一种注射用奥沙利铂冻干药物组合物的制备

摘要

本发明涉及一种奥沙利铂冻干粉针注射剂的制备方法，该方法包括以下步骤：1）奥沙利铂的重结晶：采用异丙醇和乙腈对奥沙利铂进行重结晶，得奥沙利铂结晶粉末；2）奥沙利铂冻干粉针注射剂的制备：加入适量的乳糖和注射用水制备而成。

权利要求

1.一种奥沙利铂冻干粉针注射剂的制备方法，该方法包括以下步骤：

1）奥沙利铂的重结晶：采用异丙醇和乙腈3：1对购买得到的奥沙利铂进行重结晶，方法如下：将粗品奥沙利铂，用30倍量的异丙醇和乙腈3：1的混合溶剂重结晶2次，随后加入

1%活性炭煮沸1小时，趁热过滤，溶液冷却析晶，过滤，干燥，得奥沙利铂结晶粉末；

2）奥沙利铂冻干粉针注射剂的制备：

取奥沙利铂及乳糖加入90%注射用水，加热搅拌至完全溶解，其中加热温度保持在

80℃以下；放冷至室温，用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节溶液pH值至5.0-7.0，加注射用水定容至全量，再用0.22μm滤膜除菌过滤至澄明，中间体检验，灌装，冻干，压盖，灯检，包装即可。

说明书

一种注射用奥沙利铂冻干药物组合物的制备

技术领域：

[0001] 本发明涉及药物制剂领域，特别涉及一种抗肿瘤药物奥沙利铂的制剂的制备。背景技术：

[0002] 奥沙利铂,化学名为(1R,2R)-(1,2-环己烷二胺-N,N')[乙二酸(2-)-O,O']络铂。其结构式为：

[0003]

[0004] 奥沙利铂属于铂类衍生物，其中央铂原子被一草酸和1.2-二氨环己烷包围，呈反式构象，是一个立体异构体。象其他铂类衍生物一样，奥沙利铂通过产生烷化结合物作用于DNA，形成链内和链间交联，从而抑制DNA的合成及复制。奥沙利铂与DNA结合迅速，最多需15分钟，而顺铂与DNA的结合分为两个时相，其中包括一个48小时后的延迟相。在人体内给药一小时之后，通过测定白细胞的加合物，可显示其存在。复制过程中的DNA合成，其后DNA的分离、RNA及细胞蛋白质的合成均被抑制，某些对顺铂耐药的细胞系，奥沙利铂治疗有效。

[0005] 适应症: 适用于经过氟脲嘧啶治疗失败后的结、直肠癌转移的患者，可单独或联合氟尿嘧啶使用。

[0006] 用法用量:在单独或联合用药时，推荐剂量为按体表面积一次130mg/m2，加入250～500ml 5 ％葡萄糖溶液中输注2-6小时。没有主要毒性出现时，每3周(21天)给药1次。调整剂量以安全性，尤其是神经学的安全性为依据。

[0007] 已经上市的奥沙利铂的制剂主要有冻干粉针注射剂，其辅料为乳糖。产品的性状为白色或类白色疏松块状物或粉末。

[0008] 中国专利涉及到奥沙利铂制剂的专利有：

[0009] 奥沙利铂冻干粉针剂及其制备方法 申请号: 201210142677.X

[0010] 高光学纯度反式－右旋奥沙利铂冻干粉针剂及其制备方法 申请号:201210178848.4

[0011] 一种奥沙利铂结晶化合物及其冻干粉针剂 申请号: 201210147684.9[0012] 一种奥沙利铂药物组合物及其制备方法 申请号: 200910304674.X[0013] 一种以高固含量甘露醇为辅料的冻干粉针剂的制备方法 申请号:200710191485.7

[0014] 一种奥沙利铂冻干粉针剂及其制备方法 申请号: 200710191484.2 [0015] 注射用奥沙利铂冻干粉针剂及其制备方法 申请号: 200610165396.0[0016] 奥沙利铂磷脂复合物静脉给药的纳米混悬注射剂 申请号: 200610084357.8[0017] 奥沙利铂静脉注射剂及其制备方法 申请号: 200510021947.1

[0018] 这些专利中所使用的辅料包括乳糖，甘露醇，蔗糖，葡萄糖，枸橼酸等。

[0019] 通过对以上奥沙利铂冻干粉针注射剂的研究，我们发现，使用上述辅料制备的奥沙利铂冻干粉针注射剂具有不稳定性，存放中为避免药物变色需要低温储存，经研究发现，奥沙利铂原料中的草酸，硝酸银，二羟合奥沙利铂、双水二胺环己烷铂等杂质的存在影响了奥沙利铂产品的稳定性，这是由于现有奥沙利铂原料的制备中方法决定的。

[0020] 奥沙利铂冻干粉针注射剂为静脉注射剂，对其原料药的纯度要求较高，总杂质含量根据药典应小于1%，而且其中每个相关杂质的含量均应小于0.1%。但现有技术采用水或乙醇为重结晶溶剂，重结晶后奥沙利铂的含量虽大于99%，但其中1个未知结构的相关杂质的含量大于0.2%。

[0021] 为克服杂质含量的问题，我们使用新的重结晶试剂对奥沙利铂杂质进行除杂，最终得到一种高品质的奥沙利铂，其含量在99.5%以上，用该原料制备的奥沙利铂冻干粉针注射剂稳定性好，无需低温保存，长期放置也不变色。发明内容：

[0022] 本发明提供一种奥沙利铂冻干粉针注射剂的制备方法，该方法包括以下步骤：

[0023] 1）奥沙利铂的重结晶，采用异丙醇和乙腈1:3（v/v）对购买得到的奥沙利铂进行重结晶，方法如下：将市场上购买的粗品奥沙利铂（纯度98.6%），用30倍量（w/v）的异丙醇和乙腈1:3（v/v）的混合溶剂重结晶2次，每次都用1%（g/ml）活性炭煮沸，过滤，冷却析晶，过滤，干燥，得奥沙利铂结晶粉末（纯度99.6%）；

[0024] 2）奥沙利铂冻干粉针注射剂的制备，方法如下：

[0025]

[0026] 取处方量奥沙利铂及乳糖加入90%注射用水，加热搅拌至完全溶解（加热温度保持在80℃以下）；放冷至室温，用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节溶液pH值至5.0—7.0，加注射用水定溶至全量，再用0.22μm滤膜除菌过滤至澄明，中间体检验，灌装，冻干，压盖，灯检，包装即可。

[0027] 本发明的上述制备方法是经过筛选获得的，筛选过程如下：

[0028] 表1 市售奥沙利铂粗产品用不同溶剂处理后各样品中杂质的含量

[0029]溶 剂 杂质(%)
水 0.96
乙醇 0.85
甲醇 0.84
异丙醇 0.67
乙腈 0.80
异丙醇与乙腈(1:1) 0.73
异丙醇与乙腈(2:1) 0.62
异丙醇与乙腈(3:1) 0.46
异丙醇与乙腈(1:2) 0.61
异丙醇与乙腈(1:3) 0.75

[0030] 以上结果显示，异丙醇与乙腈(3:1)纯化效果最好，该方法得到的产品，经过HPLC检测，草酸，硝酸银，二羟合奥沙利铂、双水二胺环己烷铂四种杂质的含量均小于0.1%。

[0031] 稳定性考察：

[0032] 对本发明实施例中的方法制备的制剂和市场上购买得到的制剂进行加速稳定性对比考察，将样品在40℃温箱中放置，用HPLC法测定奥沙利铂的含量，同时观察样品的色泽，结果如下：

[0033] 表2

[0034]

[0035] 长期稳定性试验

[0036] 将注射用奥沙利铂三批中试样品，按拟上市包装，另制备三批用现有技术制备的注射用奥沙利铂，同样置25℃±2℃，RH60%±10%的恒温恒湿箱中，分别于3、6、9、12、18、24个月取样，检查样品的性状、酸度、澄清度与颜色、可见异物、有关物质及含量。测定结果与样品0月测定结果进行比较。结果表明：本品经长期留样12个月考察，各项指标与0月及市售对照药比较无差别，但在24个月时取样，本发明样品含量稳定，变化极小，但现有技术产品则含量下降明显，颜色发黄。结论：注射用奥沙利铂三批样品（20090501、20090502、
20090503）经加速试验和长期留样观察6个月，表明本品在常温保存条件下稳定，根据上市药品的有效期暂定本品有效期为24个月。

[0037] 本发明还对制剂的配方进行了筛选，筛选结果如下：

[0038] 溶剂量考察

[0039] 根据奥沙利铂国家药品标准WS1-(X-117)-2003Z，本品性状为白色或类白色结晶性粉末，在水中微溶。因此，在奥沙利铂用量固定的情况下，对注射用水（溶媒）的最佳用量进行了考察。根据试验结果，我们确定本品溶剂量100ml/500mg较为适宜，即10ml/瓶。赋形剂用量确定

[0040] 本产品选择了乳糖作为本品赋形剂。其在处方中的用量根据试验进行了筛选。试验结果显示,乳糖用量在2.5%-4.5%时冻干制品的性状、复溶性及溶液的澄清度与颜色均好。综合考虑，同等效果下选低加量者，最后确定乳糖用量为3.5%（w/v,g/ml）。

[0041] 加热温度考察

[0042] 根据奥沙利铂理化性质可知，本品微溶于水，因此在配剂过程中，为了保证原料药快速溶解，采用加热溶解并考察加热溶解温度为50℃和80℃时对产品质量的影响。按处方分别配制药液并放冷至室温，用0.1mol/L氢氧化钠溶液调溶液pH值至6.0，加注射用水定溶至全量，再用0.22μm滤膜除菌过滤，灌装，冻干。对冻干后样品进行了检查对比。结果表明：本品制剂在配剂时加热温度为50℃和80℃，冷冻干燥后样品的性状、可见异物、酸度、溶液的澄清度与颜色、有关物质及含量均无明显差异，质量均符合标准规定。说明奥沙利铂原料对热比较稳定。为了保证产品质量，故确定本品在配剂时加热温度控制在80℃以下。

[0043] pH值范围考察

[0044] 根据注射用奥沙利铂进口标准pH值范围为（4.0~7.0），按处方配制药液，用0.1mol/L的氢氧化钠溶液和盐酸溶液调节成不同pH值的样品液（4.00~7.00），过滤，灌装，冻干。对冻干后样品进行加速考察（40±2℃）。根据试验结果并参照已上市注射用奥沙利铂WS1-（X-090）-2003质量标准，确定本品pH值范围在5.0～7.0之间。

[0045] 活性炭考察

[0046] 注射剂制备过程中一般需要加入一定量的活性炭来吸附杂质，脱色,去除内毒素等，因此我公司对本品生产工艺进行研究时，也对活性炭是否加入及加入量多少进行了对比研究。试验结果表明：活性炭加入与否对本品的性状、澄清度与颜色、可见异物及其它有关物质项等无显著影响，因此本品生产时不加入活性炭。详见资料8。

[0047] 冻干程序的确定

[0048] 将样品置冷冻箱中，预冻至温度为-45℃左右后，再保持冷冻3小时左右；之后抽真空，并以1℃/小时左右升温至0℃，为使制品中水分含量降低，以5℃/小时左右快速升温至40℃，再保温6小时以上，以除尽水分,即可。

[0049] 溶血性试验：

[0050] 本实验观察了注射用奥沙利铂有无溶血作用。

[0051] 实验过程：

[0052] 制备2%红细胞悬液：

[0053] 取家兔血10ml，放入洁净盛有玻璃球的三角烧杯中振摇10min，除去纤维蛋白原后，加10倍量生理盐水（0.9%），摇匀，以2000r/min离心15min，弃去上清液，沉淀红细胞，再用生理盐水反复洗涤至上清液无红色为止，量取血球，以生理盐水配置成2%红细胞悬液。

[0054] 测试方法：

[0055] 取洁净试管7支，进行编号，1-5号管为供试品管，6号为阴性对照管，7号为阳性对照管。按表4配比量依次加入2%红细胞悬液和生理盐水，混匀后，于37℃±0.5℃恒温水浴放置30min，然后分别加入不同量注射用奥沙利铂，第6管不加药液加生理盐水做阴性对照管，第7管亦不加药液，生理盐水改加蒸馏水，做阳性对照管，各试管均摇匀后，置37℃±0.5℃恒温水浴中，开始观察放入后15min、30min、45min、1h、2h、3h、4h有无溶血出现。

[0056] 实验结果表明：注射用奥沙利铂加入到2%兔红细胞悬液后15min、30min、45min、1h、2h、3h、4h均未出现红细胞悬液透明及絮状沉淀，表明该批制剂没有溶血作用及红细胞凝集作用。

[0057] 血管刺激性试验：

[0058] 本实验观察了注射用奥沙利铂耳缘静脉注射对家兔耳血管的影响。

[0059] 实验方法：取家兔6只，雄性，体重2.5-3.0kg，分二组，每组3只。供试药组以恒流泵给家兔左耳耳缘静脉缓慢注射注射用奥沙利铂5ml/只，10分钟注射完，阴性对照组以同样给药方式静脉注射5%葡萄糖溶液，均每三天一次，连续四次，每次给药前及最后给药后48h、96h对动物注射部位进行肉眼观察耳局部血管刺激情况，观察结束后，每组处死2只家兔，剪取注射部位耳，放入10%甲醛溶液中固定，石蜡包埋，切片，HE染色，光镜下观察血管有无变性和组织坏死，余下1只家兔于14天后处死，剪取注射部位耳，放入10%甲醛溶液中固定，石蜡包埋，切片，HE染色，光镜下观察血管有无变性和组织坏死。

[0060] 实验结果：连续四次给药后做兔耳血管病理切片检查，未见坏死和变性。

[0061] 提示该批注射用奥沙利铂静脉注射无明显血管刺激反应。具体实施方式：

[0062] 以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。

[0063] 奥沙利铂冻干粉针注射剂的制备

[0064] 1）奥沙利铂的重结晶，采用异丙醇和乙腈1:3（v/v）对购买得到的奥沙利铂进行重结晶，方法如下：将粗品奥沙利铂（纯度98.6%），用30倍量（w/v）的异丙醇和乙腈1:3（v/v）的混合溶剂加热溶解，随后加入1%（g/ml）活性炭煮沸1小时，趁热过滤，溶液冷却析晶，得奥沙利铂结晶（收率95.8%，纯度99.6%）；