一种具有抗疲劳作用的药物组合物及其制备方法与应用

摘要

本发明公开了一种具有抗疲劳作用的药物组合物及其制备方法与应用。所述药物组合物包括重量份白芍8～50份、枳壳4～30份、制何首乌2～15份、荷叶1～12份、仙鹤草3～25份、三七2～20份；所述方法包括原料准备、水溶活性成分制备、醇溶活性成分制备、混合组配工序；所述药物组合物中加入医学上可以接受的载体和/或赋形剂制成丸剂、膏剂、丹剂、片剂、胶囊剂、口服液、散剂、冲剂；所述药物组合物的应用系在制备具有缓解疲劳和/或治疗精神性疲劳、运动性疲劳食品或药品中的应用。本发明药物组合物组方合理，制备简便，疗效确切。经小鼠毒性试验和精神疲劳及运动疲劳负重游泳试验，无毒副作用，缓解和消除疲劳效果显著。

权利要求

1.一种具有抗疲劳作用的药物组合物，其特征在于药物组合物的原料药由重量份白芍

8~50份、枳壳4~30份、制何首乌2~15份、荷叶1~12份、仙鹤草3~25份、三七2~20份组成。

2.根据权利要求1所述的具有抗疲劳作用的药物组合物，其特征在于药物组合物的原料药由重量份白芍10~35份、枳壳5~18份、制何首乌4~12份、荷叶2~8份、仙鹤草5~17份、三七3~10份组成。

3.根据权利要求2所述的具有抗疲劳作用的药物组合物，其特征在于药物组合物的原料药由重量份白芍12~20份、枳壳6~13份、制何首乌5~10份、荷叶3~6份、仙鹤草7~12份、三七4~8份组成。

4.一种权利要求1~3任意一项所述的具有抗疲劳作用的药物组合物的制备方法，包括原料准备、水溶活性成分制备、醇溶活性成分制备、混合组配工序，具体包括：A、原料准备：按组方备料并按中药饮片加工要求进行前处理后备用；

B、水溶活性成分制备：将白芍、枳壳、制何首乌、荷叶和仙鹤草置入提取容器中，加入3~15倍重量的水，提取1~5次，每次0.5~5h，合并提取液并过滤，浓缩滤液得相对密度

1.02~1.10的水提浸膏；水提浸膏中加入1~10倍重量浓度为50~90%的乙醇溶液，0~15℃冷藏静置6~48h，取上清液并过滤，滤液浓缩得相对密度≥1.02的精制水提浸膏；

C、醇溶活性成分制备：三七粗粉碎后置于提取容器中，加入2~12倍重量浓度为60~90%的乙醇溶液，提取1~5次，每次0.5~5h，合并提取液过滤，浓缩滤液得相对密度≥1.02的醇提浸膏；

D、混合组配：将精制水提浸膏和醇提浸膏干燥、粉碎后混匀即得目标药物组合物。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述的提取在超声波、电磁波或微波提取容器中完成。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述的浓缩为减压浓缩、膜浓缩或离心浓缩中的一种或一种以上。

7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述的干燥采取冷冻干燥、减压干燥、水浴干燥、鼓风干燥、喷雾干燥或微波干燥中的一种或一种以上。

8.一种权利要求1~3任意一项所述的具有抗疲劳作用的药物组合物药物制剂，其特征在于：所述药物组合物中加入医学上可以接受的载体和/或赋形剂制得。

9.根据权利要求8所述的具有抗疲劳作用的药物组合物药物制剂，其特征在于：所述的制剂包括丸剂、膏剂、丹剂、片剂、胶囊剂、口服液、散剂、冲剂。

10.一种权利要求1~3任意一项所述的具有抗疲劳作用的药物组合物在制备具有缓解疲劳和/或治疗精神性疲劳、运动性疲劳食品或药品中的应用。

说明书

一种具有抗疲劳作用的药物组合物及其制备方法与应用

技术领域

[0001] 本发明属于生物制药技术领域，具体涉及一种组方合理，制备简便，疗效确切，无毒副作用的具有抗疲劳作用的药物组合物及其制备方法与应用。

背景技术

[0002] 疲劳是一种主观不适感觉，是临床上常见病、多发病，归于亚健康范畴，涉及五脏六腑，主要以脾、肝、肾为主。现代中医认为，疲劳为元气耗伤之虚证与心理变化（或不畅）双重因素所致。治疗上不仅要补虚扶正，也应祛疲安神。一方面，补虚固元，滋养机体，虚得补，正则旺，疲劳自除；另一方面，调畅心志，舒心畅意，神得安，心则宁，疲劳可消。现代研究认为，疲劳是由于运动过度、刺激过强或紧张过度，血液中二氧化碳、乳酸及其他代谢产物的堆积，肌肉因缺氧而张力下降，导致的运动耐久性降低和身体感觉的不适。

[0003] 目前，临床上常用的抗疲劳中医有虫草、刺五加、西洋参、人参、红景天、三七、熟地黄等，通过单独或不同配伍，制成各种剂型的中成药，达到服用和携带方便、易于药效的充分吸收。但同时也存在着部分药材较为名贵，导致中成药价高，受众面较窄；部分的抗疲劳效果不明显或者存在毒副作用，不适于长期食用。

[0004] 针对目前抗疲劳药物或保健食品价格高昂、疗效不确切、毒副作用大的缺陷，人们更加关注从传统植物药中寻找、研究和开发抗疲劳的理想药物。如果能够从传统中药中寻找到一种缓解和消除精神性疲劳、提高抵抗运动性疲劳效果明显、无毒副作用，治疗脱力劳伤、缓解乏力神疲的药物组合物，将能够为机体疲劳的抵抗能力增强和治疗开辟新的途径。

发明内容

[0005] 本发明的第一目的在于提供一种组方合理，制备简便，疗效确切，无毒副作用的抗疲劳药物组合物，第二目的在于提供一种该药物组合物的制备方法，第三目的在于提供一种该药物组合物制剂；第四目的在于提供一种该药物组合物的应用。

[0006] 本发明的第一目的是这样实现的，所述具有抗疲劳作用的药物组合物包括重量份白芍8～50份、枳壳4～30份、制何首乌2～15份、荷叶1～12份、仙鹤草3～25份、三七2～20份。

[0007] 本发明的第二目的是这样实现的，包括原料准备、水溶活性成分制备、醇溶活性成分制备、混合组配工序，具体包括：

[0008] A、原料准备：按组方备料并按中药饮片加工要求进行前处理后备用；

[0009] B、水溶活性成分制备：将白芍、枳壳、制何首乌、荷叶和仙鹤草置入提取容器中，加入3～15倍重量的水，提取1～5次，每次0.5～5h，合并提取液并过滤，浓缩滤液得相对密度1.02～1.10的水提浸膏；水提浸膏中加入1～10倍重量浓度为50～90%的乙醇溶液，0～15℃冷藏静置6～48h，取上清液并过滤，滤液浓缩得相对密度≥1.02的精制水提浸膏；

[0010] C、醇溶活性成分制备：三七粗粉碎后置于提取容器中，加入2～12倍重量浓度为60～90%的乙醇溶液，提取1～5次，每次0.5～5h，合并提取液过滤，浓缩滤液得相对密度≥1.02的醇提浸膏；

[0011] D、混合组配：将精制水提浸膏和醇提浸膏干燥、粉碎后混匀即得目标药物组合物。

[0012] 本发明的第三目的是这样实现的，所述的具有抗疲劳作用的药物组合物中加入医学上可以接受的载体和/或赋形剂制得药物制剂。

[0013] 本发明的第四目的是这样实现的，所述的具有抗疲劳作用的药物组合物在制备具有缓解疲劳和/或治疗精神性疲劳、运动性疲劳食品或药品中的应用。

[0014] 本发明组方药理学依据：白芍药，中医称白芍，属毛茛科芍药属植物。白芍的主要有效成分为水溶性的芍药苷、氧化芍药苷和苯甲酰芍药苷等单萜苷类化合物。传统中医认为，白芍具有养血柔肝补脾，缓中止痛，敛阴收汗的作用。《本草发挥》：“成聊摄云：芍药白补而赤泻，白收而赤散也。又云：正气虚弱，收而行之。”《本草正义》：“成无己谓白补而赤泻，白收而赤散。故益阴养血，滋润肝脾，皆用白芍。”现代医学研究表明，白芍水溶物具有养血柔肝、调节免疫功能和耐缺氧的作用。胡南、许惠玉、陈志伟等，芍药苷的药理学研究进展[J]，齐齐哈尔医学院学报，2007，28（9），1093～1095：芍药苷能够增加大脑局部血流量，对缺血、缺氧引起的脑血管舒缩功能障碍具有良好的改善作用，从而提高大脑对疲劳的耐受力；具有舒张平滑肌的作用，从而增加血流量，改善机体的供氧状况。其它研究还表明，白芍水溶物可明显延长异丙肾上腺素所致心肌缺氧的存活时间，增加心肌的营养性血流量；芍药甙有较好的解痉作用；白芍提取物对D-半乳糖胺所致肝损伤和SGPT（谷丙转氨酶）升高有明显的对抗作用，能使SGPT降低，并使肝细胞的病变和坏死恢复正常；白芍水溶物对巨噬细胞的吞噬功能有增强作用，表明具有抗炎和免疫调节作用。

[0015] 枳壳为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L及其栽培变种的干燥未成熟果实。《日华子本草》认为枳壳具有“健脾开胃，调五脏，下气，止呕逆，消痰。”现代医学药理研究表明，枳壳的黄酮类成分有抗炎、抑制毛细血管脆性和恢复损伤所致紫斑而有康复作用。枳壳的有效成分还具有增加冠脉流量和肾血流量，降低心肌氧耗量；有很强的诱发心肌节律的作用，其强度与肾上腺素相当，而比多巴胺和辛弗林强，从而增加血氧量的供给，提高人体的运动耐久性；有显著的增加脑血流量和降低脑血管阻力的作用，有显着的降低肾血管阻力的作用，均能有效的改善脑部和肾脏的供血能力，消除大脑疲劳和加快血液乳酸的反应而从肾脏中过滤排出，从而恢复体力。

[0016] 何首乌，为蓼科多年生缠绕藤本植物，制何首乌为何首乌的炮制加工品。中医认为，制何首乌具有补肝肾，益精血，乌须发，强筋骨的作用。现代研究表明，制何首乌的有效成分为二苯乙烯苷类化合物，具有补肝肾，抗衰老，提高免疫功能，防治动脉粥样硬化，调节血脂，促智及保肝等作用。何首乌还有类似肾上腺皮质功能的作用，可使应激能力明显提高，能够促进短时血氧含量的增加，提高机体抗疲劳能力；何首乌中含有较多的卵磷脂和铁，能够促进红细胞的生成和补血作用，从而缓解和消除慢性疲劳（精神批量）；何首乌中的二苯烯能使血清游离脂肪酸和肝脏过氧化脂显著下降，具有明显的保肝作用。

[0017] 荷叶为睡莲科植物莲的叶。中医认为，荷叶性味甘、寒，入脾、胃经，有清热解暑、平肝降脂之功，《本草通玄》言其“开胃消食，止血固精”。现代医学研究表明，荷叶的主要有效成分为生物碱及黄酮苷，均有明显的调节血脂和保肝作用。

[0018] 仙鹤草为蔷薇科植物龙芽草Agrimonia pilosa Ledeb. var. japonica (Miq.) Nakai 的全草。《现代实用中药》认为其：“为强壮性收敛止血剂，兼有强心作用。”中医认为，仙鹤草有补虚、强壮的作用，可用治劳力过度所致的脱力劳伤。现代医学研究表明，仙鹤草的有效成分为脂溶性的鹤草酚和水溶性的三萜皂苷、黄酮苷、糖苷类、鞣酸和有机酸类，其水溶性成分具有治疗脱力劳伤、乏力神疲。仙鹤草浸出物能够增加心脏的心率和收缩强度，具有强心作用。

[0019] 三七为五加科植物三七Panax Notoginseng (Burk.) F.H.Chen的干燥根和根茎。明代著名医学家李时珍在《本草纲目》中誉之为“金不换”，为中药之最珍贵者。《本草纲目》云：“三七止血，散血，定痛。”现代医学研究表明，三七主要含有三七总皂苷、三七素、黄酮、氨基酸、糖类及各种微量元素等，具有改善心肌缺血、缺氧、降血脂、降血压、抗血栓、抗休克、抗纤维化活性、抗炎镇痛、镇静、降血糖、抗衰老、增强免疫力和保肝利胆作用。

[0020] 现有技术领域有对白芍、枳壳、制何首乌、荷叶、仙鹤草、三七的单独或其中几味与其它药材配伍用于抗疲劳的报道，但其组方提取物用于缓解和治疗精神性疲劳及运动性疲劳未见报道。本方所用原料为纯天然植物药，其中白芍养血柔肝、调节免疫和耐缺氧，枳壳健脾开胃、有很强的诱发心肌节律和增加脑血流量及降低脑血管、肾血管阻力的作用，制何首乌补肝肾、益精血、提高激能力，荷叶开胃消食、止血固精、清热解暑和平肝降脂，仙鹤草补虚、强壮，具有治疗脱力劳伤、乏力神疲之功，三七具有改善心肌缺血、缺氧、降血脂、降血压、抗休克、增强免疫力和保肝利胆作用。通过各味药材的合理搭配，达到补精益气、健脾养肝益肾、消食化瘀、清热提神和提高免疫力、缺氧耐受力，从而提高机体短时的抵抗运动性疲劳和缓解慢性疲劳，总体上增强机体的抗疲劳能力。同时，本发明的药材原料组方严格限制在一定范围，经过小鼠急性和慢性毒理试验，安全性有保障，长期服用无毒副作用。经小鼠负重游泳试验，抵抗运动性疲劳和缓解精神性疲劳效果明显。本发明的药物组合物，组方合理，制备简便，疗效确切，经过小鼠毒理试验，无毒副作用。经小鼠负重游泳（精神疲劳和运动疲劳）试验，缓解和消除精神性疲劳、提高抵抗运动性疲劳效果明显。

附图说明

[0021] 图1为本发明的药物组合物提取工艺示意图。

具体实施方式

[0022] 下面对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换，均落入本发明的保护范围。

[0023] 本发明的所述的具有抗疲劳作用的药物组合物，包括重量份白芍8～50份、枳壳4～30份、制何首乌2～15份、荷叶1～12份、仙鹤草3～25份、三七2～20份。

[0024] 所述具有抗疲劳作用的药物组合物，包括重量份白芍10～35份、枳壳5～18份、制何首乌4～12份、荷叶2～8份、仙鹤草5～17份、三七3～10份。

[0025] 所述具有抗疲劳作用的药物组合物，包括重量份白芍12～20份、枳壳6～13份、制何首乌5～10份、荷叶3～6份、仙鹤草7～12份、三七4～8份。

[0026] 本发明所述的具有抗疲劳作用的药物组合物的制备方法，包括原料准备、水溶活性成分制备、醇溶活性成分制备、混合组配工序，具体包括：

[0027] A、原料准备：按组方备料并按中药饮片加工要求进行前处理后备用；

[0028] B、水溶活性成分制备：将白芍、枳壳、制何首乌、荷叶和仙鹤草置入提取容器中，加入3～15倍重量的水，提取1～5次，每次0.5～5h，合并提取液并过滤，浓缩滤液得相对密度1.02～1.10的水提浸膏；水提浸膏中加入1～10倍重量浓度为50～90%的乙醇溶液，0～15℃冷藏静置6～48h，取上清液并过滤，滤液浓缩得相对密度≥1.02的精制水提浸膏；

[0029] C、醇溶活性成分制备：三七粗粉碎后置于提取容器中，加入2～12倍重量浓度为60～90%的乙醇溶液，提取1～5次，每次0.5～5h，合并提取液过滤，浓缩滤液得相对密度≥1.02的醇提浸膏；

[0030] D、混合组配：将精制水提浸膏和醇提浸膏干燥、粉碎后混匀即得目标药物组合物。

[0031] 所述的提取在超声波、电磁波或微波提取容器中完成。

[0032] 所述的浓缩为减压浓缩、膜浓缩或离心浓缩中的一种或一种以上。

[0033] 所述的干燥采取冷冻干燥、减压干燥、水浴干燥、鼓风干燥、喷雾干燥或微波干燥中的一种或一种以上。

[0034] 本发明所述的药物制剂由所述具有抗疲劳作用的药物组合物中加入医学上可以接受的载体和/或赋形剂制得；所述的载体包括脂质体、毫微型胶囊、β-环糊精包含物、微球剂和磁性微球、琼脂聚糖小珠等，所述的赋形剂包括黏合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、防腐剂、抗氧剂、矫味剂、芳香剂、助溶剂、乳化剂、增溶剂、渗透压调节剂、着色剂等。

[0035] 所述的药物制剂包括丸剂、膏剂、丹剂、片剂、胶囊剂、口服液、散剂、冲剂。

[0036] 本发明所述的具有抗疲劳作用的药物组合物在制备具有缓解疲劳和/或治疗精神性疲劳、运动性疲劳食品或药品中的应用。

[0037] 实施例1 ：

[0038] 取饮片白芍400g、枳壳200g、制何首乌100g、荷叶50g、仙鹤草150g放入超声波配制罐中，加入13500g的软化水，超声波浸提药材5小时，得到浸出液，重复提取5次，然后合并浸出液并过滤得到滤液，减压蒸馏浓缩滤液至相对密度1.02的水提浸膏。向水提浸膏中加入1倍重量浓度为50%乙醇，0℃冷藏静置48小时，取上清液并过滤，滤液减压蒸馏浓缩成相对密度1.02的精制水提浸膏。取三七10g粉碎至1mm粒度并置于超声波配制罐中，加入120g浓度为60%的乙醇溶液，超声波浸提5小时，得到的浸出液经减压蒸馏浓缩成相对密度1.25的醇提浸膏。将上述取得的精制水提浸膏和醇提浸膏冷冻干燥并粉碎混匀，得到具有抗疲劳作业的药物组合物。

[0039] 实施例2 ：

[0040] 取饮片白芍1000g、枳壳600g、制何首乌300g、荷叶240g、仙鹤草500g放入电磁波配制罐中，加入7920g的去离子水，电磁波浸提药材0.5小时，得到浸出液，重复提取3次，然后合并浸出液并过滤得到滤液，1000分子量膜浓缩滤液至相对密度1.1的水提浸膏。向浸膏中加入10倍重量浓度为90%乙醇，15℃冷藏静置6小时，取上清液并过滤，滤液500分子量膜浓缩成相对密度1.25的精制水提浸膏。取三七400g粉碎至20mm粒度并置于超声波配制罐中，加入80g浓度为90%的乙醇溶液，超声波浸提3小时，得到浸出液，重复提取5次，然后合并浸出液并过滤得到滤液，经500分子量膜浓缩成相对密度1.02的醇提浸膏。将上述取得的精制水提浸膏和醇提浸膏减压干燥并粉碎混匀，得到具有抗疲劳作业的药物组合物。

[0041] 实施例3 ：

[0042] 取饮片白芍16kg、枳壳8kg、制何首乌6.4kg、荷叶3.2kg、仙鹤草8kg放入微波配制罐中，加入333kg的蒸馏水，微波浸提药材3小时，得到浸出液，重复提取2次，然后合并浸出液并过滤得到滤液，滤液离心浓缩至相对密度1.05的水提浸膏。向浸膏中加入5倍重量浓度为70%乙醇，10℃冷藏静置36小时，取上清液并过滤，滤液离心浓缩至相对密度1.15的精制水提浸膏。取三七4.8kg粉碎至10mm粒度并置于微波配制罐中，加入24kg浓度为70%的乙醇溶液，微波浸提1小时，得到浸出液，重复提取3次，然后合并浸出液并过滤得到滤液，滤液经离心浓缩成相对密度1.1的醇提浸膏。将上述取得的精制水提浸膏和醇提浸膏喷雾干燥并粉碎混匀，然后加入蔗糖，按常规方法制成冲剂。

[0043] 实施例4 ：

[0044] 取饮片白芍350g、枳壳180g、制何首乌120g、荷叶80g、仙鹤草170g放入普通配制罐中，加入10800g的蒸馏水，浸泡浸提药材2小时，然后合并浸出液并过滤得到滤液，滤液减压浓缩至相对密度1.07的水提浸膏。向浸膏中加入7倍重量浓度为60%乙醇，4℃冷藏静置12小时，取上清液并过滤，滤液减压浓缩至相对密度1.1的精制水提浸膏。取三七100g粉碎至5mm粒度并置于配制罐中，加入1000g浓度为80%的乙醇溶液，浸泡浸提4小时，得到浸出液，重复提取2次，然后合并浸出液并过滤得到滤液，滤液经减压浓缩至相对密度1.15的醇提浸膏。将上述取得的精制水提浸膏和醇提浸膏水浴干燥并粉碎混匀，然后加入蜂蜜、抑菌剂等，按常规方法制成口服液。

[0045] 实施例5 ：

[0046] 取饮片白芍600g、枳壳300g、制何首乌250g、荷叶150g、仙鹤草350g放入微波配制罐中，加入13200g的蒸馏水，微波浸提药材2.5小时，得到浸出液，重复提取4次，然后合并浸出液并过滤得到滤液，滤液离心浓缩至相对密度1.03的水提浸膏。向浸膏中加入3倍重量浓度为80%乙醇，10℃冷藏静置24小时，取上清液并过滤，滤液离心浓缩至相对密度1.05的精制水提浸膏。取三七200g粉碎至2.5mm粒度并置于微波配制罐中，加入2000g浓度为75%的乙醇溶液，微波浸提2.5小时，得到浸出液，重复提取4次，然后合并浸出液并过滤得到滤液，滤液经减压浓缩至相对密度1.18的醇提浸膏。将上述取得的精制水提浸膏和醇提浸膏鼓风干燥并粉碎混匀，然后加入淀粉、蜂蜜等，按常规方法制成丸剂。

[0047] 实施例6 ：

[0048] 取饮片白芍2000g、枳壳1300g、制何首乌1000g、荷叶600g、仙鹤草1200g放入超声波配制罐中，加入61000g的蒸馏水，超声波浸提药材4小时，得到浸出液，重复提取3次，然后合并浸出液并过滤得到滤液，滤液减压浓缩至相对密度1.08的水提浸膏。向浸膏中加入8倍重量浓度为55%乙醇，6℃冷藏静置30小时，取上清液并过滤，滤液减压浓缩至相对密度1.18的精制水提浸膏。取三七800g粉碎至15mm粒度并置于微波配制罐中，加入6400g浓度为65%的乙醇溶液，微波浸提2小时，得到浸出液，重复提取2次，然后合并浸出液并过滤得到滤液，滤液经减压浓缩至相对密度1.05的醇提浸膏。将上述取得的精制水提浸膏和醇提浸膏微波干燥并粉碎混匀，然后加入玉米淀粉、蔗糖、碳酸钙、羧甲基纤维素钠等，按常规方法制成片剂。

[0049] 实施例7 ：

[0050] 取饮片白芍8kg、枳壳5kg、制何首乌4kg、荷叶2kg、仙鹤草5kg放入超声波配制罐中，加入240kg的去离子水，超声波浸提药材1.5小时，得到浸出液，重复提取2次，然后合并浸出液并过滤得到滤液，滤液减压浓缩至相对密度1.04的浸膏。向浸膏中加入2倍重量浓度为65%乙醇，10℃冷藏静置16小时，取上清液并过滤，滤液减压浓缩至相对密度1.3的精制水提浸膏。取三七3kg粉碎至2.5mm粒度并置于超声波配制罐中，加入24kg浓度为70%的乙醇溶液，超声波浸提1.5小时，得到浸出液，重复提取3次，然后合并浸出液并过滤得到滤液，滤液经减压浓缩至相对密度1.08的醇提浸膏。将上述取得的精制水提浸膏和醇提浸膏经70℃减压干燥并粉碎混匀，加入符合规定的食用玉米淀粉，按常规方法制成硬胶囊剂。

[0051] 实施例8：

[0052] 取饮片白芍2kg、枳壳7.5kg、制何首乌2.5kg、荷叶1kg、仙鹤草5kg放入超声波配制罐中，加入126kg的去离子水，超声波浸提药材2h，得到浸出液，重复提取3次，然后合并浸出液并过滤得到滤液，滤液离心浓缩至相对密度1.05的浸膏。向浸膏中加入6倍重量浓度为75%乙醇，8℃冷藏静置24h，取上清液并过滤，滤液离心浓缩至相对密度1.08的精制水提浸膏。取三七2.5kg粉碎至5mm粒度并置于超声波配制罐中，加入25kg浓度为65%的乙醇溶液，超声波浸提3h，得到浸出液，重复提取2次，然后合并浸出液并过滤得到滤液，滤液经离心浓缩至相对密度1.3的醇提浸膏。将上述取得的精制水提浸膏和醇提浸膏减压干燥并粉碎混匀，加入适当比例的玉米淀粉、甘油等混匀，按常规方法制得具有抗疲劳作用的软胶囊剂。

[0053] 试验例1：毒性实验

[0054] 1 材料

[0055] 1.1 药物：抗疲劳作用的药物组合物由云南云药科技股份有限公司制备，经检测符合其质量标准，存放于干燥器中。

[0056] 1.2 动物：健康昆明种小鼠，雌雄各半，体重18～22g。

[0057] 2 小鼠急性毒性实验

[0058] 在最大给药浓度和最大给药容量下，小鼠口服灌胃给予水提和醇提物粉碎混合物10g/kg，连续观察14天，试验小鼠未见死亡和异常毒性反应。试验结束，解剖试验小鼠，观察肝、肾、脾、心、肺、胃、肠等主要脏器，均未见异常改变。按急性毒性标准，该样品属无毒级。

[0059] 表1 小鼠急性毒性试验结果

[0060]

[0061] 3 小鼠长期毒性实验

[0062] 水提和醇提物粉碎混合物分为500mg/kg、250mg/kg、100mg/kg三组，对小鼠连续口服灌胃90d后停药恢复28d长期毒性实验。结果显示：

[0063] 3.1 一般情况：在给药和恢复期间，小鼠皮毛光滑，行为活动正常，体重增加，摄食饮水正常；

[0064] 3.2 血液学和血液生化指标：在给药结束和恢复期后，小鼠血液学和血液生化指标均在正常范围内波动，未见明显异常；

[0065] 3.3 骨髓和尿常规指标：在给药结束和恢复期后，小鼠骨髓和尿常规指标未见明显异常；

[0066] 3.4 组织病理学指标：在给药结束和恢复期后，小鼠各脏器肉眼未见明显异常，各脏器病理未见明显异常改变。

[0067] 小鼠长期毒性试验表明，曲札茋苷和白皮杉醇对小鼠长期给药未见明显毒性反应。

[0068] 4 结论：小鼠急性和长期毒性实验表明，曲札茋苷和白皮杉醇在安全给药范围内，没有明显毒性反应。

[0069] 试验例2：小鼠负重游泳（运动疲劳）

[0070] 1 药物：同实验例1。

[0071] 2 动物：同实验例1。

[0072] 3 方法：将健康昆明种小鼠随机分为4组，每组l0只，分别为空白对照组（生理盐水）；本发明药物组合物高、中、低剂量组（215，420，840mg/kg，相当于推荐人体用量的5、10、20倍）。灌胃给药，1次/天，连续29天。实验期间动物自由取食和饮水。于第30天将小鼠尾部固定其体重8%的铅皮，放于直径约18cm，水深18cm，水温25℃的容器内，以小鼠游泳至头部深入水中10秒不再浮起结束，记录小鼠游泳时间，将其作为运动性疲劳引起的疲劳度进行评价。

[0073] 表2 小鼠负重游泳试验结果

[0074]

[0075] 4 结论：小鼠在负重游泳模型中的游泳时间，反映了动物抵抗运动性疲劳的程度，本发明的药物组合物在840mg/kg、420mg/kg、215mg/kg剂量下与空白对照组的差异具有显著性（P<0.05），能够明显增加小鼠负重游泳时间，并且呈剂量依赖关系，有增加抵抗运动性疲劳的作用。

[0076] 试验例3：小鼠负重游泳（精神疲劳）

[0077] 1 药物：同实验例1。

[0078] 2 动物：同实验例1。

[0079] 3 方法：将健康昆明种小鼠随机分为5组，每组l0只，分别为空白对照组（生理盐水）；水浸空白对照组（生理盐水）；本发明药物组合物高、中、低剂量组（215，420，840mg/kg，相当于推荐人体用量的5、10、20倍）。灌胃给药，1次/天，空白对照组（生理盐水）普通饲养，其余四组在设定水深1.5cm水温25℃的容器中连续给药饲养3天，养成疲劳小鼠，实验期间动物自由取食。于第4天将小鼠尾部固定其体重8%的铅皮，放于直径约18cm，水深18cm，水温25℃的容器内，以小鼠游泳至头部深入水中10秒不再浮起结束，记录小鼠游泳时间，将其作为精神性疲劳（慢性疲劳）引起的疲劳度进行评价。

[0080] 表3 小鼠负重游泳试验结果

[0081]组别 剂量（mg/Kg） 游泳时间（min）
空白对照组（普通） / 3.37±2.14
空白对照组（水浸） / 1.62±1.26
高剂量组 840 3.18±1.31
中剂量组 420 2.86±1.48
低剂量组 215 2.63±1.24

[0082] 4 结论：小鼠在负重游泳模型中的游泳时间，反映了动物抵抗运动性疲劳的程度，本发明的药物组合物在840mg/kg、420mg/kg剂量下与空白对照组的差异具有显著性（P<0.05），能够明显增加小鼠负重游泳时间，并且呈剂量依赖关系，有缓解精神性疲劳的作用。