无水Na2SO4干燥。通过减压蒸发来去除溶剂，由此得到约6g2-(2-叠氮基乙基)-2H-吲唑-3-甲酸甲酯，其不经其它纯化步骤用于后续反应。

[0134] 1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ:3.87(t,J=6.0Hz;2H);4.04(s,3H);5.11(t,J=6.0Hz;2H);7.2-7.4(m,2H);7.80(t,J=9.0Hz;1H);8.01(d;J=9.0Hz;1H)。

[0135] 1c)3,4-二氢吡嗪并[1，2-b]吲唑-1(2H)-酮

[0136] 将含有2-(2-叠氮基乙基)-2H-吲唑-3-甲酸甲酯(6g;0.024mol)、10%炭载钯(0.5g;0.5mmol)在5N乙醇盐酸盐(100ml)的悬浮液放入Parr系统中，在氢气氛下在室温氢化24h。

[0137] 反应结束后，在西莱特（celite）上过滤悬浮液，并通过减压蒸发来去除溶剂。

[0138] 将如此得到的粗产物溶解于无水乙醇(250ml)中，加入三乙胺(12ml;0.12mol)，并在回流下搅拌48h。然后通过减压蒸发去除溶剂，停止反应。用水(100ml)溶解残余物，并用二氯甲烷(DCM)(3x 150ml)萃取。然后用饱和NaCl溶液(50ml)洗涤收集到一起的有机相，并用无水Na2SO4干燥。得到约3g粗产物。使用8:2比例的己烷:乙酸乙酯混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法纯化它。由此得到1.5g 3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮。

[0139] 1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ:3.6-3.8(m,2H);4.64(t,J=6.0Hz;2H);7.26(t,J=9.0Hz;1H);7.36(t,J=9.0Hz;1H);7.75(d,J=9.0Hz;1H);7.98(d;J=9.0 Hz;1H)。

[0140] 1d)4-[(1-氧代-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-2(1H)-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯

[0141] 将60％NaH(0.72g；0.018mol)加入在室温搅拌的3，4-二氢吡嗪并[l，2-b]吲唑-1(2H)-酮(2.7g；0.015mol)在二甲基甲酰胺(DMF)(50m1)中的溶液中。

[0142] 将所述反应混合物在相同温度在氮气氛下搅拌2小时30分钟，然后缓慢地加入4-{[(甲磺酰基)氧基]甲基}哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.4g；0.015mol)在DMF(25m1)中的
溶液。加入结束以后，将所述混合物在150℃温热6h。然后如下停止反应：在室温冷却所述混合物，并通过减压蒸发去除溶剂。用二氯甲烷溶解残余物，然后通过硅胶垫过滤。通过减压蒸发来去除溶剂，由此得到3.5g4-[(1-氧代-3，4-二氢吡嗪并[1，2-b]吲唑-2(1H)-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯，其不经其它纯化步骤用于后续反应。

[0143] 1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ：1.1-1.4(m，2H)；1.45(s，9H)；1.6-1.8(m，2H)；1.9-2.1(m，1H)；2.71(bt，J ＝ 13.2 Hz；2H)；3.4-3.6(m，2H)，3.89(t，J＝ 6.6 Hz，2H)；
4.0-4.3(m，2H)；4.69(t，J ＝ 6.6 Hz；2H)；7.2-7.4(m，2H)；7.75(d，J ＝ 8.7 Hz；1H)；
8.16(d，J＝8.7 Hz；1H)。

[0144] 1e)2-(哌啶-4-基甲基)-3，4-二氢吡嗪并[1，2-b]吲唑-1(2H)-酮盐酸盐

[0145] 将含有4-[(1-氧代-3，4-二氢吡嗪并[1，2-b]吲唑-2(1H)基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.5 g；0.009 mol)、乙酸乙酯(20ml)和3M乙醇盐酸盐(10ml)的溶液在室温搅拌2h。然后如下停止反应：过滤已经形成的固体，并用乙酸乙酯洗涤它。由此得到1.5g2-(哌啶-4-基甲基)-3，4-二氢吡嗪并[1，2-b]吲唑-1(2H)-酮盐酸盐，其不经其它纯化步骤用于后续反应。

[0146] 1H-NMR(300 MHz，DMSO-d6+D2O.)δ：1，38(bq，J＝9，0 Hz；2H)；1，81(bd，J＝12，0 Hz；2H)；1，9-2，1(m，1H)；2，80(bt，J＝9，0 Hz；2H)；3，25(bd，J＝12，0 Hz；2H)；3，42(d，J＝6，0 Hz；2H)；3，81(t，J＝6，0 Hz；2H)；4，74(t，J＝6 Hz；2H)；7，27(t，J＝9，0Hz；1H)；7，36(t，J＝9，0 Hz；1H)；7，75(d，J＝9，0 Hz；1H)；8，00(d，J＝9，0 Hz；1H)。

[0147] 1f)2-({1-[2-(4-氟苯基)乙基]哌啶-4-基}甲基)-3，4-二氢吡嗪并[1，2-b]吲唑-1(2H)-酮盐酸盐

[0148] 将2-(哌啶-4-基-甲基)-3，4-二氢吡嗪并[1，2-b]吲唑-1(2H)-酮盐酸盐(528 mg；1.64 mmol)、碳酸钾(610 mg；4.4 mmol)、4-氟苯乙基溴(450mg；2.2 mmol)在乙醇(10 ml)的溶液在回流下搅拌24h。然后如下停止反应：在室温冷却所述混合物，并在减压下浓缩溶剂。用DCM(30 ml)溶解残余物，并分别用NaHCO3饱和溶液(2x 20 ml)、水(2x 15 ml)和饱和Nacl溶液(10 ml)洗涤。然后用Na2SO4干燥有机相，通过减压蒸发来去除溶剂。使用9∶1比例的氯仿∶甲醇混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化固体粗产物。将这样纯化的产物溶解于10∶1比例的二乙醚∶乙醇混合物(10 ml)中，并用3M乙醇盐酸盐(0.33 ml)在室温处理。过滤如此形成的固体，并用3∶7比例的异丙醇∶二异丙醚混合物进行结晶。由此得到250 mg 2-({1-[2-(4-氟苯基)乙基]哌啶-4-基}甲基)-3，4-二氢吡嗪并[1，2-b]-吲唑-1(2H)-酮盐酸盐。

[0149] 1H-NMR(300 MHz，DMSO-d6.)δ：1，49-1，78(m，2H)；1，81-2，10(m，3H)；2，76-2，99(m，2H)；3，00-3，12(m，2H)；3，17-3，40(m，2H)；3，47(d，J＝6，61 Hz；2H)；3，51-3，67(m，
2H)；3，93(t，J＝6，11Hz；2H)；4，75(t，J＝6，11 Hz；2H)；7，11-7，42(m，6H)；7，76(dt，J＝
8，59 Hz；J＝0．99 Hz；1H)；8，01(dt，J＝8，26 Hz；J＝1，16 Hz；1 H)，10，51(bs，1H)。

[0150] 实施例2

[0151] 2-({1-[2-(4-氟苯基)乙基]哌啶-3-基}甲基)-3，4-二氢吡嗪并[1，2-b]吲唑-1(2H)-酮

[0152] 2a)叔丁基-2-溴乙基氨基甲酸酯

[0153] 将三乙胺(2.02 g；0.020 mol)逐滴加入在0℃搅拌的2-溴乙胺(2.04g；0.010 mol)和叔丁氧基羰基酸酐(1.74 g；0.010 mol)在二氯甲烷(50ml)中的溶液中。将所述反应物在0℃搅拌15分钟，然后在室温搅拌8h。用水(2x50ml)洗涤所述混合物，并在Na2SO4上干燥有机相。通过减压蒸发去除溶剂以后，使用8∶2比例的己烷∶乙酸乙酯混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法纯化残余物。由此得到1.79 g叔丁基-2-溴乙基-氨基甲酸酯。该固体不经其它纯化步骤用于后续反应。

[0154] 1H-NMR(200 MHz，CDCl3.)δ：1，41(s，9H)；3，24-3，59(m，4H)；4，95(bs，1H)。

[0155] 2b)2-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基]-2H-吲唑-3-甲酸甲酯

[0156] 将碳酸铯(19.5 g；0.06 mol)加入在室温搅拌的1H-吲唑-3-甲酸甲酯(3，5 g；0，02mol)和叔丁基-2-溴乙基氨基甲酸酯(8，9 g；0，04 mol)在DMF(30 ml)中的溶液中。
将所述混合物在强搅拌下在室温保持48h，然后如下处理：加入水(50 ml)，接着加入1M HCl直到达到pH6。

[0157] 用乙酸乙酯(3x 50 ml)萃取水相，用饱和NaCl溶液(10 ml)洗涤收集到一起的有机相，然后在Na2S04上干燥。通过减压蒸发去除溶剂以后，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化残余物；使用6∶4比例的己烷∶乙酸乙酯混合物作为洗脱液。由此得到2.87 g2-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基]-2H-吲唑-3-甲酸甲酯，其不经其它纯化步骤用于后续反应。

[0158] 1H-NMR(200 MHz，CDCl3.)δ：1，36(s，9H)；3，74(q，2H，J＝5，5 Hz)；4，03(s，3H)；4，89-5，07(bs，1H)；5，03(t，2H，J＝5，5 Hz)；7，23-7，42(m，2H)；7，79(dt，1H，J＝7，5 Hz；
J＝1，6 Hz)；8，02(dt，1H，J＝7，5 Hz；J＝1，6Hz)。

[0159] 2c)3，4-二氢吡嗪并[1，2-b]吲唑-1(2H)-酮

[0160] 将1.25M HCl在乙醇(48 ml；0.06 mol)中的溶液缓慢地加入在室温搅拌的2-[2-(叔丁氧基羰基胺)乙基]-2H-吲唑-3-甲酸甲酯(6.38 g；0.02 mol)在乙酸乙酯(50 ml)中的溶液中。将如此得到的混合物在室温搅拌2h。然后通过减压蒸发来去除溶剂，并用乙酸乙酯(20 ml)在室温处理残余物，并过滤。将如此得到的固体溶解于甲醇(10 ml)中，并将碳酸铯(13.0 g；0.04 mol)加入在室温搅拌的得到的溶液中。将所述混合物在室温搅拌16h，然后通过减压蒸发来去除溶剂。用水(50 ml)溶解残余物，并用乙酸乙酯(5x 50 ml)萃取水相几次。在Na2SO4上干燥收集到一起的有机相，在通过减压蒸发来去除溶剂以后，得到约4g粗产物。然后使用8∶2比例的己烷∶乙酸乙酯混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化粗产物。由此得到3.4 g 3，4-二氢吡嗪并[1，2-b]吲唑-1(2H)-酮。

[0161] 1H-NMR(200MHz,CDCl3.)δ:3,93(dt,2H,J＝6,7Hz;J=1.7Hz);4,72(t,2H,J=6,7Hz);6,35(bs,1H);7,27-7,46(m,2H);7,78(dt,1H,J=8,4Hz;J=1,4Hz);8,16(dt,1H,J=8,4Hz;J=1,4Hz)。

[0162] 2d)3-[(1-氧代-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-2(1H)-基)-甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯

[0163] 按照在实施例1d)中所述的方法，但是使用3-{[(甲磺酰基)氧基]甲基}-哌啶-1-甲酸叔丁酯作为试剂，制备所述产物。由此得到3.8g3-[(1-氧代-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-2(1H)-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯。

[0164] 1H-NMR(200MHz,CDCl3.)δ:1,20-1,45(m,1H);1,43(s,3H);1,55-2,10(m,4H);2,65-3,05(m,2H);3,30-3,75(m,2H);3,75-4,05(m,2H);3,90(t,2H,J=6,1Hz);4,72(t,2H,J=
6,1Hz);7,25-7,45(m,2H);7,76(dt,1H,J=8,4Hz;J=1,1Hz);8,15(dt,1H,J=8.0Hz;J=1,3Hz)。

[0165] 2e)2-({1-[2-(4-氟苯基)乙基]哌啶-3-基}甲基)-3,4-二氢-吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮

[0166] 将1.25M HCl在乙 醇(4.8ml;0.006mol)中的溶 液加 入在室 温搅拌 的3-[(1-氧代-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-2(1H)-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯
(0.77g;0.002mol)在乙酸乙酯(7ml)中的溶液中。

[0167] 将如此得到的混合物在室温搅拌2h，然后通过减压蒸发来去除溶剂。用乙酸乙酯(5ml)溶解如此得到的残余物，并过滤。用在无水DMF(10ml)中的1-(2-溴乙基)-4-氟苯(0.81g;0.004mol)，溶解固体产物。将碳酸铯(1.95g;0.006mol)加入在室温搅拌的得到的溶液中。然后将所述混合物在强搅拌下在室温保持48h，然后通过加入水(20ml)和乙酸乙酯(25ml)进行处理。用乙酸乙酯(3x 20ml)萃取水相几次，并在Na2SO4上干燥收集到一起的有机相。然后通过减压蒸发来去除溶剂，并使用7:3比例的己烷:乙酸乙酯混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化残余物。

[0168] 由此得到170mg 2-({1-[2-(4-氟苯基)乙基]哌啶-3-基}甲基)-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮。

[0169] 1H-NMR(300MHz,DMSO-d6.)δ:8.00(d,J=8,48Hz;1H),7,75(d,J=8,77Hz;1H);7,31-7,41(m,1H);7,18-7,30(m,3H);6,99-7,11(m,2H);4,70(t,J=6,14Hz;2H),3,88(t,J=6,1
4Hz;2H),3,32-3,56(m,2H);2,63-2,86(m,4H);2,39-2,47(m,2H);1,79-2,11(m,3H);1,67(d,J=10,23Hz;2H);1,35-1,53(m,1H);1,03(d,J=9,35Hz;1H)。

[0170] 实施例5

[0171] 2-({1-[2-(2-氟苯基)乙基]哌啶-3-基}甲基)-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮盐酸盐

[0172] 按照在实施例2e)中所述的方法，但是使用1-(2-溴乙基)-2-氟苯作为试剂，制备所述产物。使用9:1比例的氯仿:甲醇混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化目标产物。

[0173] 由此得到350mg 2-({1-[2-(2-氟苯基)乙基]哌啶-3-基}甲基)-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮盐酸盐。

[0174] 1H-NMR(300MHz,DMSO-d6.)δ:10,81(bs,1H);8,00(dt,J=1,16;8,26Hz;1H);7,76(d,J=8,59Hz;1H);7,09-7,42(m,6H);4,71-4,81(m,2H);3,93(t,J=6,28Hz;2H);3,48-3,70(m,3H);3,06-3,46(m,5H);2,67-3,00(m,2H);2,36-2,47(m,1H);1,66-2,05(m,3H);1,05-1,39(m,1H)。

[0175] 实施例8

[0176] 2-({1-[2-(2-氟苯基)乙基]哌啶-4-基}甲基)-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮

[0177] 按照在实施例2e)中所述的方法，但是使用4-[(1-氧代-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-2(1H)-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(在实施例1d中制备)和1-(2-溴
乙基)-2-氟苯作为试剂，制备所述产物。使用95:5比例的氯仿:甲醇混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化目标产物。

[0178] 由此得到160mg 2-({1-[2-(2-氟苯基)乙基]哌啶-4-基}甲基)-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮。

[0179] 1H-NMR(300MHz,DMSO-d6.)δ:8,00(d,J=8,18Hz;1H);7,74(d,J=8,48Hz;1H);7,17-7,41(m,4H);7,05-7,16(m,2H);4,70(t,J=6,30Hz,2H);3,90(t,J=6,30Hz;2H);3,41(d,J=7,02Hz;2H);2,91(d,J=10,52Hz;2H);2,76(t,J=7,50Hz;2H),1,86-2,06(m,2H);1,55-1,8
3(m,3H);1,12-1,37(m,2H)。

[0180] 实施例10

[0181] 2-({1-[2-(4-氟苯基)乙基]哌啶-3-基}甲基)-2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-1-酮二盐酸盐

[0182] 10a)叔丁基-3-溴丙基氨基甲酸酯

[0183] 使用在实施例2a)中描述的方法，使用3-溴丙烷-1-胺作为试剂，制备所述产物。使用95:5比例的己烷:乙酸乙酯混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化产物。由此得到1.77g叔丁基-3-溴丙基氨基甲酸酯。
1

[0184] H-NMR(200MHz,CDCl3.)δ:1,41(s,9H);2,02(qn,2H,J=6,5Hz);3,24(t,2H,J=6,5Hz);3,41(t,2H,J=6,5);4,7(bs,1H)。

[0185] 10b)2-[3-(叔丁氧基羰基胺)丙基]-2H-吲唑-3-甲酸甲酯

[0186] 使用在实施例2b)中描述的方法，使用叔丁基-3-溴丙基氨基甲酸酯作为试剂，制备所述产物。使用7:3比例的己烷:乙酸乙酯混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化产物，。

[0187] 由此得到3.13g 2-[3-(叔丁氧基羰基胺)丙基]-2H-吲唑-3-甲酸甲酯。1

[0188] H-NMR(200MHz,CDCl3.)δ:1,43(s,9H);2,16(qn,2H,J=6,5Hz);3,10(q,2H,J=6,5Hz);4,03(s,3H);4,97(t,2H,J=6,5Hz);4,90-5,10(bs,1H);7,20-7,40(m,2H);7,76(dt,1H,J=8,3Hz;J=1,1Hz);8,01(dt,1H,J=7,3Hz;J=1,3Hz)。

[0189] 10c)2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-1-酮

[0190] 使用在实施例2c)中描述的方法，使用2-[3-(叔丁氧基羰基胺)丙基]-2H-吲唑-3-甲酸甲酯作为试剂，制备所述产物。使用95:5比例的戊烷:二乙醚混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化产物。由此得到3.5g 2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-1-酮。1

[0191] H-NMR(200MHz,CDCl3.)δ:2,42(qn,2H,J=6,6Hz);3,43(q,2H,J=6,6Hz);4,82(t,2H,J=6,6Hz);6,38(bs,1H);7,20-7,45(m,2H);7,74(dt,1H,J=8,4Hz;J=1,2Hz);8,06(dt,1H,J=8,4Hz;J=1,4Hz)。

[0192] 10d)3-[(1-氧代-4,5-二氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-2(3H)-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯

[0193] 使用在实施例1d)中描述的方法，使用2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-1-酮和3-{[(甲磺酰基)氧基]甲基}哌啶-1-甲酸叔丁酯作为试剂，制
备所述产物。由此得到3.6g 3-[(1-氧代-4,5-二氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲
唑-2(3H)-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯。

[0194] 1H-NMR(200MHz,CDCl3.)δ:1,15-1,40(m,1H);1,44(s,3H);1,50-2,10(m,4H);2,45(qn,2H,J=6,7Hz);2,55-2,95(m,2H);3,40-3,70(m,1H);3,45(t,2H,J=6,7Hz);3,80-4,15(m,3H);4,77(t,2H,J=6,7Hz);7,15-7,40(m,2H);7,72(dt,1H,J=8,6Hz;J=1,0Hz);7,94(dt,1H,J=8,3Hz;J=1,2Hz)。

[0195] 10e)2-({1-[2-(4-氟苯基)乙基]哌啶-3-基}甲基)-2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-1-酮二盐酸盐

[0196] 使用在实施例2e)中描述的方法，使用3-[(1-氧代-4,5-二氢-1H-[1,4]二氮杂并[1,2-b]吲唑-2(3H)-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯作为试剂，制备所述产物。使用9:1比例的氯仿:甲醇混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化胺产物。将纯化的产物溶解于10:1比例的二乙醚:乙醇的混合物(10ml)中，并用在乙醇(0.33ml)中的
3M HCl在室温进行处理。过滤如此形成的固体，并从8:2比例的异丙醇:二异丙醚混合物中结晶。由此得到188mg 2-({1-[2-(4-氟苯基)乙基]哌啶-3-基}甲基)-2,3,4,5-四
氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-1-酮二盐酸盐。
1

[0197] H-NMR(300MHz,DMSO-d6.)δ:11,24(bs,1H);10,96(bs,1H);7,79-7,86(m,1H);7,70(d,J=8,59Hz;1H);7,25-7,41(m,3H);7,01-7,25(m,3H);4,64-4,88(m,2H);3,00-3,85(m,10H);2,67-2,97(m,2H);2,53-2,65(m,1H);2,24-2,43(m,1H);1,80-2,04(m,3H);1,14-1,39(m,1H)。

[0198] 实施例13

[0199] 2-({1-[2-(2-氟苯基)乙基]哌啶-3-基}甲基)-2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-1-酮二盐酸盐

[0200] 使用在实施例10e)中描述的方法，使用1-(2-溴乙基)-2-氟苯作为试剂制备所述产物。使用9:1比例的氯仿:甲醇混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化胺产物。或者，从8:2比例的异丙醇:二异丙醚混合物中结晶终产物。由此得到163mg2-({1-[2-(2-氟苯基)乙基]哌啶-3-基}甲基)-2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂 并
[1,2-b]吲唑-1-酮二盐酸盐。

[0201] 1H-NMR(300MHz,DMSO-d6.)δ:11,19(bs,1H);10,40(bs,1H);7,83(d,J=8,26Hz;1H);7,70(d,J=8,92Hz;1H);7,25-7,45(m,3H);7,11-7,24(m,3H);4,59-4,91(m,2H);3,04-3,86(m,10H);2,68-3,04(m,2H);2,54-2,63(m,1H);2,21-2,44(m,1H);1,79-2;05(m,3H);1,15-1,37(m,1H)。

[0202] 实施例16

[0203] 2-({1-[2-(4-氟苯基)乙基]哌啶-4-基}甲基)-2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-1-酮盐酸盐

[0204] 16a)4-((1-氧代-4,5-二氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-2(3H)-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

[0205] 使用在实施例1d)中描述的方法，使用2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-1-酮作为试剂，制备所述产物。使用95:5比例的戊烷:二乙醚混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化产物。由此得到3.40g 4-((1-氧代-4,5-二氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-2(3H)-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯。

[0206] 1H-NMR(200MHz,CDCl3.)δ:2,41(s,3H);7,26(d,2H,J=8,1Hz);7,45(d,2H,J=8,1Hz);7,57(d,1H,J=13,6Hz);7,99(d,1H,J=13,6Hz)。16b)2-({1-[2-(4-氟苯基)乙基]哌啶-4-基}甲基)-2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-1-酮盐酸盐

[0207] 使用在实施例10e)中描述的方法，使用4-[(1-氧代-4,5-二氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-2(3H)-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯作为试剂，制备所述产
物。使用95:5比例的氯仿:甲醇混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化胺产物。或者，从4:6比例的异丙醇:二异丙醚混合物中，纯化终产物。由此得到167mg
2-({1-[2-(4-氟苯基)乙基]哌啶-4-基}甲基)-2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂 并
[1,2-b]吲唑-1-酮盐酸盐。
1

[0208] H-NMR(300MHz,DMSO-d6.)δ:10,63(bs,1H);7,82(d,J=8,59Hz;1H),7,70(d,J=8,92Hz;1H);7,25-7,40(m,3H);7,10-7,25(m,3H);4,72(t,J=6,94Hz;2H);3,45-3,70(m,4H);3,43(t,J=6,44Hz;2H);2,75-3,35(m,7H);2,37(q,J=6,69Hz;2H);1,85-2,10(m,3H);1,50-1,85(m,2H)。

[0209] 实施例17

[0210] 2-({1-[2-(4-氟苯基)乙基]哌啶-4-基}甲基)-3,4,7,8,9,10-六氢吡嗪并（esahydropyrazino）[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮盐酸盐

[0211] 17a)4-[(1-氧代-3,4,7,8,9,10-六氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-2(1H)-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯

[0212] 使用在实施例1d)中描述的方法，使用3,4,7,8,9,10-六氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮作为试剂，制备所述产物。所述粗产物不经其它纯化步骤用于后续反应。1

[0213] H-NMR(300MHz,DMSO-d6.)δ:4,17-4,28(m,2H);3,92(d,J=12,86Hz;2H);3,66-3,77(m,2H);3,26-3,35(m,2H);2,59-2,72(m,4H);2,55(t,J=5,85Hz,2H);1,77-1,93(m,1H);1,53-1,76(m,6H);1,39(s,9H);1,02(dd,2H)。

[0214] 17b)2-({1-[2-(4-氟苯基)乙基]哌啶-4-基}甲基)-3,4,7,8,9,10-六氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮盐酸盐

[0215] 使用在实施例2e)中描述的方法，使用4-[(1-氧代-3,4,7,8,9,10-六氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-2(1H)-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯作为试剂，制备所述产物。通过从异丙醇:二异丙醚混合物中结晶，纯化产物。由此得到0.2g 2-({1-[2-(4-氟苯基)乙基]哌啶-4-基}甲基)-3,4,7,8,9,10-六氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮盐酸盐。

[0216] 1H-NMR(300MHz,DMSO-d6.)δ:10,47(bs,1H);7,26-7,40(m,2H);7,10-7,23(m,2H);4,19-4,32(m,2H);3,73(t,J=5,95Hz,2H);3,46-3,59(m,2H);3,35(d,J=6,61Hz;2H);3,12-3,27(m,2H);2,98-3,11(m,2H);2,77-2,96(m,2H);2,65(t,J=5,78Hz;2H);2,56(t,J=5,7
8Hz;2H);1,44-2,05(m,9H)。

[0217] 实施例20

[0218] 2-[(1-苯乙基哌啶-4-基)甲基]-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮盐酸盐

[0219] 使用在实施例10e)中描述的方法，使用4-[(1-氧代-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-2(1H)-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(实施例1d)和苯乙基溴作为试剂，制备所述产物。使用85:15比例的氯仿:甲醇混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化胺产物。或者，通过在3:7比例的异丙醇:二异丙醚混合物中结晶，纯化所述终产物。由此得到121mg 2-[(1-苯乙基哌啶-4-基)甲基]-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮
盐酸盐。

[0220] 1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:10,84(bs,1H);8,01(d,J=8,26Hz;1H);7,76(d,J=8,59Hz;1H);7,13-7,44(m,7H);4,75(t,J=6,11Hz;2H);3,94(t,J=6,11Hz;2H),3,51-3,67(m,
2H);3,47(d,J=6,94Hz;2H);3,01-3,39(m,6H);2,78-3,02(m,2H);1,81-2,28(m,3H);1,53-
1,79(m,2H)。

[0221] 实施例22

[0222] 2-[(1-苯乙基哌啶-4-基)甲基]-2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-1-酮

[0223] 使用在实施例2e)中描述的方法，使用4-[(1-氧代-4,5-二氢-1H-[1,4]二氮杂并[1,2-b]吲唑-2(3H)-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(实施例16a)和苯乙基溴作为试剂，制备所述产物。使用95:5比例的氯仿:甲醇混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化产物。由此得到223mg 2-[(1-苯乙基哌啶-4-基)甲基]-2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-1-酮。

[0224] 1H-NMR(300MHz,DMSO-d6.)δ:7,82(d,J=8,18Hz;1H);7,69(d,J=8,48Hz;1H);7,07-7,40(m,7H);4,68(t,J=7,02Hz;2H);3,34-3,55(m,4H);2,94(d,J=11,40Hz;2H);2,65-2,
79(m,2H);2,33(qn,J=6,65Hz;2H);1,97(t,J=10,82Hz;2H);1,59-1,83(m,3H);1,15-1,37(m,2H)。

[0225] 实施例25

[0226] 2-{[1-(苯基乙酰基)哌啶-4-基]甲基}-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮

[0227] 使用在实施例2e)中描述的方法，使用4-[(1-氧代-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-2(1H)-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(实施例1d)和苯乙酰氯作为试剂，制备所述产物。使用9:1比例的氯仿:甲醇混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化产物。由此得到104mg 2-{[1-(苯基乙酰基)哌啶-4-基]甲基}-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮。

[0228] 1H-NMR(200MHz,CDCl3.)δ:0,85-1,15(m,1H);1,15-1,35(m,1H);1,85-2,15(m,1H);2,61(td,1H,J=13,2Hz;J=2,8Hz);2,95(td,1H,J=13,2Hz;J=2,8Hz);3,39(dd,1H,J=13,7Hz;J=6,9Hz);3,54(dd,1H,J=13,7Hz;J=7,5Hz);3,73(s,2H);3,75-4,05(m,2H);3,84(t,2H,J=6,3Hz);3,86(d,2H,J=6,3Hz);4,67(t,2H,J=6,3Hz);7,10-7,45(m,7H);7,76(dt,1H,J=8,3Hz;J=1,1Hz);8,14(dt,1H,J=8,2Hz;J=1,1Hz)。

[0229] 实施例26

[0230] 2-{[1-(苯基乙酰基)哌啶-4-基]甲基}-2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂并[1,2-b]吲唑-1-酮

[0231] 使用在实施例2e)中描述的方法，使用4-[(1-氧代-4,5-二氢-1H-[1,4]二氮杂并[1,2-b]吲唑-2(3H)-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(实施例16a)和苯乙酰氯作为试剂，制备所述产物。使用9:1比例的氯仿:甲醇混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化产物。由此得到141mg 2-{[1-(苯基乙酰基)哌啶-4-基]甲基}-2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-1-酮。

[0232] 1H-NMR(200MHz,CDCl3.)δ:0,85-1,45(m,2H);1,85-2,15(m,1H);2,39(qn,2H,J=6,7Hz);2,64(td,1H,J=12,5Hz;J=2,2Hz);2,98(td,1H,J=12,5Hz;J=2,2Hz);3,25-3,45(m,4H);3,50-3,70(m,1H);3,75(s,2H);3,89(bd,2H,J=14,2Hz);4,50-4,80(m,2H);4,67(t,2H,J=7,1Hz);7,10-7,45(m,7H);7,72(dt,1H,J=8,6Hz;J=1,1Hz);7,93(dt,1H,J=8,2Hz;J=1,1Hz)。

[0233] 实施例28

[0234] 2-[3-(4-苯基哌啶-1-基)丙基]-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮盐酸盐

[0235] 28a)1-(3-氯丙基)-4-苯基哌啶

[0236] 将固体碳酸铯(195g;0.6mmol)加入在室温搅拌的4-苯基哌啶(32g;0.2mol)、1-溴-3-氯丙烷(40ml;0.4mmol)在无水DMF(300ml)中的溶液中。将该混合物相同温度搅拌12h。加入水(1000ml)和乙酸乙酯(500ml)，以停止反应。分离相以后，用乙酸乙酯(3x
500ml)萃取水相几次。分别用水(100ml)和饱和NaCl溶液(100ml)洗涤收集到一起的有机相，然后在无水Na2SO4上干燥。通过减压蒸发来去除溶剂，并使用1:1比例的己烷:乙酸乙酯混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化残余物。由此得到29.5g 1-(3-氯丙基)-4-苯基哌啶，为无色油。

[0237] 1H-NMR(200MHz,CDCl3.)δ:1,75-1,90(m,2H);1,90-2,15(m,6H);2,35-2,65(m,3H);3,02(bd,2H,J=6,4Hz);3,64(t,2H,J=6,4Hz);7,05-7,45(m,5H)。

[0238] 28b)2-[3-(4-苯基哌啶-1-基)丙基]-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮盐酸盐

[0239] 将3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮(375mg;2.0mmol)在1:1比例的四氢呋喃:二甲基甲酰胺(DMF)混合物(4ml)中的溶液，逐滴加入在氩气氛下在室温搅拌的于矿物油中的NaH 55%(104mg;2.4mmol)在无水四氢呋喃(THF)中的悬浮液中。在惰性气氛下在相同温度搅拌该混合物1h；然后，缓慢地加入1-(3-氯丙基)-4-苯基哌啶(4.4g;0.015mol)在DMF(25ml)中的溶液。加入结束以后，在回流温度加热混合物6h。然后如下停止反应：将所述混合物冷却至室温，并加入乙酸乙酯(10ml)。然后通过硅胶垫过滤所述混合物，再通过减压蒸发来去除溶剂。使用9:1比例的氯仿:甲醇混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化残余物。将这样纯化的产物溶解于10:1比例的二乙醚:乙醇的混合物(10ml)中，并用在乙醇(0.33ml)中的3M HCl在室温处理。过滤如此形成的固体，并从1:1比例的异丙醇:二异丙醚混合物结晶。由此得到197mg 2-[3-(4-苯基哌啶-1-基)丙基]-3,4-二氢吡嗪并[1,2-b]吲唑-1(2H)-酮盐酸盐。

[0240] 1H-NMR(300MHz,DMSO-d6.)δ:10,88(bs,1H);8,02(dt,J=1,16Hz;J=8,26Hz;1H);7,77(dt,J=0,93Hz;J=8,55Hz;1H);7,18-7,42(m,7H);4,74-4,81(m,2H);3,89-4,03(m,2H);3,65(t,J=6,44Hz;2H);3,57(d,J=11,72Hz;2H);2,92-3,18(m,4H);2,70-2,87(m,1H);2,0
1-2,26(m,4H);1,94(d,J=12,55Hz;2H)。

[0241] 实施例31

[0242] 2-[3-(4-苯基哌啶-1-基)丙基]-2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-1-酮盐酸盐

[0243] 使用在实施例28b)中描述的方法，使用2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-1-酮(实施例10c)作为试剂，制备所述产物。使用85:15比例的氯仿:乙醇混合物作为洗脱液，通过在硅胶上的快速色谱法，纯化胺产物。或者，通过从1:1比例的异丙醇:二异丙醚混合物中结晶，纯化终产物。由此得到317mg 2-[3-(4-苯基哌啶-1-基)丙基]-2,3,4,5-四氢-1H-[1,4]二氮杂 并[1,2-b]吲唑-1-酮盐酸盐。

[0244] 1H-NMR(300MHz,DMSO-d6.) :10,94(bs,1H);7,84(dt,J=1,11Hz;J=8,34Hz;1H);7,71(dt,J=0,97Hz;J=8,63Hz;1H);7,29-7,40(m,3H);7,16-7,29(m,4H);4,73(t,J=7,02Hz;2H);3,55-3,73(m,5H);3,44(t,J=6,36Hz;2H);2,97-3,21(m,4H);2,83(tt,J=3,63Hz;J=1
2,14Hz;1H);2,42(qn,J=6,65Hz;2H);2,04-2,26(m,4H);1,96(d,J=13,87Hz;2H)。

[0245] 药理学

[0246] 通过在下述部分实验A、B和C中所述的方法，评价了根据本发明的式(I)化合物的药理学性质。

[0247] 实验A(体外)

[0248] 通过下述文献描述的标准方法，证实了根据本发明的式(I)化合物对人重组5-HT2A血清素受体的亲和力：Bonhaus DW,Bach C,DeSouza A,Rich Salazar FH,Matsuoka BD,Zuppan P,Chan HW和Eglen RM(1995),“The pharmacology and distribution of human5-hydroxytryptamine 2B(5-HT2B)receptor gene products:comparison with
5-HT2A and 5-HT2C receptors”.Br.J.Pharmacol.115:622–628。

[0249] 具体地，使用来自表达人5-HT2A受体的稳定重组CHO-K1细胞系的膜制品作为原料，进行与人5-HT2A血清素受体的结合。

[0250] 使用0.5nM[3H]-酮色林作为放射性配体，进行置换研究。在饱和研究的基础上，选择该浓度，其使得得到0.51pmol/mg蛋白的Bmax和0.2nM的Kd成为可能。

[0251] 在有1μM米安色林存在下，测量非特异性结合。在Tris-HCl50mM缓冲液(pH 7.4，在37℃)中进行该试验，在25℃温育1小时。将实验化合物溶解于DMSO中，然后在缓冲液中稀释(DMSO终浓度0.01%)，并铺板在96-孔平板上。在8-点浓度响应曲线中一式两份-12 -5地测试所述化合物(在范围为从10 至10 M的对数标度中)。使用酮色林作为参照化合物。

[0252] 在温育以后，在用0.5%聚乙烯亚胺处理过的玻璃纤维过滤器(GF/B)(Unifilter,Packard)上过滤膜。然后，用缓冲溶液洗涤所述过滤器，并在45℃烘干30分钟。
将闪烁液加入每个孔中，在至少16小时以后，使用TopCount(Packard)测量放射性1分钟。

[0253] 使用非线性回归分析(GraphPad PRISM软件)，计算每种化合物的IC50值，并使用下述文献描述的方程式，确定抑制常数Ki：Cheng Y.和Prussof W.H.(1973)“Relationship between the inhibition constant(Ki)and the concentration of inhibitorwhich causes 50percent inhibition(I50)of an enzyme reaction.”Biochem.
Pharmacol.22:3099-3108。

[0254] 在表2中显示了根据本发明的代表性的式(I)化合物对5-HT2A受体的亲和力值，其中pKi值越高，亲和力越大。

[0255] 表2

[0256]化合物(编号) 5-HT2A(pKi)
1 7.71
2 5.94
5 6.16
8 8.74
10 6.56
13 6.59
16 8.14
17 7.53
20 7.78
22 7.68
28 7.13
31 7.34
酮色林 9.65

[0257] 实验B(体外)

[0258] 通过下述文献描述的标准方法，证实了根据本发明的式(I)化合物对5-HT2C血清 素受 体 的亲 和力：Wolf W.A.和Schutz J.S.(1997)，“The serotonin 5-HT2C receptor is a prominent serotonin receptor in basal ganglia:evidence from functional studies on serotonin-mediated phosphoinositide hydrolysis.”J.Neurochem.69:1449-1458。

[0259] 具体地，使用来自表达人5-HT2C受体的稳定重组CHO-K1细胞系的膜制品作为原料，进行与人血清素5-HT2C受体的结合。3

[0260] 使用1nM[H]-美舒麦角作为放射性配体，进行置换研究。在饱和研究的基础上，选择该浓度，其使得得到4.9pmol/mg蛋白的Bmax和1.1nM的Kd成为可能。

[0261] 在有1μM米安色林存在下，测量非特异性结合。在Tris-HCl50mM缓冲液(pH 7.4，在37℃)、0.1%抗坏血酸、10μM帕吉林中进行该试验，在25℃温育1小时。将实验化合物溶解于DMSO中，然后在缓冲液中稀释(DMSO终浓度0.01%)，并铺板在96-孔平板上。在8-点-12 -5浓度响应曲线中一式两份地测试所述化合物(在范围为从10 至10 M的对数标度中)。
使用SB 242084作为参照化合物。SB 242084是由Sigma-Aldrich生产和销售的一种选择性的5-HT2c血清素受体拮抗剂，其具有下述结构式：

[0262]

[0263] 在温育以后，在用0.5%聚乙烯亚胺处理过的玻璃纤维过滤器(GF/B)(Unifilter,Packard)上过滤膜。然后，用缓冲溶液洗涤所述过滤器，并在45℃烘干30分钟。
将闪烁液加入每个孔中，在至少16小时以后，使用TopCount(Packard)测量放射性1分钟。

[0264] 使用非线性回归分析(GraphPad PRISM软件)，计算每种化合物的IC50值，并使用下述文献描述的方程式，确定抑制常数Ki：Cheng Y.和Prussof W.H.(1973)“Relationship between the inhibition constant(Ki)and the concentration of inhibitorwhich causes 50percent inhibition(I50)of an enzyme reaction.”Biochem.
Pharmacol.22:3099-3108。

[0265] 在表3中显示了根据本发明的代表性的式(I)化合物对人重组细胞5-HT2c受体的亲和力值，其中pKi值越高，亲和力越大。

[0266] 表3

[0267]化合物(编号) (h)5-HT2c(pKi)
1 5.77
16 <5
17 5.13
28 <5
31 <5
SB 242084 9.33

[0268] 在上面表2和3中报告的亲和力值之间的对比表明，与5-HT2c受体相比，本发明的化合物对5-HT2A受体具有更高的选择性亲和力。

[0269] 实验C(体内)

[0270] 根据在下述文献中描述的标准方法，按照小鼠的“头颤搐”模型，测试了根据本发明的式(I)化合物与血清素能系统的相互作用：Sztanke K.,Fidecka S.,Kedzierska E.,Karczmarzyk Z.,Pihlaj a K.,Matosiuk D.(2005)，“Antionociceptive activity of new imidazole carbonyl derivatives.Part 4.Synthesis and pharmacological activity of 8-aryl-3,4-dioxo-2H，8H-6，7-dihydrimidazo[2,1c][1,2,4]triazine.”Eur.J.Med.Chem.40:127-134， 和 Corne S.J.,Pickering R.W.,Warner B.T.(1963)“Amethod for assessing the effects of drugsonthe central actions of
5-hydroxytryptamine.”Br.J.Pharmacol.Chemother.20:106-120。

[0271] “头颤搐”是，由血清素的中枢水平的增加在动物中诱发的头的特征性摇动。

[0272] 使用重量为25-30g的雄性CD-1小鼠进行“头颤搐”实验。将分子悬浮于0.5%甲基纤维素水溶液(MTC)中，以5mg/kg(10ml/kg体重)的剂量，用实验化合物腹膜内地处理所述动物。对照动物通过相同的途径接受单独的媒介物(MTC)。通过5-羟基色氨酸(5-HTP)（血清素(5-HT)的一种前体）的腹膜内给药，诱导头颤搐（视作血清素能神经元的活化的特征性行为模型），所述5-羟基色氨酸(5-HTP)溶解在0.5%MTC溶液中，并在给药后30min以300mg/kg施用。

[0273] 在施用5-HTP以后，以24-26分钟的间隔，测量头颤搐的次数，所述次数构成用于评估血清素能应答的参数。

[0274] 在图1中和在下面的表4中，显示了使用所述试验化合物在“头颤搐”实验中得到的抑制值。

[0275] 表4

[0276]化合物 %抑制
1 50
8 70
16 56
17 32

[0277] 具体地，如图1所示，本发明的化合物诱导在32-70%（相对于媒介物治疗组进行计算）范围内的头颤搐次数的减少，这证实了用于拮抗通过施用5-HTP诱导的血清素能效应的能力。