用于治疗心血管和血液病的取代的二氢吡唑啉酮

摘要

本申请涉及新的取代的二氢吡唑啉酮衍生物，它们的制备方法，它们对于制备用于治疗和/或预防疾病的应用和它们对于制备用于治疗和/或预防疾病，特别是心血管和血液学疾病和肾病，和用于促进伤口愈合的药物的应用。

权利要求

1.具有式(I)的化合物，其中

1

R 代表具有下式的杂芳基基团在其中

*表示与二氢吡唑啉酮环的连接点，和

4

R 表示氢，氟，氯，溴，氰基，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟甲基，(C1-C4)-烷氧基，三氟甲氧基，羟基羰基或者(C1-C4)-烷氧基羰基，2

R 代表具有下式的杂芳基基团在其中

#表示与二氢吡唑啉酮环的连接点，和

R6，R6A和R6B是相同的或者不同的并且彼此独立地表示氢或 者选自以下的取代基：氟，氯，溴，氰基，(C1-C6)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C6)-烷氧基，三氟甲氧基，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基，(C1-C4)-烷氧基羰基和4-～6-元杂环烷基，在其中(C1-C6)-烷基本身可以被羟基，(C1-C4)-烷氧基或者氨基取代和

4-～6-元杂环烷基本身可以被氟，氰基，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C4)-烷氧基，氧代，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代一次或者两次，和

R3代表氢，

和它们的盐。

2.根据权利要求1的2-[5-(羟甲基)吡啶-2-基]-4-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-1-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮，其具有下式：和其盐。

3.根据权利要求1的2-[5-(羟甲基)吡啶-2-基]-4-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-1-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮，其具有下式：

4.根据权利要求1的2-[5-(羟甲基)吡啶-2-基]-4-[4-(三氟甲基) -1H-咪唑-1-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐，其具有下式：

5.制备如在权利要求1-4中任一项定义的具有式(I)的化合物的方法，特征在于具有下式(II)的化合物

1 3

其中R 和R 具有在权利要求1-4中给出的意思和1

Z 代表甲基或者乙基，

在惰性溶剂中，任选在酸存在的条件下，与具有式(III)的化合物反应2

其中R 具有在权利要求1-4中给出的意思，以产生具有下式(IV)的化合物

1 1 2 3

其中Z，R，R 和R 具有以上提到的意思，其已经在这些反应条件下或者在随后的反应阶段中在碱影响下环化以产生具有式(I)的化合物，和具有式(I)的化合物任选用碱或者酸转化成它们的盐。

3

6.制备如在权利要求1-4中任一项定义的具有式(I)的化合物的方法，其中R 表示氢，特征在于具有下式(V)的化合物其中R1具有在权利要求1-4中给出的意思和Z1代表甲基或者乙基，

与具有下式(VI)的化合物经过缩合反应其中

2

Z 代表甲基或者乙基，

以产生具有下式(VII)的化合物

1 1

其中Z 和R 具有以上提到的意思，和这些随后在酸存在的条件下与具有下式(III)的化合物反应2

其中R 具有在权利要求1-4中给出的意思，以产生具有下式(IV-A)的化合物

1 1 2

其中Z，R 和R 具有以上提到的意思，其已经在这些反应条件下或者在随后的反应阶段中在碱影响下环化以产生具有式(I)3

的化合物，在其中R 代表氢。

7.如在权利要求1-4之一项中定义的化合物在制备治疗和/或预防心血管疾病，心功能不全，贫血，慢性肾病和肾机能不全的药物中的应用。

8.包含如在权利要求1-4之一项中定义的、与惰性的、无毒的、药物合适的辅助物质结合的化合物的药物。

说明书

用于治疗心血管和血液病的取代的二氢吡唑啉酮

[0001] 本申请是申请号为200780048262.3申请的分案申请，申请号为200780048262.3申请的申请日是2007年10月12日。

[0002] 本申请涉及新的取代的二氢吡唑啉酮衍生物，它们的制备方法，它们对于治疗和/或预防疾病的应用和它们对于制备用于治疗和/或预防疾病，特别是心血管和血液病，肾病，和用于促进伤口愈合的药物的应用。

[0003] 氧对人有机体或者它的部件的不足供应，其或者由于它的持续和/或它的程度损害有机体或者它的部件的正常功能或者导致它的功能完全停顿，被称作缺氧。缺氧可能由在空气中吸入的有效氧的减少(例如在高海拔下在此期间)，心输出量减少(例如如果心脏供血不足，由于肺动脉栓塞急性右心室超负荷)，血太低的氧转运能力(例如由于贫血或者中毒，例如由于一氧化碳)，由于血管闭塞局部被还原血流分界(典型地例如心，下肢或者脑的局部缺血状态，糖尿病大-和微血管病)或者还有组织增加的需氧量(例如由于增加的肌肉活动或者局部炎症)引起[Eder，Gedigk(编)，Allgemeine Pathologie und pathologische Anatomie，第33版，Springer Verlag，柏林，1990]。

[0004] 人有机体能够有限程度上适应急性和慢性供氧减少的情况。除立即响应外，其特别地包括心输出量和呼吸输出量的增加和通过本能的神经控制机制血管的局部扩张，缺氧造成许多基因转录的改变。这里基因产物的作用用来补偿缺氧。因此，提高了糖酵解和葡萄糖转运蛋白I的几种酶的表达，作为其结果增加了厌氧ATP产生并且使得缺氧幸存成为可能[施密特，Thews(编)，Physiologie des Menschen，第27版，Springer Verlag，柏林，1997； Petrides(编)，Biochemie und Pathobiochemie，第7版，SpringerVerlag，柏林，2003]。

[0005] 缺氧还导致脉管内皮细胞生长因子VEGF的增强表达，作其为结果促进在含氧量低的组织中血管的再生(血管生成)。通过缺血的组织的血流量借此长期改善。在各种心血管疾病和血管闭塞疾病情况下该反-规则显然是仅仅非常不充分的[综述在以下中：
Simons and Ware，Therapeutic angiogenesis in cardiovascular disease，Nat.Rev.Drug.Discov.2(11)，863-71(2003)]。

[0006] 此外，就肽激素的全身缺氧表达而言增加了主要在肾的间质成纤维细胞中形成的红细胞生成素。借此促进在骨髓中红血球的形成，并且因此增加血的氧运输能力。该效果已经并且被高效能运动员在所称的高原训练中应用。血氧运输能力的降低例如作为出血后贫血的结果通常引起肾中红细胞生成素产量的增加。由于某种形式的贫血，该调节机制可能被干扰或者它的正常值可能调低。因此例如在遭受肾机能不全的病人中，红细胞生成素诚然在肾软组织中产生，但是对于血的氧运输能力以显著减少的量，其导致所称的肾贫血。特别是肾贫血，并且由肿瘤和HIV感染引起的贫血通常通过重组人体红细胞生成素(rhEPO)的肠胃外投药法治疗。对于这种昂贵的治疗目前不存在用可口服药物的替代疗法[综述在以下中：Eckardt，The potential of erythropoietin and related strategies to stimulate erythropoiesis，Curr.Opin.Investig.Drugs2(8)，1081-5(2001)；Berns，Should the target hemoglobin for patients with chronic kidney disease treated with erythropoietic replacement therapy be changed ？，Semin.Dial.18(1)，22-9(2005)]。近代研究表明，除它的红细胞生成增加作用外，红细胞生成素对含氧量低的组织，特别是心和脑还具有保护(抗-凋亡的)作用，其是独立的。此外，根据近代研究用红细胞生成素的疗法减少了具有心功能不全的病人发病的平均严重程度[综述在以下中：Caiola和Cheng，Use of erythropoietin in heart failure management，Ann.Pharmacother.38(12)，2145-9(2004)；卡茨，Mechanisms and treatment of anemia in chronic heart failure，Congest.Heart.Fail.10(5)，243-7(2004)]。

[0007] 通过缺氧诱发的以上描述的基因具有在缺氧下由所称的缺氧-可诱导的转录因子(HIF)引起它们的表达增加的共同的特征。HIF是杂二聚物转录因子，其包括α和β亚单位(subunit)。描述了三种HIFα异构重整，其中HIF-1α和HIF-2α是高度类似的并且对于缺氧诱发的基因表达具有重要性。虽然β亚单位(其中已经描述了二种异构重整)，其也被称为ARNT(芳香烃受体原子转运蛋白)，在组成上表达，α亚单位的表达取决于细胞中的含氧量，HIFα蛋白质是聚-遍在蛋白质并且之后蛋白酶体降解。在缺氧下降解被抑制，以致HIFα与ARNT二聚并且可以激活它的靶基因。这里HIF二聚物与在它的靶基因的调节序列中所称的依赖缺氧的成分(HRE)结合。HRE通过交感序列定义。在众多 缺氧诱发基因的调节要素中已经检测到在起作用的HRE(综述在以下中：Semenza，Hypoxia-inducible factor1：oxygen homeostasis and disease patho-physiology，Trends Mol.Med.7(8)，
345-50(2001)；Wenger和Gassmann，Oxygen(es)and the hypoxia-inducible factor-1，Biol.Chem.378(7)，609-16(1997)]。

[0008] HIFα的调节基于的分子机制已经被几个独立的研究小组的工作阐明。该机制被从种到种地保存：HIFα被依赖氧的脯氨酰基4-羟化酶的亚类在两个特定脯氨酰基基团(人HIF-1α亚单位的P402和P564)上羟基化，称为PHD或者EGLN。HIF脯氨酰基4-羟化酶是依赖铁的、2-酮戊二酸-转化的加双氧酶[Epstein等，C.elegans EGL-9and mammalian homologs define a family of dioxygenases that regulate HIF by prolyl hydroxylation，Cell107(1)，43-54(2001)；Bruick 和 McKnight，A conserved family of prolyl-4-hydroxylases that modify HIF，Science294(5545)，1337-40(2001)；
Ivan等，Biochemical purification and pharmacological inhibition of amammalian prolyl hydroxylase acting on hypoxia-inducible factor，Proc.Natl.Acad.Sci.
U.S.A.99(21)，13459-64(2002)]。该酶在2001年第一次被注释为脯氨酰基羟化酶
[Aravind和Koonin，The DNA-repair protein AlkB，EGL-9，and leprecan define new families of2-oxoglutarate-and iron-dependent dioxygenases，Genome Biol.2(3)，research0007.1-0007.8，2001年二月19日编辑出版]。

[0009] pVHL肿瘤抑制蛋白，其连同elongin B和C形成所称的VBC配合物，其使HIFα亚单位适应E3遍在蛋白连接酶，与脯氨酰羟基化的HIFα亚单位结合。因为作为细胞内氧的浓度的函数发生HIFα亚单位的脯氨酰基4-羟基化和它的随后的降解，HIF脯氨酰基
4-羟化酶还被称为细胞氧传感器。已经识别这些酶的三种异构重整：EGLN1/PHD2，EGLN2/PHD1和EGLN3/PHD3。这些酶的两种(EGLN2/PHD1和EGLN3/PHD3)甚至在缺氧下被转录
诱发并且可能负责在长期缺氧下观测到的HIFα水平的降低[综述在以下中：Schofield和 Ratcliffe，Oxygen sensing by HIF hydroxylases，Nat.Rev.Mol.Cell.Biol.5(5)，
343-54(2004)]。

[0010] HI HIF脯氨酰基4-羟化酶的选择性药理学抑制造成依赖HIF的靶基因的基因表达的增加并且因此对众多疾病综合征的治疗有好处。在特别 是心血管系统疾病情况下，期待来自新的血管的诱发的在疾病期间的改进和在缺血器官的新陈代谢情况下来自需氧到厌氧ATP产量的变化。在长期伤口的血管形成中的改进促进了治愈方法，特别是在糟糕地治愈溃疡小腿和其它长期皮肤伤口情况下。以某种疾病形式的内生红细胞生成素的诱发，特别是在患有肾贫血的病人中，同样是针对的治疗目的。

[0011] 至今在科学文献中描述的HIF脯氨酰基4-羟化酶抑制剂没有满足对药物施加的需要。这些任何一个是竞争性的酮戊二酸类似物(例如N-草酰氨基乙酸)，其特征在于它们的非常低的动态电势，并且因此在活体模型中在HIF靶基因的诱发意义上至今还未显示作用。或者它们是铁-络合剂(螯合剂)，例如，其作为含铁的加双氧酶的非特异性抑制剂并且，虽然它们造成靶基因的诱发，例如红细胞生成素，在活体内，显然通过可吸收铁的络合抵消了红细胞生成。

[0012] 本发明的目的是提供新的化合物，其可以用于治疗疾病，特别是心血管和血液学疾病。

[0013] 在本发明的上下文中，现在描述了作为HIF脯氨酰基4-羟化酶特定的抑制剂的化合物并且在该特效机制基础上在活体内引起，非肠道或者口服后，诱发HIF靶基因，例如红细胞生成素，并且借此引起的生物进程，例如红细胞生成。

[0014] 在EP165448和EP212281中公开了具有杀菌性和/或杀菌作用的2-杂芳基-4-芳基-1，2-二氢吡唑啉酮。在EP183159中要求保护作为治疗呼吸道，心血管和炎性疾病的脂加氧酶抑制剂的2-杂芳基-4-芳基-1，2-二氢吡唑啉酮。在DE2651008中描述了具有除莠剂活性的2，4-二苯基-1，2-二氢吡唑啉酮。在Helv.Chim.Acta49(1)中报到了某种2-吡啶基-1，2-二氢吡唑啉酮的制备和药理学性质。WO96/12706，WO00/51989和WO03/074550要求保护治疗各种疾病的具有二氢吡唑啉酮局部结构的化合物，并且在WO2006/101903中公开了治疗神经精神病学疾病的羟基-或者烷氧基-取代的联吡唑。在WO03/051833
和WO2004/089303中还描述了治疗疼痛和各种CNS疾病的杂芳基-取代的吡唑衍生物。
WO2006/114213同时公开了作为HIF脯氨酰基4-羟化酶抑制剂的2，4-二吡啶基-1，2-二氢吡唑啉酮。

[0015] 在 Acta Crystallogr.，E 部 分：Structure Reports Online E57(11)，o1126-o1127(2001)[Chem.Abstr.2001：796190]中 报 到了 化 合物3- 甲 基-1-( 吡啶-2-基)-4-(1-吡啶-2-基-3-甲基-1H-吡唑-5-基)-2H-3-吡唑啉-5(1H)-酮
(其它的名称：5，5′-二甲基-2，2′-二吡啶-2-基-1′，2′-二氢-2H，3′H-3，
4′-二吡唑-3′-酮)的晶体X射线结构。在Indian J.Heterocyclic Chem.3(1)，
5-8(1993)[Chem.Abstr.1994：323362]中描述了某种3′，5-二甲基-2-苯基-1′-(1，
3-噻唑-2-基)-1′H，2H-3，4′-二吡唑-5′-醇衍生物的合成。在J.Heterocyclic
Chem.27(4)，865-870(1990)[Chem.Abstr.1991：428557] 中 报 到 了 个 别 4-( 吡唑-5-基)-吡唑啉-5-酮衍生物的制备和互变现象。对于在这些出版物中提到的化合物迄今还未描述治疗应用。化合物2-叔-丁基-1′-[4-(4-氯苯基)-1，3-噻唑-2-基]-3′，
5-二甲基-1′H，2H-3，4′-二吡唑-5′-醇在WO2007/008541中列为试验实施例。

[0016] 本发明提供了具有以下通式(I)的化合物

[0017]

[0018] 其中

[0019] R1 代表具有下式的杂芳基基团

[0020]

[0021] 在其中

[0022] * 表示与二氢吡唑啉酮环的连接点，

[0023] A 在每个单个出现时表示C-R4或者N，在其中至多两个环成员A同时代表N，

[0024] 和

[0025] E 表示O，S或者N-R5，

[0026] R2 代表具有下式的杂芳基基团

[0027]

[0028] 在其中

[0029] # 表示与二氢吡唑啉酮环的连接点，

[0030] G 在每个单个出现时表示C-R6或者N，在其中至多两个环成员G同时代表N，

[0031] J 表示O，S或者N-R7

[0032] 和

[0033] L 在每个单个出现时表示C-R8或者N，在其中至多两个环成员L同时代表N，

[0034] 在其中

[0035] R4，R6和R8是相同的或者不同的并且在每个单个情况下彼此独立地代表氢或者选自以下的取代基：卤素，氰基，硝基，(C1-C6)-烷基，(C3-C7)-环烷基，4-～10-元杂环烷9 10 11 12
基，苯基，5-或者6-元杂芳基，-C(＝O)-R，-C(＝O) -OR ，-C(＝O)-NR R ，-O-C(＝
13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
O)-R ，-O-C(＝O)-NR R ，-NR -C(＝O)-R ，-NR -C(＝O)-OR ，-NR -C(＝O)-NR R ，
23 24 25 26 27 28 29 30 31
-NR -SO2-R ，-SO2-R ，-SO2-NR R ，-OR ，-SR 和-NR R ，在其中

[0036] (i) (C1-C6)-烷基本身可以以相同的或者不同的方式被选自以下的基团取代一次至三次：卤素，氰基，氧代，(C3-C7)-环烷基，4-～10-元杂环烷基，苯基，5-或者
9 10 11 12 13
6-元杂芳基，-C(＝O)-R，-C(＝O)-OR ，-C(＝O)-NR R ，-O-C(＝O)-R ，-O-C(＝
14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24
O)-NR R ，-NR -C(＝O)-R ，-NR -C(＝O)-OR ，-NR -C(＝O)-NR R ，-NR -SO2-R ，-S
25 26 27 28 29 30 31
O2-R ，-SO2-NR R ，-OR ，-SR 和-NR R ，

[0037] 在其中最后提到的环烷基，杂环烷基，苯基和杂芳基基团本身可以在每一种情况下被卤素，氰基，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C4)-烷氧基，三氟甲氧基，氧代，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代最多三次，

[0038] (ii) (C3-C7)-环烷基，4-～10-元杂环烷基，苯基和5-或者6-元杂芳基本身可以在每一种情况下被选自以下的基团以相同的或者不同的方式取代一次-三次：
9 10 11 12
(C1-C6)-烷基，卤素，氰基，氧代，-C(＝O)-R，-C(＝O)-OR ，-C(＝O)-NR R ，-O-C(＝
13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
O)-R ，-O-C(＝O)-NR R ，-NR -C(＝O)-R ，-NR -C(＝O)-OR ，-NR -C(＝O)-NR R ，
23 24 25 26 27 28 29 30 31
-NR -SO2-R ，-SO2-R ，-SO2-NR R ，-OR ，-SR 和-NR R ，

[0039] 在其中最后提到的烷基本身可以被卤素，氰基，羟基，三氟甲氧基，(C1-C4)-烷氧基，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基，(C1-C4)-烷氧基羰基，(C3-C7)-环烷基，4-～7- 元杂环烷基，苯基和/或5-或者6-元杂芳基以相同的或者不同的方式取代最多三次，

[0040] (iii)R9，R10，R11，R13，R14，R17，R19，R21，R24，R25，R26，R28，R29和R30在每个单个出现时彼此独立地代表选自以下的基团：氢，(C1-C6)-烷基，(C3-C7)-环烷基，4-～10-元杂环烷基，苯基和5-或者6-元杂芳基，在其中

[0041] (C3-C7)-环烷基，4-～10-元杂环烷基，苯基和5-或者6-元杂芳基本身可以在每一种情况下被卤素，氰基，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C4)-烷氧基，三氟甲氧基，氧代，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代最多三次，

[0042] 和

[0043] (C1-C6)-烷基可以被卤素，氰基，羟基，三氟甲氧基，(C1-C4)-烷氧基，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基，(C1-C4)-烷氧基羰基，(C3-C7)-环烷基，4-～7-元杂环烷基，苯基和/或5-或者6-元杂芳基以相同的或者不同的方式取代一次-三次，

[0044] (iv)R12，R15，R16，R18，R20，R22，R23，R27和R31在每个单个出现时彼此独立地代表选自氢和(C1-C6)-烷基的基团，

[0045] 在其中(C1-C6)-烷基可以被卤素，氰基，羟基，三氟甲氧基，(C1-C4)-烷氧基，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代一次-三次，

[0046] 和/或在其中

[0047] (v)在每一种情况下与它们连接的原子配对的R11和R12，R14和R15，R16和R17，R18和19 20 21 21 22 23 24 26 27 30 31
R ，R 和R ， R 和R ，R 和R ，R 和R 以及R 和R 可以形成5-或者6-元杂环烷
基环，其可以被卤素，氰基，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C4)-烷氧基，三氟甲氧基，氧代，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代一次-三次，

[0048] 和

[0049] R5和R7是相同的或者不同的并且代表氢或者选自以下的取代基：(C1-C6)-烷基，(C3-C7)-环烷基，4-～7-元杂环烷基，苯基和5-或者6-元杂芳基，在其中

[0050] (i) (C1-C6)-烷基本身可以被选自以下的基团以相同的或者不同的方式取代一次-三次：卤素，氰基，氧代，(C3-C7)-环烷基，4-～7-元杂环烷基，苯基，5-或者
9 10 11 12 13
6-元杂芳基，-C(＝O)-R，-C(＝O)-OR ，-C(＝O)-NR R ，-O-C(＝O)-R ，-O-C(＝
14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24
O)-NR R ，-NR -C(＝O)-R ，-NR -C(＝O)-OR ，-NR -C(＝O)-NR R ，-NR -SO2-R ，-S
25 26 27 28 29 30 31
O2-R ，-SO2-NR R ，-OR ，-SR 和-NR R ，

[0051] 在其中最后提到的环烷基，杂环烷基，苯基和杂芳基基团本身可以在每一种情况下被卤素，氰基，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C4)-烷氧基，三氟甲氧基，氧代，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代最多三次，

[0052] 和

[0053] (ii) (C3-C7)-环烷基，4-～7-元杂环烷基，苯基和5-或者6-元杂芳基本身可以在每一种情况下被选自以下的基团以相同的或者不同的方式取代一次-三次：(C1-C6)-烷9 10 11 12 13
基，卤素，氰基，氧代，-C(＝O)-R，-C(＝O)-OR ，-C(＝O)-NR R ，-O-C(＝O)-R ，
14 15 16 17 18 19 20 21 22 23
-O-C(＝O)-NR R ，-NR -C(＝O)-R ，-NR -C(＝O)-OR ，-NR -C(＝O)-NR R ，-NR -S
24 25 26 27 28 29 30 31
O2-R ，-SO2-R ，-SO2-NR R ，-OR ，-SR 和-NR R ，

[0054] 在其中最后提到的烷基本身可以被卤素，氰基，羟基，三氟甲氧基，(C1-C4)-烷氧基，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基，(C1-C4)-烷氧基羰基，(C3-C7)-环烷基，4-～7-元杂环烷基，苯基和/或5-或者6-元杂芳基以相同的或者不同的方式取代最多三次，

[0055] 在其中

[0056] (a)R9，R10，R11，R13，R14，R17，R19，R21，R24，R25，R26，R28，R29和R30对于每个单个出现时彼此独立地代表选自以下的基团：氢，(C1-C6)-烷基，(C3-C7)-环烷基，4-～7-元杂环烷基，苯基和5-或者6-元杂芳基，在其中

[0057] (C3-C7)-环烷基，4-～7-元杂环烷基，苯基和5-或者6-元杂芳基本身可以在每一种情况下被卤素，氰基，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C4)-烷氧基，三氟甲氧基，氧代，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代最多三次，

[0058] 和

[0059] (C1-C6)-烷基可以被卤素，氰基，羟基，三氟甲氧基，(C1-C4)-烷氧基，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基，(C1-C4)-烷氧基羰基，(C3-C7)-环烷基，4-～7-元杂环烷基，苯基和/或5-或者6-元杂芳基以相同的或者不同的方式取代一次-三次，

[0060] (b)R12，R15，R16，R18，R20，R22，R23，R27和R31对于每个单个出现时彼此独立地代表选自氢和(C1-C6)- 烷基的基团，

[0061] 在其中(C1-C6)-烷基可以被卤素，氰基，羟基，三氟甲氧基，(C1-C4)-烷氧基，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代一次-三次，

[0062] 和/或

[0063] (c)在每一种情况下与它们连接的原子配对的R11和R12，R14和R15，R16和R17，R18和19 20 21 21 22 23 24 26 27 30 31
R ，R 和R ，R 和R ，R 和R ，R 和R 以及R 和R 可以形成5-或者6-元杂环烷基
环，其可以被被卤素，氰基，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C4)-烷氧基，三氟甲氧基，氧代，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代一次-三次，

[0064] 和

[0065] R3 代表氢，(C1-C6)-烷基或者(C3-C7)-环烷基，

[0066] 和它们的盐，溶剂化物和盐的溶剂化物，

[0067] 以下化合物除外

[0068] 3-甲基-1-(吡啶-2-基)-4-(1-吡啶-2-基-3-甲基-1H-吡唑-5-基)-2H-3-吡唑啉-5(1H)-酮，

[0069] 3′，5-二甲基-2-苯基-1′-(4-苯基-1，3-噻唑-2-基)-1′H，2H-3，4′-双吡唑-5′-醇，

[0070] 3′，5-二甲基-2-苯基-1′-(4-噻吩-2-基-1，3-噻唑-2-基)-1′H，2H-3，4′-双吡唑-5′-醇，

[0071] 3′，5-二甲基-1′-(4-甲基-1，3-噻唑-2-基)-2-苯基-1′H，2H-3，4′-双吡唑-5′-醇，

[0072] 2-(4-氯苯基)-3′，5-二甲基-1′-(4-苯基-1，3-噻唑-2-基)-1′H，2H-3，4′-双吡唑-5′-醇，

[0073] 和

[0074] 2-叔-丁基-1′-[4-(4-氯苯基)-1，3-噻唑-2-基]-3′，5-二甲基-1′H，2H-3，4′-双吡唑-5′-醇。

[0075] 根据本发明的化合物是具有式(I)的化合物和它们的盐，溶剂化物 和盐的溶剂化物，在具有以下提到的式的式(I)中包括的化合物和它们的盐，溶剂化物和盐的溶剂化物，和在式(I)中包括的和以下作为实施例提到的化合物和它们的盐，溶剂化物和盐的溶剂化物，只要在式(I)中包括的和以下提到的化合物还不是盐，溶剂化物和盐的溶剂化物。

[0076] 根据本发明的化合物可以以立体异构的形式(对映异构体，非对应异构体)存在，这取决于它们的结构。本发明因此包括对映异构体或者非对应异构体和它们的具体的混合物。立体异构相同的组分可以由具有对映异构体和/或非对应异构体的这种混合物以已和的方式分离。

[0077] 如果根据本发明的化合物可以以互变异构形式存在，那么本发明包括全部互变异构形式。

[0078] 在本发明的上下文中优选的盐是根据本发明的化合物的生理可接受的盐。也包括本身不适于药用但是例如可以用于根据本发明的化合物的分离或者提纯的盐。

[0079] 根据本发明的化合物的生理可接受的盐包括无机酸，羧酸类和磺酸的酸加成盐，例如盐酸，氢溴酸，硫酸，磷酸，甲磺酸，乙磺酸，甲苯磺酸，苯磺酸，萘二磺酸，乙酸，三氟乙酸，丙酸，乳酸，酒石酸，苹果酸，柠檬酸，富马酸，马来酸和苯甲酸的盐。

[0080] 根据本发明的化合物的生理可接受的盐还包括常用碱的盐，例如和优选碱金属盐(例如钠和钾盐)，碱土金属盐(例如钙和镁盐)和衍生自氨或者具有1-16个C原子的有机胺的铵盐，例如和优选乙胺，二乙胺，三乙胺，乙基二异丙基胺，一乙醇胺，二乙醇胺，三乙醇胺，二环己基胺，二甲基胺基乙醇，普鲁卡因，二苄基胺，N-甲基吗啉，精氨酸，赖氨酸，乙二胺和N-甲基哌啶的盐。

[0081] 在本发明的上下文中溶剂化物被称作根据本发明的化合物的那些形式，其通过与溶剂分子配位形成固态或者液态的复合物。水合物是溶剂化物的特定形式，其中配位用水进行。在本发明的上下文中水合物是优选的溶剂化物。

[0082] 本发明此外还包括根据本发明的化合物的药物前体。术语“药物前体”包括其本身可以是生物学活性的或者非活性的，但是在它们在身体内停留期间转化(例如代谢或者水解)成根据本发明的化合物的化合物。

[0083] 在本发明的上下文中，取代基具有以下意思，除非另外说明：

[0084] 在本发明的上下文中(C1-C6)-烷基和(C1-C4)-烷基代表具有1-6 个或者分别地1-4个碳原子的直链或者支链烷基基团。优选具有1-4个碳原子的直链或者支链烷基基团。
可以提到例如和优选：甲基，乙基，正-丙基，异丙基，正-丁基，异-丁基，仲-丁基，叔-丁基，1-乙基丙基，正-戊基和正-己基。

[0085] 在本发明的上下文中(C1-C6)-烷氧基和(C1-C4)-烷氧基代表具有1-6个或者分别地1-4个碳原子的直链或者支链烷氧基基团。优选具有1-4个碳原子的直链或者支链烷氧基基团。可以提到例如和优选：甲氧基，乙氧基，正-丙氧基，异丙氧基，正-丁氧基，异-丁氧基，正-戊氧基和正-己氧基。

[0086] 在本发明的上下文中一-(C1-C6)-烷基氨基和一-(C1-C4)-烷基氨基代表具有包含1-6个或者分别地1-4个碳原子的直链或者支链烷基取代基的氨基基团。优选具有1-4个碳原子的直链或者支链一烷基氨基基团。可以提到例如和优选：甲基氨基，乙基氨基，正-丙基氨基，异丙基氨基，正-丁基氨基，叔-丁基氨基，正-戊基氨基和正-己基氨基。

[0087] 在本发明的上下文中二-(C1-C6)-烷基氨基和二-(C1-C4)-烷基氨基代表具有两个每个包含1-6个或者分别地1-4个碳原子的相同的或者不同的直链或者支链烷基取代基的氨基基团。优选在各自情况下具有1-4个碳原子的直链或者支链二烷基氨基基团。
可以提到例如和优选：N，N-二甲基氨基，N，N-二乙基氨基，N-乙基-N-甲基氨基，N-甲基-N-正-丙基氨基，N-异丙基-N-正-丙基氨基，N，N-二异丙基氨基，N-正-丁基-N-甲基氨基，N-叔-丁基-N-甲基氨基，N-甲基-N-正-戊基氨基和N-正-己基-N-甲基氨
基。

[0088] 在本发明的上下文中(C1-C6)-烷氧基羰基和(C1-C4)-烷氧基羰基代表具有1-6个或者分别地1-4个碳原子的且其通过羰基基团连接的直链或者支链烷氧基基团。优选在烷氧基基团中具有1-4个碳原子的直链或者支链烷氧基羰基基团。可以提到例如和优选：甲氧基羰基，乙氧基羰基，正-丙氧基羰基，异丙氧基羰基，正-丁氧基羰基和叔丁氧基羰基。

[0089] 在本发明的上下文中(C3-C7)-环烷基和(C3-C6)-环烷基代表具有3-7个或者分别地3-6个环碳原子的单环的、饱和的碳环基团。可以提到例如和优选：环丙基，环丁基，环戊基，环己基和环庚基。

[0090] 在本发明的上下文中4-～10-元杂环烷基代表杂环基团，其是一-或者任选二环的、饱和的或者包含双键并且总共具有4-10个环原子，包含 一个或两个来自N，O和/或S的环杂原子并且通过环碳原子或者任选环氮原子连接。可以提到例如：吖丁啶基，氮杂环丁烷基，硫杂环丁基(thietanyl)，吡咯烷基，吡咯啉基，吡唑烷基，二氢吡唑基，四氢呋喃基，thiolanyl，1，3- 唑烷基，1，3-噻唑烷基，哌啶基，四氢吡啶基，哌嗪基，四氢吡喃基，二氢吡喃基，四氢噻喃基，1，3-二 烷基，1，4-二 烷基，吗啉基，硫代吗啉基，六氢吖庚因基，六氢-1，4-二吖庚因基，八氢吖辛基，八氢吡咯并[3，4-b]吡咯基，八氢异吲哚基，八氢吡咯并[3，4-b]吡啶基，六氢吡咯并[3，4-c]吡啶基，八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪基，十氢异喹啉基，八氢吡啶并[1，2-a]吡嗪基，7-氮杂双环[2.2.1]庚烷基，3-氮杂双环[3.2.0]庚烷基，3-氮杂双环[3.2.1]辛烷基和8-氮杂双环[3.2.1]辛烷基，8-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]
辛烷基。在本发明的上下文中优选单环的、饱和的具有总共4-7个环原子的4-～7-元杂环烷基基团，其包含一个或两个来自N，O和/或S的环杂原子并且通过环碳原子或者任选环氮原子连接。可以提到例如：吖丁啶基，氮杂环丁烷基，硫杂环丁基，吡咯烷基，吡唑烷基，四氢呋喃基，thiolanyl，1，3- 唑烷基，哌啶基，哌嗪基，四氢吡喃基，四氢噻喃基，1，3-二烷基，1，4-二 烷基，吗啉基，硫代吗啉基，六氢吖庚因基，六氢-1，4-二吖庚因基。特别优选具有总共4～6个环原子的4-～6-元杂环烷基基团，其包含一个或两个来自N和/
或O的环杂原子，例如吡咯烷基，四氢呋喃基，哌啶基，哌嗪基，四氢吡喃基和吗啉基。

[0091] 在本发明的上下文中5-或者6-元杂芳基代表具有总共5个或者分别地6个环原子的芳族杂环基(杂芳族的)，其包含最多四个相同的或者不同的来自N，O和/或S的环
杂原子并且通过环碳原子或者任选通过环氮原子连接。可以提到例如：呋喃基，吡咯基，噻吩基，吡唑基，咪唑基，噻唑基， 唑基，异 唑基，异噻唑基，三唑基， 二唑基，噻二唑基，四唑基，吡啶基，嘧啶基，哒嗪基，吡嗪基，三嗪基。优选具有最多三个来自N，O和/或S的环杂原子的5-或者6-元杂芳基基团，例如呋喃基，噻吩基，噻唑基， 唑基，异噻唑基，异唑基，吡唑基，咪唑基，三唑基， 二唑基，噻二唑基，吡啶基，嘧啶基，哒嗪基，吡嗪基。

[0092] 在本发明的上下文中卤素包括氟，氯，溴和碘。优选氟，氯和溴，并且特别优选氟和氯。

[0093] 如果在根据本发明的化合物中基团被取代，基团可以是一-或者多取代的，除非另外说明。在本发明的上下文中，对于所有多次出现的基团，其意思彼此独立。优选被一个，两个或者三个相同的或者不同的取代基取代。特别优选被一个或两个相同的或者不同的取代基取代。

[0094] 在本发明的上下文中优选的具有式(I)的化合物是下列那些，其中

[0095] R1 代表具有下式的杂芳基基团

[0096]

[0097] 在其中

[0098] * 表示与有二氢吡唑啉酮环的连接点，

[0099] A 在每个单个出现时表示C-R4或者N，在其中至多两个环成员A同时代表N，在其中

[0100] R4 在每个单个情况中，彼此独立地代表氢或者选自以下的取代基：氟，氯，溴，氰基，硝基，(C1-C6)-烷基，羟基，(C1-C6)-烷氧基，三氟甲氧基，氨基，一-(C1-C6)-烷基氨基，二-(C1-C6)-烷基氨基，羟基羰基和(C1-C6)-烷氧基羰基，

[0101] 在其中提到的(C1-C6)-烷基基团本身可以被氟，氯，溴，氰基，羟基，三氟甲氧基，(C1-C4)-烷氧基，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代最多三次，

[0102] 和

[0103] E 表示O，S或者N-R5，在其中

[0104] R5 代表氢或者(C1-C6)-烷基，

[0105] R2 代表具有下式的杂芳基基团

[0106]

[0107] 在其中

[0108] # 表示与二氢吡唑啉酮环的连接点，6

[0109] G 在各自情况下表示C-R 或者N，在其中两个环成员G的不多于一个代表N，在其中6

[0110] R 在每个单个情况中，彼此独立地代表氢或者选自以下的取代基：氟，氯，溴，氰基，(C1-C6)-烷基，(C3-C6)-环烷基，4-～6-元杂环烷基，苯基，5-或者6-元杂芳10 11 12 13 14 15 16
基，-C(＝ O)-OR ，-C(＝ O)-NR R ，-O-C(＝ O)-R ，-O-C( ＝O)-NR R ，-NR -C( ＝
17 18 19 20 21 22 23 24 28 30 31
O)-R ，-NR -C(＝O)-OR ，-NR -C(＝O)-NR R ，-NR -SO2-R ，-OR 和-NR R ，在其中[0111] (i) (C1-C6)-烷基本身可以被选自以下的取代基以相同的或者不同的方式取代一次-三次：氟，氯，溴，氰基，(C3-C6)环烷基，4-～6-元杂环烷基，苯基，5-或者6-元杂
10 11 12 13 14 15 16
芳基，-C(＝O)-OR ，-C(＝O)-NR R ，-O-C(＝O)-R ，-O-C(＝O)-NR R ，-NR -C(＝
17 18 19 20 21 22 23 24 28 30 31
O)-R ，-NR -C(＝O)-OR ，-NR -C(＝O)-NR R ，-NR -SO2-R ，-OR 和-NR R ，

[0112] 在其中最后提到的环烷基，杂环烷基，苯基和杂芳基基团本身可以在各自情况下被氟，氯，溴，氰基，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C4)-烷氧基，三氟甲氧基，氧代，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代最多两次，

[0113] (ii) (C3-C6)-环烷基，4-～6-元杂环烷基，苯基和5-或者6-元杂芳基本身可以在各自情况下被氟，氯，溴， 氰基，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C4)-烷氧基，三氟甲氧基，氧代，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代一次或者两次，
10 11 13 14 17 19 21 24 28 30

[0114] (iii)R ，R ，R ，R ，R ，R ，R ，R ，R 和R 在每个单个出现时彼此独立地代表选自以下的基团：氢，(C1-C6)-烷基，(C3-C6)-环烷基，4-～6-元杂环烷基，苯基和5-或者6-元杂芳基，在其中(C3-C6)-环烷基，4-～6-元杂环烷基，苯基和5-或者6-元杂芳基本身可以在各自情况下被氟，氯，溴，氰基，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C4)-烷氧基，三氟甲氧基，氧代，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代最多三次，

[0115] 和

[0116] (C1-C6)-烷基可以被氟，氯，溴，氰基，羟基，三氟甲氧基，(C1-C4)-烷氧基，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基，(C1-C4)-烷氧基羰基，(C3-C6)-环烷基，4-～6-元杂环烷基，苯基和/或5-或者6-元杂芳基以相同的或者不同的方式取代一次-三次，

[0117] (iv)R12，R15，R16，R18，R20，R22，R23和R31在每个单个出现时彼此独立地代表选自氢和(C1-C6)-烷基的基团，

[0118] 在其中(C1-C6)-烷基可以被氟，氯，溴，氰基，羟基，三氟甲氧基，(C1-C4)-烷氧基，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代一次或者两次，

[0119] 和/或在其中

[0120] (v)在每一种情况下与它们连接的原子配对的R11和R12，R14和R15，R16和R17，R1819 20 21 21 22 23 24 30 31
和R ，R 和R ，R 和R ，R 和R 以及R 和R 可以形成5-或者6-元杂环烷基环，其可
以被氟，氯，溴，氰基，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C4)-烷氧基，三氟甲氧基，氧代，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代一次或者两次，

[0121] 和

[0122] J 表示O或者S，

[0123] 和

[0124] R3 代表氢或者甲基，

[0125] 和它们的盐，溶剂化物和盐的溶剂化物。

[0126] 在本发明的上下文中优选的具有式(I)的化合物还是下列那些，其中

[0127] R1 代表具有下式的杂芳基基团

[0128]

[0129] 在其中

[0130] * 表示与二氢吡唑啉酮环的连接点，

[0131] A 在每个单个出现时表示C-R4或者N，在其中至多一个环成员A代表N，在其中[0132] R4 在每个单个情况下彼此独立地代表氢或者选自以下的基团：氟，氯，溴，氰基，硝基，(C1-C6)-烷基，羟基，(C1-C6)-烷氧基，三氟甲氧基，氨基，一-(C1-C6)-烷基氨基，二-(C1-C6)-烷基氨基，羟基羰基和(C1-C6)-烷氧基羰基，

[0133] 在其中提到的(C1-C6)-烷基基团本身可以被氟，羟基， 三氟甲氧基，(C1-C4)-烷氧基，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代最多三次，

[0134] 和

[0135] E 表示O或者S，

[0136] R2 代表具有下式的杂芳基基团

[0137]

[0138] 在其中

[0139] # 表示与二氢吡唑啉酮环的连接点，

[0140] G 在每一种情况下表示C-R6或者N，在其中两个环成员G的不多于一个代表N，在其中

[0141] R6 在每个单个情况下，彼此独立地代表氢或者选自以下的取代基：氟，氯，溴，氰基，(C1-C6)-烷基，(C3-C6)-环烷基，4-～6-元杂环烷基，苯基，5-或者6-元杂芳基，-C(＝10 11 12 16 17 18 19 28 30 31
O)-OR ，-C(＝O)-NR R ，-NR -C(＝O)-R ，-NR -C(＝O)-ONR ，-OR 和-NR R ，在其中

[0142] (i) (C1-C6)-烷基本身可以被选自以下的基团以相同的或者不同的方式取代一次-三次：氟，(C3-C6)-环烷基，4-～6-元杂环烷基，5-或者6-元杂芳基，-C(＝
10 11 12 16 17 18 19 28 30 31
O)-OR ，-C(＝O)-NR R ，-NR -C(＝O)-R ，-NR -C(＝O)-OR ，-OR 和-NR R ，

[0143] 在其中最后提到的环烷基，杂环烷基和杂芳基基团本身可以在每一种情况下被氟，氯，溴，氰基，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C4)-烷氧基，三氟甲氧基，氧代，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代最多两次，

[0144] (ii) (C3-C6)-环烷基，4-～6-元杂环烷基，苯基和5-或者6-元杂芳基本身可以在每一种情况下被氟，氯，溴，氰基，(C1-C6)-烷基，羟基，(C1-C4)-烷氧基，三氟甲氧基，氧代，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代一次或者两次，

[0145] 在其中(C1-C6)-烷基本身可以被氟，羟基，(C1-C4)-烷氧基，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基，(C1-C4)-烷氧基羰基，(C3-C6)-环烷基，4-～6-元杂环烷基，苯基和/或5-或者6-元杂芳基以相同的或者不同的方式取代最多三次，

[0146] (iii)R10，R11，R17，R19，R28和R30对于每个单个出现时彼此独立地代表选自以下的基团：氢，(C1-C6)-烷基，(C3-C6)-环烷基和4-～6-元杂环烷基，在其中

[0147] (C3-C6)-环烷基和4-～6-元杂环烷基本身可以在每一种情况下被氟，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C4)-烷氧基，氧代，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代最多三次，

[0148] 和

[0149] (C1-C6)-烷基本身可以被氟，羟基，(C1-C4)-烷氧基，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基，(C1-C4)-烷氧基羰基，(C3-C6)-环烷基，4-～6-元杂环烷基，苯基和/或5-或者6-元杂芳基以相同的或者不同的方式取代一次-三次，

[0150] (iv)R12，R16，R18和R31对于每个单个出现时彼此独立地代表选自氢和(C1-C6)-烷基的基团， 在其中(C1-C6)-烷基可以被氟，羟基，(C1-C4)-烷氧基，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代一次或者两次，

[0151] 和/或在其中

[0152] (v) 在各自情况下与它们连接的原子配对的R11和R12，R16和R11，R18和R19以及30 31
R 和R 可以形成5-或者6-元杂环烷基环，其可以被氟，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C4)-烷氧基，氧代，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代一次或者两次，

[0153] 和

[0154] J 表示O或者S，

[0155] 和

[0156] R3 代表氢，

[0157] 和它们的盐，溶剂化物和盐的溶剂化物。

[0158] 在本发明的上下文中特别优选的具有式(I)的化合物是下列那些，其中

[0159] R1 代表具有下式的杂芳基基团

[0160]

[0161] 在其中

[0162] * 表示与二氢吡唑啉酮环的连接点，

[0163] 和4

[0164] R 表示氢，氟，氯，溴，氰基，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟甲基，(C1-C4)-烷氧基，三氟甲氧基，羟基羰基或者(C1-C4)-烷氧基羰基，2

[0165] R 代表具有下式的杂芳基基团

[0166]

[0167] 在其中

[0168] # 表示与二氢吡唑啉酮环的连接点，

[0169] 和6 6A 6B

[0170] R，R 和R 是相同的或者不同的并且彼此独立地表示氢或者选自以下的取代基：氟，氯，溴，氰基，(C1-C6)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C6)-烷氧基，三氟甲氧基，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基，(C1-C4)-烷氧基羰基，4-～6-元杂环烷基，苯基和5-或者6-元杂芳基，在其中

[0171] (C1-C6)-烷基本身可以被羟基，(C1-C4)-烷氧基或者氨基取

[0172] 代

[0173] 和

[0174] 4-～6-元杂环烷基，苯基和5-或者6-元杂芳基本身可以在各自情况下被氟，氯，溴，氰基，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C4)-烷氧基，三氟甲氧基，氧代，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代一次或者两次，

[0175] 和

[0176] R3 代表氢，

[0177] 和它们的盐，溶剂化物和盐的溶剂化物。

[0178] 在本发明的上下文中同样特别优选的具有式(I)的化合物是下列那些，其中

[0179] R1 代表具有下式的杂芳基基团

[0180]

[0181] 在其中

[0182] * 表示与二氢吡唑啉酮环的连接点，

[0183] 和4

[0184] R 表示氢，氟，氯，溴，氰基，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟甲基，(C1-C4)-烷氧基，三氟甲氧基，羟基羰基或者(C1-C4)-烷氧基羰基，2

[0185] R 代表具有下式的杂芳基基团

[0186]

[0187] 在其中

[0188] # 表示与二氢吡唑啉酮环的连接点，

[0189] 和6 6A 6B

[0190] R，R 和R 是相同的或者不同的并且彼此独立地表示氢或者选自以下的取代基：氟，氯，溴，氰基，(C1-C6)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C6)-烷氧基，三氟甲氧基，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基，(C1-C4)-烷氧基羰基和4-～6-元杂环烷基，在其中

[0191] (C1-C6)-烷基本身可以被羟基，(C1-C4)-烷氧基或者氨基取代

[0192] 和

[0193] 4-～6-元杂环烷基本身可以被氟，氰基，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，羟基，(C1-C4)-烷氧基，氧代，氨基，一-(C1-C4)-烷基氨基，二-(C1-C4)-烷基氨基，羟基羰基和/或(C1-C4)-烷氧基羰基以相同的或者不同的方式取代一次或者两次，

[0194] 加3

[0195] R 代表氢，

[0196] 和它们的盐，溶剂化物和盐的溶剂化物。

[0197] 在基团特别组合或者优选组合中详细地给出的基团定义还任意被其他的组合的基团定义替换，不依赖于给出的特别的基团组合。

[0198] 非常特别优选两个或更多以上提到的优选范围的组合。

[0199] 根据本发明具有下式(I)的1，2-二氢吡唑-3-酮衍生物还可以是互变异构的1H-吡唑-5-醇形式(I′)(参见下列方案1)；两种互变异构形式明确地包括在本发明中。

[0200] 方案1

[0201]

[0202] 本发明还提供了制备具有式(I)的化合物的方法，特征在于化合物具有下式(II)的化合物

[0203]

[0204] 其中R1和R3具有以上提到的意思和

[0205] Z1代表甲基或者乙基，

[0206] 在惰性溶剂中，任选在酸存在的条件下，与具有下式(III)的化合物反应

[0207]

[0208] 其中R2具有以上提到的意思，

[0209] 以产生具有下式(IV)的化合物

[0210]

[0211] 其中Z1，R1，R2和R3具有以上提到的意思，

[0212] 其已经在这些反应条件下或者在随后的反应阶段中在碱影响下环化以产生具有式(I)的化合物，

[0213] 和具有式(I)的化合物任选用相应的(i)溶剂和/或(ii)碱或者酸转化成它们的溶剂化物，盐和/或盐的溶剂化物。

[0214] 根据本发明其中R3表示氢的具有式(I)的化合物还可以通过以下方法制备，其中具有下式(V)的化合物

[0215]

[0216] 其中Z1和R1具有以上提到的意思，

[0217] 首先经过与具有下式(VI)的化合物的缩合反应

[0218]

[0219] 其中

[0220] Z2代表甲基或者乙基，

[0221] 以产生具有下式(VII)的化合物

[0222]

[0223] 其中Z1和R1具有以上提到的意思，

[0224] 其然后在酸存在的条件下与具有式(III)的化合物反应以产生具有下式(IV-A)的化合物

[0225]

[0226] 其中Z1，R1和R2具有以上提到的意思，

[0227] 其已经在这些反应条件下或者在随后的反应阶段中在碱影响下环化以产生具有3
式(I)的化合物，在其中R 代表氢。

[0228] 更进一步地根据本发明的化合物还可以任选通过个别取代基的官能团，特别是在1 2
R 和R 下列出的那些的转化，从通过以上方法获得的具有式(I)的化合物开始制备。这些转化通过本领域技术人员已知的常规方法进行并且包括例如反应例如亲核或者亲电取代反应，氧化，还原，氢化，过渡金属-催化的偶联反应，烷基化，酰化，氨基化，酯化，酯裂解，醚化，醚裂解，甲酰胺，磺酰胺，氨基甲酸酯和脲的形成，和临时的保护基的引入和除去。

[0229] 对于方法步骤(II)+(III)→(IV)，(IV)→(I)，(VII)+(III)→(IV-A)和(IV-A)→(I)合适的惰性溶剂特别地是醚，比如乙醚，甲基叔丁基醚，1，2-二甲氧基乙烷，四氢呋喃和二 烷，或者醇，例如甲醇，乙醇，正-丙醇，异-丙醇，正-丁醇和叔-丁醇。优选使用甲醇，乙醇，四氢呋喃或者这些溶剂的混合物。

[0230] 方法步骤(V)+(VI)→(VII)优选在作为溶剂的二甲基甲酰胺中或者在过量(VI)而没有进一步的溶剂存在的条件下进行。反应还可以任选在微波照射下进行。反应通常在+20℃～+150℃，优选在+80℃～+120℃的温度范围发生[还参见J.P.Bazureau等，Synthesis1998，967；同上2001(4)，581]。

[0231] 方法步骤(II)+(III)→(IV)和(VII)+(III)→(IV-A)可以任选有利地添加酸进行。对此常用的无机或者有机酸是合适的，例如氯化氢，乙酸，三氟乙酸，甲磺酸，对-甲苯磺酸或者樟脑-10-磺酸。优选使用乙酸或者特别是樟脑-10-磺酸或者对-甲苯磺酸。

[0232] 本反应(II)+(III)→(IV)通常在从0℃-+100℃，优选+10℃-+50℃的温度范围进行。反应(VII)+(III)→(IVA)通常在从+20℃-+120℃，优选在+50℃-+100℃的温度范围进行。

[0233] 方法程序(II)+(III)→(IV)→(I)和(VII)+(III)→(IV-A)→(I)可以在二阶段反应程序下或者作为一锅反应(Eintopf-Reaktion)进行，没有分别中间阶段(IV)或者(IV-A)的分离。对于后面的变换，在微波照射下组分的反应是特别合适的；这里反应通常在从+50℃-+200℃，优选在+100℃-+180℃的温度范围进行。

[0234] 有时到(I)的环化同样甚至已经分别在(IV)或者(IV-A)的制备期间发生；环化之后可以任选通过就地用碱处理反应混合物完成。

[0235] 对于这种分离环化步骤(IV)→(I)或者(IV-A)→(I)常用的无机或者有机碱作为碱是合适的。这些包括，特别是碱金属氢氧化物，例如氢氧化钠或者氢氧化钾，碱金属或者碱土金属碳酸盐，例如碳酸钠，碳酸钾，碳酸钙或者碳酸铯，碱金属醇化物，例如甲醇钠或者甲醇钾，乙醇钠或者乙醇钾或者丁醇钠或者丁醇钾，或者碱金属氢化物，例如氢化钠。优选使用甲醇钠或者乙醇钠。

[0236] 碱诱导反应(IV)→(I)或者(IV-A)→(I)通常在从0℃-+60℃，优选在0℃-+30℃温度范围进行。

[0237] 所有的方法步骤可以在常压、升压或者降压下(例如从0.5-5巴)进行。通常，应用常压。

[0238] 对于自具有式(V)的化合物羧酸酯的C-酰化，具有式(II)的化合物可以通过来自文献的常规方法制备。具有式(III)，(V)和(VI)的化合物可商购或者由文献已知或者可以类似于在文献中描述的方法 制备。

[0239] 根据本发明的化合物的制备可以通过以下反应方案2说明：

[0240] 方案2

[0241]

[0242] [a)：DMF，16h，+100℃；b)：乙醇，产品目录樟脑-10-磺酸，78℃；c)：NaOEt，乙醇，1h，RT]。

[0243] 根据本发明的化合物显示不可预见的、有价值的药理作用谱。它们因此适合用作治疗和/或预防人和动物身上的疾病的药物。

[0244] 根据本发明的化合物称之为HIF脯氨酰基4-羟化酶的特效抑制剂。

[0245] 在它们的药理学性质基础上，根据本发明的化合物可以用于治疗和/或预防心血管疾病，特别是心功能不全，冠心病，心绞痛，心肌梗死，中风，动脉硬化，自发性高血压，肺动脉高压和恶性高血压和周围动脉阻塞性疾病。

[0246] 根据本发明的化合物还适合于治疗和/或预防血液形成疾病，例如特发性贫血，肾贫血和伴奏肿瘤疾病的贫血(特别是化疗诱发的贫血)，传染病(特别是HIV传染
病)或者另外的炎性疾病，例如类风湿性关节炎。根据本发明的化合物还适合于支持治疗由于失血的贫血，缺铁性贫 血，维生素缺乏症贫血(例如由于维生素B12不足或者由于叶酸缺乏)，细胞减生和再生障碍性贫血或者溶血性贫血，或者适合于支持治疗由于铁利用疾病(铁失利用性贫血)的贫血或者由于其它的内分泌疾病(例如甲状腺功能减退
(hypothyroidosis))的贫血。

[0247] 该化合物还适合于增加血细胞比容，目的是获得用于手术前血自身捐献(autodonation)的血。

[0248] 根据本发明的化合物此外可以用于治疗和/或预防外科手术后与手术有关的局部缺血和其连续症状的情况，特别是关于使用心肺机的心脏介入(例如搭桥手术，心脏瓣膜移植术)，颈动脉介入，主动脉介入和伴有颅骨容量器械打开或者穿透的介入。该化合物还适合于发生外科手术时的一般疗法和/或预防，目的是促进伤口愈合和缩短恢复时间。

[0249] 该化合物还适合于治疗和预防急性和延长性脑缺血状态的连续症状(例如中风，胎儿产时窒息)。

[0250] 该化合物还可以用于治疗和/或预防癌和用于治疗和/或预防在癌治疗过程中发生的健康状况的损害，特别是用细胞抑制剂，抗生素和辐射治疗后。

[0251] 该化合物还适合于治疗和/或预防风湿病类型及其它被视为自身免疫疾病的疾病形式，特别是用于治疗和/或预防在这种疾病的药物治疗过程中发生的健康状况的损害。

[0252] 根据本发明的化合物此外可以用于治疗和/或预防眼病(例如青光眼)，脑病(例如帕金森氏病，阿尔茨海默氏病，痴呆，慢性痛觉)，慢性肾病，肾机能不全和急性肾衰竭和用于敛疮。

[0253] 该化合物还适合于治疗和/或预防一般的身体虚弱，直到恶病质，特别是在更年长年龄程度增加发生的。

[0254] 该化合物还适合于治疗和/或预防性功能障碍。

[0255] 该化合物还适合于治疗和/或预防糖尿病和它的连续症状，例如糖尿病大血管病和微血管病，糖尿病肾病和神经病。

[0256] 根据本发明的化合物还适合于治疗和/或预防纤维变性疾病，例如心，肺和肝的纤维化。

[0257] 特别地，根据本发明的化合物还适合于防治早产儿视网膜病(retinopathiaprematurorum)。

[0258] 本发明还提供了根据本发明的化合物对于治疗和/或预防疾病，特别 是以上提到的疾病的应用。

[0259] 本发明还提供了根据本发明的化合物对于制备用于治疗和/或预防疾病，特别是以上提到的疾病的药物的应用。

[0260] 本发明还提供了使用活性量的至少一种根据本发明的化合物治疗和/或预防疾病，特别是以上提到的疾病的方法。

[0261] 根据本发明的化合物可以单独或者，如需要，与其它的活性化合物结合使用。本发明还提供了包括至少一种根据本发明的化合物和一种或多种进一步的活性物质，特别是用于治疗和/或预防以上提到的疾病的药物。在可以提到的组合中合适的活性物质例如和优选是：ACE抑制剂，血管紧张素II受体拮抗体，β受体阻滞剂，钙拮抗剂，PDE抑制剂，盐皮质激素受体拮抗体，利尿剂，阿斯匹林，铁添加物，维生素B12和叶酸添加物，抑制素，洋地黄叶(地高辛)衍生物，肿瘤化疗药物和抗生素。

[0262] 在本发明优选的实施方案中，根据本发明的化合物与ACE抑制剂，例如和优选依那普利，甲巯丙脯酸(captopril)，赖诺普利，雷米普利，地拉普利，福辛普利，喹那普利(quinoprol)，培哚普利或者群多普利结合服用。

[0263] 在本发明优选的实施方案中，根据本发明的化合物与血管紧张素AII拮抗剂，例如和优选洛沙坦，坎德沙坦，缬沙坦，替米沙坦或者embusartan结合服用。

[0264] 在本发明优选的实施方案中，根据本发明的化合物与β受体阻滞剂，例如和优选萘洛尔，阿替洛尔，噻吗洛尔，吲哚洛尔，阿普洛尔，氧烯洛尔，喷布洛尔，布拉洛尔，美替洛尔，纳多洛尔，卡拉洛尔，索他洛尔，美托洛尔，倍他洛尔，塞利洛尔，比索洛尔，卡替洛尔，艾司洛尔，拉贝洛尔，卡维地洛，阿达洛尔，兰地洛尔，萘必洛尔，依泮洛尔或者布新洛尔结合服用。

[0265] 在本发明优选的实施方案中，根据本发明的化合物与钙拮抗剂，例如和优选硝苯地平，氨氧地平，维拉帕米或者地尔硫草结合服用。

[0266] 在本发明优选的实施方案中，根据本发明的化合物与磷酸二酯酶(PDE)抑制剂，例如和优选米力农，氨利酮，匹莫苯(pimobendan)，西洛他唑(cilostazol)，西登那菲(sildenafil)，伐地那非(vardenafil)和他达拉非(tadalafil)结合服用。

[0267] 在本发明优选的实施方案中，根据本发明的化合物与盐皮质激素受体拮抗体，例如和优选类甾醇螺旋内酯，依匹乐酮(eplerenone)，坎利酮或者坎利酸钾结合服用。

[0268] 在本发明优选的实施方案中根据本发明的化合物与利尿剂，例如和优选呋喃苯胺酸，丁尿胺，托拉塞米(torsemide)，苄氟噻嗪，氯噻嗪，双氢氯噻嗪(hydrochlorthiazide)，双氢氟噻嗪，甲氯噻嗪，多噻嗪，三氯甲噻嗪，氯噻酮，吲达帕胺(indapamide)，美托拉宗，喹乙宗，乙酰唑胺，二氯磺胺，甲醋唑胺，甘油，异山梨糖醇，甘露糖醇，氨氯吡脒或者氨苯喋啶结合服用。

[0269] 在本发明优选的实施方案中，根据本发明的化合物与来自抑制素类的HMG-CoA还原酶抑制剂，例如和优选洛伐他汀，斯伐他汀，普伐他汀，氟伐他汀，阿托伐他汀，瑞舒伐他汀，西立伐他汀或者匹伐他汀结合服用。

[0270] 在本发明优选的实施方案中，根据本发明的化合物与例如和优选来自铂配合物的肿瘤化疗药物，例如顺氯氨铂和碳铂，烷基化剂，例如环磷酰胺和苯丁酸氮芥，抗代谢物，例如5-氟尿嘧啶和氨甲喋呤，局部异构酶抑制剂，例如鬼臼亚乙苷和喜树碱，抗生素，例如亚德利亚霉素和红必霉素，或者激酶抑制剂，例如索拉非尼(sorafenib)和舒尼替尼(sunitinib)结合服用。

[0271] 在本发明优选的实施方案中，根据本发明的化合物与抗菌素，例如和优选青霉素，头孢菌素或者2-羟基喹啉，例如环丙沙星和莫西沙星结合服用。

[0272] 本发明还提供了包含至少一种根据本发明的化合物，通常连同一种或多种惰性的、无毒的、药学合适的辅助物质的药物，和其对于以上提到的目的应用。

[0273] 根据本发明的化合物可以全身和/或局部地起作用。它们可以为此目的以合适的方式，例如口，肠胃外，肺，鼻，舌下，舌，颊，直肠，真皮，透过皮肤，结膜，耳或者作为植入物或者支架(stent)服用。

[0274] 对于这些给药途径根据本发明的化合物可以以合适的服用形式服用。

[0275] 根据现有技术起作用，快速地和/或以改进方式释放根据本发明的化合物并且包含以结晶的和/或无定形的和/或溶解的形式的根据本发明的 化合物的服用形式适合于口服，例如片剂(无涂层的或者糖衣片剂，例如抗胃液或者以延迟的方式溶解或者不溶的的并且控制器解除根据本发明的化合物的涂层)，片剂或者薄膜/淀粉薄膜，在口腔中快速地分解的薄膜/冻干物或者胶囊(例如硬的或者软的胶囊)，糖衣片，颗粒，小药丸，粉末，乳剂，悬浮液，气雾剂或者溶液。

[0276] 肠胃外投药法可以用绕过吸收步骤(例如静脉内，动脉内，心内，脊柱内或者腰内)或者同时包括吸收(例如肌内注射，皮下，皮内，经皮或者腹膜内)实施。适合于肠胃外投药法的服用形式特别是以溶液，悬浮液，乳剂，冻干物或者无菌粉末形式的注射和输注制剂。

[0277] 对于另一种给药途径例如吸入剂型(特别是吸入剂和雾化剂)，滴鼻剂，溶液或者喷雾，片剂，用于舌，舌下或者面颊服用的薄膜/淀粉薄膜或者胶囊，栓剂，耳或者眼制剂，阴道胶囊，水悬浮液(洗液，振荡混合物)，亲脂性悬浮液，药膏，乳膏，经皮吸收剂型(例如碎片)，乳剂，糊剂，泡沫，扑粉，植入物或者支架是合适的。

[0278] 优选口服和肠胃外投药法，特别是口服和静脉内服用。

[0279] 根据本发明的化合物可以转化为提到的服用形式。这可以以本身已知的的方式通过与惰性的、无毒的、药学合适的辅助物质混合实施。这些辅助物质特别地包括载体物质(例如微晶纤维素，乳糖，甘露糖醇)，溶剂(例如液体聚乙二醇)，乳化剂和分散或者湿润剂(例如十二烷基硫酸钠，聚氧乙烯失水山梨糖醇油酸酯)，粘合剂(例如聚乙烯吡咯烷酮)，合成和天然聚合物(例如白蛋白)，稳定剂(例如抗氧化剂，例如抗坏血酸)，着色剂(例如无机颜料，例如氧化铁)和香味和/或气味改进剂。

[0280] 通常，已经证明在肠胃外投药法情况下服用从大约0.001-1mg/kg，优选大约0.01-0.5mg/kg体重的量以实现有效的结果是有利的。在口服情况下剂量是大约
0.01-100mg/kg，优选大约0.01-20mg/kg和非常特别优选0.1-10mg/kg体重。

[0281] 然而也许必须偏离提到的量，并且特别地取决于体重，给药途径，个人对于活性物质的行为，制剂的性质和服用发生的时点或者间隔。因此有时也许服用小于以上提到的最低量足够了，而在其它情况下必须超过提到的上限。在服用相对大量的情况下，也许全天将这些分成几个单独的剂量是适当的。

[0282] 以下应用实施例解释本发明。本发明不局限于该实施例。

[0283] 在以下试验和实施例中百分比数据是重量百分率，除非另有说明；份是重量份。在所有情况下液体/液体溶液的溶剂比，稀释比和浓度数据涉及体积。A.实施例

[0284] 缩写和缩略词：

[0285] aq. 水溶液

[0286] cat. 催化的

[0287] d 天

[0288] DCI 直接化学电离(在MS中)

[0289] DMF 二甲基甲酰胺

[0290] DMSO 二甲基亚砜

[0291] of th. 理论的(产率)

[0292] EI 电子碰撞电离(在MS中)

[0293] ESI 电喷射离子化(在MS中)

[0294] Et 乙基

[0295] GC-MS 气相色谱质谱联用

[0296] h 小时

[0297] HPLC 高压高效液相色谱

[0298] conc. 浓

[0299] LC-MS 液相色谱质谱联用

[0300] Meth. 方法

[0301] min 分钟

[0302] MS 质谱

[0303] NMR 核磁共振谱

[0304] Rt 停留时间(在HPLC中)

[0305] RT 室温

[0306] TFA 三氟乙酸

[0307] THF 氢呋喃

[0308] LC-MS，GC-MS和HPLC方法：

[0309] 方法1(LC-MS)：

[0310] 仪 器：具 有HPLC Agilent Series1100 的 Micromass Platform LCZ；柱：Thermo Hypersil GOLD3μ，20mm×4mm；洗脱液A：1l水+0.5ml50％浓度甲酸，洗脱液
B：1l乙腈+0.5ml50％浓度甲酸；梯度：0.0min100％A→0.2min100％A→2.9min30％
A→3.1min10％A→5.5min10％A；烘箱：50℃；流速：0.8ml/min；UV检测：210nm。

[0311] 方法2(LC-MS)：

[0312] 仪器 类 型MS：Micromass ZQ；仪 器 类型HPLC：HP1100Series；UV DAD；柱：Phenomenex Gemini3μ30mm×3.00mm；洗脱液A：1l水+0.5ml50％浓度甲酸，洗脱液
B：1l乙腈+0.5ml50％浓度甲酸；梯度：0.0min90％A→2.5min30％A→3.0min5％
A→4.5min5％A；流速：0.0min1ml/min→2.5min/3.0min/4.5min2ml/min；烘箱：50℃；UV检测：210nm。

[0313] 方法3(LC-MS)：

[0314] 仪 器：具 有 HPLC Agilent Series1100 的 Micromass Quattro LCZ；柱：Phenomenex Synergi2μHydro-RP Mercury20mm×4mm；洗脱液A：1l水+0.5ml50％浓
度甲酸，洗脱液B：1l乙腈+0.5ml50％浓度甲酸；梯度：0.0min90％A→2.5min30％
A→3.0min5％A→4.5min5％A；流速：0.0min1ml/min→2.5min/3.0min/4.5min2ml/min；
烘箱：50℃；UV检测：208-400nm。

[0315] 方法4(LC-MS)：

[0316] 仪 器类 型MS：Micromass ZQ；仪 器 类 型HPLC：Waters Alliance2795；柱：Phenomenex Synergi2μHydro-RP Mercury20mm×4mm；洗脱液A：1l水+0.5ml50％浓
度甲酸，洗脱液B：1l乙腈+0.5ml50％浓度甲酸；梯度：0.0min90％A→2.5min30％
A→3.0min5％A→4.5min5％A；流速：0.0min1ml/min→2.5min/3.0min/4.5min2ml/min；
烘箱：50℃；UV检测：210nm。

[0317] 方法5(LC-MS)：

[0318] 仪器 类 型MS：Micromass ZQ；仪 器 类型HPLC：HP1100Series；UV DAD；柱：Phenomenex Synergi2μHydro-RP Mercury20mm×4mm；洗脱液A：1l水+0.5ml50％浓
度甲酸，洗脱液B：1l乙腈+0.5ml50％浓度甲酸；梯度：0.0min90％A→2.5min30％
A→3.0min5％A→4.5min5％A；流速：0.0min1ml/min→2.5min/3.0min/4.5min2ml/min；
烘箱：50℃；UV检测：210nm。

[0319] 方法6(LC-MS)：

[0320] 仪器类型MS：Waters ZQ；仪器类型HPLC：Agilent1100Series；UV DAD；柱：Thermo Hypersil GOLD3μ20mm×4mm；洗脱液A：1l水+0.5ml50％浓度甲酸，洗脱液
B：1l乙腈+0.5ml50％浓度甲酸；梯度：0.0min100％A→3.0min10％A→4.0min10％
A→4.1min100％A；流速：2.5ml/min；烘箱：55℃；UV检测：210nm。

[0321] 方法7(LC-MS)：

[0322] 仪 器类 型MS：Micromass ZQ；仪 器 类 型HPLC：Waters Alliance2795；柱：Phenomenex synergi2.5μMAX-RP100A Mercury20mm×4mm；洗脱液A：1l水+0.5ml50％
浓度甲酸，洗脱液B：1l乙腈+0.5ml50％浓度甲酸；梯度：0.0min90％A→0.1min90％
A→3.0min5％A→4.0min5％A→4.01min90％A；流速：2ml/min；烘箱：50℃；UV检测：
210nm。

[0323] 方法8(LC-MS)：

[0324] 仪器：具有HPLC Agilent Series1100的Micromass Quattro Micro MS；柱：Thermo Hypersil GOLD3μ20mm×4mm；洗脱液A：1l水+0.5ml50％浓度甲酸，洗脱液
B：1l乙腈+0.5ml50％浓度甲酸；梯度：0.0min100％A→3.0min10％A→4.0min10％
A→4.01min100％A(流速2.5ml/min)→5.00min100％A；烘箱：50℃；流速：2ml/min；UV检测：210nm。

[0325] 方法9(LC-MS)：

[0326] 仪 器：具 有 HPLC Agilent Series1100 的 Micromass Quattro LCZ；柱：Phenomenex Synergi2.5μMAX-RP100A Mercury20mm×4mm；洗脱液A：1l水+0.5ml50％
浓度甲酸，洗脱液B：1l乙腈+0.5ml50％浓度甲酸；梯度：0.0min90％A→0.1min90％
A→3.0min5％A→4.0min5％A→4.1min90％A；流速：2ml/min；烘箱：50℃；UV检测：
208-400nm。

[0327] 方法10(LC-MS)：

[0328] 仪器：具有Waters UPLC Acquity的Micromass quattropremier；柱：Thermo Hypersil GOLD1.9μ50mm×1mm；洗脱液A：1l水+0.5ml50％浓度甲酸，洗脱液B：1l乙腈+0.5ml50％浓度甲酸；梯度：0.0min90％A→0.1min90％A→1.5min10％A→2.2min10％A；流速：0.33ml/min；烘箱：50℃；UV检测：210nm。

[0329] 方法11(HPLC)：

[0330] 仪器：具有DAD检测的HP1100Series；柱：Kromasil100RP-18，60mm×2.1mm，3.5μm；洗脱液A：5ml HClO4(70％浓度)/升水，洗脱液B：乙腈；梯度：0min2％
B→0.5min2％B→4.5min90％B→6.5min90％B→6.7min2％B→7.5min2％B；流速：
0.75ml/min；柱温：30℃；UV检测：210nm。

[0331] 方法12(HPLC)：

[0332] 柱：Kromasil100C185μm，250mm×20mm；洗脱液A：0.2％浓度三氟乙酸，洗脱液B：乙腈；梯度：0.0min95％A→10min5％A→15min5％A→15.1min95％A→20min95％A；
烘箱：30℃；流速：25ml/min；UV检测：240nm。

[0333] 方法13(LC-MS)：

[0334] 仪 器：具 有 HPLC Agilent Series1100 的 Micromass Quattro LCZ；柱：Phenomenex Onyx Monolithic C18，100mm×3mm；洗脱液A：1l水+0.5ml50％浓度甲酸，洗脱液B：1l乙腈+0.5ml50％浓度甲酸；梯 度：0.0min90％A→2min65％A→4.5min5％
A→6min5％A；流速：2ml/min；烘箱：40℃；UV检测：208-400nm。

[0335] 方法14(GC-MS)：

[0336] 仪器：Micromass GCT，GC6890；柱：Restek RTX-35，15m×200μm×0.33μm；用氦恒定流速：0.88ml/min；烘箱：70℃；进口：250℃；梯度：70℃，30℃/min→310℃(维持3min)。

[0337] 方法15(制备HPLC)：

[0338] 柱：Chromatorex C185μm，250mm×20mm；洗脱液A：含水的0.1％浓度的二异丙基乙胺溶液，洗脱液B：乙腈；梯度：0.0min60％A→4min60％A；烘箱：30℃；流速：25ml/min；UV检测：260nm。

[0339] 方法16(制备LC-MS)：

[0340] 仪器MS：Waters ZQ2000；仪器HPLC：Agilent1100，2-柱周路(Schaltung)；自动取样器：HTC PAL；柱：YMC-ODS-AQ，50mm×4.6mm，3.0μm；洗脱液A：水+0.1％甲酸，洗脱液B：乙腈+0.1％甲酸；梯度：0.0min100％A→0.2min95％A→1.8min25％A→1.9min10％A→2.0min5％A→3.2min5％A→3.21min100％A→3.35min100％A；烘箱：40℃；流速：3.0ml/min；UV检测：210nm。

[0341] 方法17(制备HPLC)：

[0342] 柱：Kromasil100C185μm，250mm×20mm；洗脱液A：含水的0.1％浓度的二异丙基乙胺溶液，洗脱液B：乙腈；梯度：0.0min95％A→10min65％A→10.1min95％
A→15min95％A；烘箱：40℃；流速：25ml/min；UV检测：210nm。

[0343] 初始化合物和中间体：

[0344] 实施例1A

[0345] 2-肼基-4-甲基吡啶

[0346]

[0347] 开始向40ml2-乙氧基乙醇中加入3.33g(30.0mmol)2-氟-4-甲基吡啶，向溶液中添加14.6ml(15.0g，300mmol)水合肼并且混合物在沸点(150℃浴温)搅拌16h。此后，反应溶液在旋转蒸发器上浓缩，残余物添加到100ml水中并且混合物用乙酸乙酯提取(三次，每次100ml)。合并的有机相通过硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。获得的残余物在真空中干燥。

[0348] 产率：1.90g(理论的51％)

[0349] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 7.83(d，1H)，7.22(s，1H)，6.51(s，1H)，6.38(d，1H)，4.04(s，2H)，2.17(s，3H).

[0350] LC-MS(方法1)：Rt＝0.80min；MS(ESIpos)：m/z＝124[M+H]+.

[0351] 实施例2A

[0352] 3-(二甲基氨基)-2-[5-(三氟甲基)-1，3，4-噻二唑-2-基]丙烯酸甲基酯

[0353]

[0354] 3.05g(13.5mmol)5-(三氟甲基)-1，3，4-噻二唑-2-基乙酸乙酯[对于制备参见DE4240168-A1]在100℃下在6.9ml(40.5mmol)二甲基甲酰胺二乙基缩醛中加热过夜。冷却后，混合物浓缩并且残余物通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度)。

[0355] 产率：2.8g(理论的74％)1

[0356] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝8.28(s，1H)，3.74(s，3H)，3.32(s，6H).+

[0357] LC-MS(方法4)：Rt＝1.88min；MS(ESIpos)：m/z＝282[M+H].

[0358] 实施例3A

[0359] 3-(二甲基氨基)-2-(1H-1，2，3-三唑-1-基)丙烯酸乙基酯

[0360]

[0361] 从1.00g(6.45mmol)2-(1H-1，2，3-三唑-1-基)乙酸乙酯开始类似于2A进行标题化合物的制备。

[0362] 产率：1.4g(理论的100％)

[0363] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.10(d，1H)，7.78(d，1H)，7.65(s，1H)，4.03(q，2H)，3.06(br.s，3H)，2.10(br.s，3H)，1.12(t，3H).

[0364] LC-MS(方法5)：Rt＝1.40min；MS(ESIpos)：m/z＝211[M+H]+.

[0365] 实施例4A

[0366] (6-肼基吡啶-3-基)甲醇

[0367]

[0368] 开 始 向746ml(767.1g，15.3mol)水 合 肼 中 加 入220.0g(1.5mol)(6- 氯 吡啶-3-基)甲醇[Evans等，Organic Letters2001，19，3009-3012]并且混合物在150℃浴温下搅拌5h。反应混合物在真空中浓缩，残余物在500ml水中吸收并且添加86.0g(1.5mol)氢氧化钾。混合物搅拌15min，然后在旋转蒸发器上几乎完全地除去水并且若干次用甲苯共沸蒸馏出水的残余物。在乙醇中搅拌油状残余物，混合物冷却到大约10℃，滤掉已经沉淀析出的氯化钾，滤液浓缩，乙醚添加到残余物中并且搅拌混合物。最后，滤掉产物，残余物在过滤器上用乙醚洗涤并且在真空中干燥晶体。

[0369] 产率：149.0g(理论的68％)

[0370] LC-MS(方法1)：Rt＝0.46min；MS(ESIpos)：m/z＝140[M+H]+；

[0371] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 7.91(d，1H)，7.40(dd，1H)，7.29(s，1H)，6.66(d，1H)，4.94(br.s，1H)，4.34-4.28(m，2H)，4.04(br.s，2H).

[0372] 实施例5A

[0373] 1-(6-肼基吡啶-3-基)-N-甲基甲胺

[0374]

[0375] 开 始 向1.5ml(1.6g，31.9mmol)水 合 肼 中 加 入1.0g(6.4mmol)1-(6- 氯 吡啶-3-基)-N-甲基甲胺[对于制备看EP0556684-A1]并且混合物在沸点在150℃浴温下搅拌12h。浓缩冷却的反应溶液并且残余物在真空中干燥。获得1.1g标题化合物，其没有进一步提纯地使用。

[0376] LC-MS(方法1)：Rt＝0.52min；MS(ESIpos)：m/z＝153[M+H]+.

[0377] 实施例6A

[0378] 6-肼基烟酸

[0379]

[0380] 开始向10ml乙醇中加入5.0g(31.7mmol)6-氯烟酸和30.9ml(31.8g，634.7mmol)水合肼并且混合物在沸点在100℃浴温下搅拌16h。在旋转蒸发器上蒸馏出溶剂和过量水合肼，残余物在水中吸收，然后添加1.8g(31.7mmol)氢氧化钾并且混合物搅拌15min。在旋转蒸发器上完全除去溶剂，残余物在真空中干燥并且获得7.5g粗产物，其原样地进一步反应。

[0381] LC-MS(方法1)：Rt＝0.48min；MS(ESIpos)：m/z＝154[M+H]+；

[0382] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.49(d，1H)，7.89(br.s，1H)，7.84(dd， 1H)，6.63(d，1H)，5.37(br.s，2H).

[0383] 实施例7A

[0384] 4-氯-6-肼基嘧啶

[0385]

[0386] 在RT下向20.0g(134.3mmol)4，6-二氯嘧啶在300ml乙醇中的溶液中滴加11.8ml(12.1g，241.6mmol)水合肼，同时搅拌。在水合肼的计量加入期间如果发生溶液混浊，进一步添加乙醇(大约400ml)。随后在RT下反应溶液搅拌12h。为了后处理，滤掉已经沉淀析出的固体，残余物在过滤器上每次用150ml水洗涤两次和每次用100ml乙醚洗涤两次并且产物在真空中干燥。由浓缩母液获得进一步的结晶的产物组分。产率：16.8g(理论的87％)

[0387] LC-MS(方法1)：Rt＝1.17min；MS(ESIpos)：m/z＝145[M+H]+；

[0388] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.81(s，1H)，8.17(br.s，1H)，6.75(s，1H)，4.48(br.s，2H).

[0389] 实施例8A

[0390] 4-肼基-6-哌啶-1-基嘧啶

[0391]

[0392] 阶段a)：4-氯-6-哌啶-1-基嘧啶

[0393]

[0394] 10.0g(67.1mmol)4，6-二氯嘧啶和5.7g(67.1mmol)哌啶在100ml水中的混合物在115℃浴温下搅拌16h。冷却到RT后，滤掉沉淀，用水洗涤并且在真空中干燥。

[0395] 产率：6.4g(理论的47％)+

[0396] LC-MS(方法4)：Rt＝2.16min；MS(ESIpos)：m/z＝198[M+H] ；1

[0397] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.29(s，1H)，6.92(s，1H)，3.65-3.58(m，4H)，1.66-1.62(m，2H)，1.60-1.48(m，4H).

[0398] 阶段b)：4-肼基-6-哌啶-1-基嘧啶

[0399]

[0400] 在RT下向6.0g(30.4mmol)4-氯-6-哌啶-1-基嘧啶在50ml乙醇中的溶液中滴加17.7ml(18.2g，364.2mmol)水合肼，同时搅拌。随后在80℃下反应溶液搅拌16h。为了后处理，混合物在真空中浓缩，残余物在水中搅拌，滤掉已经沉淀析出的固体，残余物在过滤器上每次用150ml水洗涤两次和每次用100ml乙醚洗涤两次并且产物在真空中干燥。

[0401] 产率：4.0g(理论的69％)

[0402] LC-MS(方法1)：Rt＝2.06min；MS(ESIpos)：m/z＝194[M+H]+；

[0403] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 7.91(s，1H)，7.54(br.s，1H)，5.89(s， 1H)，4.11(br.s，2H)，3.50-3.47(m，4H)，1.61-1.58(m，2H)，1.51-1.46(m，4H).

[0404] 实施例9A

[0405] 2-肼基-5-(甲磺酰)吡啶

[0406]

[0407] 向 在15ml 乙 醇 中 的2.0g(8.5mmol)2，5-双 (甲 磺 酰) 吡 啶[Woods 等，J.Heterocycl.Chem.1984，21，97-101]中添加1.7ml(1.7g，34.0mmol)水合肼并且混合物在回流下搅拌4h。为了后处理，反应溶液冷却到15℃，滤掉已经沉淀析出的固体，在过滤器上的残余物用乙醇和乙醚洗涤并且产物在真空中干燥。

[0408] 产率：1.4g(理论的89％)

[0409] LC-MS(方法1)：Rt＝0.51min；MS(ESIpos)：m/z＝188[M+H]+；

[0410] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.56(s，1H)，8.38(d，1H)，7.81(dd，1H)，6.79(d，1H)，4.42(s，2H)，3.11(s，3H).

[0411] 实施例10A

[0412] 5-溴-2-肼基吡啶

[0413]

[0414] 在RT下向1.8g(9.5mmol)5-溴-2-氯吡啶在25ml乙醇中的溶液中添加9.3ml(9.5g，190.2mmol)水合肼，同时搅拌，并且混合物然后在90℃下搅拌46h。反应混合物在真空中浓缩后，残余物在水中搅拌并且滤掉固体，用水和乙醚洗涤并且在真空中干燥。

[0415] 产率：0.8g(理论的44％)

[0416] LC-MS(方法8)：Rt＝0.50min；MS(ESIpos)：m/z＝188[M+H]+；

[0417] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.02(d，1H)，7.66(s，1H)，7.58(dd，1H)，6.69(d，1H)，4.16(s，2H).

[0418] 实施例11A

[0419] 1-(6-肼基嘧啶-4-基)氮杂环丁-3-醇

[0420]

[0421] 阶段a)：1-(6-氯嘧啶-4-基)氮杂环丁-3-醇

[0422]

[0423] 开始向140ml水中加入7.2g(48.7mmol)2，4-二氯嘧啶。添加5.3g(48.7mmol)3-羟基氮杂环丁烷盐酸盐和48.7ml1N氢氧化钠溶液并且混合物在90℃下加热72h(2，4-二氯嘧啶是可检测挥发性的并以结晶形式在冷凝器上沉淀)。在真空中除去溶剂并且干燥残余物以产生10.4g粗产物，其没有进一步提纯地反应。

[0424] LC-MS(方法10)：Rt＝0.36min；MS(ESIpos)：m/z＝186[M+H]+；

[0425] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.29(s，1H)，6.50(s，1H)，4.63-4.57(m，1H)，4.26(t，2H)，3.82-3.75(m，2H).

[0426] 阶段b)：1-(6-肼基嘧啶-4-基)氮杂环丁-3-醇

[0427]

[0428] 开始向10ml乙醇和10ml THF的混合物中加入960mg(5.2mmol)1-(6-氯嘧啶-4-基)氮杂环丁-3-醇和2.5ml(51.7mmol)水合肼。反应在130℃下在单一模式微波
(CEM Explorer)中进行1h。混合物浓缩至液体原始体积的大约20-50％并且在RT下放置静止48h。由形成的固体滗析掉上清液并且固体每次用1.5ml冷的乙醇洗涤三次。它在高度真空下干燥。

[0429] 产率：300mg(理论的32％)

[0430] LC-MS(方法8)：Rt＝0.23min；MS(ESIpos)：m/z＝182[M+H]+；

[0431] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 7.88(s，1H)，7.63(s，1H)，5.68(br.s，1H)，5.52(s，1H)，4.55(br.s，1H)，4.18-4.06(m，4H)，3.65-3.60(m，2H).

[0432] 实施例12A

[0433] 5-(2，2-二甲基丙氧基)-2-肼基吡啶

[0434]

[0435] 阶段a)：2-氯-5-(2，2-二甲基丙氧基)吡啶

[0436]

[0437] 5.2g(40.0mmol)6-氯吡啶-3-醇，11.9g(60.0mmol)1-碘-2，2-二甲基丙烷，19.6g(60.0mmol)碳酸铯和120ml二乙二醇二甲醚被分成一样大小的五份并且按份在单一模式微波(CEM Explorer)中在160℃下反应4h。此后，合并获得的五份反应混合物，滤掉固体和用二乙二醇二甲醚洗涤并且合并滤液和洗出溶液。除去大部分溶剂并且向该浓溶液(大约50ml)中添加300ml水。混合物搅拌30min并且滤掉获得的固体，用水洗涤一次和在高度真空下干燥。

[0438] 产率：7.0g(理论的88％)

[0439] LC-MS(方法8)：Rt＝2.47min；MS(ESIpos)：m/z＝200[M+H]+；

[0440] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ ＝ 8.05(d，1H)，7.25-7.15(m，2H)，3.61(s，2H)，1.03(s，9H).

[0441] 阶段b)：5-(2，2-二甲基丙氧基)-2-肼基吡啶

[0442]

[0443] 6.2g(30.8mmol)2-氯-5-(2，2-二甲基丙氧基)吡啶连同60ml(1.2mol)水合肼被分成相等大小的四份并且向每份中添加10ml乙醇。在各自情况下每份在170℃(200瓦)下在单一模式微波(CEM Explorer)中反应12h。此后，合并四份混合物并且除去溶剂。残余物在乙酸乙酯中吸收并且在各自情况下混合物用饱和的碳酸氢钠溶液和饱和的氯化钠溶液洗涤一次。混合物通过硫酸镁干燥并且在真空中除去溶剂。

[0444] 产率：6.0g(理论的76％)

[0445] LC-MS(方法8)：Rt＝1.28min；MS(ESIpos)：m/z＝196[M+H]+；

[0446] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ＝7.84(s，1H)，7.17(dd，1H)，6.68(d，1H)，5.54(br.s，1H)，3.80(br.s，2H)，3.56(s，2H)，1.02(s，9H).

[0447] 实施例13A

[0448] 2-氯-5-(甲氧基甲基)吡啶

[0449]

[0450] 2.6g(23.0mmol)叔-丁醇钾溶于50mlTHF。添加3.0g(20.9mmol)(6-氯吡啶-3-基)甲醇并且混合物在RT下搅拌15min。然后添加4.4g(31.3mmol)碘甲烷并且混
合物搅拌大约30min直到轻微放热反应已经减退。除去溶剂，残余物在二氯甲烷中吸收并且混合物用水洗涤两次。混合物通过硫酸镁干燥并且浓缩，残余物通过硅胶通过柱层析提纯(Biotage色谱仪，流动相：环己烷/乙酸乙酯85∶15)。

[0451] 产率：2.2g(理论的68％)+

[0452] LC-MS(方法1)：Rt＝2.62min；MS(ESIpos)：m/z＝158[M+H] ；1

[0453] H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ ＝ 8.34(d，1H)，7.65(dd，1H)，7.32(d，1H)，4.45(s，2H)，3.41(s，3H).

[0454] 实施例14A

[0455] 2-溴-4，5-二甲基吡啶

[0456]

[0457] 开始向500ml正己烷中加入71.3g(0.8mol)2-(二甲基氨基)-乙醇并且混合物冷却到0℃。缓慢添加1.0升(1.6mol)正-丁基锂溶液(在正己烷中1.6M)并且混合物在0℃下搅拌15min。然后滴加17.9g (166.7mmol)3，4-二甲基吡啶在500ml正己烷中的溶液并且混合物在0℃下搅拌1h。它随后冷却到-78℃并且添加331.7g(1.0mol)四溴甲烷在
1.0升THF中的溶液。反应混合物随后在-78℃下搅拌1h并且此后使其能够暖到RT。它再次冷却到0℃并且缓慢滴加1.5升水。分离相并且有机相用水洗涤，通过硫酸镁干燥并且在真空中浓缩。残余物首先通过大约1kg硅胶预提纯(流动相：环己烷/乙酸乙酯9∶1，然后7∶3)。合并包含产物的组分并且在真空中浓缩。残余物然后再次通过硅胶提纯(流动相：环己烷/乙酸乙酯9∶1)。以这种方法获得的产物包含大约10％区域异构的2-溴-3，
4-二甲基吡啶。

[0458] 产率：6.7g(理论的20％)

[0459] GC-MS(方法14)：Rt＝4.24min；MS(ESIpos)：m/z＝187[M+H]+；

[0460] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ＝8.07(s，1H)，7.25(s，1H)，2.24(s，3H)，2.18(s，3H).[0461] 实施例15A

[0462] [(6-氯吡啶-3-基)甲基]氨基甲酸叔-丁基酯

[0463]

[0464] 开始向175ml二氯甲烷中加入25.0g(175.3mmol)5-氨基甲基-2-氯嘧啶。添加175ml10％浓度氢氧化钠溶液并且滴加38.3g(175.3mmol)重碳酸二-叔-丁基酯在175ml
二氯甲烷中的溶液。混合物在RT下搅拌16h。它然后用175ml二氯甲烷稀释，分离掉有机相并且含水相用175ml二氯甲烷提纯。合并的有机相通过硫酸镁干燥并且在真空中浓缩。
产物在高度真空下干燥。

[0465] 产率：42.0g(理论的99％)+

[0466] LC-MS(方法7)：Rt＝1.58min；MS(ESIpos)：m/z＝243[M+H] ；1

[0467] H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ＝8.31(d，1H)，7.61(dd，1H)，7.30(d，1H)，4.99(br.s，1H)，4.30(d，2H)，1.46(s，9H).

[0468] 实施例16A

[0469] 4-(6-肼基嘧啶-4-基)吗啉

[0470]

[0471] 阶段a)：4-(6-氯嘧啶-4-基)吗啉

[0472]

[0473] 开始向450ml水中加入45.0g(302.1mmol)4，6-二氯嘧啶。添加26.3g(302.1mmol)吗啉并且混合物在90℃下搅拌16h。此后，它冷却到0℃并且滤掉形成的沉淀。沉淀用50ml水洗涤一次并且在空气中干燥。

[0474] 产率：51.0g(理论的85％)

[0475] LC-MS(方法4)：Rt＝1.09min；MS(ESIpos)：m/z＝200[M+H]+；

[0476] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝8.35(s，1H)，6.95(s，1H)，3.62(s，8H).[0477] 阶段b)：4-(6-肼基嘧啶-4-基)吗啉

[0478]

[0479] 开始向260ml乙醇中加入53.0g(2.7mmol)4-(6-氯嘧啶-4-基)吗啉。添加132.9g(2.7mol)水合肼并且混合物在回流下搅拌16h。此后，它冷却到RT并且通过蒸馏除去大约一半的溶剂。混合物冷却到0℃并且滤掉形成的固体。它用冷的乙醇洗涤并且固体首先在空气中然后在真空中干燥。

[0480] 产率：35.0g(理论的68％)+

[0481] LC-MS(方法1)：Rt＝0.17min；MS(ESIpos)：m/z＝196[M+H] ；1

[0482] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 7.94(s，1H)，7.70(s，1H)，5.91(s，1H)，4.15(s，2H)，3.66-3.60(m，4H)，3.45-3.37(m，4H).

[0483] 实施例17A

[0484] 2-肼基吡嗪

[0485]

[0486] 向60.0ml(61.7g，1.2mol)水合肼中滴加20.0g(174.6mmol)2-氯吡嗪。混合物在120℃浴温下搅拌45min。为了后处理，冷却的反应混合物在下2℃放置静止12h，滤掉已经沉淀析出的晶体并且在过滤器上的残余物用石油醚洗涤两次。残余物然后由甲苯重结晶。

[0487] 产率：6.5g(理论的34％)

[0488] LC-MS(方法1)：Rt＝0.49min；MS(ESIpos)：m/z＝111[M+H]+；

[0489] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.11(s，1H)，7.94(s，1H)，7.90(s，1H)，7.70(d，1H)，4.29(br.s，2H).

[0490] 实施例18A

[0491] 5-(叔-丁氧基甲基)-2-肼基吡啶

[0492]

[0493] 阶段a)：5-(叔-丁氧基甲基)-2-氯吡啶

[0494]

[0495] 开始向50ml二氯甲烷中加入7.2g(50.0mmol)(6-氯吡啶-3-基)甲醇。添加25.1g(115.0mmol)重碳酸二-叔-丁基酯和1.2g(5.0mmol)高氯酸镁并且混合物在40℃
下搅拌24h。它然后冷却到RT，进一步添加12.5g(87.1mmol)重碳酸二-叔-丁基酯和
600mg(2.7mmol)高氯酸镁并且混合物在回流下再次搅拌2.5h。再次添加12.5g(87.1mol)重碳酸二-叔-丁基酯并且混合物在回流下进一步搅拌3h。此后，它用二氯甲烷稀释并且用水洗涤一次和用饱和的氯化钠溶液洗涤一次。混合物通过硫酸镁干燥并浓缩和残余物通过在硅胶上柱层析提纯(流动相：环己烷/乙酸乙酯85∶15)。

[0496] 产率：7.9g(理论的79％)

[0497] LC-MS(方法10)：Rt＝1.12min；MS(ESIpos)：m/z＝200[M+H]+；

[0498] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.36(d，1H)，7.78(dd，1H)，6.98(d，1H)，4.45(s，2H)，1.22(s，9H).

[0499] 阶段b)：5-(叔-丁氧基甲基)-2-肼基吡啶

[0500]

[0501] 7.9g(39.6mmol)5-(叔-丁氧基甲基)-2-氯吡啶与19.8g(395.6mmol) 水合肼被分成相等大小的三份并向每份中添加15ml乙醇。在各自情况下每份在170℃下在单一模式微波(CEM Explorer)中反应4h。此后，合并三份种混合物并除去溶剂。残余物在乙酸乙酯中吸收并且混合物用饱和的碳酸氢钠溶液洗涤一次。含水相用乙酸乙酯提取一次。合并两份乙酸乙酯相并用饱和的氯化钠溶液洗涤一次。混合物通过硫酸镁干燥并除去溶剂。获得的残余物在石油醚中搅拌并滤掉固体。

[0502] 产率：1.6g(理论的21％)

[0503] LC-MS(方法10)：Rt＝0.77min；MS(ESIpos)：m/z＝196[M+H]+；

[0504] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ＝8.08(s，1H)，7.50(dd，1H)，6.68(d，1H)，5.77(br.s，1H)，4.32(s，2H)，3.80(br.s，2H)，1.28(s，9H).

[0505] 实施例19A

[0506] 6-肼基吡啶-3-腈

[0507]

[0508] 在100℃浴温下2.0g(14.4mmol)6-氯烟腈在7.0ml(7.3g，144.4mmol)水合肼中搅拌15min。冷却到RT的反应混合物用水稀释并且在RT下搅拌30min。滤掉已经析出的沉淀，在过滤器上的残余物用水洗涤并且晶体在空气中干燥过夜并由乙酸乙酯重结晶。

[0509] 产率：1.5g(理论的80％)

[0510] LC-MS(方法1)：Rt＝0.51min；MS(ESIpos)：m/z＝135[M+H]+；

[0511] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6) ＝ 8.56(s，1H)，8.35(s，1H)，7.73(d，1H)，6.75(m，1H)，4.42(s，1H).

[0512] 实施例20A

[0513] 2-肼基-5-甲基吡啶

[0514]

[0515] 1.0g(7.8mmol)2-氯-5-甲基吡啶在5.7ml(5.9g，117.6mmol)水合肼中在回流下搅拌12h。向冷却的反应混合物中添加10ml乙二醇单乙醚并且然后在旋转蒸发器上完全除去溶剂。该操作步骤重复两次，然后向残余物中添加二氯甲烷，滤掉沉淀，滤液在真空中浓缩并在真空中干燥残余物。

[0516] 产率：644mg(理论的67％)

[0517] LC-MS(方法8)：Rt＝0.35min；MS(ESIpos)：m/z＝124[M+H]+.

[0518] 实施例21A

[0519] 4-环丙基-6-肼基嘧啶

[0520]

[0521] 1.6g(6.9mmol)4-氯-6-环丙基嘧啶[FR1519069(1966)；Chem.Abstr.71，49965y，1969]和3.4ml(3.5g，69.0mmol)水合肼在90℃浴温下搅拌16h。向冷却的反应混合物中添加乙二醇单乙醚并且混合物在真空中浓缩。该操作重复一次。残余物然后通过硅胶60色谱分离(流动相：乙腈/水8∶2)。

[0522] 产率：0.8g(理论的69％)

[0523] GC-MS(方法14)：Rt＝5.72min；MS(ESIpos)：m/z＝151[M+H]+；

[0524] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.33(br.s，1H)，8.19(s，1H)，6.59(s，1H)，4.85(br.s，2H)，1.90-1.87(m，1H)，0.96-0.85(m，4H).

[0525] 在下表1中列出的化合物以相似的方式由所述的原料根据以下教导制备：

[0526] 使用水合肼或者1M肼在THF中的溶液。该反应还可以在单一模式微波(CEMExplore或者Emrys Optimizer)中进行，一般在150℃下在乙醇或者THF中经过大约15min到4h。提纯如在实施例9A的制备中描述或者以类似的方式，例如通过用水洗涤沉淀出的固体和由乙酸乙酯重结晶或者通过用乙酸乙酯或者石油醚搅拌进行。过量水合肼可以通过在例如乙酸乙酯中吸收粗产物并用饱和的碳酸氢钠溶液洗涤混合物除去。

[0527] 表1

[0528]

[0529]

[0530] 实施例30A

[0531] 4-肼基-6-(4-吡咯烷-1-基哌啶-1-基)嘧啶

[0532]

[0533] 2.0g(13.8mmol)来自实施例7A的化合物和4.3g(27.7mmol)4-吡咯烷-1-基吡啶的混合物在100℃下在20ml水中搅拌16h。滤掉已经沉淀析出的固体，首先用乙醇和然后用乙醚洗涤并在真空中干燥。

[0534] 产率：3.0g(理论的82％)

[0535] LC-MS(方法8)：Rt＝0.21min；MS(ESIpos)：m/z＝263[M+H]+；

[0536] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 7.92(s，1H)，7.58(s，1H)，5.91(s，1H)，4.17-4.07(m，4H)，2.95-2.85(m，2H)，2.54(s，2H)，2.52-2.46(m，2H)，2.24-2.15(m，1H)，
1.90-1.80(m，2H)，1.71-1.61(m，4H)，1.39-1.24(m，2H).

[0537] 实施例31A

[0538] 4-肼基-6-[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]嘧啶

[0539]

[0540] 1.0g(6.9mmol)来自实施例7A的化合物和1.1g(7.6mmol)1-(2-甲氧基乙基)哌嗪在10ml水中的混合物在100℃下搅拌2h。进一步添加0.9g(6.2mmol)1-(2-甲氧基乙
基)哌嗪并且反应混合物在100℃下再搅拌16h。在真空中浓缩后，残余物在乙腈中搅拌。
滤掉已经沉淀析出的固体，首先用乙醇和然后用乙醚洗涤并在真空中干燥。

[0541] 产率：0.8g(理论的42％)

[0542] LC-MS(方法8)：Rt＝0.22min；MS(ESIpos)：m/z＝253[M+H]+；

[0543] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 7.93(s，1H)，7.64(s，1H)，5.91(s，1H)，4.14(s，2H)，3.50-3.40(m，6H)，3.24(s，3H)，2.47-2.39(m，4H).

[0544] 实施例32A

[0545] [4-(三氟甲基)-1H-咪唑-1-基]乙酸乙酯

[0546]

[0547] 开始向5.5ml(4.7g，14.7mmol)21％浓度乙醇钠在乙醇中的溶液中加入2.0g(14.7mmol)4-(三氟甲基)-1H-咪唑并添加1.8ml(2.7g，16.2mmol)溴乙酸乙酯。反应混合物在RT下搅拌16h。为了后处理，滤掉已经沉淀析出的固体，在过滤器上的残余物用乙醇洗涤并且滤液在真空中浓缩。向残余物中添加二异丙醚，混合物再次过滤，滤液再次在旋转蒸发器上浓缩并且残余物在真空中干燥。获得作为两种区域异构体9∶1混合物的产物并进一步原样反应。

[0548] 产率：3.3g(理论的95％)

[0549] LC-MS(方法1)：Rt＝1.75min+1.80min；MS(ESIpos)：m/z＝223[M+H]+；

[0550] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝7.93(s，1H)，7.82(s，1H)，5.04(s，2H)，[5.07(s，2H)]，4.18(q，2H)，[4.12(q，2H)]，1.22(t，3H)，[1.19(t，3H)].

[0551] 实施例33A

[0552] [4-氰基-1H-咪唑-1-基]乙酸乙酯

[0553]

[0554] 开始向13.2ml(11.5g，35.3mmol)21％浓度乙醇钠在乙醇中的溶液中加入3.3g(35.3mmol)1H-咪唑-4-腈[Matthews等，J.Org.Chem.1986，51，3228-3231]并且添加
4.3ml(6.5g，38.9mmol)溴乙酸乙酯。反应混合物在RT下搅拌16h。为了后处理，滤掉已经沉淀析出的固体，在过滤器上的残余物用乙醇洗涤并且滤液在真空中浓缩。向残余物中添 加二异丙醚，混合物再次过滤，滤液再次在旋转蒸发器上浓缩并且残余物在真空中干燥。

[0555] 产率：3.8g(理论的60％)

[0556] LC-MS(方法1)：Rt＝1.17min；MS(ESIpos)：m/z＝180[M+H]+；

[0557] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.12(s，1H)，7.88(s，1H)，5.06(s，2H)，4.18(q，2H)，1.22(t，3H).

[0558] 实施例34A

[0559] (4-甲基-1H-咪唑-1-基)乙酸乙酯

[0560]

[0561] 开始向20.0ml(17.4g，53.6mmol)21％浓度乙醇钠在乙醇中的溶液中加入4.4g(53.6mmol)4-甲基-1H-咪唑并添加6.5ml(9.8g，58.9mmol)溴乙酸乙酯。反应混合物在RT下搅拌16h。为了后处理，滤掉已经沉淀析出的固体，在过滤器上的残余物用乙醇洗涤并且滤液在真空中浓缩。残余物通过硅胶通过柱层析提纯(流动相：乙腈/水9∶1)。获得作为两种区域异构体9∶1混合物的产物并进一步照此反应。

[0562] 产率：1.8g(理论的20％)

[0563] LC-MS(方法1)：Rt＝1.02min；MS(ESIpos)：m/z＝169[M+H]+；

[0564] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 7.48(s，1H)，[7.52(s，1H)]，6.82(s，1H)，[6.64(s，1H)]，4.86(s，2H)，[4.88(s，2H)]，4.22-4.11(m，2H)，2.07(s，3H)，[2.06(s，3H)]，1.25-1.19(m，3H).

[0565] 实施例35A

[0566] (2-甲基-1H-咪唑-1-基)乙酸乙酯

[0567]

[0568] 开始向9.1ml(7.9g，24.4mmol)21％浓度乙醇钠在乙醇中的溶液中加入2.0g(24.4mmol)2-甲基-1H-咪唑并且添加2.9ml(4.5g，26.8mmol)溴乙酸乙酯。反应混合物在RT下搅拌16h。为了后处理，滤掉已经沉淀析出的固体，在过滤器上的残余物用乙醇洗涤并且滤液在真空中浓缩。残余物在二异丙醚中搅拌，混合物再次过滤并且滤液在真空中再次浓缩。

[0569] 产率：2.9g(理论的70％)+

[0570] LC-MS(方法1)：Rt＝0.49min；MS(ESIpos)：m/z＝169[M+H].

[0571] 实施例36A

[0572] (4-甲基-1H-1，2，3-三唑-1-基)乙酸乙酯

[0573]

[0574] 2.0g(14.2mmol)(4-甲基-1H-1，2，3-三唑-1-基)乙酸溶于30ml乙醇并且添加10滴浓硫酸。反应混合物在RT下搅拌16h。为了后处理，混合物在真空中浓缩，向残余物中添加乙酸乙酯并且悬浮液用半浓缩碳酸氢钠溶液洗涤。有机相通过硫酸镁干燥，在旋转蒸发器上完全除去溶剂并且固体在真空中干燥。

[0575] 产率：1.5g(理论的61％)+

[0576] LC-MS(方法1)：Rt＝2.33min；MS(ESIpos)：m/z＝170[M+H] ；1

[0577] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 7.82(s，1H)，5.31(s，2H)，4.17(q，2H)，2.25(s，3H)，1.21(t，3H).

[0578] 在表2中列出的化合物类似于实施例36A由所述的原料制备：

[0579] 表2

[0580]

[0581] 实施例39A

[0582] 2-(1H-1，2，3-三唑-1-基)乙酸乙酯

[0583]

[0584] 缓慢向4.0升乙醇中添加129.2g(5.6mol)钠。然后添加400.0g(5.6mol)1，2，3-1H-三唑并且在20-25℃内部温度下滴加623ml(938.2g，5.6mol)溴乙酸乙酯。混合物在RT下搅拌48h。滤掉已经沉淀析出的固体，在真空中除去乙醇并且混合物再次过滤。残余物在乙酸乙酯中吸收，过滤混合物和在真空中再次浓缩并且残余物通过30cm柱蒸馏。在
140℃浴温，60-115℃塔顶温度和1毫巴压力下获得产物。

[0585] 产率：440.0g(理论的50％)

[0586] HPLC(方法11)：Rt＝1.58min；

[0587] LC-MS(方法1)：Rt＝0.71min；MS(ESIpos)：m/z＝156[M+H]+.

[0588] 实施例40A

[0589] 1H-咪唑-1-基乙酸乙酯

[0590]

[0591] 缓慢向2.5升乙醇中添加118.2g(5.1mol)钠。然后添加350.0g(5.1mol)咪唑并在20-25℃内部温度下滴加570ml(858.6g，5.1mol)溴乙酸乙酯。混合物在RT下搅拌24h。滤掉已经沉淀析出的固体，在真空中除去乙醇并且混合物再次过滤。残余物通过硅胶通过柱层析提纯(流动相：乙酸乙酯)。

[0592] 产率：639.0g(理论的81％)

[0593] GC-MS(方法14)：Rt＝4.55min；MS(ESIpos)：m/z＝155[M+H]+.

[0594] 实施例41A

[0595] (4-氰基-1H-1，2，3-三唑-1-基)乙酸乙酯

[0596]

[0597] 4.1g(31.9mmol)叠氮基乙酸乙酯和2.8g(31.9mmol)2-氯代丙烯腈在32ml水中在80℃浴温下搅拌16h。冷却到RT后，用1N盐酸使溶液呈酸性并且用乙酸乙酯提取。有机相通过硫酸钠干燥，过滤并且在真空中浓缩。向残余物中添加50ml乙醇和10滴浓硫酸并且混合物在回流下搅拌16h。为了后处理，反应混合物在真空中浓缩，向残余物中添加乙酸乙酯，悬浮液用半浓缩碳酸氢钠溶液洗涤并且有机相通过硫酸钠干燥。在旋转蒸发器上完全除去溶剂并且固体在真空中干燥。

[0598] 产率：1.5g(理论的25％)

[0599] LC-MS(方法7)：Rt＝0.96min；MS(ESIpos)：m/z＝181[M+H]+；

[0600] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.06(s，1H)，5.57(s，2H)，4.19(q，2H)，1.22(t，3H).

[0601] 实施例42A

[0602] 3-(二甲基氨基)-2-(1H-咪唑-1-基)丙烯酸乙基酯

[0603]

[0604] 38.0g(244.9mmol)来自实施例39A的化合物在126ml(108.1g，734.7mmol)二甲基甲酰胺二乙基缩醛中在90℃浴温下搅拌16h。冷却后，混合物在真空中浓缩，残余物用二异丙醚搅拌并滤掉固体和最后用二异丙醚洗涤。

[0605] 产率：49.0g(理论的95％)

[0606] LC-MS(方法4)：Rt＝2.42min；MS(ESIpos)：m/z＝211[M+H]+；

[0607] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 7.52(s，1H)，7.49(s，1H)，7.05(s，1H)，6.91(s，1H)，4.02(q，2H)，2.63(br.s，6H)，1.12(t，3H).

[0608] 实施例43A

[0609] 3-(二甲基氨基)-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙烯酸乙基酯

[0610]

[0611] 1.9g(9.8mmol)[1，2，4]-三 唑 -1-基 乙 酸 乙 酯[Ainsworth 等，J.Am.Chem.Soc.1955，77，621-623]和3.6ml(2.9g，19.6mmol)二甲基甲酰胺二乙基缩醛在100℃浴温下搅拌12h。为了后处理，冷却的反应溶液在旋转蒸发器上浓缩并且残余物在真空中干燥。

[0612] 产率：2.3g(90％纯度，理论的100％)+

[0613] LC-MS(方法1)：Rt＝2.32min；MS(ESIpos)：m/z＝211[M+H] ；1

[0614] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.48(s，1H)，8.04(s，1H)，7.61(s，1H)，4.03(q，2H)，3.04(br.s，3H)，2.25(br.s，3H)，1.12(t，3H).

[0615] 实施例44A

[0616] 3-(二甲基氨基)-2-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-1-基]丙烯酸乙基酯

[0617]

[0618] 38.0g(170.8mmol)来自实施例32A的化合物和58.5ml(50.3g，341.6mmol)二甲基甲酰胺二乙基缩醛在100℃浴温下搅拌16h。为了后处理，冷却的反应溶液在旋转蒸发器上浓缩并且残余物在真空中干燥。产率：49.5g(理论的97％)+

[0619] LC-MS(方法8)：Rt＝1.68min；MS(ESIpos)：m/z＝278[M+H] ；1

[0620] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 7.81(s，1H)，7.27(s，1H)，7.58(s，1H)，4.03(q，2H)，2.68(br.s，6H)，1.13(t，3H).

[0621] 实施例45A

[0622] 3-(二甲基氨基)-2-[4-氰基-1H-咪唑-1-基]丙烯酸乙基酯

[0623]

[0624] 3.8g(21.4mmol)来自实施例33A的化合物和7.4ml(6.3g，42.8mmol)二甲基甲酰胺二乙基缩醛在100℃浴温下搅拌16h。为了后处理，冷却的反应溶液在旋转蒸发器上浓缩并且残余物在真空中干燥。

[0625] 产率：5.0g(73％纯度，理论的73％)

[0626] LC-MS(方法1)：Rt＝2.69min；MS(ESIpos)：m/z＝235[M+H]+；

[0627] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.13(s，1H)，7.85(s，1H)，7.58(s，1H)，4.03(q，2H)，2.69(br.s，6H)，1.12(t，3H).

[0628] 实施例46A

[0629] 3-(二甲基氨基)-2-[4-甲基-1H-咪唑-1-基]丙烯酸乙基酯

[0630]

[0631] 310mg(1.5mmol，80％纯度)来自实施例34A的化合物和0.5ml(434mg，3.0mmol)二甲基甲酰胺二乙基缩醛在100℃浴温下搅拌16h。为了后处理，冷却的反应溶液在旋转蒸发器上浓缩并且残余物在真空中干燥。获得作为两种区域异构体3∶2混合物的产物并且进一步原样反应。产率：329mg(理论的99％)+

[0632] LC-MS(方法1)：Rt＝2.05min；MS(ESIpos)：m/z＝224[M+H] ；1

[0633] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 7.50(s，1H)，[7.58(s，1H)]，7.32(d，1H)，[7.38(d，1H)]，6.73(s，1H)，[6.66(s，1H)]，4.04-3.98(m，2H)，2.64(br.s，6H)，2.08(s，3H)，[1.97(s，3H)]，1.12(t，3H).

[0634] 在表3中列出的化合物类似于实施例43A由所述的原料和二甲基甲酰胺二乙基缩醛制备：

[0635] 表3

[0636]

[0637]

[0638] 实施例52A

[0639] 2-(6-氯嘧啶-4-基)-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0640]

[0641] 开始向100ml乙醇中加入10.0g(47.7mmol)来自实施例3A的化合物和8.3g(57.1mmol)来自实施例7A的化合物并添加1.5ml(2.2g，19.0mmol)TFA。混合物在回流下搅拌12h。然后向冷却的反应混合物中过量添加氯化氢在二 烷中的4M溶液，混合物通过搅拌大约1h，滤掉已经沉淀析出的晶体和在过滤器上的残余物用二 烷和乙醇洗涤。
以这种方法获得的中间产物溶于150ml乙醇，添加50ml25％浓度甲醇钠的甲醇溶液并且混合物在RT下搅拌2h。反应混合物然后用1N盐酸调整到pH5并通过在RT下再搅拌2h，滤
掉固体，在过滤器上的残余物用乙醇洗涤并且产物在真空中干燥。

[0642] 产率：7.0g(理论的49％)

[0643] LC-MS(方法10)：Rt＝1.20min；MS(ESIpos)：m/z＝264[M+H]+.

[0644] 实施例53A

[0645] 2-(6-氯嘧啶-4-基)-4-(1H-咪唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0646]

[0647] 开始向100ml乙醇中加入10.0g(47.8mmol)来自实施例42A的化合物和8.3g(57.3mmol)来自实施例7A的化合物并加入1.5ml(2.2g，19.0mmol)TFA。混合物在回流下搅拌12h。滤掉已经沉淀析出的晶体，在过滤器上的残余物用乙醇洗涤并且中间产物在真空中干燥过夜。其然后悬浮在20ml甲醇中，添加100ml氯化氢在二 烷中的4M溶液并
且混合物随后在RT下搅拌1h。滤掉固体，在过滤器上的残余物用二 烷，乙酸乙酯和二异丙醚洗涤并且产物在真空中干燥。

[0648] 产率：4.6g(理论的32％)

[0649] HPLC(方法11)：Rt＝2.81min；MS(ESIpos)：m/z＝263[M+H]+；

[0650] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.46(s，1H)，8.96(s，1H)，8.56(s，1H)，8.51(d，1H)，8.07-8.04(m，1H)，7.85-7.82(m，1H).

[0651] 实施例54A

[0652] 2-(6-吗啉-4-基嘧啶-4-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑4-乙基酯

[0653]

[0654] 1.4g(10.0mmol)碳酸钾溶于50ml水。向该溶液中添加2.0g(10.0mmol)来自实施例16A的化合物和然后2.2g(10.0mmol)乙氧基 亚甲基丙二酸二乙基酯并且然后混合物在100℃下搅拌2h。使其能够冷却到RT并滤掉固体，用水洗涤两次并在高度真空下干燥。

[0655] 产率：2.4g(理论的75％)

[0656] LC-MS(方法8)：Rt＝1.31min；MS(ESIpos)：m/z＝320[M+H]+；

[0657] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.30(s，1H)，7.97(s，1H)，7.48(s，1H)，4.00(q，2H)，3.75-3.61(m，4H)，3.55-3.45(m，4H)，1.18(t，3H).

[0658] 实施方案实施例：

[0659] 实施例1

[0660] 2-吡啶-2-基-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[0661]

[0662] 250mg(1.19mmol)来自实施例3A的化合物，108mg(0.99mmol)2-肼基吡啶和23mg(99μmol)樟脑-10-磺酸溶于5ml无水乙醇并且混合物在回流下加热过夜。在每一种情况下再次总共四次添加108mg(0.99mmol)2-肼基吡啶并且混合物在回流下进一步加热直到来自实施例3A的化合物转化完全。冷却后，反应混合物通过制备HPLC提纯几次(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度伴随添加0.1％浓盐酸)并且获得6mg(理论的2％)标题化合
物。

[0663] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.52(d，1H)，8.44(s，1H)，8.37(s，1H)，8.29-8.23(m，1H)，8.11-8.06(m，1H)，7.90(s，1H)，7.43-7.38(m，1H).

[0664] LC-MS(方法2)：Rt＝1.17min；MS(ESIpos)：m/z＝229[M+H]+.

[0665] 实施例2

[0666] 2-(4-甲基吡啶-2-基)-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮[0667]

[0668] 250mg(1.19mmol)来自实施例3A的化合物，122mg(0.99mmol)来自实施例1A的化合物和23mg(99μmol)樟脑-10-磺酸溶于5ml无水乙醇并且本混合物在回流下加热过夜。此后，使反应混合物冷却并且通过制备HPLC预提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度)并且随后通过硅胶快速层析(流动相：二氯甲烷/甲醇梯度)。用制备HPLC重新提纯(RP18
柱；流动相：乙腈/水梯度)最后产生21mg(理论的9％)标题化合物。
1

[0669] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.42(s，1H)，8.38(d，1H)，8.29(s，1H)，8.09(s，1H)，7.90(s，1H)，7.27(d，1H)，2.46(s，3H).
+

[0670] LC-MS(方法4)：Rt＝1.05min；MS(ESIpos)：m/z＝243[M+H].

[0671] 实施例3

[0672] 2-(6-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-4-[5-(三氟甲基)-1，3，4-噻二唑-2-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[0673]

[0674] 2.43g(8.62mmol)来自实施例2A的化合物，1.53g来自实施例16A的化合物和182mg(784μmol)樟脑-10-磺酸溶于35ml无水甲醇并且混合物在回流下加热过夜。冷却后，混合物浓缩，残余物在325ml甲醇中再次吸收，添加0.5ml(8.62mmol)25％浓度甲醇钠的甲醇溶液并且混合物再次在回流下加热过夜。冷却后，抽吸滤掉形成的沉淀，用乙醚洗 涤并悬浮于少量水中，添加过量的1M盐酸并且悬浮液再次浓缩。残余物用水和乙醚洗涤并干燥。获得1.34g(理论的43％)标题化合物。

[0675] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.55(s，1H)，8.26(s，1H)，7.49(s，1H)，3.84-3.70(m，8H).

[0676] LC-MS(方法4)：Rt＝1.68min；MS(ESIpos)：m/z＝400[M+H]+.

[0677] 实施例4

[0678] 2-(6-哌啶-1-基-嘧啶-4-基)-4-[5-(三氟甲基)-1，3，4-噻二唑-2-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[0679]

[0680] 240mg(854μmol)来自实施例2A的化合物，150mg(776mmol)来自实施例8A的化合物和18mg(78μmol)樟脑-10-磺酸溶于3ml无水乙醇并且混合物在回流下加热过夜。冷却后，添加64mg(931μmol)乙醇钠并且混合物进一步在RT下搅拌过夜。抽吸滤掉形成的沉淀，用乙醇和乙醚洗涤并干燥。滤液浓缩并且残余物通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度)。获得的两种中间产物组分一起悬浮于5ml甲醇中，添加15mg(278μmol)甲醇钠并且混合物在回流下加热过夜。冷却后，反应混合物通过制备HPLC提纯(RP18柱；
流动相：乙腈/水梯度)并获得26mg(理论的8％)标题化合物。

[0681] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.33(s，1H)，7.87(s，1H)，7.76(s，1H)，3.63-3.58(m，4H)，1.68-1.51(m，6H).

[0682] LC-MS(方法3)：Rt＝2.23min；MS(ESIpos)：m/z＝398[M+H]+.

[0683] 在表4中列出的化合物类似于实施例4由相应原料制备：

[0684] 表4

[0685]

[0686] 实施例7

[0687] 2-(4-甲基吡啶-2-基)-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0688]

[0689] 3.7g(17.6mmol)来自实施例3A的化合物和2.6g(21.1mmol)来自实施例1A的化合物溶于100ml无水乙醇并且添加0.7ml(1.0g，8.8mmol)三氟乙酸(TFA)。混合物在100℃浴温下搅拌16h。此后，使混合物冷却到RT并且在真空中浓缩。残余物溶于35ml乙腈并在RT下添加9ml(35.2mmol)氯化氢在二 烷中的4N溶液。分离掉沉淀并 用35ml乙腈洗
涤。固体用二异丙基醚洗涤和之后在10ml甲醇中加热到40℃，添加10ml乙酸乙酯，过滤混合物并且产物用5ml甲醇和乙酸乙酯1∶1的混合物和2ml乙酸乙酯洗涤。

[0690] 产率：2.0g(理论的40％)

[0691] LC-MS(方法2)：Rt＝1.05min；MS(ESIpos)：m/z＝243[M+H]+；

[0692] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.42-8.40(m，1H)，8.37(d，1H)，8.29(s，1H)，8.09(s，1H)，7.89(d，1H)，7.27(d，1H)，2.46(s，3H).

[0693] 实施例8

[0694] 6-[5-氧代-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]烟酸乙基酯盐酸盐

[0695]

[0696] 227mg(1.1mmol)来自实施例3A的化合物，245mg(1.1mmol)6-肼基烟酸乙基酯[对于制备参见WO2006/114213]和50mg(0.2mmol)樟脑-10-磺酸在回流下在6ml乙醇中
搅拌3h。此后，向冷却的反应混合物中进一步添加490mg(2.2mmol)6-肼基烟酸乙基酯和
37mg(0.2mmol)对-甲苯磺酸并且混合物在沸点搅拌1天。为了后处理，反应混合物在真空中浓缩和残余物通过制备HPLC色谱分离(方法12)。向由HPLC分离获得的冷冻干燥的三
氟乙酸盐中添加4ml氯化氢在二 烷中的4N溶液，悬浮液部分浓缩，滤掉固体，在过滤器上的残余物用乙醚洗涤并且产物在真空中干燥。

[0697] 产率：139mg(理论的38％)

[0698] LC-MS(方法1)：Rt＝2.88min；MS(ESIpos)：m/z＝301[M+H]+；

[0699] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.00(s，1H)，8.60-8.57(m，1H)，8.53-8.46(m，2H)，8.45(s，1H)，7.91(s，1H)，4.38(q，2H)，1.35(t，3H).

[0700] 实施例9

[0701] 2-(6-哌啶-1-基嘧啶-4-基)-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0702]

[0703] 最初向2ml THF和2ml乙醇的混合物中加入400mg(1.8mmol)来自实施例3A的化合物，338mg(1.8mmol)来自实施例8A的化合物和60mg(0.4mmol)对-甲苯磺酸并且混合
物在单一模式微波(Emrys Optimizer)中在140℃下反应1h。冷却的反应混合物在真空中浓缩并且向残余物中添加2ml氯化氢在二 烷中的4N溶液，乙醚和乙腈。滤掉已经分离出的沉淀并且在过滤器上的残余物通过制备的HPLC色谱分离(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加在水中的0.1％甲酸)。向由此获得的冷冻干燥的甲酸盐中添加4ml氯化氢在二 烷中的4N溶液，悬浮液部分浓缩，滤掉固体，在过滤器上的残余物用乙醚洗涤并且产物在真空中干燥。

[0704] 产率：75mg(理论的12％)

[0705] LC-MS(方法1)：Rt＝2.75min；MS(ESIpos)：m/z＝313[M+H]+；

[0706] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.51(s，1H)，8.38(s，1H)，8.21(s，1H)，7.85(s，1H)，7.38(s，1H)，3.76-3.72(m，4H)，1.74-1.63(m，2H)，1.59(s，9H).

[0707] 实施例10

[0708] 4-(1H-咪唑-1-基)-2-(6-哌啶-1-基嘧啶-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[0709]

[0710] 5.5g(26.3mmol)来自实施例42A的化合物和6.1g(31.5mmol)来自实施例8A的化合物溶于55ml乙酸乙酯并添加1.2g(10.5mmol)对-甲苯磺酸。混合物加热回流并在该温度下搅拌16h。冷却到RT后，滤掉沉淀并用乙酸乙酯洗涤。固体溶于50ml水并且溶液用1N盐酸调节到pH7。滤掉沉淀，用水和二异丙基醚洗涤和最后通过五氧化二磷干燥。产率：
7.8g(理论的95％)
+

[0711] LC-MS(方法1)：Rt＝2.32min；MS(ESIpos)：m/z＝312[M+H] ；1

[0712] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.42(s，1H)，8.53(s，1H)，8.28(s，1H)，8.04(s，1H)，7.82(s，1H)，7.45(s，1H)，3.76-3.72(m，4H)，1.74-1.52(m，6H).

[0713] 实施例11

[0714] 4-(1H-咪唑-1-基)-2-(4-甲基吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[0715]

[0716] 200mg(1.0mmol)来自实施例42A的化合物和118mg(1.0mmol)来自实施例1A的化合物溶于2ml乙醇并且添加44mg(0.2mmol)樟脑-10-磺酸。混合物在回流下加热16h和然后浓缩并且残余物通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加在水中的0.1％甲酸)。

[0717] 产率：4mg(理论的2％)

[0718] LC-MS(方法1)：Rt＝1.94min；MS(ESIpos)：m/z＝242[M+H]+；

[0719] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.34(d，1H)，8.18(s，1H)，8.12-8.09(m，2H)，7.53(s，1H)，7.19(d，1H)，7.09(s，1H)，2.42(s，3H).

[0720] 实施例12

[0721] 2-[5-(羟甲基)吡啶-2-基]-4-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-1-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[0722]

[0723] 1.0g(3.6mmol)来自实施例44A的化合物和502mg(3.6mmol)来自实施例4A的化合物溶于1ml冰醋酸并且混合物在RT下搅拌16h。此后，再次添加200mg(1.4mmol)来
自实施例4A的化合物并且混合物在RT下再搅拌20h。反应混合物在5ml乙酸乙酯中吸
收并且混合物用稀碳酸氢钠水溶液调整到pH7。含水相在真空中浓缩，向残余物中添加
1.5ml(4.0mmol)21％浓度乙醇钠的乙醇溶液并且混合物在RT下搅拌4h。

[0724] 滤掉沉淀并用乙醇洗涤。

[0725] 产率：111mg(理论的9％)

[0726] LC-MS(方法4)：Rt＝1.70min；MS(ESIpos)：m/z＝326[M+H]+；

[0727] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.44(s，1H)，8.39-8.21(m，2H)，8.19(s，1H)，8.14(s，1H)，7.98(dd，1H)，5.41(t，1H)，4.58(d，2H).

[0728] 实施例13

[0729] 2-[5-(羟甲基)吡啶-2-基]-4-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-1-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0730]

[0731] 7.5g(27.0mmol)来自实施例44A的化合物和3.9g(27.0mmol)来自实施例4A的化合物溶于50ml乙醇，添加1.3g(5.4mmol)樟脑-10-磺酸并且混合物在RT下搅拌16h。此外1.5g(5.4mmol)来自实施例44A的化合物和0.8g(5.4mmol)来自实施例4A的化合物溶
于10ml乙醇，添加0.2g(1.1mmol)对-甲苯磺酸并且混合物在RT下搅拌16h。此后，合并两种混合物，混合物在真空中浓缩并且残余物通过硅胶通过柱层析提纯(流动相：乙腈/水
4∶1)。除去溶剂后，固体添加2ml氯化氢在二 烷中的4N溶液，混合物在真空中浓缩并干燥残余物。

[0732] 产率：1.5g(理论的14％)

[0733] HPLC(方法11)：Rt＝3.38min；MS(ESIpos)：m/z＝326[M+H]+；

[0734] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.43(s，1H)，8.39-8.21(m，2H)，8.19(s，1H)，8.15(s，1H)，7.98(dd，1H)，5.48-5.38(m，1H)，4.57(d，2H).

[0735] 实施例14

[0736] 2-(4-甲基吡啶-2-基)-4-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-1-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0737]

[0738] 4.1g(13.4mmol)来自实施例44A的化合物，1.9g(15.7mmol)来自实施例1A的化合物和0.5g(2.7mmol)对-甲苯磺酸在8ml THF和12ml乙醇混合物中在单一模式微波(Emrys Optimizer)中在160℃下反应1h。在真空中除去所有挥发性组分后，向残余物中添加乙酸乙酯和水。分离掉的有机相用饱和的氯化钠溶液洗涤并且通过硫酸钠干燥并滤掉干燥剂。滤液在真空中浓缩并且粗产物通过制备HPLC色谱分离(方法15)。向获得的冻干物中添加5ml氯化氢在二 烷中的4N溶液，混合物在真空中部分浓缩，在乙腈和乙醚中搅拌悬浮液，滤掉晶体，在过滤器上的残余物用正-戊烷洗涤并且产物在真空中干燥。

[0739] 产率：0.4g(理论的9％)+

[0740] LC-MS(方法1)：Rt＝3.11min；MS(ESIpos)：m/z＝310[M+H] ；1

[0741] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.37(d，1H)，8.31(s，1H)，8.19(s，1H)，8.19(s，1H)，8.16(s，1H)，8.12(s，1H)，7.23(d，1H)，2.44(s，3H).

[0742] 实施例15

[0743] 2-(6-哌啶-1-基嘧啶-4-基)-4-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-1-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0744]

[0745] 200mg(0.7mmol)来自实施例44A的化合物，139mg(0.7mmol)来自实施例8A的化合物和24mg(0.1mmol)对-甲苯磺酸在3ml THF中在单一模式微波(Emrys Optimizer)中在160℃下反应1h。在真空中除去所有挥发性组分后，残余物通过制备HPLC色谱分离(RP-18柱；洗脱液：乙腈/水梯度，伴随添加在水中的0.1％甲酸)。向浓缩产物组分中添加2ml氯化氢在二 烷中的4N溶液和乙醚，滤掉已经沉淀析出的晶体，在过滤器上的残余物用乙醚洗涤并且产物在真空中干燥。

[0746] 产率：72mg(理论的24％)+

[0747] LC-MS(方法1)：Rt＝3.29min；MS(ESIpos)：m/z＝380[M+H] ；1

[0748] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.49(s，1H)，8.25(s，1H)，8.15(s，1H)，8.11(s，1H)，7.43(s，1H)，3.69(s，4H)，1.69-1.66(m，2H)，1.58(s，9H).

[0749] 实施例16

[0750] 1-[3-氧代-2-(6-哌啶-1-基嘧啶-4-基)-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基]-1H-咪唑-4-腈盐酸盐

[0751]

[0752] 200mg(0.9mmol)来自实施例45A的化合物和165mg(0.9mmol)来自实施例8A的化合物溶于2ml乙醇并且添加29mg(0.2mmol)对-甲苯磺酸。混合物在90℃下搅拌48h。冷却到RT后，反应混合物浓缩并且残余物通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％甲酸)。向浓缩产物组分中添加过量氯化氢在二 烷中的4N溶液和乙醚，滤掉已经沉淀析出的晶体，在过滤器上的残余物用乙醚洗涤并且产物在真空中干燥。

[0753] 产率：18mg(理论的6％)

[0754] HPLC(方法11)：Rt＝3.64min；MS(ESIpos)：m/z＝337[M+H]+；

[0755] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.49(s，1H)，8.40(s，1H)，8.21(s，1H)，8.18(s，1H)，7.42(s，1H)，3.75-3.65(m，4H)，1.73-1.51(m，6H).

[0756] 实施例17

[0757] 2-(6-环丙基嘧啶-4-基)-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0758]

[0759] 280mg(1.3mmol)来自实施例3A的化合物和200mg(1.3mmol)来自实施例37A的化合物溶于2ml乙醇并且添加21μl(30g，0.3mmol)TFA。混合物在回流下搅拌12h。冷却到RT后，反应溶液直接通过制备 HPLC色谱分离(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％甲酸)。标题化合物(作为游离碱)由此在产物组分中部分沉淀析出。滤掉沉淀，在过滤器上的残余物用乙醚洗涤并且向滤液中添加氯化氢在二 烷中的4N溶液。混合物通过在RT下搅拌，滤掉已经沉淀析出的固体，在过滤器上的残余物用乙醚洗涤并且产物在真空中干燥。

[0760] 产率：16mg(理论的4％)

[0761] HPLC(方法11)：Rt＝3.11min；

[0762] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.90(s，1H)，8.59(m，1H)，8.44(s，1H)，8.29(s，1H)，7.91(s，1H)，2.26-2.24(m，1H)，1.17-1.05(m，4H).

[0763] 实施例18

[0764] 2-(6-环丙基嘧啶-4-基)-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮[0765]

[0766] 280mg(1.3mmol)来自实施例3A的化合物和200mg(1.3mmol)来自实施例37A的化合物溶于2ml乙醇并且添加21μl(30mg，0.3mmol)TFA。混合物在回流下搅拌12h。冷却到RT后，反应溶液直接通过制备HPLC色谱分离(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加
0.1％甲酸)。标题化合物由此在产物组分中部分沉淀析出。滤掉固体并且在真空中干燥。

[0767] 产率：5mg(理论的1.3％)

[0768] HPLC(方法11)：Rt＝3.10min；1

[0769] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.89(s，1H)，8.59-8.55(m，1H)，8.44(s，1H)，8.29(s，1H)，7.91(s，1H)，2.25-2.23(m，1H)，1.17-1.05(m，4H).

[0770] 实施例19

[0771] 2-[5-(羟甲基)吡啶-2-基]-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[0772]

[0773] 15.1g(71.9mmol)来自实施例3A的化合物和10.0g(71.9mmol)来自实施例4A的化合物溶于375ml乙醇并添加1.7g(7.2mmol)樟脑-10-磺酸。混合物在回流下加热16h。
冷却到RT后，反应混合物浓缩并且残余物通过硅胶通过柱层析提纯(流动相：二氯甲烷/甲醇9∶1，然后1∶1)。产物组分在真空中浓缩并且残余物在二异丙醚中搅拌，滤出并在真空中干燥。

[0774] 产率：1.0g(理论的5％)

[0775] LC-MS(方法1)：Rt＝2.14min；MS(ESIpos)：m/z＝259[M+H]+；

[0776] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.46(d，1H)，8.43(s，1H)，8.34(s，1H)，8.23(d，1H)，8.01(dd，1H)，7.90(s，1H)，5.43(br.s，1H)，4.58(s，2H).

[0777] 实施例20

[0778] 1-[3-氧代-2-(6-哌啶-1-基嘧啶-4-基)-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基]-1H-1，2，3-三唑-4-腈盐酸盐

[0779]

[0780] 400mg(1.7mmol)来自实施例51A的化合物和328mg(1.7mmol)来自实施例8A的化合物溶于4ml乙醇并且添加59mg(0.3mmol)对- 甲苯磺酸。混合物在120℃下在单一模式微波(Emrys Optimizer)中反应1h。冷却到RT后，反应混合物浓缩并且残余物通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加在水中的0.1％甲酸)。通过添加
0.2ml氯化氢在二 烷中的4N溶液由此获得的甲酸盐转化为盐酸盐。

[0781] 产率：4mg(理论的1％)

[0782] LC-MS(方法8)：Rt＝1.73min；MS(ESIpos)：m/z＝338[M+H]+；

[0783] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.35(s，1H)，8.47(s，1H)，8.47(s，1H)，8.33(s，1H)，7.05(s，1H)，3.75-3.65(m，4H)，1.67-1.64(m，2H)，1.57-1.55(m，4H).

[0784] 实施例21

[0785] 2-[6-(二甲基氨基)嘧啶-4-基)]-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[0786]

[0787] 3.7g(16.5mmol)来自实施例3A的化合物，2.4g来自实施例7A的化合物和0.6g(3.3mmol)对-甲苯磺酸在10ml乙醇和5ml THF的混合物中在单一模式微波(Emrys
Optimizer)中在140℃下反应1h。滤掉由此析出的沉淀，在过滤器上的残余物用乙醇和乙醚的混合物洗涤并且产物在真空中干燥。

[0788] 产率：0.8g(理论的17％)+

[0789] LC-MS(方法10)：Rt＝0.47min；MS(ESIpos)：m/z＝273[M+H] ；1

[0790] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.53(s，1H)，8.38(s，1H)，8.20(s，1H)，7.85(s，1H)，7.22(s，1H)，3.21(s，6H).

[0791] 实施例22

[0792] 2-(5-溴吡啶-2-基)-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0793]

[0794] 280mg(1.3mmol)来自实施例3A的化合物，250mg(1.3mmol)来自实施例10A的化合物和46mg(0.3mmol)对-甲苯磺酸在5ml THF中的混合物在单一模式微波(Emrys
Optimizer)中在170℃下反应30min。向反应溶液中添加2ml甲酸后，滤掉已经沉淀析出的固体，用3ml氯化氢在二 烷中的4N溶液搅拌，再次滤出，用乙醚洗涤并且在真空中干燥。

[0795] 产率：181mg(理论的40％)

[0796] LC-MS(方法8)：Rt＝1.50min；MS(ESIpos)：m/z＝306[M+H]+；

[0797] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.66(s，1H)，8.48(s，1H)，8.44(s，1H)，8.33-8.25(m，2H)，7.90(s，1H).

[0798] 实施例23

[0799] 2-(5-溴吡啶-2-基)-4-(1H-咪唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0800]

[0801] 278mg(1.3mmol)来自实施例42A的化合物，250mg(1.3mmol)来自实施例8A的化合物和46mg(0.3mmol)对-甲苯磺酸在5ml THF中的混合物在单一模式微波(Emrys
Optimizer)中在170℃下反应30min。冷却到RT后，反应混合物浓缩并且残余物通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加在水中的0.1％甲酸)。通过添加 2ml氯化氢在二 烷中的4N溶液由此获得的甲酸盐转化为盐酸盐。产物用乙醚洗涤并在真空中干燥。

[0802] 产率：60mg(理论的13％)

[0803] LC-MS(方法8)：Rt＝1.04min；MS(ESIpos)：m/z＝307[M+H]+；

[0804] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.49(s，1H)，8.67(s，1H)，8.60(s，1H)，8.39-8.25(m，2H)，8.06(s，1H)，7.85(s，1H).

[0805] 实施例24

[0806] 2-(6-氯嘧啶-4-基)-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0807]

[0808] 向7.3g(34.6mmol)来自实施例3A的化合物和6.0g(41.5mmol)来自实施例7A的化合物在70ml乙醇中的混合物中添加1.1ml(1.6g，13.8mmol)TFA并且混合物在100℃下搅拌20h。滤掉已经沉淀析出的固体并且滤液在真空中浓缩。残余物悬浮于100ml乙醇中，添加30ml30％浓度甲醇钠在甲醇中的溶液并且混合物在RT下搅拌1.5h。添加42ml氯化氢
在二 烷中的4N溶液(pH＝5-6)后和搅拌30min后，滤掉固体，首先用乙醇和然后用乙醚洗涤并在真空中干燥。通过在乙醇和乙腈中搅拌若干次进行进一步提纯。然后添加10ml氯化氢在二 烷中的4N溶液并且混合物在RT下搅拌16h。滤掉产物，首先用乙腈和然后
用乙醚洗涤并在真空中干燥。

[0809] 产率：7.9g(理论的76％)

[0810] LC-MS(方法8)：Rt＝1.20min；MS(ESIpos)：m/z＝264[M+H]+；

[0811] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.97(s，1H)，8.59(s，1H)，8.47(s，1H)，8.43(s，1H)，7.89(s，1H).

[0812] 实施例25

[0813] 2-[6-(4-吡咯烷-1-基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-4-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-1-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0814]

[0815] 向683mg(2.5mmol)来自实施例44A的化合物和711mg(2.7mmol)来自实施例30A的化合物在10ml乙醇中的混合物中添加76μl(112mg，1.0mmol)TFA并且混合物在100℃下搅拌16h。添加10ml甲酸后，反应溶液通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加在水中的0.1％甲酸)。通过添加2ml氯化氢在二 烷中的4N溶液获得的甲
酸盐转化为盐酸盐。其用乙醚洗涤并且在真空中干燥。

[0816] 产率：315mg(理论的25％)+

[0817] LC-MS(方法10)：Rt＝0.65min；MS(ESIpos)：m/z＝449[M+H] ；1

[0818] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 11.42(br.s，1H)，8.54(s，1H)，8.35(s，1H)，8.19(s，1H)，8.14(s，1H)，7.56(s，1H)，4.51(br.s，2H)，3.53-3.37(m，4H)，3.13-2.97(m，
4H)，2.24-2.14(m，2H)，2.03-1.68(m，5H).

[0819] 实施例26

[0820] 2-(5-溴吡啶-2-基)-4-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-1-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0821]

[0822] 369mg(1.3mmol)来自实施例44A的化合物，250mg(1.3mmol)来自实施例10A的化合物和46mg(0.3mmol)对-甲苯磺酸在5ml THF中的混合物在单一模式微波(Emrys
Optimizer)中在170℃下反应30min。向反应溶液中添加2ml甲酸后，滤掉已经沉淀析出的固体，用3ml氯化氢在二 烷中的4N溶液搅拌，再次滤出，首先用乙腈和然后用乙醚洗涤并且在真空中干燥。

[0823] 产率：163mg(理论的30％)

[0824] LC-MS(方法10)：Rt＝1.06min；MS(ESIpos)：m/z＝374[M+H]+；

[0825] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.65(s，1H)，8.45(s，1H)，8.38-8.23(m，2H)，8.19(s，1H)，8.15(s，1H).

[0826] 实施例27

[0827] 2-[5-(羟甲基)吡啶-2-基]-4-(1H-咪唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0828]

[0829] 200mg(1.0mmol)来自实施例42A的化合物和133mg(1.0mmol)来自实施例4A的化合物溶于2ml乙醇并且添加44mg(0.2mmol)樟脑-10-磺酸。混合物在回流下搅拌12h。
冷却的反应混合物在真空中浓缩。通过制备HPLC提纯两次后(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％甲酸)，向产物组分添加1ml氯化氢在二 烷中的4N溶液，混合物搅拌1h，在旋转蒸发器上完全除去溶剂并且残余物在真空中干燥。产率：86mg(理论的31％)+

[0830] LC-MS(方法1)：Rt＝1.77min；MS(ESIpos)：m/z＝258[M+H] ；1

[0831] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.50(s，1H)，8.51(s，1H)，8.47(s，1H)，8.29(d，1H)，8.09-8.01(m，2H)，7.87(s，1H)，3.58(s，2H).

[0832] 实施例28

[0833] 2-[6-(二甲基氨基)嘧啶-4-基]-4-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-1-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[0834]

[0835] 8.3g(27.7mmol)来自实施例44A的化合物，4.0g(27.7mmol)来自实施例7A的化合物和1.0g(5.5mmol)对-甲苯磺酸在10ml乙醇和5mlTHF的混合物中在单一模式微波(Emrys Optimizer)中在140℃下反应1h。滤掉已经析出的沉淀，在过滤器上的残余物用乙醇和乙醚的混合物洗涤并且产物在真空中干燥。

[0836] 产率：1.3mg(理论的14％)

[0837] LC-MS(方法10)：Rt＝0.84min；MS(ESIpos)：m/z＝340[M+H]+；

[0838] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.50(s，1H)，8.24(s，1H)，8.15(s，1H)，8.11(s，1H)，7.28(s，1H)，2.54(s，6H).

[0839] 在表5中列出的化合物类似于给出的实施例由相应原料制备：

[0840] 表5

[0841]

[0842]

[0843]

[0844]

[0845]

[0846]

[0847]

[0848]

[0849] 实施例62

[0850] 6-[5-氧代-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-羧酸叔-丁基酯盐酸盐

[0851]

[0852] 开始向100ml乙醇中加入3.2g(15.0mmol)来自实施例3A的化合物。添加3.1g(15.0mmol)来自实施例22A的化合物和571mg(3.0mmol)对-甲苯磺酸一水合物并且
混合物在回流下搅拌16h。混合物然后浓缩并且残余物通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。合并包含产物的组分，除去大部分溶剂并且滤掉形成的固体。其在高度真空下干燥和然后添加氯化氢在二 烷中的4N溶液。混合物在RT下搅拌1h并且滤掉固体和在高度真空下干燥。

[0853] 产率：1.6g(理论的28％)+

[0854] LC-MS(方法1)：Rt＝3.32min；MS(ESIpos)：m/z＝329[M+H] ；1

[0855] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.94(s，1H)，8.53(s，1H)，8.50-8.40(m，3H)，7.91(s，1H)，1.58(s，9H).

[0856] 实施例63

[0857] 6-[4-(1H-咪唑-1-基)-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-羧酸叔-丁基酯盐酸盐

[0858]

[0859] 开始向100ml乙醇中加入3.1g(15.0mmol)来自实施例42A的化合物。添加3.1g(15.0mmol)来自实施例22A的化合物和571mg(3.0mmol)对-甲苯磺酸一水合物并且
混合物首先在回流下搅拌16h。它随后在回流下进一步搅拌24h并且然后除去溶剂。残余物通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度伴随添加0.1％TFA)。合并产物组分并除去在其中包含的大部分乙腈。剩余溶液冻干。向冻干物中添加氯化氢在二 烷中的4N溶液并且混合物在RT下搅拌1h。滤掉固体和在高度真空下干燥。

[0860] 产率：1.3g(理论的23％)+

[0861] LC-MS(方法7)：Rt＝0.99min；MS(ESIpos)：m/z＝328[M+H] ；1

[0862] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.55(s，1H)，8.94(s，1H)，8.70(s，1H)，8.53-8.42(m，2H)，8.10(s，1H)，7.88(s，1H)，1.58(s，9H).

[0863] 实施例64

[0864] 6-{5-氧代-4-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-1-基]-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基}吡啶-3-羧酸叔-丁基酯盐酸盐

[0865]

[0866] 开始向100ml乙醇中加入4.2g(15.0mmol)来自实施例44A的化合物。添加3.1g(15.0mmol)来自实施例22A的化合物和571mg(3.0mmol)对-甲苯磺酸一水合物并且
混合物混合物在RT下搅拌16h。然后除去溶剂并且残余物通过制备HPLC提纯(RP18柱；
流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。合并产物组分并除去其中包含的大部分乙腈和一些水。滤掉形成的固体并且在空气中干燥。然后添加20ml氯化氢二 烷中的4N溶液并且混合物RT下搅拌1h。滤掉固体并且再次通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。

[0867] 合并产物组分，添加1N盐酸并且冻干混合物。

[0868] 产率：750mg(理论的12％)+

[0869] LC-MS(方法7)：Rt＝2.10min；MS(ESIpos)：m/z＝396[M+H] ；1

[0870] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.93(s，1H)，8.59-8.38(m，3H)，8.19(s，1H)，8.14(s，1H)，1.59(s，9H).

[0871] 实施例65

[0872] 6-[5-氧代-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-羧酸盐酸盐

[0873]

[0874] 50mg(0.1mmol)来自实施例62的化合物溶于1ml二氯甲烷和TFA的1∶1混合物并且混合物在RT下搅拌1h。反应溶液在真空中浓缩，残余物悬浮于2ml1N盐酸中并且然后冻干悬浮液。

[0875] 产率：42mg(理论的99％)+

[0876] LC-MS(方法9)：Rt＝0.82min；MS(ESIpos)：m/z＝273[M+H] ；1

[0877] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.99(s，1H)，8.53(s，1H)，8.51-8.41(m，3H)，7.91(s，1H).

[0878] 在表6中列出的目标化合物的制备类似于实施例化合物65进行：

[0879] 表6

[0880]

[0881] 实施例68

[0882] 6-[5-氧代-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-羧酸

[0883]

[0884] 491mg(1.8mmol，80％纯度)来自实施例3A的化合物和289mg(1.6mmol)6-肼基烟酸乙基酯[对于该制备参见WO2006/114213]在 10ml乙酸中在RT下搅拌12h。此后，向反应混合物中再次添加120mg(0.7mmol)6-肼基烟酸乙基酯并且混合物再次在RT下搅拌13h。在RT下再静止两天后，反应溶液在真空中浓缩，残余物在乙酸乙酯中吸收，混合物用饱和的碳酸氢钠溶液洗涤中性并且有机相通过硫酸钠干燥，过滤并且在旋转蒸发器上浓缩。以这种方法获得的中间产物溶于10ml乙醇，添加0.3ml(1.8mmol)30％浓度甲醇钠在甲醇中的溶液并且混合物在RT下搅拌17h。反应溶液用1N盐酸调整到pH5和随后在RT下再搅
拌2h。它在真空中浓缩，向残余物中添加乙腈，滤掉已经析出的沉淀并且在过滤器上的残余物用乙醚洗涤和在真空中干燥。向以这种方法获得的酯中添加9.4ml0.1M氢氧化钾的乙醇溶液并且混合物在RT下搅拌16h。反应溶液用1N盐酸调整到pH2，在旋转蒸发器上除去溶剂，残余物在水中吸收并且混合物用乙酸乙酯提取。滤掉来自含水相的已经沉淀析出的晶体，在过滤器上的残余物用乙醚洗涤并且产物在真空中干燥。

[0885] 产率：32mg(理论的7％)

[0886] LC-MS(方法1)：Rt＝2.31min；MS(ESIpos)：m/z＝273[M+H]+；

[0887] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝13.49(br.s，1H)，9.00(s，1H)，8.71-8.33(m，4H)，8.41(s，1H).

[0888] 实施例69

[0889] 6-[5-氧代-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]烟酸乙基酯

[0890]

[0891] 2.7g(13.1mmol)实施例3A的化合物，2.0g(13.1mmol)实施例6A的化合物和1.1g(6.5mmol)对-甲苯磺酸在回流下在50ml乙醇中搅拌16h。向冷却的反应混合物中添加50ml DMF并且然后混合物在130℃浴温下再搅拌10h。反应溶液在真空中浓缩并且向残余物中添加10ml乙醇和1ml浓硫酸。混合物随后在沸点搅拌12h。向冷却的反应混合物 中添加水，滤掉固体，在过滤器上的残余物用乙醇洗涤并且产物在真空中干燥。

[0892] 产率：0.14g(理论的3％)

[0893] LC-MS(方法9)：Rt＝2.89min；MS(ESIpos)：m/z＝300[M+H]+；

[0894] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.00(s，1H)，8.57-8.54(m，1H)，8.53-8.46(m，2H)，8.45(s，1H)，7.91(s，1H)，4.38(q，2H)，1.35(t，3H).

[0895] 实施例70

[0896] 2-[5-(氨基甲基)吡啶-2-基]-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0897]

[0898] 83mg(0.2mmol)实施例32的化合物在5ml氯化氢在二 烷中的4M溶液中在RT下搅拌2h。此后，混合物在真空中浓缩并且残余物通过制备HPLC色谱分离(RP18柱；梯度：乙腈/水，伴随添加0.1％TFA)。浓缩合并的产物组分并且向残余物中添加2ml1N盐酸。产生的悬浮液冷冻干燥。冻干物在乙醇中搅拌，滤掉固体并且晶体在真空中干燥。

[0899] 产率：10mg(理论的14％)

[0900] LC-MS(方法8)：Rt＝0.76min；MS(ESIpos)：m/z＝258[M+H]+；

[0901] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.64(s，1H)，8.53(s，3H)，8.47(s，2H)，8.31(s，1H)，8.18(s，1H)，7.91(s，1H)，4.12-4.10(m，2H).

[0902] 实施例71

[0903] 2-(6-吗啉-4-基嘧啶-4-基)-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[0904]

[0905] 开始向25ml乙酸乙酯中加入1.9g(8.8mmol)来自实施例3A的化合物和1.9g(9.7mmol)来自实施例16A的化合物并且在RT下添加504mg(4.4mmol)TFA。混合物在回流下搅拌16h，然后冷却到5℃并且随后再搅拌2h。滤掉形成的固体，用乙酸乙酯洗涤并且首先在空气中并且此后在高度真空下干燥。获得1.7g产物。

[0906] 母液与洗出溶液合并并且除去溶剂。根据LC-MS，残余物(2.4g)仍然包含中间体3-[2-(6-吗啉-4-基嘧啶-4-基)-肼基]-2-(1H-1，2，3-三唑-1-基)丙-2-烯酸乙基酯
(环化的中间阶段)，其直接用于实施例72的制备(参见那里)。

[0907] 产率：1.7g(理论的61％)

[0908] LC-MS(方法9)：Rt＝0.90min；MS(ESIpos)：m/z＝315[M+H]+；

[0909] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.42(s，1H)，8.38(s，1H)，8.01(s，1H)，7.73(s，1H)，7.70(s，1H)，3.71-3.65(m，4H)，3.57-3.51(m，4H).

[0910] 实施例72

[0911] 2-(6-吗啉-4-基嘧啶-4-基)-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0912]

[0913] 批次1：向1.7g(5.4mmol)来自实施例71的化合物中添加7.5ml氯化氢在二 烷中的4N溶液。混合物在RT下搅拌，添加5ml二 烷并且混合物在RT下搅拌16h。滤掉固
体并且用5ml二 烷洗涤。混合物在高度真空下干燥16h，然后添加10ml甲醇并且混合物在RT下搅拌1h。滤掉固体，用4ml甲醇洗涤并且在高度真空下干燥。1.6g标题化合物获得。

[0914] 批次2：更多量的标题化合物获得如下：在实施例71的化合物合成期间由母液获得的残余物(2.4g)，其包含环化的开环中间状态，3-[2-(6-吗啉-4-基嘧啶-4-基)肼基]-2-(1H-1，2，3-三唑-1-基)丙-2-烯酸乙基酯，溶于12ml乙醇并且在RT下添加
1.5ml30％浓度甲醇钠在甲醇中的溶液，同时搅拌。混合物随后在RT下搅拌45min，然后用
2N盐酸调整到pH5并且随后在RT下再搅拌16h。混合物冷却到10℃并且滤掉固体和用
3.5ml二 烷洗涤。混合物在高度真空下干燥16h，然后添加5ml甲醇并且混合物随后在RT下搅拌1h。滤掉固体，用2ml甲醇洗涤并且在高度真空下干燥以用这种方法产生进一步的
997mg标题化合物。

[0915] 产率：总共2.6g(理论的83％)

[0916] LC-MS(方法6)：Rt＝0.89min；MS(ESIpos)：m/z＝315[M+H]+；

[0917] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.54(s，1H)，8.39(s，1H)，8.28(s，1H)，7.88(s，1H)，7.42(s，1H)，3.71(s，8H).

[0918] 实施例73

[0919] 4-(1H-咪唑-1-基)-2-(6-吗啉-4-基嘧啶-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮三氟乙酸盐

[0920]

[0921] 209mg(1.0mmol)来自实施例42A的化合物溶于7ml THF。在RT 下添加195mg(1.0mmol)来自实施例16A的化合物和38mg(0.2mmol)对-甲苯磺酸一水合物并且混合物然后在单一模式微波(CEM Explorer)中在150℃下反应1h。获得的混合物然后直接通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。

[0922] 产率：71mg(理论的17％)+

[0923] LC-MS(方法1)：Rt＝2.03min；MS(ESIpos)：m/z＝314[M+H] ；1

[0924] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.38(s，1H)，8.57(s，1H)，8.31(s，1H)，8.02(s，1H)，7.79(s，1H)，7.47(s，1H)，3.72(s，8H).

[0925] 实施例74

[0926] 4-(1H-咪唑-1-基)-2-(6-吗啉-4-基嘧啶-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0927]

[0928] 向60mg(0.1mmol)来自实施例73的化合物中添加0.5ml氯化氢在二 烷中的4N溶液并且混合物在RT下搅拌1h。固体滤掉，每次用0.5ml二 烷洗涤两次并且随后在真
空中干燥。

[0929] 产率：46mg(理论的94％)+

[0930] LC-MS(方法1)：Rt＝0.91min；MS(ESIpos)：m/z＝314[M+H] ；1

[0931] H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.46(s，1H)，8.57(s，1H)，8.35(s，1H)，8.06(s，1H)，7.82(s，1H)，7.46(s，1H)，3.73(s，8H).

[0932] 实施例75

[0933] 2-(6-吗啉-4-基嘧啶-4-基)-4-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-1-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0934]

[0935] 309mg(1.0mmol)来自实施例44A的化合物溶于7ml THF。在RT下添加195mg(1.0mmol)来自实施例16A的化合物和38mg(0.2mmol)对-甲苯磺酸一水合物并且混合物然后在单一模式微波(CEM Explorer)中在150℃下反应1h。获得的混合物随后直接通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。合并获得的产物组分并且除去溶剂。向残余物中添加氯化氢在二 烷中的4N溶液。混合物在RT下搅拌
1h并且滤掉固体和在高度真空下干燥。

[0936] 产率：77mg(理论的19％)

[0937] LC-MS(方法7)：Rt＝1.31min；MS(ESIpos)：m/z＝382[M+H]+；

[0938] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.53(s，1H)，8.33(s，1H)，8.18(s，1H)，8.13(s，1H)，7.49(s，1H)，3.67(s，8H).

[0939] 实施例76

[0940] 1-[2-(6-吗啉-4-基嘧啶-4-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基]-1H-咪唑-4-腈三氟乙酸盐

[0941]

[0942] 开始向20ml THF中加入976mg(纯度72％，3.0mmol)来自实施例45A的化合物。添加586mg(3.0mmol)来自实施例16A的化合物和114mg (0.6mmol)对-甲苯磺酸一水合
物并且混合物然后在单一模式微波(CEM Explorer)中在150℃下反应1h。反应混合物首先通过硅胶色谱预提纯(Biotage色谱仪；流动相：二氯甲烷/甲醇10∶1，伴随添加一点氨水溶液)。以这种方法获得的粗产物然后进一步通过制备HPLC提纯两次(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。合并HPLC层析的产物组分，添加相同体积的水并且进行冷冻干燥。

[0943] 产率：11mg(理论的1％)+

[0944] LC-MS(方法4)：Rt＝1.54min；MS(ESIpos)：m/z＝339[M+H] ；

[0945] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.53(s，1H)，8.42(s，1H)，8.29(s，1H)，8.19(s，1H)，7.46(s，1H)，3.70-3.64(m，8H).

[0946] 实施例77

[0947] 1-[2-(6-吗啉-4-基嘧啶-4-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基]-1H-咪唑-4-甲酰胺盐酸盐

[0948]

[0949] 开始向20ml THF中加入976mg(纯度72％，3.0mmol)来自实施例45A的化合物。添加586mg(3.0mmol)来自实施例16A的化合物和114mg(0.6mmol)对-甲苯磺酸一水合物
并且混合物然后在单一模式微波(CEM Explorer)中在150℃下反应1h。反应混合物首先通过硅胶色谱预提纯(Biotage色谱仪；流动相：二氯甲烷/甲醇10∶1，伴随添加一点氨水溶液)。以这种方法获得的粗产物然后进一步通过制备HPLC提纯两次(RP18柱；流动相：
乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。合并HPLC层析的产物组分，混合物在真空中浓缩，残余物在1M盐酸中吸收并且冻干溶液。

[0950] 产率：14mg(理论的1.2％)

[0951] LC-MS(方法10)：Rt＝0.47min；MS(ESIpos)：m/z＝357[M+H]+；

[0952] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.20(s，1H)，8.57(s，1H)，8.53(s，1H)，8.29(s，1H)，8.23(br.s，1H)，7.80(br.s，1H)，7.49(s，1H)，3.72(s，8H).

[0953] 实施例78

[0954] 6-[4-(4-氰基-1H-咪唑-1-基)-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-羧酸叔-丁基酯盐酸盐

[0955]

[0956] 开始向11ml THF中加入500mg(纯度72％，1.5mmol)来自实施例45A的化合物。添加322mg(1.5mmol)来自实施例22A的化合物和58mg(0.3mmol)对-甲苯磺酸一水合物
并且混合物在单一模式微波(CEMExplorer)中在150℃下反应3h。此后，混合物直接通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。合并产物组分并且浓缩，添加氯化氢在二 烷中的1N溶液并且混合物在RT下搅拌1h。滤掉沉淀，每次用
0.5ml二 烷洗涤两次并且在高度真空下干燥。产率：144mg(理论的24％)

[0957] LC-MS(方法8)：Rt＝2.10min；MS(ESIpos)：m/z＝353[M+H]+；

[0958] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.94(s，1H)，8.54-8.42(m，4H)，8.20(s，1H)，1.58(s，9H).

[0959] 在表7中列出的化合物类似于给出的实施例由相应原料制备。替换樟脑-10-磺酸，还可以使用甲苯-4-磺酸一水合物。

[0960] 表7

[0961]

[0962] 实施例82

[0963] 2-[5-(叔-丁氧基甲基)吡啶-2-基]-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0964]

[0965] 开始向10ml乙醇中加入631mg(3.0mmol)来自实施例3A的化合 物和586mg(3.0mmol)来自实施例18A的化合物。添加114mg(0.6mmol)对-甲苯磺酸一水合物
并且混合物在RT下搅拌16h。然后除去溶剂并且残余物通过制备HPLC提纯(RP18柱；流
动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。合并产物组分和浓缩并且残余物在高度真空下干燥。添加10ml氯化氢在二 烷中的4N溶液并且混合物在RT下搅拌1h。滤出固体，用
叔-丁基甲基醚洗涤并在高度真空下干燥。

[0966] 产率：260mg(理论的25％)

[0967] LC-MS(方法8)：Rt＝1.77min；MS(ESIpos)：m/z＝315[M+H]+；

[0968] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.47-8.42(m，2H)，8.35(s，1H)，8.22(d，1H)，7.99(dd，1H)，7.90(s，1H)，4.50(s，2H)，1.25(s，9H).

[0969] 实施例83

[0970] 4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-2-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0971]

[0972] 开始向10ml乙醇中加入631mg(3.0mmol)来自实施例3A的化合 物和531mg(3.0mmol)来自实施例25A的化合物。添加114mg(0.6mmol)对-甲苯磺酸一水合物
并且混合物在回流下搅拌16h。它然后浓缩并且残余物通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。合并产物组分，除去溶剂并且在高度真空下干燥残余物。添加20ml氯化氢在二 烷中的4N溶液并且混合物在RT下搅拌1h。滤掉固体，
用叔-丁基甲基醚洗涤并在高度真空下干燥。

[0973] 产率：231mg(理论的23％)

[0974] LC-MS(方法8)：Rt＝1.65min；MS(ESIpos)：m/z＝297[M+H]+；

[0975] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.81(d，1H)，8.70(s，1H)，8.59(s，1H)，8.47(s，1H)，7.92(s，1H)，7.77(d，1H).

[0976] 实施例84

[0977] 2-[5-(2，2-二甲基丙氧基)吡啶-2-基]-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[0978]

[0979] 开始向7ml乙醇中加入171mg(0.8mmol)来自实施例3A的化合物和455mg(纯度35％，0.8mmol)来自实施例12A的化合物。添加31mg(0.2mmol)对-甲苯磺酸一水合物并且混合物在回流下搅拌64h。此后，它浓缩并且残余物通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度伴随添加0.1％TFA)。合并产物组分，除去溶剂并且在高度真空下干燥残余物。

[0980] 产率：28mg(理论的11％)

[0981] LC-MS(方法10)：Rt＝1.17min；MS(ESIpos)：m/z＝315[M+H]+；

[0982] 1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.42(s，1H)，8.29(s，1H)，8.23(s，1H)，8.18-8.08(m，1H)，7.90(s，1H)，7.69(dd，1H)，3.78(s，2H)，1.02(s，9H).

[0983] 实施例85

[0984] 2-[5-(2，2-二甲基丙氧基)吡啶-2-基]-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[0985]

[0986] 向22mg(0.1mmol)来自实施例84的化合物中添加2ml氯化氢在二 烷中的4N溶液并且混合物在RT下搅拌1h。滤掉固体并且在高度真空下干燥。

[0987] 产率：17mg(理论的97％)

[0988] LC-MS(方法10)：Rt＝1.17min；MS(ESIpos)：m/z＝315[M+H]+；

[0989] 1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.42(s，1H)，8.29(s，1H)，8.23(s，1H)，8.18-8.08(m，1H)，7.90(s，1H)，7.69(dd，1H)，3.78(s，2H)，1.02(s，9H).

[0990] 实施例86

[0991] 1-[2-(6-吗啉-4-基嘧啶-4-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基]-1H-1，2，3-三唑-4-腈三氟乙酸盐

[0992]

[0993] 开 始向 10ml THF中 加 入250mg(1.1mmol)来 自 实 施 例41A的 化 合 物，207mg(1.1mmol)来自实施例16A的化合物和40mg(0.2mmol)对-甲苯磺酸一水合物。混
合物在单一模式微波(CEM Explorer)中首先在120℃下反应3.5h和然后在130℃下反应
4h。使混合物冷却到RT，添加5ml乙腈并且混合物放置静止24h。滗析掉上清液，以乙腈洗涤沉淀一次。洗涤溶液与滗析出的上清液合并并且浓缩混合物。以这种方法获得的残余物通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。合并包含产物的组分并浓缩。固体残余物在少量叔-丁基甲基醚和几滴乙腈的混合物中搅拌两次。每次滗析掉上清液并且最后在高度真空下干燥固体。

[0994] 产率：15mg(理论的3％)

[0995] LC-MS(方法4)：Rt＝1.57min；MS(ESIpos)：m/z＝340[M+H]+；

[0996] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.58(s，1H)，8.24(s，1H)，7.42(s，1H)，3.80-3.63(m，8H).

[0997] 实施例87

[0998] 1-[2-(6-吗啉-4-基嘧啶-4-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基]-1H-1，2，3-三唑-4-腈盐酸盐

[0999]

[1000] 向18mg(0.04mmol)来自实施例86的化合物中添加3ml氯化氢在二 烷中的4N溶液并且混合物在RT下搅拌1h。滤掉固体，用叔-丁基甲基醚洗涤并且在高度真空下干燥。

[1001] 产率：15mg(理论的97％)

[1002] LC-MS(方法8)：Rt＝1.38min；MS(ESIpos)：m/z＝340[M+H]+；

[1003] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.58(s，1H)，8.25(s，1H)，7.41(s，1H)，3.82-3.57(m，8H).

[1004] 实施例88

[1005] 2-[6-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)嘧啶-4-基]-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[1006]

[1007] 开始向6ml THF和6ml乙醇的混合物中加入348mg(1.7mmol)来自实施例3A的化合物和300mg(1.7mmol)来自实施例11A的化合物。 添加63mg(0.3mmol)对-甲苯磺
酸一水合物并且混合物在单一模式微波(CEM Explorer)中在130℃下反应1.5h。使混合物冷却到RT，进一步添加50mg来自实施例3A的化合物和一刮勺尖对-甲苯磺酸一水合物并且混合物在150℃下加热1h。使其能够冷却到室温和由固体滗析掉并且固体用THF洗涤几次(固体批次1)。滗析掉的上清液合并洗出溶液，混合物浓缩并向获得的残余物中添加
5ml乙醇和5ml THF和一刮勺尖对-甲苯磺酸一水合物。混合物再次在单一模式微波(CEM Explorer)中在150℃下反应2h。使其冷却到RT并滤掉形成的固体(固体批次2)。滤液
浓缩，向残余物中添加3ml DMSO并通过制备HPLC进行提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。合并包含产物的组分并浓缩。残余物溶于乙醇，添加少量THF并且浓缩混合物，伴随形成沉淀。滤掉固体并用THF洗涤(固体批次3)。合并三个获得的固体批次并且混合物在高度真空下干燥。

[1008] 产率：108mg(理论的22％)

[1009] LC-MS(方法8)：Rt＝1.00min；MS(ESIpos)：m/z＝301[M+H]+；

[1010] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.47(s，1H)，8.36(s，1H)，8.18(s，1H)，7.84(s，1H)，6.97(s，1H)，5.92(d，1H)，4.69-4.49(m，1H)，4.41-4.33(m，2H)，3.95-3.86(m，2H).[1011] 实施例89

[1012] 2-[6-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)嘧啶-4-基]-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[1013]

[1014] 向105mg(0.4mmol)来自实施例88的化合物中添加3ml氯化氢在 二 烷中的4N溶液并且混合物在RT下搅拌1h。滤掉固体，用叔-丁基甲基醚洗涤并且在高度真空下干燥。

[1015] 产率：117mg(理论的99％)

[1016] LC-MS(方法8)：Rt＝0.99min；MS(ESIpos)：m/z＝301[M+H]+；

[1017] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.50(s，1H)，8.38(s，1H)，8.22(s，1H)，7.87(s，1H)，6.95(s，1H)，4.68-4.60(m，1H)，4.43-4.35(m，2H)，3.97-3.88(m，2H).

[1018] 实施例90

[1019] 2-(4，5-二甲基吡啶-2-基)-4-(1H-咪唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[1020]

[1021] 开始向5ml乙醇中加入262mg(1.3mmol)来自实施例42A的化合 物和172mg(1.3mmol)来自实施例26A的化合物。添加48mg(0.3mmol)对-甲苯磺酸一水合物并且混合物在回流下搅拌24h。混合物然后冷却到RT，期间产物结晶析出。滤掉晶体并且在每一种情况下用乙醇和石油醚洗涤一次。产物随后在高度真空下干燥。

[1022] 产率：65mg(理论的20％)

[1023] LC-MS(方法8)：Rt＝0.92min；MS(ESIpos)：m/z＝256[M+H]+；

[1024] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.23(s，1H)，8.15(s，1H)，8.07(s，2H)，7.52(s，1H)，7.08(s，1H)，2.36(s，3H)，2.26(s，3H).

[1025] 实施例91

[1026] 2-(4，5-二甲基吡啶-2-基)-4-(1H-咪唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[1027]

[1028] 向200mg(0.5mmol)来自实施例90的化合物中添加5ml氯化氢在二 烷中的4N溶液并且混合物在RT下搅拌1h。然后滤掉固体，在每一种情况下用二 烷和叔-丁基甲
基醚洗涤一次并且在高度真空下干燥。产率：117mg(理论的74％)

[1029] LC-MS(方法10)：Rt＝0.28min；MS(ESIpos)：m/z＝256[M+H]+；

[1030] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.50(s，1H)，8.40(s，1H)，8.26(s，1H)，8.13(s，1H)，8.08(s，1H)，7.87(s，1H)，2.40(s，3H)，2.28(s，3H).

[1031] 实施例92

[1032] 2-[5-(2，2-二甲基丙氧基)吡啶-2-基]-4-(1H-咪唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[1033]

[1034] 开始向4ml乙醇中加入233mg(1.0mmol，纯度90％)来自实施例42A的化合物。添加260mg(1.0mmol，纯度75％)来自实施例12A的化合物和38mg(0.2mmol)对-甲苯磺酸一水合物并且混合物在回流下搅拌16h。然后使混合物冷却到RT，滤掉已经沉淀析出的固体并用少量乙醇洗涤和在高度真空下干燥固体。通过制备HPLC(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)通过提纯过滤的母液获得进一步量的目标化合物。

[1035] 产率：264mg(理论的78％)

[1036] LC-MS(方法10)：Rt＝0.88min；MS(ESIpos)：m/z＝314[M+H]+；

[1037] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.22-8.08(m，4H)，7.67-7.62(dd，1H)，7.52(s，1H)，7.10(s，1H)，3.75(s，2H)，1.02(s，9H).

[1038] 实施例93

[1039] 2-[5-(2，2-二甲基丙氧基)吡啶-2-基]-4-(1H-咪唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[1040]

[1041] 向200mg(0.638mmol)来自实施例92的化合物中添加5ml氯化氢在二 烷中的4N溶液并且混合物在RT下搅拌30min。随后滤掉固体，用二 烷洗涤一次和用叔-丁基甲基醚洗涤两次并且随后在高度真空下干燥。

[1042] 产率：129mg(理论的64％)

[1043] LC-MS(方法10)：Rt＝0.87min；MS(ESIpos)：m/z＝314[M+H]+；

[1044] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.52(s，1H)，8.46(s，1H)，8.22(d，1H)，8.18-8.15(d，1H)，8.07(s，1H)，7.87(s，1H)，7.71-7.68(dd，1H)，3.79(s，2H)，1.02(s，9H).[1045] 实施例94

[1046] 2-(4，5-二甲基吡啶-2-基)-4-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-1-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮三氟乙酸盐

[1047]

[1048] 开始向5ml乙醇中加入347mg(1.3mmol)来自实施例44A的化合 物和171mg(1.3mmol)来自实施例26A的化合物。添加48mg(0.3mmol)对-甲苯磺酸一水合物并且混合物在回流下搅拌16h。此后，反应溶液直 接通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：
乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。合并包含产物的组分并部分浓缩。滤掉固体，用水洗涤并且在高度真空下干燥。

[1049] 产率：84mg(理论的15％)

[1050] LC-MS(方法8)：Rt＝1.88min；MS(ESIpos)：m/z＝324[M+H]+；

[1051] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.27(s，1H)，8.25(s，1H)，8.18(s，1H)，8.15(s，1H)，8.08(s，1H)，2.38(s，3H)，2.27(s，3H).

[1052] 实施例95

[1053] 2-(4，5-二甲基吡啶-2-基)-4-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-1-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[1054]

[1055] 向80mg(0.2mmol)来自实施例94的化合物中添加2.5ml氯化氢在二 烷中的4N溶液并且混合物在RT下搅拌1h。滤掉固体，在每一种情况下用二 烷和叔-丁基甲基醚
洗涤一次并且随后在高度真空下干燥。

[1056] 产率：65mg(理论的99％)

[1057] LC-MS(方法10)：Rt＝1.03min；MS(ESIpos)：m/z＝324[M+H]+；

[1058] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.27(s，1H)，8.25(s，1H)，8.18(s，1H)，8.13(s，1H)，8.07(s，1H)，2.37(s，3H)，2.27(s，3H).

[1059] 实施例96

[1060] 2-[5-(2，2-二甲基丙氧基)吡啶-2-基]-4-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-1-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[1061]

[1062] 开始向4ml乙醇中加入308mg(1.0mmol，纯度90％)来自实施例44A的化合物。添加260mg(1.0mmol，纯度75％)来自实施例12A的化合物和38mg(0.2mmol)对-甲苯磺酸一水合物并且混合物在回流下搅拌16h。此后，它浓缩并且残余物通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。合并包含产物的组分并且除去溶剂。向残余物中添加5ml氯化氢在二 烷中的4N溶液并且混合物搅拌30min。滤掉固体并且在高度真空下干燥。

[1063] 产率：140mg(理论的34％)

[1064] LC-MS(方法10)：Rt＝1.38min；MS(ESIpos)：m/z＝382[M+H]+；

[1065] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.29(s，1H)，8.21-8.12(m，4H)，7.71-7.68(dd，1H)，3.76(s，2H)，1.02(s，9H).

[1066] 实施例97

[1067] 2-[6-(氮杂环丁烷-3-基氧基)嘧啶-4-基]-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[1068]

[1069] 阶段a)：

[1070] 3-({6-[5-氧代-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]嘧啶-4-基}氧基)氮杂环丁烷1-叔-丁基酯三氟乙酸盐

[1071]

[1072] 开始向15ml二 烷中加入345mg(2.0mmol)3-羟基氮杂环丁烷-1-叔-丁基酯。在RT下添加1ml(2.0mmol)磷腈碱P2-叔-丁基在THF中的2M溶液。混合物随后在RT下
搅拌15min并且添加350mg(1.3mmol)来自实施例52A的化合物。混合物然后在单一模式
微波(CEM Explorer)中在120℃下反应1h。通过过滤分离掉固体，反应溶液浓缩并且残余物通过制备HPLC提纯(RP18柱随后；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。合并包含产物的组分并且部分浓缩。滤掉固体，用水洗涤并且在高度真空下干燥。

[1073] 产率：82mg(理论的12％)

[1074] LC-MS(方法10)：Rt＝0.98min；MS(ESIpos)：m/z＝401[M+H]+；

[1075] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.77(s，1H)，8.61(s，1H)，8.43(s，1H)，7.90(s，1H)，7.78(s，1H)，5.47-5.38(m，1H)，4.32-4.22(m，2H)，3.96-3.86(m，2H)，1.40(s，9H).[1076] 阶段b)：

[1077] 2-[6-(氮杂环丁烷-3-基氧基)嘧啶-4-基]-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[1078]

[1079] 60mg(0.2mmol)3-({6-[5-氧代-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]嘧啶-4-基}氧基)氮杂环丁烷-1-叔-丁基酯悬浮于2ml二氯甲烷中。添加1ml TFA并且混合物在RT下搅拌1h。此后，混合物浓缩并且在高度真空下干燥残余物。然后向残余物中添加3ml氯化氢在二 烷中的4N溶液并且混合物在RT下搅拌1h。然后滤
掉固体，在每一种情况下用二 烷和叔-丁基甲基醚洗涤一次并且在高度真空下干燥。

[1080] 产率：54mg(理论的97％)

[1081] LC-MS(方法8)：Rt＝0.80min；MS(ESIpos)：m/z＝301[M+H]+；

[1082] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.50(br.s，1H)，9.37(br.s，1H)，8.80(s，1H)，8.63(s，1H)，8.44(s，1H)，7.90(s，1H)，7.80(s，1H)，5.57-5.48(m，1H)，4.43-4.32(m，2H)，
4.18-4.07(m，2H).

[1083] 实施例98

[1084] 1-{2-[5-(2，2-二甲基丙氧基)吡啶-2-基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基}-1H-1，2，3-三唑-4-腈盐酸盐

[1085]

[1086] 开始向2.5ml乙醇中加入150mg(0.6mmol)来自实施例41A的化合物。添加166mg(0.6mmol，纯度75％)来自实施例12A的化合物和24mg(0.1mmol)对-甲苯磺酸一水合物并且混合物在回流下搅拌16h。反应溶液直接通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：
乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。合并包含产物的组分并浓缩。向获得的残余物中添加添加1ml氯化氢在二 烷中的4N溶液并且混合物在RT下搅拌1h。混合物浓缩并且在
高度真空下干燥残余物。

[1087] 产率：3mg(理论的1％)

[1088] LC-MS(方法8)：Rt＝2.42min；MS(ESIpos)：m/z＝340[M+H]+；

[1089] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.39(s，1H)，8.41(s，1H)，8.24(d，1H)，8.12(d，1H)，7.70(dd，1H)，3.78(s，2H)，1.03(s，9H).

[1090] 实施例99

[1091] 6-[4-(4-氰基-1H-1，2，3-三唑-1-基)-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-叔-丁基酯盐酸盐

[1092]

[1093] 开始向2.5ml乙醇中加入150mg(0.6mmol)来自实施例41A的化合物。添加178mg(0.6mmol)来自实施例22A的化合物和24mg(0.1mmol)对-甲苯磺酸一水合物并且
混合物在回流下搅拌16h。反应溶液直接通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。合并包含产物的组分，混合物浓缩并且在高度真空下干燥残余物。向获得的残余物中添加添加5ml氯化氢在二 烷中的4N溶液并且混合物在RT下搅拌
30min。滤掉固体，用叔-丁基甲基醚洗涤并且在高度真空下干燥。

[1094] 产率：21mg(理论的8％)

[1095] LC-MS(方法7)：Rt＝1.96min；MS(ESIpos)：m/z＝354[M+H]+；

[1096] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.39(s，1H)，8.94(s，1H)，8.63(s，1H)，8.46(s，2H)，1.58(s，9H).

[1097] 实施例100

[1098] 2-[6-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)嘧啶-4-基]-4-(1H-咪唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮三氟乙酸盐

[1099]

[1100] 400mg(1.3mmol)来自实施例53A的化合物，518mg(4.0mmol)N，N-二异丙胺和293mg(2.6mmol)氮杂环丁-3-醇盐酸盐悬浮于8ml乙醇中。混合物在单一模式微波(CEM Explorer)中在120℃下反应30min。过滤后，反应溶液通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。浓缩包含产物的组分并且残余物在5ml叔-丁基甲基醚和10ml甲醇的混合物中搅拌和然后用抽吸滤掉。此后，它再次通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度伴随添加0.1％TFA)。合并包含产物的组分，混合物浓缩并且在高度真空下干燥残余物。

[1101] 产率：115mg(理论的21％)

[1102] LC-MS(方法8)：Rt＝0.80min；MS(ESIpos)：m/z＝300[M+H]+；

[1103] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.38(s，1H)，8.50(s，1H)，8.23(s，1H)，8.02(t，1H)，7.80(t，1H)，6.97(s，1H)，4.70-4.61(m，1H)，4.47-4.38(m，2H)，3.98-3.90(m，2H).[1104] 实施例101

[1105] 2-[6-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)嘧啶-4-基]-4-(1H-咪唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[1106]

[1107] 100mg(0.2mmol)来自实施例100的化合物用3ml氯化氢在二 烷中的4N溶液搅拌。滤掉固体，用叔-丁基甲基醚洗涤两次并且在高度真空下干燥。

[1108] 产率：78mg(理论的96％)

[1109] LC-MS(方法8)：Rt＝0.80min；MS(ESIpos)：m/z＝300[M+H]+；

[1110] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝9.42(s，1H)，8.50(s，1H)，8.25(s，1H)， 8.03(t，1H)，7.82(t，1H)，6.97(s，1H)，4.69-4.60(m，1H)，4.47-4.37(m，2H)，3.99-3.90(m，2H).[1111] 实施例102

[1112] 2-[6-(乙硫基)嘧啶-4-基]-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[1113]

[1114] 200mg(0.7mmol)来自实施例52A的化合物在氩下悬浮于1.1mlDMF中。添加61mg(1.0mmol)乙硫醇。小心地添加35mg(0.8mmol，在矿物油中60％浓度)氢化钠，同时用冰冷却。混合物在RT下搅拌2.5h。随后滴加1ml水并且混合物随后在RT下搅拌15min.。获得的澄清的溶液直接通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。合并包含产物的组分，混合物浓缩并且在高度真空下干燥残余物。

[1115] 产率：39mg(理论的18％)

[1116] LC-MS(方法10)：Rt＝0.81min；MS(ESIpos)：m/z＝290[M+H]+；

[1117] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.90(s，1H)，8.60(s，1H)，8.44(s，1H)，8.27(s，1H)，7.90(s，1H)，3.20(q，2H)，1.35(t，3H).

[1118] 实施例103

[1119] 2-[6-(乙硫基)嘧啶-4-基]-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[1120]

[1121] 35mg(0.1mmol)来自实施例102的化合物用1.5ml氯化氢在二 烷中的4N溶液搅拌。滤掉固体，用叔-丁基甲基醚洗涤两次并且在高度真空下干燥。

[1122] 产率：36mg(理论的90％)

[1123] LC-MS(方法10)：Rt＝0.80min；MS(ESIpos)：m/z＝290[M+H]+；

[1124] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.90(s，1H)，8.62(s，1H)，8.44(s，1H)，8.26(s，1H)，7.91(s，1H)，3.21(q，2H)，1.35(t，3H).

[1125] 实施例104

[1126] 2-(6-{[2-(二 乙 基 氨 基)乙 基]硫 基} 嘧 啶-4-基)-4-(1H-1，2，3- 三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮三氟乙酸盐

[1127]

[1128] 200mg(0.7mmol)来自实施例52A的化合物在氩下悬浮于溶于2mlDMF中。滴加131mg(1.0mmol)2-(二乙基氨基)乙硫醇并且混合物然后冷却到0℃。添加35mg(0.8mmol，在矿物油中60％浓度)氢化钠并且使混合物暖到RT并且在RT下搅拌2.5h。随后缓慢添
加3ml水并且混合物搅拌15min。滤掉沉淀并且浓缩滤液。以这种方法获得的残余物通过制备HPLC提纯(RP38柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。

[1129] 产率：129mg(理论的41％)

[1130] LC-MS(方法10)：Rt＝0.29min；MS(ESIpos)：m/z＝361[M+H]+；

[1131] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 9.42(br.s，1H)，8.91(s，1H)，8.49(s，1H)，8.40(s，1H)，8.37(s，1H)，7.88(s，1H)，3.58-3.51(m，2H)，3.42-3.33(m，2H)，3.28-3.20(m，
4H)，1.30-1.20(m，6H).

[1132] 实施例105

[1133] 2-{6-[4-(2-甲 氧 基 乙 基) 哌 嗪 -1-基 ]嘧 啶 -4-基 }-4-(1H-2，3- 三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[1134]

[1135] 开始向8ml THF中加入500mg(2.4mmol)来自实施例3A的化合物，600mg(2.4mmol)来自实施例31A的化合物和82mg(0.5mmol)对-甲苯磺酸并且混合物在单一模式微波(Emrys Optimizer)中在170℃下反应30min。冷却到RT后，反应残余物直接通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加在水中的0.1％甲酸)。通过添加4ml氯化氢在二 烷中的4N溶液，由此获得的甲酸盐转化为盐酸盐。产物用乙醚洗涤并在真空中干燥。

[1136] 产率：212mg(理论的20％)

[1137] LC-MS(方法11)：Rt＝2.79min；MS(ESIpos)：m/z＝372[M+H]+；

[1138] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 11.28(br.s，1H)，8.61(s，1H)，8.41(s，1H)，8.38(s，1H)，7.90(s，1H)，7.56(s，1H)，4.64-4.43(m，2H)，3.76(t，2H)，3.65-3.51(m，4H)，
3.36-3.30(m，5H)，3.23-3.08(m，2H).

[1139] 实施例106

[1140] 2-[6-(3，5-二甲基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[1141]

[1142] 2.9g(9.6mmol)实施例52A的化合物溶于40ml DMF并且作为储备溶液提供。

[1143] 开始向200μl DMF中加入23mg(0.1mmol)3，5-二甲基哌啶，并且顺序添加400μl(0.1mmol)来自实施例化合物52A的储备溶液和35mg(0.3mmol)碳酸钾。反应混合物在100℃下搅拌16h。为了后处理，悬浮液过滤并且滤液通过制备LC-MS色谱分离(方法
16)。产物组分在真空中浓缩并且干燥残余物。

[1144] 产率：3mg(理论的10％)

[1145] LC-MS(方法16)：Rt＝1.90min；MS(ESIpos)：m/z＝341[M+H]+.

[1146] 在表8中列出的化合物类似于实施例106的操作规程由0.1mmol实施例化合物52A和0.1mmol相应仲胺制备：

[1147] 表8

[1148]

[1149]

[1150]

[1151]

[1152]

[1153]

[1154]

[1155]

[1156]

[1157] 实施例138

[1158] 2-[6-(2，5-二甲基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-基)嘧啶-4-基]-4-(1H-咪唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[1159]

[1160] 2.9g(9.6mmol)实施例化合物53A溶于40ml DMF并且作为储备溶液提供。

[1161] 开始向200μl DMF中加入19mg(0.1mmol)2，5-二甲基-2，5-二氢-1H-吡咯，并且顺序地添加400μl(0.1mmol)来自实施例53A化合物的储备溶液和35mg(0.3mmol)碳酸钾。反应混合物在100℃下搅拌16h。为了后处理，悬浮液过滤并且滤液通过制备的LC-MS色谱分离(方法16)。产物组分在真空中浓缩并且干燥残余物。

[1162] 产率：5mg(理论的16％)

[1163] LC-MS(方法16)：Rt＝1.42min；MS(ESIpos)：m/z＝324[M+H]+.

[1164] 在表9中列出的化合物类似于实施例140的操作规程由0.1mmol实施例化合物53A和0.1mmol相应仲胺制备：

[1165] 表9

[1166]

[1167]

[1168]

[1169]

[1170]

[1171]

[1172]

[1173]

[1174]

[1175]

[1176] 实施例177

[1177] 4-(3-甲基-1，2，4- 二唑-5-基)-2-(6-吗啉-4-基嘧啶-4-基)-1，2-二氢-3H- 吡唑-3-酮三氟乙酸盐

[1178]

[1179] 22mg(0.5mmol，在矿物油中60％浓度)氢化钠在氩下悬浮于1mlDMF中。添加38mg(0.5mmol)1-N′-羟基乙烷酰亚胺酰胺(hydroxyethanimidamide)(“乙酰
胺肟(acetamide oxime)”)并且混合物在50℃下加热，同时搅拌。一小时后，添加
50mg(0.2mmol)来自实施例54A的化合物。反应混合物在80℃下搅拌2h。在每一
种情况下随后两次连续地再次添加22mg(0.5mmol，在矿物油中60％浓度)氢化钠和
38mg(0.5mmol)1-N′-羟基乙烷酰亚胺酰胺在1ml DMF中的混合物，其已经首先在50℃下加热30min，同时搅拌，并且每次添加后反应混合物在80℃下进一步搅拌30min。此后，使混合物冷却并浓缩。残余物溶于含2ml水、乙醇和1N盐酸的混合物中并且通过制备HPLC提纯(RP18柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。

[1180] 产率：12mg(理论的17％)

[1181] LC-MS(方法4)：Rt＝1.35min；MS(ESIpos)：m/z＝330[M+H]+；

[1182] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.58(s，1H)，8.04(s，1H)，7.29(s，1H)，3.85-3.65(m，8H)，2.23(s，3H).

[1183] 实施例178

[1184] 4-(3-甲基-1，2，4- 二唑-5-基)-2-(6-吗啉-4-基嘧啶-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[1185]

[1186] 10mg(0.02mmol)来自实施例177的化合物在RT下用氯化氢在二 烷中的4N溶液搅拌2h。此后，滗析掉溶剂并且固体在叔-丁基甲基醚中顺序地搅拌三次和每次滗析掉溶剂。剩余固体在高度真空下干燥。

[1187] 产率：7mg(理论的86％)

[1188] LC-MS(方法8)：Rt＝1.24min；MS(ESIpos)：m/z＝330[M+H]+；

[1189] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.58(s，1H)，8.08(s，1H)，7.29(s，1H)，4.00-3.50(m，8H)，2.23(s，3H).

[1190] 实施例179

[1191] 2-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐

[1192]

[1193] 开始向15ml二 烷中加入0.3ml(6.6mmol)甲醇。缓慢添加1.3ml(2.7mmol)磷腈碱P2-叔-丁基在THF中的2M溶液，并且混合物随后在RT下搅拌15min。随后添加
350mg(1.3mmol)来自实施例52A的化合物并且混合物在单一模式微波(CEM Explorer)中在150℃下反应2h。然后再添加2ml(49.2mmol)甲醇并且混合物再次在单一模式微波(CEM Explorer)中在相同的条件下反应2h。冷却后，反应混合物浓缩并且残余物通过制备HPLC提纯(RP2.38柱；流动相：乙腈/水梯度，伴随添加0.1％TFA)。合并包含产物的组分并且混合物在旋转蒸发器上浓缩。 在高度真空下干燥残余物并随后添加3ml氯化氢在二 烷中的4N溶液。混合物在RT下搅拌30min并且然后滤掉固体并在高度真空下干燥。

[1194] 产率：60mg(理论的15％)

[1195] LC-MS(方法7)：Rt＝0.82min；MS(ESIpos)：m/z＝260[M+H]+；

[1196] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.80(s，1H)，8.59(s，1H)，8.43(s，1H)，7.90(s，1H)，7.70(s，1H)，4.00(s，3H).

[1197] 实施例180

[1198] 2-[6-(4-吡咯烷-1-基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

[1199]

[1200] 开始向8ml THF中加入481mg(2.3mmol)来自实施例3A的化合物，600mg(2.3mmol)来自实施例30A的化合物和79mg(0.5mmol)对-甲苯磺酸并且混合物在单一模式微波(Emrys Optimizer)中在170℃下反应30min。为了后处理，反应混合物浓缩并且残余物通过制备的HPLC色谱分离(方法17)。冻干产物组分并且此后添加水/乙腈(5∶1)。加热
溶液，用超声处理并且通过Millipore过滤器(0.45μm)过滤。滤液在真空中浓缩至干燥。

[1201] 产率：17mg(理论的2％)

[1202] LC-MS(方法8)：Rt＝0.94min；MS(ESIpos)：m/z＝382[M+H]+；

[1203] 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ ＝ 8.41(s，1H)，8.35(s，1H)，8.07(s，1H)，7.70(s，1H)，7.68(s，1H)，4.43-4.23(m，2H)，3.18-2.88(m，6H)，2.14-2.00(m，2H)，1.92-1.76(m，
4H)，1.56-1.40(m，2H)，1.16(t，1H).

[1204] B.药理学活性的评价

[1205] 根据本发明的化合物的药理学性质可以在以下试验中显示：

[1206] 缩写：

[1207] DMEM DME培养基(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)

[1208] FCS 胎牛血清

[1209] TMB 3，3′，5，5′-四甲基联苯胺

[1210] Tris 三(羟甲基)-氨基甲烷

[1211] 1.测定HIF脯氨酰基4-羟化酶抑制剂的活性和选择性的体外试验

[1212] 1.a)HIF脯氨酰基羟化酶活性的抑制：

[1213] 羟基化的HIF特定地与von Hippel-Lindau蛋白-延伸蛋白(elongin)B-延伸蛋白C配合物(VBC配合物)结合。该相互作用只有当HIF在保存的脯氨酰基基团上
羟基化时才发生。它是生化测定HIF脯氨酰基羟化酶活性的基础。该试验如描述进行
[Oehme F.，Jonghaus W.，Narouz-Ott L.，Huetter J.，Flamme I.，Anal.Biochem.330(1)，
74-80(2004)]：

[1214] 涂有NeutrAvidin HBC(Pierce)的干净的96-孔微量滴定板用阻滞剂酪蛋白培养30分钟。滴定板然后每孔每次用200μl洗涤缓冲液(50mM三(羟甲基)-氨基甲烷，pH7.5，
100mM NaCl，10％(v/v)阻滞剂酪蛋白，0.05％(v/v)吐温20)洗涤三次。在100μl洗涤缓冲液中以400nM的浓度添加肽生物素-DLDLEMLAPYIPMDDDFQL(Eurogentec，4102Seraing，比利时)。该肽作为脯氨酰基羟基化作用的底物并且与微量滴定板结合。培养60分钟后，滴定板用洗涤缓冲液洗涤三次，在阻滞剂酪蛋白中用1mM生物素培养30分钟和然后再次用洗涤缓冲液洗涤三次。

[1215] 为了进行脯氨酰基羟化酶反应，与滴定板结合的肽底物用包含脯氨酰基羟化酶的溶胞产物培养1-60分钟。该反应在100μl反应缓冲液(20mM三(羟甲基)-氨基甲烷，pH7.5，5mM KCl，1.5mM MgCl2，1μM-1mM2-酮戊二酸，10μM FeSO4，2mM抗坏血酸)中在室温下发生。反应混合物还包含不同浓度的要测试的脯氨酰基羟化酶抑制剂。该试验物质优选，然而并非仅仅，以1nM-100μM浓度使用。该反应通过用洗涤缓冲液洗涤滴定板三次停止。

[1216] 为了定量测定脯氨酰基羟基化作用，加入包含来自E.coli的硫氧还蛋白和在80μl结合缓冲液(50mM三(羟甲基)-氨基甲烷，pH7.5，120mMNaCl)中的VBC配合物的融合蛋白。15分钟后，添加10μl来自兔的多元性繁殖系的抗-硫氧还蛋白抗体在结合缓冲液中的溶液。再过30分钟后，添加10μl偶联到辣根过氧化酶的抗-兔免疫球蛋白在结合缓冲液中的溶液。在室温下培养30分钟后，为了除去未-结合的VBC配合物和抗体，滴定板用洗涤缓冲液洗涤三次。为了测定结合的VBC配合物的量，滴定板用TMB培养15分钟。
通过添加100μl1M硫酸结束显色反应。通过在450nm测定光密度测定结合的VBC配合物
的量。它与在肽底物中的羟基化的脯氨酸的量成正比。

[1217] 或者，偶联到铕(Perkin Elmer)上的VBC配合物可以用于检测脯氨酰基羟基化。35
在这种情况下，结合的VBC配合物的量通过荧光相对于时间测定。用[ S]-甲硫氨酸标记的VBC配合物也是可能的。为此，放射性标记的VBC配合物可以通过在网织红细胞裂解物中体外转录-转译制备。

[1218] 在该试验中，实施方案实施例用≤30μM的IC50值抑制HIF脯氨酰基羟化酶的活性:对于实施方案实施例典型的IC50值在下表10中再现:

[1219] 表10

[1220]实施例号 IC50[μM]
5 1.2
7 0.34
10 0.5
12 0.75
17 0.56
43 1.8
45 0.78
50 1.4
55 2
60 1.4
61 1.1
62 0.05
72 0.49
83 1.9
85 0.19
91 2.8
101 1.7
103 0.35
113 0.74
129 0.36
166 0.69

[1221] 1.b)细胞的体外功能试验:

[1222] 根据本发明的化合物的活性借助于重组细胞系(recombinant cell line)定量。该细胞最初来源于人肺癌细胞系(A549，ATCC:American Type Culture Collection，Manassas，VA20108，美国)。该试验细胞系以稳定的方式用包含Photinus pyTalis荧光素酶(在以下中称为荧光素酶)的指示基因的媒介物在人造最小量的促进剂(promoter)
控制下转染。 最小量的促进剂包括两种依赖缺氧的TATA框的上游成分[Oehme F.，
Ellinghaus P.，Kolkhof P.，Smith T.J.，Ramakrishnan S.，Hütter J.，Schramm M.，Flamme I.，Biochem.Biophys.Res.Commun.296(2)，343-9(2002)]。在缺氧作用下(例如在
1％氧存在的条件下培养24小时)或者在非选择性的二氧化酶抑制剂作用下(例如去铁敏以100μM浓度，氯化钴以100μM浓度或者N-草酰氨基乙酸二乙基酯以1mM浓度)，该试验细胞系产生荧光素酶，其可以被检测并且借助于合适的生物发光试剂(例如
Luciferase Assay System，Promega Cor-poration，Madison，WI53711，美国)和合适的光度计定量。

[1223] 试验步骤：试验前那一天，在384-或者1,536-孔微量滴定板中以准确计算量的培养基(DMEM，10％FCS，2mM谷氨酰胺)放上细胞并且保存在细胞培养箱(96％大气湿度，5％v/v CO2，37℃)中。在试验那天，向分等级浓度的培养基中添加试验物质。作为阴性对照没有向细胞中分批地添加试验物质。作为测定细胞对于抑制剂敏感性的阳性对照，以100μM的最后浓度添加例如去铁敏。试验物质转入微量滴定板的孔六-24小时，在光度计中测定产生的光信号。借助于测定值绘制剂量/效果关系，其作为测定半-最大量活性浓度(称为EC50值)的基础。

[1224] 1.c)细胞的基因表达修饰的体外功能试验：

[1225] 为了研究用试验物质处理后人细胞系中特定的mRNA表达的修饰，以下细胞系在6-或者24-孔滴定板上培养：人肝癌细胞(HUH，JCRB Cell Bank，日本)，人胚胎肾成纤维细胞(HEK/293，ATCC，Manassas，VA20108，美国)，人宫颈癌细胞(HeLa，ATCC，Manassas，VA20108，美国)，人脐静脉内皮细胞(HUVEC，Cambrex，East Rutherford，New Jersey07073，美国)。添加该试验24小时后，细胞用磷酸缓冲盐水洗涤并且由它们使用合适的方法(例如 试剂，Invitrogen GmbH，76131Karlsruhe，德国)获得总RNA。

[1226] 对于一般的分析实验，1μg以这种方法获得的每一个总RNA用DNase I消化并且使用合适的逆转录酶反应(ImProm II Reverse Transcription System，Promega Corporation，Madison，WI53711，USA)转译成互补DNA(cDNA)。以这种方法获得的2.5％cDNA批次用于聚合酶链式反应的每种情况。研究的基因的mRNA的表达水平通过 实时定量的聚合酶链式反应[TaqMan-PCR；Heid C.A.，Stevens J.，Livak K.J.，Williams P.M.，Genome Res.6(10)，986-94(1996)]使用ABI Prism7700序列探测仪(Applied Biosystems，Inc.)研究。这里所用的引物探针组合通过Primer Express1.5Software(Applied
Biosystems，Inc.)来产生。特定地，研究红细胞生成素，carboanhydrase IX，乳酸脱氢酶A和脉管内皮细胞生长因子的mRNA。

[1227] 根据本发明的物质导致对于在人来源的细胞中的缺氧诱发基因的mRNA明显的剂量-依赖的增加。

[1228] 2.检测在心血管系统中作用的体内试验

[1229] 2.a)基因表达修饰的体内试验：

[1230] 溶于合适的溶剂的该试验化合物给小鼠或者鼠，通过胃管口服，腹膜内或者静脉内服用。一般的剂量是0.1，0.5，1，5，10，20，50，100和300mg物质每kg体重和服用。对照动物只接受溶剂。试验物质服用后4，8或者24小时，动物用服用过量异氟烷处死并且除去要研究的随后的颈和器官的骨折。器官的一部分在液氮中休克-冷冻。由器官部分如在B.1.a)下描述获得总RNA并且其被转译成cDNA。要研究的基因的mRNA的表达水平通过实时定量的聚合酶链式反应[TaqMan-PCR；Heid C.A.，Stevens J.，Livak K.J.，Williams P.M.，Genome Res.6(10)，986-94(1996)]使用ABI Prism7700序 列探测仪 (Applied Biosystems，Inc.)研究。

[1231] 根据本发明的物质导致口服或者肠胃外投药法后与安慰剂对照比较对于在肾中的红细胞生成素的mRNA明显的剂量-依赖的增加。

[1232] 2.b)血清中红细胞生成素水平的测定：

[1233] 在合适的溶剂中的该试验物质给小鼠或者鼠，腹膜内服药或者口服，每日一次或者两次。一般的剂量是0.1，0.5，1，5，10，20，50，100和300mg物质每kg体重和服用。安慰剂对照动物只接受溶剂。服用前和最后服用物质后四小时，由动物由隐静脉(retroorbital)静脉丛或者尾部静脉在短期麻醉下采50μl血。通过添加锂肝素使血不凝固。通过离心获得血浆。在血浆中红细胞生成素的含量借助于红细胞生成素-ELISA( mouseEpo Immunoassay，R&D Systems，Inc.， Minneapolis，美国)根据该厂家的说明测定。测定值借助于小鼠红细胞生成素记录的参考尺寸转化为pg/ml。

[1234] 根据本发明的物质导致口服和肠胃外投药法后与初始值和安慰剂对照比较对于血浆红细胞生成素明显的剂量-依赖的增加。

[1235] 2.c)周围血液细胞组成的测定：

[1236] 在合适的溶剂中的该试验物质每日一次或者两次给小鼠或者鼠腹膜内或者口服几日。一般的剂量是例如0.1，0.5，1，5，10，20，50，100和300mg物质每kg体重和服用。对照动物只接受溶剂。在研究结尾，由动物由睚的静脉丛或者尾部静脉在短期麻醉下采血并且通过添加柠檬酸钠使其不凝固。在合适的电子测量仪器中测定血样中红血球，白血球和血小板的浓度。通过在每一种情况下1,000红血球的显微镜拍摄借助于用适合于该目的的着色剂溶液(KABE Labortechnik，Nümbrecht)着色的血涂片测定网织红细胞的浓度。为了测定血细胞比容，由隐静脉静脉丛通过血细胞比容毛细管采血并且在适合于该目的的离心机中毛细管离心后人工读出血细胞比容值。

[1237] 根据本发明的物质导致口服和肠外肠胃外投药法后与初始值和安慰剂对照比较对于血细胞比容，红血球数和网织红细胞明显的剂量-依赖的增加。

[1238] 3.溶解性的测定

[1239] 开始溶液(初始溶液)的制备：

[1240] 准确称出至少1.5mg试验物质进入具有装配螺钉帽和隔膜的Wide Mouth10mmScrew V-Vial(来自Glastechnik GmbH，物品编号8004-WM-H/V15μ)，添加
DMSO以产生50mg/ml的浓度并且混合物涡旋30分钟。

[1241] 校准溶液的制备：

[1242] 在具有96孔的1.2ml Deep Well Plate(DWP)中使用液体操作机器人进行要求的移液步骤。使用的溶剂是乙腈/水8∶2的混合物。

[1243] 用于校准溶液(储备溶液)的初始溶液的制备：向10μl初始溶液(浓度＝600μg/ml)中添加833μl溶剂混合物，并且混合物均化。对于每种试 验物质，在分开的DWP中制备1∶100稀释液，并且稀释液被进一步均化。

[1244] 校准溶液5(600ng/ml)：向30μl储备溶液中添加270μl溶剂混合物，并且混合物被均化。

[1245] 校准溶液4(60ng/ml)：向30μl校准溶液5中添加270μl溶剂混合物，并且混合物被均化。

[1246] 校准溶液3(12ng/ml)：向100μl溶液4中添加400μl溶剂混合物，并且混合物被均化。

[1247] 校准溶液2(1.2ng/ml)：向30μl校准溶液3中添加270μl溶剂混合物，并且混合物被均化。

[1248] 校准溶液1(0.6ng/ml)：向150μl校准溶液2中添加150μl溶剂混合物，并且混合物被均化。

[1249] 样品溶液的制备：

[1250] 在具有96孔的1.2ml DWP中使用液体操作机器人进行要求的移液步骤。向10.1μl储备溶液中添加1000μl PBS缓冲液pH6.5(称出PBS缓冲液pH6.5：61.86g氯化
钠，39.54g磷酸二氢钠和83.35g1N氢氧化钠水溶液进入1升容量瓶，该瓶充满水并且混合物搅拌大约1小时。由此溶液，向5升容量瓶中添加500ml，并且该瓶充满水。使用1N氢氧化钠水溶液，pH被调整到6.5。)

[1251] 实验操作：

[1252] 在具有96孔的1.2ml DWP中使用液体操作机器人进行要求的移液步骤。使用温度可调振动器，用这样的方式制备的样品溶液在20℃和1400rpm振动24小时。由此溶液，在每一种情况下除去180μl下并且转入Beckman polyallomer离心管。该溶液在大约223000x g离心1小时。由每种样品溶液，除去100μl上清液并且用PBS缓冲液6.5稀释1∶10和1∶1000。

[1253] 分析：

[1254] 样品通过HPLC/MS-MS分析。使用该试验化合物的五点校准曲线进行量化。溶解性用mg/l表示。分析顺序：1)空白(溶剂混合物)；2) 校准溶液0.6ng/ml；3)校准溶液1.2ng/ml；4)校准溶液12ng/ml；5)校准溶液60ng/ml；6校准溶液600ng/ml；7)空白(溶剂混合物)；8)样品溶液1∶1000；7)样品溶液1∶10。

[1255] HPLC/MS-MS方法

[1256] HPLC：Agilent1100，定量泵(G1311A)，自动取样器CTC HTS PAL，脱气装置(G1322A)和柱恒温器(G1316A)；柱：Oasis HLB20mm x2.1mm，25μ；温度：40℃；流动相A：
水+0.5ml甲酸/l；流动相B：乙腈+0.5ml甲酸/l；流速：2.5ml/min；停止时间1.5min；梯度：0min95％A，5％B；坡度(ramp)：0-0.5min5％A，95％B；0.5-0.84min5％A，95％B；坡度：0.84-0.85min95％A，5％B；0.85-1.5min95％A，5％B。

[1257] MS/MS：WATERS Quattro Micro Tandem MS/MS；Z-Spray API界面；HPLC-MS初始分离器1∶20；以ESI模式测定。

[1258] C.对于药物组合物的实施方案实施例

[1259] 根据本发明的化合物可以转化为如下药物制剂：

[1260] 片剂：

[1261] 组成：

[1262] 100mg根据本发明的化合物，50mg乳糖(一水合物)，50mg玉米淀粉(国产的)，10mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP25)(BASF，Ludwigshafen，德国)和2mg硬脂酸镁。

[1263] 片剂重量212mg。直径8mm，曲率半径12mm。

[1264] 制备：

[1265] 根据本发明的化合物，乳糖和淀粉的混合物用5％浓度PVP在水中的溶液(w/w)造粒。干燥后，颗粒与硬脂酸镁混合5分钟。混合物用常用的压片机压制(对于片剂形式参见上面)。15kN的压力用作压制的推荐值。