用于治疗冠心病的葛兰心宁软胶囊的固体脂质纳米粒及其制备方法和用途

摘要

本发明提供一种用于治疗冠心病的葛兰心宁软胶囊的固体脂质纳米粒及其制备方法和用途。本发明提供的固体脂质纳米粒包括以下重量份的组分：1）活性成分，1-50份，由以下重量份的原料制成：葛根总黄酮4-60份，山楂提取物1-30份，绞股蓝总苷0.4-10份；2）磷脂或其衍生物，1-100份；3）固体脂质材料，1-100份；以及4）乳化剂，1-50份。本发明通过对活性成份进行固体脂质纳米处理，提高了其溶解性和吸收度，尤其是提高葛根素的生物利用度，发挥了药物治疗效果，还具有生产工艺简单可控、疗效确切、质量稳定、便于贮存，有利于临床应用。

权利要求

1.一种用于治疗冠心病的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质纳米粒包括以下重量份的组分：1）活性成分，5-20份，由以下重量份的原料制成：葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份；2）磷脂或其衍生物，10-80份；3）固体脂质材料，10-100份；

以及4）乳化剂，1-25份;

所述磷脂或其衍生物选自卵磷脂、豆磷脂、脑磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱和二硬脂酰磷脂酰胆碱中的一种或几种；

所述固体脂质纳米粒的粒径小于600nm。

2.一种用于治疗冠心病的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质纳米粒包括以下重量份的组分：1）活性成分，21份，由以下重量份的原料制成：葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份；2）磷脂或其衍生物，80-100份；3）固体脂质材料，100-120份；

以及4）乳化剂，10-12份；

所述磷脂或其衍生物选自卵磷脂、豆磷脂、脑磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱和二硬脂酰磷脂酰胆碱中的一种或几种；

所述固体脂质纳米粒的粒径小于600nm。

3.根据权利要求1或2所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述葛根总黄酮为以葛根素计含量为15-40%重量的葛根提取物；所述山楂提取物为以芦丁计总黄酮大于2.0%重量的山楂提取物；所述绞股蓝总苷为以绞股蓝总苷-A计含量大于70%重量的绞股蓝提取物。

4.根据权利要求1或2所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质材料选自高级脂肪酸酯或高级脂肪醇。

5.根据权利要求4所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质材料选自甘油棕榈酸硬脂酸酯、鲸蜡醇十六酸酯和十八醇中的一种或几种。

6.根据权利要求3所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质材料选自高级脂肪酸酯或高级脂肪醇。

7.根据权利要求6所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质材料选自甘油棕榈酸硬脂酸酯、鲸蜡醇十六酸酯和十八醇中的一种或几种。

8.根据权利要求1或2所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述乳化剂选自聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯脂肪酸酯和泊洛沙姆188中的一种或几种。

9.根据权利要求3所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述乳化剂选自聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯脂肪酸酯和泊洛沙姆188中的一种或几种。

10.根据权利要求4所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述乳化剂选自聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯脂肪酸酯和泊洛沙姆188中的一种或几种。

11.根据权利要求5所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述乳化剂选自聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯脂肪酸酯和泊洛沙姆188中的一种或几种。

12.根据权利要求6所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述乳化剂选自聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯脂肪酸酯和泊洛沙姆188中的一种或几种。

13.根据权利要求7所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述乳化剂选自聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯脂肪酸酯和泊洛沙姆188中的一种或几种。

14.根据权利要求1或2所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质纳米粒的粒径为50-400nm。

15.根据权利要求3所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质纳米粒的粒径为50-400nm。

16.根据权利要求4所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质纳米粒的粒径为50-400nm。

17.根据权利要求5所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质纳米粒的粒径为50-400nm。

18.根据权利要求6所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质纳米粒的粒径为50-400nm。

19.根据权利要求7所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质纳米粒的粒径为50-400nm。

20.根据权利要求8所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质纳米粒的粒径为50-400nm。

21.根据权利要求9所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质纳米粒的粒径为50-400nm。

22.根据权利要求10所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质纳米粒的粒径为50-400nm。

23.根据权利要求11所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质纳米粒的粒径为50-400nm。

24.根据权利要求12所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质纳米粒的粒径为50-400nm。

25.根据权利要求13所述的固体脂质纳米粒，其特征在于，所述固体脂质纳米粒的粒径为50-400nm。

26.一种制备权利要求1至25中任一项所述固体脂质纳米粒的方法，其特征在于，所述方法选自熔融超声法、高压乳匀法、乳化-溶剂挥发法、微乳法。

27.一种用于治疗冠心病的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂包含权利要求1至25中任一项所述的固体脂质纳米粒。

28.根据权利要求27所述的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂为片剂或胶囊剂。

29.根据权利要求28所述的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂为葛兰心宁软胶囊。

30.权利要求1至25中任一项所述的固体脂质纳米粒在制备用于治疗冠心病的药物制剂中的用途。

31.根据权利要求30所述的用途，其特征在于，所述药物制剂为片剂或胶囊剂。

32.根据权利要求31所述的用途，其特征在于，所述药物制剂为葛兰心宁软胶囊。

说明书

用于治疗冠心病的葛兰心宁软胶囊的固体脂质纳米粒及其

制备方法和用途

技术领域

[0001] 本发明属于医药领域，涉及一种用于治疗冠心病的固体脂质纳米粒及其制备方法和用途，具体涉及一种用于治疗冠心病的葛兰心宁软胶囊的固体脂质纳米粒及其制备方法和用途。

背景技术

[0002] 冠心病是一种最常见的心脏病，是指因冠状动脉狭窄、供血不足而引起的心肌机能障碍和（或）器质性病变，故又称缺血性心脏病（IHD）。冠心病的治疗原则是改善冠状动脉的供血和减轻心肌的耗氧，同时治疗动脉粥样硬化。已有的治疗冠心病的化学药物主要分为以下三类：

[0003] 第1类，硝酸盐制剂，其主要作用是扩张冠状动脉，降低阻力，增加冠状循环的血流量外，减低心脏前后负荷和心肌的需氧，以此来缓解心绞痛。常用的有硝酸甘油、亚硝酸异戊酯、戊四硝酯及硝酸异山梨醇酯等。

[0004] 第2类，β受体阻滞剂，其主要作用是阻断拟交感胺类对心率和心收缩力的刺激作用，减慢心率，降低血压，减低心肌收缩力和氧耗量，以此来缓解心绞痛的发作。最常用的有阿替洛尔、比索洛尔、美托洛尔、艾司洛尔、普奈洛尔等。

[0005] 第3类，钙通道阻滞剂，主要作用为抑制钙离子进入细胞内，也抑制心肌细胞兴奋—收缩耦联中钙离子的作用，从而抑制心肌收缩，减少心肌氧耗，改善心内膜下心肌的血供。常用的有硝苯地平、尼莫地平、氨氯地平、地尔硫卓等。

[0006] 虽然目前这些化学药物的治疗作用在于缓解或减少心绞痛发作，对于冠心病、心绞痛急性发作期的临床已能基本控制，但是仍然不能彻底解决冠状动脉狭窄问题及动脉粥样硬化问题，由于化学药物还具有毒副反应大，不良反应多的缺点，不适用于冠心病、心绞痛的缓解期。

[0007] 葛兰心宁软胶囊（国家药品标准（试行）WS-10370(ZD-0370)-2002 ，国药准字Z20025490）的处方为葛根总黄酮200g ；山楂提取物60g；绞股蓝总皂苷20g；色拉油254g ；蜂蜡6g ；氢化棕榈油20g ；大豆磷脂10g；甲基硅油0.5g，制成1000粒 。其具有活血化瘀、通络止痛的功能，用于瘀血闭阻所致的冠心病、心绞痛的治疗。

[0008] 因此，在本申请人的中国专利CN1282467C中，公开了一种治疗冠心病和心绞痛的中药组合物，该药物处方以葛根总黄酮、绞股蓝总苷和山楂提取物为活性成分，具有扩张冠脉、降压、降血脂的功效，特别适用于治疗轻、中度的冠心病。但是，由于在该专利中制备的是中药软胶囊，存在贮存条件要求严格（晾暗处），不到有效期就有可能出现崩解时限均超限的现象，药物内容物易沉淀，易发生药液渗漏，影响药物的贮存、吸收和疗效，严重阻碍了临床应用；另外，软胶囊生产过程复杂，质量较难控制，物料损耗高导致成品收率低、成本高，严重制约了此类产品的临床应用，使处方治疗优势无法实现经济学优势。为此，在中国专利申请CN101703592A中，公开了将该中药组合物进行羟丙基β环糊精包合后压片，解决了软胶囊在有效期内质量不稳定的问题。但是，作为一种中药分散片，也有其局限性，包括要选择良好的崩解剂，成本较高；质量要求相对较高，质量标准控制难度较大；另外，由于分散片使用的崩解剂量较大，吸湿性较强，对包装材料的阻湿效果要求更高，故包装及贮藏成本也较高。

发明内容

[0009] 因此，本发明的目的是，提供一种用于治疗冠心病的固体脂质纳米粒。

[0010] 本发明的另一个目的是，提供一种制备上述固体脂质纳米粒的方法及其用途。

[0011] 本发明的目的是通过以下技术方案来实现的。一方面，本发明提供一种用于治疗冠心病的固体脂质纳米粒，所述固体脂质纳米粒包括以下重量份的组分：1）活性成分，1-50份，由以下重量份的原料制成：葛根总黄酮4-60份，山楂提取物1-30份，绞股蓝总苷
0.4-10份；2）磷脂或其衍生物，1-100份；3）固体脂质材料，1-100份；以及4）乳化剂，1-50份。

[0012] 优选地，所述固体脂质纳米粒包括以下重量份的组分：1）活性成分，5-20份，由以下重量份的原料制成：葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份；2）磷脂或其衍生物，10-80份；3）固体脂质材料，10-100份；以及4）乳化剂，1-25份。

[0013] 优选地，所述固体脂质纳米粒包括以下重量份的组分：1）活性成分，21份，由以下重量份的原料制成：葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份；2）磷脂或其衍生物，80-100份；3）固体脂质材料，100-120份；以及4）乳化剂，10-12份。

[0014] 优选地，所述葛根总黄酮为以葛根素计含量为15-40%的葛根提取物；所述山楂提取物为以芦丁计总黄酮大于2.0%的山楂提取物；所述绞股蓝总苷为以绞股蓝皂苷-A计含量大于70%的绞股蓝提取物。

[0015] 优选地，所述磷脂或其衍生物选自卵磷脂、大豆磷脂、脑磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱（DPPC）和二硬脂酰磷脂酰胆碱（DSPC）中的一种或几种。

[0016] 优选地，所述固体脂质材料选自高级脂肪酸酯或高级脂肪醇，例如甘油棕榈酸硬脂酸酯、鲸蜡醇十六酸酯和十八醇中的一种或几种。

[0017] 优选地，所述乳化剂选自聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯脂肪酸酯和泊洛沙姆188中的一种或几种。

[0018] 优选地，所述固体脂质纳米粒的粒径小于800nm，优选为50-400nm，更优选为50-200nm。

[0019] 另一方面，本发明提供一种制备上述固体脂质纳米粒的方法，上述方法选自熔融超声法、高压乳匀法、乳化-溶剂挥发法或微乳法。

[0020] 此外，本发明还提供了一种用于治疗冠心病的药物制剂，所述药物制剂包含上述固体脂质纳米粒。优选地，所述药物制剂为片剂或胶囊剂。最优选地，所述药物制剂为葛兰心宁软胶囊。

[0021] 本发明还提供了上述固体脂质纳米粒在制备用于治疗冠心病的药物制剂中的用途。优选地，所述药物制剂为片剂或胶囊剂。最优选地，所述药物制剂为葛兰心宁软胶囊。

[0022] 在本发明的一个优选实施方案中，所用葛根总黄酮是指取以葛根素计含量在15%-40%重量、粒度120-200目的葛根提取物；山楂提取物是指以芦丁计总黄酮大于2.0%重量、粒度150目的山楂提取物；绞股蓝总苷是指以绞股蓝皂苷-A计含量大于70%重量、粒度150目的绞股蓝提取物。所提供的优选制备方法如下：（1）取葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份，置于混合机内混合均匀，备用；（2）取药用磷脂（豆磷脂、卵磷脂、脑磷脂）80-100份、乳化剂（聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、卖泽）10-12份、固体脂质材料（甘油棕榈酸硬脂酸酯、鲸蜡醇十六酸酯、十八醇等）100-120份，将（1）中的混合物、磷脂、脂质材料溶于适量的有机溶剂构成有机相；将表面活性剂溶于适量的水中构成水相；有机相和水相分别加热至相同温度，在搅拌条件下将有机相注入水相中，形成透明体系；将此透明体系减压除去有机溶剂，浓缩后混于0-4℃的水相中搅拌降温再经高压均质机处理，得固体脂质纳米粒混悬液，备用；（3）将（2）中得到的纳米粒混悬液喷雾干燥或经冷冻干燥，即得固体脂质纳米颗粒，置于混合机内，加入羧甲基淀粉钠0.6-1.0份或微粉硅胶 0.2-0.6份，混合5-15 min；填充或压片，分装，即得。

[0023] 可见，本发明提供了一种治疗冠心病和心绞痛的药物，所述药物为固体脂质纳米粒，其处方以葛根总黄酮、绞股蓝总苷和山楂提取物为主要成分，并含有可药用的磷脂、乳化剂、固体脂质材料等，将处方中的原料药（活性成分）包载于固体脂质纳米粒中，然后再与其它辅料混合装入胶囊或压制成片剂。

[0024] 在前期研究中，为制备固体脂质纳米粒，本发明人曾尝试各种固体脂质材料的用量，当固体脂质材料的用量与药物活性成分用量相同时，无论怎样变化其它的辅料，结果所得的纳米粒包封率都很低，只有20%左右。若增大固体脂质材料的量，如1份药物中，按重量计算，投入100份或200份以上的固体脂质材料，即使增加高压均质的压力后，所制得的纳米粒径也很大，能达到将近600纳米左右。此外，优选处方的结果表明，如果乳化剂的用量太少，将不能形成稳定的乳剂，如果乳化剂用量过大，则制得的纳米粒混悬液泡沫很多，此外还要考虑乳化剂用量过高带来的毒性问题，因此按重量计算，投入1-50份乳化剂，尤其是1-25份较为适宜；在选用磷脂用量的过程中，发现磷脂用量太低，则制得的纳米粒体系比较粘稠，同时也不适合工业化生产，此外，适量的磷脂作为亲脂基团，有利于活性成分的释放。因此优化的结果是投入磷脂1-100份，特别是10-80份。通过多种辅料、多种用量比的多次试验，最后形成了适合固体脂质纳米粒的配方，即活性成分原料药、药用磷脂、乳化剂、固体脂质材料按重量份数比为1-50：1-100：1-50：1-100，较好的配方为5-20：10-80：1-25：10-100。

[0025] 可见，本发明对处方中药理成份进行固体脂质纳米处理，提高了其溶解性和吸收度，尤其是提高葛根素的生物利用度，发挥了药物治疗效果，还具有生产工艺简单可控、疗效确切、质量稳定、便于贮存，有利于临床大量应用，有显著的临床治疗经济学意义。

附图说明

[0026] 以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：

[0027] 图1为本发明提供的固体脂质纳米粒的电镜照片；

[0028] 图2为本实施例10中测试的累积释放曲线。

具体实施方式

[0029] 以下参照具体的实施例来说明本发明。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅用于说明本发明，其不以任何方式限制本发明的范围。

[0030] 以下对各实施例中使用的原材料说明如下：

[0031] 1）葛根总黄酮

[0032] 本品为豆科植物葛根[Pueraria lobata (Willd.) Ohwi]的乙醇提取物（总黄酮），含葛根素（Ｃ21Ｈ20Ｏ9）不得少于15.0％，其制备方法如下：

[0033] 取野葛根，破碎成粗粉，第一次加70%乙醇8倍量浸润，1小时后回流提取，第二次加70%乙醇8倍量回流提取，每次2小时，合并两次提取液，滤过，减压浓缩至相对密度至1.05～1.15（60℃热测）的浸膏，喷雾干燥，即得葛根总黄酮。

[0034] 2）山楂提取物

[0035] 本品为蔷薇科植物山里红（Crataegus pinnatifida Bge var. major N. E. Br）或山楂（Crataegus pinnatifida Bgede）的干燥成熟果实的70％乙醇提取物。于60℃干燥6小时，含芦丁(C27H30O16) 不得少于2.0％。具体的制备方法如下：

[0036] 取山楂，粉碎成粗粉，第一次加70%乙醇8倍量，第二次加70%乙醇6倍量，加热回流提取两次，每次2小时，合并两次提取液，滤过，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05～1.15（60℃热测）的浸膏，喷雾干燥，即得。

[0037] 3）绞股蓝总苷可以通过市场购买，例如购自安康正大制药有限公司。

[0038] 以下实施例1-7提供了制备本发明固体脂质纳米粒的实施例。

[0039] 实施例1

[0040] 本实施例制备的固体脂质纳米粒的原料重量组分如下：

[0041] 葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份，卵磷脂80份，聚氧乙烯氢化蓖麻油10份，甘油棕榈酸硬脂酸酯100份。

[0042] 制备方法如下：

[0043] 1）取葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份，置于多维混合机内混合10分钟，混合均匀，备用；

[0044] 2）取豆磷脂80份、聚氧乙烯氢化蓖麻油10份、甘油棕榈酸硬脂酸酯100份，将步骤1）的活性成分、卵磷脂、甘油棕榈酸硬脂酸酯溶于适量的丙酮溶液构成有机相；将聚氧乙烯氢化蓖麻油溶于适量的水中构成水相；有机相和水相分别加热至75℃，在搅拌条件下将有机相注入水相中，形成透明体系；将此透明体系减压除去有机溶剂，浓缩后混于0-4℃的水相中搅拌降温，再经高压均质机处理，得到固体脂质纳米粒混悬液，备用；

[0045] 3）将步骤2）制备的纳米粒混悬液喷雾干燥，即得固体脂质纳米颗粒，置于混合机内，加入微粉硅胶0.2份，混合5 分钟，填充，分装，即得。

[0046] 实施例2

[0047] 本实施例制备的固体脂质纳米粒的原料重量组分如下：

[0048] 葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份，二棕榈酰磷脂酰胆碱（DPPC）100份，聚氧乙烯氢化蓖麻油12份，甘油棕榈酸硬脂酸酯120份。

[0049] 制备方法如下：

[0050] 1）取葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份，置于多维混合机内混合15分钟，混合均匀，备用；

[0051] 2）取二棕榈酰磷脂酰胆碱100份、聚氧乙烯氢化蓖麻油12份、鲸蜡醇十六酸酯120份，将步骤1）的活性成分、二棕榈酰磷脂酰胆碱、鲸蜡醇十六酸酯溶于适量的乙醇溶液构成有机相；将聚氧乙烯氢化蓖麻油溶于适量的水中构成水相；有机相和水相分别加热至
70℃，在搅拌条件下将有机相注入水相中，形成透明体系；将此透明体系减压除去有机溶剂，浓缩后混于0-4℃的水相中搅拌降温再经高压均质机处理，得固体脂质纳米粒混悬液，备用；

[0052] 3）将步骤2）制备的纳米粒混悬液经冷冻干燥，即得固体脂质纳米颗粒，置于混合机内，加入微粉硅胶 0.4份，混合10分钟，填充，分装，即得。

[0053] 实施例3

[0054] 本实施例制备的固体脂质纳米粒的原料重量组分如下：

[0055] 葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份，二硬脂酰磷脂酰胆碱（DSPC）100份，泊洛沙姆188 10份，十八醇100份。

[0056] 制备方法如下：

[0057] 1）取葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份，置于多维混合机内混合10分钟，混合均匀，备用；

[0058] 2）取二硬脂酰磷脂酰胆碱100份、泊洛沙姆188 10份，十八醇100份，将步骤1）的活性成分、二硬脂酰磷脂酰胆碱、十八醇溶于适量的异丙醇溶液构成有机相；将泊洛沙姆188溶于适量的水中构成水相；有机相和水相分别加热至80℃，在搅拌条件下将有机相注入水相中，形成透明体系；将此透明体系减压除去有机溶剂，浓缩后混于0-4℃的水相中搅拌降温再经高压均质机处理，得固体脂质纳米粒混悬液，备用；

[0059] 3）将步骤2）制备的纳米粒混悬液在-40℃冷冻干燥，即得固体脂质纳米颗粒，置于混合机内，加入微粉硅胶0.6份，混合15 分钟，填充，分装，即得。

[0060] 实施例4

[0061] 本实施例制备的固体脂质纳米粒的原料重量组分如下：

[0062] 葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份，卵磷脂80份，聚氧乙烯氢化蓖麻油10份，甘油棕榈酸硬脂酸酯100份。

[0063] 制备方法如下：

[0064] 1）取葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份，置于多维混合机内混合10分钟，混合均匀，备用；

[0065] 2）取卵磷脂80份、聚氧乙烯氢化蓖麻油10份、甘油棕榈酸硬脂酸酯100份，将步骤1）的活性成分、卵磷脂、甘油棕榈酸硬脂酸酯溶于适量的丙酮溶液构成有机相；将聚氧乙烯氢化蓖麻油溶于适量的水中构成水相；有机相和水相分别加热至75℃，在搅拌条件下将有机相注入水相中，形成透明体系；将此透明体系减压除去有机溶剂，浓缩后混于0-4℃的水相中搅拌降温再经高压均质机处理，得固体脂质纳米粒混悬液，备用；

[0066] 3）将步骤2）制备的纳米粒混悬液喷雾干燥，即得固体脂质纳米颗粒，置于混合机内，加入微粉硅胶 0.2份，羧甲基淀粉钠0.6份，混合5 分钟，压片，分装，即得。

[0067] 实施例5

[0068] 本实施例制备的固体脂质纳米粒的原料重量组分如下：

[0069] 葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份，二棕榈酰磷脂酰胆碱（DPPC）100份，聚氧乙烯氢化蓖麻油12份，甘油棕榈酸硬脂酸酯120份。

[0070] 制备方法如下：

[0071] 1）取葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷 2份，置于多维混合机内混合15分钟，混合均匀，备用；

[0072] 2）取二棕榈酰磷脂酰胆碱（DPPC）100份、聚氧乙烯氢化蓖麻油12份、鲸蜡醇十六酸酯120份，将步骤1）的活性成分、卵磷脂、鲸蜡醇十六酸酯溶于适量的乙醇溶液构成有机相；将聚氧乙烯氢化蓖麻油溶于适量的水中构成水相；有机相和水相分别加热至70℃，在搅拌条件下将有机相注入水相中，形成透明体系；将此透明体系减压除去有机溶剂，浓缩后混于0-4℃的水相中搅拌降温再经高压均质机处理，得固体脂质纳米粒混悬液，备用；

[0073] 3）将步骤2）制备的纳米粒混悬液经冷冻干燥，即得固体脂质纳米颗粒，置于混合机内，加入微粉硅胶0.4份，羧甲基淀粉钠0.8份，混合10分钟，压片，分装，即得。

[0074] 实施例6

[0075] 本实施例制备的固体脂质纳米粒的原料重量组分如下：

[0076] 葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份，二硬脂酰磷脂酰胆碱（DSPC）100份，泊洛沙姆188 10份，十八醇100份。

[0077] 制备方法如下：

[0078] 1）取葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份，置于多维混合机内混合10分钟，混合均匀，备用；

[0079] 2）取二硬脂酰磷脂酰胆碱（DSPC）100份、泊洛沙姆188 10份，十八醇100份，将步骤1）的活性成分、二硬脂酰磷脂酰胆碱（DSPC）、十八醇溶于适量的异丙醇溶液构成有机相；将泊洛沙姆188溶于适量的水中构成水相；有机相和水相分别加热至80℃，在搅拌条件下将有机相注入水相中，形成透明体系；将此透明体系减压除去有机溶剂，浓缩后混于0-4℃的水相中搅拌降温再经高压均质机处理，得固体脂质纳米粒混悬液，备用；

[0080] 3）将步骤2）制备的纳米粒混悬液在-40℃冷冻干燥，即得固体脂质纳米颗粒，置于混合机内，加入微粉硅胶0.6份，羧甲基淀粉钠1.0份，混合15分钟，填充，分装，即得。

[0081] 实施例7

[0082] 本实施例制备的固体脂质纳米粒的原料重量组分如下：

[0083] 葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份，卵磷脂80份，聚氧乙烯氢化蓖麻油15份，甘油棕榈酸硬脂酸酯100份。

[0084] 制备方法如下：

[0085] 1）取葛根总黄酮15份，山楂提取物4份，绞股蓝总苷2份，置于多维混合机内混合10分钟，混合均匀，备用；

[0086] 2）取卵磷脂80份、聚氧乙烯氢化蓖麻油15份，甘油棕榈酸硬脂酸酯100份，将步骤1）的活性成分、卵磷脂、十八醇溶于适量的CH2Cl2溶解；置旋转蒸发仪上40℃减压干燥成膜脂质均匀成膜。再抽真空30 min 除尽有机溶剂。加入一定量三羟甲基氨基甲烷缓冲溶液充分水合，在40℃水浴下震荡水化2 h使膜脱落，冰水浴中超声至形成固体脂质纳米粒水性悬浊液，4℃下保存，备用。

[0087] 3）将步骤2）制备的纳米粒混悬液在-40℃冷冻干燥，即得固体脂质纳米颗粒，置于混合机内，加入微粉硅胶0.6份，羧甲基淀粉钠1.0份，混合15分钟，填充，分装，即得。

[0088] 实施例8 包封率的测定

[0089] 本实施例采用鱼精蛋白凝聚法对以上实施例1-7中制备的固体脂质纳米粒包封率进行了考察。葛根素的含量测定采用高效液相色谱法［参见《中国药典》2011版一部“葛根中葛根素的含量测定方法”］。具体操作如下：

[0090] 分别取固体脂质纳米粒各试样混悬液摇匀，精密量取0.1 mL，分别置50 mL量瓶中，加甲醇溶解，测定固体脂质纳米粒中总药物的浓度。另外，分别取固体脂质纳米粒各试样混悬液摇匀，精密量取0.1 mL，分别置于10 mL锥形离心管中，加入0.1 mL鱼精蛋白溶液（10 mg/mL），搅匀，静置3 min，再加3 mL生理盐水，在室温条件下离心20 min（2000转/分钟）吸取2 mL上清液，测定游离药物的浓度。以甲醇为空白，分别取固体脂质纳米粒各试样溶液，测定其葛根素含量，并计算各制备工艺固体脂质纳米粒的包封率。

[0091] 结果显示，以上实施例制备的固体脂质纳米粒的药物包封率均达80%以上。

[0092] 实施例9 粒径和形态的观察

[0093] 本实施例经透射电镜观察所制备的固体脂质纳米粒粒径和形态。

[0094] 经透射电镜观察可见，固体脂质纳米粒是粒径很小的圆形小球，粒径较为均匀，相互之间没有聚集现象，如图1所示。

[0095] 取实施例2制备的固体脂质纳米粒适量，置激光散射仪中，测定其粒径大小和粒径分布。结果显示：最大粒径为780nm，最小粒径为20nm，平均粒径为200nm，80％分布在50～400nm。

[0096] 实施例10 体外释放行为的考察

[0097] 将实施例2制备的固体脂质纳米粒经离心洗涤除去游离的药物，沉降的固体脂质纳米粒用乙醇稀释至1 mL，加入装有100 mL乙醇的广口瓶中，置于37℃恒温水浴摇床中。分别于0、0.5、1、2、4、6、8、12、24h取样，样品经微孔滤膜滤过，测定续滤液中药物浓度，计算各时间点的累积释药百分率：累积释放百分率＝释放的药物总量/总药物量×100％。同时，以相同活性成分的软胶囊和分散片样品（参见CN1282467C和CN101703592A）作为对照。

[0098] 累积释放曲线见图2。体外释放行为考察结果表明，固体脂质纳米粒的体外释放度比软胶囊或分散片的体外释放度显著提高。

[0099] 实施例11 稳定性的考察

[0100] 取实施例2制备的固体脂质纳米粒，4℃低温保存，每隔1天测定其渗透率。固体脂质纳米粒溶液20 d渗透率仅为2.1%，表明所制备的固体脂质纳米粒较为稳定。