梓醇在制备治疗口腔溃疡的药物中的应用

摘要

本发明涉及一种地黄在用于制备治疗口腔溃疡的药物中的应用，以及地黄中的梓醇成分在用于制备治疗口腔溃疡的药物中的应用。特别是，梓醇对于口腔溃疡具有显著的治疗作用和愈合作用。

权利要求

1.梓醇作为唯一活性成分在制备治疗口腔溃疡的药物中的应用。

说明书

梓醇在制备治疗口腔溃疡的药物中的应用

技术领域：

[0001] 本发明主要涉及地黄中的梓醇成分在制备治疗口腔溃疡药物中的应用。背景技术：

[0002] 口腔溃疡，又称口疮、口炎、复发性阿弗他溃疡等，是口腔黏膜疾病中发病率最高的一种疾病，感冒、消化不良、精神紧张、郁闷压抑等均能偶然引起该病的发生，好发于口腔、唇、颊、舌缘等，在黏膜的任何部位均能出现。口腔溃疡属于中医口疮范畴，多为素体虚弱，阴虚、大病之后或劳伤过度，阴亏耗液，水不制火，虚火上浮口腔而发为溃疡。其病因病机多与肝、脾、肾有关，治疗应重视肝、脾、肾的调治。发病年龄一般在10～30岁之间，女性较多，一年四季均能发生。口腔溃疡有自限性，能在10天左右自愈。该病还具有周期性、复发性等特点。

[0003] 口腔溃疡主要包括以下几种类型：

[0004] 1.轻型复发性阿弗他溃疡

[0005] 初起病变处敏感或出现针尖样大小或稍大的充血区，短期内即形成直径在2～4mm左右，圆形或椭圆形，边界清晰的浅小溃疡。中心微凹陷，表面覆有一层淡黄色假膜，溃疡周围黏膜充血呈红晕状，其底扪之不硬。溃疡数目一般为2～3个左右。溃疡形成后有较剧烈的烧灼痛。经7～10天左右溃疡可逐渐自愈，不留瘢痕。但经长短不一的间歇期后又可复发。患者甚为痛苦。

[0006] 2.疱疹型复发性阿弗他溃疡

[0007] 亦称口炎型口疮。此型除溃疡小、数目多(可达20～30个)外，其余 与轻型复发性阿弗他溃疡表现相似。溃疡散在，分布广泛，黏膜充血明显。有剧烈疼痛及伴有头痛、发热、局部淋巴结肿大等。

[0008] 3.重型复发性阿弗他溃疡

[0009] 亦称复发性坏死性黏膜腺周围炎或腺周口疮，为各型中最严重的一型。溃疡常单个发生，2个或2个以上者少见。好发于唇内侧及口角区黏膜。初起时溃疡与轻型复发性阿弗他溃疡相同，但其直径逐渐扩大至1～2cm，并向深层发展至黏膜腺。溃疡为紫红色或暗红色，边缘不规则，呈瓣状隆起，中央凹陷，似“弹坑”。底不平、微硬、呈小结节状，溃疡周围红晕，局部有剧烈疼痛及可伴局部淋巴结肿大、发热等。病程常在月余以上。愈后遗留瘢痕，严重者可形成组织缺损或畸形。

[0010] 近年来，临床治疗口腔溃疡的中药复方有六味地黄丸，知柏地黄丸、杞菊地黄丸等。

[0011] 六味地黄丸主要原料是熟地黄、山茱萸(制)、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻，具有滋阴补肾的功效，可用于肾阴亏损，头晕耳鸣，腰膝酸软，骨蒸潮热，盗汗遗精。六味地黄丸是目前临床运用最多的一个补阴方剂。该方用熟地滋肾填精为主；辅以山萸肉养肝而涩精，山药补益脾阴而固精，三药合用，达到三阴并补之功。又配茯苓淡渗脾湿，以助山药之益脾；泽泻清泄肾火，并防熟地之滋腻；丹皮清泄肝火，并制山萸肉之温。各药合用，有补有泻，使之滋补而不留邪，降泄而不伤正，相辅相成。现代药理研究也表明，六味地黄丸中的许多药有局部抑菌作用。如山茱萸煎剂于体外可抑制金黄色葡萄球菌、皮肤真菌。六味地黄丸可以使溃疡(特别是肾阴亏虚型口腔溃疡)复发周期延长，溃疡个数减少，疼痛程度减轻，溃疡愈合时间缩短，明显改善复发性口腔溃疡患者的临床症状。

[0012] 知柏地黄丸主要成分为：知母、黄柏、熟地黄、山茱萸(制)、牡丹皮、茯苓、泽泻、山药，具有滋阴降火的功效，用于阴虚火旺，潮热盗汗，口干咽痛，耳鸣遗精，小便短赤等，可治疗西医诊断之慢性肾炎、慢性肾功能不全、慢性肾盂肾炎、甲亢、糖尿病等。知柏地黄丸中熟地滋阴补肾，山茱萸补养肝肾，山药补益脾阴，泽泻利湿泄浊，丹皮清泄虚热，茯苓淡渗脾湿，知母、黄柏滋阴降火。知柏地黄丸既能调补肝、脾、肾三脏之阴，又能降相火。因此，也可用于口腔溃疡的治疗。

[0013] 关于六味地黄丸、知柏地黄丸等治疗复发性口腔溃疡的临床报道常可见于医学杂志。

[0014] 上述中药复方制剂中都含有地黄。地黄为玄参科植物地黄(Rehm annia glutinasa Liboschde.)的新鲜块茎。作为常用中药之一，地黄的临床应用极为广泛，尤其擅长补血、凉血、调血，常用于热病舌绛、内热消渴、肝肾阴虚，骨蒸潮热等症。依照炮制方法在药材上分为：鲜地黄、干地黄与熟地黄，同时其药性和功效也有较大的差异，鲜地黄为清热凉血药；熟地黄则为补益药。

[0015] 近年来，国内外对地黄的化学成分及药理作用进行了很多研究。地黄的生物活性十分广泛，化学成分以包括皂苷类、环烯醚萜甙类、多糖类等。从鲜地黄分得的环烯醚萜甙有：益母草甙(l eonuride)，桃叶珊瑚甙(aucubin)，梓醇(catalpol)，地共同甙(rehmannioside)，美利妥双甙(melittoside)，都桷子甙(melittoside)等；多糖类：D-半乳糖，棉子糖，水苏糖，甘露三糖，毛蕊花糖等，以水苏糖的含量最高；还含赖氨酸，组氨酸，精氨酸，天冬氨酸，谷氨酸，苏氨酸(threonine)，等氨基酸以及葡萄糖胺，D-甙露醇，磷酸，β-谷甾醇，胡萝卜甙及无机元素等。

[0016] 梓醇是地黄的有效成分之一，是其“滋阴”作用的有效活性成分，为一种不很稳定的环烯醚萜苷类化合物，常与多种环烯醚萜苷类成分如桃叶珊瑚苷和胡黄连苷等同时存在于植物组织中，具有利尿、缓泻、降血糖、保肝及抗衰老等多种药理活性。研究表明，在暂时缺血情况下，梓醇有显著的神经保护功能，并发现梓醇能激活脑神经元，可以治疗因外伤、代谢障碍、脑缺血和帕金森氏病等引起的脑神经病。

[0017] 本发明申请人通过大量实验和研究，发明了地黄在用于制备治疗口腔溃疡的药物中的应用，特别是地黄中的梓醇成分在用于制备治疗口腔溃疡的药物中的应用。发明内容：

[0018] 本发明的目的在于提供了地黄在用于制备治疗口腔溃疡的药物中的应用，特别是地黄中的梓醇成分在用于制备治疗口腔溃疡的药物中的应用。

[0019] 本申请的发明人通过大量的对比研究和药理实验，在众多具有治疗口腔溃疡功效的中药复方中筛选出地黄可单独作为治疗口腔溃疡的药物，并通过进一步的对比分析、实验研究，从地黄的众多有效成分中筛选出梓醇成分可单独作为治疗口腔溃疡的药物，并具有显著的治疗作用和愈合作用。

[0020] 具体地说，本发明是通过如下技术方案实现的。

[0021] 一、地黄在用于制备治疗口腔溃疡的药物中的应用

[0022] 申请人在对众多包含地黄的、临床上可用于治疗口腔溃疡的中药复方进行了分析和研究，包括六位地黄丸、知柏地黄丸等在内，发现地黄可单独用于治疗口腔溃疡。不仅如此，申请人在对地黄治疗糖尿病功效进行研究时，在进行糖尿病动物实验中，有部分动物发生口腔溃疡的情况，喂服地黄后发现3天左右溃疡面愈合。针对这个发现用地黄对致病性动物进行试验， 验证了地黄对口腔溃疡的有效性。在此研究结果上，申请人对地黄进行工艺研究，提取地黄皂苷，多糖及环烯迷萜类的梓醇，并进行相关动物试验和研究，结果显示梓醇生物活性最强水溶性好，血管通透性明显，治疗口腔溃疡最为有效(具体见第二点)。

[0023] 此外，我们将生地黄和金银花单独对比进行研究和药理实验，具体如下：

[0024] 1、实验目的：研究生地黄与金银花对动物实验性口腔溃疡的治疗作用。

[0025] 2、实验方法：通过烧灼法制备口腔黏膜浅表性溃疡模型、大鼠角叉菜胶足趾肿胀实验、体外抑菌试验、小鼠腹腔毛细血管通透性试验考察生地黄与金银花治疗效果。

[0026] 3、实验材料

[0027] (1)、药品

[0028] 生地黄与金银花喷剂(生地黄与金银花粉研细过120目筛，分装于塑料捏喷瓶内，批号110309)；生地黄与金银花软膏(以凡士林、羊毛脂为基质，配制成5％，10％软膏制剂，批号1103016)；生地黄与金银花含片(含量0.5g，批号1103021)；

[0029] (2)、动物

[0030] SD大鼠；日本大耳白家兔。

[0031] 4、实验方法

[0032] (1)、对家兔实验性口腔溃疡的治疗作用

[0033] 日本大耳白家兔8只，公兔，体质量2.0-2.5kg，自由进水饮食，适应环境1周。以烧灼法制备口腔黏膜浅表性溃疡模型：将动物以异戊巴 比妥麻醉并固定，用内径4mm玻璃管，内置一棉球，使棉球的底部与玻璃管下口取平，在管内滴入液化苯酚(含苯酚90％)，以浸透小棉球为宜，然后，将玻璃管下端平置于家兔左侧口角颊黏膜同一部位烧灼30s，24h后在家兔烧灼黏膜部位形成直经约4.5mm的圆形或椭圆形溃疡，溃疡表面呈灰白色。随机分成1组，设为8只，。对溃疡部位捏喷生地黄与金银花一次，每次约12mg药物。每日在第1次用药前用分规测量和记录所有动物溃疡的大小和愈合情况。结果表明，生地黄比金银花对家兔口腔溃疡的疗效更好，平均愈合时间为(8.2±0.6)。

[0034] (2)对大鼠实验性口腔溃疡的治疗作用

[0035] SD大鼠15只，公鼠，体质量约250g，实验前适应环境1周，自由饮水进食。异戊巴比妥麻醉，由大鼠面颊外侧进针，将15％醋酸0.05mL准确注入颊黏膜下。24h后，分开大鼠嘴唇，可见表面呈灰白色的圆形或椭圆形的溃疡。按上述家兔的方法治疗和观察。结果表明，生地黄比金银花对大鼠口腔溃疡更有效，平均愈合时间为(8.5±1.2)d。

[0036] 5、结论

[0037] 实验结果表明，生地黄与金银花对动物实验性口腔溃疡均有治疗作用果和愈合作用；生地黄与要比金银花对实验性口腔溃疡的治疗愈合作用更好。

[0038] 二、地黄中的梓醇成分在用于制备治疗口腔溃疡的药物中的应用

[0039] 地黄含有众多有效活性成分，包括皂苷类、环烯醚萜甙类、多糖类、氨基酸类等。申请人通过大量的研究和实验，确定了地黄可单独作为治疗口腔溃疡的药物。但现有技术中并未公开地黄之所以具有治疗口腔溃疡的功效是因为地黄中各种有效成分的综合作用，还是其中某一类或某一种活 性成分发挥的作用；如果是某一类或某一种活性成分发挥作用，那么该活性成分是什么。为了更精确地确定地黄中对于口腔溃疡的有效成分，提高药物的生物利用率和更好的药效，发明人选取了地黄中的主要有效成分地黄皂苷、地黄多糖和环烯醚萜甙类进行了对比实验分析和研究；考虑到梓醇是环烯醚萜甙类成分的指标成分。申请人选取了地黄皂苷、地黄多糖和梓醇进行了对比研究，具体如下：

[0040] 1、地黄皂苷对实验性口腔黏膜溃疡的药效学

[0041] (1)、实验目的：研究地黄有效部位地黄皂苷对动物实验性口腔黏膜溃疡的治疗作用。

[0042] (2)实验方法：通过烧灼法制备口腔黏膜浅表性溃疡模型、大鼠角叉菜胶足趾肿胀实验、体外抑菌试验、小鼠腹腔毛细血管通透性试验考察地黄皂苷治疗效果。

[0043] (3)、实验材料

[0044] 3.1药品

[0045] 地黄皂苷喷剂(分装于塑料捏喷瓶内，批号110409)；地黄皂苷软膏(以凡士林、羊毛脂为基质，配制成5％，10％软膏制剂，批号1104016)；地黄皂苷含片(含量0.5g，批号1104021)；

[0046] 3.2动物

[0047] SD大鼠；日本大耳白家兔。

[0048] (4)、实验方法

[0049] 4.1对家兔实验性口腔溃疡的治疗作用

[0050] 日本大耳白家兔10只，公兔，体质量2.0-2.5kg，自由进水饮食，适应环境1周。以烧灼法制备口腔黏膜浅表性溃疡模型：将动物以异戊巴 比妥麻醉并固定，用内径4mm玻璃管，内置一棉球，使棉球的底部与玻璃管下口取平，在管内滴入液化苯酚(含苯酚90％)，以浸透小棉球为宜，然后，将玻璃管下端平置于家兔左侧口角颊黏膜同一部位烧灼30s，24h后在家兔烧灼黏膜部位形成直经约4.5mm的圆形或椭圆形溃疡，溃疡表面呈灰白色。分成1组，设为一组10只。对溃疡部位捏喷地黄皂苷，每次约12mg药物。每日在第1次用药前用分规测量和记录所有动物溃疡的大小和愈合情况。结果表明，地黄皂苷对家兔口腔溃疡的疗效不显著，实验过程只有1只在12小时有愈合现象，不做统计。

[0051] 4.2对大鼠实验性口腔溃疡的治疗作用

[0052] SD大鼠15只，公鼠，体质量约250g，实验前适应环境1周，自由饮水进食。异戊巴比妥麻醉，由大鼠面颊外侧进针，将15％醋酸0.05mL准确注入颊黏膜下。24h后，分开大鼠嘴唇，可见表面呈灰白色的圆形或椭圆形的溃疡。随机分成3组，按上述家兔的方法治疗和观察。结果表明，地黄皂苷对大鼠口腔溃疡未有疗效。

[0053] (5)、结论

[0054] 实验结果表明，地黄皂苷对动物模拟的口腔溃疡未有明显的治疗作用和愈合作用。

[0055] 2、地黄多糖对实验性口腔黏膜溃疡的药效学

[0056] (1)、实验目的：研究地黄多糖对动物实验性口腔黏膜溃疡的治疗作用。

[0057] (2)、实验方法：通过烧灼法制备口腔黏膜浅表性溃疡模型、大鼠角叉菜胶足趾肿胀实验、体外抑菌试验、小鼠腹腔毛细血管通透性试验考察地黄多糖治疗效果。

[0058] (3)、实验材料

[0059] 3.1药品

[0060] 地黄多糖(含量80％)喷剂(分装于塑料捏喷瓶内，批号110509)；地黄多糖软膏(以凡士林、羊毛脂为基质，配制成5％，10％软膏制剂，批号1105016)；地黄多糖含片(含量0.5g，批号1105021)。

[0061] 3.2动物

[0062] SD大鼠；昆明种小鼠；豚鼠；日本大耳白家兔(天津药物研究院实验动物中心)。

[0063] (4)、实验方法

[0064] 4.1对家兔实验性口腔溃疡的治疗作用

[0065] 日本大耳白家兔24只，公兔，体质量2.0-2.5kg，自由进水饮食，适应环境1周。以烧灼法制备口腔黏膜浅表性溃疡模型：将动物以异戊巴比妥麻醉并固定，用内径4mm玻璃管，内置一棉球，使棉球的底部与玻璃管下口取平，在管内滴入液化苯酚(含苯酚90％)，以浸透小棉球为宜，然后，将玻璃管下端平置于家兔左侧口角颊黏膜同一部位烧灼30s，24h后在家兔烧灼黏膜部位形成直经约4.5mm的圆形或椭圆形溃疡，溃疡表面呈灰白色。分成1组，设为一组8只。对溃疡部位捏喷地黄多糖一下，每次约12mg药物。每日在第1次用药前用分规测量和记录所有动物溃疡的大小和愈合情况。结果表明，地黄多糖对家兔口腔溃疡的疗效有效，平均愈合时间为(8.9±0.6)d。

[0066] 4.2对大鼠实验性口腔溃疡的治疗作用

[0067] SD大鼠30只，公鼠，体质量约250g，实验前适应环境1周，自由饮水进食。异戊巴比妥麻醉，由大鼠面颊外侧进针，将15％醋酸0.05mL准确 注入颊黏膜下。24h后，分开大鼠嘴唇，可见表面呈灰白色的圆形或椭圆形的溃疡。按上述家兔的方法治疗和观察。结果表明，地黄多糖对大鼠口腔溃疡有效，平均愈合时间为(9.1±1.2)d。

[0068] (5)、结论

[0069] 实验结果表明，地黄多糖对动物模拟的口腔溃疡具有一定治疗作用，愈合时间较长；对多种细菌具有抑制作用，但不能很好降低毛细血管的通透性；不能明显抑制致炎剂引起的炎症反应。

[0070] 3、梓醇对实验性口腔黏膜溃疡的药效学

[0071] (1)、实验目的：研究梓醇对动物实验性口腔黏膜溃疡的治疗作用。

[0072] (2)、实验方法：通过烧灼法制备口腔黏膜浅表性溃疡模型、大鼠角叉菜胶足趾肿胀实验、体外抑菌试验、小鼠腹腔毛细血管通透性试验考察梓醇治疗效果。我们研制出几无刺激性的梓醇，在家兔和大鼠模拟的口腔溃疡模型上进行了药效学实验，并进行了相关的药理、毒理实验。

[0073] (3)、实验材料

[0074] 3.1药品

[0075] 梓醇喷剂(梓醇含量90％，分装于塑料捏喷瓶内，批号110609)；梓醇软膏(以凡士林、羊毛脂为基质，配制成5％，10％软膏制剂，批号1106016)；梓醇含片(含量0.5g，批号1106021)；桂林西瓜霜喷剂(桂林中药制药厂，批号110126)。

[0076] 3.2动物

[0077] SD大鼠；昆明种小鼠；豚鼠；日本大耳白家兔(天津药物研究院实验动物中心)。

[0078] (4)、实验方法

[0079] 4.1对家兔实验性口腔溃疡的治疗作用

[0080] 日本大耳白家兔24只，公兔，体质量2.0-2.5kg，自由进水饮食，适应环境1周。以烧灼法制备口腔黏膜浅表性溃疡模型：将动物以异戊巴比妥麻醉并固定，用内径4mm玻璃管，内置一棉球，使棉球的底部与玻璃管下口取平，在管内滴入液化苯酚(含苯酚90％)，以浸透小棉球为宜，然后，将玻璃管下端平置于家兔左侧口角颊黏膜同一部位烧灼30s，24h后在家兔烧灼黏膜部位形成直经约4.5mm的圆形或椭圆形溃疡，溃疡表面呈灰白色。随机分成3组，每组8只，设梓醇组、桂林西瓜霜对照组和空白对照组。分别对溃疡部位捏喷梓醇和桂林西瓜霜各一下，每次约12mg药物，bid，对照组不作任何处理。每日在第1次用药前用分规测量和记录所有动物溃疡的大小和愈合情况。结果表明，梓醇对家兔口腔溃疡的疗效显著，平均愈合时间为(3.8±0.6)d，与桂林西瓜霜的的(9.4±1.2)d和空白对照组的(9.7±1.6)d相比，差异具有显著性(P<0.01)。

[0081] 4.2对大鼠实验性口腔溃疡的治疗作用

[0082] SD大鼠30只，公鼠，体质量约250g，实验前适应环境1周，自由饮水进食。异戊巴比妥麻醉，由大鼠面颊外侧进针，将15％醋酸0.05mL准确注入颊黏膜下。24h后，分开大鼠嘴唇，可见表面呈灰白色的圆形或椭圆形的溃疡。随机分成3组，按上述家兔的方法治疗和观察。结果表明，梓醇对大鼠口腔溃疡的疗效显著，平均愈合时间为(3.9±1.2)d，与桂林西瓜霜的(9.2±1.5)d和空白对照组的(9.8±1.3)d相比，差异具有显著性(P<0.01)。

[0083] (5)、药理及毒理试验

[0084] 5.1小鼠腹腔毛细血管通透性实验

[0085] 取小鼠随机分成3组，每组10只，其中第1组0.32g／kg梓醇溶液(以0.5％CMC-Na作溶媒)灌胃给药，qd，连续3d；第2组以0.32g／kg西瓜霜溶液(以0.5％CMC-Na作溶媒)给药方法同梓醇组；第3组以0.5％CMC-Na溶液灌胃给药0.5mL，方法同梓醇组。按Whittle法末次给药后1h小鼠静注0.5％伊文氏兰0.2mL，腹腔注射0.25％冰醋酸0.4mL／10g，30min后杀死动物，放血后剖开腹腔，用适量纯化水分次清洗腹腔，收集洗出液，过滤后定容到10mL，于616nm处分别测量吸收度并作组间统计学。结果表明，梓醇的毛细血管通透抑制率可达到70.40％，与西瓜霜组对照组比较，差异显著(P<0.01)。

[0086] 5.2抗炎试验

[0087] SD大鼠随机分成3组，每组8只，分别涂以10％梓醇软膏、10％桂林西瓜霜软膏和凡士林。每组上、下午各1次于右后肢下部涂药0.2g，连涂2d，第3天上午涂药30min后于右后肢足趾腱膜下注射1％角叉菜胶0.1mL／只，于致炎后1～6h，分别测定(容积测量法)大鼠右后肢容积，以其致炎前后的足容积差值为肿胀程度，结果表明，梓醇有明显的抗炎作用，梓醇与西瓜霜对照组比较，抗炎作用差异显著(P<0.01)。

[0088] 5.3实验室抑菌试验

[0089] 选取硫乙醇盐液体培养基，在净化台上，加入经精密称定的梓醇，浓度梯度分别为1：50，1：100，1：200，1：400，1：800，1：1600，1：3200。然后，再分别加入经活化24h并稀释
100倍的金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、白色念珠菌、大肠杆菌、白色葡萄球菌、甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌2mL；同法做阳性对照，置37e培养箱中培养，每日振摇培养液3～
4次，连续培养5d，每日观察和记录。结果在需氧菌、厌氧菌培 养基中，梓醇对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、白色念珠菌、白色葡萄球菌的MIC为181600；对大肠杆菌、甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌的MIC为18800。

[0090] 5.4梓醇急性毒性试验

[0091] 取昆明种小鼠70只，体质量18-22g，公母各半。随机分成7组，以梓醇混悬液按不同剂量一次性灌胃，然后观察14d。记录逐日小鼠毒性反应及死亡数，用Bliss法以NDST程序计算小鼠的半数致死量，结果表明，小鼠经口服LD50为2.15g／kg。

[0092] 2.3.5皮肤毒性试验

[0093] 5.4.1完整皮肤毒性试验

[0094] SD大鼠30只，随机分成3组，于给药前24h将大鼠背部脊柱两侧毛脱掉，去毛范围约相当于体表面积有10％左右。第1组每只大鼠涂10％的梓醇软膏3g，第2组每只大鼠涂50％的梓醇软膏3g，第3组每只大鼠涂软膏基质3g，纱布固定，24h后去除残留的受试物和赋形剂，每日观察，连续7d。结果3组大鼠的皮肤、毛发、眼睛、四肢活动均无变化。处死观察肝、肾组织，未见异常。

[0095] 5.4.2烫伤皮肤毒性试验

[0096] SD大鼠20只，随机分成2组，以上法脱毛，并造成三度烫伤，各组分别涂10％梓醇和基质，约厚2mm，每日用药1次，连续用药14d。停药1周后处死动物，观察肝、肾组织，并进行病理切片。结果未见毒性反应，肝、肾病理切片未见损伤。

[0097] 5.5皮肤刺激试验

[0098] 日本大耳白家兔4只，于用药前24h将家兔背部两侧毛脱掉，不损伤 皮肤，脱毛面积为体表面积的10％(两侧各50cm2)。一侧脱毛区作正常皮肤刺激试验，分为梓醇软膏区(给药区)和凡士林区(空白对照区)，给药区涂10％梓醇软膏1.0g，对照区涂以等量的白凡士林；另一侧脱毛区作损伤皮肤刺激试验，给药前用大头针在脱毛区划出#形擦伤，直径2cm，以刺伤皮肤，不伤真皮，使皮肤出现密集出血点，立即在擦伤部位涂10％梓醇软膏。观察指标同上，并与对照组比较。给药24h后擦干净药物和赋形剂，观察发现局部无红斑和水肿反应。然后连续涂药7d，同样观察24，48，72h的皮肤反应，结果正常皮肤和破损皮肤均未发现红斑和水肿反应。

[0099] 5.6皮肤过敏试验

[0100] 白色豚鼠30只，体质量250-300g，公母各半，随机分为3组，每组10只。于用药前24h将豚鼠背部两侧对称脱毛3mm@3mm。致敏接触：3组分别涂0.2g10％梓醇软膏、阳性致敏物(2，4-二硝基氯代苯配制成1％的致敏浓度和0.1％的激发浓度)和软膏基质，用适宜方法固定。6、7、14d以同样方法重复1次。激发接触，于末次给10％梓醇软膏致敏后的14d，将10％梓醇软膏0.2g涂于右侧脱毛区，6h后去掉10％梓醇软膏，即刻观察，于24、48、
72h再次观察皮肤过敏反应情况。试验结果梓醇和基质组对豚鼠均无致敏性，与阳性对照组比较差异有极显著性。

[0101] (6)、结论

[0102] 实验结果表明，对动物实验性口腔黏膜溃疡有显著的治疗作用和促进愈合作用；