一种三唑并嘧啶类HIV-1逆转录酶抑制剂及其制备方法与应用

摘要

本发明涉及一种三唑并嘧啶类HIV-1逆转录酶抑制剂及其药学上可接受的盐、酯或前药，其制备方法及含有一个或多个此类化合物的组合物在制备抗艾滋病药物中的应用。。

权利要求

1.一种三唑并嘧啶类HIV-1逆转录酶抑制剂，或其药学上可接受的盐，其特征在于，结构通式Ⅰ或Ⅱ如下：其中，

X为NH或O；

Ar为取代苯基，选自2,4,6-三甲基苯基、2,4,6-三氯苯基、2,4,6-三溴苯基、

2,4,6-三氟苯基、2,6-二溴-4-甲基苯基、2,6-二甲基-4-溴苯基、2,6-二甲基-4-氰基苯基、2,6-二甲基-4-氯苯基、2,6-二甲苯基、2,6-二氯苯基或2,6-二甲氧苯基；

R1为CN,Me,OMe,Cl或NO2。

2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，是下列化合物之一：

4-((5-(2,6-二甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氨基)苄腈(WL-a1)、

4-((5-(2,4,6-三氯苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氨基)苄腈(WL-a2)、

4-((5-(4-溴-2,6-二甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氨基)苄腈(WL-a3)、

4-((5-(2,4,6-三氟苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氨基)苄腈(WL-a4)、

4-((5-(2,4,6-三甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氨基)苄腈(WL-a5)、

4-((7-(2,6-二甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈(WL-b1)、

4-((7-(4-溴-2,6-二甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈(WL-b2)、

4-((7-(2,4,6-三氯苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈(WL-b3)、

4-((7-(2,4,6-三甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈(WL-b4)、

4-((7-(2,6-二氯苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈(WL-b5)、

4-((5-((4-氰苯基)氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氧基)-3,5-二甲基苄腈(WL-b6)、

7-(三甲苯氧基)-N-(4-硝基苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺(WL-b7)、N-(4-氯苯基)-7-(三甲氧苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺(WL-b8)、

4-((7-(2,4,6-三溴氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈(WL-b9)、

7-(三甲氧苯基)-N-(4-甲苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺(WL-b10)、

4-((7-(2,4,6-三甲苯胺基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈(WL-b11)

4-((7-(2,6-二溴-4-甲基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈(WL-b12)、

7-(三甲氧苯基)-N-(4-甲氧基苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺(WL-b13)、

4-((7-(4-氯-2,6-二甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈(WL-b14)或

4-((7-((2,6-二甲苯基)氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈(WL-b15)。

3.如权利要求1所述的化合物的制备方法，步骤如下：

以氨基三唑为起始原料，与丙二酸二乙酯环合生成三唑并嘧啶母环1，然后经过氯代得到中间体2；通式Ⅰ与Ⅱ分别按照各自的合成路线进行两个芳环的取代反应，生成通式Ⅰ或Ⅱ目标化合物；

合成路线如下：

其中，Ar、R1、X的定义同上通式Ⅰ或Ⅱ所述；

试剂和条件如下：i)丙二酸二乙酯/钠/乙醇，回流；ii)三氯氧磷，95℃；iii)取代苯胺/乙醇，室温；iv)取代苯酚/无水碳酸钾/N,N-二甲基甲酰胺，85℃；v)取代苯酚或取代苯胺/无水碳酸钾/N,N-二甲基甲酰胺，室温；vi)苯胺，150-160℃。

4.如权利要求3所述的化合物的制备方法，步骤如下：

(1)首先称取1.37g金属Na，与10mL无水EtOH反应制得NaOEt4.05g；将氨基三唑

5.0g、丙二酸二乙酯9.52g以及制得的NaOEt 4.05g加入到50mL无水EtOH中，搅拌下回流

12h；蒸除残留的乙醇，加入冰水，用乙酸乙酯萃取三次，除去其中的丙二酸二乙酯；收集水层，用浓HCl酸化至pH＝1；静置于冰浴中析出大量白色固体，过滤，水洗，干燥得中间体1；

(2)将制得的中间体1 6.08g加入到57mL POCl3中，在95℃下搅拌回流12h；蒸除过量的POCl3，冷却后加入碎冰，搅拌除去残留POCl3；加入水和二氯甲烷进行萃取，收集有机层；

以Na2SO4干燥，浓缩，得中间体2；

(3)将中间体2 2.5g与对氰基苯胺1.56g加入到35mL无水EtOH中，室温下搅拌反应

6h；将所得反应液过滤，醇洗，收集固体，干燥；得中间体3；

(4)将一个当量的不同取代的苯酚和一个当量的K2CO3加入到适量的DMF中，室温下搅拌5min，然后加入一个当量的中间体3，150℃下反应8-12h，冷却至室温；加入水和乙酸乙酯萃取，收集有机相；加入Na2SO4干燥，悬蒸得粗品；用EA:PE 1:2柱层析得到通式Ⅰ化合物；

(5)分别将2.7mmol不同的取代苯酚或苯胺、5.4mmol K2CO3加入到含有3mmol中间体2的DMF15mL中，30℃下搅拌，反应6-12h，TLC检测至原料点消失；加入水以析出沉淀，水洗，干燥，得粗产物4，中间体4不需纯化，直接投入到下一步反应中；

(6)将以上所得的化合物1.5mmol分别与对氰基苯胺5.25mmol混合，缓慢加热到

150℃，搅拌2h；加入DMF溶解，硅胶拌样，用EA:PE 1:2柱层析得到通式Ⅱ化合物。

5.权利要求1或2所述化合物在制备抗艾滋病药物中的应用。

6.一种抗艾滋病药物组合物，包含权利要求1或2所述化合物或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受载体或赋形剂。

说明书

一种三唑并嘧啶类HIV-1逆转录酶抑制剂及其制备方法与

应用

技术领域

[0001] 本发明涉及一种衍生物及其制备方法与应用，具体涉及一种三唑并嘧啶类HIV-1逆转录酶抑制剂及其制备方法与应用，属于医药技术领域。

背景技术

[0002] 艾滋病亦称获得性免疫缺陷综合征（Acquired immunodeficiency syndrome，AIDS），是由艾滋病的病原体即人类免疫缺陷病毒（Human immumodeficiency virus，HIV）引起的以T细胞免疫功能缺陷为主的一种传染性疾病。自20世纪80年代被发现以来，艾滋病已经成为严重危害人类健康的重大传染性疾病之一。目前临床上最常用的防治艾滋病的方法为高效抗逆转录病毒疗法(Highly Active Antiretroviral Therapy，HAART)，此疗法的实施虽然大大提高了HIV病毒的抑制效率，但是由于HIV病毒极易产生变异以及长期服药的毒性问题很大程度上限制了该疗法的应用。因此研究并开发新型的抗耐药性艾滋病治疗药物依然具有十分重要的意义。非核苷类逆转录酶抑制剂(Non-nucleoside Reverse Transcriptase Inhibitors，NNRTIs)作为HAART的重要组成部分，具有活性高、选择性强、毒性低等优点，一直以来是抗艾滋病药物研究的热点。但是由于NNRTIs结合位点的氨基酸容易发生突变，导致耐药毒株的产生而使得该类药物迅速丧失临床效价。因此研发新型、高效、抗耐药的NNRTIs是目前抗艾滋病药物研究的重要方向。

[0003] 第二代NNRTIs由于分子的柔韧性使得它们与RT结合时能够通过扭转（摆动）和复位（微动）适应靶酶的突变，因而具有良好的抗耐药性。其中，上市药物依曲韦林和利匹韦林作为第二代NNRTIs的典型代表，受到了广泛的关注，但是由于这两个药物存在口服利用度差或者副作用等问题，因此需要对其进行进一步的结构改造以克服以上问题。对于该类化合物的结构改造产生了一系列的DAPY类似物，表现出了良好的抗野生型与变异型HIV-1活性。

[0004] 其中，五元并六元杂环类DAPY类似物表现出了极佳的抗HIV-1活性，且具有十分优异的体内性质。化合物RDEA-640和化合物RDEA-427分别处于临床研究和临床前研究阶段，研究数据显示，REDA-427和REDA-640对野生型HIV-1病毒EC50分别为0.9和0.8nM。另外，在人血清中测试中，因病毒变异而对RDEA-427和RDEA-640活性造成的影响远远低于依法韦仑。值得注意的是，相比于依法韦仑和利匹韦林，RDEA-427和RDEA-640不易诱导细胞色素CYP3A4的产生。同时，RDEA-427在肝脏微粒体中有更好的稳定性且不易发生共价结合。

[0005] 因此，按照电子等排体原理对五元并六元环进行变换有望得到了多种DAPY类似物，对发现广谱高效、体内活性良好且具有自主知识产权的抗HIV药物具有重要的意义。

发明内容

[0006] 针对现有技术的不足，本发明提供了一种三唑并嘧啶类HIV-1逆转录酶抑制剂，本发明还提供该化合物的制备方法及应用。

[0007] 本发明的技术方案如下：

[0008] 一、三唑并嘧啶类HIV-1逆转录酶抑制剂

[0009] 一种三唑并嘧啶类HIV-1逆转录酶抑制剂，或其药学上可接受的盐、酯或前药，结构通式Ⅰ或Ⅱ如下：

[0010]

[0011] 其中，

[0012] X为NH或O；

[0013] Ar为取代苯基，选自2,4,6-三甲基苯基、2,4,6-三氯苯基、2,4,6-三溴苯基、2,4,6-三氟苯基、2,6-二溴-4-甲基苯基、2,6-二甲基-4-溴苯基、2,6-二甲基-4-氰基苯基、2,6-二甲基-4-氯苯基、2,6-二甲苯基、2,6-二氯苯基或2,6-二甲氧苯基；

[0014] R1为CN,Me,OMe,Cl或NO2。

[0015] 优选的，上述通式Ⅰ或Ⅱ的化合物是下列之一：

[0016] 通式Ⅰ优选：

[0017] 4-((5-(2,6-二甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氨基)苄腈（WL-a1）、

[0018] 4-((5-(2,4,6-三氯苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氨基)苄腈（WL-a2）、

[0019] 4-((5-(4-溴-2,6-二甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氨基)苄腈（WL-a3）、

[0020] 4-((5-(2,4,6-三氟苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氨基)苄腈（WL-a4）或

[0021] 4-((5-(2,4,6-三甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氨基)苄腈（WL-a5）。

[0022] 通式Ⅱ优选：

[0023] 4-((7-(2,6-二甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b1）、

[0024] 4-((7-(4-溴-2,6-二甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b2）、

[0025] 4-((7-(2,4,6-三氯苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b3）、

[0026] 4-((7-(2,4,6-三甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b4）、

[0027] 4-((7-(2,6-二氯苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b5）、

[0028] 4-((5-((4-氰苯基)氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氧基)-3,5-二甲基苄腈（WL-b6）、

[0029] 7-(三甲苯氧基)-N-(4-硝基苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺（WL-b7）、

[0030] N-(4-氯苯基)-7-(三甲氧苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺（WL-b8）、[0031] 4-((7-(2,4,6-三溴氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b9）、

[0032] 7-(三甲氧苯基)-N-(4-甲苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺（WL-b10）、[0033] 4-((7-(2,4,6-三甲苯胺基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b11）

[0034] 4-((7-(2,6-二溴-4-甲基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b12）、

[0035] 7-(三甲氧苯基)-N-(4-甲氧基苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺（WL-b13）、

[0036] 4-((7-(4-氯-2,6-二甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b14）或

[0037] 4-((7-((2,6-二甲苯基)氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b15）。

[0038] 二、三唑并嘧啶类HIV-1逆转录酶抑制剂的制备方法

[0039] 一种三唑并嘧啶类HIV-1逆转录酶抑制剂的制备方法，以氨基三唑为起始原料，与丙二酸二乙酯环合生成三唑并嘧啶母环1，然后经过氯代得到中间体2；通式Ⅰ与Ⅱ分别按照各自的合成路线进行两个芳环的取代反应，生成通式Ⅰ或Ⅱ目标化合物；

[0040] 合成路线如下：

[0041]

[0042] 其中，Ar、R1、X的定义同上通式Ⅰ或Ⅱ所述；

[0043] 试剂和条件如下：i)丙二酸二乙酯/钠/乙醇，回流；ii)三氯氧磷，95℃；iii)取代苯胺/乙醇，室温；iv)取代苯酚/无水碳酸钾/N,N-二甲基甲酰胺，85℃；v)取代苯酚或取代苯胺/无水碳酸钾/N,N-二甲基甲酰胺，室温；vi)苯胺，150-160℃。

[0044] 本发明更为详细的，一种三唑并嘧啶类HIV-1逆转录酶抑制剂的制备方法，步骤如下：

[0045] (1)首先称取1.37g金属Na，与10mL无水EtOH反应制得NaOEt4.05g。将氨基三唑5.0g、丙二酸二乙酯9.52g以及制得的NaOEt4.05g加入到50mL无水EtOH中，搅拌下回流12h；蒸除残留的乙醇，加入冰水，用乙酸乙酯萃取三次，除去其中的丙二酸二乙酯；收集水层，用浓HCl酸化至pH=1；静置于冰浴中析出大量白色固体，过滤，水洗，干燥得中间体1；

[0046] (2)将制得的中间体16.08g加入到57mL POCl3中，在95℃下搅拌回流12h；蒸除过量的POCl3，冷却后加入碎冰，搅拌除去残留POCl3；加入水和二氯甲烷进行萃取，收集有机层；以Na2SO4干燥，浓缩，得中间体2；

[0047] (3)将中间体22.5g与对氰基苯胺1.56g加入到35mL无水EtOH中，室温下搅拌反应6h；将所得反应液过滤，醇洗，收集固体，干燥；得中间体3；

[0048] (4)将一个当量的不同取代的苯酚和一个当量的K2CO3加入到适量的DMF中，室温下搅拌5min，然后加入一个当量的中间体3，150℃下反应8-12h，冷却至室温；加入水和乙酸乙酯萃取，收集有机相；加入Na2SO4干燥，悬蒸得粗品；用EA:PE1:2柱层析得到通式Ⅰ化合物；

[0049] (5)分别将2.7mmol不同的取代苯酚或苯胺、5.4mmol K2CO3加入到含有3mmol中间体2的DMF15mL中，30℃下搅拌，反应6-12h，TLC检测至原料点消失；加入水以析出沉淀，水洗，干燥，得粗产物4，中间体4不需纯化，直接投入到下一步反应中；

[0050] (6)将以上所得的化合物1.5mmol分别与对氰基苯胺5.25mmol混合，缓慢加热到150℃，搅拌2h；加入DMF溶解，硅胶拌样，用EA:PE1:2柱层析得到通式Ⅱ化合物。

[0051] 三、含有本发明化合物的药物组合物

[0052] 一种抗艾滋病药物组合物，包含本发明所述的化合物和一种或多种药学上可接受载体或赋形剂。

[0053] 四、应用

[0054] 本发明所述的化合物作为抗HIV药物的应用。具体地，作为HIV-1非核苷类逆转录酶抑制剂用于制备抗艾滋病药物。

[0055] 下面结合实验例对本发明做进一步说明，但不限于此。

[0056] 实验例：体外抗HIV-1活性实验

[0057] 由于HIV感染某些细胞系细胞（C8166,MT-4等）后，在一定时间内（5-7天）HIV感染细胞会发生病变，因此向HIV-1感染细胞悬浊液加入适当浓度的待检化合物溶液，经过一段时间（5-7天）的培养后使用MTT或XTT方法测定存活的细胞数，得到50%细胞免于细胞病变的药物浓度（EC50）即可得出目标化合物的抗HIV的活性。同时还可以测定化合物对未感染细胞的细胞毒性，半数致死浓度CC50和化合物的选择性指数SI。

[0058] 本发明以奈韦拉平（NVP）和依法韦仑（EFV）为对照，对合成的20个化合物进行了抗HIV-1,HIV-2活性筛选。活性结果见表1、表2。

[0059] 表1本发明方法合成的目标化合物通式Ⅰ（WL-a1-5）,通式Ⅱ（WL-b1-15）的化学结构

[0060]

[0061]

[0062] 表2本发明方法合成的目标化合物WL-a1-5,WL-b1-15的抗HIV活性结果[0063]

[0064]

[0065] 注：aEC50:保护50%感染HIV-1的细胞免于细胞病变的化合物浓度；bCC50:使50%c未感染HIV-1的细胞发生病变的浓度；SI：选择性常数（CC50/EC50）。

[0066] 上述实验结果表明：合成的化合物大多数具有较好的抗野生型HIV-1活性，例如 化 合 物 WL-a5（EC50=0.073μM，SI=1449）、WL-b4（EC50=0.051μM，SI=3198）、WL-b8（EC50=0.053μM，SI=864）、WL-b10（EC50=0.072μM，SI=649）、WL-b11（EC50=0.021μM，SI=8986）、WL-b12（EC50=0.052μM，SI=3618）等。以上化合物均表现出了优于阳性药物奈韦拉平和依法韦仑的抗野生型HIV-1毒株活性，且具有较高的选择性常数。

具体实施方式

[0067] 下面结合实施例对本发明做进一步说明，但本发明所保护范围不限于此。实施例中所用原料均为常规试剂，市购产品。

[0068] 实施例1.4-((5-(2,4,6-三甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氨基)苄腈（WL-a1）的制备

[0069] 将氨基三唑5.0g（59.5mmol）、丙二酸二乙酯9.52g（59.5mmol）以及NaOEt4.05g（59.5mmol）（事先由Na和EtOH制得）加入到50mL无水EtOH中，搅拌，回流12h。蒸除残留的乙醇，加入冰水，用乙酸乙酯萃取三次，除去其中的丙二酸二乙酯。收集水层，用浓HCl酸化至pH=1。静置于冰浴中析出大量白色固体，过滤，水洗，干燥得中间体1；

[0070] 将制得的中间体16.08g(40mmol)加入到57mL（600mmol）POCl3中，在95℃下搅拌回流12h。蒸除过量的POCl3，冷却后加入碎冰，搅拌除去残留POCl3。加入H2O和CH2Cl2进行萃取，收集有机层。以Na2SO4干燥，浓缩，得中间体2；将中间体22.5g（13.2mmol）与对氰基苯胺1.56g（13.2mmol）加入到35mL无水EtOH中，室温下搅拌反应6h。将所得反应液过滤，醇洗，收集固体，干燥。得中间体3；将2mmol的二甲基苯酚和4mmol的K2CO3加入到适量的DMF中，室温下搅拌5min，然后加入2mmol的中间体3，150℃反应8-12h，冷却至室温。加入水和乙酸乙酯萃取，收集有机相。加入Na2SO4干燥，悬蒸的粗品。用EA:PE1:2柱层析得到终产物WL-a1，产物为白色固体，0.1g,总产率8%，mp:298-300℃。

[0071] ESIMS:m/z357.4(M+1).

[0072] IR(KBr,cm-1):3303(NH),2223(CN).

[0073] 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:10.15(s,1H,NH),8.43(s,1H,triazole-H),7.97(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),7.81(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),7.32(m,3H,OPh-H),5.68(s,1H,pyrimidine-H),2.18(s,6H,CH3).

[0074] 实施例2.4-((5-(2,4,6-三氯苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氨基)苄腈（WL-a2）的制备

[0075] 制备方法如实施例1，所不同的是：将2mmol的三氯苯酚和4mmol的K2CO3加入到适量的DMF中，室温下搅拌5min，然后加入2mmol的中间体3，150℃反应8-12h。产物为白色固体,总产率7%，mp:258-260℃。

[0076] ESIMS:m/z431.3(M+1),433.4(M+3),435.3(M+5),437.3(M+7).

[0077] IR(KBr,cm-1):3303(NH),2231(CN).

[0078] 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:10.16(s,1H,NH),8.48(s,1H,triazole-H),8.13(s,2H,OPh-H),7.96(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),7.84(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),5.91(s,1H,pyrimidine-H).

[0079] 实施例3.4-((5-(4-溴-2,6-二甲基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氨基)苄腈（WL-a3）的制备

[0080] 制备方法如实施例1，所不同的是：将2mmol的4-溴-2,6-二甲基苯酚和4mmol的K2CO3加入到适量的DMF中，室温下搅拌5min，然后加入2mmol的中间体3，150℃下反应8-12h。产物为白色固体,总产率8%，mp:285℃（dec）。

[0081] ESIMS:m/z435.4(M+1),437.4(M+3).

[0082] IR(KBr,cm-1):3358(NH),2218(CN).

[0083] 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:10.13(s,1H,NH),8.44(s,1H,triazole-H),7.98(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),7.82(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),7.60(s,2H,OPh-H),5.71(s,1H,pyrimidine-H),2.18(s,6H,CH3).

[0084] 实施例4.4-((5-(2,4,6-三氟苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氨基)苄腈（WL-a4）的制备

[0085] 制备方法如实施例1，所不同的是：将2mmol的2,4,6-三氟苯酚和4mmol的K2CO3加入到适量的DMF中，室温下搅拌5min，然后加入2mmol的中间体3，150℃反应8-12h。产物为白色固体，总产率4%，mp:248-251。

[0086] ESIMS:m/z383.4(M+1).

[0087] IR(KBr,cm-1):3434(NH),2229(CN).

[0088] 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:10.85(s,1H,NH),8.53(s,1H,triazole-H),7.96(s,2H,OPh-H),7.75(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),7.50(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),6.54(s,1H,pyrimidine-H).

[0089] 实施例5.4-((5-(2,4,6-三甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氨基)苄腈（WL-a5）的制备

[0090] 制备方法如实施例1，所不同的是：将2mmol的2,4,6-三甲苯酚和4mmol的K2CO3加入到适量的DMF中，室温下搅拌5min，然后加入2mmol的中间体3，150℃反应8-12h。产物为白色固体，总产率8%，mp:246-248。

[0091] ESIMS:m/z371.4(M+1).

[0092] IR(KBr,cm-1):3303(NH),2223(CN).

[0093] 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:10.14(s,1H,NH),8.43(s,1H,triazole-H),7.98(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),7.81(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),7.12(s,2H,OPh-H),5.70(s,1H,pyrimidine-H),2.33(s,3H,CH3),2.14(s,6H,CH3).

[0094] 实施例6.4-((7-(2,6-二甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b1）的制备

[0095] 将二甲苯酚（2.7mmol）、K2CO3（5.4mmol）加入到含有中间体2（3mmol）的DMF15mL中，30℃下搅拌，反应6-12h，TLC检测至原料点消失。加入水以析出沉淀，水洗，干燥，得粗产物4，中间体4不需纯化，直接投入到下一步反应中；将以上所得的化合物1.5mmol分别与对氰基苯胺5.25mmol混合，缓慢加热到150℃，搅拌2h。加入DMF溶解，硅胶拌样，柱分离（EA:PE=1:2）。产物为白色固体0.267g，总产率50%，mp:290-293℃。

[0096] ESIMS:m/z375.3(M+1).

[0097] IR(KBr,cm-1):3295(NH),2224(CN).

[0098] 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:10.14(s,1H,NH),8.43(s,1H,triazole-H),7.97(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),7.81(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),7.34(m,3H,OPh-H),5.68(s,1H,pyrimidine-H),2.18(s,6H,CH3).

[0099] 实施例7.4-((7-(4-溴-2,6-二甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b2）的制备

[0100] 制备方法如实施例6，所不同的是：该反应中取代苯酚换做4-溴-2,6-二甲基苯酚。产物为白色固体，总产率46%，mp:285-288℃。

[0101] ESIMS:m/z435.6(M+1),437.6(M+3).

[0102] IR(KBr,cm-1):3358(NH),2218(CN).

[0103] 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:10.11(s,1H,NH),8.43(s,1H,triazole-H),7.97(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),7.82(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),7.60(s,2H,OPh-H),5.71(s,1H,pyrimidine-H),2.19(s,6H,CH3).

[0104] 实施例8.4-((7-(三氯苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b3）的制备

[0105] 制备方法如实施例6，所不同的是：该反应中取代苯酚换做2,4,6-三氯苯酚。产物为白色固体，总产率45%，mp:246-252℃。

[0106] ESIMS:m/z431.2(M+1),433.3(M+3),435.3(M+5),437.3(M+7).

[0107] IR(KBr,cm-1):3323(NH),2231(CN).

[0108] 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:10.20(s,1H,NH),8.49(s,1H,triazole-H),8.13(s,2H,OPh-H),7.97(d,2H,J=8.6Hz,Ph-H),7.84(d,2H,J=8.6Hz,Ph-H),5.93(s,1H,pyrimidine-H).

[0109] 实施例9.4-((7-(三甲苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b4）的制备

[0110] 制备方法如实施例6，所不同的是：该反应中取代苯酚换做三甲苯酚。产物为白色固体，总产率70%，mp:255-258℃。

[0111] ESIMS:m/z371.4(M+1),393.3(M+23).

[0112] IR(KBr,cm-1):3324(NH),2223(CN).

[0113] 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:10.14(s,1H,NH),8.42(s,1H,triazole-H),7.98(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),7.81(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),7.12(s,2H,OPh-H),5.69(s,1H,pyrimidine-H),2.33(s,3H,CH3),2.14(s,6H,CH3).

[0114] 实施例10.4-((7-(2,6-二氯苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b5）的制备

[0115] 制备方法如实施例6，所不同的是：该反应中取代苯酚换做2,4,6-三甲苯酚。产物为白色固体，总产率36%，mp:273-278℃。

[0116] ESIMS:m/z397.3(M+1),401.3(M+5).

[0117] IR(KBr,cm-1):3431(NH),2224(CN).

[0118] 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:10.22(s,1H,NH),8.48(s,1H,triazole-H),7.97(d,2H,J=8.7Hz,OPh-H),7.86(m,4H,Ph-H),7.62(d,1H,J=8.8Hz,OPh-H),5.93(s,1H,pyrimidine-H).

[0119] 实施例11.4-((7-(2,6-二甲-4-氰基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b6）的制备

[0120] 制备方法如实施例6，所不同的是：该反应中取代苯酚换做2,6-二甲基-4-氰基苯酚。产物为白色固体，总产率60%，mp:285-287℃。

[0121] ESIMS:m/z382.5(M+1),404.5(M+23).

[0122] IR(KBr,cm-1):3342(NH),2223(CN).

[0123] 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:10.10(s,1H,NH),8.45(s,1H,triazole-H),7.97(d,2H,J=8.6Hz,Ph-H),7.92(s,2H,OPh-H),7.82(d,2H,J=8.6Hz,Ph-H),5.67(s,1H,pyrimidine-H),2.23(s,6H,CH3).

[0124] 实施例12.7-(2,4,6-三甲苯酚)-N-(4-硝基苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺（WL-b7）的制备

[0125] 制备方法如实施例6，所不同的是：该反应中对氰基苯胺换做对硝基苯胺。产物为黄色固体，总产率54%，mp:293-297℃。

[0126] ESIMS:m/z391.3(M+1).

[0127] IR(KBr,cm-1):2218(CN),1328(NO2).

[0128] 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:10.33(s,1H,NH),8.45(s,1H,triazole-H),8.27(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),8.03(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),7.13(s,2H,OPh-H),5.73(s,1H,pyrimidine-H),2.33(s,3H,CH3),2.14(s,6H,CH3).

[0129] 实施例13.7-(2,4,6-三甲苯酚)-N-(4-氯苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺（WL-b8）的制备

[0130] 制备方法如实施例6，所不同的是：该反应中对氰基苯胺换做对氯苯胺。产物为白色固体，总产率62%，mp:200-205℃。

[0131] ESIMS:m/z380.3(M+1).

[0132] IR(KBr,cm-1):3305(NH).

[0133] 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:9.82(s,1H,NH),8.36(s,1H,triazole-H),7.81(d,2H,J=8.9Hz,Ph-H),7.40(d,2H,J=8.9Hz,Ph-H),7.11(s,2H,OPh-H),5.61(s,1H,pyrimidine-H),2.32(s,3H,CH3),2.13(s,6H,CH3).

[0134] 实施例14.4-((7-(2,4,6-三溴苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b9）的制备

[0135] 制备方法如实施例6，所不同的是：该反应中取代苯酚换做2,4,6-三溴苯酚。产物为白色固体，总产率36%，mp:270-273℃。

[0136] ESIMS:m/z563.0(M+1),565.1(M+3),357.1(M+5),569.0(M+7).

[0137] IR(KBr,cm-1):3432(NH),2227(CN).

[0138] 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:10.22(s,1H,NH),8.49(s,1H,triazole-H),8.32(s,2H,OPh-H),7.98(d,2H,J=8.7Hz,Ph-H),7.84(d,2H,J=8.7Hz,Ph-H),5.90(s,1H,pyrimidine-H).

[0139] 实施例15.7-(2,4,6-三甲苯酚)-N-(4-氯苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺（WL-b10）的制备

[0140] 制备方法如实施例6，所不同的是：该反应中对氰基苯胺换做对甲基苯胺。产物为白色固体，总产率68%，mp:260-263℃。

[0141] ESIMS:m/z360.4(M+1),382.5(M+23).

[0142] IR(KBr,cm-1):3301(NH).

[0143] 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:9.63(s,1H,NH),8.33(s,1H,triazole-H),7.65(d,2H,J=8.4Hz,Ph-H),7.15(d,2H,J=8.4Hz,Ph-H),7.11(s,2H,OPh-H),5.61(s,1H,pyrimidine-H),2.32(s,3H,OPh-CH3),2.27(s,3H,Ph-CH3),2.13(s,6H,OPh-CH3).

[0144] 实施例16.4-((7-(2,4,6-三甲苯胺基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b11）的制备

[0145] 制备方法如实施例6，所不同的是：该反应中取代苯酚换做三甲基苯胺。产物为白色固体，总产率33%，mp:275-278℃。

[0146] ESIMS:m/z370.4(M+1).

[0147] IR(KBr,cm-1):3354(NH),3251(NH),2219(CN).

[0148] 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:9.79(s,1H,NH),9.51(s,1H,NH),8.36(s,1H,triazole-H),7.97(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),7.75(d,2H,J=8.8Hz,Ph-H),7.06(s,2H,NHPh-H),5.21(s,1H,pyrimidine-H),2.31(s,3H,CH3),2.16(s,6H,CH3).

[0149] 实施例17.4-((7-(2,6-二溴-4-甲基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)氨基)苄腈（WL-b12）的制备

[0150] 制备方法如实施例6，所不同的是：该反应中取代苯酚换做2,6-二溴-4-甲基苯酚。产物为白色固体，总产率46%，mp:278-282℃。

[0151] ESIMS:m/z500.9(M+1).

[0152] IR(KBr,cm-1):3440(NH),2226(CN).

[0153] 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:10.21(s,1H,NH),8.48(s,1H,triazole-H),7.98(d,2