包含莫匹罗星的软膏药物组合物

摘要

本发明涉及包含莫匹罗星的软膏药物组合物。具体地说，本发明涉及一种软膏药物组合物，其中包含：下式所示莫匹罗星或其药学可接受的盐、聚乙二醇和无机酸，本发明所述聚乙二醇包括分子量为200~600的聚乙二醇和分子量为2000~6000的聚乙二醇。本发明软膏药物组合物具有优良药学特点。

权利要求

1.一种软膏药物组合物，其中包含：下式所示莫匹罗星或其药学可接受的盐、分子量为200～600的聚乙二醇、分子量为2000～6000的聚乙二醇和硼酸，其中，该软膏药物组合物每100克中包含：莫匹罗星或其药学可接受的盐：1～3g，分子量为2000～6000的聚乙二醇：15～25g，硼酸：0.1～1g，

任选的药学可接受的辅料：0～2g，和分子量为200～600的聚乙二醇：适量，加至100g。

2.根据权利要求1的软膏药物组合物，其中所述莫匹罗星的药学可接受的盐是莫匹罗星的钙盐。

3.根据权利要求1的软膏药物组合物，其中所述莫匹罗星的药学可接受的盐是下式所示的莫匹罗星钙盐的二水合物：

4.根据权利要求1的软膏药物组合物，其中所述分子量为200～600的聚乙二醇是分子量为200-400的聚乙二醇。

5.根据权利要求1的软膏药物组合物，其中所述分子量为2000～6000的聚乙二醇是分子量为2000-4000的聚乙二醇。

6.根据权利要求1的软膏药物组合物，其中所述药学可接受的辅料选自：温感调节剂、防腐剂、增稠剂。

7.根据权利要求1的软膏药物组合物，其每100克中包含：莫匹罗星或其药学可接受的盐：1～3g，分子量为2000～4000的聚乙二醇：15～25g，硼酸：0.1～1g，

任选的药学可接受的辅料：0～2g，和分子量为200～400的聚乙二醇：适量，加至100g。

8.根据权利要求1的软膏药物组合物，其每100克中包含：

9.根据权利要求1的软膏药物组合物，其每100克中包含：

10.根据权利要求1的软膏药物组合物，其每100克中包含：

11.根据权利要求1的软膏药物组合物，其每100克中包含：

12.根据权利要求1的软膏药物组合物，其每100克中包含：

13.根据权利要求1的软膏药物组合物，其每100克中包含：

14.根据权利要求1的软膏药物组合物，其每100克中包含：

15.根据权利要求1的软膏药物组合物，其每100克中包含：

16.根据权利要求1的软膏药物组合物，其每100克中包含：

17.根据权利要求1的软膏药物组合物，其每100克中包含：

18.制备权利要求1-17任一项所述软膏药物组合物的方法，其包括以下步骤：(1)使硼酸和任选的药学可接受的辅料溶解于适量的分子量为200～600的聚乙二醇中，得到混合物；

(2)向步骤(1)的混合物中加入莫匹罗星或其药学可接受的盐，搅拌溶解；

(3)将分子量为2000～6000的聚乙二醇加热至熔融，然后将其在搅拌下加入到步骤(2)所得物料中，搅拌均匀；

(4)补加分子量为200～600的聚乙二醇至全量，混合均匀，即得。

说明书

包含莫匹罗星的软膏药物组合物

技术领域

[0001] 本发明涉及新的包含莫匹罗星的软膏药物组合物，以及该组合物的制备方法。

背景技术

[0002] 莫匹罗星(Mupirocin)又名假单孢菌酸A，由荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)分离出，是一种比较理想的皮肤表面抗菌制剂，在1985年由葛兰素史克以“百多邦”(Bactroban)为商品名推向市场。美国FDA在1987年批准该药在美国上市使用，我国在1993年批准中美史克制药生产和销售该药品。莫匹罗星主要用于预防和治疗革兰氏阳性球菌引起的皮肤细菌感染疾病，例如脓疱病、疖肿、毛囊炎等原发性皮肤感染，及湿疹合并感染、溃疡合并感染、创伤合并感染等继发性皮肤感染疾病。莫匹罗星抗菌作用的主要机理在于抑制细菌体内的蛋白质合成。具体而言，莫匹罗星作用在细菌体内的异亮氨酸-tRNA合成酶与异亮氨酸的结合点上，从而阻碍氨基酸的合成，也消耗了细胞内的tRNA，使RNA的合成及蛋白质的合成过程中止。

[0003] 莫匹罗星的化学名为9-[[(2E)-4-[(2S,3R,4R,5S)-5-[(2S,3S,4S,5S)-2,3-环氧-5-羟基-4-甲基己基]-3,4-二羟基-3,4,5,6-四氢-2H-吡喃-2-基]-3-甲基丁-2-烯酰基]氧基]壬酸，分子式为C26H44O9，分子量为500.6，化学结构式为：

[0004]

[0005] 目前，临床应用中，莫匹罗星的主要制剂有莫匹罗星钙霜剂(以莫匹罗星钙为活性成分)和莫匹罗星软膏剂(以莫匹罗星为活性成分)两种。现有的中美天津史克制药有限公司生产和销售的莫匹罗星软膏，其活性成分为莫匹罗星，软膏基质为聚乙二醇400(平均分子量为400，下同)和聚乙二醇3350。

[0006] 尽管如此，本领域仍然期待有莫匹罗星的新方法配制的产品特别是临床使用的制剂，这种新的制剂期待有至少一个方面的优良药学特点。

发明内容

[0007] 本发明的目的在于提供一种新的配制莫匹罗星的方法，以配制成产品特别是临床使用的制剂，并赋予这种新的制剂具有至少一个方面的优良药学特点。本发明人惊奇地发现具有本发明所述配方的莫匹罗星软膏药物组合物获得了令人期待的效果，本发明基于此而得以完成。

[0008] 在本发明的第一个方面，提供了一种软膏药物组合物，其中包含：下式所示莫匹罗星或其药学可接受的盐、聚乙二醇和无机酸，

[0009]

[0010] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其包含莫匹罗星或其药学可接受的盐、分子量为200~600的聚乙二醇、分子量为2000~6000的聚乙二醇、和无机酸。

[0011] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其中所述莫匹罗星的药学可接受的盐是莫匹罗星的钙盐或其溶剂合物。

[0012] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其中所述莫匹罗星的药学可接受的盐是莫匹罗星的钙盐或其水合物。

[0013] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其中所述莫匹罗星的药学可接受的盐是下式所示的莫匹罗星钙盐的二水合物：

[0014]

[0015] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其中所述分子量为200~600的聚乙二醇是分子量为200-400的聚乙二醇。例如所述分子量为200~600的聚乙二醇是分子量为200、300、400的聚乙二醇或其组合。

[0016] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其中所述分子量为200~600的聚乙二醇是分子量为400的聚乙二醇。

[0017] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其中所述分子量为2000~6000的聚乙二醇是分子量为2000-4000的聚乙二醇。例如所述分子量为2000~4000的聚乙二醇是分子量为2000、3000、3350、4000的聚乙二醇或其组合。

[0018] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其中所述分子量为2000~6000的聚乙二醇是分子量为3350的聚乙二醇。

[0019] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其中所述无机酸是硼酸。

[0020] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其中还包括任选的药学可接受的辅料。其是不同于上述聚乙二醇和硼酸的辅料。

[0021] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其每100克中包含：

[0022] 莫匹罗星或其药学可接受的盐：0.5~5g，

[0023] 分子量为2000~6000的聚乙二醇：10~30g,

[0024] 无机酸：0.01~2g，

[0025] 任选的药学可接受的辅料：0~5g，和

[0026] 分子量为200~600的聚乙二醇：适量，加至100g。

[0027] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其每100克中包含：

[0028] 莫匹罗星或其药学可接受的盐：1~3g，

[0029] 分子量为2000~6000的聚乙二醇：15~25g，

[0030] 无机酸：0.1~1g，

[0031] 任选的药学可接受的辅料：0~2g，和

[0032] 分子量为200~600的聚乙二醇：适量，加至100g。

[0033] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其每100克中包含：

[0034] 莫匹罗星或其药学可接受的盐：1~3g，

[0035] 分子量为2000~4000的聚乙二醇：15~25g，

[0036] 无机酸：0.1~1g，

[0037] 任选的药学可接受的辅料：0~2g，和

[0038] 分子量为200~400的聚乙二醇：适量，加至100g。

[0039] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其每100克中包含：

[0040] 莫匹罗星： 1.5g

[0041] PEG4000： 18g

[0042] 硼酸： 0.25g

[0043] PEG400： 适量，加至100克。

[0044] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其每100克中包含：

[0045] 莫匹罗星： 2g

[0046] PEG3350： 19g

[0047] 硼酸： 0.5g

[0048] PEG400： 适量，加至100克。

[0049] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其每100克中包含：

[0050] 莫匹罗星： 2.5g

[0051] PEG3350： 20g

[0052] 硼酸： 0.75g

[0053] PEG300： 适量，加至100克。

[0054] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其每100克中包含：

[0055] 莫匹罗星： 3g

[0056] PEG3000： 15g

[0057] 硼酸： 1g

[0058] PEG600： 适量，加至100克。

[0059] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其每100克中包含：

[0060]

[0061]

[0062] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其每100克中包含：

[0063] 莫匹罗星： 2g

[0064] PEG6000： 15g

[0065] 硼酸： 0.5g

[0066] PEG200： 适量，加至100克。

[0067] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其每100克中包含：

[0068] 莫匹罗星： 2g

[0069] PEG4000： 15g

[0070] 硼酸： 0.6g

[0071] 冰片： 0.5g

[0072] PEG300： 适量，加至100克。

[0073] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其每100克中包含：

[0074]

[0075] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其每100克中包含：

[0076] 莫匹罗星钙： 3g

[0077] PEG2000： 25g

[0078] 硼酸： 0.6g

[0079] PEG400： 适量，加至100克。

[0080] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其每100克中包含：

[0081] 莫匹罗星： 2.5g

[0082] PEG4000： 15g

[0083] 硼酸： 0.2g

[0084] 薄荷： 0.2g

[0085] PEG200： 适量，加至100克。

[0086] 根据本发明第一方面的软膏药物组合物，其中所述任选的药学可接受的辅料例如但不限于温感调节剂(例如冰片、薄荷脑、薄荷油)、防腐剂(例如苯甲醇)、增稠剂(例如卡波姆、分子量大于6000的聚乙二醇)等。

[0087] 本发明第二方面提供了制备本发明第一方面所述软膏药物组合物的方法，其包括以下步骤：

[0088] (1)使无机酸和任选的药学可接受的辅料溶解于适量的分子量为200~600的聚乙二醇中，得到混合物；

[0089] (2)向步骤(1)的混合物中加入莫匹罗星或其药学可接受的盐，搅拌溶解；

[0090] (3)将分子量为2000~6000的聚乙二醇加热至熔融，然后将其在搅拌下加入到步骤(2)所得物料中，搅拌均匀；

[0091] (4)补加分子量为200~600的聚乙二醇至全量，混合均匀，即得。

[0092] 根据本发明第二方面的方法，其中步骤(1)中分子量为200~600的聚乙二醇的加入量可以是该组分大致用量的50~95%。在相应组分充分溶解或混匀的前提下，在步骤(1)中适当少加入分子量为200~600的液状聚乙二醇有助于步骤(1)至步骤(3)配液更容易均匀，并且在执行步骤(4)的终混工艺之前可以在较小的配液容器中操作。由于本发明所述无机酸、莫匹罗星或其药学可接受的盐以及任选的药学可接受的辅料在液状聚乙二醇中的溶解性较好，因此步骤(1)中预先使用“适量”的液状聚乙二醇是有利的，并且此“适量”是本领域技术人员根据已有知识和经验容易控制或调整的。另外，在例如下文实施例中表述液状聚乙二醇的用量时，“适量，加至100克”表示加入的量可以不作精确确定，只要最终产物总量达到相应规定的100克。

[0093] 根据本发明第二方面的方法，其中步骤(3)中，将固态聚乙二醇熔融后，加入到步骤(2)所得物料中时，如有必要，可以将步骤(2)所得物料预先温热到40~50°C，以便固态聚乙二醇与前面的物料混合均匀。

[0094] 本发明任一方面或该任一方面的任一实施方案所具有的任一技术特征同样适用其它任一实施方案或其它任一方面的任一实施方案，只要它们不会相互矛盾，当然在相互之间适用时，必要的话可对相应特征作适当修饰。下面对本发明的各个方面和特点作进一步的描述。

[0095] 本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。

[0096] 在本发明中，活性成分莫匹罗星或其药学可接受的盐是本领域技术人员公知的，并且可以从市场购买获得或根据已有文献方法获得。例如欧洲药典、日本药典等已收载了莫匹罗星或其药学可接受的盐的一些技术信息。

[0097] 在本发明中，使用到两类聚乙二醇，一类是液状的低分子量的聚乙二醇，特别是分子量为200~600的聚乙二醇；另一类是固体的高分子量的聚乙二醇，特别是分子量为2000~6000的聚乙二醇。两类聚乙二醇组合使用可以为本发明软膏组合物提供良好的物理性能，例如涂布性能，并且由于它们是水溶性高分子材料而容易洗除，比之于油性基质的软膏有更好的患者顺应性。

[0098] 在本发明中，提及聚乙二醇的分子量时，其具有本领域技术人员公知的含义，并且通常而言所述分子量是聚乙二醇的平均分子量，例如使用到分子量为400的聚乙二醇是指平均分子量为400的聚乙二醇。

[0099] 在本发明中，聚乙二醇可以用PEG表示，例如分子量为400的聚乙二醇可以表示为PEG400。

[0100] 在本发明组合物中，提及莫匹罗星或其药学可接受的盐的量时，均以莫匹罗星游离酸计。例如当直接以莫匹罗星加入组合物中时，直接以莫匹罗星的量计；而当以莫匹罗星的药学可接受的盐加入时，其加入量折算成相当于莫匹罗星的量计，例如要配制100克2%莫匹罗星钙软膏时，如以下式钙盐二水合物投料，则理论投料量应为2.15克，此2.15克相当于2克莫匹罗星游离酸：

[0101]

[0102] 在本发明中，提及莫匹罗星钙时，如未另外说明，是指具有上式所示莫匹罗星的钙盐的二水合物。

[0103] 本发明提供的莫匹罗星软膏适用于革兰氏阳性球菌引起的皮肤感染如脓皮病、毛囊炎、疖肿等原发性感染的治疗；对湿疹、皮炎、糜烂、溃疡继发感染可起到抗菌及制止原发病加重的作用，有利于原发病治疗；对降低皮肤外科手术后伤口化脓十分有效。较适宜的是，本发明所述软膏采用局部施用方式，可通过将冷却产物装填在可折迭的金属或塑料管中。

[0104] 另外，本发明所述软膏还可以含有适宜的常规添加剂例如防腐剂以及有助于药物渗透的溶剂和软膏中的润肤剂。

[0105] 所述软膏中还可以含有其他常规载体。

[0106] 如果需要，在所述方法的任何适宜步骤中，可将原料组分磨细。

[0107] 如果需要，在所述方法中也可以包括适宜的灭菌步骤。

[0108] 本发明不受任何理论的约束，出人意料地发现具有本发明配方特别是具有本发明所述特定比率的无机酸所制成的软膏剂药物组合物具有例如但不限于稳定性等方面具有良好的药学性能。

具体实施方式

[0109] 下面通过具体的实施例/实验例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例和实验例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。

[0110] 本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和操作方法是本领域公知的。

[0111] I、制备实施例部分

[0112] 实施例1：制备包含莫匹罗星的软膏组合物(以100克量配制)

[0113] 配方：

[0114]

[0115] 制法：照以下一般性的步骤进行。

[0116] (1)使硼酸(后面实施例或者对照例中如果存在的话，此时同时加入其它药学可接受的辅料)溶解于适量(约为处方预计用量的70%)的低分子量的液状聚乙二醇中，得到混合物；

[0117] (2)向步骤(1)的混合物中加入活性成分，搅拌溶解；

[0118] (3)将高分子量的固态聚乙二醇加热至熔融，然后将其在搅拌下加入到步骤(2)所得物料(约40°C)中，搅拌均匀；

[0119] (4)补加低分子量的液状聚乙二醇至全量，混合均匀，放冷至室温，即得本发明软膏药物组合物。

[0120] 可以将上述组合物分装到软膏包装用铝管中，每管2g、5g、10g、或20g，为软膏剂。

[0121] 实施例2：制备包含莫匹罗星的软膏组合物(以100克量配制)

[0122] 配方：

[0123]

[0124] 制法：参考实施例1的方法进行。步骤(1)中低分子量液状聚乙二醇加入量是处方预计用量的50%。

[0125] 实施例3：制备包含莫匹罗星的软膏组合物(以100克量配制)

[0126] 配方：

[0127]

[0128] 制法：参考实施例1的方法进行。步骤(1)中低分子量液状聚乙二醇加入量是处方预计用量的95%。

[0129] 实施例4：制备包含莫匹罗星的软膏组合物(以100克量配制)

[0130] 配方：

[0131]

[0132] 制法：参考实施例1的方法进行。

[0133] 实施例5：制备包含莫匹罗星的软膏组合物(以100克量配制)

[0134] 配方：

[0135]

[0136] 制法：参考实施例1的方法进行。使用PEG200和PEG400两者组合作为低分子量PEG，其中处方量的PEG400在步骤(1)中加入。步骤(3)中将高分子量的固态聚乙二醇加热至熔融，然后将其在搅拌下加入到室温状态下的步骤(2)所得物料中。

[0137] 实施例6：制备包含莫匹罗星的软膏组合物(以100克量配制)

[0138] 配方：

[0139]

[0140] 制法：参考实施例1的方法进行。步骤(3)中将高分子量的固态聚乙二醇加热至熔融，然后将其在搅拌下加入到步骤(2)所得物料(50°C)中。

[0141] 实施例7：制备包含莫匹罗星的软膏组合物(以100克量配制)

[0142] 配方：

[0143]

[0144] 制法：参考实施例1的方法进行。

[0145] 实施例8：制备包含莫匹罗星的软膏组合物(以100克量配制)

[0146] 配方：

[0147]

[0148] 制法：参考实施例1的方法进行。使用PEG3350和PEG4000两者作为高分子量PEG。PEG20000与PEG3350和PEG4000一起熔融加入到处方中。

[0149] 实施例9：制备包含莫匹罗星的软膏组合物(以100克量配制)

[0150] 配方：

[0151]

[0152] 制法：参考实施例1的方法进行。

[0153] 实施例10：制备包含莫匹罗星的软膏组合物(以100克量配制)

[0154] 配方：

[0155]

[0156] 制法：参考实施例1的方法进行。

[0157] II、对照例部分

[0158] 对照例1：制备含莫匹罗星的软膏组合物

[0159] 配方：

[0160]

[0161] 制备方法：将柠檬酸溶解于聚乙二醇400中，再加入聚乙二醇4000，在60℃的水浴中加热至熔融，再加入莫匹罗星，在60℃的水浴中搅拌使莫匹罗星溶解，均匀混合，冷却至室温，即得莫匹罗星软膏。

[0162] 对照例2：制备含莫匹罗星的软膏组合物

[0163] 配方：

[0164]

[0165]

[0166] 制备方法：将酒石酸溶解于聚乙二醇400中，再加入聚乙二醇4000，在55℃的水浴中加热至熔融，再加入莫匹罗星，在55℃的水浴中搅拌使莫匹罗星溶解，均匀混合，冷却至室温，即得莫匹罗星软膏。

[0167] 对照例3：制备含莫匹罗星的软膏组合物

[0168] 配方：

[0169]

[0170] 制备方法：将乳酸溶解于聚乙二醇400中，再加入聚乙二醇4000，在60℃的水浴中加热至熔融，再加入莫匹罗星，在60℃的水浴中搅拌使莫匹罗星溶解，均匀混合，冷却至室温，即得莫匹罗星软膏。

[0171] 对照例4：制备含莫匹罗星的软膏组合物

[0172] 除了在配方中不加硼酸外，其它组成和制法与实施例2相同。

[0173] 对照例5：制备含莫匹罗星的软膏组合物

[0174] 除了在配方中不加硼酸外，其它组成和制法与实施例9相同。

[0175] 对照例6：制备含莫匹罗星的软膏组合物

[0176] 除了将配方中的硼酸改用枸橼酸外，其它组成和制法与实施例1相同。

[0177] 对照例7：制备含莫匹罗星的软膏组合物

[0178] 除了将配方中的硼酸改用枸橼酸外，其它组成和制法与实施例2相同。

[0179] 对照例8：制备含莫匹罗星的软膏组合物

[0180] 除了将配方中的硼酸改用枸橼酸外，其它组成和制法与实施例3相同。

[0181] III、试验例部分

[0182] 试验例1、组合物的质量分析方法

[0183] 现有技术中记载了多种对莫匹罗星进行质量评价分析的方法，例如欧洲药典5.4版(EP5.4)以及英国药典2009版(EP2009)，这些分析方法均可用于进行莫匹罗星原料以及包含它们制剂的质量评价分析。

[0184] 例如EP5.4中记载的莫匹罗星原料有关物质检测方法如下：

[0185] 有关物质检测，照高效液相色谱法进行。

[0186] 测试溶液：将含有约50.0mg活性成分的待检物质溶解于混合溶剂(甲醇与13.6g/l乙酸钠溶液等体积混合，用乙酸调节至pH4.0)，再用相同的混合溶剂稀释至10ml。

[0187] 参比溶液(a)：将1.0ml的测试溶液用混合溶剂(甲醇与13.6g/l乙酸钠溶液等体积混合，用乙酸调节至pH4.0)稀释至50.0ml。

[0188] 参比溶液(b)：用盐酸将10ml参比溶液(a)调节至pH2.0，再放置20h。

[0189] 参比溶液(c)：将25mg莫匹罗星锂(CRS)溶解于混合溶剂(甲醇与13.6g/l乙酸钠溶液等体积混合，用乙酸调节至pH4.0)，再用相同的混合溶剂稀释至200.0ml。

[0190] 使用以下设备进行色谱操作：

[0191] —色谱柱：0.25m长，内径4.6mm，填充物为色谱用辛烷基硅烷键合硅胶(5μm)，[0192] —流动相：20体积水、30体积四氢呋喃和50体积10.5g/l预先用乙酸调节至pH5.7的乙酸铵溶液的混合物为流动相，流速为1ml/min，

[0193] —检测器，紫外分光光度计，波长240nm。

[0194] 向仪器中注入20μl参比溶液(b)。参比溶液(b)中两个主要杂质峰中第2个峰与莫匹罗星峰之间的分离度应大于7。向仪器中注入20μl参比溶液(c)。在前述条件下记录色谱图，杂质C的保留时间相对于莫匹罗星而言为约0.75。向仪器中注入20μl测试溶液和20μl参比溶液(a)。连续记录测试溶液色谱图至莫匹罗星保留时间的3.5倍。在测试溶液的色谱图中：杂质C的峰面积不大于参比溶液(a)色谱图中主峰面积的2倍(4%)；除了主峰和杂质C峰以外的其它任何峰的面积不大于参比溶液(a)色谱图中主峰面积的一半(1%)；除主峰之外的全部峰面积之和不大于参比溶液(a)色谱图中主峰面积的3倍(6%)。忽略比参比溶液(a)色谱图中主峰面积的0.05倍小的峰。

[0195] 含量测定亦可参照上述方法进行。

[0196] 例如BP2009中记载的莫匹罗星原料有关物质检测方法如下：

[0197] 有关物质测定：

[0198] (1)供试品溶液和对照溶液的准备：精密称取本品适量(约相当于莫匹罗星25mg)，置50mL容量瓶中，加0.1mol/L且pH为6.3的磷酸盐缓冲液溶解并定容至刻度，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1mL，置100mL容量瓶中，加0.1mol/L且pH为6.3的磷酸盐缓冲液稀释至刻度，作为对照溶液；

[0199] (2)色谱条件与系统适用性试验：用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂(加C8的不锈钢预柱)；以四氢呋喃：7.7g/L醋酸铵(用冰醋酸调节pH值至5.7)(28：72)为流动相；检测波长为240nm，莫匹罗星峰与其相对保留时间为0.73的峰(莫匹罗星杂质C)的分离度不得小于3.5；

[0200] (3)测定：精密量取供试品溶液和对照溶液各20uL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液的色谱图中，杂质C峰面积不得大于对照溶液主峰面积的4倍(4%)；杂质D(相对保留时间0.6)峰面积不得大于对照溶液主峰面积的5倍(5%)；杂质E(相对保留时间0.64)峰面积不得大于对照溶液主峰面积的10倍(10%)；其它单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1.5倍(1.5%)；总杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的20倍(20%)；供试品溶液色谱图中小于对照溶液主峰面积0.1倍(0.1%)的峰忽略不计。

[0201] 莫匹罗星含量的测定：

[0202] (1)色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈：0.05mol/L且pH为6.3磷酸盐缓冲液(28：72)为流动相；检测波长为230nm。莫匹罗星峰与其相对保留时间为0.75的峰(莫匹罗星杂质C)的分离度不得小于1.5；

[0203] (2)测定：精密称取本品适量(约相当于莫匹罗星12.5mg)，置50mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取滤液20uL注入液相色谱仪，记录色谱图；另取莫匹罗星对照品，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得莫匹罗星含量。

[0204] 对于本发明而言，本发明组合物中有关物质和含量测定方法参照BP2009中的方法进行，特别是在进行本发明组合物有关物质时，照BP2009中的色谱条件和要求进行，使色谱条件调节至莫匹罗星峰与其相对保留时间为0.73的峰(莫匹罗星杂质C)的分离度不得小于3.5；然后用BP2009中的方法，测定本发明组合物的供试溶液，从而可以计算某些单个杂质的量或者总杂质的量。

[0205] 试验例2、硼酸用量的考察

[0206] 参考实施例1的方法，每100g的软膏组合物基本配方为：莫匹罗星2g、PEG4000为18g、硼酸量适当变化、PEG400加至100g。其中在不同配方中，硼酸的加入量分别为(每100g的软膏组合物中)：0g、0.01g、0.025g、0.05g、0.075g、0.1g、0.2g、0.3g、0.5g、0.6g、
0.8g、1.0g、1.25g、1.5g、1.75g、2g、2.5g、3g、5g。得到19个软膏组合物。

[0207] 将这19个软膏组合物密封装于铝质软膏管中，置于45°C恒温器中放置50天。测定相对于某样品未经高温处置而言，该样品中杂质C的变化倍数和总杂质的变化倍数。

[0208] 上述杂质C的“变化倍数”是指，对于某个配方的样品，其未经45°C高温处置而是置于4-8°C冰箱中放置50天，此时的杂质C百分数为X1；该样品经45°C高温处置50天后杂质C百分数为X2，则将杂质C的变化倍数=X2÷X1，此变化倍数越接近于1，则表示杂质变化量越小；当杂质C增加时，该倍数就大于1。类似地，可以计算总杂质的变化倍数。不同硼酸加入量的配方及其杂质变化倍数见下表1。结果显示，无机酸的量仅仅是在一定量的范围内显示出良好的结果，加入量过大或过小均无于产品质量的稳定性。

[0209] 表1：

[0210]