中药小蓟有效部位提取物及其制法、药物组合物和用途

摘要

本发明提供了一种小蓟有效部位提取物及其制备方法，以及含有上述小蓟有效部位提取物的药物组合物和用途。本发明的小蓟有效部位提取物包含作为唯一活性成分的黄酮类化合物。该提取物由小蓟经提取、过滤、浓缩、离心后得沉淀；沉淀用有机溶剂提取脱脂后，即得。本发明在临床可用于痔疮、下肢静脉曲张等疾病的预防和治疗。本发明的药物原料来源易得，易于产业化，可以根据需要制成各种剂型，为临床提供了使用更加方便、治疗更加有效、质量更加可控的现代中药，为患者带来更多的益处，从而产生了巨大的社会效益。

权利要求

1.一种小蓟有效部位提取物在制备预防和/或治疗肛周溃疡和/或由局部炎症引起的水肿的药物中的用途，其中，所述小蓟有效部位提取物中总黄酮类化合物的重量百分含量大于50％，并且所述小蓟有效部位提取物是由包括以下步骤的方法制备的：(1)取小蓟药材经溶剂提取；

(2)将步骤(1)所得的提取液减压浓缩至适当体积，放至室温，离心，得沉淀；

(3)将步骤(2)中的沉淀用有机溶剂提取脱脂后，弃去有机层，沉淀干燥后即得小蓟有效部位提取物；或者将步骤(2)中的沉淀用碱溶液溶解，过滤，将滤液用大孔吸附树脂柱纯化后得到小蓟有效部位提取物；

其中，所述步骤(1)中的溶剂选自水、碱溶液、甲醇、乙醇和丙酮中的一种或多种，其中，当用碱溶液提取时，步骤(2)中还包括先用酸的水溶液将溶液pH值调至3-7的步骤；

所述步骤(3)中的有机溶剂为石油醚、乙醚、二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯。

2.根据权利要求1所述的用途，其中，所述黄酮类化合物主要包括蒙花苷、芦丁、刺槐素和槲皮素。

3.根据权利要求1所述的用途，其中，所述步骤(1)中的提取方法为温浸、热回流和/或渗漉。

4.根据权利要求1所述的用途，其中，所述碱溶液为石灰水、氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液或碳酸钠水溶液。

5.根据权利要求1所述的用途，其中，所述酸为盐酸或硫酸。

6.根据权利要求1所述的用途，其中，所述步骤(3)中的大孔吸附树脂柱为非极性大孔吸附树脂柱。

7.根据权利要求6所述的用途，其中，所述非极性大孔吸附树脂柱为HPD-300大孔吸附树脂柱。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的用途，其中，所述步骤(3)中进一步包括将脱脂后的沉淀用碱溶液溶解，过滤，向滤液中加入酸的水溶液调节pH值至3-7，将析出的沉淀过滤，水洗，干燥后即得小蓟有效部位提取物。

9.根据权利要求8所述的用途，其中，所述碱溶液为石灰水、氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液或碳酸钠水溶液。

10.根据权利要求8所述的用途，其中，所述酸为盐酸或硫酸。

说明书

中药小蓟有效部位提取物及其制法、药物组合物和用途

技术领域

[0001] 本发明属于医药领域，具体涉及一种中药小蓟有效部位提取物及其制备方法、包含该小蓟有效部位提取物的药物组合物和用途。

背景技术

[0002] 静脉曲张已成为危害人民生命健康的常见疾病，重压、缺少运动、口服避孕药、怀孕、更年期、肥胖、衰老、遗传等因素都可导致静脉曲张。静脉曲张可导致痔疮的发生，痔疮是由于直肠下端粘膜下和肛管或肛缘皮下的静脉曲张、扩大造成的，是一种常见疾病，其发病率约为25-40%，五十岁以上老年人的发病率为60-70%。当病人患痔疮时，会出现便血、痔块脱落、疼痛、瘙痒等症状，给患者的生活带来很大的不便和痛苦。下肢静脉曲张也是最为常见的静脉曲张疾病，人群患病率高达约5-30%。主要临床表现包括下肢浅表静脉发生扩张、延长、弯曲成团状；患者有腿部沉重、乏力、酸胀、刺痛、麻木感、水肿、瘙痒感，久立或行走后症状加重；疾病后期可出现浅表静脉血栓硬结形成、静脉性溃疡（俗称“老烂腿”）。部分患者出现患处血管破裂急性出血，或慢性皮肤溃疡经久不愈，截肢乃至危及生命。

[0003] 静脉管壁强度减弱和静脉内压力升高是引起静脉曲张的主要原因，因此，增加静脉血管的张力，降低静脉内压力就可有效地治疗静脉曲张。

[0004] 小蓟为菊科植物剌儿菜Cirsium setosum(Willd.)MB.的干燥地上部分。其味甘、苦，性凉；归心、肝经。具有凉血止血，祛瘀消肿的功效。其制剂血立止片、血立止胶囊和血立止颗粒均用于衄血，吐血，尿血，便血，崩漏下血，外伤出血等的治疗。但未见关于小蓟用于治疗静脉曲张性疾病的相关专利申请和研究报道。

发明内容

[0005] 本发明的一个目的是提供一种具有较好的抗静脉曲张活性和治疗出血性疾病的小蓟有效部位提取物。

[0006] 本发明另一个目的在于提供一种上述小蓟有效部位提取物的制备方法。

[0007] 本发明的又一个目的是提供一种包含上述小蓟有效部位提取物的药物组合物。

[0008] 本发明的再一个目的是提供上述小蓟有效部位提取物的用途。

[0009] 本发明在对小蓟化学成分和药理活性进行研究的基础上，发现该植物中所包含的黄酮类成分具有明显的抑制局部炎症引起的水肿、降低微脉血管通透性的作用。

[0010] 本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

[0011] 一方面，本发明提供一种小蓟有效部位提取物，所述小蓟有效部位提取物包含作为唯一活性成分的黄酮类化合物。

[0012] 优选地，所述黄酮类化合物主要包括蒙花苷、芦丁、刺槐素和槲皮素等。

[0013] 优选地，所述小蓟有效部位提取物中总黄酮类化合物的含量大于50%（重量）。

[0014] 另一方面，本发明提供一种制备上述小蓟有效部位提取物的方法，所述方法包括以下步骤：

[0015] （1）取小蓟药材经溶剂提取；

[0016] （2）将步骤（1）所得的提取液减压浓缩至适当体积，放至室温，离心，得沉淀；

[0017] （3）将步骤（2）中的沉淀用有机溶剂提取脱脂后，弃去有机层，沉淀干燥后即得小蓟有效部位提取物；或者将步骤（2）中的沉淀用碱溶液溶解，过滤，将滤液用大孔吸附树脂柱纯化后得到小蓟有效部位提取物。

[0018] 优选地，所述步骤（1）中的提取方法为温浸、热回流和/或渗漉；优选地，所述步骤（1）中的溶剂选自水、碱溶液、甲醇、乙醇和丙酮中的一种或多种，其中，当用碱溶液提取时，步骤（2）中还包括先用酸的水溶液将溶液pH值调至3-7的步骤；优选所述碱溶液为石灰水、氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液或碳酸钠水溶液等；优选地，所述酸为盐酸或硫酸等。

[0019] 优选地，所述步骤（3）中的有机溶剂为石油醚、乙醚、二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯等；优选地，所述步骤（3）中的碱溶液为石灰水、氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液或碳酸钠水溶液等；优选地，所述步骤（3）中的大孔吸附树脂柱为非极性大孔吸附树脂柱，如HPD-300大孔吸附树脂柱等。

[0020] 优选地，所述步骤（3）中进一步包括将脱脂后的沉淀用碱溶液溶解，过滤，向滤液中加入酸的水溶液调节pH值至3-7，将析出的沉淀过滤，水洗，干燥后即得小蓟有效部位提取物；优选地，所述碱溶液为石灰水、氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液或碳酸钠水溶液等，优选地，所述酸为盐酸或硫酸等。

[0021] 上述制备方法简单易行、提取效果好、易于工业推广应用。

[0022] 又一方面，本发明提供一种药物组合物，所述药物组合物包含上述小蓟有效部位提取物。

[0023] 优选地，所述药物组合物为胶囊剂、片剂、颗粒剂、滴丸、软胶囊剂、分散片、口腔崩解片、缓释片、控释片、注射液、输液或注射用无菌粉末。

[0024] 可以采用常规方法将小蓟有效部位提取物与任何一种或一种以上药用辅料，如淀粉、糊精、乳糖、微晶纤维素、羟丙甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠、聚乙二醇、硬脂酸镁、微粉硅胶、葡萄糖、甘露醇、木糖醇、甘氨酸等混合制成上述剂型。

[0025] 再一方面，本发明提供所述的小蓟有效部位提取物在制备预防和/或治疗静脉曲张疾病的药物中的用途。

[0026] 优选地，其中所述静脉曲张疾病为痔疮或下肢静脉曲张等。

[0027] 小蓟有效部位提取物中总黄酮的含量测定方法如下：

[0028] 总黄酮的测定（分光光度法）

[0029] 对照品溶液的制备：精密称取干燥恒重的蒙花苷对照品适量，用甲醇溶解制成每1ml含15μg的溶液，即得。

[0030] 供试品溶液的制备：精密称取本品粉末50mg，置10ml量瓶中，加蒸馏水溶解至刻度，摇匀，滤过。沉淀连滤纸置于100ml具塞锥形瓶中，加甲醇50ml，精密称定重量，超声处理30min，再次称重，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。取续滤液1ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

[0031] 标准曲线的绘制：精密量取蒙花苷对照品溶液（0.13mg/ml）1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml，分别置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，以甲醇为空白，在326mn波长处测定-1
吸光度。以吸收度（A）为纵坐标，浓度C（μg·ml ）为横坐标，绘制标准曲线。

[0032] 测定法：取供试品溶液，以甲醇为空白，按照分光光度法（中国药典2005年版一部附录VA），在326nm波长处测定吸收度。

[0033] 对本发明的药物的药效学部分进行了初步研究，结果发现本发明的药物对醋酸致大鼠肛周溃疡具有明显治疗作用。在上述药理活性试验的基础上，小蓟有效部位提取物在临床可用于痔疮、下肢静脉曲张等疾病的预防和治疗。

[0034] 本发明的药物原料来源易得，易于产业化，可以根据需要制成各种剂型，为临床提供了使用更加方便、治疗更加有效、质量更加可控的现代中药，为患者带来更多的益处，从而产生了巨大的社会效益。

具体实施方式

[0035] 下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。

[0036] 实施例1

[0037] 取小蓟药材10kg，用100L 80%（体积）乙醇提取三次，每次1小时。收集提取液，减压回收乙醇，并浓缩至10L，放置至室温，离心，沉淀经石油醚脱脂，干燥即得小蓟有效部位提取物。按小蓟有效部位提取物的总重量计，总黄酮含量为68.9%（重量）。

[0038] 实施例2

[0039] 取小蓟药材10kg，用250L 70%（体积）乙醇渗漉提取，收集渗漉液，减压回收乙醇，并浓缩至10L，放置至室温。离心，沉淀经氯仿脱脂，即得小蓟有效部位提取物。按小蓟有效部位提取物的总重量计，总黄酮含量为65.7%（重量）。

[0040] 实施例3

[0041] 取小蓟药材10kg，用100L 80%（体积）乙醇提取三次，每次2小时，收集提取液，减压回收乙醇，并浓缩至10L，放置至室温。离心，沉淀经甲醇超声处理，抽滤，弃去甲醇液，沉淀干燥，即得小蓟有效部位提取物。按小蓟有效部位提取物的总重量计，总黄酮含量为70.1%（重量）。

[0042] 实施例4

[0043] 取小蓟药材10kg，用100L pH8-9的石灰水提取2次，每次1小时，滤过，收集滤液，加盐酸调节pH至3-4，并浓缩至10L，静置过夜。离心，沉淀经氯仿加热处理，抽滤，弃去氯仿液，沉淀干燥，即得小蓟有效部位提取物。按小蓟有效部位提取物的总重量计，总黄酮含量为52.1%（重量）。

[0044] 实施例5

[0045] 取小蓟药材10kg，用100L 70%（体积）乙醇提取三次，每次2小时，收集提取液，减压回收乙醇，并浓缩至10L，放置至室温。离心，沉淀经二氯甲烷冷浸处理，抽滤，弃去二氯甲烷液，沉淀用20L浓度2%（重量/体积）氢氧化钠水溶液溶解，过滤，向滤液中加入20L药用乙醇，用浓盐酸调节pH至5，静置过夜，析出沉淀，抽滤，沉淀用清水充分清洗至pH中性，即得小蓟有效部位提取物。按小蓟有效部位提取物的总重量计，总黄酮含量为72.9%（重量）。

[0046] 实施例6

[0047] 取小蓟药材10kg，用100L 80%（体积）乙醇提取二次，每次2小时，收集提取液，减压回收乙醇，并浓缩至10L，放置至室温。离心，沉淀用20L浓度2%（重量/体积）氢氧化钠水溶液溶解，过滤，取滤液，通过HPD-300大孔吸附树脂柱，先用蒸馏水洗至流出液pH值为中性，再用70%（体积）浓度乙醇洗脱20L，收集70%（体积）乙醇溶液，减压回收乙醇并浓缩至干，即得小蓟有效部位提取物。按小蓟有效部位提取物的总重量计，总黄酮含量为85.3%（重量）。

[0048] 实施例7

[0049] 取小蓟有效部位提取物100g，微粉硅胶适量，混合均匀，采用胶囊制备工艺制备，即得小蓟有效部位提取物胶囊。

[0050] 实施例8

[0051] 取小蓟有效部位提取物100g，加到200g熔融的聚乙二醇6000中，采用滴丸制备工艺制备，即得小蓟有效部位提取物滴丸。

[0052] 实施例9

[0053] 取小蓟有效部位提取物100g，糊精200g，混合均匀，制粒，过筛，干燥，即得小蓟有效部位提取物的颗粒剂；或将制得的颗粒经进一步压片，干燥，即得小蓟有效部位提取物的片剂。

[0054] 实施例10

[0055] 取小蓟有效部位提取物100g，羟丙基甲基纤维素100g，羧甲基纤维素钠60g，乳糖40g，混合均匀，制粒，干燥，压片，即得小蓟有效部位提取物的缓释片剂。

[0056] 实施例11

[0057] 取小蓟有效部位提取物100g，微晶纤维素120g，羧甲基纤维素钠30g，微粉硅胶1g，混合均匀，压片，即得小蓟有效部位提取物的分散片。

[0058] 实施例12

[0059] 取小蓟有效部位提取物100g，植物油250g，混匀，用明胶作囊壳材料，压制成软胶囊，即得小蓟有效部位提取物的软胶囊。

[0060] 实施例13

[0061] 取小蓟有效部位提取物10g，溶于500ml注射用水中，采用现有注射用无菌粉末制备工艺制备，即得小蓟有效部位提取物注射用无菌粉末剂型。

[0062] 实施例14

[0063] 取小蓟有效部位提取物10g，溶于1000ml注射用水中，采用注射剂制备工艺，即得小蓟有效部位提取物注射液（含输液）。

[0064] 试验例1

[0065] 本发明药物的疗效由以下药效学试验证明：

[0066] 1、试验材料

[0067] 1.1 药物及试剂

[0068] 小蓟有效部位提取物：实施例1制备的样品，棕色粉末（总黄酮含量大于50%（重量））。用生理盐水配成合适浓度的溶液供试验用。

[0069] 爱脉朗（地奥司明片）：购自施维雅(天津)制药有限公司。

[0070] 1.2 动物

[0071] 大鼠：SD大鼠，雌雄兼用，体重160-180g，购自北京华埠康生物科技股份有限公