一种含腐植酸的多肽蛋白饲料及其制备方法

摘要

本发明涉及一种含腐植酸的多肽蛋白饲料及其制备方法，属于一种生物饲料。本发明为一种含腐植酸钠的固态培养基经枯草芽孢杆菌和黑曲霉混菌发酵制备而成；该多肽蛋白饲料含腐植酸3.5％～6％、多肽≥18％、粗蛋白≥40％、中性蛋白酶≥260U/g、淀粉酶酶≥28000U/g。本发明的含腐植酸多肽蛋白饲料，具有调节胃肠道菌群，促进动物消化功能，提高饲料利用率，增强机体免疫，促进动物生长，降低养殖成本，改善环境污染等作用。

权利要求

1.一种含腐植酸的多肽蛋白饲料，其特征在于：该产品是由含腐植酸钠的固态培养基经混合菌悬液固态发酵制备而成，所得产品含腐植酸3.5％-6％、多肽≥18％、粗蛋白≥

40％、中性蛋白酶≥260U/g、淀粉酶≥28000U/g，水分含量≤12％；所述的混合菌悬液为枯草芽孢杆菌种子液和黑曲霉种子液，其混合比例为1-2.5∶0.5-1.5；所述含腐植酸的固态培养基组成成分按质量百分比计算为：主料：豆粕60-75％、葵粕15-30％、麸皮4-8％、玉米皮

2-5％、辅料：腐植酸钠3％-6％、糖蜜0％-0.3％、硫酸铵0.5％-1％、磷酸氢二钾0.7-1.0％和氯化锌0％-0.1％；

所述含腐植酸的多肽蛋白饲料的制备方法，具体步骤为：

(1)将枯草芽孢杆菌和黑曲霉分别经一级种子、二级种子培养，制备成种子液；

(2)将枯草芽孢杆菌种子液和黑曲霉种子液以1-2.5∶0.5-1.5比例混合，制备成混合菌悬液；

(3)将含腐植酸的固态培养基中加入水，料水按w/v比达1∶0.9-1.1，自然pH值，接种混合菌悬液，其接种量按主料总量计算为7-10％v/w，在32-34℃条件下发酵84-120小时，再将发酵产物经40-60℃烘干至水分≤12％，即得成品。

说明书

一种含腐植酸的多肽蛋白饲料及其制备方法

技术领域：

[0001] 本发明设计一种生物饲料技术领域，特别涉及一种含腐植酸的多肽蛋白饲料及其制备方法。背景技术：

[0002] 众所周知，我国人多地少，随着饲料工业的迅速发展，粮食紧缺现象也越来越明显，可用于发展新畜牧业的粮食极为有限，饲料资源十分紧张。随着我国畜牧业的迅速发展，配合饲料的使用量越来越大，现阶段饲料资源开发利用很不合理，新型饲料开发与利用严重滞后，大量优质蛋白质资源未能得到开发、利用。目前我国饲料蛋白质资源紧缺，价格坚挺，不能满足自身需要，主要依靠进口来解决。目前我国大量优质蛋白质原料和农副产品的下脚料没有得到合理的开发利用，即浪费了宝贵的蛋白质资源，又对环境造成了严重的污染。随着我国饲料需求量的增加，饲料企业数量也连年增加，我国饲料工业开始进入扩大企业规模和提高产品品质的产业升级阶段，已由速度型向质量与速度并重型转变，“天然、无公害、无残留、高效、节粮”已成为饲料企业发展的主题。发明内容：

[0003] 为解决上述问题，本发明的目的是提供一种含腐植酸的多肽蛋白饲料及其制备方法，该制备方法通过在底物中添加腐植酸钠以提高发酵豆粕中多肽的含量，为微生物发酵制备蛋白饲料中多肽的含量少、成本相对过高等问题的解决提供了参考。同时该发明提供的蛋白饲料既含有腐植酸又含有大量的多肽，更有利于动物的吸收利用，从而有效地提高饲料转化率，促进生长，增强动物机体的免疫力。

[0004] 该产品是由含腐植酸钠的固态培养基经混合菌悬液固态发酵制备而成。

[0005] 所述的混合菌悬液为枯草芽孢杆菌种子液和黑曲霉种子液，其混合比例为1-2.5∶0.5-1.5。

[0006] 所述含腐植酸的固态培养基组成成分为：主料：豆粕60-75％、葵粕15-30％、麸皮4-8％、玉米皮2-5％、辅料：腐植酸钠3％-6％、糖蜜0％-0.3％、硫酸铵0.5％-1％、磷酸氢二钾0.7-1.0％和氯化锌0％-0.1％(按质量百分比计算)。

[0007] 所述枯草芽孢杆菌种子液和黑曲霉种子液为枯草芽孢杆菌CGMCC1.0892(Bacillus subtilis CGMCC1.0892)和黑曲霉CGMCC3.3016(Aspergillus niger CGMCC3.3016)。

[0008] 所述的腐植酸钠提取原料为内蒙古武川地区的褐煤。

[0009] 一种含腐植酸的多肽蛋白饲料的制备方法，其特征在于：

[0010] 具体步骤为：

[0011] (1)将枯草芽孢杆菌和黑曲霉分别经一级种子、二级种子培养，制备成种子液；

[0012] (2)将枯草芽孢杆菌种子液和黑曲霉种子液以1-2.5∶0.5-1.5比例混合，制备成混合菌悬液；

[0013] (3)将含腐植酸的固态培养基中加入水，料水比达1∶0.9-1.1(w/v)，自然pH值，接种混合菌悬液，其接种量为7-10％(按主料总量计算，v/w)，在32-34℃条件下发酵84-120小时，再将发酵产物经40-60℃烘干至水分≤12％，即得成品。

[0014] 所得产品含腐植酸3.5％-6％、多肽≥18％、粗蛋白≥40％、中性蛋白酶≥260U/g、淀粉酶≥28000U/g，水分含量≤12％。

[0015] 本发明提供了一种含腐植酸的多肽蛋白饲料及其制备方法，具有以下优点：可促进枯草芽孢杆菌和黑曲霉的生长，提高其产酶能力，从而提高了发酵产物中的多肽含量、粗蛋白含量和各种酶含量，且对其适口性有明显改善。制备出的含腐植酸的多肽蛋白饲料能促进动物消化利用，提高饲料利用率，增强机体免疫，促进动物生长，降低养殖成本，改善环境污染。

[0016] 下面通过实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。具体实施方式：

[0017] 下面通过具体实施例进行进一步说明本发明一种含腐植酸的多肽蛋白饲料及其制备方法的技术方案。

[0018] 实施例一：

[0019] 该产品是由含腐植酸钠的固态培养基经混合菌悬液固态发酵制备而成。

[0020] 所述的混合菌悬液为：枯草芽孢杆菌种子液和黑曲霉种子液，其混合比例为2∶1；

[0021] 所述含腐植酸的固态培养基组成成分为：主料：豆粕65％、葵粕20％、麸皮5％、玉米皮3％、辅料：腐植酸钠5％、糖蜜0.2％、硫酸铵1％、磷酸氢二钾0.8％(按质量百分比计算)；

[0022] 所述枯草芽孢杆菌种子液和黑曲霉种子液为枯草芽孢杆菌CGMCC1.0892(Bacillus subtilis CGMCC1.0892)和黑曲霉CGMCC3.3016(Aspergillus niger CGMCC3.3016)；

[0023] 所述的腐植酸钠提取原料为：内蒙古武川地区的褐煤；

[0024] 一种含腐植酸的多肽蛋白饲料的制备方法，具体步骤为：

[0025] (1)将枯草芽孢杆菌和黑曲霉分别经一级种子、二级种子培养，制备成种子液；

[0026] (2)将枯草芽孢杆菌种子液和黑曲霉种子液以2∶1比例混合，制备成混合菌悬液；

[0027] (3)将含腐植酸的固态培养基中加入水，料水比达1∶0.9(w/v)，自然pH值，接种混合菌悬液，其接种量为10％(按主料总量计算，v/w)，在32℃条件下发酵115小时，再将发酵产物经55℃烘干至水分为9％，即得成品。

[0028] 该多肽蛋白饲料成品含腐植酸5％、多肽含量25％、粗蛋白60％、中性蛋白酶260U/g、淀粉酶酶28000U/g、水分含量9％。

[0029] 实施例二：

[0030] 该产品是由含腐植酸钠的固态培养基经混合菌悬液固态发酵制备而成。

[0031] 所述的混合菌悬液为：枯草芽孢杆菌种子液和黑曲霉种子液，其混合比例为2∶1.5；

[0032] 所述含腐植酸的固态培养基组成成分为：主料：豆粕70％、葵粕15％、麸皮7％、玉 米皮2％、辅料：腐植酸钠4％、糖蜜0.1％、硫酸铵0.8％、磷酸氢二钾1％和氯化锌0.1％(按质量百分比计算)；

[0033] 所述枯草芽孢杆菌种子液和黑曲霉种子液为枯草芽孢杆菌CGMCC1.0892(Bacillus subtilis CGMCC1.0892)和黑曲霉CGMCC3.3016(Aspergillus niger CGMCC3.3016)；

[0034] 所述的腐植酸钠提取原料为：内蒙古武川地区的褐煤；

[0035] 一种含腐植酸的多肽蛋白饲料的制备方法，具体步骤为：

[0036] (1)将枯草芽孢杆菌和黑曲霉分别经一级种子、二级种子培养，制备成种子液；

[0037] (2)将枯草芽孢杆菌种子液和黑曲霉种子液以2∶1.5比例混合，制备成混合菌悬液；

[0038] (3)将含腐植酸的固态培养基中加入水，料水比达1∶1(w/v)，自然pH值，接种混合菌悬液，其接种量为8％(按主料总量计算，v/w)，在34℃条件下发酵100小时，再将发酵产物经60℃烘干至水分为6％，即得成品；

[0039] 该多肽蛋白饲料成品含腐植酸4％、多肽含量20％、粗蛋白40％、中性蛋白酶280U/g、淀粉酶酶30000U/g、水分含量6％。

[0040] 实施例三：

[0041] 该产品是由含腐植酸钠的固态培养基经混合菌悬液固态发酵制备而成。

[0042] 所述的混合菌悬液为：枯草芽孢杆菌种子液和黑曲霉种子液，其混合比例为1∶1；

[0043] 所述含腐植酸的固态培养基组成成分为：主料：豆粕60％、葵粕25％、麸皮6％、玉米皮4％、辅料：腐植酸钠3％、糖蜜0.3％、硫酸铵0.7％、磷酸氢二钾0.9％和氯化锌0.1％(按质量百分比计算)；

[0044] 所述枯草芽孢杆菌和黑曲霉为枯草芽孢杆菌CGMCC1.0892(Bacillus subtilis CGMCC1.0892)和黑曲霉CGMCC3.3016(Aspergillus niger CGMCC3.3016)；

[0045] 所述的腐植酸钠提取原料为：内蒙古武川地区的褐煤；

[0046] 一种含腐植酸的多肽蛋白饲料的制备方法，具体步骤为：

[0047] (1)将枯草芽孢杆菌和黑曲霉分别经一级种子、二级种子培养，制备成种子液；

[0048] (2)将枯草芽孢杆菌种子液和黑曲霉种子液以1∶1比例混合，制备成混合菌悬液；

[0049] (3)将含腐植酸的固态培养基中加入水，料水比达1∶1.1(w/v)，自然pH值，接种混合菌悬液，其接种量为7％(按主料总量计算，v/w)，在33℃条件下发酵90小时，再将发酵产物经45℃烘干至水分为11％，即得成品；

[0050] 该多肽蛋白饲料成品含腐植酸6％、多肽含量28％、粗蛋白50％、中性蛋白酶275U/g、淀粉酶酶29000U/g、水分含量6％。

[0051] 本发明一种含腐植酸的多肽蛋白饲料具有可促进枯草芽孢杆菌和黑曲霉的生长，提高其产酶能力，从而提高了发酵产物中的多肽含量、粗蛋白含量和各种酶含量，且对其适口性有明显改善。制备出的含腐植酸的多肽蛋白饲料能促进动物消化利用，提高饲料利用率，增强机体免疫，促进动物生长，降低养殖成本，改善环境污染。

[0052] 本产品经检测分析

[0053] 1、多肽含量测定

[0054] 多肽含量测定：

[0055] 凯氏定氮法测定发酵产物中酸溶性蛋白的含量；茚三酮显色法测定发酵产物中游离氨基酸的含量；

[0056] 多肽(％)＝酸溶性蛋白(％)-游离氨基酸游离氨基酸(％)。

[0057] 2、腐植酸含量测定：用氢氧化钠溶液从发酵产物中提取总腐植酸，抽提出的腐植酸中的碳用重铬酸钾氧化，过剩的重铬酸钾用硫酸亚铁铵标准溶液滴定(可参照：腐植酸的提取及其成分含量测定，黄金凤、赵义龙、赵金香、矫继峰、李太元；四川畜牧兽医；2007年第5期)。

[0058] 3、酶活的测定

[0059] 蛋白酶活测定：参照GB/T23527-2009，采用Folin酚法。

[0060] 淀粉酶酶活测定：采用3，5-二水杨酸比色法(DNS)。

[0061] 4、常规营养成分分析

[0062] 粗蛋白含量测定：采用GB/T6432-1994饲料中粗蛋白测定方法。

[0063] 粗纤维含量测定：采用GB/T6434-1994饲料中粗纤维测定方法。

[0064] 磷含量测定：采用GB/T6437-92饲料中总磷量的测定方法-分光光度法。

[0065] 表1含腐植酸的多肽蛋白饲料营养成分分析结果

[0066]

[0067]

[0068] 注：1、一个蛋白酶活力单位为1g固体物质在40℃、pH7.5条件下，1min水解酪素产生1μg酪氨酸量。

[0069] 2、一个淀粉酶活力单位为在37℃、pH6.8的条件下，每分钟水解淀粉生成1mg还原糖所需要的酶量。

[0070] 下面通过具体实验来说明本发明一种含腐植酸的多肽蛋白饲料的显著功效。

[0071] 实施例1含腐植酸的多肽蛋白饲料喂奶牛的效果

[0072] 选择80头泌乳中期的健康荷斯坦奶牛，按照年龄、日产奶量、泌乳天数、胎次相近的原则进行分组配对，随机分为4组，包括1个对照组和3个试验组，每组20头；对照组为不添加多肽蛋白饲料，试验组用含腐植酸的多肽蛋白饲料替代饲料中豆粕的50％。4个处理组为：对照组(15％豆粕)，试验组(7.5％豆粕+7.5％腐植酸多肽蛋白饲料)。4个组均饲喂粗饲料，主要是干草、玉米青贮等。奶牛精饲料日粮组成及营养水平见表2。试验预饲期6d，含腐植酸的多肽蛋白饲料的添加量逐渐增大至试验要求。第7d开始进入试验正试期，试验期30d。试验奶牛采用栓系饲养，每日喂料3次，管道式挤奶机挤奶3次，运动场自 由饮水。

[0073] 试验结果见表3和表4。从3表中可见看出，试验结束时，对照组产奶量提高了4.82％，而试验组产奶量却提高了13.44％、19.37％和16.41％，明显高于对照组；表4比较了含腐植酸的多肽蛋白饲料对牛奶品质的影响，结果显示含腐植酸的多肽蛋白饲料可降低乳品质中体细胞数，提高乳蛋白含量的影响。因此，用含腐植酸的多肽蛋白饲料替代精饲料中豆粕的50％饲喂奶牛效果较好，可提高奶产量10％以上，且对牛奶品质有一定的提高。

[0074] 表2奶牛精饲料日粮配方及营养水平

[0075]

[0076] 表3含腐植酸的多肽蛋白饲料对奶牛产奶量的影响kg/d

[0077]

[0078] 表4含腐植酸的多肽蛋白饲料对牛奶乳成分的影响

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[0080]

[0081] 实施例2含腐植酸的多肽蛋白饲料饲喂肉羊的效果

[0082] 选择1月龄健康无病的寒杂羔羊240只，体质量接近，随机分为4组，每组60只。包括1个对照组和3个试验组，对照组为不添加多肽蛋白饲料，试验组T1、T2、T3用含腐植酸的多肽蛋白饲料替代饲料中的75％的豆粕。4组均饲喂粗饲料，主要是野干草、玉米青贮等。羔羊精饲料日粮组成及营养水平见表5。试验预饲期7d，正式期60d。试验结果见表6。

[0083] 表5羔羊精饲料日粮配方及营养水平

[0084]

[0085] 由表6可见，试验组羔羊日增重分别较对照组提高11.13％、18.78％和9.16％，饲料利用率提高了25.01％、13.93％和25.89％。由此可见，含腐植酸的多肽蛋白饲料以替代精饲料中豆粕的75％饲喂羔羊，日增重和饲料转化率均有明显提高，日增重可提高8％以上，饲料转化率可提高10％以上。

[0086] 表6含腐植酸的多肽蛋白饲料对羔羊生长性能的影响