一种黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂的制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂，具有预防、保健、治疗和调节免疫等多种功效，是替代抗生素药物的理想、绿色、环保、安全、新型饲料添加剂。该发酵中草药饲料添加剂由复方中草药通过“中草药超声波辅助浸提+多菌种二步发酵”工艺制得，具有中草药和益生菌的双重优点，可以高效调理黄颡鱼肠道健康，标本兼治，固本培元，保持肠道微生态平衡和最佳免疫状态，提高营养物质的消化吸收率，提高黄颡鱼机体免疫力，提高养殖收益，降低养殖风险，替代抗生素使用，对黄颡鱼无不良影响，使用安全，不存在药物残留和耐药性等问题，有着广阔的市场前景。

权利要求

1.一种黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂，其特征在于通过“中草药超声波辅助浸提+多菌种好氧发酵和厌氧发酵相结合的二步发酵工艺”制得，具体包括以下步骤：（1）复方中草药的制备：按照菌陈12～18份、黄柏8～12份、枸杞8～12份、金银花

6～10份、灵芝3～5份、水飞蓟6～10份、柴胡6～8份、黄连3～5份、泽泻6～10份、葛根6～10份、马齿苋6～10份、何首乌5～7份、沙蒺藜3～5份比例准确称量中草药，将其粉碎至40～60目，混合均匀，制得复方中草药；

（2）超声波辅助浸提：向复方中草药粉剂中加入5～10倍的水，在超声波辅助作用下，

100℃条件下回流浸提20～30min；

（3）发酵液制备：向浸提后的中草药浸提液中加入3.0～5.0%可溶性淀粉、2.0～3.0%豆饼粉、0.3～0.5%磷酸二氢钾、0.02%MgSO4.7H2O、0.01%CaCl2,pH调至7.0～7.2；

（4）好氧发酵：选用50L液体发酵罐，装液量为60～70%，接种枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌，接种量分别为2～4%、5～8%，控制发酵温度28～37℃，转速150～300rpm，通气量

10～20L/min；在此发酵条件下发酵12～24h；

（5）厌氧发酵：好氧发酵结束后，接种保加利亚乳杆菌和两歧双歧杆菌，接种量均为

2～4%，发酵温度28～37℃，控温厌氧发酵12～24h；

（6）发酵后处理：发酵完成后将发酵液体用1.2～2体积比麸皮吸附，在40～60℃鼓风干燥机中干燥，水分控制在8～10%；

（7）粉碎：将干燥后的产品用粉碎机60目过筛粉碎，即得黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂。

说明书

一种黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂的制备方法及应用

技术领域

[0001] 本发明涉及一种黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂的制备方法，属于饲料添加剂领域。

背景技术

[0002] 水产品在人们日常饮食中越来越占据重要的份额，为了满足不断增长的水产品的需求，解决因水产养殖规模不断扩大和生长周期缩减而导致的生理机能紊乱、疾病频发成为水产养殖的重点问题，也是水产饲料产业发展的关键。在此背景下，抗生素类饲料添加剂受到热捧，被广泛应用于饲料业中，在一定程度上促进了水产养殖业的发展，但是抗生素带来的高残留、高污染和抗药性等问题愈发的严重。当前社会，食品安全事故频发，人们在满足温饱的同时也更加注重饮食健康，绿色健康的水产品备受关注。中草药饲料添加剂符合绿色水产养殖业发展要求，消除了人们对其饲喂出水产产品的安全顾虑，值得大力推广应用。但当前中药饲料添加剂的研究水平较低，制作工艺简单粗糙，产品科技含量较低，质量不够稳定，诸如此类问题严重制约着中药饲料添加的推广应用。微生物发酵中药是对传统中药加工技术的改革和创新，具有诸多特点和优势。将此技术引入中药饲料添加剂的研究，可使其科技含量大幅提升，效果更加显著，质量更加稳定，效益更加明显，可以显著提高机体免疫力，增强水产动物抵抗疾病的水平，对于解决当前水产养殖业中水产动物的多种问题有着重要的应用价值。利用微生物发酵技术来加工中草药，可使其主要活性物质多糖的含量显著提高，这对于注重养殖成本的水产养殖业显得尤为重要。

[0003] 黄颡鱼（Pseudobagrus fulvidraco Richardson）又称嘎牙子、黄腊丁，在分类上属鲶形目（Silurfoymes），鮠科（Bagridae），黄颡鱼属（Pseudobagrus），本属有5个种，分别为黄颡鱼、江黄颡鱼（瓦氏黄颡鱼）、光泽黄颡鱼、岔尾黄颡鱼及中间黄颡鱼，目前用于人工养殖的主要是黄颡鱼和江黄颡鱼。黄颡鱼在我国大部分地区江河湖泊池沼均有分布，虽然个体较小，但因其肉妹鲜美细嫩，少刺，营养丰富，很受消费者欢迎，黄颗鱼不但有滋补作用，而且有一定的药用价值，其成鱼个体一般在100-250g。黄顺鱼在日本、韩国、东南亚等国家也有巨大的市场潜力，是出口创汇的优良品种。目前，由于天然产量不足，自然捕捞的黄顺鱼已远不能满足人类生活的需要，人工养殖成为黄颡鱼满足市场需求的最主要的途径。但在黄颡鱼人工养殖过程中也存在着抗生素使用过量、养殖风险大等弊端，成为制约黄颡鱼养殖业可持续发展的瓶颈因素。

发明内容

[0004] 本发明的目的在于根据现有技术中存在的上述不足，考虑中草药具有的抗菌、抗病毒、提高机体免疫力和改善动物生长性能的左右，可减少抗生素大量使用造成的养殖业污染，且原料来源广，价格低廉，是一种绿色、环保、高效的饲料添加剂，研制开发一种黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂。

[0005] 本发明上述目的是通过以下技术方案予以实现的：

[0006] 一种黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂，其特征在于复方中草药由以下质量比的中草药组成：菌陈12～18份、黄柏8～12份、枸杞8～12份、金银花6～10份、灵芝3～5份、水飞蓟6～10份、柴胡6～8份、黄连3～5份、泽泻6～10份、葛根6～10份、马齿苋6～10份、何首乌5～7份、沙蒺藜3～5份。

[0007] 本发明提供一种黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂，所选发酵剂为由枯草芽孢杆菌（中国农业微生物菌种保藏管理中心，菌种编号ACCC10619）、酿酒酵母菌(安琪酵母)、保加利亚乳杆菌（中国农业微生物菌种保藏管理中心，菌种编号ACCC10638）和两歧双歧杆菌（ATCC标准菌种，菌种编号ATCC29521）组成的复合发酵剂，其中枯草芽孢杆菌、保加利亚乳杆菌、两歧双歧杆菌的接种量为2～4%、酿酒酵母菌接种量为5～8%。

[0008] 本发明提供一种黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂的制备方法，具体包括以下的步骤：

[0009] （1）复方中草药的制备：按照上述配方准确称量中草药，将其粉碎至40～60目，混合均匀，制得复方中草药；

[0010] （2）超声波辅助浸提：向复方中草药粉剂中加入5～10倍的水，在超声波辅助作用下，100℃条件下回流浸提20～30min；

[0011] （3）发酵液制备：向浸提后的中草药浸提液中加入3.0～5.0%可溶性淀粉、2.0～3.0%豆饼粉、0.3～0.5%磷酸二氢钾、0.02%MgSO4.7H2O、0.01%CaCl2,pH调至7.0～7.2；

[0012] （4）好氧发酵：选用50L液体发酵罐，装液量为60～70%，接种枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌，接种量分别为2～4%、5～8%，控制发酵温度28～37℃，转速150～300rpm，通气量10～20L/min；在此发酵条件下发酵12～24h；

[0013] （5）厌氧发酵：好氧发酵结束后，接种保加利亚乳杆菌和两歧双歧杆菌，接种量均为2～4%，发酵温度28～37℃，控温厌氧发酵12～24h；

[0014] （6）发酵后处理：发酵完成后将发酵液体用1.2～2体积比麸皮吸附，在40～60℃鼓风干燥机中干燥，水分控制在8～10%；

[0015] （7）粉碎：将干燥后的产品用粉碎机60目过筛粉碎，即得黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂。

[0016] 本发明提供一种黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂，具有预防、保健、治疗和调节免疫等多种功效，是替代抗生素药物的理想、绿色、环保、安全、新型饲料添加剂。该发明发酵中草药饲料添加剂一是可以高效调理黄颡鱼肠道健康，标本兼治，固本培元，保持肠道微生态平衡和最佳免疫状态，提高营养物质的消化吸收率，提高动物机体免疫力；二是可抑制和阻止病原大肠菌、梭状芽孢杆菌、沙门氏菌等有害菌的发生，增加肠道益生菌，维持健康的肠道菌群；三是增强免疫作用，通过刺激肠道内免疫系细胞，增加局部抗体的形成，增加巨噬细胞活性；四是发酵中草药饲料添加剂进入肠内抵制有害菌，降低恶臭及有害成分形成，使排出的粪便消除恶臭，在保护养殖环境的同时提高黄颡鱼肉质品质。

[0017] 本发明提供一种黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂，所述黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂产品在水产饲料全价料中使用的质量比例为0.1～0.5：或所述的饲料添加剂在预混料、浓缩料以全价料中所需的比例添加使用。

[0018] 本发明提供一种黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂，其优势在于：一是在发酵中草药饲料添加剂制备过程中采用了“中草药超声波辅助浸提+多菌种二步发酵”的生产工艺，与现有的中草药饲料添加剂产品相比作用效果更显著；二是发酵中草药饲料添加剂具有中草药和益生菌的双重优点，可以高效调理黄颡鱼肠道健康，标本兼治，固本培元，保持肠道微生态平衡和最佳免疫状态，提高营养物质的消化吸收率，提高动物机体免疫力，提高养殖收益，降低养殖风险；三是该产品可替代抗生素使用，对黄颡鱼无不良影响，使用安全，不存在药物残留和耐药性等问题，有着广阔的市场前景。

具体实施方式

[0019] 实施例1：

[0020] 一种黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂，具体制备步骤如下：

[0021] （1）称量：按照如下配方准确称量中草药：菌陈12份、黄柏12份、枸杞8份、金银花10份、灵芝3份、水飞蓟10份、柴胡6份、黄连5份、泽泻6份、葛根10份、马齿苋6份、何首乌7份、沙蒺藜3份；

[0022] （2）复方中草药的制备：将称量后的中草药粉碎至40～60目，混合均匀，制得复方中草药；

[0023] （3）超声波辅助浸提：向复方中草药粉剂中加入5倍的水，在超声波辅助作用下，100℃条件下回流浸提20～30min；

[0024] （4）发酵液制备：向浸提后的中草药浸提液中加入3.0%可溶性淀粉、3.0%豆饼粉、0.3%磷酸二氢钾、0.02%MgSO4.7H2O、0.01%CaCl2,pH调至7.0～7.2；

[0025] （5）好氧发酵：选用50L液体发酵罐，装液量为60～70%，接种枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌，接种量分别为2%、8%，控制发酵温度28～37℃，转速150～300rpm，通气量10～20L/min；在此发酵条件下发酵12h；

[0026] （6）厌氧发酵：好氧发酵结束后，接种保加利亚乳杆菌和两歧双歧杆菌，接种量分别为2%、4%，发酵温度28～37℃，控温厌氧发酵24h；

[0027] （7）发酵后处理：发酵完成后将发酵液体用1.2倍体积比麸皮吸附，在40～60℃鼓风干燥机中干燥，水分控制在8～10%；

[0028] （8）粉碎：将干燥后的产品用粉碎机60目过筛粉碎，即得黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂。

[0029] 实施例2：

[0030] 一种黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂，具体制备步骤如下：

[0031] （1）称量：按照如下配方准确称量中草药：菌陈18份、黄柏8份、枸杞12份、金银花6份、灵芝5份、水飞蓟6份、柴胡8份、黄连3份、泽泻10份、葛根6份、马齿苋10份、何首乌5份、沙蒺藜5份；

[0032] （2）复方中草药的制备：将称量后的中草药粉碎至40～60目，混合均匀，制得复方中草药；

[0033] （3）超声波辅助浸提：向复方中草药粉剂中加入10倍的水，在超声波辅助作用下，100℃条件下回流浸提20～30min；

[0034] （4）发酵液制备：向浸提后的中草药浸提液中加入5.0%可溶性淀粉、2.0%豆饼粉、0.5%磷酸二氢钾、0.02%MgSO4.7H2O、0.01%CaCl2,pH调至7.0～7.2；

[0035] （5）好氧发酵：选用50L液体发酵罐，装液量为60～70%，接种枯草芽孢杆菌和酿