一种治疗哮喘的中药组合物及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种治疗哮喘的中药组合物及其制备方法和应用。它由以下重量份的中药组成：麻黄18-22份、人参18-22份、穿山龙36-44份、苦杏仁10-12份、厚朴10-12份、陈皮10-12份、甘草18-22份、柴胡15-17份和紫苏叶10-12份。该中药组合物具有抗炎、抗敏治其标，扶正、增强免疫力治其本，针对气虚寒哮症发作期及缓解期，宣肺平喘、发汗解表、理气化痰为主，辅以扶正健脾，实现标本兼治。

权利要求

1.一种治疗哮喘的中药组合物，其特征在于由以下重量份的中药原料制成：麻黄

18-22份、人参18-22份、穿山龙36-44份、苦杏仁10-12份、厚朴10-12份、陈皮10-12份、甘草18-22份、柴胡15-17份和紫苏叶10-12份；

所述治疗哮喘的中药组合物的制备方法包括下列步骤：

1）有效成分提取浓缩物制备；

a）将配比量的陈皮、柴胡、紫苏叶用水蒸气蒸馏法提取挥发油，得到第一提取液Ⅰ；将所述第一提取液Ⅰ用8-12倍量的药用辅料包结，得第一包结物；

b）将配比量的麻黄、人参、穿山龙、厚朴用5-9倍量50-80%乙醇作溶剂，浸渍18-30小时后，进行渗漉，收集渗漉液，减压回收乙醇，浓缩至20-30℃时相对密度为1.08-1.12，得第二提取液Ⅱ；

c）将以上七味药渣与配比量的甘草合并，加入8-12倍量水煎煮2-3次，每次1.5-2.5小时，煮沸后加入苦杏仁，煎液滤过，合并滤液，浓缩至75-85℃时相对密度为1.05-1.10，得第三提取液Ⅲ；

2）制剂制备

合并所述第一包结物、提取液Ⅱ和提取液Ⅲ，与药用辅料制成液体口服制剂；或将合并后的提取液Ⅱ和提取液Ⅲ进行喷雾干燥，与第一包结物、药用辅料制成固体口服制剂。

2.根据权利要求1所述的治疗哮喘的中药组合物，其特征在于：所述中药组合物包括有效成分提取液浓缩物或提取液喷雾干燥粉末与药用辅料制成的液体口服制剂或固体口服制剂，所述固体口服制剂包括颗粒剂、片剂、胶囊剂。

3. 根据权利要求1或2所述的治疗哮喘的中药组合物的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括下列步骤：

1）有效成分制备

a）将配比量的陈皮、柴胡、紫苏叶用水蒸气蒸馏法提取挥发油，挥发油用8-12倍量的药用辅料包结，得第一包结物；

b）将配比量的麻黄、人参、穿山龙、厚朴用5-9倍量70%乙醇作溶剂，浸渍24小时后，进行渗漉，收集渗漉液，减压回收乙醇，浓缩至25℃时相对密度为1.08-1.12，得第二提取液Ⅱ；

c）将以上七味药渣与配比量的甘草合并，加入8-12倍量水煎煮2-3次，每次1.5-2.5小时，煮沸后加入苦杏仁，煎液滤过，合并滤液，浓缩至75-85℃时相对密度为1.05-1.10，得第三提取液Ⅲ；

2）制剂制备

合并所述第一包结物、提取液Ⅱ、提取液Ⅲ，与药用辅料制成液体口服制剂；或将提取液Ⅱ、提取液Ⅲ合并后的物质进行喷雾干燥，与所述第一包结物、药用辅料制成固体口服制剂。

4.根据权利要求3所述的治疗哮喘的中药组合物的制备方法，其特征在于：制备固体口服制剂时的喷雾干燥条件是：进风温度150-180℃,使得喷雾干燥的出风温度为

80-100℃。

5.根据权利要求3所述的治疗哮喘的中药组合物的制备方法，其特征在于：所述液体口服制剂的制备方法是合并所述提取液Ⅱ、提取液Ⅲ，获得合并液后，加2-4倍合并液质量的93-98%乙醇，搅匀，冷藏20-28小时，取上清液减压回收乙醇，加入第一包结物，加水稀释，静置，取上清液滤过，灭菌。

6.根据权利要求1或2所述的中药组合物在制备治疗哮喘药物中的应用。

说明书

一种治疗哮喘的中药组合物及其制备方法和应用

技术领域

[0001] 本发明涉及中药领域，具体涉及一种治疗哮喘的中药组合物及其制备方法和应用。

背景技术

[0002] 支气管哮喘（简称：哮喘）是一种常见病、多发病，也是一种久治不愈的疾病。常见发病症状为发作性的喘息、气急、胸闷或咳嗽等，少数患者还可能以胸痛为主要表现，很多患者在哮喘发作时自己可闻及哮鸣音。哮喘的发病机制尚不完全明确，缺乏有效的治疗手段，严重影响患者的生活质量。

[0003] 近年来，随着哮喘发病机理研究方面的新突破，明确了过敏性炎症反应在发病过程中占主导地位。因此，在哮喘治疗药物研究的方面主要针对过敏性炎症这一发病机理，例如，欧洲上市的Nedocromil sodium其主要作用机理就是抗过敏抗炎作用。现代医学治疗哮喘的药物主要是激素，针对支气管平滑肌，解除支气管痉挛，只能缓解症状，不能去除病根且副作用大，例如CN101657214B(2013-01-09)公开了一种哮喘的治疗和预防，然而不能去除病根。而我国平喘药研究方面由于合成力量薄弱，现有临床上应用的常用平喘药几乎全是仿制药。目前防治哮喘发作的中成药品种也偏少，且对扶正及抗炎过敏标本兼治方面上注意不够。

发明内容

[0004] 本发明的目的之一是提供一种具有标本兼治效果的治疗哮喘的中药组合物。

[0005] 本发明的目的之二是提供一种具有标本兼治效果的治疗哮喘的中药组合物的制备方法。

[0006] 本发明的目的之三是提供所述中药组合物在治疗哮喘药物中的应用。

[0007] 本发明的第一技术目的是通过以下技术方案实现的：

[0008] 一种治疗哮喘的中药组合物，它包括以下重量份组成的有效成份：麻黄18-22份、人参18-22份、穿山龙36-44份、苦杏仁10-12份、厚朴10-12份、陈皮10-12份、甘草18-22份、柴胡15-17份和紫苏叶10-12份。

[0009] 本发明的优点是：

[0010] （1）本发明根据中医辨证论治疗的指导思想，结合现代医学最新的研究成果，以温肺散寒、化痰平喘为基础，根据哮喘病人多系反复发作，病情日久，脾肾亏损，元气必虚，宜标本同治的原理，宣肺平喘，补肺益气；从而避免了传统治疗哮喘的中成药忽视扶正固本有利于提高哮喘治疗效果，减少复发的不足之处，同时也能降低哮喘患者长期使用合成、半合成激素类药物带来的危害；

[0011] 这可能由于本发明组合物麻黄作为君药，苦辛而温，长于宣肺平喘，发汗解表。穿山龙、厚朴、苦杏仁为臣药，穿山龙祛风除湿，止咳化痰，增强麻黄止咳平喘之用；厚朴降逆平喘；苦杏仁宣降肺气，止咳平喘，可增止咳平喘之功。人参、柴胡、紫苏叶、陈皮为佐药，人参补气健脾益肺，扶正助柴胡祛邪；柴胡微苦辛寒，透表泄热，以助麻黄发散去邪；紫苏叶辛温，散寒解表；陈皮燥湿化痰，理气健脾，助苦杏仁化痰止咳。甘草为使药，甘平益气，调和诸药。本发明药物针对气虚寒哮症发作期及缓解期，秉承以宣肺平喘、发汗解表、理气化痰为主，辅以扶正健脾，标本兼治。本发明的药物用于宣肺平喘、补肺益气。主治气虚寒哮症，症见呼吸急促、喉中有哮鸣音、咳嗽、胸闷、神疲乏力、畏风恶寒、少气懒言、自汗、痰白不粘或清稀多泡等病症；

[0012] （2）本发明以中医药理论和经验为基础，通过符合《药品注册管理办法》要求的医学研究方法和现代工艺反复试验、验证而来；

[0013] 这可能是由于麻黄、杏仁、厚朴、柴胡、紫苏叶、陈皮、甘草的组合具有抗过敏、抗炎、扩张气道等作用，对中、轻度哮喘有替代糖皮质激素或减少糖皮质激素使用量方面的疗效；穿山龙和人参与其组合后具有抗过敏、抗炎、扩张气道的协同增效作用，并且增强了免疫、镇咳和祛痰、增强B淋巴细胞核T淋巴细胞方面等功能，从而使宣肺平喘与扶正祛邪兼顾、镇咳祛痰与抗炎抗过敏结合，具有标本兼治优点；能够治疗支气管哮喘，减轻发作期症状，减少和防止支气管哮喘复发；

[0014] （3）本发明中药组合物使用简单，按照常规方法煎煮例如全部放入水中煎煮后服用，即能达到标本兼治效果。

[0015] 作为优选，所述中药组合物包括有效成分与药用辅料制成的液体口服制剂或固体口服制剂，所述固体口服制剂包括颗粒剂、片剂、胶囊剂。

[0016] 本发明所述的口服制剂是指医学上可接受的各种口服制剂，包括颗粒剂、片剂、胶囊剂或口服液等。

[0017] 口服制剂可以更方便患者使用，用于治疗哮喘的效果更好。

[0018] 本发明所述的药用辅料为常规制剂中所采用的各种辅料。

[0019] 本发明的第二技术目的是通过以下技术方案实现的：

[0020] 一种治疗哮喘的中药组合物的制备方法，包括下列步骤：

[0021] 1）有效成分提取浓缩物制备

[0022] a）将配比量的陈皮、柴胡、紫苏叶用水蒸气蒸馏法提取挥发油，得到第一提取液Ⅰ；

[0023] b）将配比量的麻黄、人参、穿山龙、厚朴用5-9倍量50-80%乙醇作溶剂，浸渍18-30小时后，进行渗漏，收集渗漏液，减压回收乙醇，浓缩至20-30℃时相对密度为1.08-1.12，得第二提取液Ⅱ；

[0024] c）将以上七味药渣与配比量的甘草合并，加入8-12倍量水煎煮2-3次，每次1.5-2.5小时，煮沸后加入苦杏仁，煎液滤过，合并滤液，浓缩至75-85℃时相对密度为
1.05-1.10，得第三提取液Ⅲ；

[0025] 2）制剂制备

[0026] 将所述提取液Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ加入药用辅料制成口服制剂。

[0027] 本发明治疗哮喘的中药组合物的提取物中含麻黄以盐酸麻黄碱（C10H15NO·HCl）计，固体口服制剂应为1.65-3.00mg/g，液体口服制剂应为0.35-0.60mg/ml，由高效液相色谱测定。

[0028] 本发明在制取工艺中最大限度的浓缩了有效成分，既提高了药效还保证了用药的安全性。

[0029] 作为优选，将所述第一提取液Ⅰ用8-12倍量的药用辅料包结，得第一包结物，然后在制剂制备时合并所述第一包结物、提取液Ⅱ和提取液Ⅲ，与药用辅料制成液体口服制剂；或将合并后的提取液Ⅱ和提取液Ⅲ进行喷雾干燥，与第一包结物、药用辅料制成固体口服制剂。所述步骤1）a）中的挥发油容易挥发，将其用药用辅料包结可防止挥发油挥发，提高药效。

[0030] 作为优选，所述制备方法包括下列步骤：

[0031] 1）有效成分制备

[0032] a）将配比量的陈皮、柴胡、紫苏叶用水蒸气蒸馏法提取挥发油，挥发油用8-12倍量的药用辅料包结，得第一包结物；

[0033] b）将配比量的麻黄、人参、穿山龙、厚朴用5-9倍量70%乙醇作溶剂，浸渍24小时后，进行渗漏，收集渗漏液，减压回收乙醇，浓缩至25℃时相对密度为1.08-1.12，得第二提取液Ⅱ；

[0034] c）将以上七味药渣与配比量的甘草合并，加入8-12倍量水煎煮2-3次，煮沸后加入苦杏仁，每次1.5-2.5小时，煎液滤过，合并滤液，浓缩至75-85℃时相对密度为1.05-1.10，得第三提取液Ⅲ；

[0035] 2）制剂制备

[0036] 合并所述第一包结物、提取液Ⅱ、提取液Ⅲ，与药用辅料制成液体口服制剂；或将合并后的提取液Ⅱ和提取液Ⅲ进行喷雾干燥，与第一包结物、药用辅料制成固体口服制剂。

[0037] 所述步骤1）a）中的挥发油容易挥发，将其用药用辅料包结可防止挥发油挥发，提高药效。

[0038] 作为优选，制备颗粒剂、片剂或胶囊剂时，喷雾干燥条件是：进风温度150-180℃,出风温度80-100℃。

[0039] 作为优选，所述液体口服制剂的制备方法是合并提取液Ⅱ、提取液Ⅲ获得合并液后，加2-4倍合并液质量的93-98%乙醇，搅匀，冷藏20-28小时，取上清液减压回收乙醇，加入第一包结物，加水稀释，静置，取上清液滤过，灭菌。

[0040] 合并提取液Ⅱ、提取液Ⅲ并进行醇沉后，然后再加入第一包结物，可以防止有效成分的损失，提高有效成分的含量，增加药效。

[0041] 本发明所要解决的技术问题在于公开上述中药组合物在制备治疗哮喘药物中的应用。

[0042] 用本发明治疗哮喘的中药组合物进行有关药效试验：

[0043] 一、抗过敏作用

[0044] 1.大鼠被动皮肤过敏试验（PCA）

[0045] 动物：SD鼠体，体重140-160g，雌雄各半。

[0046] 方法：10只SD鼠体，每鼠用精制天花粉1mg+氢氧化铝200mg，混匀后于四足掌皮9
下注射，然后腹腔注射百日咳菌苗1×10，14天，从颈动脉取血，分离得血清至冰箱备用。此抗血清比价为1:120。另取正常SD大鼠48只，雌雄各半，体重130-160g，用乙醚麻醉后，在大鼠背中线两侧将毛剪光，取上述抗血清1:40稀释，在两侧各皮内注射两点，每点0.1ml，
72h后，iv 0.5%伊文思蓝0.5ml和0.2%精制天花粉0.5ml，30min后处死大鼠，剪下蓝斑皮肤，剪碎后置试管内，加入丙酮-生理盐水（7:3）混合溶液5ml，浸泡48h后，2000rpm/min离心取上清液，OD610nm测光密度。

[0047] 分组及给药：共分6组，每组7-9只，即生理盐水对照组、本发明制剂2.5g/kg、5.0g/kg、10.0g/kg各1组，桂龙咳喘打（以下简称桂龙）10.0g/kg，每日1次ig给药，共3次，末次给药于后1h抗原攻击，色甘酸钠5.0mg/kg于抗原攻击前5min，iv给药。

[0048] 表1：本发明制剂对大鼠PCA的抑制作用

[0049] 注：Durmett,s统计方法，与生理盐水组比较 *P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。色甘酸钠组iv给药，其余均ig给药。

[0050] 结果：由表1可见，本发明制剂呈剂量反应抑制大鼠PCA，5.0g/kg和10.0g/kg组与生理盐水组比较，P<0.05和0.011；桂龙10.0g/kg组与生理盐水组比较无显著性差异，P<0.05；色甘酸钠5mg/k（iv）组与生理盐水组比较，P<0.001。结果显示本发明制剂具有显著地抗大鼠被动皮肤过敏的作用。

[0051] 2．对组胺和5-羟色胺诱发大鼠皮肤毛细血管通透性增强的抑制作用[0052] 动物：SD鼠体，46只，雌雄各半。

[0053] 方法：将大鼠背中线两侧毛剪光，在乙醚麻醉下，每点皮内注射0.02%磷酸组胺0.1ml和0.005%5-羟色胺硫酸肌酐0.1ml,各2点，随即0.25%伊文思蓝1ml（iv），30min后，处死大鼠，剪下皮肤蓝斑，剪碎后置试管内，加丙酮-生理盐水5ml，浸泡48h，测定方法同上。

[0054] 分组及给药：除阳性对照药用扑尔敏5mg/kg（ig）外，其余分组、给药途径和时间均同上。

[0055] 表2：本发明制剂对组胺和5-羟色胺诱发大鼠皮肤毛细血管通透性的抑制[0056] 注：Durmett,s统计方法，与生理盐水组比较 *P<0.05，**P<0.01。

[0057] 结果：由表2可见，对照组扑尔敏5mg/kg（ig）对组胺引起的毛细血管通透性增高有明显抑制作用（P<0.05），但对5-羟色胺引起的无明显影响；本发明制剂对组胺和5-羟色胺引起的大鼠皮肤毛细血管通透性增高有较强的抑制作用，而桂龙则无明显影响（P>0.05）。结果显示本发明制剂对组胺和5-羟色胺引起的大鼠皮肤毛细血管通透性增高有较强的抑制作用。

[0058] 3.对清醒致敏豚鼠肺功能的影响

[0059] 动物：致敏豚鼠，Hartly豚鼠，体重300-350g，雌雄各半，每鼠腿部im卵白蛋白完全弗氏佐剂0.5ml（含卵白蛋白10mg），雌雄分笼，常规颗粒饲料喂养。4-6周后试验。

[0060] 方法：肺功能测定：将豚鼠装入1.5L容积，完全密闭的体积描记箱内，描记箱分前后两端，将豚鼠的颈部置前端，四肢躯体置后端，固定后两端互不相通，呈密闭状，而后将测定潮气量和气道流速的导管通出箱外。（1）潮气量（V）测定：随着豚鼠自主呼吸，胸廓起伏，密闭的体积描记箱内气体压力发生周期性变化，经过压力换能器把压力变化转换成电讯号输入记录仪。定标：用注射器向体积描记箱内注入定量空气即可从记录仪上获得标准潮气量值，作定标曲线。（2）气流速度（F）测定：用经改良的一玻质Feisch呼吸流速计，一端连接于描记箱的前端，侧管连接于压力换能器，由于流速计远端用玻质毛细管填充形成的气流阻力，随着呼吸运动，侧管中的压力发生变化，经压力换能器转化成电讯号输入记录仪。定标：以不同流速的恒速气流通过转子流速仪和改良的Feisch流速计，换能器产生的电讯号输入记录仪即可获得标准气流速值，作定标曲线。（3）抗原攻击：1%（W/V）卵白蛋白生理盐水溶液超声雾化吸入2min后，描记吸入后1、2、3、4、5、7.5、10min的V和F以及呼吸频率的变化。

[0061] 分组及给药：同上，对照药酮替芬2mg/kg于抗原攻击前1h ig×1次。

[0062] 统计：Student-Newman-Keul method

[0063] 结果：生理盐水组有5/10豚鼠在抗原攻击后呈现呼吸骤停，V和F以及呼吸频率消失或明显减少，另有3/10豚鼠呈现不同程度的V和F及呼吸频率减少，有2/10豚鼠表现为呼吸频率加快，但V和F仍减少；本发明制剂呈剂量反应抑制抗原攻击引起的致敏清醒豚鼠肺功能降低，5g/kg与生理盐水组比较有显著性差异P<0.05-0.01，10g/kg组呈现完全保护作用与对照药酮替芬2mg/kg组作用相似。结果显示本发明制剂对清醒致敏豚鼠肺功能有保护作用。

[0064] 二、抗炎作用

[0065] 1.对致敏豚鼠抗原攻击后支气管肺泡灌流液中炎症细胞的影响

[0066] 动物：同前

[0067] 方法：（1）抗原攻击：将致敏豚鼠置于一4L玻璃钟罩内，用超声波雾化器气雾1%卵白蛋白1min，豚鼠在此钟罩内继续吸入1min，共2min，将豚鼠放回鼠笼再养48h后供试验用。（2）支气管肺泡灌流：用2%戊巴比妥钠5ml/kg（ip）麻醉豚鼠，麻醉后切开颈部皮肤，分离出气管，切开气管，插入气管插管，用1%牛血清蛋白生理盐水溶液12ml，分两次从气管插管注入气道，每次来回冲洗3次，冲洗液收集于试管内，回收率约70-80%（8-10ml）。（3）白细胞计数和分类计数：1%冰醋酸3:1稀释灌流液，用计数板在显微镜下计总数。将灌流液涂于玻片上，待干后用Wight-Gimsa染色液染色，然后在显微镜油镜下分类计数。

[0068] 分组及给药：共分6组：（1）空白对照组：致敏豚鼠，用0.9%NaCl代替1%卵白蛋白气雾给药攻击，灌流方法同样；（2）生理盐水对照组：用0.9%NaCl 10ml/kg（ig），每日1次×4次；（3）本发明制剂2.5g/kg，ig，每日1次×4次；（4）本发明制剂5.0g/kg， ig，每日1次×4次；（5）本发明制剂10.0g/kg，ig，每日1次×4次；（6）酮替芬2.0mg/kg（ig），每日1次×4次。

[0069] 表3：本发明制剂对致敏豚鼠抗原攻击后支气管肺泡灌流液中炎症细胞数的影响[0070] 注：Durmett,s统计方法，与生理盐水组比较 *：P<0.05，**：P<0.01。

[0071] 结果：由表3可见，与空白组比较，生理盐水组经1%卵白蛋白攻击后，白细胞总数、嗜酸性白细胞、嗜中性白细胞、单核细胞分类计数均有非常明显的增多，特别是嗜酸性白细胞和嗜中性白细胞数目增多最为明显，达20倍之多，表明致敏豚鼠抗原攻击产生过敏性哮喘之后，有一个非常明显的炎症反应过程。本发明制剂2.5-10 g/kg呈剂量反应抑制这一过敏性炎症反应，炎症细胞在支气管肺泡的聚集明显减少，特别是对嗜酸性和嗜中性白细胞尤为明显。结果显示本发明制剂对致敏豚鼠抗原攻击后支气管肺泡灌流液中炎症细胞有抑制作用。

[0072] 2.对大鼠胸膜炎的影响

[0073] 动物：同前

[0074] 方法：用胸膜腔穿刺法注入0.5%角叉菜胶0.1ml/只，5h后处理动物，打开胸膜腔，吸取和计量渗出液，并计数渗出液中白细胞，计算出白细胞总数量，统计处理结果，比较本发明制剂组与生理盐水组之间的显著性差异。

[0075] 分组及给药：雌雄各半，分5组实验，每组10只，即生理盐水组、本发明制剂2.5g/kg、5.0 g/kg、10.0 g/kg各1组，阿司匹林0.5 g/kg，均ig给药，每日1次，共计3天，阿司匹林组于实验前30min给药1次。

[0076] 表4：本发明制剂对大鼠胸腔炎的影响

[0077] 注：Durmett,s统计方法，每组动物数n=8-10，与生理盐水组比较 *P<0.05，**P<0.01。

[0078] 结果：由表4可见，本发明制剂10.0g/kg组和阿司匹林0.5g/kg可明显抑制角叉菜胶引起大鼠胸膜炎渗出液（P<0.05），本发明制剂5.0g/kg和10.0g/kg及阿司匹林0.5g/kg组能非常显著抑制白细胞趋化，白细胞总数减少（P分别<0.01和0.001）。结果显示本发明制剂对大鼠胸腔炎有抑制作用，使炎症渗出液和白细胞数明显减少。

[0079] 三、平喘作用

[0080] 1.对组胺和乙酸胆碱诱发豚鼠哮喘的影响

[0081] 动物：Hartely豚鼠，体重250-330g，雌雄各半。

[0082] 方法：取豚鼠1只置14L密闭玻璃钟罩内，用超声波雾化器以0.5ml/min的雾化量向密闭钟罩内雾化2%溴化乙酸胆碱和0.1%磷酸组胺（1:1V/V）混合液10sec（雾粒直径1-6 m）,关机后观察豚鼠从气雾开始到产生抽搐跌倒由气道痉挛窒息所致向喘息潜伏期的长短。

[0083] 分组及给药：按体重均匀分6组，每组9-11只即生理盐水1组，本发明制剂2.5g/kg、5.0 g/kg、10.0 g/kg各1组，桂龙10 g/kg1组，ig给药，×3天，末次给药于实验前30min，盐酸沙丁胺醇4 mg/kg1组，于实验前30min ig给药。

[0084] 表5：本发明制剂对组胺和乙酸胆碱诱发豚鼠哮喘的抑制作用

[0085] 注：Durmett,s统计方法，与生理盐水组和桂龙组比较 *P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。

[0086] 结果：由表5可见，本发明制剂呈剂量反应延长组胺和乙酸胆碱诱发的豚鼠喘息潜期，5.0 g/kg和10.0 g/kg组与生理盐水组和桂龙组比较，P值分别<0.05和0.01。沙丁胺醇组的豚鼠在120sec内无一抽搐跌倒。结果显示本发明制剂对组胺和乙酸胆碱诱发豚鼠哮喘有明显的保护作用。

[0087] 2.对离体豚鼠平滑肌的影响

[0088] 动物：Hartely豚鼠，体重300-400g，雌雄不拘。

[0089] 方法：击毙后，切开颈部，分离出气管，置克-亨氏液中，将气管均匀剪成3段，在软骨切开后，再将每段分成4片，每4片用线串联成一串，一段用固定钩固定，置5ml37℃恒温水浴槽内，另一端与张力换能器连接，记录仪描记，浴槽内通100%氧气。气管在浴槽内稳定30-40min后，将配置的受试药加入浴槽，观察受试药的反应。

[0090] 结果：本发明制剂呈剂量反应直接松弛离体豚鼠气管平滑肌，普奈洛尔10-5mol/L可部分阻断本发明制剂的直接松弛作用，表明本发明制剂松弛豚鼠气管平滑肌的作用部分依赖于β-肾上腺素受体。桂龙不但无松弛气管作用，而且随剂量量增加而收缩幅度增大。结果表明本发明制剂松弛平滑肌部分依赖于β-肾上腺素受体。

[0091] 四、镇咳作用

[0092] 1.对柠檬酸诱发豚鼠咳嗽的影响

[0093] 动物：Hartely豚鼠，体重250-330g，雌雄各半，按体重性别均匀分成5组，每组9-11只。

[0094] 方法：将豚鼠置4L密闭玻璃钟罩内，用超声波雾化器以1ml/min的量雾化23.3%柠檬酸30sec，记录豚鼠在10min内的咳嗽次数。咳嗽次数<10次/min者弃之。

[0095] 分组及给药：次日开始给受试，生理盐水组10.0ml/kg，本发明制剂2.5g/kg、5.0 g/kg、10.0 g/kg，桂龙10.0 g/kg，均ig给药，每日1次，连续3天，末次给药1h后，重复上诉引咳方法。

[0096] 表6：本发明制剂对柠檬酸引起豚鼠咳嗽的影响

[0097] 注：Durmett,s统计方法，与生理盐水组比较 ，**P<0.01。

[0098] 结果：由表6可见，除本发明制剂10.0 g/kg组有明显镇咳作用外（P<0.01），其余各组均无作用，对照组桂龙组在此动物模型上无明显作用。结果表明本发明制剂10 .0g/kg（ig）能明显减少柠檬酸诱发的豚鼠咳嗽次数，2.5 g/kg 和5.0g/kg无明显作用。

[0099] 五、祛痰作用

[0100] 对小鼠气道酚红排泄作用的影响

[0101] 动物：NIH品系小鼠，体重20-22g，雌雄各半。

[0102] 方法：固定背部，分高气管，气管上剪一小口，插入连接1ml注射器的塑料管，以1ml生理盐水来回冲洗3次，×3ml。将每次的冲洗液收集于试管内，加1mol/LNaOH0.05ml，使冲洗液显粉红色。用721型分光光度计测546nm的OD值。

[0103] 分组及给药：分5组，每组10-11只。生理盐水组10ml/kg，本发明制剂2.5g/kg、5.0 g/kg、10.0 g/kg各1组，远志水煎剂10.0 g/kg（生药量），均ig给药，每日1次，连续
3天，末次给药30min后，给小鼠ip2.5%酚红生理盐水溶液250mg/kg，ip30min后，脱臼处死小鼠。

[0104] 表7：本发明制剂对小鼠气道酚红排泄的影响

[0105] 注：Durmett,s统计方法，与生理盐水组比较 ，*P<0.05，**P<0.001。

[0106] 结果：由表7可见，本发明制剂5.0 g/kg组和对照药远志10.0 g/kg组可明显促使小鼠气道的酚红排泄，P分别<0.05和0.01，但本发明制剂10.0 g/kg组无明显作用，经两次重复实验，结果相同。结果表明本发明制剂5.0 g/kg对小鼠气道酚红排泄有明显的促进作用。

[0107] 六、增强免疫作用

[0108] 1.对小鼠脾脏和胸腺重量的影响

[0109] 动物：NIH品系小鼠，体重18-22g，雌雄各半。

[0110] 方法：于末次给药后1h后，脱臼处死，解剖出脾脏和胸腺，用扭力天平称重。

[0111] 分组及给药：分5组，每组13-14只。生理盐水组10ml/kg,本发明制剂2.5g/kg、5.0g/kg、10.0g/kg各1组、人参5.0g/kg1组，均ig给药，每天1次，连续8天。

[0112] 表8：本发明制剂对小鼠脾脏和胸腺重量的影响

[0113] 注：Durmett,s统计方法，与生理盐水组比较 ，*P<0.05。

[0114] 结果：由表8可见，本发明制剂10.0g/kg组能明显增加小鼠胸腺的重量，其余各组均无明显作用。本发明制剂和人参对小鼠脾脏亦无明显作用。结果表明本发明制剂10.0g/kg可明显增加小鼠胸腺重量，而对小鼠脾脏重量无明显影响。

[0115] 2.对小鼠抗体分泌细胞的影响

[0116] 动物：NIH品系小鼠，体重18-22g，雌雄各半。

[0117] 方法：制备脾细胞：将小鼠放血致死后，取出脾脏，经清洗后捻碎，经尼龙布（100’目）过滤，离心（250g、5min）后弃去上清，经低渗除去红细胞，用冷Hank s液洗3次，再’ 7 7
用Hank s液重悬，制成1×10/ml备用。采用SRBC定量测血测定法：取1×10/ml 1ml、
0.2%SRBC 1ml和1:10补体1ml，充分混匀，另设不加补体的空白对照管。置37℃水浴中温浴1h，3000rpm/min×5min，取上清液用721分光光度计测413nm的OD值。

[0118] 分组及给药：分5组实验，每组13-14只。生理盐水组10ml/kg1组，本发明制剂2.5g/kg、5.0g/kg、10g/kg各1组，人参5.0g/kg1组，均ig给药，每天1次，连续8天。在第
3次给药后免疫小鼠，免疫小鼠：5%SRBC0.2ml/只ip免疫4-5天。

[0119] 表9：本发明制剂对小鼠抗体分泌细胞的影响

[0120] 注：Durmett,s统计方法，与生理盐水组比较 ，*P<0.05。

[0121] 结果：由表9可见，本发明制剂2.5-10.0g/kg各组和人参5.0g/kg组均可明显增强小鼠抗分泌细胞（脾细胞）的分泌溶血素能力，QHS测定OD值均高。结果表明本发明制剂对小鼠抗体分泌细胞有明显促进作用。

[0122] 3.对环磷酸胺所致免疫低下小鼠脾脏T-淋巴细胞转化功能的影响

[0123] 动物：NIH品系小鼠，体重18-22g，雌雄各半。

[0124] 方法：T淋巴测定：去脾脏制成细胞悬液，用Hank’s液洗一次，调整细胞浓度至7
2×10/ml，取细胞悬液100µL，加入96孔细胞培养板内，再加入100µL ConA(20µl)的完全
3
1640培养液，每鼠作复孔。将96孔板置37℃、5%CO2培养48h，加入 H-TdR 1µ Ci/孔，再培养24h，用细胞收集仪收集细胞，用液闪仪测定每分钟脉冲数（CPM），结果用复孔的平均CPM表示。各组小鼠均在试验第11天去脾脏作T淋巴细胞转化功能测定。

[0125] 分组及给药：分5组，每组9-10只。以不同剂量的本发明制剂ig给药：10.0 g/kg、5.0 g/kg、2.5 g/kg，人参2.5 g/kg组作为阳性对照组，另设生理盐水组，上述5组均于给药后第4天和第7天（ip）环磷酸胺2mg/20k。第6组注射等量生理盐水和（ig）等量生理盐水作为对照组。

[0126] 表10：本发明制剂对小鼠脾脏T-淋巴细胞转化功能的影响,

[0127] 注：Durmetts统计方法，与生理盐水组比较 ，*P<0.05，**P<0.01。

[0128] 结果：由表10可见，本发明制剂和人参均可使小鼠T-淋巴细胞转化率上升，并随着本发明制剂剂量的增加而使转化率增高，显示均能增强T-淋巴细胞功能。结果表明本发明制剂对环磷酸胺所致免疫低下小鼠脾脏T-淋巴细胞转化功能呈剂量反应增强作用。

[0129] 4.对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

[0130] 动物：取NIH小鼠66只，雌1/3，雄2/3。

[0131] 方法：消毒腹部皮肤，剪开腹部，滴管吸取腹腔洗液，置试管混匀后，再滴入载玻片上，放置于有湿纱布的瓷盘内，置37℃孵育30min后，在室温自然吹干。以丙酮-甲醇（1:1）固定2min，再用Giensa-Wright染色，冲洗晾干后，在油镜下每片计数200个细胞，计算出吞噬%和吞噬指数。

[0132] 分组及给药：按体重分组，每组12-14只，即生理盐水组0.9%Nacl 10ml/kg，本发明制剂2.5g/kg、5.0 g/kg、10.0 g/kg各1组，人参5.0 g/kg 1组，均ig给药，每日1次，连续给药8天。末次给药30min后，ip5%CRBC 0.4ml/只，4h后，ip0.9% Nacl 2ml/只，随即脱臼处死小鼠。

[0133] 表11：本发明制剂对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

[0134] 注：Mann-Whitney Rank Sum Test 统计方法，与生理盐水组比较*P<0.05。

[0135] 结果：由表11可见，本发明制剂2.5-10.0 g/kg对小鼠腹腔巨噬细胞功能无明显影响，而阳性对照药人参5.0g/kg可明显增强吞噬功能。结果表明本发明制剂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能无明显影响。

[0136] 用本发明治疗哮喘的中药组合物进行有关药理试验：

[0137] 动物：猫，雌雄兼用，体重2.5-3.2kg；昆明（KM）种小鼠，雌雄兼用，体重18-22g，年龄7-8周龄。

[0138] 一、对中枢神经系统的影响

[0139] 1.对小鼠平衡协调功能的影响

[0140] 1.1平衡试验

[0141] 选取上述昆明种小鼠40只，雌雄兼用，随机分组，每组10只，各组分别给予本发明制剂5g/kg、10g/kg、15 g/kg及生理盐水，灌胃给药，给药容量0.1ml/10g，给药后60min，将小鼠放在60cm长，直径为8mm的水平棒上，观察3min内落下的次数，组间差别的显著性采用t试验。

[0142] 表12：本发明制剂灌胃给药对小鼠平衡功能的影响

[0143] 结果表明：小鼠口服本发明制剂，随剂量增加，对小鼠平衡功能无明显差异（表中数据均值±标准差，显著性检验采用校正T-test）。

[0144] 1.2对小鼠倾斜板运动的影响

[0145] 选取上述昆明种小鼠40只，雌雄兼用，随机分组，每组10只，各组分别给予本发明制剂5g/kg、10g/kg、15 g/kg及生理盐水，灌胃给药，给药容量0.1ml/10g，给药后60min，将2
试验小鼠置于与水平位置成60度角的木质三合板中央，三合板面积60×60cm,测定其在倾斜板上的滞留时间，观察本发明制剂灌胃给药对肌肉协调能力的影响。

[0146] 表13：本发明制剂对小鼠倾斜板滞留时间的影响

[0147] 结果表明：小鼠口服本发明制剂，对小鼠在倾斜板上的滞留时间与生理盐水对照组比较，未见有明显差别（表中数据均值±标准差，显著性检验采用校正T-test）。

[0148] 2.对小鼠自主活动的影响

[0149] 选取昆明小鼠，试验前禁食16h，随机分组，每组10只，雌雄各半，口服给药，给药剂量：本发明制剂5、10、15g/kg及生理盐水对照组共5组，各组均按0.1ml/10g体重灌胃给药。给药后60min，将动物放入JZZ-98鼠跳台避暗自主活动仪活动箱中，适应5min，记录5min内小鼠自主活动计数，同时观察给药后动物的一般行为表现，组间差别的显著性检验采用t检验。

[0150] 试验结果：给药后各组动物，外观正常，无竖毛、俯卧、扭体等异常现象，自主活动计数如表14所示。

[0151] 表14：本发明制剂灌胃对小鼠自主活动的影响

[0152] 结果表明：小鼠口服本发明制剂5、10、15g/kg，对小鼠行为、一般反应未见有明显影响。（与生理盐水对照组比较P>0.05，表中数据均值±标准差，显著性检验采用校正T-test）。

[0153] 3.对小鼠戊巴比妥钠睡眠时间的影响

[0154] 选取上述小鼠40只，雌雄兼用，共分5组，每组10只，试验前禁食4h，给予正常饮水，各组分别给予本发明制剂5、10、15g/kg及生理盐水，灌胃给药，给药容量0.1ml/10g,给药后60min，腹腔注射戊巴比妥钠36mg/kg，以翻正反射消失到翻正反射恢复时间计为睡眠时间，睡眠时间超过90分钟以90分计，观察对小鼠睡眠时间的影响。各组试验数据的显著性检验采用t检验。

[0155] 表15：本发明制剂对小鼠戊巴比妥钠睡眠时间的影响

[0156] 结果表明：小鼠口服本发明制剂15g/kg剂量显著缩短戊巴比妥钠导致的小鼠睡眠时间（与生理盐水对照组比较，表中数据均值±标准差，显著性检验采用校正T-test）。

[0157] 结论：实验结果表明本发明制剂在本试验剂量下，对小鼠中枢神经系统作用不明显，但对睡眠作用有一定的影响。

[0158] 二、对消化系统的影响

[0159] 1.对小鼠肠运动的影响

[0160] 选取上述昆明小鼠40只，雌雄兼用，体重18-22g，共分5组，每组10只，试验前禁食16h，给予正常饮水，各组分别给予板发明制剂5、10、15g/kg，注射用油及生理盐水，灌胃给药，给药容量0.1ml/10g，给药后60min，按0.2ml/10g体重灌胃印度墨汁，20分钟后处死小鼠，打开腹腔分离小肠，不加牵引平铺于托盘上，测量贲门至墨汁前端的长度（L1）及贲门至直肠的总长度（L2），计算肠推进的率L1/L2。各组试验数据的显著性检验采用t检验。

[0161] 表16:本发明制剂对小鼠肠推进功能的影响

[0162] 结果表明：本发明制剂5、10、15g/kg，对小鼠肠推进功能未见有明显影响（与生理盐水对照组比较，表中数据均值±标准差，显著性检验采用校正T-test）。

[0163] 结论：实验结果表明本发明制剂在本试验剂量下，对小鼠消化系统不产生明显影响。

[0164] 三、对心血管、呼吸系统的影响

[0165] 对麻醉猫心血管系统及呼吸系统的影响

[0166] 试验方法：选取上述家猫，试验前禁食16h，给予正常饮水。实验用戊巴比妥钠30mg/kg iv麻醉，分离一侧下肢动脉和静脉，分别插入动脉插管和静脉插管。动脉插管连接yp-100型压力换能器；静脉插管接入输液器，供静脉滴注维持麻醉用。呼吸功能测定用敷带式张力换能器；常规连接四肢电极，把yp-100型压力换能器、敷带式换能器、四肢电极分别接入MedLab生物信号采集处理系统和心电图仪同步记录呼吸、血压、心电图，观察给药后对麻醉猫呼吸、血压、心电的影响。食道插管，供灌胃给药。试验过程用戊巴比妥钠2-3mg/kg/h静脉滴注维持麻醉，试验共分四组，本发明制剂：3、6、12g/kg，生理盐水对照组，每一剂量给5只动物。

[0167] 试验结果：本发明制剂给麻醉猫灌胃给药，3、6、12g/kg，三个剂量组队心率、呼吸幅度、呼吸频率均未见明显影响，对心律及S-T、P波QRS波群、P-R间期、Q-T间期各给药组与对照组均未见明显改变。

[0168] 表17：本发明制剂对麻醉猫心率（次/分）的影响（ ±SD）

[0169] 各组动物实验前后比较，心率变化均无显著性差别，P>0.05（与生理盐水组比较）。显著性检验采用T-test；n=5。

[0170] 表18：本发明制剂对麻醉猫呼吸容积（ml）的影响（ ±SD）

[0171] 各组动物实验前后比较，呼吸幅度均无显著性差别，P>0.05（与生理盐水组比较）。显著性检验采用T-test；n=5。

[0172] 表19：本发明制剂对麻醉猫呼吸频率（次/分）的影响（ ±SD）

[0173] 各组动物实验前后比较，呼吸频率均无显著性差别，P>0.05（与生理盐水组比较）。显著性检验采用T-test；n=5。

[0174] 结论：实验结果表明本发明制剂在本试验剂量下，对小鼠心血管系统、呼吸系统不产生明显影响。

[0175] 用本发明治疗哮喘的中药组合物进行有关临床试验：

[0176] 根据《药物临床研究质量管理规范》进行了本发明制剂的临床研究。Ⅰ期临床试验证明本发明制剂在人体上应用具有安全性，可以用于临床试验。

[0177] 2000年11月至2001年8月由福建省中医药研究院、成都中医药大学附属医院、浙江省中医院及四川大学华西医院等进行了平喘益气颗粒治疗气虚寒哮症（哮喘）Ⅱ期临床试验。该试验采用多中心、随机、双盲、阳性药（如意定喘丹）平行对照方法，共纳入200例哮喘急性发作期（气虚寒哮症）患者，按1:1比例随机分为平喘益气颗粒组及如意定喘丹组。结果表明：在改善中医症状自汗方面，平喘益气颗粒组优于如意定喘单组（P＜0.05）。

[0178] 2001年9月至2003年8月采用多中心、随机、双盲、阳性药（如意定喘丹）平行对照方法，由福建省中医药研究院、成都中医药大学附属医院、浙江省中医院及四川大学华西医院等进行了平喘益气颗粒治疗气虚寒哮症（哮喘）Ⅲ期临床试验。实验组300例（包括成人160例及儿童140例），对照组120例（包括成人60例及儿童60例）。结果表明：平喘益气颗粒在改善哮鸣音、神疲乏力等单症状或体征方面优于对照组。

[0179] 2010年7月至2012年1月，平喘益气颗粒上市后再评价（IV期）的多中心、开放、非对照临床研究，在治疗支气管哮喘急性发作期（气虚寒哮证）方面，能够改善气虚寒哮证中医证候和症状，减少缓解治疗速效β2受体激动剂和全身性激素用量，同时在用药12小时内改善肺功能，且副作用小耐受性良好，表明平喘益气颗粒治疗支气管哮喘急性发作期（气虚寒哮证）疗效确切且安全耐受性良好。

[0180] 具体实施方式：

[0181] 实施例1：颗粒剂制备

[0182] a）将333g陈皮、483g柴胡、333g紫苏叶用水蒸气蒸馏法提取挥发油，挥发油用10倍量的β环糊精包结，得第一包结物；

[0183] b）将600g麻黄、600g人参、1200g穿山龙、333g厚朴用7倍量70%乙醇作溶剂，浸渍24小时后，进行渗漏，收集渗漏液，减压回收乙醇，浓缩至25℃时相对密度为1.08-1.12，得提取液Ⅱ；

[0184] c）将以上七味药渣与600g甘草合并，加入10倍量水煎煮2次，煮沸后加入333g苦杏仁，每次2小时，煎液滤过，合并滤液，浓缩至80℃时相对密度为1.05-1.10，得提取液Ⅲ；

[0185] d）合并提取液Ⅱ、提取液Ⅲ，进行喷雾干燥（进风温度160℃,出风温度90℃），得干燥粉，与第一包结物、药用辅料干法制成颗粒，整粒，分装于铝箔袋中，每包3g，灭菌，即得。用HPLC法测定含麻黄以盐酸麻黄碱（C10H15NO·HCl）计5.5mg/包。

[0186] 实施例2：片剂的制备

[0187] a）将333g陈皮、483g柴胡、333g紫苏叶用水蒸气蒸馏法提取挥发油，挥发油用10倍量的β环糊精包结，得第一包结物；

[0188] b）将600g麻黄、600g人参、1200g穿山龙、333g厚朴用7倍量70%乙醇作溶剂，浸渍24小时后，进行渗漏，收集渗漏液，减压回收乙醇，浓缩至25℃时相对密度为1.08-1.12，得提取液Ⅱ；

[0189] c）将以上七味药渣与600g甘草合并，加入10倍量水煎煮2次，煮沸后加入333g苦杏仁，每次2小时，煎液滤过，合并滤液，浓缩至80℃时相对密度为1.05-1.10，得提取液Ⅲ；

[0190] d）合并提取液Ⅱ、提取液Ⅲ，进行喷雾干燥（进风温度160℃，出风温度90℃），得干燥粉，加入第一包结物和适量辅料，干法制成颗粒，整粒，压片，每片0.3g，灭菌，即得。用HPLC法测定含麻黄以盐酸麻黄碱（C10H15NO·HCl）计0.56mg/片。

[0191] 实施例3：胶囊剂制备

[0192] a）将333g陈皮、483g柴胡、333g紫苏叶用水蒸气蒸馏法提取挥发油，挥发油用10倍量的β环糊精包结，得第一包结物；

[0193] b）将600g麻黄、600g人参、1200g穿山龙、333g厚朴用7倍量70%乙醇作溶剂，浸渍24小时后，进行渗漏，收集渗漏液，减压回收乙醇，浓缩至25℃时相对密度为1.08-1.12，得提取液Ⅱ；

[0194] c）将以上七味药渣与600g甘草合并，加入10倍量水煎煮2次，煮沸后加入333g苦杏仁，每次2小时，煎液滤过，合并滤液，浓缩至80℃时相对密度为1.05-1.10，得提取液Ⅲ；

[0195] d）合并提取液Ⅱ、提取液Ⅲ，进行喷雾干燥（进风温度160℃，出风温度90℃），得干燥粉，加入第一包结物干法制成颗粒，加入5%硬脂酸镁，混匀，灌胶囊，每粒0.45g，灭菌，即得。用HPLC法测定含麻黄以盐酸麻黄碱（C10H15NO·HCl）计0.89mg/粒。

[0196] 实施例4：液体口服制剂的制备

[0197] a）将333g陈皮、483g柴胡、333g紫苏叶用水蒸气蒸馏法提取挥发油，挥发油用10倍量的β环糊精包结，得第一包结物；

[0198] b）将600g麻黄、600g人参、1200g穿山龙、333g厚朴用7倍量70%乙醇作溶剂，浸渍24小时后，进行渗漏，收集渗漏液，减压回收乙醇，浓缩至25℃时相对密度为1.08-1.12，得提取液Ⅱ；

[0199] c）将以上七味药渣与600g甘草合并，加入10倍量水煎煮2次，煮沸后加入333g苦杏仁，每次2小时，煎液滤过，合并滤液，浓缩至80℃时相对密度为1.05-1.10，得提取液Ⅲ；

[0200] d）合并提取液Ⅱ、提取液Ⅲ，加3倍量95%乙醇，搅匀，冷藏24小时，取上清液减压回收乙醇，加入第一包结物，加水稀释至5L，静置，取上清液滤过，灌装，每支10ml,灭菌，即得。用HPLC法测定含麻黄以盐酸麻黄碱（C10H15NO·HCl）计4.2mg/支。

[0201] 实施例5

[0202] 同实施例1，不同的是陈皮、柴胡、紫苏叶、麻黄、人参、穿山龙、厚朴、甘草、苦杏仁的配量，具体见表1。

[0203] 实施例6

[0204] 同实施例2，不同的是陈皮、柴胡、紫苏叶、麻黄、人参、穿山龙、厚朴、甘草、苦杏仁的配量。

[0205] 实施例7

[0206] 同实施例3，不同的是陈皮、柴胡、紫苏叶、麻黄、人参、穿山龙、厚朴、甘草、苦杏仁的配量。

[0207] 实施例8

[0208] 同实施例4，不同的是陈皮、柴胡、紫苏叶、麻黄、人参、穿山龙、厚朴、甘草、苦杏仁的配量。

[0209] 表20

[0210]

[0211] 实施例9

[0212] 同实施例4，不同的是有效成分制备

[0213] a）将配比量的陈皮、柴胡、紫苏叶用水蒸气蒸馏法提取挥发油，得到第一提取液Ⅰ；

[0214] b）将配比量的麻黄、人参、穿山龙、厚朴用5倍量50%乙醇作溶剂，浸渍18小时后，进行渗漏，收集渗漏液，减压回收乙醇，浓缩至20℃时相对密度为1.08-1.12，得第二提取液Ⅱ；

[0215] c）将以上七味药渣与配比量的甘草合并，加入8倍量水煎煮2次，煮沸后加入配比量的苦杏仁，每次1.5小时，煎液滤过，合并滤液，浓缩至75℃时相对密度为1.05-1.10，得第三提取液Ⅲ。

[0216] 合并提取液Ⅱ、Ⅲ，加3倍量93%乙醇，搅匀，冷藏20小时，取上清液减压回收乙醇，加入提取液Ⅰ和药用辅料，加水稀释至5L，静置，取上清液滤过，灌装,灭菌，即得。用