畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法及其应用

摘要

本发明的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法、及其应用，选用的乳酸菌同型乳酸发酵的厌氧菌，主要包括屎肠球菌、粪肠球菌和嗜热链球菌，是畜禽养殖业最常用的乳酸菌，代谢过程基本不产生气体，只要保持发酵体系有较好的密闭性，对绝大多数畜禽饲料的发酵都有较好的适用性。选用的酵母菌是面包酵母菌，就是商业市场上流通的生产面包的酵母菌，每克面包酵母干粉含100亿cfu活性酵母菌；制备出的复合菌制剂含水量一般不超过9.0%，在真空包装条件下可存放3-6个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在50-65%左右。这种复合菌产品在畜禽发酵饲料中接种0.1～0.2%就可以很好地启动发酵。

权利要求

1.一种畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法，其特征在于：所述复合菌制剂为含有面包酵母菌和乳酸菌的复合菌制剂，所述乳酸菌为采用高密度液体厌氧培养的厌氧乳酸菌，所述面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母菌，所述复合菌制剂的制备方法包括以下步骤：a.制备待接种的液体乳酸菌培养基：将红糖与牛奶按重量比为红糖：牛奶＝1:19-22混合搅拌至红糖完全溶解并密封存储，并在温度为105-115℃之下消毒18-22分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；

b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液：用1-3倍于牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖：牛奶稀释液＝1:25-30的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，将该混合液在温度为115-125℃下消毒18-22分钟后冷却至常温，然后加入重量比为混合液：乳酸菌＝

50:0.05-0.1的乳酸菌，并在温度为35-40℃下恒温培养22-26小时，即得接种种液；

c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为

35-45℃下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；

d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入30-40乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附3-7分钟，然后加入1-2吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌1-4分钟，制得生产畜禽发酵饲料用复合菌制剂。

2.根据权利要求1所述的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法，其特征在于：步骤a中，将红糖与牛奶按重量比为红糖：牛奶＝1:20混合搅拌至红糖完全溶解并密封存储，并在温度为110℃之下消毒20分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基。

3.根据权利要求2所述的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法，其特征在于：步骤a中，所述牛奶为不含抗生素且未经稀释的牛奶。

4.根据权利要求3所述的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法，其特征在于：步骤b中，用2倍于牛奶重量的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖：牛奶稀释液＝1:28的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，将该混合液在温度为120℃下消毒20分钟后冷却至常温，然后加入重量比为混合液：乳酸菌＝50:0.08的乳酸菌，并在温度为37℃下恒温培养24小时，即得接种种液。

5.根据权利要求4所述的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法，其特征在于：步骤c中，将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为40℃下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液。

6.根据权利要求5所述的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法，其特征在于：步骤d中，将步骤c中的乳酸菌培养液加入35乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附5分钟，然后加入1.5吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌3分钟，制得生产畜禽发酵饲料用复合菌制剂。

7.根据权利要求6所述的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法，其特征在于：所述厌氧乳酸菌包括嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)和屎肠球菌(Enterococcus faecium)中的一种或两种以上混合物。

8.根据权利要求7制得的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，其特征在于：向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为0.1-0.2％的畜禽发酵饲料用复合菌制剂。

说明书

畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法及其应用

技术领域

[0001] 本发明涉及一种复合菌，特别涉及一种畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法、及其应用。

背景技术

[0002] 发酵饲料是指在人工控制条件下，微生物通过自身的代谢活动，将植物性、动物性和矿物性物质中的抗营养因子分解或转化，产生更能被牲畜采食消化、吸收的养分更高且无毒害作用的饲料原料。生产畜禽发酵饲料的微生物主要有酵母菌和乳酸菌，有时还有少量的芽孢杆菌。但是对于普通的畜禽饲料，如果含水量达到30%以上，有适量的酵母菌和乳酸菌就足够启动发酵了。目前，畜禽养殖行业逐渐开始推广使用发酵饲料，但是生产发酵饲料的菌种都是由专业的生物技术公司生产，生产工艺比较复杂，价格也很高。实际上，生产畜禽发酵饲料用的菌种制剂不需要很复杂的操作工艺，也不需要很大的设备投入，一些简便的生产技术同样能达到很理想的效果。实用新型内容

[0003] 有鉴于此，本发明的目的在于提供一种畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法、及其应用，制备复合菌制剂的工序少，工艺简单，操作方便，无需大型设备的投入，推广性强，节约经济成本；所制备出的复合菌制剂能够有效促进饲料营养成分的转化，提高饲料转化率。

[0004] 本发明公开一种畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法，所述复合菌制剂为含有面包酵母菌和乳酸菌的复合菌制剂，所述乳酸菌为采用高密度液体厌氧培养的厌氧乳酸菌，所述面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母菌；所述复合菌制剂的制备方法包括以下步骤：

[0005] a.制备待接种的液体乳酸菌培养基：将红糖与牛奶按重量比为红糖：牛奶=1:19-22混合搅拌至红糖完全溶解并密封存储，并在温度为105-115℃之下消毒18-22分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；

[0006] b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液：用1-3倍于牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖：牛奶稀释液=1:25-30的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，将该混合液在温度为115-125℃下消毒18-22分钟后冷却至常温，然后加入重量比为混合液：乳酸菌=50:0.05-0.1的乳酸菌，并在温度为35-40℃下恒温培养22-26小时，即得接种种液；

[0007] c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为35-45℃下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；

[0008] d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入30-40乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附3-7分钟，然后加入1-2吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌1-4分钟，制得生产畜禽发酵饲料用复合菌制剂；

[0009] 进一步，步骤a中，将红糖与牛奶按重量比为红糖：牛奶=1:20混合搅拌至红糖完全溶解并密封存储，并在温度为110℃之下消毒20分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；

[0010] 进一步，步骤a中，所述牛奶为不含抗生素且未经稀释的牛奶；

[0011] 进一步，步骤b中，用2倍于牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖：牛奶稀释液=1:28的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，将该混合液在温度为120℃下消毒20分钟后冷却至常温，然后加入重量比为混合液：乳酸菌=50:0.08的乳酸菌，并在温度为37℃下恒温培养24小时，即得接种种液；

[0012] 进一步，步骤c中，将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为40℃下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；

[0013] 进一步，步骤d中，将步骤c中的乳酸菌培养液加入35乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附5分钟，然后加入1.5吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌3分钟，制得生产畜禽发酵饲料用复合菌制剂；

[0014] 进一步，所述厌氧乳酸菌包括嗜热链球菌（Streptococcus thermophilus）、粪肠球菌（Enterococcus.faecalis）和屎肠球菌（Enterococcus.faecium）中的一种或两种以上混合物。

[0015] 本发明还公开一种畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为0.1-0.2%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂。

[0016] 本发明的有益效果：本发明的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法、及其应用，选用的乳酸菌同型乳酸发酵的厌氧菌，这些乳酸菌主要包括屎肠球菌、粪肠球菌和嗜热链球菌，它们都是畜禽养殖业最常用的乳酸菌，代谢过程基本不产生气体，只要保持发酵体系有较好的密闭性，这些乳酸菌就可以很好地生存和代谢，对绝大多数畜禽饲料的发酵都有较好的适用性。选用的酵母菌是面包酵母菌，就是商业市场上流通的生产面包的酵母菌，每克面包酵母干粉含100亿cfu活性酵母菌；这种酵母液具有很好很广泛的适用范围，是一种生产畜禽发酵饲料很好的微生物。特别是在发酵的起始阶段，这种酵母菌有很强的发酵力，可以快速地消耗原料中残留的氧气，为乳酸菌的快速繁殖和正常代谢提供很好的厌氧环境。面包酵母菌是采用成熟的面包酵母干粉（安琪酵母粉，食品级面包酵母，已商业化流通）。乳酸菌采用高浓度液态培养，培养结束后用干燥的麦芽粉吸附，吸附的比例是30～40。即30～40倍重量的麦芽粉与1倍重量的液态乳酸菌培养液混合。由于普通干燥麦芽粉的含水量一般都不超过5%，因此通过大比例吸附稀释后，最终产品中的含水量一般不超过9.0%。在真空包装条件下可存放3-6个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在50-65%左右。这种复合菌产品在畜禽发酵饲料中接种0.1～0.2%就可以很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。

具体实施方式

[0017] 实施例一

[0018] a.制备待接种的液体乳酸菌培养基：将红糖与未经稀释且不含抗生素的牛奶按重量比为红糖：牛奶=1:20混合搅拌至红糖完全溶解，然后分装在三角瓶中，瓶口用棉塞封口，外包牛皮纸密封存储，并在温度为110℃之下消毒20分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；红糖也可有蔗糖替代，同样能达到实验目的。

[0019] b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液：用2倍于无抗生素牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖：牛奶稀释液=1:28的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，把溶液装在玻璃瓶中，用橡胶塞密闭玻璃瓶口，将该混合液在温度为120℃下消毒20分钟后冷却至常温以后转移到超净工作台上，然后打开橡胶瓶塞加入重量比为混合液：厌氧乳酸菌=50:0.08的厌氧乳酸菌并用橡胶塞密闭瓶口，转移到恒温培养箱内，并在温度为37℃下恒温培养24小时，即得接种种液；成熟的种液如果不及时用，需要保存在4℃冰箱内，有效期为10天。

[0020] c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为40℃下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；

[0021] d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入35乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附5分钟，即35倍重量的麦芽粉与1倍重量的乳酸菌培养液混合，然后加入1.5吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌3分钟，即1.5倍重量的面包酵母粉与1倍重量的乳酸菌培养液（吸附后的）混合，面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母菌，制得畜禽发酵饲料用复合菌制剂，将复合菌制剂进行真空装袋保存。

[0022] 本实施例的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为0.15%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂,就能很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。

[0023] 本实施例中，所述厌氧乳酸菌为嗜热链球菌；本实施例中，将嗜热链球菌按同等重量比替换为粪肠球菌、屎肠球菌中的一种，或者按照同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌、屎肠球菌中的混合物，均得到合格的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，所得产品性质并无明显差别。

[0024] 本实施例制得的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，含水量为0.6%，在真空包装条件下存放6个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在65%。

[0025] 实施例二

[0026] a.制备待接种的液体乳酸菌培养基：将红糖与未经稀释且不含抗生素的牛奶按重量比为红糖：牛奶=1:19混合搅拌至红糖完全溶解，然后分装在三角瓶中，瓶口用棉塞封口，外包牛皮纸密封存储，并在温度为105℃之下消毒18分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；红糖也可有蔗糖替代，同样能达到实验目的。

[0027] b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液：用1倍于无抗生素牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖：牛奶稀释液=1:25的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，把溶液装在玻璃瓶中，用橡胶塞密闭玻璃瓶口，将该混合液在温度为115℃下消毒18分钟后冷却至常温以后转移到超净工作台上，然后打开橡胶瓶塞加入重量比为混合液：厌氧乳酸菌=50:0.05的厌氧乳酸菌并用橡胶塞密闭瓶口，转移到恒温培养箱内，并在温度为35℃下恒温培养22小时，即得接种种液；成熟的种液如果不及时用，需要保存在4℃冰箱内，有效期为10天。

[0028] c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液（后密封存储，在温度为35℃下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；

[0029] d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入30乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附3分钟，即30倍重量的麦芽粉与1倍重量的乳酸菌培养液混合，然后加入1吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌1分钟，即1倍重量的面包酵母粉与1倍重量的乳酸菌培养液（吸附后的）混合，面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母菌，制得畜禽发酵饲料用复合菌制剂，将复合菌制剂进行真空装袋保存。

[0030] 本实施例的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为0.1%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂,就能很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。

[0031] 本实施例中，所述厌氧乳酸菌为粪肠球菌；本实施例中，将粪肠球菌按同等重量比替换为嗜热链球菌、屎肠球菌中的一种，或者按照同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌、屎肠球菌中的混合物，均得到合格的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，所得产品性质并无明显差别。

[0032] 本实施例制得的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，含水量为0.8%，在真空包装条件下存放3个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在50%。

[0033] 实施例三

[0034] a.制备待接种的液体乳酸菌培养基：将红糖与未经稀释且不含抗生素的牛奶按重量比为红糖：牛奶=1:22混合搅拌至红糖完全溶解，然后分装在三角瓶中，瓶口用棉塞封口，外包牛皮纸密封存储，并在温度为115℃之下消毒22分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；红糖也可有蔗糖替代，同样能达到实验目的。

[0035] b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液：用3倍于无抗生素牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖：牛奶稀释液=1:30的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，把溶液装在玻璃瓶中，用橡胶塞密闭玻璃瓶口，将该混合液在温度为125℃下消毒22分钟后冷却至常温以后转移到超净工作台上，然后打开橡胶瓶塞加入重量比为混合液：厌氧乳酸菌=50:0.1的厌氧乳酸菌并用橡胶塞密闭瓶口，转移到恒温培养箱内，并在温度为40℃下恒温培养26小时，即得接种种液；成熟的种液如果不及时用，需要保存在4℃冰箱内，有效期为10天。

[0036] c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为35℃下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；

[0037] d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入30乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附3分钟，即30倍重量的麦芽粉与1倍重量的乳酸菌培养液混合，然后加入1吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌1分钟，即1倍重量的面包酵母粉与1倍重量的乳酸菌培养液（吸附后的）混合，面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母菌，制得畜禽发酵饲料用复合菌制剂，将复合菌制剂进行真空装袋保存。

[0038] 本实施例的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为0.1%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂,就能很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。

[0039] 本实施例中，所述厌氧乳酸菌为屎肠球菌；本实施例中，将屎肠球菌按同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌中的一种，或者按照同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌、屎肠球菌中的混合物，均得到合格的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，所得产品性质并无明显差别。

[0040] 本实施例制得的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，含水量为0.8%，在真空包装条件下存放3个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在50%。

[0041] 实施例四

[0042] a.制备待接种的液体乳酸菌培养基：将红糖与未经稀释且不含抗生素的牛奶按重量比为红糖：牛奶=1:22混合搅拌至红糖完全溶解，然后分装在三角瓶中，瓶口用棉塞封口，外包牛皮纸密封存储，并在温度为105℃之下消毒22分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；红糖也可有蔗糖替代，同样能达到实验目的。

[0043] b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液：用3倍于无抗生素牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖：牛奶稀释液=1:30的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，把溶液装在玻璃瓶中，用橡胶塞密闭玻璃瓶口，将该混合液在温度为115℃下消毒22分钟后冷却至常温以后转移到超净工作台上，然后打开橡胶瓶塞加入重量比为混合液：厌氧乳酸菌=50:0.1的厌氧乳酸菌并用橡胶塞密闭瓶口，转移到恒温培养箱内，并在温度为40℃下恒温培养22小时，即得接种种液；成熟的种液如果不及时用，需要保存在4℃冰箱内，有效期为10天。

[0044] c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为35℃下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；

[0045] d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入40乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附3分钟，即40倍重量的麦芽粉与1倍重量的乳酸菌培养液混合，然后加入2吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅7分钟，即2倍重量的面包酵母粉与1倍重量的乳酸菌培养液（吸附后的）混合，面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母菌，制得畜禽发酵饲料用复合菌制剂，将复合菌制剂进行真空装袋保存。

[0046] 本实施例的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为0.15%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂,就能很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。

[0047] 本实施例中，所述厌氧乳酸菌为嗜热链球菌；本实施例中，将嗜热链球菌按同等重量比替换为粪肠球菌、屎肠球菌中的一种，或者按照同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌、屎肠球菌中的混合物，均得到合格的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，所得产品性质并无明显差别。

[0048] 本实施例制得的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，含水量为0.7%，在真空包装条件下存放5个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在60%。

[0049] 实施例五

[0050] a.制备待接种的液体乳酸菌培养基：将红糖与未经稀释且不含抗生素的牛奶按重量比为红糖：牛奶=1:19混合搅拌至红糖完全溶解，然后分装在三角瓶中，瓶口用棉塞封口，外包牛皮纸密封存储，并在温度为112℃之下消毒19分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；红糖也可有蔗糖替代，同样能达到实验目的。

[0051] b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液：用2倍于无抗生素牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖：牛奶稀释液=1:27的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，把溶液装在玻璃瓶中，用橡胶塞密闭玻璃瓶口，将该混合液在温度为122℃下消毒19分钟后冷却至常温以后转移到超净工作台上，然后打开橡胶瓶塞加入重量比为混合液：厌氧乳酸菌=50:0.06的厌氧乳酸菌并用橡胶塞密闭瓶口，转移到恒温培养箱内，并在温度为37℃下恒温培养25小时，即得接种种液；成熟的种液如果不及时用，需要保存在4℃冰箱内，有效期为10天。

[0052] c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为42℃下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；

[0053] d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入32乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附3分钟，即32倍重量的麦芽粉与1倍重量的乳酸菌培养液混合，然后加入1.5吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌1分钟，即1.5倍重量的面包酵母粉与1倍重量的乳酸菌培养液（吸附后的）混合，面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母菌，制得畜禽发酵饲料用复合菌制剂，将复合菌制剂进行真空装袋保存。

[0054] 本实施例的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为0.18%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂,就能很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。

[0055] 本实施例中，所述厌氧乳酸菌为屎肠球菌；本实施例中，将屎肠球菌按同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌中的一种，或者按照同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌、屎肠球菌中的混合物，均得到合格的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，所得产品性质并无明显差别。

[0056] 本实施例制得的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，含水量为0.7%，在真空包装条件下存放4个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在55%。

[0057] 实施例六

[0058] a.制备待接种的液体乳酸菌培养基：将红糖与未经稀释且不含抗生素的牛奶按重量比为红糖：牛奶=1:21混合搅拌至红糖完全溶解，然后分装在三角瓶中，瓶口用棉塞封口，外包牛皮纸密封存储，并在温度为108℃之下消毒21分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；红糖也可有蔗糖替代，同样能达到实验目的。

[0059] b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液：用1倍于无抗生素牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖：牛奶稀释液=1:26的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，把溶液装在玻璃瓶中，用橡胶塞密闭玻璃瓶口，将该混合液在温度为118℃下消毒18分钟后冷却至常温以后转移到超净工作台上，然后打开橡胶瓶塞加入重量比为混合液：厌氧乳酸菌=50:0.07的厌氧乳酸菌并用橡胶塞密闭瓶口，转移到恒温培养箱内，并在温度为39℃下恒温培养25小时，即得接种种液；成熟的种液如果不及时用，需要保存在4℃冰箱内，有效期为10天。

[0060] c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液（后密封存储，在温度为43℃下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；

[0061] d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入33乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附3分钟，即33倍重量的麦芽粉与1倍重量的乳酸菌培养液混合，然后加入1.9吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌1分钟，即1.9倍重量的面包酵母粉与1倍重量的乳酸菌培养液（吸附后的）混合，面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母菌，制得畜禽发酵饲料用复合菌制剂，将复合菌制剂进行真空装袋保存。

[0062] 本实施例的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为0.2%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂,就能很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。

[0063] 本实施例中，所述厌氧乳酸菌为粪肠球菌；本实施例中，将粪肠球菌按同等重量比替换为嗜热链球菌、屎肠球菌中的一种，或者按照同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌、屎肠球菌中的混合物，均得到合格的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，所得产品性质并无明显差别。

[0064] 本实施例制得的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，含水量为0.75%，在真空包装条件下存放6个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在63%。

[0065] 实施例七

[0066] a.制备待接种的液体乳酸菌培养基：将红糖与未经稀释且不含抗生素的牛奶按重量比为红糖：牛奶=1:21混合搅拌至红糖完全溶解，然后分装在三角瓶中，瓶口用棉塞封口，外包牛皮纸密封存储，并在温度为114℃之下消毒19分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；红糖也可有蔗糖替代，同样能达到实验目的。

[0067] b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液：用2倍于无抗生素牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖：牛奶稀释液=1:26的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，把溶液装在玻璃瓶中，用橡胶塞密闭玻璃瓶口，将该混合液在温度为121℃下消毒22分钟后冷却至常温以后转移到超净工作台上，然后打开橡胶瓶塞加入重量比为混合液：厌氧乳酸菌=50:0.1的厌氧乳酸菌并用橡胶塞密闭瓶口，转移到恒温培养箱内，并在温度为36℃下恒温培养25小时，即得接种种液；成熟的种液如果不及时用，需要保存在4℃冰箱内，有效期为10天。

[0068] c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为38℃下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；

[0069] d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入36乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附3分钟，即36倍重量的麦芽粉与1倍重量的乳酸菌培养液混合，然后加入2吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅7分钟，即2倍重量的面包酵母粉与1倍重量的乳酸菌培养液（吸附后的）混合，面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母菌，制得畜禽发酵饲料用复合菌制剂，将复合菌制剂进行真空装袋保存。

[0070] 本实施例的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为0.2%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂,就能很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。

[0071] 本实施例中，所述厌氧乳酸菌为嗜热链球菌；本实施例中，将嗜热链球菌按同等重量比替换为粪肠球菌、屎肠球菌中的一种，或者按照同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌、屎肠球菌中的混合物，均得到合格的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，所得产品性质并无明显差别。

[0072] 本实施例制得的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，含水量为0.75%，在真空包装条件下存放6个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在62%。

[0073] 实施例八

[0074] a.制备待接种的液体乳酸菌培养基：将红糖与未经稀释且不含抗生素的牛奶按重量比为红糖：牛奶=1:20混合搅拌至红糖完全溶解，然后分装在三角瓶中，瓶口用棉塞封口，外包牛皮纸密封存储，并在温度为108℃之下消毒18分钟，然后冷却至常温即为待接种