一种提高免疫机能的黄颡鱼饲料添加剂及其应用

摘要

本发明公开了一种提高免疫机能的黄颡鱼饲料添加剂，其特征在于：所述添加剂由重量份60~85份的猴头菇和重量份45~95份的黑木耳经粉碎、发酵、浓缩、过滤、干燥、粉碎后混以重量份5~10份的低聚木糖。本发明饲料添加剂具有提高免疫力，增强机身功能的作用。添加了饲料添加剂的饲料有助于提高黄颡鱼的机体功能和自身免疫力，增强黄颡鱼血细胞的吞噬活性、溶菌酶活力。本发明黄颡鱼成分来源广泛，价格低廉，适合大规模养殖用。

权利要求

1.一种提高免疫机能的黄颡鱼饲料添加剂，其特征在于：所述添加剂由重量份60~85份的猴头菇和重量份45~95份的黑木耳经粉碎、发酵、浓缩、过滤、干燥、粉碎后混以重量份

5~10份的低聚木糖。

2.如权利要求1所述的提高免疫机能的黄颡鱼饲料添加剂，其特征在于：所述添加剂的制备过程如下：（1）粉碎：选取新鲜猴头菇和黑木耳，晒干脱水，将脱水后重量份60~85份的猴头菇和重量份45~95份的黑木耳用研磨机研磨粉碎，过80~120目筛；

（2）发酵：将步骤（1）的粉末接入培养基；粉末与培养基的重量比为1~5:50~80；发酵温度26~28℃，pH值6~7，时间0.5~2h；

（3）猴头菇黑木耳多糖的制备：将步骤（2）的发酵液通过孔径为0.2~0.3um膜过滤；过滤后减压浓缩、过滤；将滤液真空干燥后得到猴头菇黑木耳多糖；

（4）将步骤（3）猴头菇黑木耳多糖粉碎；再混以重量份5~10份的低聚木糖。

3.如权利要求2所述的提高免疫机能的黄颡鱼饲料添加剂，其特征在于：所述培养基包括如下质量百分比的组份：葡萄糖1.2～2.8%，胰蛋白胨0.5～1.8%，酵母浸粉1.5～

2.5%，硫酸铵0.05～0.18%，碳酸氢钠0.05～0.20%，玉米浆粉0.2～0.35%。

4.如权利要求2所述的提高免疫机能的黄颡鱼饲料添加剂，其特征在于：所述真空干燥直至水分的重量百分含量小于等于3%。

5.权利要求1所述的提高免疫机能的黄颡鱼饲料添加剂的应用：其特征在于：所述饲料添加剂按照质量分数0.5~2%的添加量加入到基础饲料中。

说明书

一种提高免疫机能的黄颡鱼饲料添加剂及其应用

技术领域

[0001] 本发明涉及一种饲料添加剂及其应用，具体是一种提高免疫机能的黄颡鱼饲料添加剂及其应用。

背景技术

[0002] 黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidrac)属鲶形目、鱼危科、黄颡鱼属。分布于我国河川、湖泊、沟渠等水域中。由于黄颡鱼肉质细嫩、肉味鲜美,因而广受消费者喜爱,近几年来,已经成为国内新兴淡水养殖品种之一。随着黄颡鱼集约化养殖的迅速发展,其病害也日趋严重，提高黄颡鱼的免疫机能对于水产养殖意义重大。

发明内容

[0003] 发明目的：本发明的目的在于提供一种黄颡鱼饲料添加剂，以实现易于制备、便于推广、能有效改善黄颡鱼的身体机能、提高免疫能力。本发明还提供了该饲料添加剂的应用。

[0004] 技术方案：为了实现上述发明目的，本发明所采用的技术方案为：

[0005] 一种提高免疫机能的黄颡鱼饲料添加剂，其特征在于：所述添加剂由重量份60～85份的猴头菇和重量份45～95份的黑木耳经粉碎、发酵、浓缩、过滤、干燥、粉碎后混以重量份5～10份的低聚木糖。

[0006] 所述添加剂的制备过程如下：

[0007] （1）粉碎：选取新鲜猴头菇和黑木耳，晒干脱水，将脱水后重量份60～85份的猴头菇和重量份45～95份的黑木耳用研磨机研磨粉碎，过80～120目筛；

[0008] （2）发酵：将步骤（1）的粉末接入培养基；粉末与培养基的重量比为1～5:50～80；发酵温度26～28℃，pH值6～7，时间0.5～2h；

[0009] （3）猴头菇黑木耳多糖的制备：将步骤（2）的发酵液通过孔径为0.2～0.3um膜过滤；过滤后减压浓缩、过滤；将滤液真空干燥后得到猴头菇黑木耳多糖；

[0010] （4）将步骤（3）猴头菇黑木耳多糖粉碎；再混以重量份5～10份的低聚木糖。

[0011] 所述培养基包括如下质量百分比的组份：葡萄糖1.2～2.8%，胰蛋白胨0.5～1.8%，酵母浸粉1.5～2.5%，硫酸铵0.05～0.18%，碳酸氢钠0.05～0.20%，玉米浆粉0.2～
0.35%。

[0012] 所述减压浓缩的真空度为0.05-0.15MPa，温度为60-80℃。

[0013] 所述真空干燥的真空压力为0.10-0.15MPa，温度为60-80℃。

[0014] 所述真空干燥直至水分的重量百分含量小于等于3%。

[0015] 所述饲料添加剂按照质量分数0.5～2%的添加量加入到基础饲料中。

[0016] 有益效果：与现有技术相比，本发明的显著优点是：本发明饲料添加剂具有提高免疫力，增强机身功能的作用。添加了饲料添加剂的饲料有助于提高黄颡鱼的机体功能和自身免疫力，增强黄颡鱼血细胞的吞噬活性、溶菌酶活力。本发明黄颡鱼成分来源广泛，价格低廉，适合大规模养殖用。

具体实施方式

[0017] 下面通过具体的实施例对本发明进一步说明，应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干变型和改进，这些也应视为属于本发明的保护范围。

[0018] 实施例1

[0019] 选取新鲜猴头菇和黑木耳，选取新鲜猴头菇和黑木耳，晒干脱水，将脱水后重量份60g的猴头菇和重量份45g的黑木耳用研磨机研磨粉碎，过80目筛；将粉末接入培养基；粉末与培养基的重量比为1:50；培养基包括如下质量百分比的组份：葡萄糖1.2%，胰蛋白胨
0.5%，酵母浸粉1.5%，硫酸铵0.05%，碳酸氢钠0.05%，玉米浆粉0.2%。；发酵温度26℃，pH值
6，时间0.5h；发酵液通过孔径为0.2um膜过滤；过滤后于真空度0.05MPa，温度60℃减压浓缩、过滤；将滤液于真空压力0.10MPa，温度60℃真空干燥直至水分的重量百分含量小于等于3%后得到猴头菇黑木耳多糖；猴头菇黑木耳多糖粉碎后再混以重量份5g的低聚木糖。
将制得的饲料添加剂按照质量分数0.5%的添加量加入到基础饲料中供黄颡鱼食用。

[0020] 实施例2

[0021] 选取新鲜猴头菇和黑木耳，晒干脱水，将脱水后重量份85g的猴头菇和重量份95g的黑木耳用研磨机研磨粉碎，过120目筛；粉末接入培养基；培养基包括如下质量百分比的组份：葡萄糖2.8%，胰蛋白胨1.8%，酵母浸粉2.5%，硫酸铵0.18%，碳酸氢钠0.20%，玉米浆粉0.35%。粉末与培养基的重量比为5:80；发酵温度28℃，pH值7，时间2h；发酵液通过孔径为0.3um膜过滤；过滤后于真空度0.15MPa，温度60-80℃减压浓缩、过滤；将滤液于真空压力0.15MPa，温度60-80℃真空干燥直至水分的重量百分含量小于等于3%后得到猴头菇黑木耳多糖；猴头菇黑木耳多糖粉碎后再混以10g的低聚木糖。将制得的饲料添加剂按照质量分数2%的添加量加入到基础饲料中供黄颡鱼食用。

[0022] 实施例3

[0023] 选取新鲜猴头菇和黑木耳，晒干脱水，将脱水后重量份70份的猴头菇和重量份65份的黑木耳用研磨机研磨粉碎，过100目筛；粉末接入培养基；培养基包括如下质量百分比的组份：葡萄糖2%，胰蛋白胨1.2%，酵母浸粉2%，硫酸铵0.12%，碳酸氢钠0.15%，玉米浆粉0.30%。粉末与培养基的重量比为3:65；发酵温度27℃，pH值6.5，时间1h；发酵液通过孔径为0.25um膜过滤；过滤后于真空度0.10MPa，温度70℃减压浓缩、过滤；将滤液于真空压力0.12MPa，温度70℃真空干燥直至水分的重量百分含量小于等于3%后得到猴头菇黑木耳多糖；猴头菇黑木耳多糖粉碎后再混以8g的低聚木糖。将制得的饲料添加剂按照质量分数
1%的添加量加入到基础饲料中供黄颡鱼食用。

[0024] 实施例4

[0025] 本实施例自养殖渔场选取2龄健康黄颡鱼540尾，平均体重(61.6±5.4)g，平均体长(19.5±3.2)cm，随机分为6组，每组3个重复，每个重复30尾鱼(雌雄各占1/2)。6组试验鱼分别饲喂在基础饲料中添加0(对照组)、300、600、900、1200、1500mg/kg本发明饲料添加剂的试验饲料。

[0026] 黄颡鱼养殖8周后，经迟钝爱德华氏菌活菌攻毒96h，试验结果见表1，对照组死亡率为80%，各添加组的死亡率均有所降低，获得了一定的免疫保护率，尤其是1500mg/kg组，死亡率仅为40%，免疫保护率达到60%。此外，试验中黄颡鱼的死亡率与免疫保护率与饲料添加剂添加水平存在一定的剂量关系。

[0027] 表1

[0028]组别 攻毒鱼数量(尾) 死亡鱼数量(尾) 死亡率(%) 免疫保护率(%)
0mg/kg 20 17 85 /
300mg/kg 20 13 65 22
600mg/kg 20 12 60 25
900mg/kg 20 10 50 37.5
1200mg/kg 20 9 45 50
1500mg/kg 20 8 40 60

[0029] 实施例5

[0030] 本实施例选择规格整齐，体格健壮，平均体质量(10.39±0.68g的黄颡鱼240尾,随机分4组，每组设3个重复，每重复组20尾鱼。Ⅰ～Ⅲ组为试验组，分别饲喂在基础饲料中添加了0.5%、1.0%、2.0%的饲料添加剂的饲料，另设一对照组，投喂基础饲料。试验进行60d停止投食，停食第2d,，测定黄颡鱼血细胞的吞噬活性、溶菌酶活力。

[0031] 免疫指标测定：

[0032] 1、采血

[0033] 停饲后第2d，随机捞取10尾供试鱼，用MS-222(150mg/L)麻醉鱼体，1%肝素湿润的注射器尾部血管采血。将每尾鱼的血液分为2份，其中1份血液首先在室温下静置1h待其凝固，置冰箱4℃保存4h，4℃，4000r/min离心10min，收集血清用于溶菌酶测定；另1份用肝素抗凝,制备抗凝血,供测定白细胞吞噬活性。

[0034] 2、吞噬细胞吞噬功能的测定

[0035] 在抗凝血中加入0.25ml金黄色葡萄球菌悬液，充分混匀后于28℃下水浴1h，水浴期间每隔10min摇匀1次。再加入0.15mol/L冷NaCl溶液0.8ml，2000r/min离心4min，弃去上清液。然后用吸管吸取血细胞涂片，每个血样涂5片，甲醇固定5～7min,，蒸馏水冲洗，Giemsa染色1～5h，水洗晾干后镜检。吞噬活性分别以吞噬百分比(PP)和吞噬指数(PI)表示：PP%=(100个吞噬细胞中参与吞噬的细胞数/100)×100%；PI%=(吞噬细胞内的细菌总数/参与吞噬的吞噬细胞数)×100%。

[0036] 3、溶菌酶(LSZ)活力的测定

[0037] 以溶壁微球菌为底物，用0.1mol/ml磷酸缓冲液(pH6.4)将溶壁微球菌配成0.3mg/ml的菌悬液，每个样品取3ml菌悬液，吸取0.04ml血清加入菌悬液中，混匀后立即用UV-2000分光光度计于570nm下测定AO值。然后在37℃水浴中温浴30min后，取出置于4℃水浴中10min以终止反应，测定其于570nm处的光密度值A，按下式计算溶菌酶活力：