一种香石竹组培快繁的方法

摘要

本发明提供一种香石竹组培快繁的方法，将香石竹生长发育不良的组培苗切段后，轮换放入不同的培养基中培养15～30天，每次培养温度为22～26℃、光照强度为2000～3000lx，光照时间为10～14小时/天，且上一次培养结束后，将增殖的组培苗切段放入下一次培养基内继续培养，获得生长发育良好的组培苗。本发明有效解决了香石竹组培繁殖过程中，由于品种自身的因素或是由于继代次数增加而造成组培苗茎秆细弱、繁殖系数降低、生长缓慢、黄化及玻璃化、增殖力弱或不增殖等问题，对香石竹种质资源保存和优质种苗产业化生产具有重要的意义。

权利要求

1.一种香石竹组培快繁的方法，其特征在于经过下列步骤：将香石竹玻璃化的组培苗切段后，轮换放入下列任意二组或者任意三组或者四组不同培养基中培养，具体培养基组别的确定视组培苗玻璃化的程度而决定，且每一组培养基的轮换培养次数至少为一次：MS；

MS+KT 0.05～0.15mg/L+NAA 0.1mg/L；

MS+BA 0.05～0.15mg/L+NAA 0.1mg/L；

MS+BA 0.05～0.15mg/L+KT 0.05～0.15mg/L+NAA 0.1mg/L；

或者，

将香石竹增殖力弱或不增殖的组培苗切段后，轮换放入下列二组不同培养基中培养，每一组培养基至少轮换一次：MS+BA 0.05～0.15mg/L+KT 0.05～0.15mg/L+NAA 0.1mg/L；

MS+BA 0.2～0.25mg/L+NAA 0.1mg/L；

每次培养温度为22～26℃、光照强度为2000～3000lx，光照时间为10～14小时/天，培养时间为15～30天，且上一次培养结束后，将增殖的组培苗切段放入下一次培养基内继续培养，获得生长发育良好的组培苗。

说明书

一种香石竹组培快繁的方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种香石竹组培快繁的方法，尤其是涉及一种克服香石竹组培苗增殖力弱和玻璃化的方法，属于生物技术领域。

背景技术

[0002] 香石竹(Dianthus caryophyllus Liunn)，又名康乃馨，为石竹科石竹属多年宿根性草本植物，是目前世界上应用最普遍的花卉之一，也是中国、云南省最重要的出口花卉之一。香石竹以其花姿优美、花色艳丽、保鲜期长等特点为人们所喜爱。目前香石竹市场需求量很大，而常规的扦插繁殖和无性繁殖无法满足市场的需求。组织培养是在短期内大量快速繁殖苗木、满足市场需求的有效途径。在组培扩繁过程中，香石竹存在茎秆细弱、黄化、增殖力弱及玻璃化严重等现象，影响种苗的产量和质量，限制了其组培技术的应用。因此，克服香石竹组培苗增殖力弱和玻璃化的现象，对香石竹无病毒苗木的快速繁殖和推广具有重要的意义。

发明内容

[0003] 为克服香石竹组培苗增殖力弱和玻璃化等问题，本发明提供一种香石竹组培快繁的方法，通过下列技术方案实现：

[0004] 一种香石竹组培快繁的方法，其特征在于经过下列步骤：

[0005] 将香石竹生长发育不良的组培苗切段后轮换放入下列不同的培养基中培养：

[0006] MS；

[0007] MS+KT 0.05～0.15mg/L+NAA 0.1mg/L；

[0008] MS+BA 0.05～0.15mg/L+NAA 0.1mg/L；

[0009] MS+BA 0.05～0.15mg/L+KT 0.05～0.15mg/L+NAA 0.1mg/L；

[0010] 或者

[0011] MS+BA 0.05～0.15mg/L+KT 0.05～0.15mg/L+NAA 0.1mg/L；

[0012] MS+BA 0.2～0.25mg/L+NAA 0.1mg/L；

[0013] 每次培养温度为22～26℃、光照强度为2000～3000lx，光照时间为10～14小时/天，培养时间为15～30天，且上一次培养结束后，将增殖的组培苗切段放入下一次培养基内继续培养，获得生长发育良好的组培苗。

[0014] 所述香石竹生长发育不良的组培苗是玻璃化的组培苗，或者是增殖力弱或不增殖的组培苗。

[0015] 所述玻璃化的组培苗，轮换放入下列任意二组或者任意三组或者四组不同培养基中培养，具体培养基组别的确定视组培苗玻璃化的程度而决定，且每一组培养基的轮换培养次数至少为一次：

[0016] MS；

[0017] MS+KT 0.05～0.15mg/L+NAA 0.1mg/L；

[0018] MS+BA 0.05～0.15mg/L+NAA 0.1mg/L；

[0019] MS+BA 0.05～0.15mg/L+KT 0.05～0.15mg/L+NAA 0.1mg/L。

[0020] 所述增殖力弱或不增殖的组培苗，轮换放入下列二组不同培养基中培养，每一组培养基至少轮换一次：

[0021] MS+BA 0.05～0.15mg/L+KT 0.05～0.15mg/L+NAA 0.1mg/L；

[0022] MS+BA 0.2～0.25mg/L+NAA 0.1mg/L。

[0023] 本发明具备的优点和效果：通过将生长发育不良的组培苗轮换培养，且每次采用不同的培养基，能有效的克服香石竹组培繁殖过程中由于品种自身的因素或是由于继代次数增加而造成组培苗茎秆细弱、繁殖系数降低、生长缓慢、黄化及玻璃化、增殖力弱或不增殖的现象，对香石竹种质资源保存和优质种苗产业化生产具有重要的意义。

具体实施方式

[0024] 下面结合实施例对本发明做进一步说明。

[0025] 实施例1

[0026] 将玻璃化的香石竹组培苗切段后放入下列培养基中：MS+BA 0.05mg/L+KT0.05mg/L+NAA 0.1mg/L，在培养温度为25℃、光照强度为3000lx，光照时间为14小时/天条件下，培养25天，然后将增殖的组培苗切段，放入下列培养基内：MS+BA 0.05mg/L+NAA
0.1mg/L，在培养温度为25℃、光照强度为3000lx，光照时间为14小时/天条件下，继续培养25天，之后将增殖的组培苗切段，放入下列培养基内：MS+KT 0.05mg/L+NAA 0.1mg/L，在培养温度为25℃、光照强度为3000lx，光照时间为14小时/天条件理，继续培养25天，再将增殖的组培苗切段，放入MS培养基内，在培养温度为25℃、光照强度为3000lx，光照时间为14小时/天条件下，继续培养25天；经四轮培养后，组培苗恢复正常，获得生长发育良好的组培苗，且长势良好。

[0027] 实施例2

[0028] 将不增殖的香石竹组培苗切段后，放入下列培养基中：MS+BA 0.15mg/L+KT0.15mg/L+NAA 0.1mg/L，在培养温度为24℃、光照强度为3000lx，光照时间为12小时/天条件下，培养20天，然后将增殖的组培苗切段，放入下列培养基内：MS+BA 0.25mg/L+NAA
0.1mg/L，在培养温度为24℃、光照强度为3000lx，光照时间为12小时/天条件下，继续培养20天；经两轮培养后，组培苗繁殖系数高且长势良好，获得生长发育良好的组培苗。

[0029] 实施例3

[0030] 将增殖力弱的香石竹组培苗切段后放入下列培养基中：MS+BA 0.2mg/L+NAA0.1mg/L，在培养温度为26℃、光照强度为2500lx，光照时间为14小时/天条件下，继续培养30天，然后将增殖的组培苗切段，放入下列培养基内：MS+BA 0.15mg/L+KT 0.1mg/L+NAA
0.1mg/L，在培养温度为25℃、光照强度为2500lx，光照时间为12小时/天条件下，继续培养25天，再将增殖的组培苗切段，放入MS+BA 0.1mg/L+KT 0.15mg/L+NAA 0.1mg/L培养基内，在培养温度为24℃、光照强度为2000lx，光照时间为14小时/天条件下，继续培养30天；经三轮培养后，组培苗繁殖系数高且长势良好，获得生长发育良好的组培苗。

[0031] 实施例4

[0032] 将玻璃化的香石竹组培苗切段后，放入下列培养基中：MS+BA 0.1mg/L+NAA0.1mg/L，在培养温度为25℃、光照强度为3000lx，光照时间为14小时/天条件下，培养30天，然后将增殖的组培苗切段，放入下列培养基内：MS+ KT 0.1mg/L +NAA 0.1mg/L，在培养温度为23℃、光照强度为2500lx，光照时间为14小时/天条件下，继续培养25天，之后将增殖的组培苗切段，放入下列培养基内：MS+KT 0.05mg/L+NAA 0.1mg/L，在培养温度为25℃、光照强度为3000lx，光照时间为14小时/天条件下，继续培养25天；经三轮培养后，组培苗恢复正常，获得生长发育良好的组培苗，且长势良好。

[0033] 实施例5

[0034] 将不增殖的香石竹组培苗切段后，放入下列培养基中：MS+BA 0.12mg/L+KT0.12mg/L +NAA 0.1mg/L，在培养温度为25℃、光照强度为2500lx，光照时间为13小时/天条件下，培养30天，然后将增殖的组培苗切段，放入下列培养基内：MS+BA 0.23mg/L +NAA
0.1mg/L，在培养温度为25℃、光照强度为2500lx，光照时间为12小时/天条件下，继续培养25天；经二轮培养后，组培苗繁殖系数高且长势良好，获得生长发育良好的组培苗。

[0035] 实施例6

[0036] 将玻璃化的香石竹组培苗切段后，放入下列培养基中：MS+BA 0.05mg/L+KT0.1mg/L +NAA 0.1mg/L，在培养温度为25℃、光照强度为3000lx，光照时间为14小时/天条件下，培养30天，然后将增殖的组培苗切段，放入MS培养基内，在培养温度为25℃、光照强度为2000lx，光照时间为14小时/天条件下，继续培养30天；经两轮培养后，组培苗恢复正常，获得生长发育良好的组培苗，且长势良好。

[0037] 下面通过对比试验，进一步表明本发明的优点和效果。

[0038] 一、试验对象

[0039] 选用同地域条件下所得香石竹生长发育不良的组培苗，包括①玻璃化的组培苗、②增殖力弱或不增殖的组培苗。

[0040] 二、试验方法

[0041] a组采用本发明实施例1的方法对上述试验对象中①类组培苗进行快繁；

[0042] aa组采用传统的方法（仅使用一次培养基）对上述试验对象中①类组培苗进行快繁，选用的培养基为MS + BA 0.1mg/L+KT 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L，培养温度为25℃、光照强度为3000lx，光照为14小时/天、培养25天；

[0043] b组采用本发明实施例2的方法对上述试验对象中②类组培苗进行快繁；

[0044] bb组采用传统的方法（仅使用一次培养基）对上述试验对象中②类组培苗进行快繁，选用的培养基为MS + BA 0.1mg/L+KT 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L，培养温度为24℃、光照强度为3000lx，光照为12小时/天、培养20天。

[0045] 三、试验结果

[0046] a组经四轮培养后组培苗叶片变绿、恢复正常，且长势良好，组培苗繁殖系数达到3.5～4.5倍；

[0047] aa组经培养后组培苗叶片玻璃化程度严重，长势缓慢，组培苗繁殖系数达到1～2倍；

[0048] b组经二轮培养后组培苗长势良好，增殖能力强，组培苗繁殖系数达到3.5～4.5倍；

[0049] bb组经培养后组培苗长势缓慢，增殖能力弱，组培苗繁殖系数达到1～2倍。