用于治疗涉及血蛋白渗出的皮肤病及缓和该皮肤病的症状的贴片

摘要

本发明涉及一种用于治疗和缓和伴随有血蛋白渗出的皮肤病的症状的贴片，或者用于吸附从皮肤渗出的血蛋白的贴片。

权利要求

1.一种用于治疗涉及血蛋白渗出的皮肤病或缓和该皮肤病的症状的贴片，该贴片包括：a)琼脂糖-凝胶；和

b-1)多种具有二乙胺基乙基基团的树脂，其选自具有二乙胺基乙基基团的琼脂糖、具有二乙胺基乙基基团的葡聚糖凝胶和具有二乙胺基乙基基团的琼脂糖凝胶；b-2)多种具有羧甲基基团的树脂，其选自具有羧甲基基团的琼脂糖、具有羧甲基基团的葡聚糖凝胶和具有羧甲基基团的琼脂糖凝胶，其中，所述皮肤病选自特应性皮炎、湿疹、和牛皮癣。

2.根据权利要求1所述的用于治疗皮肤病或缓和该皮肤病的症状的贴片，其中，所述贴片是通过多种排列具有不同极性的树脂来制备的。

3.根据权利要求1所述的治疗皮肤病或缓和该皮肤病的症状的贴片，其中，所述贴片进一步包含双饱和的磷脂、有机酸以及2价阳离子。

4.根据权利要求1所述的治疗皮肤病或缓和该皮肤病的症状的贴片，其中，所述贴片进一步包含三酰甘油、神经酰胺、神经酰胺衍生物、从动物中萃取的复合脂质或合成的脂质。

5.一种用于诊断涉及血蛋白渗出的皮肤病的贴片，该贴片包括

a)琼脂糖-凝胶；和

b)多种具有二乙胺基乙基基团的树脂，其选自具有二乙胺基乙基基团的琼脂糖、具有二乙胺基乙基基团的葡聚糖凝胶和具有二乙胺基乙基基团的琼脂糖凝胶；b-2)多种具有羧甲基基团的树脂，其选自具有羧甲基基团的琼脂糖、具有羧甲基基团的葡聚糖凝胶和具有羧甲基基团的琼脂糖凝胶，其中，所述皮肤病选自特应性皮炎、湿疹、和牛皮癣。

说明书

用于治疗涉及血蛋白渗出的皮肤病及缓和该皮肤病的症状

的贴片

技术领域

[0001] 本发明是关于用于治疗涉及血蛋白渗出的皮肤病以及缓和该皮肤病的症状的贴片，或用于吸附渗出皮肤的血蛋白的贴片。

背景技术

[0002] 特应性疾病的起因的新理论。

[0003] 诸如遗传因素、花粉、尘螨、化学品（例如甲醛）、和西方化食品等的各种因素被认为是导致特应性疾病的原因。然而，仍然不清楚该疾病的确切起因。作为特应性疾病中所显示的免疫学结果，具有如下独特的特征，即当表皮被感染时Th1细胞被激活，并且作为在持续暴露于大抗原时所显示的一种现象（如寄生物感染），或者作为控制免疫调节的机制，Th2细胞是积极活性的。本发明没有强调在特应性疾病中所显示的独特的免疫学现象。然而。在本发明中，认为由于新陈代谢的不平衡或身体新陈代谢紊乱而使从血管渗出的血蛋白渗透到皮组织的现象是特应性疾病的起因和根本原因。因此，认为通过血蛋白的渗出引起在特应性疾病中所产生的免疫反应。基于上述考虑，本发明设法解决该问题。此外，还认为牛皮癣是由血蛋白的渗出引起的，从而本发明提出了基于上述原因治疗牛皮癣的新治疗法。

[0004] 在20世纪80年代之前（在美国或英国20世纪70年代之前），受特应性疾病之苦的患者出现率并不高，并且它决没有成为社会问题。然而，自从20世纪80年代后期，受特应性疾病之苦的患者出现率剧增，并且最近，1/5的小学生显示出特应性疾病的症状。因此特应性疾病已成为严重的社会问题。20世纪70年代和21世纪00年代之间的比较结果表明在与过去的20-30年相比由于禁止使用含铅汽油、政府对机动车尾气排放的严格管制、引进使用天然气的公共交通、工厂粉尘管制、对工厂排放的污染物分类（成为工业综合体）政策等原因，空气污染明显减少。由此，认为在目前环境和条件下受特应性疾病之苦的患者不会增加。

[0005] 目前生活空间比20世纪70年代房屋有更大的窗户，并且也改变了结构以便房屋室内接收更多的阳光。带微滤器的真空吸尘器越来越普遍，使用杀菌功能的洗衣机，并且洗涤剂越来越强且多样化。与前些年相比，在目前的条件下尘螨难以生存。也就是说，很难解释发生特应性疾病频率与尘螨有关。与城市相比农村地区有各种各样的草。与城市相比农村地区的花粉浓度更高。然而，在城市发生特应性疾病频率远远高于农村地区。花粉的浓度和特应性疾病的出现率之间没有关系。因此，很难认为花粉是特应性疾病的原因。

[0006] 与20世纪70年代相比，城市文化有显著的变化，包括：承办宴会的店、多种快餐店、便利的公众交通系统、私人汽车等。此外，自20世纪80年代中期开始，最显著地变化是饮食变化，特别是大量提供低成本的食用油（大豆油、玉米油、橄榄油、葡萄籽油、棉花籽油等）。因此，出乎意料地盛行采用这些油在油里加热的食品。此外，含有大量反式-油和亚油酸的人造奶油开始盛行。由于广告，即：由于人造奶油降低胆固醇含量，所以有助于身体健康，所以在短时间内人造奶油消费急剧增加。事实上，市售植物油产品是通过采用溶剂（例如，正己烷）的萃取工艺来制备的。其结果是，大部分市售植物油是以非常清澈且透明的状态的没有极性脂质的纯中性油脂，包含大量的不饱和脂肪酸。依据人类进化的过程，可以很容易地推断出人们当前吸收太多含有大量不饱和脂肪酸植物的中性油脂。也就是说，认为发生了可以大大地影响人类脂质新陈代谢的生理上革命性变化。通过长时间进化，人类吃含有自然状态的顺式-型的脂肪酸，但现在吃大量反式-型的脂肪酸。作为进化的结果，人体没有将反式-型的脂肪酸转化为顺式-型脂肪酸的酶。摄取顺式-型的脂肪酸使整个脂质新陈代谢慢下来。由于公共交通的发展和便利，迅速地减少了体育活动水平，因此在人体内形成了不能将摄取的脂肪酸转化为能量的状况。另外，可以认为由于保温系统和服装材料的发展，人体可接受的生活温度急剧地增加。

[0007] 总之，可以认为所述状况已经形成为有助于产生皮肤病如特应性疾病和牛皮癣的，这是因为由于减少脂肪向能量转化，含有不饱和脂肪酸的中性脂肪的过分放纵、摄取反式-油以及体育活动程度的减少，而引起脂质新陈代谢的不平衡，以及由于生活温度的增加，而形成可以扩张毛细管和不能完成毛细管功能的环境。

[0008] 牛皮癣和特应性疾病的区别和相似点

[0009] 从 Wolfe 等 人（Wolfe R.R.,Martini W.Z.,Irtun O.,Hawkins H.K.,Bawwow R.E.(2002)Dietary fat composition alter pulmonary function in pigs.nutrition.18:647-653）研究的结果中可以清楚地得知由于摄取大量植物不饱和脂肪酸而丧失肺机能。通过摄取植物油而丧失肺组织的顺应性，以及渗出血浆蛋白由此影响其功能。
类似地，摄取大量不饱和脂肪酸可能影响皮肤。受特应性疾病之苦的患者具有高含量高密度脂蛋白-胆固醇（HLD-cholesterol）（Schafer T.等人，(2003)Intake of unsaturated fatty acids and HDL cholesterol level and associated with manifestations of atopy in adults.Clin.Exp.Allergy.33:1360-1367）。可以解释为在摄取脂质后，活性脂质被传送到每个器官。包含不饱和脂肪的脂质传送到皮肤可能影响表皮细胞和血管细胞的膜成分，并且具有高的流动性的不饱和脂肪酸可以降低血管的功能，由此产生血浆蛋白，特别是白蛋白和免疫球蛋白G（IgG)的渗出。该渗出通过血管细胞之间的间隙来完成，作为其证据，因此渗出的蛋白质的大小被限制。容易渗出具有150KDa尺寸的IgG，但是与上述IgG相比具有更大尺寸的蛋白质不容易渗出。该分泌机制可以显示在受牛皮癣之苦的患者以及受特应性疾病之苦的患者当中。可以推断除了由于感染或强烈的物理刺激情况之外，通过产生毛血管的功能或结构的变化，可能发生牛皮癣和特应性疾病中所显示的红皮症或水肿病。重要的是牛皮癣和特应性疾病是极其不同的新陈代谢。尽管受特应性疾病之苦的患者具有高含量的HDL-胆固醇，但是受牛皮癣之苦的患者却有非常高含量的血胆固醇和三酰甘油。有趣地是，在受牛皮癣之苦的患者中分泌中性脂质成分产物的皮脂腺尺寸很小。
根据简单分析，表明合成来自血管的皮质所要求的脂质输送可能存在问题。与特应性疾病相似的情况是，用于保护皮肤所需要的神经酰胺脂质在表皮中是低的。尽管包含在牛皮癣和特应性疾病的血液中的脂质构成不同，但是两者之间共同基础是在体内脂质的新陈代谢活跃。在牛皮癣和特应性疾病中特别值得注意的共同点是在两种疾病中所产生的血蛋白渗出。可以推论出尽管在体内脂质的新陈代谢活跃地发生，但是可能存在向表皮传送脂质过程，或需要的特殊脂质不往表皮传送的问题。

[0010] 对炎症反应和血蛋白的新理解

[0011] 牛皮癣和特应性疾病之间的共同基础是，血蛋白从微血管漏出，然后渗出皮肤组织。渗出的蛋白质具有有限的分子量，并且包含大量百分比的免疫球蛋白G（IgG，150KDa）和皮脂血清白蛋白（66KDa）。可以预料到渗出皮肤的蛋白质可能慢慢地干燥、随机结合（低-亲合力地随机结合）、非选择性结合的非特定结合、或者当增加周围的盐浓度时相互团聚，其不象在血管内部的蛋白质。可以推论以连续产生的恶性循环，由于在蛋白质干燥时通过搔痒和产生荨麻疹的物理刺激，所以通过促进组胺的分泌，急剧增加渗出量。可以推论出由于尽管没有来自外部入侵的过敏原或感染，但是渗出抗体的非特定或随机的团聚的现象可能被认为是在感染的情况中相似的信号，所以第一中性粒细胞移向组织，由此可以召集多种免疫细胞。特别是，在慢性特应性疾病情况下在组织中召集巨噬细胞的现象是由Th2细胞因连续抗原暴露的免疫机制而产生的。但是，可以说明通过清除渗出的血蛋白的团聚机制而简单产生该现象。该清除机制的例子包括被先天性肺泡蛋白沉积症中巨噬细胞清理表面活性蛋白和脂质的团聚块。可以解释关于蛋白质渗出症状的在特应性疾病中观察到的嗜曙红细胞的运动和激活。众所周知嗜曙红细胞分泌阳离子蛋白质。它可能是用于使渗出的蛋白质团聚后再去除渗出的蛋白质的简单细胞学机制之一。另外，可简单地理解为在通过胸膜腔中的过敏原的感染或敏化召集嗜酸性粒细胞后，为了控制或减少血蛋白渗出而召集嗜曙红细胞一样，为了减少在特应性疾病中继续产生的血蛋白渗出而在渗出部位召集嗜曙红细胞。

[0012] 解决牛皮癣和特应性疾病的新方法

[0013] 基于上述提出的基础，如果牛皮癣和特应性疾病通常通过脂质新陈代谢的不平衡和异常而发生，以及作为其结果，通过使由组织中的血管渗漏的血蛋白向组织中渗漏，然后团聚而诱发多种炎症反应，则可以提出治疗所述疾病的新方法。

[0014] 作为最重要且优先治疗该疾病的方法，应该抑制摄取植物油，特别是中性植物油，以及应该摄取不采用在烹饪过程中产生反式-油的方法而烹制的食物或含有反式-油的食物。由于该饮食控制方法应该实施到体内的脂质成分以某种水平而变化，所以该方法需要相当多的时间和精力。存在由于有特应性疾病的患者受严重的搔痒之苦，治疗该疾病的时间长，但是必须采用控制饮食的方法的问题。

[0015] 第二个方法是，通过在病区局部地抑制血蛋白渗出而缓和炎症以及然后恢复表皮正常状态。该方法是由本发明人先前提出的，且在澳大利亚、新加坡、以及俄罗斯、另外现在在韩国被注册为专利（韩国专利号0891595、澳大利亚专利号2006217261、PCT专利号PCT/KR2006/000638）。该方法是通过将包含在动物肺中大量存在的双饱和的磷脂的组合物应用到病区，改变相关细胞和血管细胞的脂质新陈代谢，并且抑制血蛋白渗出。该方法需要治疗时间，即平均8到12周，并且有严重症状的患者的情况下需要更长的时间。

[0016] 第三个方法是在本专利中提出的方法，通过使用吸附蛋白质的贴片去除渗透至病区中的渗出蛋白质。其是可以预料到最快的治疗时间（即平均10日）的方法，并且由于其不是向皮肤传送任何物质或有效成分的方式，因此该方法是非常稳定的方法，并且快速缓解由瘙痒产生的疼痛。但是，如果使用该方法而没有减少或抑制血蛋白渗出，则由于蛋白质可能重新渗出，所以存在重新发生所述症状的可能。通过同时应用本发明中所提出的用于去除血蛋白的渗出的贴片和用于采用各种方法抑制蛋白质渗出的治疗，在短时期内期待不复发且完全的治疗。

发明内容

[0017] 技术问题

[0018] 本发明是为了解决上述问题和上述的需求而设计，本发明的目的是提供一种用于治疗和缓和涉及血蛋白的皮肤病的症状的贴片。

[0019] 技术方案

[0020] 为了达到上述目的，本发明的示例性实施方式提供治疗涉及血蛋白渗出的皮肤病或缓和该皮肤病的症状的贴片，该贴片包括：a）具有网状结构的聚合物基体；和b）与包含在所述基体中的蛋白质结合的极性树脂和/或与包含在所述基体中的蛋白质疏水性结合的树脂。

[0021] 根据本发明的实施方式，具有网状结构的高分子基体可以优选是选自琼脂和琼脂糖的复合碳水化合物的网状结构，以及使用聚丙烯酰胺、胶乳、聚苯乙烯、聚氯乙烯、硅胶、聚氨酯或纤维素纤维的网状结构，但本发明并不限于此。

[0022] 根据本发明的实施方式，所述极性树脂包括含官能团的有机或无机基体，该官能团在适当的pH条件下为离子或者能够电离。有机基体可以是合成物质（例如，丙烯酸、甲基丙烯酸、磺化苯乙烯、磺化二乙烯基苯）或部分合成的物质（例如，改性的纤维素和葡聚糖）。无机基体优选包括通过添加离子基团改性的硅胶。共价键结合的离子基团可以是强酸（例如，磺酸和磷酸）、弱酸（例如，羧酸）、强碱（例如，伯胺）、弱碱（例如，季胺）、或酸基团与碱基团的组合。通常，适于离子交换色谱中使用、也适合于水的去离子化的离子交换剂适于在药物的控制释放中使用）。该离子交换剂是在由H.F.Walton编著的"Principles of Ion Exchange"(pp:312-343)和 "Techniques and Applications of Ion-Exchange Chromatography"(pp:344-361)（E.Heftmann编辑)，诺斯特兰莱因霍尔德公司（Nostrand Reinhold Company，纽约(1975)）中公开的。

[0023] 本发明的极性树脂的实例优选包括具有DEAE（二乙胺乙基）-基团的琼脂糖、葡聚糖凝胶或琼脂糖凝胶；具有CM（羧甲基）基团的琼脂糖、葡聚糖凝胶或琼脂糖凝胶；具有三甲氨基团的琼脂糖、葡聚糖凝胶或琼脂糖凝胶；具有磺酰基或磺酸衍生物作为官能团的树脂；羟基磷灰石颗粒或聚苯乙烯结构的极性树脂。但本发明不限于此。

[0024] 根据本发明的实施方式，通过疏水作用与蛋白质结合的树脂优选包含4到10烃链的基团，但本发明不限于此。

[0025] 根据本发明的实施方式，优选将具有不同极性的多种树脂布置于贴片上。作为多重排列的贴片，更优选具有正电荷的极性树脂首先与病区接触，具有负电荷的极性树脂布置在后侧，但本发明不限于此。

[0026] 根据本发明的实施方式，这样的皮肤病包括特应性皮炎、湿疹、牛皮癣、接触性皮炎、红斑、苔藓病、慢性或接触性荨麻疹、痒疹（结节性痒疹）、以及轻微烧伤或没有破坏角质层的烫伤。但本发明不限于此。

[0027] 根据本发明的实施方式，更优选本发明的贴片进一步包含双饱和的磷脂、有机酸和2价阳离子，该双饱和的磷脂是来自动物肺的双饱和的磷脂，其代表性的例子包括DPPC、DPPI等。有机酸的代表性的例子包括构成T.C.A环的有机酸如柠檬酸；以及2价阳离子的代表性的例子包括钙和镁离子。

[0028] 另外，本发明提供一种外用贴片，其包括：a)具有网状结构的聚合物基体；以及b)包含在基体的极性树脂，其中外用贴片可以吸收渗出皮肤的血蛋白。

[0029] 另外，本发明提供用于治疗涉及血蛋白渗出的皮肤病或缓和该皮肤病的症状的贴片，其中通过将与蛋白质结合的官能团直接固定到织布、衬垫或纱布上制备该贴片。

[0030] 根据本发明的实施方式，可直接固定到织布、衬垫或纱布的官能团可以优选是DEAE-、CM-、三甲胺-基团或磺酸；或者具有碳水化合物链长度为C4到C10的官能团。然而，本发明不限于此。

[0031] 另外，本发明提供一种外用贴片，其通过将与蛋白质结合的官能团直接固定在织布、衬垫或纱布上来制备，其中外用贴片可以吸收渗出皮肤的血蛋白。

[0032] 另外，本发明提供一种用于去除由分泌至皮肤的蛋白质废品的贴片，其中该贴片包括：a)具有网状结构的聚合物基体；以及b)与包含于基体中的蛋白质结合的极性树脂和/或通过疏水作用与蛋白质相结合的树脂。

[0033] 另外，本发明提供用于诊断涉及血蛋白渗出的皮肤病的贴片，其中该贴片包括：a)具有网状结构的聚合物基体；以及b)与包含于基体中的蛋白质结合的极性树脂和/或通过疏水作用与蛋白质相结合的树脂。

[0034] 正如本发明的实验例5和图6e所解释的，在受牛皮癣之苦的患者中所显示的蛋白质构成和在受特应性疾病之苦的患者中所显示的蛋白质构成之间有明显的差异。Ig或白蛋白是蛋白质构成的一个例子。两种疾病之间的差异由采用上述蛋白质构成来明确区分。由采用该吸附方法可以找到多种皮肤疾病的标记蛋白质或通过标准化蛋白质渗出形式诊断皮肤疾病。

[0035] 以下将说明本发明。

[0036] 本发明涉及一种贴片，通过将该贴片直接应用于涉及血蛋白渗出症状的皮肤病（例如，特应性皮炎、湿疹、牛皮癣、接触性皮肤炎等）的疾病表面，其用于吸收然后去除渗透至皮肤组织的渗出的血蛋白。该贴片去除由表皮组织渗出的蛋白质并降低皮肤感染，同时使水分保持在皮肤中，使得快速且安全的治疗或缓和皮肤病。该贴片具有如下基体，通过采用可以充分通过细胞外渗出的蛋白质和肽的具有网状结构，例如，琼脂（或者琼脂糖）、聚丙烯酰胺、胶乳或聚氨酯的发泡海绵，该基体可以包含水。该贴片是通过如下方式去除渗透至皮肤的蛋白质和肽：将由于基体结构中的小颗粒而具有大表面积的各种带电树脂（常用于蛋白质色谱中的(二乙氨基乙基)-纤维素、CM（羧甲基）-纤维素；具有其他带电基团的碳水化合物复合体（衍生的复合碳水化合物）；羟基磷灰石粒子；聚丙烯结构等）固定，然后结合渗透至皮肤的蛋白质和肽。本发明基于如下假设：对诸如特应性皮炎和牛皮癣的皮肤病，由于脂质新陈代谢的紊乱及脂质摄取的不平衡，血蛋白从血管中渗出，并且由于上述渗出，表现出多种炎症反应、皮肤损伤和表皮细胞的增生。本发明提出用于快速且安全地治疗特应性皮炎、湿疹、牛皮癣以及具有类似症状的疾病的方法，其是通过提出利用可以将渗透在皮肤组织中的渗出的血蛋白和肽吸附，然后去除（通过用固定的树脂吸附渗出的血蛋白）的贴片以在在10日内治疗非常严重的特应性疾病可能性。此外，本发明提供了重新了解上述疾病的机会，以及提供了使用多种已开发的贴片的应用。

[0037] 一般认为类似的疾病如特应性皮炎、湿疹及牛皮癣可以由脂质新陈代谢的紊乱和脂质新陈代谢的不平衡引起，其结果是渗出血蛋白，并且由于渗透在组织中的血蛋白，产生多种炎症反应或表皮增生。本发明提供一种用于快速且有效地治疗皮肤病的方法，其通过固定各种树脂（例如，DEAE-纤维素(或琼脂糖)、具有CM-基团的树脂和羟基磷灰石、Dowen树脂等）在琼脂凝胶中将贴片应用于病区，或者应用在结合能使蛋白质与纯棉织布结合的带电基团后进行湿敷裹而去除渗出的蛋白质。

[0038] 技术效果

[0039] 正如在本发明中所确认的，认为根据本发明的贴片和湿敷裹的蛋白质吸附织布是最安全的治疗方法，因为除蒸馏水之外的其他任何药物或特定的成分没有被加入至表皮以治疗特应性疾病。可以预料在10天内治疗严重的特应性疾病的本发明治疗方法可以提供特应性疾病的多样性治疗方法以及关于特应性疾病原因的新理解。

附图说明

[0040] 图1是说明根据本发明的贴片的构成的示意图。通常设计外用贴片与病区紧密接触以吸附由血管渗出的血蛋白。1)敷料是粘附膜，其可为例如3M有限责任公司生产的TMTegaderm 或具有给皮肤提供氧的具有多孔结构的聚氯乙烯；以及具有能适当的保持水且通过氧的材料。2)具有能包含水的网状结构的基体，例如，琼脂。3)具有强极性的树脂，具有诸如DEAE-纤维素的强极性基团的碳水化合物复合物（衍生的碳水化合物复合体），或诸如羟基磷灰石的极性树脂。4)附着在凝胶上的棉纱布或者聚酯纤维，用于防止琼脂成分的凝胶在身体的折叠部分或弯曲表面容易被破坏。5)胶带。

[0041] 图2是说明根据本发明的贴片的布置例子的示意图。当同时使用具有不同官能团或具有不同极性的树脂，例如DEAE-琼脂糖和CM-琼脂糖时，在所述树脂与相同的凝胶混合的情况下，树脂是相互结合的，因此存在减少蛋白质吸附效率的高可能性。当如同上述极性不同时，优选将两种凝胶都施加至表皮上。特别是，当大部分蛋白质带负电荷，因此极性树脂如带正电荷的DEAE首先与病区接触，树脂如CM被布置在后侧上时，有效吸附带正电荷的小蛋白质，这是由于相对活跃的分子移动和快速扩散，具有正电荷的蛋白质通常是小分子量（例如，嗜酸细胞阳离子蛋白，18-22KDa）。6)具有不同极性的树脂。

[0042] 图3是说明根据本发明的贴片的功能机制的示意图。其是解释在采用贴片后，从血管渗出后渗入表皮组织中的血蛋白扩散到贴片，然后与贴片结合的机制的模拟图。通过利用蛋白质吸附贴片与表皮接触而将渗出的血蛋白吸附到贴片，由此去除渗出血蛋白来缓和炎症反应，并且由特应性疾病或牛皮癣损伤的病区可以通过在表皮中保持水分以及补充水分来快速恢复。

[0043] 图4与5是说明将根据本发明的贴片应用至过敏性湿疹的实施例的示意图。图4是说明将所述贴片应用至过敏性湿疹的应用的照片，其中所述贴片被应用于受严重的过敏性湿疹之苦的36岁男性患者的脚的顶部。使用包含10%（w/v）DEAE-纤维素的A2.5%（w/v）琼脂凝胶（2mm厚度）。应用贴片时间是从下午8-9点到上午8点。可以观察到在应用贴片一天后症状明显改善，3天后，症状被改善到很难确定病区界限的某种程度。图5是说明吸附在根据本发明的贴片上的蛋白质SDS-PAGE分析照片，其中给受过敏性湿疹之苦的患者贴上的贴片剪成一定大小，溶于SDS-PAGE试样缓冲溶液，然后采用电泳仪进行展开。采用10%（w/v）的聚丙烯酰胺凝胶，然后用CBB-R250对蛋白质进行显色。发现在吸附的蛋白质中，主要的蛋白质是血清蛋白质（66KDa）和免疫球蛋白（重链是52KDa和轻链是27KDa）。在第7道中的蛋白质全部是血清蛋白质结构。与由病区获得的渗出蛋白质最大的差异是具有200KD以上的蛋白质。当渗入皮肤组织的渗出蛋白质的量（或者该量可以是与贴片结合的渗出蛋白质的量）急剧减少时，快速改善病区的状态。证实了蛋白质渗出的现象是与特应性疾病的严重程度密切相关的。

[0044] 图6-9说明将根据本发明的贴片应用于受严重的皮肤炎之苦的代表性儿童的实例。

[0045] 图6说明将所述贴片应用于严重特应性皮炎（膝盖部位）的实例，其中由含有10%（w/v）DEAE-纤维素颗粒的2.5%琼脂凝胶（厚度~2mm）组成的贴片应用于显示出严重的特应性皮炎的7岁男孩。当患者在晚上睡觉时，应用该贴片。严重的皮肤状况一天一天地有明显改善。瘙痒感持续到应用该贴片后4天，但是第8天发现没有瘙痒的症状并且表皮基本上正常。

[0046] 图7是说明与在受严重的特应性皮炎之苦的儿童患者的膝盖上应用的贴片结合的渗出蛋白质的分析结果的照片。每天定期将由病区取下的贴片剪成一定大小，然后进行SDS-PAGE分析以将从表皮扩散，然后与极性树脂结合的蛋白质可视化。发现主要的蛋白质是血清白蛋白和免疫球蛋白。其结果是，证实了渗出的蛋白质的量是与病区的恢复密切相关的。

[0047] 图8是给受严重的特应性皮炎之苦的儿童患者（小腿部位）应用所述贴片的实例。该结果是在受特应性皮炎之苦的7岁男孩的小腿部位应用贴片之后观察的。该贴片是含有
10%（w/v）DEAE-纤维素的2.5%琼脂凝胶，其被制备为在凝胶的水中有10mg/ml猪肺萃取的磷脂、1.5mM CaCl2、和5mM柠檬酸盐/柠檬酸（pH值5.8）制备。此成分是在专利（韩国专利号0891595，澳大利亚专利号2006217261，PCT专利号PCT/KR2006/000638）中使用的“抑制血蛋白渗出的组合物”。容易证实上述含磷脂的贴片与只含水的贴片相比时表现出更稳定的治疗效果（图6）。

[0048] 图9说明在受严重的特应性皮炎之苦的儿童患者的小腿应用的贴片吸附的渗出的蛋白质的分析。与图7相比，证实了含磷脂的贴片可以在很长的一段时间内不断地吸附渗出的蛋白质。一般认为存在以下高的可能性：磷脂起到与弱清洁剂相同的作用，使得团聚的渗出蛋白质顺利地扩散。另外，也存在柠檬酸扰乱团聚的蛋白质的结合以促进去除渗出的蛋白质的可能性。由SDS-PAGE的结果，发现尽管很多磷脂存在于贴片，但是磷脂不妨碍渗透至皮肤的渗出蛋白质的吸附。因此，一般认为由于经过长期的湿包裹的方法可能影响皮肤屏障，所以即使应用含能够保护皮肤屏障的脂质成分的贴片，也可以获得贴片的稳定治疗效果。特别是，为了更稳定的治疗，一般认为优选可以使用将含有从猪肺中萃取的磷脂作为主要成分的“抑制血蛋白的渗出的组合物”与贴片凝胶混合，然后使用的方法。

[0049] 图10和11说明根据本发明的贴片应用于具有严重过敏性皮炎的脸上的实例。在图10中，在将所述贴片应用于脸两侧都具有严重的特应性皮炎的女学生之后，观察所述贴片的效果。自应用贴片后，容易观察到一天一天地表现出快速的恢复。在应用贴片后第4天，改善了症状，以致不能分辨病区的界限，在第8天，恢复到正常的皮肤状态。

[0050] 在图11中，从应用于脸上的贴片的凝胶中收集吸附的蛋白质进行SDS-PAGE分析。发现吸附的蛋白质的量的减少程度对应于表皮恢复的程度。

[0051] 图12和13说明采用具有不同极性树脂的双层贴片的实例，其中该贴片由通过将含10%CM-纤维素的2.5%（w/v）琼脂凝胶（~2mm）布置在含10%（w/v）DEAE-纤维素的2.5%（w/v）琼脂凝胶（~2mm）上来制备（参考图2）。在受过敏性湿疹之苦的45岁男性患者的病区应用贴片，然后通过使用SDS-PAGE观察该贴片的效果和蛋白质吸收程度。

[0052] 图12说明在使用具有不同极性的双层贴片之后的皮肤状态。

[0053] 图13说明进行SDS-PAGE分析蛋白质，其中蛋白质是由在病区应用后的贴片的凝胶中萃取的。

[0054] 图14-18说明将包含多种树脂的贴片分别应用于牛皮癣患者的病区的实例。

[0055] 该贴片被制备成具有不同极性的树脂，然后应用于28岁女性的牛皮癣部位。应用该贴片6小时，并且以表皮厚度的变薄程度和表皮颜色为基准观察了每个贴片的效果。给牛皮癣患者分别应用：（图14）只采用2.5%（w/v）琼脂形成的凝胶（厚度为~2mm）；（图15）含有10%（w/v）DEAE-纤维素的2.5%（w/v）琼脂凝胶（厚度为~2mm）；（图16）含有10%（w/v）CM-纤维素的2.5%（w/v）琼脂凝胶（厚度为~2mm）；以及(图17）含有（w/v）10%羟基磷灰石（双极性树脂）的2.5%（w/v）琼脂凝胶（厚度为~2mm）。含有DEAE-纤维素的贴片表现出最好的效果，而含有CM-纤维素的贴片没有表现出显著的效果。

[0056] 图18说明由受特应性皮炎之苦的患者的病区所获得的蛋白质样本和受牛皮癣之苦的患者的病区所获得的蛋白质样本。该结果提供了此两种疾病引起的蛋白质渗出是相同的，但渗出的蛋白质类型是不同的根据。

[0057] 图19作为应用于伤口的实例（负面效果），说明在将由含有10%（w/v）DEAE-纤维素的2.5%（w/v）琼脂（厚度为~2mm）组成的贴片应用于由外部物理冲击而引起的伤口处之后观察的结果。一般认为甚至治疗伤口所需要的蛋白质也被吸附到贴片，并且贴片降低了伤口治疗的速度。在应用6个小时之后取下的贴片中，观察到吸附的血液和黄色蛋白质。观察到在去除贴片后，如果表皮接受很少的张力，则在病区引起微弱地出血。另外，即使伤口愈合，也能观察到很大的伤口创伤痕迹。根据本发明的贴片不限于表现出血蛋白渗出如特应性皮炎或牛皮癣而没有外伤的皮肤病。

[0058] 图20是制作DEAE-棉布工艺的模拟示意图。优化将DEAE-基团结合到纤维素的方法，以使用治疗过敏性皮肤病或牛皮癣的结合DEAE-基团的棉布，并且为了大量生产而简化了该生产方法。图20是利用实验室中制造的工艺的模拟图。当连续移动具有多种厚度及网孔尺寸的布时结合DEAE-基团。一般认为能够根据疾病的症状多方面应用该方法。

[0059] 图21-22是说明利用DEAE-棉布吸收渗出蛋白质的照片。通过将DEAE-基团结合到棉布上制备DEAE-棉布。图21的左侧是干燥类型，而右侧是在应用于病区之前用蒸馏水润湿的类型。通过将该布应用于过敏性湿疹的病区证实了渗出蛋白质吸附。容易证实在普通的棉布上检测到少量的蛋白质，但是检测到大量的多种血液渗出蛋白质（图22）。此类能结合蛋白质或极性基团的织布可以在弯曲严重的病区应用。另外，可以预料到在全身都有皮炎的情况下，可以以衣服的类型制备，因此可以更有效的治疗全身。此外，可以预料到由于在使用织布的情况下，可以混合多种药物，然后使用，所以医疗专家可以根据患者的情况添加液态药物的方式进行定制治疗。

具体实施方式

[0060] 以下，参考非限制性实施例更详细地说明本发明。但是，以下的实施例仅打算说明本发明，而不要将本发明的范围理解为仅局限于下述实施例。

[0061] 实施例1：用于去除血蛋白渗出的贴片的制造和构成

[0062] 琼脂（或琼脂糖）是在生物分子学中经常使用的实验用材料，不会被活体内酶生物降解，可以食用，且可以形成不会刺激皮肤的很好的凝胶类型。该类型凝胶具有优秀的弹性，可以含有大量的水分，也有很多优点。此外，大分子量的颗粒可以在凝胶中所形成的微网孔之间容易地扩散，且可以容易地移动。一般，当将琼脂用于电泳中时，200KDa以下的蛋白质在凝胶中的扩散是非常迅速的，因此难以证实蛋白质带。这意味着琼脂的微网状结构是非常大的。由于大量200KDa以下的免疫球蛋白（IgG，150KDa）和血清白蛋白作为渗出至表皮的渗血蛋白，所以没有关于蛋白质在凝胶中自由扩散的问题。

[0063] 与凝胶中的蛋白质结合并固定凝胶中的蛋白质的极性树脂（例如，树脂如DEAE-纤维素或DEAE-琼脂糖、CM-纤维素（或琼脂糖）及羟基磷灰石）在粉末状态下可以刺激肺和粘膜，但是在完全吸水或溶胀的情况下没有刺激。根据本发明，通过将凝胶如琼脂中的颗粒分布、固定以及直接与病区接触，可以使不需要的刺激最小化。

[0064] 将固定于凝胶如琼脂中的树脂浸入蒸馏水中整晚以充分溶胀。为了去除附着于极性基团的污染物，将每种树脂按照0.1M的NaOH--0.1M的HCl--0.1M的NaOH顺序或者0.1M的HCl--0.1M的NaOH--0.1M的HCl顺序洗涤。将没有污染物的树脂用蒸馏水反复清洗数2
次，然后将清洗的树脂在高温和高压（15分钟，15lb/cm）下进行了高压灭菌处理。

[0065] 将具有树脂的琼脂凝胶（或琼脂糖凝胶）混合，然后固定的工序如下：在加热琼脂凝胶（2.5%质量/体积比）以制备其为液相后，保持60℃的温度。将所制备的树脂制成滤饼类型，并除去树脂中的水，然后测量树脂质量为该贴片的10%（质量/体积比）。将琼脂凝胶与树脂在60℃下均匀混合，倾倒入模具中，然后冷却使凝胶的厚度为1.5mm~2mm。由于当凝胶如琼脂被应用于身体的弯曲部位以过度折叠或弯曲时，可能会破碎该凝胶，所以将一层棉纱布（80~120目）应用于凝胶的表面以补偿液态凝胶状态下的凝胶的强度。说明书附图（图1-3）说明了凝胶的结构和操作原理。

[0066] 实验例1:应用于特应性湿疹的病区的实例

[0067] 通过将10%（w/v）DEAE-纤维素固定到2.5%（w/v）琼脂凝胶而制备的贴片应用于具有非常严重特应性湿疹的患者（36岁男性）的病区。该患者长时间承受特应性湿疹之苦，即10年以上，这是由于该疾病是在脚的顶部。在有很多活动的白天没有应用贴片，在晚上8-9点左右整晚应用贴片，然后在上午8点左右取下。每天观察病区。利用直径为2mm的圆筒由从病区取下的贴片上收集一定量的凝胶试样，并且对吸附后的蛋白质进行10%（w/v）SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳）测试。在进行电泳以后，将蛋白质带采用考马斯亮蓝-R250（Coomasse brilliantblue-R250）染色。

[0068] 作为分析与从病区取下的贴片结合的蛋白质的结果，发现到最多数量的蛋白质是血清白蛋白，且第二最多数量的蛋白质是免疫抗体蛋白质（重链~52KDa，轻链27KDa）。其结果与根据分子量发生血蛋白渗出的事实相一致。发现当被吸附至贴片的蛋白质的量（即渗出的血蛋白的量）的减少，病区的状况显著改善。该结果是验证血蛋白的组织渗出促进了特应性皮炎的间接结果。其显示了如下令人惊奇的事实：可以不用任何种类的药物或显示效果的治疗药物，例如，任何种类甾族化合物、甾族化合物衍生物、免疫控制机制的药物（例如，医立妥（Elidel）或他克莫司）和保湿软膏，来治疗特应性皮肤疾病。由于治疗时间非常短，并且除蒸馏水之外没有其他成分被皮肤吸收，所以本发明的方法是非常稳定的方法（图4和5）。

[0069] 实验例2:应用于代表性儿童的严重特应性皮炎上的实例（通过在贴片中含特定磷脂而实施的实施例）

[0070] 全身对称地具有严重的特应性皮炎的7岁儿童的部分病区应用了贴片。应用了两种类型的贴片。

[0071] 将含有10%（w/v）DEAE-纤维素的2.5%（w/v）琼脂凝胶（厚度为~2mm）与含有10%（w/v）DEAE-纤维素、从猪肺中萃取的10%（w/v）磷脂、1.5mMCaCl2和5mM柠檬酸盐/柠檬酸（pH值为5.8）的2.5%（w/v）琼脂凝胶（厚度为~2mm）分别应用于不同的病区，然后比较了效果。从猪肺中萃取的磷脂、1.5mM CaCl2和5mM柠檬酸盐/柠檬酸（pH值为5.8）成分是用于抑制血蛋白渗出和治疗特应性皮炎的组合物（韩国专利号0891595，澳大利亚专利号2006217261，PCT专利号PCT/KR2006/000638），现在已经完成了作为新药物许可的第III阶段临床试验。通过将两种贴片应用于病区，观察治疗的速度，然后观察了渗出蛋白质的样本。另外，调查了所添加的磷脂是否阻碍蛋白质向贴片的扩散。

[0072] 作为应用两种贴片的结果，发现所有两种贴片在具有代表性的严重特应性皮炎的儿童上显示出非常显著的治疗速度和效果。发现含磷脂、钙离子、柠檬酸盐/柠檬酸的贴片更有效地吸附渗出的蛋白质。对治疗效果，观察到含有从猪肺中萃取的磷脂的贴片更稳定地治疗皮肤且使皮肤正常化。一般认为从猪肺中萃取的磷脂起到与温和的洗涤剂相同的作用，将团聚的渗出蛋白质解离，然后刺激皮肤，因此显示出更优秀的去除渗出物的效果。另外，存在组合物中含有的柠檬酸干涉蛋白质之间的离子结合的可能性，因此能更有效的去除渗出物。一般认为由于在贴片中含有的饱和磷脂具有抑制血蛋白的渗出的效果，所以磷脂允许更迅速地恢复病区。通过比较两种贴片（只含DEAE-纤维素的贴片和含有DEAE-纤维素、从猪肺中萃取的磷脂+1.5mM CaCl2+5mM柠檬酸盐/柠檬酸（pH值为5.8）的贴片），证实了作为重要的事实是磷脂不妨碍渗出的蛋白质以结合到固定在贴片的极性树脂颗粒的结论。

[0073] 为了获得更快和稳定的治疗效果，一般认为优选一起使用具有抑制血蛋白渗出的药物或成分。

[0074] 使用湿-包裹法以治疗特应性皮炎。为了继续应用本发明的含大量水的贴片，认为应用含多种脂质和能够补偿皮肤屏障的贴片可能是减轻受特应性疾病之苦的患者的疼痛的良好方法。另外，一般认为由于众所周知软膏如甾类化合物或他克莫司除了有最初的抗应力活性和降低免疫功能之外还具有抑制血蛋白渗出的效果，所以当使用通过混合合适量的能够抑制贴片的基体中的血蛋白渗出的药物制备的贴片时，或者在通过应用贴片之前和之后应用能够抑制血蛋白渗出的药物而抑制血蛋白渗出时应用所述贴片时，可以期待增加的治疗效果。

[0075] 实验例3:应用于脸部受严重特应性皮炎之苦的青少年的实例

[0076] 在受严重的特应性皮炎之苦的16岁青少年（16岁女孩）两颊应用贴片后观察结果。患者承受严重的特应性皮炎，使得由于严重的发痒和灼热感不能维持正常的生活。贴片的效果应当在脸部上测试，因为通过皮脂大量分泌中性脂肪，从而抑制贴片吸附蛋白质的效果。作为贴片，应用含有10%（w/v）DEAE-纤维素的2.5%（w/v）琼脂凝胶（厚度为~2mm）。晚饭之后的睡觉期间应用了贴片，然后在上午上学之前取下。在采用贴片之后，症状每天有好转，并且在应用贴片后第8天，脸部皮肤恢复到正常状态。观察到患者的皮肤状态维持了约20天，随后两颊又变红，并且发生了特应性疾病的轻微症状。

[0077] 由SDS-PAGE的结果证实了：使用该贴片去除渗出蛋白质平均需要约5天，且在严重患者的情况下治疗期间需要8-10天。特别是，认为减少抗体蛋白质的数量，然后症状有好转。总之，一般认为血蛋白的渗出量直接与症状轻重有关，并且只要同时进行能抑制血蛋白渗出的多种和积极的治疗，可以容易地治疗特应性疾病。

[0078] 实验例4:含不同极性树脂的双凝胶结构型贴片的应用实例

[0079] 通过将含10%CM-纤维素的2.5%（w/v）琼脂凝胶应用于含10%（w/v）DEAE-纤维素的2.5%（w/v）琼脂凝胶上，制备具有不同极性的双层贴片（参考图2）。在受特应性湿疹之苦的45岁男性的病区应用贴片，之后观察效果和贴片的蛋白质吸附。第一天，在病区应用贴片3小时30分钟，然后在每天睡觉时间应用贴片。在应用贴片后3小时30分钟，状态有明显的改善，且每天急剧地好转。

[0080] 一般认为与仅使用DEAE-纤维素的情况相比，吸附在凝胶中的渗出蛋白质的量和种类是更各种各样的且更明显。还观察到治疗效果更快。

[0081] 实验例5:应用于牛皮癣患者的实例

[0082] 在全身（特别是四肢、腿以及臂部位的症状更严重）发生牛皮癣的28岁女性患者的皮肤上应用具有多种组合的贴片后，观察贴片的效果。

[0083] 将下述的凝胶分别应用于牛皮癣患者约5小时，然后取下。从那时候开始观察病区。在牛皮癣患者中表现出最好效果的是含有10%（w/v）DEAE-纤维素的2.5%琼脂凝胶贴片，而具有最差效果的是含有10%（w/v）CM-纤维素的2.5%（w/v）琼脂凝胶贴片（参考图14-17）。

[0084] a.由仅2.5%（w/v）琼脂形成的凝胶（厚度为~2mm）

[0085] b.含10%（w/v）DEAE-纤维素的2.5%（w/v）琼脂凝胶

[0086] c.含10%（w/v）CM-纤维素的2.5%（w/v）琼脂凝胶

[0087] d.含10%（w/v）羟基磷灰石（双极性树脂）的2.5%（w/v）琼脂凝胶。

[0088] 最有趣的发现是从牛皮癣患者和特应性疾病患者的病区渗出的蛋白质类型是不同的。在受牛皮癣之苦的患者的情况中，观察到白蛋白，但是观察到非常少量的免疫球蛋白。认为当蛋白质从血管中渗出时，根据分子量进行选择性渗出。可以预料到具有比白蛋白更大分子量的抗体蛋白不容易渗出。作为结果，认为可以描述在特应性皮炎的情况下炎症反应更活跃的理由，以及引起表皮细胞的病理学核分裂而不是牛皮癣疾病或皮肤损伤的理由。根据上述观察的结果，采用本发明的贴片，肉眼可以容易诊断牛皮癣和特应性病。即，当特应性皮炎和牛皮鲜之间的区别处于混淆时，可以采用本发明的贴片作为诊断标准。此外，通过采用免疫学研究方法，有可能研究多种蛋白质。从现在开始，除治疗目的之外，根据本发明的贴片可以用于各种应用如研究目的。

[0089] 实验例6:将贴片应用于外伤或伤口处的实例（贴片的负面影响的实例）

[0090] 将贴片应用于划伤或伤口，然后由此观察其效果。作为结果，认为在伤口处应用蛋白质吸附贴片是不优选的。这是因为甚至血液凝固和组织恢复所需要的蛋白质也被吸附，并且在应用8小时后，再次引起微弱的出血。此外，治疗伤口的速度是相当慢的，并且由于打开伤口，所以对感染虚弱。另外，即使伤口后来愈合，但是可能留下伤疤（图19）。

[0091] 实验例7:利用贴片性能的贴片应用（通过将极性基团与棉布的碳水化合物结合使用的方法）

[0092] 在制作和使用作为贴片类型的树脂的情况下，难以再利用具有极性基团如DEAE-纤维素的琼脂糖的树脂。由于具有取代基的复合碳水化合物树脂（衍生的复合碳水化合物）具有宽的表面区域和高蛋白质结合能力，当通过在凝胶类型的贴片中固定树脂而使用该树脂时，可获得该效果。然而，其具有价格稍微贵的缺点。为了弥补此问题，可以通过将多种极性基团和DEAE-基团与100%棉布结合而使用它。由于能够与蛋白质结合的化学改性织布具有好的弹性，所以该织布可以通过与身体的弯曲部位接触来使用，并且如果吸附的蛋白质被有效去除，它可以重复再利用。与提纯蛋白质的树脂相比，该织布的蛋白质结合能力会稍微降低，但是该布可多方面地应用。特别是，通过根据医生的建议进一步添加药物（例如，消毒剂、抗生素、抗组胺药、甾类化合物等）和多种脂质（例如，神经酰胺、磷脂、脂质体类型的脂质混合物），可以进行定制治疗。当其制成为衣服类型时，可以预料到该织布可以容易用于治疗全身受特应性疾病之苦的患者。

[0093] 本发明提供一种通过将DEAE-基团与棉布结合容易地制备能够吸附蛋白质的织布的方法。

[0094] 制备DEAE-棉布的本发明方法如下：

[0095] 1)用蒸馏水洗涤棉布后进行干燥;

[0096] 2)将此干燥的棉布在3M NaOH中浸泡30秒；

[0097] 3)将由此获得的棉布浸泡在3M NaOH和3M DEAE-Cl(二乙氨基乙基氯化物)混合溶液中40分钟。

[0098] 4)将由此获得的棉布浸泡在3M DEAE-Cl中；

[0099] 5)将由此获得的棉布用蒸馏水洗涤；和

[0100] 6)将由此获得的棉布进行干燥。

[0101] 当根据上述方法大量制备DEAE-棉布产品时，该方法可以通过利用图20中所公开的模拟方法是可以进行。用低价成本可以制作更有效的贴片，由此有助于更多患者，所以本发明人简化了制作工序。

[0102] 通过使用上述公开的工序所制备的DEAE-棉布与特应性疾病患者的病区接触约4小时，然后证实了渗出的蛋白质的吸附。

[0103] 图21说明DEAE-棉布，其中左侧是干燥状态的织布，而右侧是在将其应用于病区之前使用蒸馏水湿润的状态的织布。

[0104] 如图22所说明的，普通棉布和DEAE-棉布在病区分别接触5小时。取下之后，将布剪成同样大小，然后通过采用SDS-PAGE证实了吸附的蛋白质。可以证实具有DEAE-基团的棉布可以吸附，然后去除来自病区的血蛋白渗出物，其中效果并没有明显地不同于含DEAE-纤维素的琼脂凝胶。

[0105] 具有DEAE-基团或其他极性的棉布可以被用于治疗特应性疾病、牛皮癣、以及其他类似的疾病。另外，预料到上述棉布可以用于结构上去除来自皮肤的废品。在某些情况下，通过与辛基、丁基等结合可以去除特定脂质或难溶于水的蛋白质。因此，除治疗目的之外，适用于美容治疗目的（例如，美容面膜材料），特别是它既经济又环保，这是因为它可以重复使用。