从龙血竭中提取的中药单体化合物的应用

摘要

本发明涉及一种中药单体化合物的应用，具体是一种从龙血竭中提取的中药单体化合物的应用，属于生物学和药理学领域，其特征是：从龙血竭中提取的中药单体化合物在制备预防、治疗瘢痕药物中的应用；所述的从龙血竭中提取的中药单体化合物为龙血素B，龙血素B的化学名为4’-羟基-2，4，6-三甲氧基二氢查耳酮；所述的龙血素B在制备预防、治疗瘢痕药物中的应用。它提供了中药单体化合物龙血素B在预防和治疗瘢痕领域的应用。

权利要求

1.从龙血竭中提取的中药单体化合物的应用，其特征是：从龙血竭中提取的龙血素B作为唯一活性成分在制备治疗瘢痕药物中的应用；所述的从龙血竭中提取的中药单体化合物为龙血素B，龙血素B的化学名为4’-羟基-2，4，6-三甲氧基二氢查耳酮；所述的龙血素B能单独使用或与其他药用载体混合，配制成在临床上使用的注射剂、喷雾剂、气雾剂、霜剂、涂膜剂、贴剂或膏剂。

说明书

从龙血竭中提取的中药单体化合物的应用

技术领域

[0001] 本发明涉及一种中药单体化合物的应用，具体是一种从龙血竭中提取的中药单体化合物的应用，属于生物学和药理学领域。

背景技术

[0002] 瘢痕是人体创伤修复的一种自然产物，创伤修复中大多数的组织损伤通过瘢痕形成来修复。任何类型的生物、化学或物理损伤诱发了体内连锁性的体液-细胞反应，从而导致一个以纤维蛋白起主要作用的纤维增生性炎症反应过程，在此过程后由于胶原合成代谢与降解代谢的失衡，最终导致胶原的大量堆积，瘢痕形成。

[0003] 据统计，每年都有数以百万计的患者遭受烧伤、烫伤、创伤等皮肤损伤，或在手术后继发增生性瘢痕的产生。发达国家每年新增瘢痕病例约400万，光美国每年瘢痕治疗的费用就高达40亿美元，对于瘢痕的研究、预防、治疗，全世界均投入了巨大的人力，财力。

[0004] 现代医学围绕瘢痕的行成原因，进行了深入研究，但由于瘢痕形成的机制不清，治愈效果不佳，迄今为止仍无有效控制瘢痕形成的方法。在祖国医学中龙血竭（百合科植物剑叶龙血树[Dracaena cochinchinensis(Lour．)S．C．Ghen．]含脂木材提取的树脂状药材）具有活血化瘀、定痛止痛、敛疮生肌等功效，被称为“活血圣药”，用于跌打损伤、瘀血作痛、妇女气血凝滞、外伤血、脓疮久不收口等症。大量研究表明，国产龙血竭的化学成分与进口血竭的化学化学成分有显著的相似性。龙血素B(Loureirin B)是由龙血竭提取而来，龙血素B是龙血竭主要化学成分，化学名为4’-羟基-2，4，6-三甲氧基二氢查耳酮(C18H20O5)，分子量316.3484，化学结构式：

[0005]

[0006] 龙血素B具有广泛的生物学活性，包括：活血化疲、消肿止痛、收敛止血、调整机体新陈代谢、改善机体免疫功能。

[0007] 但是，目前尚未见到，龙血竭，龙血竭提取物在预防和治疗瘢痕方面的应用的相关报道及文字记载。

发明内容

[0008] 本发明的目的是提供一种预防和治疗瘢痕的中药单体化合物的应用，具体为中药单体化合物龙血素B（即4’-羟基-2，4，6-三甲氧基二氢查耳酮）在预防和治疗瘢痕领域的应用。

[0009] 本发明的技术方案是：从龙血竭中提取的中药单体化合物的应用，其特征是：从龙血竭中提取的中药单体化合物在制备预防、治疗瘢痕药物中的应用。

[0010] 所述的从龙血竭中提取的中药单体化合物为龙血素B，龙血素B的化学名为4’-羟基-2，4，6-三甲氧基二氢查耳酮。

[0011] 所述的龙血素B在制备预防、治疗瘢痕药物中的应用。

[0012] 所述的龙血素B可以单独使用或与其他药用载体混合，配制成在临床上使用的注射剂、喷雾剂、气雾剂、软膏剂、霜剂、涂膜剂、贴剂或膏剂。

[0013] 本发明的特点：

[0014] 1、首次将中药龙血竭提取物用于创伤后预防及抑制瘢痕形成，目前国内、外并无该药制备和临床应运的专利以及上市产品，因此，该项产品若上市，将成为临床创伤修复研究的新亮点，很大程度上提高临床病人的创伤修复效果及生活质量。

[0015] 2、本发明实验中所采用的活性药物中药龙血竭提取物龙血素B具有局部降解细胞外基质的作用，其局部给药后，可明显减少创伤后瘢痕形成。

[0016] 3、本发明实验中所采用的活性药物为中药龙血竭提取物的单体化合物，分子式明确可人工合成，药物结构单一，其局部给药后，可减少药物通过血管进入血液循环系统的剂量，效果明确，副作用少。

[0017] 4、本发明所公开的中药龙血竭提取物龙血素B，可制备成不同的给药形式，可用于烧伤、烫伤、擦伤、刺伤等伤口修复后期。

[0018] 下面结合具体实施例来说明本发明的实质。应理解，这些实施例使本发明所说的从龙血竭中提取的中药单体化合物的用途得以证实，而不用于限制本发明的范围。下述实施例中未注明具体条件的试验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。

具体实施方式

[0019] 实施例

[0020] 龙血素B的提取：

[0021] 取龙血竭，粉碎，用氯仿提取多次，滤过，合并滤液，回收氯仿，得氯仿提取物，经硅胶柱层析，用石油醚(60～90℃)醋酸乙酯混合溶剂洗脱。收集含龙血素B的流分，合并，再进行硅胶柱层析，用石油醚(60～90℃)醋酸乙酯混合溶剂洗脱，得粗结晶。将粗结晶反复进行硅胶H柱层析(加压)用氯仿-甲醇混合溶剂洗脱，得龙血素B结晶。经石油醚(60～90℃)氯仿混合溶剂重结晶，得无色针状结晶。参照文献（刘布鸣，等.龙血素B化学对照品研究，广西科学杂志，2006,3(2)：133～134.）属于本领域公知的技术，这里就不做更详细的描述。或直接从市场购得：可以从上海静融生物科技有限公司够得，批号：111558-200405，公司地址是：上海市浦东陆家嘴世纪大道地铁2号线东昌路。

[0022] 1．对上述的龙血素B进行裸鼠瘢痕移植实验

[0023] 1.1人皮肤瘢痕组织裸鼠移植模型的建立

[0024] 正常人皮肤瘢痕标本来自临床手术切除废弃瘢痕（已获患者知情同意），裸鼠20只，6～7周龄，体重25～30g，室温下饲养，雌雄不限。1％戊巴比妥钠1.0mL腹腔注射，麻醉生效后，以手术刀于背部制造全层皮肤缺损创面2cm×2cm大小，压迫止血后将人瘢痕标本移植于背部创面，凡士林纱布覆盖，打包包扎固定。14d后打开换药，观察瘢痕成活情况。

[0025] 1.2瘢痕的治疗

[0026] 皮肤移植术后3周，瘢痕移植成活分组治疗，分组情况：a.空白对照组注射生理盐水；b.龙血素B小剂量组；c.龙血素B中剂量组；d.龙血素B大剂量组，按分组每日在瘢痕区多点注射药物0.5ml。其中，龙血素B小剂量组、c.龙血素B中剂量组和d.龙血素B大剂量组的药物有效浓度均分别为100ug/ml，200ug/ml，500ug/ml 同下。

[0027] 1.3观察指标

[0028] 治疗30天后，龙血素B治疗组瘢痕组织标本远小于生理盐水组，且呈浓度依赖效应。其中龙血素B大剂量治疗组瘢痕组织仅为移植组织1/4，而注射生理盐水组无变化。

[0029] 2.兔耳瘢痕形成实验

[0030] 日本大耳白兔20只，在兔耳腹侧选定4个位点，作直径1cm直达软骨表面的皮肤全层及软组织缺损160个，压迫止血后随机分组处理。a.空白对照组涂抹生理盐水；b.龙血素B小剂量组；c.龙血素B中剂量组；d.龙血素B大剂量组。，每组40个创面，创面暴露，按分组隔日涂抹药物一次，于伤后7d去除软骨上面的肉芽及血浆痴壳一次。术后连续3个月观察创面自然愈合及瘢痕增生情况

[0031] 观测指标：

[0032] 创伤愈合区外观的变化及瘢痕厚度

[0033] 打孔板定位后先用游标卡尺测定打孔中心的兔耳正常皮肤厚度，从造创后第2天开始连续3个月观察创面愈合过程及瘢痕生长的色泽、质地、增生和退化情况，并在15d、30d、60d三个时段测量瘢痕厚度评价有无瘢痕生长，愈合组织高于原创面1mm认为有瘢痕生长，其中，d代表天数。

[0034] 表1.各组瘢痕生长情况

[0035]

[0036] 3.Balb/C小鼠创面愈合实验

[0037] 20只Balb/C雄性小鼠，8周龄，（20±1.5g）随机分为4组。背部脱毛，次日做0.5cm×1cm全层缺损创面。分组情况：a.空白对照组涂抹生理盐水；b.龙血素B小剂量组；
c.龙血素B中剂量组；d.龙血素B大剂量组，按分组隔日涂抹药物一次观测创面愈合情况。

[0038] 观测指标：

[0039] 创伤愈合区外观的变化

[0040] 28d后，应用龙血素B治疗组小鼠切口愈合区的面积明显小于空白对照组，且呈浓度依赖性。

[0041] 创伤愈合区胶原沉积的变化

[0042] 28d后，切取小鼠愈合区的皮肤组织，4％多聚甲醛溶液固定常规方法制备石蜡切片。进行H＆E及胶原三色染色，观察愈合的切口及其组织周缘的胶原分布。

[0043] 结果表明：龙血素B组切口创缘真皮组织中胶原排列明显较对照组整齐有序。

[0044] 实验结果