一种高含量r-氨基丁酸青稞红曲及其制备方法转让专利
申请号 : CN201210379855.0
文献号 : CN102885303B
文献日 : 2014-04-02
发明人 : 赵辉 , 万强 , 熊燕 , 刘敏
申请人 : 西藏月王生物技术有限公司
摘要 :
一种高含量r-氨基丁酸青稞红曲及其制备方法,属于生物技术食品领域，尤其涉及一种青稞红曲及其制备方法。它按以下步骤制得：、制备斜面培养基、制备种子培养基、制备青稞坯芽、制备青稞坯芽培养基、制备红曲霉发酵种子液、接种、发酵，干燥。本发明具有的有益效果是：本发明方法经过两步法提高天然r-氨基丁酸的含量：第一步是利用青稞发芽培养过程中自身的谷氨酸脱羧酶的作用催化谷氨酸或谷氨酸钠转化成r-氨基丁酸；第二步是红曲菌与青稞坯芽结合，利用红曲霉菌生长代谢时将青稞中淀粉质部分作为自身的营养代谢能源，产生代谢产物r-氨基丁酸，并生物转化多余的谷氨酸钠，提高r-氨基丁酸的含量。
权利要求 :
1.一种高含量r-氨基丁酸青稞红曲，其特征在于按以下步骤制得：
1）制备斜面培养基：
取马铃薯片18g、葡萄糖3g、蔗糖1g、酵母膏1g、蛋白胨0.5g、琼脂粉2g搅拌均匀，调pH5.5，装瓶后121℃灭菌30分钟；
2）制备种子培养基：
取葡萄糖5g、酵母膏0.3g、谷氨酸钠0.4g、硝酸钠0.2g、硫酸镁0.05g、磷酸二氢钾
0.1g、硫酸铁0.001g搅拌均匀，调pH5.5，分装罐后121℃灭菌30分钟；
3）制备青稞坯芽：
取颗粒饱满青稞，清洗后用清水浸泡24小时，沥干，放入25℃的培养箱中活化48小时，活化期间，分别取浓度为30ml/L的维生素B6水溶液、浓度为6g/L的谷氨酸钠水溶液喷洒青稞表面，待青稞长出1-2毫米坯芽，停止活化，收集青稞坯芽；
4）制备青稞坯芽培养基：
向青稞坯芽中加入青稞坯芽重量20%的玉米粉、10%的黄豆粉，再加入水，使青稞坯芽保持含水率40%时，装瓶后125℃灭菌25分钟，制备成青稞坯芽培养基备用；
5）制备红曲霉发酵种子液：
在无菌条件下，将红曲霉菌株转接到斜面培养基30℃培养8天，红曲霉菌株的接种量是斜面培养基重量的0.01%，将无菌水加入到长有红曲菌的种子瓶中，加水量与斜面培养基等体积，将培养生长出的红曲菌丝体转入磁力搅拌机上打散，制得红曲孢子菌液，再将红曲孢子菌液转接到液体摇瓶，35℃振荡培养3天，再转接到发酵罐的种子培养基中，制备好红曲霉发酵种子液；
6）接种、发酵：
将红曲霉发酵种子液接种到青稞坯芽培养基中，30℃培养12天，红曲霉发酵种子液的接种量是青稞坯芽培养基重量的2%；
7）干燥：
将发酵完毕的青稞坯芽培养基75℃干燥12小时，粉碎处理得高含量r-氨基丁酸青稞红曲。
2.权利要求1所述高含量r-氨基丁酸青稞红曲的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
1）制备斜面培养基：
取马铃薯片18g、葡萄糖3g、蔗糖1g、酵母膏1g、蛋白胨0.5g、琼脂粉2g搅拌均匀，调pH5.5，装瓶后121℃灭菌30分钟；
2）制备种子培养基：
取葡萄糖5g、酵母膏0.3g、谷氨酸钠0.4g、硝酸钠0.2g、硫酸镁0.05g、磷酸二氢钾
0.1g、硫酸铁0.001g搅拌均匀，调pH5.5，分装罐后121℃灭菌30分钟；
3）制备青稞坯芽：
取颗粒饱满青稞，清洗后用清水浸泡24小时，沥干，放入25℃的培养箱中活化48小时，活化期间，分别取浓度为30ml/L的维生素B6水溶液、浓度为6g/L的谷氨酸钠水溶液喷洒青稞表面，待青稞长出1-2毫米坯芽，停止活化，收集青稞坯芽；
4）制备青稞坯芽培养基：
向青稞坯芽中加入青稞坯芽重量20%的玉米粉、10%的黄豆粉，再加入水，使青稞坯芽保持含水率40%时，装瓶后125℃灭菌25分钟，制备成青稞坯芽培养基备用；
5）制备红曲霉发酵种子液：
在无菌条件下，将红曲霉菌株转接到斜面培养基30℃培养8天，红曲霉菌株的接种量是斜面培养基重量的0.01%，将无菌水加入到长有红曲菌的种子瓶中，加水量与斜面培养基等体积，将培养生长出的红曲菌丝体转入磁力搅拌机上打散，制得红曲孢子菌液，再将红曲孢子菌液转接到液体摇瓶，35℃振荡培养3天，再转接到发酵罐的种子培养基中，制备好红曲霉发酵种子液；
6）接种、发酵：
将红曲霉发酵种子液接种到青稞坯芽培养基中，30℃培养12天，红曲霉发酵种子液的接种量是青稞坯芽培养基重量的2%；
7）干燥：
将发酵完毕的青稞坯芽培养基75℃干燥12小时，粉碎处理得高含量r-氨基丁酸青稞红曲。
说明书 :
一种高含量r-氨基丁酸青稞红曲及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明属于生物技术食品领域，尤其涉及一种青稞红曲及其制备方法。
背景技术
[0002] r-氨基丁酸（GABA）是一种抑制性神经递质，具有降血压、改善记忆力、预防癫痫、预防老年痴呆、舒缓压力、抗衰老等功效，是目前国际推荐的一种功能性食品因子。GABA广泛分布在动物、植物和微生物中。以食用植物（如茶叶、桑叶）、粮食（如稻米、米胚芽）、农副产品如米糠等进行GABA富集，可以实现以这些原料加工的食品GABA强化。但是其GABA含量很低，要从这些原料提取GABA作为食品添加剂或制成保健品非常困难。据陈体强等人（参海峡药学[J],2005年，第17卷第5期）的测定，红曲中r-氨基丁酸的含量仅为0.419mg/g。公开号CN101240301的中国发明专利公开了一种固态发酵制备r-氨基丁酸的方法，是利用从腐乳中分离出的红曲霉进行发酵，制备的红曲r-氨基丁酸最高含量为0.35mg/g。GABA的化学合成由于缺乏安全性，不适宜作为食品添加剂或医用GABA。利用食品安全级的微生物合成法生产GABA是一条较理想的途径。
[0003] 青稞是生长在高海拔高寒地区的粮食作物，具有适应性广、耐寒、耐低温、抗旱性强、产量低等特点。整个青稞颗粒饱满，胚芽、胚乳都含有丰富的营养物质，淀粉含量丰富，可以作为微生物生长代谢的能量源。
[0004] 如何利用生物的方法获得高含量的红曲r-氨基丁酸作为增强红曲的降血压功效一直是研究的热点。
发明内容
[0005] 本发明的目的就是针对传统红曲中r-氨基丁酸含量较低的问题而提供一种高含量r-氨基丁酸青稞红曲，以及它的制备方法。其技术方案如下：
[0006] 一种高含量r-氨基丁酸青稞红曲，按以下步骤制得：
[0007] 1）制备斜面培养基：
[0008] 取马铃薯片18-20份、葡糖糖2-3份、蔗糖1-2份、酵母膏0.5-1份、蛋白胨0.5-1份、琼脂粉1-2份搅拌均匀，调pH5.5，装瓶后121℃灭菌30分钟；
[0009] 2）制备种子培养基：
[0010] 取葡糖糖5-7份、酵母膏0.2-0.3份、谷氨酸钠0.4-0.6份、硝酸钠0.1-0.2份、硫酸镁0.05份、磷酸二氢钾0.1份、硫酸铁0.001份搅拌均匀，调pH5.5，分装罐后121℃灭菌30分钟
[0011] 3）制备青稞坯芽：
[0012] 取青稞活化，活化期间，分别取浓度为30ml/L的维生素B6水溶液、浓度为6g/L的谷氨酸钠水溶液喷洒青稞表面，待青稞长出1-2毫米坯芽，停止活化，收集青稞坯芽；
[0013] 4）制备青稞坯芽培养基：
[0014] 向青稞坯芽加入水，使青稞坯芽保持含水率40%—50%时，装瓶后121℃-125℃灭菌25-28分钟，制备成青稞坯芽培养基备用；
[0015] 5）制备红曲霉发酵种子液：
[0016] 将红曲霉菌株转接到斜面培养基30℃-35℃培养6-8天，红曲霉菌株的接种量是斜面培养基重量的0.01-0.05%，将培养生长出的红曲菌丝体打散，制得红曲孢子菌液，再将红曲孢子菌液转接到液体摇瓶，30℃—35℃振荡培养3-4天，再转接到种子培养基中，制备好红曲霉发酵种子液；
[0017] 6）接种、发酵：
[0018] 将红曲霉发酵种子液接种到青稞坯芽培养基中，30℃—35℃培养8-12天，红曲霉发酵种子液的接种量是青稞坯芽培养基重量的2—6%。
[0019] 7）干燥：
[0020] 将发酵完毕的青稞坯芽培养基75℃-80℃干燥10—12小时，粉碎处理得高含量r-氨基丁酸青稞红曲。
[0021] 一种高含量r-氨基丁酸青稞红曲的制备方法，包括以下步骤：
[0022] 1）制备斜面培养基：
[0023] 取马铃薯片18-20份、葡糖糖2-3份、蔗糖1-2份、酵母膏0.5-1份、蛋白胨0.5-1份、琼脂粉1-2份搅拌均匀，调pH5.5，装瓶后121℃灭菌30分钟；
[0024] 2）制备种子培养基：
[0025] 取葡糖糖5-7份、酵母膏0.2-0.3份、谷氨酸钠0.4-0.6份、硝酸钠0.1-0.2份、硫酸镁0.05份、磷酸二氢钾0.1份、硫酸铁0.001份搅拌均匀，调pH5.5，分装罐后121℃灭菌30分钟
[0026] 3）制备青稞坯芽：
[0027] 取青稞活化，活化期间，分别取浓度为30ml/L的维生素B6水溶液、浓度为6g/L的谷氨酸钠水溶液喷洒青稞表面，待青稞长出1-2毫米坯芽，停止活化，收集青稞坯芽；
[0028] 4）制备青稞坯芽培养基：
[0029] 向青稞坯芽加入水，使青稞坯芽保持含水率40%—50%时，装瓶后121℃-125℃灭菌25-28分钟，制备成青稞坯芽培养基备用；
[0030] 5）制备红曲霉发酵种子液：
[0031] 将红曲霉菌株转接到斜面培养基30℃-35℃培养6-8天，红曲霉菌株的接种量是斜面培养基重量的0.01-0.05%，将培养生长出的红曲菌丝体打散，制得红曲孢子菌液，再将红曲孢子菌液转接到液体摇瓶，30℃—35℃振荡培养3-4天，再转接到种子培养基中，制备好红曲霉发酵种子液；
[0032] 6）接种、发酵：
[0033] 将红曲霉发酵种子液接种到青稞坯芽培养基中，30℃—35℃培养8-12天，红曲霉发酵种子液的接种量是青稞坯芽培养基重量的2—6%。
[0034] 7）干燥：
[0035] 将发酵完毕的青稞坯芽培养基75℃-80℃干燥10—12小时，粉碎处理得高含量r-氨基丁酸青稞红曲。
[0036] 与现有技术相比本发明具有的有益效果是：
[0037] 本发明方法经过两步法提高天然r-氨基丁酸的含量：第一步是利用青稞发芽培养过程中自身的谷氨酸脱羧酶的作用催化谷氨酸或谷氨酸钠转化成r-氨基丁酸；第二步是红曲菌与青稞坯芽结合，利用红曲霉菌生长代谢时将青稞中淀粉质部分作为自身的营养代谢能源，产生代谢产物r-氨基丁酸，并生物转化多余的谷氨酸钠，提高r-氨基丁酸的含量。
[0038] 通过采用以上技术方案，实验测得5批样品的r-氨基丁酸结果：
[0039]
[0040] 从以上可以看出，本发明青稞红曲r-氨基丁酸含量达到13000mg/kg以上，比现有技术制得的青稞红曲的r-氨基丁酸含量提高了300%以上。
具体实施方式
[0041] 实施例一：
[0042] 本实施例高含量r-氨基丁酸青稞红曲，按以下步骤制得：
[0043] 1）制备斜面培养基：
[0044] 取马铃薯片20g、葡糖糖2g、蔗糖2g、酵母膏0.5g、蛋白胨1g、琼脂粉1g搅拌均匀，调pH5.5，装瓶后121℃灭菌30分钟；
[0045] 2）制备种子培养基：
[0046] 取葡糖糖7g、酵母膏0.2g、谷氨酸钠0.6g、硝酸钠0.1g、硫酸镁0.05g、磷酸二氢钾0.1g、硫酸铁0.001g搅拌均匀，调pH5.5，分装罐后121℃灭菌30分钟
[0047] 3）制备青稞坯芽：
[0048] 取颗粒饱满青稞，清洗后用清水浸泡40小时，沥干，放入25℃的培养箱中活化36小时，活化期间，分别取浓度为30ml/L的维生素B6水溶液、浓度为6g/L的谷氨酸钠水溶液喷洒青稞表面，待青稞长出1-2毫米坯芽，停止活化，收集青稞坯芽；
[0049] 4）制备青稞坯芽培养基：
[0050] 向青稞坯芽加入水，使青稞坯芽保持含水率50%时，装瓶后121℃灭菌28分钟，制备成青稞坯芽培养基备用；
[0051] 5）制备红曲霉发酵种子液：
[0052] 在无菌条件下，将红曲霉菌株转接到斜面培养基35℃培养6天，红曲霉菌株的接种量是斜面培养基重量的0.05%，将无菌水加入到长有红曲菌的种子瓶中，加水量与斜面培养基等体积，将培养生长出的红曲菌丝体转入磁力搅拌机上打散，制得红曲孢子菌液，再将红曲孢子菌液转接到液体摇瓶，30℃振荡培养4天，再转接到发酵罐的种子培养基中，制备好红曲霉发酵种子液；
[0053] 6）接种、发酵：
[0054] 将红曲霉发酵种子液接种到青稞坯芽培养基中，35℃培养8天，红曲霉发酵种子液的接种量是青稞坯芽培养基重量的6%。
[0055] 7）干燥：
[0056] 将发酵完毕的青稞坯芽培养基80℃干燥10小时，粉碎处理得高含量r-氨基丁酸青稞红曲。
[0057] 本实施例青稞红曲r-氨基丁酸含量达到14000mg/kg。
[0058] 本实施例高含量r-氨基丁酸青稞红曲的制备方法包括以下步骤：
[0059] 1）制备斜面培养基：
[0060] 取马铃薯片20g、葡糖糖2g、蔗糖2g、酵母膏0.5g、蛋白胨1g、琼脂粉1g搅拌均匀，调pH5.5，装瓶后121℃灭菌30分钟；
[0061] 2）制备种子培养基：
[0062] 取葡糖糖7g、酵母膏0.2g、谷氨酸钠0.6g、硝酸钠0.1g、硫酸镁0.05g、磷酸二氢钾0.1g、硫酸铁0.001g搅拌均匀，调pH5.5，分装罐后121℃灭菌30分钟
[0063] 3）制备青稞坯芽：
[0064] 取颗粒饱满青稞，清洗后用清水浸泡40小时，沥干，放入25℃的培养箱中活化36小时，活化期间，分别取浓度为30ml/L的维生素B6水溶液、浓度为6g/L的谷氨酸钠水溶液喷洒青稞表面，待青稞长出1-2毫米坯芽，停止活化，收集青稞坯芽；
[0065] 4）制备青稞坯芽培养基：
[0066] 向青稞坯芽加入水，使青稞坯芽保持含水率50%时，装瓶后121℃灭菌28分钟，制备成青稞坯芽培养基备用；
[0067] 5）制备红曲霉发酵种子液：
[0068] 在无菌条件下，将红曲霉菌株转接到斜面培养基35℃培养6天，红曲霉菌株的接种量是斜面培养基重量的0.05%，将无菌水加入到长有红曲菌的种子瓶中，加水量与斜面培养基等体积，将培养生长出的红曲菌丝体转入磁力搅拌机上打散，制得红曲孢子菌液，再将红曲孢子菌液转接到液体摇瓶，30℃振荡培养4天，再转接到发酵罐的种子培养基中，制备好红曲霉发酵种子液；
[0069] 6）接种、发酵：
[0070] 将红曲霉发酵种子液接种到青稞坯芽培养基中，35℃培养8天，红曲霉发酵种子液的接种量是青稞坯芽培养基重量的6%。
[0071] 7）干燥：
[0072] 将发酵完毕的青稞坯芽培养基80℃干燥10小时，粉碎处理得高含量r-氨基丁酸青稞红曲。
[0073] 实施例二：
[0074] 本实施例高含量r-氨基丁酸青稞红曲，按以下步骤制得：
[0075] 1）制备斜面培养基：
[0076] 取马铃薯片18g、葡糖糖3g、蔗糖1g、酵母膏1g、蛋白胨0.5g、琼脂粉2g搅拌均匀，调pH5.5，装瓶后121℃灭菌30分钟；
[0077] 2）制备种子培养基：
[0078] 取葡糖糖5g、酵母膏0.3g、谷氨酸钠0.4g、硝酸钠0.2g、硫酸镁0.05g、磷酸二氢钾0.1g、硫酸铁0.001g搅拌均匀，调pH5.5，分装罐后121℃灭菌30分钟
[0079] 3）制备青稞坯芽：
[0080] 取颗粒饱满青稞，清洗后用清水浸泡24小时，沥干，放入25℃的培养箱中活化48小时，活化期间，分别取浓度为30ml/L的维生素B6水溶液、浓度为6g/L的谷氨酸钠水溶液喷洒青稞表面，待青稞长出1-2毫米坯芽，停止活化，收集青稞坯芽；
[0081] 4）制备青稞坯芽培养基：
[0082] 向青稞坯芽加入水，使青稞坯芽保持含水率40%时，装瓶后125℃灭菌25分钟，制备成青稞坯芽培养基备用；
[0083] 5）制备红曲霉发酵种子液：
[0084] 在无菌条件下，将红曲霉菌株转接到斜面培养基30℃培养8天，红曲霉菌株的接种量是斜面培养基重量的0.01%，将无菌水加入到长有红曲菌的种子瓶中，加水量与斜面培养基等体积，将培养生长出的红曲菌丝体转入磁力搅拌机上打散，制得红曲孢子菌液，再将红曲孢子菌液转接到液体摇瓶，35℃振荡培养3天，再转接到发酵罐的种子培养基中，制备好红曲霉发酵种子液；
[0085] 6）接种、发酵：
[0086] 将红曲霉发酵种子液接种到青稞坯芽培养基中，30℃培养12天，红曲霉发酵种子液的接种量是青稞坯芽培养基重量的2%。
[0087] 7）干燥：
[0088] 将发酵完毕的青稞坯芽培养基75℃干燥12小时，粉碎处理得高含量r-氨基丁酸青稞红曲。
[0089] 本实施例青稞红曲r-氨基丁酸含量达到16500mg/kg。
[0090] 本实施例高含量r-氨基丁酸青稞红曲的制备方法包括以下步骤：
[0091] 1）制备斜面培养基：
[0092] 取马铃薯片18g、葡糖糖3g、蔗糖1g、酵母膏1g、蛋白胨0.5g、琼脂粉2g搅拌均匀，调pH5.5，装瓶后121℃灭菌30分钟；
[0093] 2）制备种子培养基：
[0094] 取葡糖糖5g、酵母膏0.3g、谷氨酸钠0.4g、硝酸钠0.2g、硫酸镁0.05g、磷酸二氢钾0.1g、硫酸铁0.001g搅拌均匀，调pH5.5，分装罐后121℃灭菌30分钟
[0095] 3）制备青稞坯芽：
[0096] 取颗粒饱满青稞，清洗后用清水浸泡24小时，沥干，放入25℃的培养箱中活化48小时，活化期间，分别取浓度为30ml/L的维生素B6水溶液、浓度为6g/L的谷氨酸钠水溶液喷洒青稞表面，待青稞长出1-2毫米坯芽，停止活化，收集青稞坯芽；
[0097] 4）制备青稞坯芽培养基：
[0098] 向青稞坯芽加入水，使青稞坯芽保持含水率40%时，装瓶后125℃灭菌25分钟，制备成青稞坯芽培养基备用；
[0099] 5）制备红曲霉发酵种子液：
[0100] 在无菌条件下，将红曲霉菌株转接到斜面培养基30℃培养8天，红曲霉菌株的接种量是斜面培养基重量的0.01%，将无菌水加入到长有红曲菌的种子瓶中，加水量与斜面培养基等体积，将培养生长出的红曲菌丝体转入磁力搅拌机上打散，制得红曲孢子菌液，再将红曲孢子菌液转接到液体摇瓶，35℃振荡培养3天，再转接到发酵罐的种子培养基中，制备好红曲霉发酵种子液；
[0101] 6）接种、发酵：
[0102] 将红曲霉发酵种子液接种到青稞坯芽培养基中，30℃培养12天，红曲霉发酵种子液的接种量是青稞坯芽培养基重量的2%。
[0103] 7）干燥：
[0104] 将发酵完毕的青稞坯芽培养基75℃干燥12小时，粉碎处理得高含量r氨基丁酸青稞红曲。
[0105] 实施例三：
[0106] 本实施例高含量r-氨基丁酸青稞红曲，按以下步骤制得：
[0107] 1）制备斜面培养基：
[0108] 取马铃薯片18-20g、葡糖糖2-3g、蔗糖1-2g、酵母膏0.5-1g、蛋白胨0.5-1g、琼脂粉1-2g搅拌均匀，调pH5.5，装瓶后121℃灭菌30分钟；
[0109] 2）制备种子培养基：
[0110] 取葡糖糖5-7g、酵母膏0.2-0.3g、谷氨酸钠0.4-0.6g、硝酸钠0.1-0.2g、硫酸镁0.05g、磷酸二氢钾0.1g、硫酸铁0.001g搅拌均匀，调pH5.5，分装罐后121℃灭菌30分钟[0111] 3）制备青稞坯芽：
[0112] 取颗粒饱满青稞，清洗后用清水浸泡24-40小时，沥干，放入25℃的培养箱中活化36-48小时，活化期间，分别取浓度为30ml/L的维生素B6水溶液、浓度为6g/L的谷氨酸钠水溶液喷洒青稞表面，待青稞长出1-2毫米坯芽，停止活化，收集青稞坯芽；
[0113] 4）制备青稞坯芽培养基：
[0114] 向青稞坯芽加入水，使青稞坯芽保持含水率40%—50%时，装瓶后121℃-125℃灭菌25-28分钟，制备成青稞坯芽培养基备用；
[0115] 5）制备红曲霉发酵种子液：
[0116] 在无菌条件下，将红曲霉菌株转接到斜面培养基30℃-35℃培养6-8天，红曲霉菌株的接种量是斜面培养基重量的0.01-0.05%，将无菌水加入到长有红曲菌的种子瓶中，加水量与斜面培养基等体积，将培养生长出的红曲菌丝体转入磁力搅拌机上打散，制得红曲孢子菌液，再将红曲孢子菌液转接到液体摇瓶，30℃—35℃振荡培养3-4天，再转接到发酵罐的种子培养基中，制备好红曲霉发酵种子液；
[0117] 6）接种、发酵：
[0118] 将红曲霉发酵种子液接种到青稞坯芽培养基中，30℃—35℃培养8-12天，红曲霉发酵种子液的接种量是青稞坯芽培养基重量的2—6%。
[0119] 7）干燥：
[0120] 将发酵完毕的青稞坯芽培养基75℃-80℃干燥10—12小时，粉碎处理得高含量r-氨基丁酸青稞红曲。
[0121] 本实施例青稞红曲r-氨基丁酸含量达到19500mg/kg。
[0122] 本实施例高含量r-氨基丁酸青稞红曲的制备方法包括以下步骤：
[0123] 1）制备斜面培养基：
[0124] 取马铃薯片18-20g、葡糖糖2-3g、蔗糖1-2g、酵母膏0.5-1g、蛋白胨0.5-1g、琼脂粉1-2g搅拌均匀，调pH5.5，装瓶后121℃灭菌30分钟；
[0125] 2）制备种子培养基：
[0126] 取葡糖糖5-7g、酵母膏0.2-0.3g、谷氨酸钠0.4-0.6g、硝酸钠0.1-0.2g、硫酸镁0.05g、磷酸二氢钾0.1g、硫酸铁0.001g搅拌均匀，调pH5.5，分装罐后121℃灭菌30分钟[0127] 3）制备青稞坯芽：
[0128] 取颗粒饱满青稞，清洗后用清水浸泡24-40小时，沥干，放入25℃的培养箱中活化36-48小时，活化期间，分别取浓度为30ml/L的维生素B6水溶液、浓度为6g/L的谷氨酸钠水溶液喷洒青稞表面，待青稞长出1-2毫米坯芽，停止活化，收集青稞坯芽；
[0129] 4）制备青稞坯芽培养基：
[0130] 向青稞坯芽加入水，使青稞坯芽保持含水率40%—50%时，装瓶后121℃-125℃灭菌25-28分钟，制备成青稞坯芽培养基备用；
[0131] 5）制备红曲霉发酵种子液：
[0132] 在无菌条件下，将红曲霉菌株转接到斜面培养基30℃-35℃培养6-8天，红曲霉菌株的接种量是斜面培养基重量的0.01-0.05%，将无菌水加入到长有红曲菌的种子瓶中，加水量与斜面培养基等体积，将培养生长出的红曲菌丝体转入磁力搅拌机上打散，制得红曲孢子菌液，再将红曲孢子菌液转接到液体摇瓶，30℃—35℃振荡培养3-4天，再转接到发酵罐的种子培养基中，制备好红曲霉发酵种子液；
[0133] 6）接种、发酵：
[0134] 将红曲霉发酵种子液接种到青稞坯芽培养基中，30℃—35℃培养8-12天，红曲霉发酵种子液的接种量是青稞坯芽培养基重量的2—6%。
[0135] 7）干燥：
[0136] 将发酵完毕的青稞坯芽培养基75℃-80℃干燥10—12小时，粉碎处理得高含量r-氨基丁酸青稞红曲。
[0137] 实施例四：
[0138] 本实施例高含量r-氨基丁酸青稞红曲，按以下步骤制得：
[0139] 1）制备斜面培养基：
[0140] 取马铃薯片20g、葡糖糖2g、蔗糖2g、酵母膏0.5g、蛋白胨1g、琼脂粉1g搅拌均匀，调pH5.5，装瓶后121℃灭菌30分钟；
[0141] 2）制备种子培养基：
[0142] 取葡糖糖7g、酵母膏0.2g、谷氨酸钠0.6g、硝酸钠0.1g、硫酸镁0.05g、磷酸二氢钾0.1g、硫酸铁0.001g搅拌均匀，调pH5.5，分装罐后121℃灭菌30分钟
[0143] 3）制备青稞坯芽：
[0144] 取颗粒饱满青稞，清洗后用清水浸泡40小时，沥干，放入25℃的培养箱中活化36小时，活化期间，分别取浓度为30ml/L的维生素B6水溶液、浓度为6g/L的谷氨酸钠水溶液喷洒青稞表面，待青稞长出1-2毫米坯芽，停止活化，收集青稞坯芽；
[0145] 4）制备青稞坯芽培养基：
[0146] 向青稞坯芽中加入青稞坯芽重量20%大米粉，再加入水，使青稞坯芽保持含水率50%时，装瓶后121℃灭菌28分钟，制备成青稞坯芽培养基备用；
[0147] 5）制备红曲霉发酵种子液：
[0148] 在无菌条件下，将红曲霉菌株转接到斜面培养基35℃培养6天，红曲霉菌株的接种量是斜面培养基重量的0.05%，将无菌水加入到长有红曲菌的种子瓶中，加水量与斜面培养基等体积，将培养生长出的红曲菌丝体转入磁力搅拌机上打散，制得红曲孢子菌液，再将红曲孢子菌液转接到液体摇瓶，30℃振荡培养4天，再转接到发酵罐的种子培养基中，制备好红曲霉发酵种子液；
[0149] 6）接种、发酵：
[0150] 将红曲霉发酵种子液接种到青稞坯芽培养基中，35℃培养8天，红曲霉发酵种子液的接种量是青稞坯芽培养基重量的6%。
[0151] 7）干燥：
[0152] 将发酵完毕的青稞坯芽培养基80℃干燥10小时，粉碎处理得高含量r-氨基丁酸青稞红曲。
[0153] 本实施例青稞红曲r-氨基丁酸含量达到15500mg/kg。
[0154] 本实施例高含量r-氨基丁酸青稞红曲的制备方法包括以下步骤：
[0155] 1）制备斜面培养基：
[0156] 取马铃薯片20g、葡糖糖2g、蔗糖2g、酵母膏0.5g、蛋白胨1g、琼脂粉1g搅拌均匀，调pH5.5，装瓶后121℃灭菌30分钟；
[0157] 2）制备种子培养基：
[0158] 取葡糖糖7g、酵母膏0.2g、谷氨酸钠0.6g、硝酸钠0.1g、硫酸镁0.05g、磷酸二氢钾0.1g、硫酸铁0.001g搅拌均匀，调pH5.5，分装罐后121℃灭菌30分钟
[0159] 3）制备青稞坯芽：
[0160] 取颗粒饱满青稞，清洗后用清水浸泡40小时，沥干，放入25℃的培养箱中活化36小时，活化期间，分别取浓度为30ml/L的维生素B6水溶液、浓度为6g/L的谷氨酸钠水溶液喷洒青稞表面，待青稞长出1-2毫米坯芽，停止活化，收集青稞坯芽；
[0161] 4）制备青稞坯芽培养基：
[0162] 向青稞坯芽中加入青稞坯芽重量20%大米粉，再加入水，使青稞坯芽保持含水率50%时，装瓶后121℃灭菌28分钟，制备成青稞坯芽培养基备用；
[0163] 5）制备红曲霉发酵种子液：
[0164] 在无菌条件下，将红曲霉菌株转接到斜面培养基35℃培养6天，红曲霉菌株的接种量是斜面培养基重量的0.05%，将无菌水加入到长有红曲菌的种子瓶中，加水量与斜面培养基等体积，将培养生长出的红曲菌丝体转入磁力搅拌机上打散，制得红曲孢子菌液，再将红曲孢子菌液转接到液体摇瓶，30℃振荡培养4天，再转接到发酵罐的种子培养基中，制备好红曲霉发酵种子液；
[0165] 6）接种、发酵：
[0166] 将红曲霉发酵种子液接种到青稞坯芽培养基中，35℃培养8天，红曲霉发酵种子液的接种量是青稞坯芽培养基重量的6%。
[0167] 7）干燥：
[0168] 将发酵完毕的青稞坯芽培养基80℃干燥10小时，粉碎处理得高含量r-氨基丁酸青稞红曲。
[0169] 实施例五：
[0170] 本实施例高含量r-氨基丁酸青稞红曲，按以下步骤制得：
[0171] 1）制备斜面培养基：
[0172] 取马铃薯片18g、葡糖糖3g、蔗糖1g、酵母膏1g、蛋白胨0.5g、琼脂粉2g搅拌均匀，调pH5.5，装瓶后121℃灭菌30分钟；
[0173] 2）制备种子培养基：
[0174] 取葡糖糖5g、酵母膏0.3g、谷氨酸钠0.4g、硝酸钠0.2g、硫酸镁0.05g、磷酸二氢钾0.1g、硫酸铁0.001g搅拌均匀，调pH5.5，分装罐后121℃灭菌30分钟
[0175] 3）制备青稞坯芽：
[0176] 取颗粒饱满青稞，清洗后用清水浸泡24小时，沥干，放入25℃的培养箱中活化48小时，活化期间，分别取浓度为30ml/L的维生素B6水溶液、浓度为6g/L的谷氨酸钠水溶液喷洒青稞表面，待青稞长出1-2毫米坯芽，停止活化，收集青稞坯芽；
[0177] 4）制备青稞坯芽培养基：
[0178] 向青稞坯芽中加入青稞坯芽重量20%的玉米粉、10%的黄豆粉，再加入水，使青稞坯芽保持含水率40%时，装瓶后125℃灭菌25分钟，制备成青稞坯芽培养基备用；
[0179] 5）制备红曲霉发酵种子液：
[0180] 在无菌条件下，将红曲霉菌株转接到斜面培养基30℃培养8天，红曲霉菌株的接种量是斜面培养基重量的0.01%，将无菌水加入到长有红曲菌的种子瓶中，加水量与斜面培养基等体积，将培养生长出的红曲菌丝体转入磁力搅拌机上打散，制得红曲孢子菌液，再将红曲孢子菌液转接到液体摇瓶，35℃振荡培养3天，再转接到发酵罐的种子培养基中，制备好红曲霉发酵种子液；
[0181] 6）接种、发酵：
[0182] 将红曲霉发酵种子液接种到青稞坯芽培养基中，30℃培养12天，红曲霉发酵种子液的接种量是青稞坯芽培养基重量的2%。
[0183] 7）干燥：
[0184] 将发酵完毕的青稞坯芽培养基75℃干燥12小时，粉碎处理得高含量r-氨基丁酸青稞红曲。
[0185] 本实施例青稞红曲r-氨基丁酸含量达到18000mg/kg。
[0186] 本实施例高含量r-氨基丁酸青稞红曲的制备方法包括以下步骤：
[0187] 1）制备斜面培养基：
[0188] 取马铃薯片18g、葡糖糖3g、蔗糖1g、酵母膏1g、蛋白胨0.5g、琼脂粉2g搅拌均匀，调pH5.5，装瓶后121℃灭菌30分钟；
[0189] 2）制备种子培养基：
[0190] 取葡糖糖5g、酵母膏0.3g、谷氨酸钠0.4g、硝酸钠0.2g、硫酸镁0.05g、磷酸二氢钾0.1g、硫酸铁0.001g搅拌均匀，调pH5.5，分装罐后121℃灭菌30分钟
[0191] 3）制备青稞坯芽：
[0192] 取颗粒饱满青稞，清洗后用清水浸泡24小时，沥干，放入25℃的培养箱中活化48小时，活化期间，分别取浓度为30ml/L的维生素B6水溶液、浓度为6g/L的谷氨酸钠水溶液喷洒青稞表面，待青稞长出1-2毫米坯芽，停止活化，收集青稞坯芽；
[0193] 4）制备青稞坯芽培养基：
[0194] 向青稞坯芽中加入青稞坯芽重量20%的玉米粉、10%的黄豆粉，再加入水，使青稞坯芽保持含水率40%时，装瓶后125℃灭菌25分钟，制备成青稞坯芽培养基备用；
[0195] 5）制备红曲霉发酵种子液：
[0196] 在无菌条件下，将红曲霉菌株转接到斜面培养基30℃培养8天，红曲霉菌株的接种量是斜面培养基重量的0.01%，将无菌水加入到长有红曲菌的种子瓶中，加水量与斜面培养基等体积，将培养生长出的红曲菌丝体转入磁力搅拌机上打散，制得红曲孢子菌液，再将红曲孢子菌液转接到液体摇瓶，35℃振荡培养3天，再转接到发酵罐的种子培养基中，制备好红曲霉发酵种子液；
[0197] 6）接种、发酵：
[0198] 将红曲霉发酵种子液接种到青稞坯芽培养基中，30℃培养12天，红曲霉发酵种子液的接种量是青稞坯芽培养基重量的2%。
[0199] 7）干燥：
[0200] 将发酵完毕的青稞坯芽培养基75℃干燥12小时，粉碎处理得高含量r-氨基丁酸青稞红曲。
[0201] 实施例六：
[0202] 本实施例高含量r-氨基丁酸青稞红曲，按以下步骤制得：
[0203] 1）制备斜面培养基：
[0204] 取马铃薯片18-20g、葡糖糖2-3g、蔗糖1-2g、酵母膏0.5-1g、蛋白胨0.5-1g、琼脂粉1-2g搅拌均匀，调pH5.5，装瓶后121℃灭菌30分钟；
[0205] 2）制备种子培养基：
[0206] 取葡糖糖5-7g、酵母膏0.2-0.3g、谷氨酸钠0.4-0.6g、硝酸钠0.1-0.2g、硫酸镁0.05g、磷酸二氢钾0.1g、硫酸铁0.001g搅拌均匀，调pH5.5，分装罐后121℃灭菌30分钟[0207] 3）制备青稞坯芽：
[0208] 取颗粒饱满青稞，清洗后用清水浸泡24-40小时，沥干，放入25℃的培养箱中活化36-48小时，活化期间，分别取浓度为30ml/L的维生素B6水溶液、浓度为6g/L的谷氨酸钠水溶液喷洒青稞表面，待青稞长出1-2毫米坯芽，停止活化，收集青稞坯芽；
[0209] 4）制备青稞坯芽培养基：
[0210] 向青稞坯芽中加入青稞坯芽重量10%的大米粉、10%的玉米粉、10%的黄豆粉，再加入水，使青稞坯芽保持含水率40%—50%时，装瓶后121℃-125℃灭菌25-28分钟，制备成青稞坯芽培养基备用；
[0211] 5）制备红曲霉发酵种子液：
[0212] 在无菌条件下，将红曲霉菌株转接到斜面培养基30℃-35℃培养6-8天，红曲霉菌株的接种量是斜面培养基重量的0.01-0.05%，将无菌水加入到长有红曲菌的种子瓶中，加水量与斜面培养基等体积，将培养生长出的红曲菌丝体转入磁力搅拌机上打散，制得红曲孢子菌液，再将红曲孢子菌液转接到液体摇瓶，30℃—35℃振荡培养3-4天，再转接到发酵罐的种子培养基中，制备好红曲霉发酵种子液；
[0213] 6）接种、发酵：
[0214] 将红曲霉发酵种子液接种到青稞坯芽培养基中，30℃—35℃培养8-12天，红曲霉发酵种子液的接种量是青稞坯芽培养基重量的2—6%。
[0215] 7）干燥：