含有皮质类固醇作为活性成分的局部制剂

摘要

本发明涉及皮质类固醇药物颗粒的水悬浮液形式的制剂用于局部给药来预防和/或治疗皮肤病（如特应性皮炎、痤疮和牛皮癣）的用途。

权利要求

1.一种含有悬浮于水相中的含量为0.015至0.080％w/v的二丙酸倍氯米松微粉化颗粒作为活性成分的用于预防和/或治疗皮肤病的局部施用的无推进剂药物制剂，所述水相由以下物质组成：选自聚山梨酸酯类的含量为0.1至0.3％w/v的乳化剂、作为张力调节剂的含量为5.0至5.2％w/v的糖或糖醇、作为增稠剂的含量为0.5至1.0％w/v的微晶纤维素和羧甲基纤维素钠的混合物、一种或多种防腐剂和补足至100％的水。

2.根据权利要求1的制剂，其中二丙酸倍氯米松以无水形式存在。

3.根据权利要求1的制剂，其中二丙酸倍氯米松以单水合物形式存在。

4.根据权利要求1的制剂，其中二丙酸倍氯米松的含量为0.0385至0.077％w/v。

5.根据权利要求1-3任一项的制剂，其中乳化剂以0.1至0.2％w/v的含量存在。

6.根据权利要求5的制剂，其中乳化剂是聚山梨酸酯20或聚山梨酸酯80。

7.根据权利要求1-3任一项的制剂，其中张力调节剂以5.1%w/v的含量存在。

8.根据权利要求7的制剂，其中张力调节剂选自葡萄糖单水合物、甘露糖醇、山梨糖醇和木糖醇。

9.根据权利要求8的制剂，其中张力调节剂是葡萄糖单水合物。

10.根据权利要求1-3任一项的制剂，其中增稠剂以0.8％w/v的含量存在。

11.根据权利要求1-3任一项的制剂，其中防腐剂以0.25至0.30％w/v的含量存在。

12.根据权利要求11的制剂，其中防腐剂是苯乙醇或苯扎氯铵或其混合物。

13.根据权利要求1-3任一项的制剂，装入用于以喷雾形式局部递送的装置中。

说明书

含有皮质类固醇作为活性成分的局部制剂

[0001] 本发明涉及皮质类固醇药物颗粒的水悬浮液形式的制剂用于局部给药来预防和/或治疗皮肤病（如特应性皮炎、痤疮和牛皮癣）的用途。

[0002] 本发明进一步提供了用于制备所述制剂的方法以及将组合物以喷雾形式施用于皮肤上的方法。

[0003] 发明背景

[0004] 在人体中，皮肤是外皮（integumentary）系统的最大器官，即，保护身体免受伤害的系统。其由三个主要层组成，即：i）表皮，其是皮肤的最外层，并且主要由角化细胞组成；ii）真皮，其是由胶原蛋白、弹性纤维和超原纤维(extrafibrillar)基质组成的中间层；和iii）皮下组织，其是筋膜下的深脂肪层。

[0005] 存在许多可以影响皮肤的病症或疾病，总称为皮炎或皮肤病。

[0006] 皮炎症状随着不同形式的病症而不同。可以从皮疹变化至丘疹（bumpy rashes），或包括水泡。

[0007] 皮肤的病况或病症的预防或治疗传统上使用简单的局部递送系统。特别地，局部皮质类固醇，如17-戊酸倍他米松、二丙酸倍他米松和二丙酸倍氯米松，被广泛用作活性成分，主要是因为它们的抗炎、抗痒和血管收缩作用。

[0008] 目前可用的含皮质类固醇产品主要是作为在管或瓶子中提供的气雾剂泡沫、霜、凝胶、洗液、洗发水或膏，并用手（指尖）施用于受影响的皮肤区域。

[0009] 许多制剂，如霜、洗液或膏，是油腻的，并且因此对于施用于大面积的皮肤上令人感到不愉快。此外，还观察到所述制剂的无效性，因为它们通常太粘，使得活性剂不能在表皮中有效渗透。此外，一些常规霜和膏基料对皮肤是刺激性的，特别是为了功效常常需要长期暴露时，并且洗液的流动性常常使得难以将身体施用控制在所需区域内。此外，需要将这样的制剂擦入目标部位中，以提高活性剂进入表皮的渗透，而擦是本身会产生刺激的一个动作。此外，常常还考虑到制剂成分对环境剂（例如，U.V.射线）的敏感性。

[0010] 加压气雾剂（基于推进剂）形式的制剂常常含有乙醇，并且因此它们遭遇公知的乙醇副作用，即，刺激性。此外，所述制剂具有成本相对高的缺点，主要是由于容器和计量阀的构造引起的。其他制剂含有其他刺激性载体或溶剂，如丙二醇，因此这样的制剂不能提高病人的顺从性。

[0011] 还可以利用几种在喷雾至皮肤上时形成大量泡沫的制剂，但出于美观原因，这对于使用这样的制剂的病人而言是非常不理想的。

[0012] 此外，应当强调在许多皮肤病中，角质化过程被扰乱，导致增加的经皮水分流失。这种情况的结果可能是差的皮肤结构，导致细菌感染、过敏原或毒性物质的渗透以及增加的水分流失，进一步恶化疾病。

[0013] 为了克服这个问题，通常在施药过程中将由塑料膜组成的闭合屏障施用于皮肤上，以增强水分保持。常用的薄膜由聚偏二氯乙烯（PVDC）共聚物组成。然而，这种封闭皮肤表面的方式在特定的皮肤病中难以执行并且治疗不当，如在牛皮癣的情况中。

[0014] 或者，有时候添加保湿剂，但这些赋形剂中的一些可能是刺激性的并且不是耐受良好的，以致一些相关制剂还含有防止刺激的安抚剂，如芦荟、绿茶、甘菊、甘草根或尿囊素。

[0015] 常规制剂的再一个缺点是它们的活性剂作用短的持续时间，并且没有有效地到达更深的真皮层，而仅仅是渗透至浅表皮中。

[0016] 因此需要经常再次施药，由此对病人的治疗顺从性和生活质量产生了负面影响，由于缺乏顺从性，常常放弃强化治疗。

[0017] 此外，浅表层高水平皮质类固醇的存在可能导致不受欢迎的作用，如皮肤变薄（萎缩），其有时导致不美观的持久的长纹（细沟）。

[0018] 总而言之，基于局部皮质类固醇制剂的缺点会不同，因为它们常常刺激正常的皮肤，施用是耗费时间和麻烦的，不能长期使用，会污染衣物和/或具有讨厌的气味。

[0019] 因此，有时人们难以维持定期地施用这些药物。

[0020] 另一方面，突然停用皮质类固醇可能引起病症的侵略性复发。这称为病症的“反弹”。

[0021] 因此，对有效治疗皮肤疾病的病人顺从性提高的局部制剂仍然存在未满足的需求。

[0022] WO2011/026076中公开了不具有上述缺点中的一些的局部制剂。

[0023] 然而，其教导基本上是针对水包油型乳液的制备，其中将疏水性的皮质类固醇溶解于油相中，使其更易于吸收。

[0024] 此外，为了促进活性成分在真皮中的渗透并且因此促进其功效，在WO2011/026076的制剂中，加入了相当大含量的表面活性剂和渗透增强剂。

[0025] 所述的两个特征都有助于显著提高活性成分的渗透，不仅渗透至真皮中，而且还渗透至皮下组织中，其随后可能会引起吸收至血流中的增加。

[0026] 另一方面，已知皮质类固醇的副作用主要发生在全身性水平，并且特别是儿童，处于较高的全身性副作用风险中。这样的作用在局部以及全身性水平是剂量依赖性的。这意味着，作为一般的治疗协议，最佳给药时间表是使用最小剂量仍然提供功效（大部分是症状缓解）的时间表。

[0027] 此外，已知由于其螯合脂质的能力，而脂质是皮肤的疏水性保护屏障的重要成分，因此高含量的特定表面活性剂可能是刺激性的。

[0028] 因此，本发明的目的是提供用于局部给药以预防和/或治疗皮肤病的制剂，所述制剂，是耐受良好的，具有高水平的保湿活性，并且特征在于治疗剂有效渗透至真皮中，而没有任何显著的全身性吸收。

[0029] 发明概述

[0030] 在第一个方面中，本发明涉及一种含有悬浮于水相中的二丙酸倍氯米松（BDP）微粉化颗粒作为活性成分的用于预防和/或治疗皮肤病的局部施用的无推进剂药物制剂，所述水相由以下物质组成：选自聚山梨酸酯类的含量为0.1至0.3%w/v的乳化剂、作为张力调节剂的含量为5.0至5.2%w/v的糖或糖醇、作为增稠剂的含量为0.5至1.0%w/v的微晶纤维素和羧甲基纤维素钠的混合物、一种或多种防腐剂和补足至100%的水。

[0031] 在第二个实施方案中，本发明涉及装入用于以喷雾形式局部递送的装置中的本文中所述的制剂。

[0032] 在第三个实施方案中，本发明涉及上述制剂在制造用于预防和/或治疗皮肤病的药物中的用途。

[0033] 在第四个实施方案中，本发明涉及预防和/或治疗皮肤病的方法，其包括将有效量的上述制剂局部施用于病人。

[0034] 定义

[0035] 术语“活性药物”、“活性成分”、“活性物”和“活性物质”、“活性化合物”和“治疗剂”用作同义词。

[0036] 术语“皮质类固醇”指的是具有氢化环戊烷多氢菲环系统的一类具有抗炎活性的活性成分。

[0037] 术语“二丙酸倍氯米松”指的是化合物(8S,9R,10S,11S,13S,14S,16S,17R)-9-氯-11-羟基-10,13,16-三甲基-3-氧-17-[2-(丙酰氧)乙酰基]-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十二氢-3H-环戊[α]菲-17-基丙酸酯。

[0038] 术语“无推进剂”表示制剂没有在含有任何常用气雾剂推进剂的混合物中递送，所述推进剂如氢氟碳、烃、压缩气体等。

[0039] 术语“喷雾”意思是从合适的分配装置，作为液滴的集合或喷射，来分配制剂。

[0040] “治疗有效量”指的是每个单次装置启动（喷射）时通过喷雾一次给药的活性成分的量。

[0041] 术语“防腐剂”指的是加入以防止由微生物生长或由不需要的化学变化引起的分解的任何天然或合成化物物质。

[0042] 在本申请中，通过激光衍射测量特征性等球体直径来定量颗粒大小，所述直径称为体积直径。体积直径（VD）涉及质量直径（MD）除以颗粒密度（假设对于该颗粒，大小与密度无关）。通过以下来描述颗粒大小分布：i）体积中值直径（VMD），其对应于50%颗粒的体积直径[d(v,0.5)]，和ii）以微米计的10%和90%颗粒的VD（MD）[d(v,0.1)和d(v,0.9)]。

[0043] 术语“化学稳定的”指的是制剂中活性剂的稳定性，其中在25℃和60%相对湿度（RH）下，或在40℃和75%RH下，对于如3、6、12、18或24个月的持续时间，药物试验值和/或杂质含量的变化低于约10%，优选低于5%。

[0044] 在悬浮制剂的内容中，表述“物理上稳定的”指的是在延长的时间段中基本上没有呈现出活性成分的颗粒大小生长或晶体形态学变化的制剂，其易于再分散并且在再分散时，没有快速絮结，以防止活性成分的再次给药。

[0045] 术语“皮肤病”包括影响皮肤的总称为皮炎或皮肤病的病症或疾病。

[0046] 术语“预防”意思是降低疾病或复杂（fastidious）状况发生风险的方法。

[0047] 术语“治疗”意思是用于获得有益或所需结果（包括临床结果）的方法。有益或所需临床结果包括，但不限于，一种或多种症状或病症的缓解或改善、疾病程度的减轻、疾病的稳态（即，没有恶化）、防止疾病散播、延迟或减缓疾病进展、病况的改善或缓和以及缓解（不管是部分或全部），不管是可检测的或不可检测的。

[0048] 发明详述

[0049] 根据本发明，将无推进剂的药物制剂用于局部给药，并且启动，作为喷雾将治疗有效量直接递送至受影响的皮肤部分。

[0050] 活性成分是作为悬浮于水相中的微粉化颗粒存在的二丙酸倍氯米松。所述皮质类固醇对皮肤是耐受非常良好的。

[0051] 优选，二丙酸倍氯米松（BDP）是晶体并且以无水形式或单水合形式存在。

[0052] 在特定的实施方案中，晶体BDP作为无水形式存在，而在另一个特定的实施方案中，BDP作为单水合形式存在。

[0053] 特别地，通常通过它们的粉末X-射线衍射模式来区分两种形式。

[0054] 有利地，至少99%的活性成分悬浮颗粒具有等于或小于20微米的体积直径，至少90%的所述颗粒[d(v,0.9)]具有等于或小于10微米的体积直径，和至少50%的所述颗粒[d(v,0.5)]具有等于或小于6微米的体积直径，优选小于5微米。

[0055] 通过激光衍射测量特征性的等球体直径（称为体积直径）来测定活性物质的颗粒大小，优选使用可从Malvern Instruments Ltd.获得的Malvern装置来测量。

[0056] 活性成分有利地以0.01至0.1%w/v的含量存在，有利地为0.015至0.080%w/v，以致每次启动递送25至100μg的治疗有效量的二丙酸倍氯米松。含量优选为0.0385%至0.077%w/v。

[0057] 在优选实施方案中，治疗有效量为每次启动50μg，而在另一个优选实施方案中，可以为每次启动100μg。

[0058] 在再一个实施方案中，剂量可以为每次启动25μg。

[0059] 制剂不含乙醇、丙二醇和任何其他刺激性溶剂。也不含常用于防止刺激的安抚剂，如芦荟、绿茶、甘菊、甘草根或尿囊素。

[0060] 制剂的水相由水组成，优选纯净水，其中溶解或悬浮：

[0061] i）选自聚山梨酸酯类的乳化剂，含量为0.1至0.3%w/v，优选0.1至0.2%w/v，更优选含量为0.1%w/v。

[0062] 聚山梨酸酯是一类非离子型乳化剂，依据商品名TweenTM或SpanTM可购得，其源自用脂肪酸酯化的PEG化山梨聚糖。有利地，所述乳化剂是聚山梨酸酯20或聚山梨酸酯80。在优选实施方案中，所述乳化剂是聚山梨酸酯20。

[0063] ii）糖或糖醇，作为张力调节剂，含量为5.0至5.2%w/v，优选5.1%w/v。有利地，张力调节剂选自葡萄糖单水合物、甘露糖醇、山梨糖醇和木糖醇，优选葡萄糖单水合物，在药典中也称为右旋糖。

[0064] iii）微晶纤维素和羧甲基纤维素钠的混合物，作为增稠剂，含量为0.5至1.0%，优选0.8%w/v，和

[0065] iv）一种或多种防腐剂。

[0066] 微晶纤维素和羧甲基纤维素钠的混合物是一种商品，依据商品名 RC/CL可获得。

[0067] 有利地，防腐剂以0.25至0.30%w/v，优选0.27至0.29%w/v的含量存在。

[0068] 所述赋形剂优选是苯乙醇或苯扎氯铵或其混合物，以95:5至85:15，优选90:10的比例。

[0069] 本文中所述的制剂呈现出均匀的颗粒分布以及高水平的化学和物理稳定性。

[0070] 由于是颗粒悬浮在制剂中的形式，活性成分缓慢吸附至皮肤中，并且因此作用持续时间延长，由此降低了所需的施用数量。

[0071] 还发现了，在喷雾和水蒸发时，以特定含量使用的微晶纤维素和羧甲基纤维素钠的混合物与张力调节剂一起在皮肤上形成薄膜，这有助于保持水分，并且因此水合，从而避免了皮肤干燥和刺激的风险。

[0072] 所述薄膜不是油腻的，并且因此病人能良好地耐受。

[0073] 此外，已经发现了本文中所用的特定要求含量的乳化剂部分地作为温和渗透增强剂，有助于吸收至真皮中，因此降低了进入表皮的药物的水平，如上所述的，皮肤的萎缩可能与药物进入表皮相关。鉴于药物活性的目标是真皮，预期这将获得更好的治疗作用。

[0074] 另一方面，与其中存在较强的渗透增强剂的制剂相比，还降低了皮下吸收，因此降低了全身性副作用的风险。

[0075] 在理论限制内，假设了本文中所述制剂的优化吸收特性还可能是由于薄膜的形成引起的。

[0076] 可以根据已知的方法制备制剂。

[0077] 通常，制备方法包括以下步骤：

[0078] a）在合适的罐中制备含有合适的赋形剂的水溶液，然后转移至装配有适于均质悬浮液的涡轮机的涡轮乳化器中，并且任选使用机械搅拌器；

[0079] b）将微粉化颗粒形式的活性成分加入水溶液中；

[0080] c）通过搅拌将活性成分的悬浮颗粒均质。

[0081] d）任选将所得到的悬浮液接受高压均质机中的进一步均质步骤；

[0082] 有利地，可以根据WO00/25746中所述的条件来进行所述方法。

[0083] 优选，根据WO03/086347中所述的条件，将活性成分装载至真空下的涡轮乳化器中。

[0084] 根据已知程序进行微粉化步骤，例如，使用常规流体能量磨，如，喷射磨装置，来进行研磨。

[0085] 本文中所述的制剂还可以含有一种或多种悬浮或溶解于水相中的其他活性成分。

[0086] 可以有利地使用的更多活性成分是用于治疗皮肤病的那些，如维甲酸（tretionoin）和免疫抑制剂。

[0087] 本文中所述的局部制剂可以作为喷雾直接施用于受影响的皮肤区域。制剂的强度并因此施用的类固醇的剂量将取决于疾病的严重程度、病人的年龄和受影响区域的扩充。

[0088] 对于儿童，优选使用每次启动能够递送25或50μg治疗有效量BDP的制剂，而对于成人，使用每次启动能够递送50或100μg的制剂将更有利。

[0089] 通常，应当根据受影响区域的扩充，通过递送一至六次制剂喷射来治疗疾病，直至疾病体征消失。

[0090] 可以每天给药一次或两次，优选每天两次，通常在离皮肤约20cm的距离处保持喷雾，以最优地用一次喷射覆盖所需区域。

[0091] 本发明的其他方面还提供了用于将制剂局部以喷雾形式递送至皮肤上的分配装置。在特定的实施方案中，本发明提供了装置，其中装入了制剂，所述装置包括容器、分配器和关闭部件。用于包装的关闭部件可以由聚合物质制得，所述聚合物质如高密度聚乙烯（HDPE）、低密度聚乙烯（LDPE）或树脂。闭合部件特别是接合在容器上的帽子形式，以帮助提供分配器部件的支撑和/或将容器的内含物与外部环境隔开。各种容器材料包括，但不限于，镀锡钢、铝、不锈钢、塑料和玻璃。

[0092] 分配器的一个实例是含有适用于安装在任何类型的容器上的泵的部件，如泵通过与容器上的螺纹相配的螺纹安装在容器上。泵能够通过从启动器延伸至容器中并且连接单向阀的汲取管分配本文中所述的可喷雾制剂，其从启动器中的孔以喷雾形式释放制剂。

[0093] 阀可以是计量阀。可以使用的各种类型的阀包括，但不限于，连续喷雾阀和计量阀。启动器可以容易打开和关闭阀，并且是包装整体的一部分。各种类型的启动器包括但不限于喷雾启动器、泡沫启动器、固体流启动器和特殊启动器。在一个实施方案中，分配装置可以是包括容器的装置，容器中具有含有产品的小袋系统或包，任选装配有汲取管和装配有阀的启动器，其中容器装满氮气或压缩空气，围绕小袋或包。容器可以由铝或锡板制得，并且含有产品的小袋系统或包可以由聚乙烯（PE）、聚丙烯（PP）、聚乙烯对苯二酸酯（PET）和铝层制得。

[0094] 小袋中可以具有汲取管，与启动器阀连通，以控制喷雾速率和降低液滴大小。在实施方案中，用于分配本文中所述制剂的分配装置提供了喷雾速率和喷雾模式，以每次基本上分配均一剂量的方式，所述剂量有利地覆盖了所需的制剂喷射在其上的受影响皮肤区域。

[0095] 装置常常提供可重复的液滴分配，在分配中，约90%的液滴具有约1至约500微米的大小。确定孔的大小，以控制分配产品的微滴大小。孔大小也影响均一的特征性喷雾模式的提供。

[0096] 本文中所述的制剂可以以比可以施用的霜剂和膏剂更容易和更精确的方式来施用，因为喷雾施用只需要喷射给定的体积，而半固体产品的施用需要容易达到和视觉估计的霜剂量或膏剂量。此外，更容易避免大表面积的衣物污染和弄脏。

[0097] 对于喷雾组合物，与膏剂和霜剂产品相反，不一定需要涂抹和摩擦，因为通过液体蒸发或汽化在体表上形成的层已经具有活性剂的理想细分散；因此，以本文中所述的喷雾制剂的局部施用，将不再出现“压痛”。

[0098] 打算将本文中所述制剂的给药用于预防和/或治疗多种皮肤病或病症，包括，但不限于，接触性皮炎、特应性皮炎、脂溢性皮炎、自身敏感性皮炎、瘀滞性皮炎、皮脂缺乏性皮炎、钱币状湿疹、牛皮癣、红斑痤疮、口周皮炎、疥疮、腿溃疡、结节、癣或病毒性皮肤病、盘状狼疮、全身性红斑狼疮、各种形式的苔癣，如扁平苔癣和硬化性苔癣。此外，可以方便地用于治疗不同形式的红斑，特别是晒斑、昆虫叮咬或叮蛰、后过敏测试、包茎和肛门/肛周发炎。

[0099] 优选，所述制剂用于治疗特异性皮炎、湿疹和牛皮癣。实施例

[0100] 实施例1：含有BDP50和100μg的悬浮制剂

[0101] 根据WO00/25746中公开的制备方法，从微粉化无水二丙酸倍氯米松（BDP）开始制备制剂。

[0102] 特别地，制备了每次启动能够递送50μg和100μg的两种制剂。

[0103] 它们的组成（mg/100ml）记录于表1和2中。

[0104] 表1-每次启动50μg制剂

[0105]成分 含量(mg/100ml)
微粉化BDP 38.5
聚山梨酸酯20 100.0
微晶纤维素和羧甲基纤维素钠 800.0
葡萄糖单水合物 5100.0
苯扎氯铵 27.0
苯乙醇 255.0
纯净水，定量至 100ml

[0106] 表2-每次启动100μg制剂

[0107]成分 含量(mg/100ml)
微粉化BDP 77.0
聚山梨酸酯20 100.0
微晶纤维素和羧甲基纤维素钠 800.0
葡萄糖单水合物 5100.0
苯扎氯铵 27.0
苯乙醇 255.0
纯净水，定量至 100ml

[0108] 两种悬浮制剂在物理上都是稳定的，并且显示出良好的活性成分的均匀性。

[0109] 实施例2：含有BDP25μg的悬浮制剂

[0110] 从微粉化无水二丙酸倍氯米松（BDP）开始制备每次启动能够递送25μg的制剂。

[0111] 其组成（mg/100ml）记录于表3中。

[0112] 表3-每次启动25μg制剂

[0113]成分 含量(mg/100ml)
微粉化BDP 19.25
聚山梨酸酯80 100.0
微晶纤维素和羧甲基纤维素钠 800.0
葡萄糖单水合物 5100.0
苯扎氯铵 27.0
苯乙醇 255.0
纯净水，定量至 100ml

[0114] 比较实施例3：根据WO2011/026076制剂（实施例2G）

[0115] 该制剂，其是乳液形式，具有以下组成：

[0116] 表4

[0117]成分 含量(%v/v)
二丙酸倍氯米松 0.077
PEG-6硬脂酸棕榈酸酯
乙二醇硬脂酸棕榈酸酯
PEG-32硬脂酸棕榈酸酯 7.500
矿物油 7.060
油酰聚氧甘油酯 2.940
二乙二醇单乙基醚 10.000
对羟基苯甲酸丙酯 0.800
对羟基苯甲酸甲酯 0.200
丁基化羟基甲苯 0.050
羟乙基纤维素 0.100
水 71.273

[0118] 制备方法：

[0119] a）将聚乙二醇和乙二醇硬脂酸棕榈酸酯、油酰聚氧甘油酯和矿物油混合并加热至约50℃。

[0120] b）将对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸甲酯和丁基化羟基甲苯与液体a）混合，在50℃下连续搅拌。

[0121] c）将二丙酸倍氯米松与二乙二醇单乙基醚混合。

[0122] d）将c）的物质与b）的物质混合。

[0123] e）将羟乙基纤维素溶解于水中。

[0124] f）在50℃下使用连续搅拌，将e）的水相缓慢加入d）的油相中。

[0125] g）将f）的混合物均质，并且使其冷却至室温。

[0126] 比较实施例4：根据US5158761的制剂（实施例5）

[0127] 该制剂，其是悬浮液形式，具有以下组成：

[0128] 表5

[0129]成分 含量(%v/v)
二丙酸倍氯米松 0.10
聚山梨酸酯80 0.01
甘油 1.00
卡波姆934（4%水溶液） 15.00
氢氧化钠（2%水溶液） 10.00
氯化钠（10%水溶液） 8.00
纯净水 65.89

[0130] 制备方法：

[0131] 将2%的氢氧化钠水溶液边搅拌边逐渐加入4%的卡波姆934水溶液中，并且将混合物搅拌直至变成凝胶。

[0132] 将聚山梨酸酯80、甘油和纯净水中的二丙酸倍氯米松悬浮液逐渐加入混合物a）中，并且均匀搅拌。

[0133] 用10%的氯化钠水溶液调节混合物的粘度，并且将混合物均匀搅拌。

[0134] 实施例5：皮肤渗透测试

[0135] 该研究的目的是评价来自实施例1的每次启动100μg制剂的二丙酸倍氯米松（BDP）的渗透和皮肤停留（在表皮和真皮中），与根据US5158761的实施例5和WO2011/026076的实施例2G制备的现有技术的制剂相比较。

[0136] 根据以下描述的测试程序，使用皮肤样品，进行了皮肤渗透研究。

[0137] 使用获自当地屠宰场的完整厚度的猪耳皮肤样品。将样品存储在-20℃，不超过3个月。

[0138] 就在使用前将样品在室温下融化，并使用手术刀清除掉皮下脂肪。记录皮肤样品的平均厚度。

[0139] 在Franz-型扩散池中进行实验。每个池的表面积为0.6cm2。

[0140] 安装大约1.5×1.5cm的皮肤样品，以角膜侧面向供应室（donor chamber）。接收室（receptor chamber）含有约4ml在37℃下恒温的盐水溶液（NaCl0.9%，含有2.5%的2-羟丙基-β-环糊精），并且通过磁力搅拌。在供应室中，将不同体积（5-10-15μl）的制剂施用于角膜侧面。

[0141] 在预定的时间间隔下，从接收室中取出300μl接收溶液，用于分析。取样后，将相同体积的新鲜溶液加入接收溶液中。

[0142] 在体外实验结束时（通常4或8小时），破坏细胞，通过吸取除去接收制剂，使用异2
丙醇洗涤皮肤。然后将皮肤打孔活检（0.6cm）。用热空气加热20秒后，用钳子剥离表皮。

[0143] 分离后，将表皮和真皮引入预先称重的Eppendorf试管中，并称重。

[0144] 使用1ml合适的溶剂，从每个表皮和真皮样品提取活性物质：

[0145] 提取溶剂：CH3CN:CH3OH:H2O（19.5:45.5:35v/v/v）

[0146] 条件：1ml溶剂，室温下过夜。

[0147] 提取后，将溶液混合、过滤，并通过HPLC分析。测定了BDP及其主要代谢物，17-BMP和21-BMP。

[0148] 真皮和表皮样品中回收的活性物质含量（Qx）如下计算：

[0149] Qx(μg)=Ce*Ve

[0150] 其中：

[0151] Ce= 提取溶液中的活性物质浓度（μg/ml）

[0152] Ve= 提取溶液的体积（ml）

[0153] 每mg组织回收的活性物质含量（Q）如下计算：

[0154] Q(μg/mg)=Qx/W

[0155] 其中W表示组织的重量（mg）。

[0156] 结果记录于表6中。

[0157]

[0158] 研究结论如下：

[0159] 对于所有测试的制剂，从未在接收室中发现BDP。