天参胶囊在制备治疗2型糖尿病糖脂代谢紊乱以及动脉粥样硬化药物中的应用

摘要

本发明公开了天参胶囊在制备治疗2型糖尿病糖脂代谢紊乱以及动脉粥样硬化药物中的应用。天参胶囊可降低大鼠血清总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）水平（P

权利要求

1.天参胶囊在制备治疗2型糖尿病糖脂代谢紊乱药物中的应用。

说明书

天参胶囊在制备治疗2型糖尿病糖脂代谢紊乱以及动脉粥

样硬化药物中的应用

技术领域

[0001] 本发明属于医药领域，具体涉及天参胶囊在治疗2型糖尿病糖脂代谢紊乱以及防治动脉粥样硬化中的应用。

背景技术

[0002] 2型糖尿病，是代谢性疾病。患者其主要特征为胰岛素抵抗，相对胰岛素缺乏和高血糖。常需要药物和胰岛素治疗（特别是随着疾病进展）。2型糖尿病是非酮症性高血糖，其复杂且多因素的代谢改变常导致很多器官的损伤和功能损害，在2型的糖尿病中最重要的累及部位即是心血管系统，发病率和死亡率的显著增加。2型糖尿病常与肥胖、高血压、高胆固醇（混合型高脂血症），以及所谓“代谢综合征”（又称X综合征、Reavan′s综合征、CHAOS综合征）相关。2型糖尿病患者除了血糖升高外，还表现出糖耐量异常、胰岛素敏感性下降等，同时存在脂代谢紊乱，表现为甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白、游离脂肪酸升高，高密度脂蛋白降低等。胰岛素耐量异常是反映2型糖尿病的关键指标。现在2型糖尿病的口服药物包括双胍类（二甲双胍），α糖苷酶抑制剂类，磺脲类药，格列奈类药，GLP-1（胰高血糖素样肽1）受体激动剂，DDP-4抑制剂，选择性SGLT-2（钠-葡萄糖共转运蛋白-2）抑制剂等。二甲双胍是肥胖或超重糖尿病患者的一线治疗药物。二甲双胍是很多临床诊疗指南推荐的首选药物，能有效改善胰岛素抵抗，降低血糖，控制体重，减少心血管并发症，降低死亡率，是2型糖尿病的基础用药。罗格列酮：通过增加组织对胰岛素敏感性，提高细胞对葡萄糖的利用而发挥降低血糖的疗效，可明显降低空腹血糖及胰岛素和C-肽水平，对餐后血糖和胰岛素亦有明显的降低作用。研究机构曾对罗格列酮的安全性进行了研究，显示该药的使用与缺血性心血管疾病的风险增高相关。欧盟、美国等地的药政管理部门对罗格列酮的使用作出了严格的限制。

[0003] 天参胶囊的主要成分为红景天、丹参、三七、川木香、枸杞子、沙棘鲜浆、小檗皮等。天参胶囊益气行滞，化瘀止痛，用于气滞血瘀所致冠心病心绞痛。但天参胶囊是否具有治疗
2型糖尿病糖脂代谢紊乱以及防治动脉粥样硬化作用，未见报道。

发明内容

[0004] 发明目的：本发明的目的在于提供天参胶囊的新应用。

[0005] 技术方案：本发明公开了天参胶囊在制备治疗2型糖尿病糖脂代谢紊乱药物中的应用。

[0006] 本发明同时还公开了天参胶囊在制备防治动脉粥样硬化药物中的应用。

[0007] 上述天参胶囊由重量百分数为13～33%的红景天、1～21%的丹参、1～20%的三七、1～18%的川木香、13～33%的枸杞子、5～25%的小檗皮、1～18%的沙棘鲜浆和1～5%的淀粉混合。

[0008] 有益效果：天参胶囊可降低大鼠血清总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）水平（P<0.05），显著降低游离脂肪酸（FFA）水平（P<0.01），显著升高高密度脂蛋白（HDLC）、空腹胰岛素（FBIns）水平和胰岛素敏感指数（P<0.01），改善胰腺细胞病变，并能在一定程度上降低空腹血糖。本发明发现，天参胶囊能改善实验性2型糖尿病大鼠的糖代谢和脂代谢紊乱，其作用与增加组织的胰岛素敏感性有关。

附图说明

[0009] 图1为天参胶囊对2型糖尿病大鼠胰岛素耐量的影响；其中，A：空白组；B：模型组；C：阳性药组（4mg/kg）；D：天参胶囊低剂量组（180mg/kg）；E：天参胶囊中剂量组（360mg/kg）；F：天参胶囊高剂量组（720mg/kg）。

[0010] 图2为天参胶囊对2型糖尿病大鼠胰腺组织病理形态学的影响(HE染色，A-F×100，G-L×200)；其中，A、G：空白组；B、H：模型组；C、I：罗格列酮组（4mg/kg）；D、J：
天参胶囊低剂量组（180mg/kg）；E、K：天参胶囊中剂量组（360mg/kg）；F、L：天参胶囊高剂量组（720mg/kg）。

[0011] 图3为天参胶囊对2型糖尿病大鼠胰腺胰岛素含量的影响(HE染色，A-F×200）；其中，A：空白组；B：模型组；C：罗格列酮组（4mg/kg）；D：天参胶囊低剂量组（180mg/kg）；E：
天参胶囊中剂量组（360mg/kg）；F，天参胶囊高剂量组（720mg/kg）。

具体实施方式

[0012] 实施例1：

[0013] 天参胶囊对2型糖尿病模型大鼠糖脂代谢紊乱的作用

[0014] 1材料与方法

[0015] 1.1药物与试剂

[0016] 天参胶囊，内容物为棕褐色粉末，0.4g/粒，批号：120225，三普药业股份有限公司。罗格列酮钠片，4mg/片，批号：11100009，太极集团重庆涪陵制药厂有限公司。Streptozotocin（STZ），批号：S-0130，美国Sigma公司。葡萄糖测定试剂盒，批号20120101，上海荣盛生物药业有限公司。甘油三酯试剂盒，批号：20120524，北京北化康泰临床试剂有限公司。总胆固醇试剂盒，批号：20120525，北京北化康泰临床试剂有限公司。高密度脂蛋白胆固醇试剂盒，批号：20120411，北京北化康泰临床试剂有限公司。低密度脂蛋白胆固醇试剂盒，批号：20120229，北京北化康泰临床试剂有限公司。NEFA试剂盒，批号：20120731，南京建成生物工程研究所。精蛋白生物合成人胰岛素注射液（预混30R），批号：AVG0209，丹麦诺和诺德公司。RAT胰岛素ELISA试剂盒，批号：20120801A，南京迪兆生物科技有限公司。

[0017] 1.2动物与饲料

[0018] 清洁级SD雄性大鼠，130-150g，购自苏州市工业园区爱尔麦特科技有限公司，许可证号：SCXK（苏）2009-0001。高糖高脂饲料，购自苏州市工业园区爱尔麦特科技有限公司，配方为：10%猪油，5%蛋黄粉，15%蔗糖，0.5%胆固醇，0.5%胆酸钠，69%常规饲料。动物分笼饲养，保持12h昼夜节律，室温（22±1℃），自由饮水摄食。

[0019] 1.3仪器

[0020] 酶标仪（Thermo，美国）；电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）；大容量低温离心机（Kubota，日本）；96孔培养板（Costar，美国）；752紫外－可见分光光度计（上海菁华科技仪器有限公司）。

[0021] 2方法

[0022] 2.1动物模型的建立与分组

[0023] 大鼠适应性喂养1周后，按体重均匀分为正常饲料组及高糖高脂饲料组。其中12只大鼠使用正常饲料饲养，其余大鼠使用高糖高脂饲料饲养。4周后，禁食12h，腹腔注射柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(PH=4.4)配制的STZ溶液，35mg/kg，7d后检测禁食12h后血糖，以空腹糖>11.1mmol/L为糖尿病造模成功标准。剔除血糖值>25mmol/L的大鼠，将剩余的成模大鼠按血糖值随机分为5组：模型组、阳性药（罗格列酮）组、天参胶囊低、中、高剂量组，每组12只。天参胶囊低、中、高剂量组分别为180mg/kg、360mg/kg、720mg/kg；阳性药组罗格列酮的给药量为4mg/kg；模型组及正常组灌胃等体积的蒸馏水。隔天称一次体重、饮水量、饮食量，每天灌胃1次，连续灌胃30d，给药期间仍以高糖高脂饲料喂养。

[0024] 2.2糖耐量实验

[0025] 实验前大鼠禁食不禁水12h，以葡萄糖灌胃2g/kg，分别测定大鼠灌胃后0min、30min、60min、120min的血糖值。

[0026] 2.3胰岛素耐量实验

[0027] 于糖耐量实验测定3d后，大鼠禁食不禁水5h，腹腔注射胰岛素0.5IU/kg，分别测定大鼠注射胰岛素后0min、30min、60min、120min的血糖值。

[0028] 2.4血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDLC）、低密度脂蛋白（LDLC）、游离脂肪酸（FFA）、胰岛素（Ins）含量检测与计算

[0029] 于胰岛素耐量实验测定3d后，大鼠禁食不禁水10h，再次给药后1h，股动脉取血，室温下静置30min后，3000rpm，4℃离心15min，取上清液检测甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDLC）、低密度脂蛋白（LDLC）、游离脂肪酸（FFA）、胰岛素（Ins）含量，并计算胰岛素敏感指数（ISI）。

[0030] 2.5胰腺组织病理检查

[0031] 大鼠在股动脉取血后，断头处死，立即剖腹取胰腺，置于10%的甲醛溶液中固定，石蜡包埋，制成2μm切片，经HE染色后，在光镜下观察胰腺组织的病理形态学改变。

[0032] 2.6统计学处理

[0033] 所有数据以均数±标准差 表示，采用单向方差分析法（ANOVA）对实验数据统计分析，P<0.05为有统计学意义。

[0034] 3结果

[0035] 3.1天参胶囊对2型糖尿病大鼠体重、饮食、饮水量的影响

[0036] 见表1，治疗后，给药组体重均有不同程度的降低，但体重变化没有显著性差异。治疗后，阳性药组的平均饮水量明显降低（P<0.01），而低、中、高剂量组却有少许增加。治疗后，各给药组的平均饮食量没有明显变化。

[0037] 表1各组大鼠治疗前后体重、饮水量、饮食量的比较

[0038]

[0039]

[0040] 注：与空白组比较，#P<0.05，##P<0.01

[0041] 3.2天参胶囊对2型糖尿病大鼠糖耐量的影响

[0042] 灌胃葡萄糖30min时，各组大鼠血糖均较0min时明显升高。60min时，阳性药组大鼠血糖较模型组明显下降(P<0.01)，表现出较好的降糖作用，而天参胶囊三组大鼠血糖表现为微弱下降，没有显著性差异。表明天参胶囊对糖耐量异常没有显著地改善作用。见表2。

[0043] 表2天参胶囊对2型糖尿病大鼠葡萄糖耐量的影响

[0044]

[0045] 注：与同一时间点的空白组比较，#P<0.05，##P<0.01；与同一时间点的模型组比较，*P<0.05，**P<0.01

[0046] 3.3天参胶囊对2型糖尿病大鼠胰岛素耐量的影响

[0047] 注射胰岛素30min后，空白组与阳性药组大鼠血糖变化率较大，模型组大鼠血糖变化百分率最小；而天参胶囊三组大鼠血糖表现为微弱下降，没有显著性差异。见表3及图1。

[0048] 表3天参胶囊对2型糖尿病大鼠胰岛素耐量的影响

[0049]

[0050] 注：与同一时间点的空白组比较，#P<0.05，##P<0.01；与同一时间点的的模型组比较，*P<0.05，**P<0.0

[0051] 3.4天参胶囊对2型糖尿病大鼠空腹血糖、胰岛素、胰岛素敏感指数的影响[0052] 表4可见，治疗后，仅阳性药组可降低血糖，与模型组比较有显著性差异(P<0.01)，天参胶囊高剂量组低于模型组，但无统计学意义(P>0.05)。治疗后，阳性药组，中、高剂量组与模型组胰岛素比较，有显著性差异(P<0.01)，低剂量组胰岛素水平低于模型组，但无统计学意义(P>0.05)。天参胶囊高剂量组、阳性药组胰岛素敏感指数与模型组相比有显著性差异(P<0.05，P<0.01)，天参胶囊低、中剂量组胰岛素敏感指数高于模型组，但无显著性差异(P>0.05)。

[0053] 表4各组大鼠治疗后空腹血糖、空腹胰岛素、胰岛素敏感指数比较

[0054]

[0055] 注：与空白组比较，#P<0.05，##P<0.01；与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01[0056] 3.5天参胶囊对2型糖尿病大鼠血清中TG、TC、HDLC、LDLC、FFA的影响

[0057] 表5可见，治疗后各用药组与模型组相比，TG较模型组降低(P<0.01，P<0.05)。治疗后，阳性药组、中、高剂量组的TC较模型组降低(P<0.01，P<0.01，P<0.05)。阳性药组和高剂量组的HDL-C较模型组显著升高(P<0.01，P<0.05)，中剂量组较模型组略高，但无显著性差异（P>0.05）。各用药组均能降低LDLC含量，但仅阳性药组有显著性差异（P<0.01）。治疗后各用药组与模型组相比，FFA较模型组显著降低(P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.05)。说明各用药组均可在一定程度上改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的脂代谢紊乱。

[0058] 表5各组大鼠治疗后血清TG、TC、HDLC、LDLC、FFA含量比较

[0059]

[0060] 注：与空白组比较，#P<0.05，##P<0.01；与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01[0061] 3.6天参胶囊对2型糖尿病大鼠胰腺组织病理形态学的改变

[0062] 常规HE染色，放大100倍镜头下观察10个视野，计数胰岛数目；放大200倍镜头下观察胰岛组织形态。正常组：13个胰岛10个视野，胰岛大小及细胞分布未见显著改变；模型组：8个胰岛10个视野，胰岛重度萎缩，胰岛面积明显变小，胰岛细胞脱失，细胞类型不清，病变明显；各给药组病变存在，但明显较轻，且中剂量组病变轻于其余给药组。见图2。

[0063] 免疫组化法，放大200倍镜头下观察胰岛组织胰岛素表达情况。正常组胰岛素分布均匀，未见显著改变；模型组：胰岛素分布明显减少，分布不均匀；与模型组相比，各给药组胰岛素分布均有增加，天参胶囊低、中、高剂量组胰岛素表达呈剂量依赖性增加。见图3。

[0064] 实施例2：

[0065] 天参胶囊由重量百分数为13%的红景天、21%的丹参、20%的三七、15%的川木香、13%的枸杞子、10%的小檗皮、6%的沙棘鲜浆和2%的淀粉混合。

[0066] 实施例3：

[0067] 天参胶囊由重量百分数为18%的红景天、16%的丹参、10%的三七、18%的川木香、20%的枸杞子、15%的小檗皮、2%的沙棘鲜浆和1%的淀粉混合。

[0068] 实施例4：

[0069] 天参胶囊由重量百分数为23%的红景天、11%的丹参、5%的三七、5%的川木香、33%的枸杞子、13%的小檗皮、5%的沙棘鲜浆和5%的淀粉混合。

[0070] 实施例5：

[0071] 天参胶囊由重量百分数为28%的红景天、6%的丹参、5%的三七、10%的川木香、20%的枸杞子、12%的小檗皮、18%的沙棘鲜浆和1%的淀粉混合。

[0072] 实施例6：

[0073] 天参胶囊由重量百分数为33%的红景天、1%的丹参、10%的三七、5%的川木香、15%的枸杞子、25%的小檗皮、10%的沙棘鲜浆和1%的淀粉混合。