分子标记物在甲状旁腺肿瘤诊断中的用途

摘要

本发明涉及分子标记物在甲状旁腺肿瘤诊断中的用途。进一步地，本发明涉及一种或多种选择性结合至分子标记物的结合部分在制备用于鉴定甲状旁腺肿瘤的试剂中的用途，其中所述分子标记物选自CD24、HMOX1、VCAM1或KCNA3。

权利要求

1.一种或多种选择性结合至蛋白质分子标记物的结合部分在制备用于鉴定甲状旁腺肿瘤的试剂中的用途，其中所述蛋白质分子标记物选自HMOX1蛋白或KCNA3蛋白。

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述的结合部分选自选择性结合至蛋白质分子标记物的抗体或其抗原结合片段或变体。

3.根据权利要求1或2所述的用途，其中，鉴定甲状旁腺肿瘤包括步骤：a)提供来自个体的甲状旁腺肿瘤组织和正常对照组织的样品；和b)确定样品中分子标记物的量；

其中，甲状旁腺肿瘤组织中分子标记物的过度表达是甲状旁腺癌的指征。

4.根据权利要求3所述的用途，其中步骤b)的方法选自Western印迹、North-Western印迹、免疫吸附测定法、抗体微阵列、组织微阵列。

5.根据权利要求4所述的用途，其中步骤b)的方法选自免疫沉淀、放射免疫测定法和免疫酶测定法。

6.一种或多种特异地检测编码分子标记物的mRNA的表达水平的引物和/或探针在制备用于鉴定甲状旁腺肿瘤的试剂中的用途，其中所述分子标记物选自HMOX1或KCNA3。

7.根据权利要求6所述的用途，其中，鉴定甲状旁腺肿瘤包括步骤：a)提供来自个体的甲状旁腺肿瘤组织和正常对照组织的样品；和b)确定样品中分子标记物的mRNA的量；

其中，甲状旁腺肿瘤组织中分子标记物的mRNA的过度表达是甲状旁腺癌的指征。

8.根据权利要求7所述的用途，其中步骤b)的方法选自宏阵列筛选、微阵列筛选、纳米阵列筛选、逆转录PCR、实时PCR或原位PCR。

说明书

分子标记物在甲状旁腺肿瘤诊断中的用途

技术领域

[0001] 本发明涉及甲状旁腺肿瘤标记物的领域。特别地，本发明涉及选自CD24、HMOX1、VCAM1或KCNA3的分子标记物在甲状旁腺肿瘤诊断中的用途。

背景技术

[0002] CD24是一种表达于大部分B淋巴细胞表面和成神经纤维细胞的一种糖化蛋白，CD24可促进肿瘤细胞的增殖能力，并增加肿瘤细胞的伸展运动。CD24是P选择素配体之一，CD24被发现在非黑色素瘤中高表达，基底细胞癌和鳞状细胞癌中敏感度分别为81%和100%，特异度分别为67%和71%，参见，Miller E,Shapira S,Gur E,Naumov I,Kazanov D,Leshem D,Barnea Y,Meshiach Y,Gat A,Sion D et al:Increased expression of CD24in nonmelanoma skin cancer.The International journal of biological markers2012,27(4):e331-336.。也有报道显示CD24的高表达和恶性肿瘤的淋巴结转移、病理分期及血管侵犯等相关，参见Takahashi M,Nakajima M,Ogata H,Domeki Y,Ohtsuka K,Ihara K,Kurayama E,Yamaguchi S,Sasaki K,Miyachi K et al:CD24Expression is Associated with Progression of Gastric Cancer.Hepatogastroenterology2012,60(124)。

[0003] VCAM1是一种细胞表面糖蛋白，介导白细胞内皮细胞粘连和信号转导，VCAM1血管细胞粘附分子-1（vascular cell adhesion molecule1，VCAM-1）是免疫球蛋白超家族成员之一，是一种重要的细胞粘附分子，广泛表达在活化内皮细胞、平滑肌细胞、骨髓基质细胞（BMSC）、巨噬细胞、树突状细胞及成纤维细胞等表面，其生物学作用十分广泛。VCAM-1可在IL-1，TNF-α等细胞因子作用后表达.内皮细胞表面的VCAM-1可因细胞因子的诱导而高水平的表达。高表达在结肠癌、肺癌等癌中发现。

[0004] HMOX1属于血红素氧化酶家族，位于染色体22的长臂，是一种编码血红素酶1的人类基因，是血红素分解代谢的关键基因，分解血红素为胆绿素，HMOX1的高表达和膀胱癌的预后相关。

[0005] KCNA3编码电压门控Kv1.3通道，在T和B淋巴细胞表达，有助于凋亡的机制，和细胞增殖相关。

[0006] 原发性甲状旁腺功能亢进症（primary hyperparathyroidism,PHPT）,是由病变的甲状旁腺自主合成和分泌过多的甲状旁腺激素（parathyroid hormone,PTH），从而引起钙、磷和骨代谢紊乱的一种全身性疾病。由甲状旁腺腺瘤引起的PHPT约占80%～85%，15%～20%由甲状旁腺增生引起，由甲状旁腺癌引起的不到1%，参见Marx SJ:Hyperparathyroid and hypoparathyroid disorders.N Engl J Med2000,343(25):1863-1875。

[0007] 然而，甲状旁腺肿瘤是异质性的肿瘤，组织学分类复杂多样，因此临床上经常不易区别甲状旁腺肿瘤，包括腺瘤和增生等，尤其是区别甲状旁腺癌和不典型腺瘤时更加困难，Haven CJ,Howell VM,Eilers PH,Dunne R,Takahashi M,van Puijenbroek M,Furge K,Kievit J,Tan MH,Fleuren GJ et al:Gene expression of parathyroid tumors:molecular subclassification and identification of the potential malignant phenotype.Cancer research2004,64(20):7405-7411。甲状旁腺癌不易诊断，除了依靠组织病理组织学手段外，经常需结合手术中的探查情况确定诊断。更重要的是，甲状旁腺癌治疗效果不佳，术后很容易复发，术后包括放疗和化疗的辅助治疗的效果也有限，参见，Givi B,Shah JP:Parathyroid carcinoma.Clin Oncol(R Coll Radiol)2010,22(6):498-507。因此及时诊断鉴别甲状旁腺的良恶性肿瘤显得尤为关键。

[0008] 目前，关于甲状旁腺肿瘤发生和发展机制方面的研究报道较少。我们前期已进行了有关甲状旁腺的基因表达谱研究，寻找鉴别出了一些相关的差异基因，包括CD24、HMOX1、VCAM1或KCNA3基因。本发明人应用免疫组织化学方法和实时PCR的方法检测了甲状旁腺腺癌和甲状旁腺腺瘤组织中CD24、HMOX1、VCAM1或KCNA3的表达，惊奇地发现甲状旁腺腺癌组的CD24、HMOX1、VCAM1或KCNA3表达阳性率明显高于甲状旁腺腺瘤和正常甲状旁腺组表达的阳性率，差异均有统计学意义(P<0.05)。

发明内容

[0009] 本研究应用免疫组织化学方法和实时PCR的方法检测了甲状旁腺腺癌和甲状旁腺腺瘤组织中CD24、HMOX1、VCAM1或KCNA3的表达，惊奇地发现甲状旁腺腺癌组的CD24、HMOX1、VCAM1或KCNA3表达阳性率明显高于甲状旁腺腺瘤和正常甲状旁腺组表达的阳性率。本发明首次发现CD24、HMOX1,VCAM1和KCNA3可能作为鉴别甲状旁腺癌的新的基因。因此，可能对于鉴别诊断甲状旁腺良恶性肿瘤提供新的方向，并可能为甲状旁腺肿瘤的治疗提供新的靶点，同时联合患者的临床生化指标有望提高甲状旁腺癌的诊断率。

[0010] 一方面，本发明提供了一种或多种选择性结合至分子标记物的结合部分在制备用于鉴定甲状旁腺肿瘤的试剂中的用途，其中所述分子标记物选自CD24、HMOX1、VCAM1或KCNA3。

[0011] “结合部分”意思是能够结合至分子标记物蛋白的分子或实体。

[0012] 优选地，所述结合部分包含多肽或由多肽组成。

[0013] 我们定义“选择性结合”包括相对于另外的多肽或核酸更强地结合至CD24的结合部分；优选所述结合为强至少10倍，优选强至少50倍和甚至更优选强至少100倍。优选结合部分只结合至CD24多肽或核酸。

[0014] 本文使用的术语“多肽”意思是多种氨基酸通过肽键连接在一起。术语“肽”可以与术语“多肽”交换使用，但是肽可以由两种或两种以上的多肽组成。

[0015] 更优选地，所述结合部分包含抗体或其抗原结合片段或变体，或由抗体或其抗原结合片段或变体组成。

[0016] 我们定义“抗体”包括基本上完整的抗体分子以及嵌合抗体、人源化抗体、人抗体（其中至少一个氨基酸相对于天然存在的人抗体是突变的）、单链抗体、双特异性抗体、抗体重链、抗体轻链、抗体重链和/或轻链的同二聚体和异二聚体，以及其抗原结合片段和衍生物。

[0017] “抗原结合片段”意思是能够结合至分子标记物蛋白的抗体的功能性片段，其中所述分子标记物选自CD24、HMOX1、VCAM1或KCNA3。

[0018] 优选地，抗原结合片段选自Fv片段（例如单链Fv和二硫键合的Fv）、Fab样片段（例如Fab片段、Fab’片段和F(ab)2片段）、单可变结构域（例如VH和VL结构域）和结构域抗体（dAb，包括单和双的格式[即dAb-连接子-dAb])。

[0019] 使用抗体片段而不是整个抗体有多个优点。片段的较小尺寸可以引起改善的药理学性质，如对固体组织更好的穿透性。另外，抗原结合片段如Fab、Fv、ScFv和dAb抗体片段可以在大肠杆菌（E.coli）中表达并从大肠杆菌中分泌，因此允许促进大量所述片段的产生。

[0020] 进一步地，根据本发明的上述用途，其中，所述用途包括步骤：

[0021] a）提供来自个体的甲状旁腺肿瘤组织和正常对照组织的样品；和

[0022] b）确定样品中分子标记物的量；

[0023] 其中，甲状旁腺肿瘤组织中分子标记物的过度表达是甲状旁腺癌的指征。

[0024] 特别地，在所述步骤b）中的优选方法包括Western印迹、North-Western印迹、免疫吸附测定法（ELISA）、抗体微阵列、组织微阵列（TMA）、免疫沉淀、原位杂交和其他免疫组织化学技术、放射免疫测定法（RIA）、免疫放射测定法（IRMA）和免疫酶测定法（IEMA），包括使用单克隆和/或多克隆抗体的三明治测定法。载玻片上的细胞抗体染色可以用于细胞学实验室诊断测试中熟知的方法中，如本领域技术人员熟知的。

[0025] 通常，ELISA包括使用产生有色反应产物的酶（通常在固相测定法中）。酶如辣根过氧化物酶和磷酸酶已经被广泛应用。放大磷酸酶反应的方法是使用作为底物的NADP从而产生现在作为第二酶系统的辅酶的NAD。来自大肠杆菌（Escherichia coli）的焦磷酸酶提供良好的偶联，因为所述酶不在组织中存在，是稳定的，且产生好的反应颜色。也可以使用基于酶的化学发光系统，如荧光素酶。

[0026] 经常使用与维生素生物素的偶联，因为其可以容易地通过其与酶连接的卵白素或抗生物素蛋白链菌素（其以高特异性和亲和力结合卵白素或抗生物素蛋白链菌素）的反应得以检测。

[0027] 另一方面，本发明提供了一种或多种特异地检测编码分子标记物的mRNA的表达水平的引物和/或探针，在制备用于鉴定甲状旁腺肿瘤的试剂中的用途，其中所述分子标记物选自CD2、HMOX1、VCAM1或KCNA3。

[0028] 进一步地，根据本发明的上述用途，其包括步骤：

[0029] a）提供来自个体的甲状旁腺肿瘤组织和正常对照组织的样品；和

[0030] b）确定样品中分子标记物的mRNA的量；

[0031] 其中，甲状旁腺肿瘤组织中分子标记物的mRNA的过度表达是甲状旁腺癌的指征。

[0032] 特别地，在所述步骤(b)使用选自宏阵列筛选、微阵列筛选、纳米阵列筛选、逆转录PCR、实时PCR或原位PCR的方法进行。

[0033] 另一方面，本发明涉及一种用于鉴定甲状旁腺肿瘤的试剂盒，其包括一种或多种选择性结合至分子标记物蛋白的结合部分，其中所述分子标记物选自CD24蛋白、HMOX1蛋白、VCAM1蛋白或KCNA3蛋白。

[0034] 另一方面，本发明涉及一种用于鉴定甲状旁腺肿瘤的试剂盒，其包括一种或多种特异地检测编码分子标记物的mRNA的表达水平的引物和/或探针，其中所述分子标记物选自CD24、HMOX1、VCAM1或KCNA3。

[0035] 另一方面，本发明涉及一种或多种分子标记物用于鉴定甲状旁腺肿瘤中的用途，其中所述分子标记物选自CD24、HMOX1、VCAM1或KCNA3。

[0036] 通过纳入本文的附图以及随后与附图一起用于说明本发明的某些原理的具体实施方式，本发明的方法和装置所具有的其它特征和优点将变得清楚或更为具体地得以阐明。

附图说明

[0037] 图1表示不同甲状旁腺组织中CD24的表达（×400）。

[0038] A和B分别为正常甲状旁腺组织CD24阴性和阳性表达的图片。

[0039] C和D代表甲状旁腺腺瘤组织中CD24阴性和阳性表达的图片。

[0040] E代表甲状旁腺腺癌组织中CD24阳性表达的图片。

[0041] 图2表示甲状旁腺腺瘤和甲状旁腺腺癌中CD24、HMOX1、VCAM1和KCNA3的表达水平（×400）。

[0042] A表示甲状旁腺腺瘤CD24表达，Ｂ表示甲状旁腺腺癌CD24表达；

[0043] C表示甲状旁腺腺瘤HMOX1表达，D表示甲状旁腺腺癌HMOX1表达；

[0044] E表示甲状旁腺腺瘤VCAM1表达，F表示甲状旁腺腺癌VCAM1表达;

[0045] G表示甲状旁腺腺瘤KCNA3表达，H表示甲状旁腺腺癌KCNA3表达。

[0046] 图3在正常组织、甲状旁腺腺瘤、甲状旁腺腺癌中CD24、HMOX1、VCAM1和KCNA3的实时PCR的结果。

[0047] 应当了解，所附附图并非按比例地显示了本发明的基本原理的图示性的各种特征的略微简化的画法。本文所公开的本发明的具体设计特征包括例如具体尺寸、方向、位置和外形将部分地由具体所要应用和使用的环境来确定。

具体实施方式

[0048] 本发明人前期通过全基因组芯片实验操作方法，进行了有关甲状旁腺的基因表达谱研究，寻找鉴别出了一些相关的差异基因，包括CD24等基因。进一步地，本研究应用免疫组织化学方法以及实时PCR的方法检测了甲状旁腺腺癌、甲状旁腺腺瘤组织、以及正常甲状旁腺组织中分子标记物CD24、HMOX1、VCAM1或KCNA3的蛋白质水平和mRNA水平上的表达，并对其临床意义以及它们之间的相互关系进行了初步探讨。

[0049] 一、全转录组芯片实验操作方法

[0050] 1、研究对象

[0051] 选取北京协和医院原发性甲状旁腺功能亢进患者的甲状旁腺组织标本和正常甲状旁腺组织标本共23例，包括5例正常甲状旁腺组织和18例原发性甲状旁腺功能亢进组织标本。其中原发性甲状旁腺功能亢进患者的甲状旁腺组织标本由5例散发型甲状旁腺增生组织、5例散发型甲状旁腺腺瘤组织和3例甲状旁腺癌组织标本组成。分为正常甲状旁腺组、散发甲状旁腺增生组、散发甲状旁腺腺瘤组、不典型腺瘤组和甲状旁腺癌组共5组。其中女性19例，男性4例；年龄24～62岁。所有标本均经手术病理证实，其中甲状旁腺癌的诊断同时结合病理诊断和术中所见，排除继发性甲状旁腺功能亢进症和多发性内分泌肿瘤综合症病例。提取RNA，纯的达到1.81-2.09之间。基因表达谱被上海其明公司执行。

[0052] 2、实验结果

[0053] 首先将正常甲状旁腺组、散发甲状旁腺增生组、散发甲状旁腺腺瘤组、不典型腺瘤组和甲状旁腺癌组进行比较，将各组之间的差异基因进行合并，进行聚类图分析。

[0054] 其次将正常甲状旁腺组与散发甲状旁腺增生组、散发甲状旁腺腺瘤组、不典型腺瘤组和甲状旁腺癌组进行比较，在正常甲状旁腺组和散发甲状旁腺增生组之间共筛选出差异基因个，其中差异倍数大于2倍的基因共个，包括个上调基因和个下调基因；在正常甲状旁腺组和散发甲状旁腺增生组之间共筛选出差异基因1506个，其中差异倍数大于2倍的基因共70个，包括个上调基因11个和个下调基因59个；在正常甲状旁腺组和散发甲状旁腺腺瘤组之间共筛选出差异基因1820个，其中差异倍数大于2倍的基因共153个，包括个上调基因23个和个下调基因130个；在正常甲状旁腺组和不典型腺瘤组之间共筛选出差异基因840个，其中差异倍数大于2倍的基因共100个，包括个上调基因49个和下调基因51个；在正常甲状旁腺组和甲状旁腺癌组之间共筛选出差异基因1982个，其中差异倍数大于2倍的基因共281个，包括65个上调基因和216个下调基因。

[0055] 再将甲状旁腺癌组与散发甲状旁腺增生组、散发甲状旁腺腺瘤组和不典型腺瘤组进行比较，在甲状旁腺癌和散发甲状旁腺增生组之间共筛选出差异基因1142个，其中差异倍数大于2倍的基因共114个，包括44个上调基因和70个下调基因；在甲状旁腺癌和腺瘤组之间共筛选出差异基因2292个，其中差异倍数大于2倍的基因共310个，包括269个上调基因和41个下调基因；在甲状旁腺癌和不典型腺瘤组之间共筛选出差异基因798个，其中差异倍数大于2倍的基因共71个，包括14个上调基因和57个下调基因。

[0056] 二、Go analysis分析结果

[0057] GO Analysis方法将散发腺瘤组和癌组两组之间的差异基因基于GO数据库进行基因功能注释，得到基因参与的所有功能，而后利用Fisher精确检验和多重比较检验计算每个功能的显著性水平（P-value）和误判率（FDR）。从而筛选出差异基因所体现的显著性功能，显著性筛选的标准：P value<0.05。将差异基因的进行功能显著性分析，分别按照基因的上调和下调的不同功能和显著性进行分类。从结果表格可以发现，上调差异基因的显著性功能分析结果包括有Toll样受体信号途径的阳性上调和对刺激的反应等；下调差异基因的显著性功能分析结果包括有舒张和排泄的阳性上调等。根据分析结果中上调的差异基因显著性功能和下调的差异基因显著性功能中所含的基因数目及其在数据库中的富集程度，可以按照富集排序对显著性的功能制作靶向图。富集越大的显著性差异基因功能其排序越靠前代表在P值相同时，该功能受到实验的影响越大，且对应的差异基因功能在Gene Ontology数据库结构中的分层越低，功能也越具体。根据分析结果中上、下调显著性的差异基因功能中每一差异基因功能的显著性水平(p值)可以据此构建显著性差异基因功能的分布图。

[0058] 通过上述筛选方法，我们得到了在甲状旁腺肿瘤和甲状旁腺正常组织中表达具有显著差异的CD24、HMOX1、VCAM1或KCNA3基因，并进一步通过以下的免疫组织化学方法以及实时PCR的方法确认了其表达的差异。

[0059] 三、免疫组化

[0060] 1、研究对象

[0061] 北京协和医院2012年1月至2012年11月的甲状旁腺肿瘤组织共18例，包括,甲状旁腺正常组织5例，甲状旁腺腺瘤10例，甲状旁腺腺癌3例。其中男性13例，女性22例；年龄31～71岁，平均年龄5I.6岁。收集患者临床指标包括血钙、PTH、AKP和肿瘤大小等指标进行统计（见表一）。所有标本均经手术病理证实，其中甲状旁腺癌的诊断同时结合手术中所见，排除继发性甲状旁腺功能亢进症和多发性内分泌肿瘤综合症病例。

[0062] 表1甲状旁腺肿瘤病例的临床生化资料

[0063]

[0064] 2、实验步骤

[0065] 收集这些患者的甲状旁腺手术切除标本，均经常规石蜡包埋，以4mm厚度行连续切片。60℃烤片30min。二甲苯脱蜡，梯度酒精水化。PBS洗3次，每次5min。3%H2O2在室温下作用15min。PBS洗3次，每次5min。PH值6.0枸橼酸缓冲液高压锅修复3min。含5%羊血清的抗体稀释液在37℃封闭30min。弃液不洗，分别按照比例1/100加入一抗，分别为抗CD24、抗HMOX1、抗VCAM1和抗KCNA3抗体，4℃过夜。PBS洗3次，每次5min。加入辣根酶标记的羊抗小鼠/兔二抗，室温反应1h。PBS洗3次，每次5min。DAB显色：用DAB试剂盒，临用前取5ml蒸馏水，取A液100　l、B液100　l，取C液200　l混匀加至切片。室温显色3-5min（镜下控制显色时间），自来水终止、洗脱。PBS洗3次，每次3min。梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。显微镜观察并照相。

[0066] 3、结果判断

[0067] 光镜（×400）下观察阳性细胞的数量，染色阳性反应信号呈淡黄或棕黄色颗粒位于细胞核内。表达阳性为显色的细胞占全部细胞的25%或以上者；阴性为切片中的细胞不显色或显色的细胞占全部细胞的25%以下者。

[0068] 4、数据处理

[0069] 应用SPSS软件采用t检验和X2进行统计分析，P＜0.05表示差异有统计学意义。

[0070] 本研究包括18例病例，其中8例男性，10例女性，癌组的平均年龄45.7岁，腺瘤组的平均年龄50.1岁，无统计学差异。癌组术前的平均血钙水平(3.61mmol/L)明显高于腺瘤组(2.77mmol/L)(p<0.05)；癌组术前的平均血PTH水平1536.7pg/L明显高于腺瘤组(373.2pg/L)(p<0.05)；癌组术前的肿瘤直径(3.30cm)明显大于腺瘤组(1.73cm)(p<0.05)。

[0071] CD24的免疫组织化学阳性染色产物定位于细胞核内，见图1。3例甲状旁腺腺癌组织中有3例为CD24过度表达(100%)，10例甲状旁腺腺瘤组织中有3例为CD24过度表达(30%)，5例正常甲状旁腺组织中1例CD24的过度表达(20%)。甲状旁腺腺癌组的CD24表达阳性率明显高于甲状旁腺腺瘤和正常甲状旁腺组的CD24表达阳性率，差异均有统计学意义(P<0.05)；甲状旁腺腺瘤组的CD24表达阳性率虽高于正常甲状旁腺组，但差异均无统计学意义(P>0.05)。

[0072] 表2CD24在三种甲状旁腺组织中的表达

[0073]

[0074] 注：a为正常甲状旁腺与甲状旁腺腺瘤中CD24表达的对比

[0075] b为正常甲状旁腺与甲状旁腺腺癌中CD24表达的对比

[0076] c为甲状旁腺腺瘤与甲状旁腺腺癌中CD24表达的对比

[0077] 本研究免疫组化结果显示，CD24在甲状旁腺癌组织、腺瘤组织和正常组织中的表达率分别为100%（3／3）、30%（3／10）和20%（1／5）。尽管甲状旁腺腺癌组和甲状旁腺腺瘤组的CD24表达阳性率均高于正常甲状旁腺组，但甲状旁腺腺瘤组和正常甲状旁腺组之间差异无统计学意义(P>0.05)；相反甲状旁腺癌组的CD24表达不仅与正常甲状旁腺组之间具有统计学差异(P<0.05)，而且和甲状旁腺腺瘤之间的差异也具有统计学意义(P<0.05)。

[0078] 因此，CD24可能对于鉴别诊断甲状旁腺良恶性肿瘤提供新的方向，并可能为甲状旁腺肿瘤的治疗提供新的靶点，同时联合患者的临床生化指标能够提高甲状旁腺癌的诊断率。

[0079] 如图2所示，在甲状旁腺腺癌中CD24、HMOX1、VCAM1或KCNA3的表达均显著高于其在甲状旁腺腺瘤中的表达水平。

[0080] 四、实时PCR

[0081] 1、实验方法

[0082] 利用实时PCR(ABI7900HT)进行验证，具体引物见表3。

[0083] 表3.PCR研究中使用的引物

[0084]

[0085] 2、PCR结果

[0086] 如图3所示，结果证实在甲状旁腺癌中，CD24、HMOX1,VCAM1和KCNA3的表达高于正常甲状旁腺组织，同时在甲状旁腺癌中CD24、HMOX1,VCAM1和KCNA3的表达也高于甲状旁腺腺瘤。尤其是CD24在甲状旁腺癌中的表达明显高于正常甲状旁腺组织。