含有麻黄的三味中药制剂中盐酸麻黄碱的质量检测方法

摘要

一种含有麻黄的三味中药制剂中盐酸麻黄碱的质量检测方法，以盐酸麻黄碱对照品为对照，以体积比为40～50:60～50的甲醇-1%冰乙酸溶液为流动相，制备对照品溶液和供试品溶液，使用高效液相色谱仪，色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，将对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪中，使用262nm波长进行检测。本发明操作简便，准确，可靠性强，能够确保中药制剂在临床应用中安全，有效，可控。

权利要求

1.一种含有麻黄的三味中药制剂中盐酸麻黄碱的检测方法，其特征在于，以盐酸麻黄碱对照品为对照，以体积比为50:50的甲醇-1％冰乙酸溶液为流动相，制备对照品溶液和供试品溶液，使用高效液相色谱仪，色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，将对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪中，使用262nm波长进行检测，所述的含有麻黄的三味中药制剂是指由败酱草、麻黄和威灵仙按中药制剂制备工艺制成的中药制剂，包括洗剂、凝胶剂、搽剂、泡腾片或喷雾剂，所述的制备对照品溶液和供试品溶液，包括以下步骤：

(1)对照品溶液的制备：取盐酸麻黄碱对照品，精密称定，加水摇匀制成60～120μg/ml的溶液，精密量取60～120μg/ml的溶液10ml，置25ml量瓶中，加入0.1mol/L的高碘酸溶液1ml，摇匀，加入浓氨试液1ml，振摇5分钟，加入体积百分含量为20％的冰乙酸溶液

1ml，摇匀，用流动相稀释至量瓶刻度，摇匀，即得24～48μg/ml的对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：精密量取含有麻黄的三味中药制剂5～10ml或5～10g,加入

2mol/L的氢氧化钠溶液125ml,摇匀，加入氯化钠10g，振摇溶解后，蒸馏，用盛有1mol/L盐酸溶液1ml的100ml量瓶收集蒸馏液近95ml，加水至刻度，摇匀得到蒸馏液，精密量取蒸馏液10ml，置25ml量瓶中，加入0.1mol/L的高碘酸溶液1ml，摇匀，加入浓氨试液1ml，振摇5分钟，加入体积百分含量为20％的冰乙酸溶液1ml，摇匀，用流动相稀释至量瓶刻度，摇匀，即得供试品溶液。

说明书

含有麻黄的三味中药制剂中盐酸麻黄碱的质量检测方法

技术领域

[0001] 本发明涉及的是一种含有麻黄的三味中药制剂中盐酸麻黄碱的质量检测方法，属于医药技术领域。

背景技术

[0002] 三味清热止痒洗剂为广西盈康药业有限责任公司独家研制并生产的妇科外用洗剂，其质量标准为国家药品标准，标准编号：YBZ01532007。该制剂具清热燥湿，解毒祛风止痒之功效，用于湿热风毒瘀阻所致的外阴瘙痒病，症见局部皮肤干燥，肥厚，瘙痒难忍者。

[0003] 三味清热止痒洗剂由败酱草、麻黄、威灵仙三味中药组方而成，其制备工艺为：取败酱草、麻黄、威灵仙，加水煎煮三次，第一次1小时，第二、三次各煎煮45分钟，过滤，合并煎液，减压浓缩至相对密度为1.02～1.04（40℃）的清膏，放冷，静置，滤过，加苯甲酸钠5g，搅拌使溶解，加水至1000ml，搅匀，过滤，灌装，即得三味清热止痒洗剂。

[0004] 三味清热止痒洗剂现行质量标准已收载有败酱草和威灵仙的薄层鉴别方法以及麻黄的含量测定方法，但含量测定方法采用薄层扫描法，技术相对滞后，方法较为粗糙，重现性不理想，并且薄层扫描法在目前的药品检测技术中已极少应用，虽然现有技术已报道采用高效液相色谱法对该制剂中的盐酸麻黄碱进行检测，但方法比较繁琐，因此发明一种相对简便、方法准确可靠的检测方法，对该制剂中盐酸麻黄碱进行测定，是非常必要的。

发明内容

[0005] 本发明的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种含有麻黄的三味中药制剂中盐酸麻黄碱的质量检测方法。

[0006] 本发明实现上述目的所采用的技术方案为：一种含有麻黄的三味中药制剂中盐酸麻黄碱的质量检测方法，以盐酸麻黄碱对照品为对照，以体积比为40～50:60～50的甲醇-1%冰乙酸溶液为流动相，使用高效液相色谱仪，色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，将对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪中，使用262nm波长进行检测。

[0007] 进一步地，所述的流动相为体积比为50:50的甲醇-1%冰乙酸溶液。

[0008] 更进一步，所述的制备对照品溶液和供试品溶液，包括以下步骤：

[0009] （1）对照品溶液的制备：取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，加水摇匀，制成60～120μg/ml的溶液，精密量取60～120μg/ml的溶液10ml，置25ml量瓶中，加入
0.1mol/L的高碘酸溶液1ml，摇匀，加入浓氨试液1ml，振摇5分钟，加入体积百分含量为
20%的冰乙酸溶液1ml，摇匀，用流动相稀释至量瓶刻度，摇匀，即得24～48μg/ml的对照品溶液；

[0010] （2）供试品溶液的制备：精密量取含有麻黄的三味中药制剂5～10ml或5～10g,加入2mol/L的氢氧化钠溶液125ml,摇匀，加入氯化钠10g，振摇溶解后，蒸馏，用盛有
1mol/L盐酸溶液1ml的100ml量瓶收集蒸馏液近95ml，加水至刻度，摇匀得到蒸馏液，精密量取蒸馏液10ml，置25ml量瓶中，加入0.1mol/L的高碘酸溶液1ml，摇匀，加入浓氨试液
1ml，振摇5分钟，加入体积百分含量为20%的冰乙酸溶液1ml，摇匀，用流动相稀释至量瓶刻度，摇匀，即得供试品溶液。

[0011] 所述的含有麻黄的三味中药制剂是指由败酱草、麻黄和威灵仙按中药制剂制备工艺制成的中药制剂，包括洗剂、凝胶剂、搽剂、泡腾片或喷雾剂。

[0012] 本发明与现有技术相比，能够产生的有益效果是：

[0013] （1）采用高效液相色谱法对制剂中的盐酸麻黄碱进行含量测定，检测波长为262nm，此时盐酸麻黄碱对照品吸收最大且空白液无干扰。

[0014] （2）采用体积比为40～50:60～50的甲醇-1%冰乙酸溶液为流动相制备对照品溶液和供试品溶液，盐酸麻黄碱的峰形和分离度良好。

[0015] （3）利用游离麻黄碱具挥发性的特性，在样品中加入氢氧化钠溶液使生物碱呈游离状态后，采用蒸馏法收集蒸馏液制备供试品溶液，能够将盐酸麻黄碱成分完全提取。

[0016] （4）本发明操作简便，准确，可靠性强，能够确保中药制剂在临床应用中安全，有效，可控。

附图说明

[0017] 图1为空白液的紫外扫描图谱。

[0018] 图2为盐酸麻黄碱的紫外扫描图谱。

[0019] 图3为盐酸麻黄碱对照品的高效液相色谱图。

[0020] 图4为含有麻黄的三味中药制剂供试品的高效液相色谱图。

[0021] 图5为缺麻黄阴性样品的高效液相色谱图。

[0022] 图6为空白液的高效液相色谱图。

[0023] 图7为盐酸麻黄碱对照品标准曲线图。

具体实施方式

[0024] 麻黄为麻黄科植物草麻黄Ephedra sinica Stapf、中麻黄Ephedra intermedia Schenk et C.A.Mey或木贼麻黄Ephedra equisetina Bge的干燥草质茎，主要活性成分为生物碱，主要包括左旋麻黄碱ephedrine和右旋伪麻黄碱pseudoephedrine、左旋去甲基麻黄碱norephedrine、右旋去甲基伪麻黄碱norpseudoephe-drine、左旋甲基麻黄碱methylephedrine和痕量右旋甲基伪麻黄碱methylpseudoephedrine。对于麻黄药材及其相关制剂中生物碱的含量测定研究，报道较多的为麻黄碱和伪麻黄碱的含量测定方法的研究，主要采用的方法为高效液相色谱法，因此我们选择了采用高效液相色谱法测定供试品中盐酸麻黄碱的含量。

[0025] 为了更进一步地说明本发明的技术方案及其所带来的有益效果，申请人做了以下实施例试验：

[0026] 实施例1

[0027] 盐酸麻黄碱的含量测定试验

[0028] （1）仪器及试药准备：

[0029] 日本岛津公司LC—10ATVP高效液相色谱仪；SPD—10AVP分光光度计；威玛龙色谱工作站；BP211D十万分之一电子天平；天津四友公司配制流动相用的甲醇为一级色谱纯；所用水为纯化水；其余试剂均为分析纯。

[0030] 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶填充剂的C18柱，岛津公司提供，规格：5μm，4.6mm×150mm。

[0031] 盐酸麻黄碱对照品为中国药品生物制品检定所提供，批号:171241-200506-8。

[0032] 含有麻黄的三味中药制剂，广西盈康药业有限责任公司提供，批号为：120727、120722、120720、120620、110805、110513、110101、100727、100725、100713。

[0033] （2）检测波长的选择

[0034] 取盐酸麻黄碱对照品溶液，在190至400nm波长进行紫外扫描，空白液结果如图1所示，盐酸麻黄碱对照品结果如图2所示。根据图1和图2可知，盐酸麻黄碱对照品在262nm处具最大吸收且空白溶液无干扰，故选择262nm波长为检测波长。

[0035] （3）流动相的选择及系统适应性试验

[0036] 经优选试验，发现采用体积比为40～50:60～50的甲醇-1%冰乙酸溶液体系为流动相，盐酸麻黄碱峰的峰形和分离度均良好。其中以甲醇-1%冰乙酸溶液的体积比为50:50为流动相最优。所使用的色谱柱为Inertsil ODS-SP柱；检测波长：262nm；流速：1.0ml/min，盐酸麻黄碱峰的分离度等均符合药典的规定。

[0037] （4）供试品溶液的制备方法

[0038] 流动相直接溶解法：精密量取本品适量,置25ml量瓶中，按照对照品溶液处理方法依次加入高碘酸溶液、浓氨试液、冰乙酸溶液等进行处理后，测定，结果因成分复杂，盐酸麻黄碱主成分峰与杂质峰分离度达不到要求；

[0039] 乙醚萃取法：精密量取本品适量,加水适量及浓氨试液，用乙醚萃取，蒸干溶剂，用水溶解残渣，定溶，按照对照品溶液处理方法依次加入高碘酸溶液、浓氨试液、冰乙酸溶液等进行处理后，测定，结果萃取比较繁琐、耗时，且萃取过程中溶液极易乳化，水层和乙醚层难以分离。

[0040] 蒸馏法：利用游离麻黄碱具挥发性的特性，在样品中加入氢氧化钠溶液使生物碱呈游离状态后，采用蒸馏法收集蒸馏液制备供试品，根据预试验结果及各批次所含盐酸麻黄碱情况，我们选择供试品取样量为10ml或10g，加2mol/L的氢氧化钠溶液125ml,氯化钠10g，振摇使溶解后，蒸馏，馏液的收集量以盐酸麻黄碱成分能完全提取而定，具体数据见表
1、表2和表3。

[0041] 表1 120720批不同蒸馏液体积盐酸麻黄碱含量数据表

[0042]

[0043]

[0044] 表2 120722批不同蒸馏液体积盐酸麻黄碱含量数据表

[0045]

[0046] 表3 120727批不同蒸馏液体积盐酸麻黄碱含量数据表

[0047]

[0048] 根据考察结果，含量最高的120727样品收集蒸馏液至70ml时麻黄碱已基本提取完全，其余两批样品收集至60ml时麻黄碱已基本提取完全，根据近年我们所生产的中药制剂中盐酸麻黄碱含量情况分析，当收集馏液至70ml时，均可将盐酸麻黄碱全部提取。

[0049] 经多次论证，最终确定供试品溶液具体的制备方法为：精密量取含有麻黄的三味中药制剂5～10ml或5～10g,加入2mol/L的氢氧化钠溶液125ml,摇匀，加入氯化钠10g，振摇溶解后，蒸馏，用盛有1mol/L盐酸溶液1ml的100ml量瓶收集蒸馏液近95ml，加水至刻度，摇匀得到蒸馏液，精密量取蒸馏液10ml，置25ml量瓶中，加入0.1mol/L的高碘酸溶液1ml，摇匀，加入浓氨试液1ml，振摇5分钟，加入体积百分含量为20%的冰乙酸溶液1ml，摇匀，用流动相稀释至量瓶刻度，摇匀，即得供试品溶液。

[0050] （5）专属性试验

[0051] 按含量测定项的方法，分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性供试品溶液、空白溶液各10μl,注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，如图3-图6所示，在该色谱条件下，对照品峰形良好，供试品相应保留时间的峰形和分离度均良好，阴性样品溶液及空白溶液在相应保留时间均无杂峰干扰，说明该色谱条件符合专属性的要求。

[0052] （6）线性关系考察

[0053] 精密量取盐酸麻黄碱对照品贮备液（每1ml含盐酸麻黄碱0.126mg）1ml、5ml、10ml、15ml、20ml,分别置于25ml容量瓶中，加入0.1mol/L的高碘酸溶液1ml，摇匀，加入浓氨试液1ml，振摇5分钟，加入体积百分含量为20%的冰乙酸溶液1ml，摇匀，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得。分别精密吸取以上对照品溶液各10μl，分别注入高效液相色谱仪，测定峰面积，以盐酸麻黄碱峰面积为纵坐标，对照品进样量（μg）为横坐标，计算线性回归方程为：Y=3386509.759X-4309.1369r=0.9999。结果表明，盐酸麻黄碱在0.0504～1.0080μg之间呈良好线性关系，结果数据见表4。标准曲线图见图7。

[0054] 表4 盐酸麻黄碱对照品标准曲线数据表

[0055]

[0056]

[0057] （7）精密度试验

[0058] A．重复性试验

[0059] 取本品同一批样品（批号:120620），照含量测定项下供试品溶液制备方法平行制备6份供试品溶液，在上述色谱条件下测定，数据结果见表5。结果表明，本法用于三味中药制剂中盐酸麻黄碱含量测定，重复性良好。

[0060] 表5 重复性试验数据结果表

[0061]

[0062] B．中间精密度试验

[0063] 取本品同一批样品（批号:120620），在不同的日期、不同分析人员、不同的高效液相色谱仪等条件分别对样品进行测定。方法为照含量测定项下供试品溶液制备方法平行制备6份供试品溶液，在上述色谱条件下测定，数据结果见表6、7、8。

[0064] 表6 中间精密度试验数据结果（1）

[0065]

[0066] 表7.中间精密度试验数据结果（2）

[0067]

[0068]

[0069] 表8.中间精密度试验数据结果（3）

[0070]

[0071] 从试验结果看，在不同的日期、不同分析人员和不同设备等条件下测定同一批样品，其结果偏差不大，说明本法用于三味中药制剂中盐酸麻黄碱含量测定，中间精密度良好。

[0072] （8）加样回收率试验

[0073] 精密量取已知盐酸麻黄碱含量的本品3ml(批号：120727，含盐酸麻黄碱1.0525mg/ml)，分别精密加入对照品储备溶液（浓度为0.5127mg/ml）:5ml、7ml、9ml,低、中、高浓度各3份,照上述供试品溶液制备项下的方法进行处理、测定，按下式计算回收率，结果见表9。

[0074]

[0075] 表9.加样回收试验结果

[0076]

[0077] 上述结果表明，用本法测定本品中盐酸麻黄碱的含量，相对标准偏差在规定范围内，加样回收率符合规定。

[0078] （9）供试品溶液的稳定性试验

[0079] 照含量测定项下供试品溶液制备方法制备供试品溶液，在上述色谱条件下，取该供试品溶液分别于常温条件0h、2h、4h、6h、8h、10h、12h进样，测定其峰面积，记录色谱图，计算，结果见表10。

[0080] 表10.供试品溶液稳定性试验结果

[0081]

[0082] 以上结果表明，本法用于含量测定的供试品溶液在12小时内稳定性良好，所制备的样品在12小时内进样，能满足含量测定的要求。

[0083] （10）样品含量的测定

[0084] 按上述方法分别对10批产品进行含量测定，为考察有效期内产品的盐酸麻黄碱含量情况，我们随机选取了2010-2012年间生产的10批产品进行测定，其中100727、100725、100713为近效期产品，具体测定结果见表11。

[0085] 表11.十批产品含量测定结果

[0086]批号 盐酸麻黄碱含量（mg/ml）
120727 1.05
120722 0.86
120720 0.79
120620 0.69
110805 0.83
110513 0.49
110101 0.65
100727 0.29
100725 0.25
100713 0.36

[0087] 通过以上方法学的验证，结果表明，用上述高效液相色谱条件测定本品中盐酸麻黄碱含量,结果专属、准确。通过对10个批次样品的含量测定,本品中盐酸麻黄碱含量最低为0.25mg/ml，最高为1.05mg/ml，平均含量为0.56mg/ml，且越接近有效期的产品含量相对偏低，说明本品中盐酸麻黄碱在贮存过程中会有所降低，综合分析，确定以0.30mg/ml作为限度收入本品质量标准草案中。

[0088] 实施例2

[0089] 三味清热止痒凝胶剂的质量检测方法

[0090] 照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ D）测定。

[0091] 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-1%冰乙酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为262nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于2000。

[0092] 对照品溶液的制备：取盐酸麻黄碱对照品，精密称定，加水摇匀，制成60μg/ml的溶液，精密量取60μg/ml的溶液10ml，置25ml量瓶中，加入0.1mol/L的高碘酸溶液1ml，摇匀，加入浓氨试液1ml，振摇5分钟，加入体积百分含量为20%的冰乙酸溶液1ml，摇匀，用流动相稀释至量瓶刻度，摇匀，即得24μg/ml的对照品溶液；

[0093] 供试品溶液的制备：精密量取本品5g,加入2mol/L的氢氧化钠溶液125ml,摇匀，加入氯化钠10g，振摇溶解后，蒸馏，用盛有1mol/L盐酸溶液1ml的100ml量瓶收集蒸馏液近95ml，加水至刻度，摇匀得到蒸馏液，精密量取蒸馏液10ml，置25ml量瓶中，加入0.1mol/L的高碘酸溶液1ml，摇匀，加入浓氨试液1ml，振摇5分钟，加入体积百分含量为20%的冰乙酸溶液1ml，摇匀，用流动相稀释至量瓶刻度，摇匀，即得供试品溶液。

[0094] 将对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪中，使用262nm波长进行检测即得结果。

[0095] 本发明的三味清热止痒凝胶剂中每1g含麻黄以盐酸麻黄碱（C10H15N0．HCl）计，不得少于0.50mg。

[0096] 所述的三味清热止痒凝胶剂是指用三味清热止痒洗剂原中药配方败酱草200g、麻黄150g、威灵仙150g，按常规工艺提取，加入常规辅料制备的凝胶剂。

[0097] 实例3

[0098] 三味清热止痒搽剂的质量检测方法

[0099] 照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ D）测定。

[0100] 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-1%冰乙酸溶液（40：60）为流动相；检测波长为262nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于2000。

[0101] 对照品溶液的制备：取盐酸麻黄碱对照品，精密称定，加水摇匀制成120μg/ml的溶液，精密量取120μg/ml的溶液10ml，置25ml量瓶中，加入0.1mol/L的高碘酸溶液1ml，摇匀，加入浓氨试液1ml，振摇5分钟，加入体积百分含量为20%的冰乙酸溶液1ml，摇匀，用流动相稀释至量瓶刻度，摇匀，即得48μg/ml的对照品溶液；

[0102] 供试品溶液的制备：精密量取本品10ml,加入2mol/L的氢氧化钠溶液125ml,摇匀，加入氯化钠10g，振摇溶解后，蒸馏，用盛有1mol/L盐酸溶液1ml的100ml量瓶收集蒸馏液近95ml，加水至刻度，摇匀得到蒸馏液，精密量取蒸馏液10ml，置25ml量瓶中，加入0.1mol/L的高碘酸溶液1ml，摇匀，加入浓氨试液1ml，振摇5分钟，加入体积百分含量为
20%的冰乙酸溶液1ml，摇匀，用流动相稀释至量瓶刻度，摇匀，即得供试品溶液。

[0103] 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪，测定，即得结果。

[0104] 本发明的三味清热止痒搽剂中每1ml含麻黄以盐酸麻黄碱（C10H15N0．HCl）计，不得少于0.30mg。

[0105] 所述的三味清热止痒搽剂是指用三味清热止痒洗剂原中药配方败酱草200g、麻黄150g、威灵仙150g，按常规工艺提取，加入常规辅料制备的搽剂。

[0106] 实例4

[0107] 三味清热止痒喷雾剂的质量检测方法

[0108] 照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ D）测定。

[0109] 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-1%冰乙酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为262nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于2000。

[0110] 对照品溶液的制备：取盐酸麻黄碱对照品精密称定，加水摇匀制成80μg/ml的溶液，精密量取80μg/ml的溶液10ml，置25ml量瓶中，加入0.1mol/L的高碘酸溶液1ml，摇匀，加入浓氨试液1ml，振摇5分钟，加入体积百分含量为20%的冰乙酸溶液1ml，摇匀，用流动相稀释至量瓶刻度，摇匀，即得32μg/ml的对照品溶液；

[0111] 供试品溶液的制备：精密量取本品8ml,加入2mol/L的氢氧化钠溶液125ml,摇匀，加入氯化钠10g，振摇溶解后，蒸馏，用盛有1mol/L盐酸溶液1ml的100ml量瓶收集蒸馏液近95ml，加水至刻度，摇匀得到蒸馏液，精密量取蒸馏液10ml，置25ml量瓶中，加入0.1mol/L的高碘酸溶液1ml，摇匀，加入浓氨试液1ml，振摇5分钟，加入体积百分含量为
20%的冰乙酸溶液1ml，摇匀，用流动相稀释至量瓶刻度，摇匀，即得供试品溶液。

[0112] 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪，测定，即得。

[0113] 本发明的三味清热止喷雾剂中每1ml含麻黄以盐酸麻黄碱（C10H15N0．HCl）计，不得少于0.50mg。

[0114] 所述的三味清热止痒喷雾剂是指用三味清热止痒洗剂原中药配方败酱草200g、麻黄150g、威灵仙150g，按常规工艺提取，加入常规辅料制备的喷雾剂。

[0115] 实例5

[0116] 三味清热止痒泡腾片的质量检测方法

[0117] 照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ D）测定。

[0118] 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-1%冰乙酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为262nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于2000。

[0119] 对照品溶液的制备：取盐酸麻黄碱对照品精密称定，加水摇匀制成80μg/ml的溶液，精密量取80μg/ml的溶液10ml，置25ml量瓶中，加入0.1mol/L的高碘酸溶液1ml，摇匀，加入浓氨试液1ml，振摇5分钟，加入体积百分含量为20%的冰乙酸溶液1ml，摇匀，用流动相稀释至量瓶刻度，摇匀，即得32μg/ml的对照品溶液；

[0120] 供试品溶液的制备：精密量取本品0.5g,加入2mol/L的氢氧化钠溶液125ml,摇匀，加入氯化钠10g，振摇溶解后，蒸馏，用盛有1mol/L盐酸溶液1ml的100ml量瓶收集蒸馏液近95ml，加水至刻度，摇匀得到蒸馏液，精密量取蒸馏液10ml，置25ml量瓶中，加入0.1mol/L的高碘酸溶液1ml，摇匀，加入浓氨试液1ml，振摇5分钟，加入体积百分含量为
20%的冰乙酸溶液1ml，摇匀，用流动相稀释至量瓶刻度，摇匀，即得供试品溶液。

[0121] 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪，测定，即得。

[0122] 本发明的三味清热止泡腾片中每1g含麻黄以盐酸麻黄碱（C10H15N0．HCl）计，不得少于0.50mg。

[0123] 所述的三味清热止痒泡腾片是指用三味清热止痒洗剂原中药配方败酱草200g、麻黄150g、威灵仙150g，按常规工艺提取，加入常规辅料制备的泡腾片。