用于草鱼高密度养殖的中草药免疫增强剂及其制备方法

摘要

本发明涉及饲料添加剂领域，具体地说，涉及一种用于草鱼高密度养殖的中草药免疫增强剂及其制备方法。一种用于草鱼高密度养殖的中草药免疫增强剂，由以下重量份的原料组成：刺五加80～120份、杜仲50～100份、大黄100～120份、黄芪50～100份、黄芩80～100份、大青叶100～150份、苦豆草50～80份、党参50～80份。针对当前草鱼养殖业集约化、规模化生产中草鱼免疫力下降的问题，将中草药免疫增强剂作为饲料添加剂应用到在草鱼高密度养殖饲料中，可达到增强草鱼的免疫机能和提高草鱼成活率的效果。本发明长期使用安全高效无毒副作用，饲料成本低，草鱼生长迅速，饲料转化率高，经济效益大幅提高。

权利要求

1.一种用于草鱼高密度养殖的中草药免疫增强剂，其特征在于，由以下重量份的原料组成：刺五加80-120份、杜仲50-100份、大黄100-120份、黄芪50-100份、黄芩80-100份、大青叶100-150份、苦豆草50-80份、党参50-80份。

2.一种用于草鱼高密度养殖的中草药免疫增强剂，其特征在于，由以下重量份的原料组成：刺五加105份、杜仲85份、大黄110份、黄芪70份、黄芩90份、大青叶115份、苦豆草

60份、党参80份。

3.一种制备如权利要求1或2所述的中草药免疫增强剂的方法，其特征在于，包括将所述原料粉碎，并过100目筛，然后将粉碎后的原料混合即可。

4.如权利要求3所述的一种制备中草药免疫增强剂的方法，其特征在于，所述混合时间为10分钟。

5.如权利要求3所述的一种制备中草药免疫增强剂的方法，其特征在于，所述原料在粉碎前通过自然干燥或40-50℃烘干。

6.一种使用如权利要求1或2所述的中草药免疫增强剂的方法，其特征在于，按照

1%-3%的重量比将中草药免疫增强剂添加在草鱼饲料中。

说明书

用于草鱼高密度养殖的中草药免疫增强剂及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及饲料添加剂领域，具体地说，涉及一种用于草鱼高密度养殖的中草药免疫增强剂及其制备方法。

背景技术

[0002] 草鱼养殖具有饲料成本低、经济效益明显等优点；草鱼本身也具有肉质细嫩、肉刺少、生长快等优势，是一个优良的主养、配养品种。在集约化水产养殖条件下，增加养殖密度是提高养殖产量、降低养殖成本的重要途径。但养殖密度过大会产生应激，降低鱼类对疾病的抵抗力，甚至影响其生长等。李爱华（1997）在草鱼饲料中添加维生素C及Tocher等（2002）在大菱鲆饲料中添加维生素E、在金头鲷和斑点叉尾饲料中添加维生素C的试验均显示出以上营养素具有提高鱼类免疫力的作用。

[0003] 近年来，通过中草药的使用增强水产动物的免疫机能，降低水产动物的发病率成为研究的热点。中草药作为疾病防治的药物或饵料添加剂，尤其适用于当前水产养殖业的集约化、规模化生产的需要，便于进行养殖草鱼病害的群体防治。应用中草药防治鱼病完全符合发展无公害水产业、生产绿色水产品的病害防治准则。中草药具有残留少、致病菌不易产生耐药性等优点，其作用不仅对病原微生物有直接的抑制和杀灭作用，更重要的是对鱼类的免疫系统进行调整，提高水产动物的抗应激能力和免疫机能。但目前中草药作为免疫增强剂在高密度养殖条件下对草鱼的作用研究还不够深入，具体的作用机理也仍然不明确。

发明内容

[0004] 针对以上不足，本发明提供一种能显著增强草鱼的免疫机能和提高草鱼成活率的安全高效、无毒副作用的用于草鱼高密度养殖的中草药免疫增强剂及其制备方法。

[0005] 本发明通过以下方案达到上述目的：

[0006] 一种用于草鱼高密度养殖的中草药免疫增强剂，由以下重量份的原料组成：刺五加80-120份、杜仲50-100份、大黄100-120份、黄芪50-100份、黄芩80-100份、大青叶100-150份、苦豆草50-80份、党参50-80份。

[0007] 优选的中草药免疫增强剂，由以下重量份的原料组成：刺五加105份、杜仲85份、大黄110份、黄芪70份、黄芩90份、大青叶115份、苦豆草60份、党参80份。

[0008] 一种制备前述的中草药免疫增强剂的方法包括，将所述原料粉碎，并过100目筛，然后将粉碎后的原料混合即可。

[0009] 优选的，制备中草药免疫增强剂的方法的混合时间为10分钟。

[0010] 优选的，制备中草药免疫增强剂的方法还包括，所述原料在粉碎前通过自然干燥或40-50℃烘干。

[0011] 使用时，按照1%-3%的重量比添加在草鱼的配合饲料中。

[0012] 我国中草药资源丰富，中草药具有纯天然、高效、安全、无药物残留等优点。传统中医理论和现代医学研究表明，中草药在增强机体免疫力方面，效果显著。

[0013] 刺五加是五加科落叶灌木，干燥的根和根茎或茎入药。具有增强淡水或海水养殖鱼类免疫系统、特别是非特异性免疫功能的作用，可广泛性地降低养殖鱼类对各类病原性疾病的抵抗力，提高养殖成活率。此外，刺五加对鱼体还具有抗应激作用，从而增强鱼体对环境胁迫的适应能力。

[0014] 杜仲是杜仲科杜仲属的多年生落叶乔木植物，杜仲叶、皮均含有绿原酸、环烯醚萜类、木脂素等药理成分。多种成分共同作用，具有抗菌、抗病毒、抗癌变、清除自由基、激活免疫系统等多种功效。

[0015] 大黄是多种蓼科大黄属的多年生植物的合称，大黄及其有效成分大黄酸、大黄素等有很好的抗菌及收敛、增加血小板、促进血液凝固的作，已被证实具有增强机体抗病力的功效，目前在水产上已有一定的应用或理论研究。

[0016] 黄芪是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根。黄芪有效成分黄芪多糖能够刺激免疫，促进和诱生干扰素，刺激动物的免疫功能的发挥，解除免疫抑制至正常免疫水平作用；还可增强机体的免疫功能，如显著增强网状内皮系统的吞噬功能，促进细胞转化，诱生干扰素等。

[0017] 黄芩是唇形科植物黄芩的干燥根，具有清热燥湿，泻火解毒的作用，其中黄芩苷是主要有效成份。

[0018] 大青叶系十字花科植物菘蓝的干燥叶，具有清热，解毒，凉血，止血之功效，为常用的清热解毒类中药之一。

[0019] 苦豆草是豆科槐属多年生草本植物，含有的生物碱，能增强体液与细胞免疫功能，刺激巨噬细胞的吞噬功能。其含有的有机酸能调节胃肠内的pH值，防止有害细胞的繁殖和提高酶的活性，促进动物机体内正常的新陈代谢，从而提高营养物质的利用率。

[0020] 党参有效成分党参多糖是一种无毒且具有良好的生物活性物质，能够调节机体免疫力、抗衰老、抗缺氧、抗应激和抗氧化等。

[0021] 本发明通过以下试验证明该中草药免疫增强剂对草鱼高密度养殖的作用。

[0022] 试验材料及设计：

[0023] 将试验分为正常养殖密度组（30g/L）和高密度养殖组（60g/L）。分别采用实施例1、实施例2和实施例3的中草药免疫增强剂为添加剂。试验用草鱼为同批次人工繁殖的草鱼鱼种，试验前挑选健壮、规格均匀幼鱼1800尾，暂养于室内玻璃水族箱中；投喂饲料蛋白质含量为30%的试验饲料，饱食投喂，驯化15d，以适应环境和试验饲料。试验开始之前，停止投喂1d。试验开始后从暂养箱中挑选体格健壮、规格均匀体重为100.53±1.68g左右的幼鱼1440尾，随机分为8组，每组3个重复，每个重复60尾，放养室内玻璃水族箱中。水箱规格：80cm×60cm×60cm，水族箱内注入不同体积的水（高密度养殖组100L，正常养殖密度组200L）。试验采用循环水系统，昼夜充氧，循环水系统各水箱间水体流速相同。

[0024] 试验方法：

[0025] 试验周期为8周，试验期间水温为23～30℃，pH为（7.1±0.1），溶氧量大于5mg/L，氨氮浓度小于0.5mg/L。每天观察并记录试验鱼的摄食及活动情况。日投喂率为体重的2%～2.5%，视水温、摄食情况每隔一个星期调整一次投喂量。每天投喂2次（09∶00和
17∶00），投喂后，收集残饵、称重，计算摄食量。

[0026] 试验开始时测定每组试验鱼的初始体重，饲养8周后，测定各组鱼的末体重。测定成活率、增重率和饵料系数。取样前禁食24h，采集血液测定非特异性免疫指标—血清溶菌酶活力、超氧化物歧化酶(SOD)活性和氯化硝基四氮唑兰（NBT）阳性细胞。

[0027] 数据分析

[0028] 数据统计分析试验结果用平均值±标准差表示。不同养殖密度间的差异比较用t检验，不同添加水平之间的差异比较用方差分析（ANOVA）方法检验，差异显著时，用Duncan’s多重比较分析组间差异显著性程度，以P<0.05作为差异显著水平。

[0029] 试验结果及分析

[0030] 饲喂8周后结束试验，对各组试验鱼进行称重，测定草鱼增重率、成活率、饵料系数及免疫指标，结果如表1、表2和表3所示。

[0031] 表1不同养殖密度和中草药免疫增强剂对草鱼体重变化的影响

[0032]

[0033] 注：不同小写字母表示不同添加水平比较差异显著（P＜0.05），*和**表示不同养殖密度比较差异显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）。

[0034] 由表1可知，高密度养殖草鱼对照组、实施例1和实施例2的终末单尾均重显著低于正常养殖密度组草鱼；两个养殖密度的草鱼配合饲料中，添加中草药免疫增强剂实施例3比对照组、实施例1和实施例2终末单尾均重显著增加（P＜0.05），且两个养殖密度组实施例3的终末单尾均重无显著差异；两个养殖密度草鱼配合饲料中，添加中草药免疫增强剂实施例3的增重率显著高于对照组、实施例1和实施例2（P＜0.05）。

[0035] 表2不同养殖密度和中草药免疫增强剂对草鱼成活率、增重率和饵料系数的影响[0036]

[0037] 注：不同小写字母表示不同添加水平比较差异显著（P＜0.05），*和**表示不同养殖密度比较差异显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）。

[0038] 由表2可知，添加对照组草鱼配合饲料，高密度养殖草鱼成活率显著低于正常养殖密度组草鱼（P＜0.05），正常密度养殖草鱼配合饲料中，添加中草药免疫增强剂实施例3的成活率显著高于对照组、实施例1和实施例2（P＜0.05），高密度养殖草鱼配合饲料中，添加中草药免疫增强剂组的成活率均显著高于对照组（P＜0.05），且添加实施例3的中草药免疫增强剂组的成活率最高；草鱼配合饲料中添加不同免疫增强剂，高密度养殖草鱼的饵料系数显著高于正常养殖密度草鱼（P＜0.05），且在高密度养殖草鱼配合饲料中添加中草药免疫增强剂实施例3，其饵料系数显著低于对照组、实施例1和实施例2（P＜0.05）。

[0039] 表3不同养殖密度和中草药免疫增强剂对草鱼非特异性免疫机能的影响[0040]

[0041] 注：不同小写字母表示不同添加水平比较差异显著（P＜0.05），*和**表示不同养殖密度比较差异显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）。

[0042] 由表3可知，高密度养殖草鱼的血清溶菌酶活性、超氧化物歧化酶活性均显著低于正常养殖密度草鱼（P＜0.05），高密度养殖草鱼的NBT细胞数量极显著低于正常养殖密度草鱼（P＜0.01）；高密度养殖草鱼配合饲料中，添加中草药免疫增强剂实施例3的超氧化物歧化酶活性显著高于对照组、实施例1和实施例2（P＜0.05）；两个养殖密度草鱼配合饲料中，添加中草药免疫增强剂实施例3的超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于对照组、实施例1和实施例2（P＜0.05），添加中草药免疫增强剂实施例3的氯化硝基四氮唑兰（NBT）细胞数量比添加实施例1和实施例2显著增加（P＜0.05）。

[0043] 综上所述，添加中草药免疫增强剂能一定程度上提高两个养殖密度（正常和高密度养殖）草鱼的生长性能和免疫机能，尤其实施例3的中草药免疫增强剂对高密度养殖草鱼的生长性能和免疫机能有显著增强。

[0044] 与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

[0045] （1）本发明可有效增强高密度养殖草鱼的非特异性免疫机能、提高成活率。

[0046] （2）本发明作为饲料添加剂无毒无害，并能提高饲料的利用率。

[0047] （3）本发明的使用简单易行，配比合理，价廉物美，与市场同类产品相比，成本显著降低。

[0048] 针对当前草鱼养殖业集约化、规模化生产中草鱼免疫力下降的问题，将中草药免疫增强剂作为饲料添加剂应用到在草鱼高密度养殖饲料中，可达到增强草鱼的免疫机能和提高草鱼成活率的效果。本发明长期使用安全高效无毒副作用，饲料成本低，草鱼生长迅速，饲料转化率高，经济效益大幅提高。

具体实施方式

[0049] 以下结合具体实施例对本发明进行进一步说明。

[0050] 实施例1

[0051] 称取自然干燥的原料：刺五加100g、杜仲60g、大黄100g、黄芪60g、黄芩80g、大青叶110g、苦豆草50g、党参70g，粉碎后过100目筛，再混合均匀即可。

[0052] 使用时，按照1%的重量比添加在草鱼的配合饲料中。

[0053] 实施例2

[0054] 40℃烘干并称取原料：刺五加90g、杜仲80g、大黄115g、黄芪80g、黄芩100g、大青叶130g、苦豆草55g、党参60g，粉碎后过100目筛，再混合均匀即可。

[0055] 使用时，按照2%的的重量比添加在草鱼的配合饲料中。

[0056] 实施例3

[0057] 称取自然干燥的原料：刺五加105g、杜仲85g、大黄110g、黄芪70g、黄芩90g、大青叶115g、苦豆草60g、党参80g，粉碎后过100目筛，再混合均匀即可。

[0058] 使用时，按照2%的的重量比添加在草鱼的配合饲料中。

[0059] 实施例4

[0060] 称取自然干燥的原料：刺五加80g、杜仲50g、大黄100g、黄芪50g、黄芩80g、大青叶100g、苦豆草50g、党参50g，粉碎后过100目筛，再混合均匀即可。

[0061] 使用时，按照3%的的重量比添加在草鱼的配合饲料中。

[0062] 实施例5

[0063] 50℃烘干并称取原料：刺五加120g、杜仲100g、大黄120g、黄芪100g、黄芩100g、大青叶150g、苦豆草80g、党参80g，粉碎后过100目筛，再混合均匀即可。

[0064] 使用时，按照2.5%的的重量比添加在草鱼的配合饲料中。

[0065] 以上所述，仅为本发明的较佳的具体实施例，但本发明的保护范围并不局限于此，