心脑欣胶囊在制备抗抑郁药中的应用

摘要

本发明公开了心脑欣胶囊在制备抗抑郁药中的应用。经实验研究发现心脑欣胶囊可以显著减少行为绝望模型小鼠的悬尾和强迫游泳的不动时间，经开野实验证明，显著减少不动时间的同时，不影响小鼠的自发性活动，提示心脑欣胶囊具有一定的抗抑郁作用；与此同时，心脑欣胶囊能抑制单胺氧化酶的活性，增加突触间隙内单胺类神经递质的含量，从该角度也可证明心脑欣胶囊具有一定的抗抑郁作用；此外，心脑欣胶囊还可以显著拮抗利血平和阿扑吗啡引起的小鼠体温下降，增加外源性给予NE的毒性，都提示心脑欣胶囊具有抗抑郁作用，其抗抑郁作用是通过改善突触间隙内单胺类神经递质水平实现的。

权利要求

1.心脑欣胶囊在制备抗抑郁药中的应用，其特征在于，所述心脑欣胶囊由重量份数为

3~6份的红景天、5~10份的枸杞、3~9份的沙棘组成。

说明书

心脑欣胶囊在制备抗抑郁药中的应用

技术领域

[0001] 本发明属于医药领域，具体涉及心脑欣胶囊在制备抗抑郁药中的应用。

背景技术

[0002] 抑郁症以情感障碍为突出表现，不仅影响患者的工作、学习和生活，阻碍其社会功能的发挥，更有可能导致自杀行为而危及患者的生命。随着社会竞争的激烈，工作节奏的加快，抑郁症患者人数也将呈现上升的趋势[1]。世界卫生组织最新调查统计分析结果显示，全球抑郁症的发生率约为3.1%，而在发达国家的发生率接近6%左右，在年满20岁的成年人口中，抑郁症患者正以每年113%的速率增加，己成为多发病、常见病。

[0003] 抑郁症是一组病因和发病机制不同的异质性疾病，其症状、体征是先天遗传因素、先天神经发育异常和后天环境因素共同作用产生，难以用单一的病因和发病机制来解释。目前抑郁症的发病机理尚不完全清楚，临床上常用抗抑郁药物主要是合成药，普遍存在耐药性、副作用大等弊端，因此寻找安全、高效、副作用小的抗抑郁药物尤其是天然抗抑郁药物成为了该领域的研究热点。

[0004] 心脑欣胶囊为三普药业股份有限公司产品，国药准字Z20025866，主治益气养阴、活血化瘀。但作用在抗抑郁药中还未见报道。

发明内容

[0005] 发明目的：本发明的目的在于提供心脑欣胶囊的新应用。

[0006] 技术方案：本发明公开了心脑欣胶囊在制备抗抑郁药中的应用。

[0007] 上述心脑欣胶囊由重量份数为3～6份的红景天，5～15份的枸杞，3～9份的沙棘组成。

[0008] 有益效果：经实验研究发现心脑欣胶囊可以显著减少行为绝望模型小鼠的悬尾和强迫游泳的不动时间，经开野实验证明，显著减少不动时间的同时，不影响小鼠的自发性活动。提示心脑欣胶囊具有一定的抗抑郁作用；与此同时，心脑欣胶囊能抑制单胺氧化酶的活性，增加突触间隙内单胺类神经递质的含量，从该角度也可证明心脑欣胶囊具有一定的抗抑郁作用；此外，心脑欣胶囊还可以显著拮抗利血平和阿扑吗啡引起的小鼠体温下降，增加外源性给予NE的毒性，都提示心脑欣胶囊具有抗抑郁作用，其抗抑郁作用是通过改善突触间隙内单胺类神经递质水平实现的。

具体实施方式

[0009] 实施例1：

[0010] 心脑欣胶囊对行为绝望模型小鼠抑郁行为的影响

[0011] 1材料与方法

[0012] 1.1材料

[0013] 1.1.1主要药品与试剂

[0014] 心脑欣胶囊，内容物为棕褐色粉末，0.5g/粒，批号：120803三普药业股份有限公司；

[0015] 盐酸氟西汀片（常州四药制药有限公司，20120308）。

[0016] 1.1.2实验动物

[0017] 清洁级ICR小鼠，雄性，体重(20±2)g，南通大学实验动物中心，合格证号：SCXK（苏）2008-0010。动物分笼饲养，保持12h昼夜节律，室温22±1℃，自由饮水摄食。

[0018] 1.1.3主要实验仪器

[0019] 小鼠矿场行为测试仪（自制，直径30cm，高20cm，底部19等分）；

[0020] 小鼠强迫游泳行为测试仪（自制，高50cm，直径20cm）；

[0021] 电子天平(Sartorius，BS110S)

[0022] 1.2方法

[0023] 1.2.1分组与给药

[0024] 将小鼠随机分为五组，每组10只，分别为空白组(生理盐水，0.1ml/kg，i.g.)，阳性药组(氟西汀：20mg/kg,i.g.)，心脑欣胶囊低剂量(170mg/kg，i.g.)，中剂量(340mg/kg，i.g.)，高剂量(680mg/kg，i.g.)，连续给药7d后进行检测。

[0025] 1.2.2开野实验

[0026] 将小鼠至于小鼠开阔箱。观察4min，比较各组小鼠后2min内水平得分（穿格次数）、垂直得分（小鼠双前肢向上抬举次数）、修饰次数（小鼠在清洁身体各部委过程中，使用头、舌和前肢做出的多种动作）。

[0027] 1.2.3强迫游泳实验

[0028] 将小鼠置于水深10cm、水温25℃的玻璃圆筒中，观察6min，比较各组小鼠在后4min内的累积不动时间。不动时间判定：小鼠漂浮在水面，不挣扎，仅作一些必须保持头部在水面的动作。

[0029] 1.2.4悬尾实验

[0030] 将小鼠尾端2cm的部位贴正在一根水平木棍上，使小鼠成倒挂状态，其头部距离台面约15cm，用隔板隔开相邻动物之间的视线。观察6min，记录后4min内各组小鼠的累积不动时间。不动时间判定标准：小鼠被悬挂期间，无任何活动时定位不动时间。

[0031] 2结果

[0032] 2.1心脑欣胶囊对绝望模型小鼠悬尾实验不动时间的影响

[0033] 如表1所示，心脑欣胶囊(340mg/kg)连续口服给药7d可显著缩短悬尾实验中小鼠的不动时间；阳性对照药氟西汀(20mg/kg)在悬尾实验中同样可以缩短小鼠的不动时间。

[0034] 表1心脑欣对小鼠悬尾不动时间的影响

[0035]

[0036] 注：与空白对照组比较，*p<0.05，**p<0.01

[0037] 2.2心脑欣胶囊对绝望模型小鼠强迫游泳实验不动时间的影响

[0038] 如表2所示，心脑欣胶囊中、高剂量(340mg/kg,680mg/kg)组连续口服7d可显著缩短小鼠在强迫游泳实验中的不动时间；阳性对照药氟西汀(20mg/kg)在强迫游泳实验中同样可以缩短小鼠的不动时间。

[0039] 表2心脑欣对小鼠强迫游泳不动时间的影响

[0040]

[0041] 注：与空白对照组比较，*p<0.05，**p<0.01

[0042] 2.3心脑欣胶囊对正常小鼠自发活动的影响

[0043] 实验结果见表3，连续给予小鼠7d心脑欣胶囊(170mg/kg,340mg/kg,680mg/kg)和氟西汀(20mg/kg)，在开野实验中，小鼠自发活动与对照组比较没有显著变化，表明心脑欣胶囊对小鼠自发活动没有显著影响，其抗抑郁作用具有特异性。

[0044] 表3心脑欣对小鼠自发性活动的影响

[0045]

[0046] 注：与空白对照组比较，*p<0.05，**p<0.01

[0047] 3结论

[0048] 本实验研究证明，心脑欣胶囊(340mg/kg,680mg/kg)连续口服7d可显著缩短小鼠在强迫游泳实验中的不动时间，表现出一定的抗抑郁作用；心脑欣胶囊中剂量(340mg/kg)组连续口服7d可显著缩短小鼠在悬尾实验中的不动时间，表现出一定的抗抑郁作用。

[0049] 实施例2：

[0050] 心脑欣胶囊急性给药对小鼠脑组织MAO-B活力的影响

[0051] 1材料与方法

[0052] 1.1.1主要药品与试剂

[0053] 心脑欣胶囊，内容物为棕褐色粉末，0.5g/粒，批号：120803三普药业股份有限公司；

[0054] 盐酸氟西汀片（常州四药制药有限公司，20120308）；

[0055] BCA蛋白浓度测定试剂盒（碧云天生物技术研究所，P0012）

[0056] 单胺氧化酶(MAO)测试盒（南京建成生物工程研究所，A034）

[0057] 1.1.2实验动物

[0058] 清洁级ICR小鼠，雄性，体重(20±2)g，南通大学实验动物中心，合格证号：SCXK（苏）2008-0010。动物分笼饲养，保持12h昼夜节律，室温22±1℃，自由饮水摄食。

[0059] 1.1.3主要实验仪器

[0060] 小鼠强迫游泳行为测试仪（自制，高50cm，直径20cm）；

[0061] 电子天平（Sartorius，BS110S）；

[0062] 水浴锅（HH-4数显恒温水浴锅（常州国华电器有限公司））；

[0063] 手动匀浆器；

[0064] 酶联免疫检测仪（Thermo，美国）。

[0065] 紫外分光光度计（南京麒麟分析仪器有限公司，江苏南京）；

[0066] 台式高速冷冻离心机（Sigma，美国）

[0067] 1.2方法

[0068] 实验共分6组，对照组，模型组，心脑欣胶囊高、中、低剂量组，阳性对照组给予氟西汀(20mg/kg）。连续灌胃7d，对照组和应激组给予等体积蒸馏水。强迫游泳实验结束后24h断头处死小鼠，在冰上迅速分离出脑组织，生理盐水洗净，称重后按1:10(W/V)加入预冷的0.32mol/L蔗糖和0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)制备匀浆，制备脑组织。采用BCA蛋白浓度测定脑组织蛋白含量(以蛋白标准液为标准品)，将上述重线粒体稀释至1g/L，作为MAO酶原。

[0069] 单胺氧化酶(MAO-B)活性测定：取上述制备的MAO酶原200μl，加入磷酸盐缓冲液(pH7.4)600μl，37℃恒温水浴振荡20min后，加入200μl底物（0.01mol/L苄胺），40min后加入200μl 1mol/LHCl终止反应。空白管在保温之前加入200μl 1mol/LHCl。各管分别加入3ml环己烷（提取苄胺产物），振荡1min，4℃放置24h，紫外分光光度计下在242nm处测光密度值。

[0070] 定义：酶活力以每毫克组织蛋白在37℃1h内产生0.01个光密度为一个活力单位，即U/mg prot。

[0071] 公式：MAO活力= 测定管光密度÷0.01÷3÷500μl中蛋白mg数

[0072] 2实验结果

[0073] 急性给药对小鼠脑组织MAO-B活力的影响

[0074] 如表4，连续给药7d，与空白对照组比较,模型对照组MAO-B活力显著升高，与模型对照组相比，阳性药氟西汀组MAO-B的活性显著降低(P<0.05)，心脑欣胶囊低、高剂量组MAO-B的活性显著降低(P<0.05,P＜0.01)

[0075] 表4心脑欣胶囊对小鼠脑组织MAO-B活力的影响

[0076]

[0077] 注：与模型组比较，*p<0.05，**p<0.01

[0078] 3结论

[0079] 本实验研究证明，心脑欣胶囊高、低剂量组(170mg/kg,680mg/kg)连续给药 7d能显著抑制单胺氧化酶的活性，抑制单胺类神经递质的降解，从而增加突触间隙内的单胺类神经递质的含量，发挥抗抑郁作用。

[0080] 实施例3：

[0081] 心脑欣胶囊对药物诱发抑郁模型小鼠行为的影响

[0082] 1材料与方法

[0083] 1.1材料

[0084] 主要药品与试剂

[0085] 心脑欣胶囊，内容物为棕褐色粉末，0.5g/粒，批号：120803三普药业股份有限公司；

[0086] 盐酸氟西汀片（常州四药制药有限公司，20120308）；

[0087] 生理盐水（0.86%）；

[0088] 5-HTP：杭州中香化学有限公司生产，批号：CAC071205；

[0089] 5-羟色胺酸(5-Hydroxy-DL-tryptophan,5-HTP)，Fluka公司；

[0090] 阿朴吗啡(Apomorphine Hydrochloride Hemihydrate)，Sigma公司；

[0091] 利血平：注射液为天津金耀有限公司产品，批号1107171。

[0092] 重酒石酸去甲肾上腺素注射液(Noradrenaline Bitartrate Injection)，上海禾丰制药有限公司，批号110703。

[0093] 1.2实验动物

[0094] 清洁级ICR小鼠，雄性，体重(20±2)g，南通大学实验动物中心，合格证号：SCXK（苏）2008-0010。动物分笼饲养，保持12h昼夜节律，室温22±1℃，自由饮水摄食。

[0095] 1.3主要实验仪器

[0096] 电子天平(Sartorius,BS110S)；

[0097] 秒表；

[0098] 电子体温计（型号MC-106B，欧姆龙有限公司）

[0099] 1.4实验方法

[0100] 1.2.15-HTP诱导的甩头行为实验

[0101] 动物分为空白对照组(Control)、心脑欣胶囊低、中、高剂量组(170mg/kg,340mg/kg,680mg/kg)、阳性对照组(FLU,20mg/kg)，动物连续给药7d。参考Corne的方法，各组小鼠末次给药90min后腹腔注射5-HTP200mg/kg，10min后开始观察，记录10min内小鼠甩头次数，比较各组小鼠甩头次数的差异。

[0102] 1.2.2利血平拮抗实验

[0103] 动物分为空白对照组(Control)、模型组、心脑欣胶囊低、中、高剂量组(170 mg/kg,340mg/kg,680mg/kg)、阳性对照组(FLU,20mg/kg)，动物连续给药7d。末次给药同时腹腔注射利血平5mg/kg，4h后将体温计探头插入动物肛门内1.5-2cm处测量肛温，比较各组小鼠肛温的差异。空白对照组(Control)小鼠不给予利血平。1.2.3高剂量阿朴吗啡拮抗实验

[0104] 动物分为空白对照组(Control)、模型组、心脑欣胶囊低、中、高剂量组(170mg/kg,340mg/kg,680mg/kg)、阳性对照组(FLU,20mg/kg)，动物连续给药7d。小鼠末次给药前测量肛温，给药90min后皮下注射阿朴吗啡(16mg/kg)，30min后再次测量肛温，比较给药前后小鼠肛温变化的差异。空白对照组(Control)小鼠不给予阿朴吗啡。

[0105] 1.2.4小鼠去甲肾上腺素毒性增强实验

[0106] 动物分为空白对照组(Control)、心脑欣胶囊低、中、高剂量组(170mg/kg,340mg/kg,680mg/kg)、阳性对照组(FLU,20mg/kg)，动物连续给药7d。第7d小鼠给药1h后，皮下注射3mg/kg的去甲肾上腺素，然后将小鼠置于塑料笼中，自由进水进食，48h后比较各给药组和空白对照组中小鼠的死亡个数及死亡率。

[0107] 2实验结果

[0108] 2.1对5-HTP诱导的甩头行为的影响

[0109] 实验结果见表5，与空白对照组(Control)相比，阳性药氟西汀组及心脑欣胶囊高、中、低剂量组(170mg/kg,340mg/kg,680mg/kg)均无显著性差异。

[0110] 表5心脑欣胶囊对5-HTP诱导小鼠甩头的影响

[0111]

[0112] 注：与空白对照组比较，*p<0.05，**p<0.01

[0113] 2.2对利血平诱导体温下降的影响

[0114] 实验结果见表6，与空白对照组相比，利血平处理的小鼠体温明显下降；心脑欣胶囊低、中、高剂量组(170mg/kg,340mg/kg,680mg/kg)连续给药7d能显著拮抗利血平引起的小鼠体温下降，提示心脑欣胶囊的抗抑郁作用与影响中枢单胺能神经系统。

[0115] 表6心脑欣胶囊对利血平诱导小鼠体温下降的影响

[0116]

[0117] 注：与模型组比较，*p<0.05，**p<0.01

[0118] 2.3对高剂量阿朴吗啡致体温下降的影响

[0119] 实验结果见表7，与空白对照组相比，阳性药氟西汀组，心脑欣胶囊低、中、高剂量组(170mg/kg,340mg/kg,680mg/kg)均有显著性差异。

[0120] 表7心脑欣胶囊对阿扑吗啡致小鼠体温下降的影响

[0121]