一种富马酸卢帕他定化合物，其合成方法及其药物组合物

摘要

本发明涉及化合物领域，具体讲，涉及一种富马酸卢帕他定化合物，其合成方法及其药物组合物。所述的富马酸卢帕他定化合物使用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射图如图1所示。本发明还涉及一种富马酸卢帕他定的合成方法，该方法采用了3-甲基-5氯甲基吡啶盐酸盐为起始原料，简化了合成步骤，不需进行繁琐的萃取等工艺，从而更加适合工业化生产。本发明的富马酸卢帕他定化合物的纯度高、稳定性好，生物利用度高，非常适合于临床应用。

权利要求

1.一种富马酸卢帕他定晶体化合物，其特征在于，所述的富马酸卢帕他定晶体化合物使用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射图如图1所示，其结构式如式I所示：

2.一种权利要求1所述的富马酸卢帕他定晶体化合物的制备方法，其特征在于，所述的制备方法为：将富马酸卢帕他定粗品溶解于析晶溶剂中，加热至40～60℃，加入活性炭，

60℃下搅拌脱色30min，趁热过滤，过滤后在频率为20～25KHz、输出功率为40～80W的声场下，冷却降温，析出白色晶体后过滤，真空干燥，得富马酸卢帕他定化合物；所述析晶溶剂为异丙醇、乙腈和N,N-二甲基甲酰胺的混合溶剂，异丙醇、乙腈和N,N-二甲基甲酰胺的体积比为3～5：1～2：2～4；富马酸卢帕他定与析晶溶剂的重量体积比为1g:5～150ml。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，富马酸卢帕他定与析晶溶剂的重量体积比为1g:20～120ml。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，降温速度为0.5～3.5℃/小时。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，降温速度为1.5～2.5℃/小时。

6.根据权利要求2-5任意一项所述的制备方法，其特征在于，所述的富马酸卢帕他定粗品的制备方法包括以下步骤：(1)制备地洛他定；

(2)将地洛他定、3-甲基-5氯甲基吡啶盐酸盐于有机溶剂中，搅拌滴加碱的水溶液，升温回流反应3～5小时后将反应液减压浓缩至干，加入二氯甲烷溶解，用稀酸溶液洗涤1～

3次得到卢帕他定；

(3)卢帕他定与富马酸反应得到富马酸卢帕他定粗品。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，地洛他定的制备方法为：在反应瓶中加入氯雷他定、无水乙醇、碱和纯化水，在氮气保护下升温回流反应，TLC检测氯雷他定消失，停止反应，反应液浓缩至有大量固体析出，抽滤，洗涤，干燥，得地洛 他定；其中，所述的碱选自氢氧化钠或氢氧化钾，所述的氯雷他定与碱的投料摩尔比1：10～

25；所述的纯化水与无水乙醇体积比为1：1～5。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述氯雷他定与碱的投料摩尔比1：

20。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述纯化水与无水乙醇体积比为1：

4。

10.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述的有机溶剂选自二氯甲烷、乙醇、氯仿、四氢呋喃或甲苯；所述的碱选自三乙胺、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠或吡啶。

11.根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂选自无水乙醇。

12.根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于，所述碱选自碳酸氢钠。

13.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，地洛他定与3-甲基-5氯甲基吡啶盐酸盐的摩尔比为1：1～3；地洛他定与碱的投料摩尔比为1：2～10。

14.根据权利要求13所述的制备方法，其特征在于，地洛他定与3-甲基-5氯甲基吡啶盐酸盐的摩尔比为1：1.2。

15.根据权利要求13所述的制备方法，其特征在于，地洛他定与碱的投料摩尔比为1：

2.5。

16.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，卢帕他定与富马酸反应后的析晶溶剂选自极性溶剂。

17.根据权利要求16所述的制备方法，其特征在于，析晶溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮。

18.根据权利要求17所述的制备方法，其特征在于，析晶溶剂选自无水乙醇。

19.一种含有权利要求1所述的富马酸卢帕他定晶体化合物的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物中含有：富马酸卢帕他定10～15重量份、乳糖60～75重量份、微晶纤维素24～48重量份、预胶化淀粉5～8重量份、硬脂酸镁0.1～0.8重量份。

20.根据权利要求19所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物中含有：富马酸卢帕他定12.79重量份、乳糖72.2重量份、微晶纤维素36.0重量份、预胶化淀粉6.4重量份、硬脂酸镁0.5重量份。

说明书

一种富马酸卢帕他定化合物，其合成方法及其药物组合物

技术领域

[0001] 本发明涉及化合物领域，具体讲，涉及一种富马酸卢帕他定化合物，其合成方法及其药物组合物。

背景技术

[0002] 富马酸卢帕他定是由西班牙第一大制药公司－Uriach制药公司研制的新型、强效抗过敏药，于2003年3月15日首次在西班牙上市，批准适应症为季节性和常年性过敏性鼻炎，商品名Rupafin和Dupafin，剂量为10mg，一日一次。本品目前除在西班牙上市之外，还在巴西、葡萄牙和希腊上市；在比利时、卢森堡、爱尔兰等国家处于注册阶段；在英国、法国、南非等正在进行Ⅲ期临床研究。Uriach制药公司还许可意大利Recordati公司在西班牙上市。另外，国外正在进行本品用于湿疹治疗的Ⅲ期临床研究。

[0003] 富马酸卢帕他定具有抗组胺和拮抗血小板活化因子（PAF）双重作用。此外，富马酸卢帕他定还对肥大细胞脱颗粒、中性粒细胞和嗜酸细胞移动以及细胞因子释放均有抑制作用。其药理作用主要来自于卢帕他定，卢帕他定具有抗组胺和拮抗血小板活化因子（PAF）双重作用；富马酸对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有抑制作用，并且还具有抗肿瘤作用以及抗电休克、镇痛、镇咳等作用。而富马酸和卢帕他定的结合使水溶性大大增加，便于人体吸收，同时减少卢帕他定的副作用。富马酸卢帕他定是目前唯一上市的既有抗组胺作用又拮抗PAF活性的抗过敏药，因此它比世界最畅销的抗组胺药氯雷他定更具有优势，有望成为治疗过敏性鼻炎、肺炎、皮肤病的一线药物。

[0004] 关于富马酸卢帕他定的合成，已公开很多专利和文献；

[0005] 《卢帕他定的合成》（辛水波，中国新药杂志，2005年）中也公开了一种富马酸卢帕他定的合成路线，具体为：

[0006]

[0007] 论文《富马酸卢帕他定的化学合成、结构确证和质量分析》（山东大学，赵鑫，2008）中公开了一种富马酸卢帕他定的化学合成，其合成路线为：

[0008]

[0009] 《富马酸卢帕他定的合成》（陈建华，中国医药工业杂志，2007）中也公开了一种富马酸卢帕他定的合成路线，具体为：

[0010]

[0011]

[0012] 200910035249.5公开了一种富马酸卢帕他定的成盐制备方法，包括将卢帕他定与富马酸在混合溶剂中进行成盐反应，其中，所述的混合溶剂为丙酮与水的混合溶剂，其体积比为丙酮：水=5～20：1。此外，也可将富马酸卢帕他定在上述混合溶剂中进行重结晶。

[0013] 专利201210555827.X“富马酸卢帕他定的制备方法”公开了一种合成方法，具体为：反应容器中，加入235～237g的3-氯甲基-5-吡啶盐酸盐和465～475ml叔丁醇，搅拌升温至55～65℃，滴加235～245ml浓硫酸，控制反应液温度在55～65℃，反应8～10小时；降至室温，用235～245ml水稀释，再加入345～355ml甲苯，用浓氨水调溶液pH值至7.8～8.2，分出有机相；水层萃取后合并有机相，有机相洗涤、干燥、蒸去溶剂，得到油状液体产品。

[0014] 专利申请201310250002.1中公开了一种富马酸卢帕他定化合物。

[0015] 为了进一步的提高富马酸卢帕他定化合物的纯度和稳定性，以及简化富马酸卢帕他定化合物的合成方法，特提出本发明。

发明内容

[0016] 本发明的首要发明目的在于提出了一种富马酸卢帕他定化合物。

[0017] 本发明的第二发明目的在于提出了一种富马酸卢帕他定的合成方法。

[0018] 本发明的第三发明目的在于提出了一种富马酸卢帕他定的药物组合物。

[0019] 为了实现本发明的目的，采用的技术方案为：

[0020] 本发明涉及一种富马酸卢帕他定化合物，所述的富马酸卢帕他定化合物使用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射图如图1所示，其结构式如式I所示：

[0021]

[0022] 所述化合物的制备方法为：将富马酸卢帕他定粗品溶解于析晶溶剂中，加热至40～60℃，加入活性炭，60℃下搅拌脱色30min，趁热过滤，过滤后在频率为20～25KHz、输出功率为40～80W的声场下，冷却降温，析出白色晶体后过滤，真空干燥，得富马酸卢帕他定化合物；所述的析晶溶剂为异丙醇、乙腈和N,N-二甲基甲酰胺的混合溶剂，异丙醇、乙腈和N,N-二甲基甲酰胺的体积比为3～5：1～2：2～4；富马酸卢帕他定与析晶溶剂的重量体积比为1g:5～150ml，优选为1g:20～120ml；降温速度为0.5～3.5℃/小时，优选
1.5～2.5℃/小时。

[0023] 本发明还涉及该富马酸卢帕他定的合成方法，包括以下步骤：

[0024] （1）制备地洛他定；

[0025] （2）将地洛他定、3-甲基-5氯甲基吡啶盐酸盐于有机溶剂中，搅拌滴加碱的水溶液，升温回流反应3～5小时后将反应液减压浓缩至干，加入二氯甲烷溶解，用稀酸溶液洗涤1～3次得到卢帕他定；

[0026] （3）卢帕他定与富马酸反应得到富马酸卢帕他定粗品。

[0027] 其中，在步骤（1）中，地洛他定的制备方法为：在反应瓶中加入氯雷他定、无水乙醇、碱和纯化水，在氮气保护下升温回流反应，TLC检测氯雷他定消失，停止反应，反应液浓缩至有大量固体析出，抽滤，洗涤，干燥，得地洛他定。其中，所述的碱选自氢氧化钠或氢氧化钾，所述的氯雷他定与碱的投料摩尔比1:10～25，优选1:20；所述的纯化水与无水乙醇体积比为1:1～5，优选1:4。

[0028] 其中，在步骤（2）中，所述的有机溶剂选自二氯甲烷、乙醇、氯仿、四氢呋喃或甲苯，优选为无水乙醇；所述的碱选自三乙胺、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠或吡啶，优选碳酸氢钠；地洛他定与3-甲基-5氯甲基吡啶盐酸盐的摩尔比为1:1～3，优选1:1.2；地洛他定与碱的投料摩尔比为1：2～10，优选1：2.5。

[0029] 其中，在步骤（3）中，卢帕他定与富马酸反应后的析晶溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮等极性溶剂，优选无水乙醇。

[0030] 本发明还涉及一种富马酸卢帕他定的药物组合物，所述的药物组合物中含有：富马酸卢帕他定10～15重量份、乳糖60～75重量份、微晶纤维素24～48重量份、预胶化淀粉5～8重量份、硬脂酸镁0.1～0.8重量份；优选含有富马酸卢帕他定12.79重量份、乳糖72.2重量份、微晶纤维素36.0重量份、预胶化淀粉6.4重量份、硬脂酸镁0.5重量份。

[0031] 下面对本发明的技术方案做进一步的解释和说明。

[0032] 本发明通过对现有技术的研究，提出了一种富马酸卢帕他定的新的化合物。其性状为白色结晶性粉末，使用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射图如图1所示。

[0033] 本发明的富马酸卢帕他定化合物的纯度可达到99.98%，其结构经核磁共振氢谱确证。按照中国药典2010年版二部附录ⅧP对本发明的富马酸卢帕他定中的残留溶剂进行检测，其中含异丙醇0.004%、乙腈0.001％、N,N-二甲基甲酰胺0.001%。证实本发明的结晶方法残留溶剂含量极微量，临床应用安全可靠。

[0034] 本发明的富马酸卢帕他定化合物的制备方法的收率高，可达到93.6%，并且制备方法简单，纯度高，收率高，非常适合大规模的工业化生产。

[0035] 本发明的富马酸卢帕他定化合物可用于制备临床上使用的多种剂型，并优选片剂。并经稳定性试验证实，采用本发明的富马酸卢帕他定化合物制备的制剂，其稳定性高于现有技术，非常适于临床应用。进一步，本发明还提出了富马酸卢帕他定片的配方，乳糖、微晶纤维素为填充剂，预胶化淀粉为崩解剂，硬脂酸镁为润滑剂，水为润湿剂。

[0036] 本发明还提出一种富马酸卢帕他定的合成方法，该方法采用了3-甲基-5氯甲基吡啶盐酸盐为起始原料，简化了合成步骤，不需进行繁琐的萃取等工艺，从而更加适合工业化生产。并且其经过合成工艺制备得到的粗品的纯度就可达到99%。附图说明：

[0037] 图1为实施例1制备得到的富马酸卢帕他定化合物采用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射图；

[0038] 图2为实验例5得到的血药浓度-时间曲线。

[0039] 本发明的具体实施方式仅限于进一步解释和说明本发明，并不对本发明的内容构成限制。

具体实施方式

[0040] 实施例1：富马酸卢帕他定的合成

[0041] 1.制备地洛他定；

[0042] 在反应瓶中加入氯雷他定40g、氢氧化钠40g、无水乙醇500ml和纯化水125ml，在氮气保护下升温回流反应，TLC检测氯雷他定消失，停止反应，反应液浓缩至有大量固体析出，抽滤，洗涤，干燥，得地洛他定32g，收率98.5%。（氯雷他定与碱的投料摩尔比1：20；纯化水与无水乙醇体积比为1：4）

[0043] 2.制备富马酸卢帕他定粗品：

[0044] 将在反应瓶中加入地洛他定30 g和3-甲基-5氯甲基吡啶盐酸盐20.6ｇ（摩尔比1:1.2）；并加入无水乙醇300ml，边搅拌滴加1.5mol/L的碳酸氢钠水溶液160ml，升温回流反应5小时后将反应液减压浓缩至干，加入150ml二氯甲烷溶解，用0.1mol/L的盐酸溶液洗涤数次得到卢帕他定，纯度在99%以上，加入无水乙醇340ml、富马酸9.3ｇ，室温搅拌反应5小时，抽滤，干燥得富马酸卢帕他定粗品25.5g，收率50%。

[0045] 3.富马酸卢帕他定化合物的制备：

[0046] 将富马酸卢帕他定粗品25g溶解于析晶溶剂2500ml中，加热至50℃，加入2.5g活性炭，60℃下搅拌脱色30min，趁热过滤，过滤后于在频率为20KHz、输出功率为400W的声场下，冷却降温，析出白色晶体后过滤，50℃真空干燥，得富马酸卢帕他定化合物；所述的析晶溶剂为异丙醇、乙腈和N,N-二甲基甲酰胺的混合溶剂，异丙醇、乙腈和N,N-二甲基甲酰胺的体积比为3：2：3：降温速度为2.5℃/小时。

[0047] 制备得到的富马酸卢帕他定化合物采用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射图如图1所示；性状为白色粉末；经高效液相色谱检测，其纯度为99.98%；经《中国药典》2010版二部附录VI C熔点测定法的第一法测定，其熔点为202℃。

[0048] 实施例2：富马酸卢帕他定的合成

[0049] 1.制备地洛他定；

[0050] 在反应瓶中加入氯雷他定40g、氢氧化钠40g、无水乙醇500ml和纯化水125ml，在氮气保护下升温回流反应，TLC检测氯雷他定消失，停止反应，反应液浓缩至有大量固体析出，抽滤，洗涤，干燥，得地洛他定32g，收率98.5%。（氯雷他定与碱的投料摩尔比1：20；纯化水与无水乙醇体积比为1：4）

[0051] 2.制备富马酸卢帕他定粗品：

[0052] 将在反应瓶中加入地洛他定30 g和3-甲基-5氯甲基吡啶盐酸盐20.6ｇ（摩尔比1：1.2）；并加入无水乙醇300ml，边搅拌滴加1.5mol/L的碳酸氢钠水溶液160ml，升温回流反应5小时后将反应液减压浓缩至干，加入150ml二氯甲烷溶解，用0.1mol/L的盐酸溶液洗涤数次得到卢帕他定，纯度在99%以上，加入无水乙醇340ml、富马酸9.3ｇ，室温搅拌反应5小时，抽滤，干燥得富马酸卢帕他定粗品25.5g，收率50%。

[0053] 3.富马酸卢帕他定化合物的制备：

[0054] 将富马酸卢帕他定粗品25g溶解于析晶溶剂3200ml中，加热至40～60℃，加入2.5g活性炭，60℃下搅拌脱色30min，趁热过滤，过滤后于在频率为20～25KHz、输出功率为40～80W的声场下，冷却降温，析出白色晶体后过滤，50℃真空干燥，得富马酸卢帕他定化合物；所述的析晶溶剂为异丙醇、乙腈和N,N-二甲基甲酰胺的混合溶剂，异丙醇、乙腈和N,N-二甲基甲酰胺的体积比为5：1：4；富马酸卢帕他定与析晶溶剂的重量体积比为
1g:5～150ml，优选为1g:20～120ml；降温速度为1.5℃/小时。

[0055] 制备得到的富马酸卢帕他定化合物采用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射图如图1所示；性状为白色粉末；经高效液相色谱检测，其纯度为99.98%；经《中国药典》2010版二部附录VI C熔点测定法的第一法测定，其熔点为202℃。

[0056] 实施例3：片剂的制备

[0057] 配方：富马酸卢帕他定12.79重量份、乳糖72.2重量份、微晶纤维素36.0重量份、预胶化淀粉6.4重量份、硬脂酸镁0.5重量份。

[0058] 制备工艺：

[0059] 1、称取处方量的富马酸卢帕他定、1/2乳糖过60目筛混匀；

[0060] 2、加入微晶纤维素、预胶化淀粉及剩余的乳糖，混合均匀；

[0061] 3、以水为润湿剂制软材，20目筛制粒，60℃干燥至水分小于2.0%，用40目筛整粒；

[0062] 4、加入硬脂酸镁，混合均匀；

[0063] 5、测定中间体含量，压片。

[0064] 实施例4：片剂的制备

[0065] 配方：富马酸卢帕他定12.79重量份、乳糖75重量份、微晶纤维素32.0重量份、预胶化淀粉8重量份、硬脂酸镁0.3重量份。

[0066] 制备工艺：

[0067] 1、称取处方量的富马酸卢帕他定、1/2乳糖过60目筛混匀；

[0068] 2、加入微晶纤维素、预胶化淀粉及剩余的乳糖，混合均匀；

[0069] 3、以水为润湿剂制软材，20目筛制粒，60℃干燥至水分小于2.0%，用40目筛整粒；

[0070] 4、加入硬脂酸镁，混合均匀；

[0071] 5、测定中间体含量，压片。

[0072] 实施例5：片剂的制备

[0073] 配方：富马酸卢帕他定12.79重量份、乳糖60重量份、微晶纤维素48重量份、预胶化淀粉5重量份、硬脂酸镁0.6重量份。

[0074] 制备工艺：

[0075] 1、称取处方量的富马酸卢帕他定、1/2乳糖过60目筛混匀；

[0076] 2、加入微晶纤维素、预胶化淀粉及剩余的乳糖，混合均匀；

[0077] 3、以水为润湿剂制软材，20目筛制粒，60℃干燥至水分小于2.0%，用40目筛整粒；

[0078] 4、加入硬脂酸镁，混合均匀；

[0079] 5、测定中间体含量，压片。

[0080] 实施例6：片剂的制备

[0081] 配方：富马酸卢帕他定12.79重量份、乳糖75重量份、微晶纤维素24重量份、预胶化淀粉6重量份、硬脂酸镁0.1重量份。

[0082] 制备工艺：

[0083] 1、称取处方量的富马酸卢帕他定、1/2乳糖过60目筛混匀；

[0084] 2、加入微晶纤维素、预胶化淀粉及剩余的乳糖，混合均匀；

[0085] 3、以水为润湿剂制软材，20目筛制粒，60℃干燥至水分小于2.0%，用40目筛整粒；

[0086] 4、加入硬脂酸镁，混合均匀；

[0087] 5、测定中间体含量，压片。

[0088] 实验例1：

[0089] 1.高温试验

[0090] 取实施例1制备得到的富马酸卢帕他定晶体化合物三个批次101、102、103，模拟上市包装，置密封洁净容器中，于40±2℃温度下放置10天，于第5天和第10天取样，按稳定性重点考察项目进行检测，试验结果与0天比较。

[0091] 2.高湿度试验

[0092] 取实施例1制备得到的富马酸卢帕他定晶体化合物三个批次101、102、103，模拟上市包装，置密封洁净容器中，在25±2℃，相对湿度90±5%的条件下放置10天，于第5天和第10天取样，按稳定性重点考察项目进行检测，试验结果与0天比较。

[0093] 3.强光照射试验

[0094] 取实施例1制备得到的富马酸卢帕他定晶体化合物三个批次101、102、103，模拟上市包装，置密封洁净容器中，置于照度为4500lx的条件下放置10天，于第5天和第10天取样，按稳定性重点考察项目进行检测，结果与0天比较。

[0095] 影响因素试验结果如表1所示。

[0096] 表1：

[0097]

[0098]

[0099] 结果表明：本发明制备得到的富马酸卢帕他定晶体化合物，其稳定性能良好，在高温、高湿、强光照条件下，均保持性能稳定。对本发明其它实施例制备的富马酸卢帕他定晶体化合物进行影响因素实验，得到了相同的实验结果。

[0100] 实验例2：加速实验

[0101] 取实施例1所得的富马酸卢帕他定晶体化合物的三个批次201、202、203，模拟上市包装，置密封洁净容器中，于42℃、80%RH条件下放置6个月，在试验期间分别于1、2、3、6个月末取样一次，对各稳定性重点考察项目进行检验。试验结果如表2所示。

[0102] 表2：

[0103]

[0104]

[0105] 结果表明：本发明制备得到的富马酸卢帕他定晶体化合物，经加速试验结果可知，其稳定性能良好。对本发明其它实施例制备的富马酸卢帕他定晶体化合物进行加速实验，得到了相同的实验结果。

[0106] 实验例3：长期试验

[0107] 取实施例1所得的富马酸卢帕他定晶体化合物的三个批次301、302、303，模拟上市包装，置密封洁净容器中，在温度20±2℃条件下放置18个月，在试验期间分别于第3、6、9、12、18个月末取样一次，对各检验项目进行检验。试验结果如表3所示：

[0108] 表3：

[0109]

[0110]

[0111] 结果表明：本发明制备得到的富马酸卢帕他定晶体化合物，经长期试验结果可知，其稳定性能良好，均保持性能稳定。对本发明其它实施例制备的富马酸卢帕他定晶体化合物进行长期实验，得到了相同的实验结果。

[0112] 实验例4：稳定性对比实验

[0113] 按照以下方法制备对比例：

[0114] 对比例1：采用《富马酸卢帕他定的合成》（陈建华，中国医药工业杂志，2007）中公开的方法制备富马酸卢帕他定；

[0115] 对比例2：采用专利200910035249.5实施例1中的方法制备富马酸卢帕他定；

[0116] 对比例3：采用专利申请201310250002.1实施例1中的方法制备富马酸卢帕他定；

[0117] 并将上述化合物，置密封洁净容器中，于42℃、80%RH条件下放置6个月，在试验期间分别于1、2、3、6个月末取样一次，对各稳定性重点考察项目进行检验。试验结果如表4所示。

[0118] 表4：

[0119]

[0120]

[0121] 结果表明：本发明制备得到的富马酸卢帕他定化合物，经对比试验结果可知，其稳定性能好于现有技术。

[0122] 实验例5

[0123] 1.药品与试剂

[0124] 受试制剂：对比例富马酸卢帕他定片（采用实验例4中对比例1中原料药，按照实施例3的配方和制备方法制备成片剂，规格：每片10mg）；实验例富马酸卢帕他定片（采用实施例1制备方法制备，按照实施例3的配方和制备方法制备成片剂，规格:每片10mg），内标为氯雷他定（含量:99.52%）；甲醇和乙腈为色谱纯；其它试剂均为分析纯。

[0125] 1.2仪器：

[0126] Quattro Micro API-三重四级杆质谱仪，配有电喷雾离子源（ESI源），美国Waters公司产品；Waters2695型液相色谱系统：四元梯度泵、在线脱气机、自动进样器、柱温箱，美国Waters公司产品；数据系统：MassLynx4.1软件，美国Waters公司产品；AB-265S型精密天平，日本梅特勒公司产品；漩涡混合器，上海沪西分析仪器厂产品；Multi Reax自动震荡器，德国Heidolph仪器公司产品。

[0127] 1.3受试者选择

[0128] 试验方案通过医学伦理委员会批准，志愿者均进行常规体检和实验室检查（尿常规、血常规、肝肾功能、心电图和输血四项等）。共筛选了43位男性健康志愿者，40位入选，年龄为（21.8±1.9）岁，体重为（63.1±5.5）kg，身高为（173.8）cm，BMI为（21.7±1.4）kg/2
m，无烟酒嗜好。受试者试验前经体格检查和实验室检查均符合要求，且无药物过敏史、药物依赖史、精神病史及其它慢性病史。两周内未服任何药物。受试者试验前均签署知情同意书。1.4给药方案与血样采集

[0129] 采用开放、随机、两周期交叉空腹给药，将20名受试者随机分为两组，每组20例，先后口服对比例富马酸卢帕他定片和与实验组富马酸卢帕他定片。受试者于前一天晚入住病房，在禁食12h后，于试验日早上8点口服受试制剂或参比制剂各10mg，2h后给予统一标准早餐，早餐后方可适量饮水，受试期间统一清淡饮食。分别于给药前（0h）和给药后0.25、0.5、0.75、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0、12.0、24.0h从肘静脉取5mL血置于抗凝管中，离心分离血浆后，置于-20℃保存，待测。两个周期间洗脱期为7d。

[0130] 1.5样本测定方法

[0131] 1.5.1色谱条件

[0132] 分析柱:SunFire C18柱（5μm，2.1mm×150mm，XPerra）；预柱：保护柱；C18（4mm×2.0mm Phenomenex，Torrance，CA，USA）；流动相：乙腈20mmol/L甲酸铵水溶液（80：20，V/V）；流速：0.3mL/min；进样量：10L；柱温：30℃。

[0133] 1.5.2质谱条件

[0134] 离子源：ESI+；离子扫描方式：MRM；鞘气：氮气；用于定量分析的离子反应分别是m/z416.5——309.3（卢帕他定）和m/z383.3—337.2（氯雷他定）；采集时间：300ms；碰撞能分别为18-eV（卢帕他定）和25-eV（氯雷他定）；Cone电压：40V；毛细管电压：3.0kV；源温度：100℃；去溶剂气体温度：350℃;锥孔气体流速：60L/h；去溶剂气体流速：450L/h；MuLtiplier：700V；LM1和LM2分辨率均为11；离子能1电压：3.0V；离子能2电压：3.0V；
-3
碰撞气压：9.21×10 mbar。

[0135] 1.5.3卢帕他定对照品工作溶液的配制精密称取富马酸卢帕他定对照品适量，置于10mL容量瓶，加适量甲醇溶解后，用50%的甲醇稀释至刻度，摇匀，即得浓度1003mg/L的富马酸卢帕他定对照品储备液。然后用50%的甲醇将其依次稀释成相当于含卢帕他定浓度分别为125、100、50、25、10、5.0、2.5、1.0、0.5μg/L的系列工作溶液,用于建立标准曲线。1.5.4血浆样品处理

[0136] 取200L血浆置2mLEp管中，加入50L内标(20g/L的氯雷他定工作液）和50L0.1mol/L的氢氧化钠溶液，混匀，再加入1mL萃取剂（乙酸乙酯：二氯甲烷=4：1，V/V），涡漩3min，13000r/min离心10min，取上清液置另一2mLEp管中，40℃水浴N2吹干，残渣用
150μL流动相溶解，10μL进样分析。

[0137] 1.6.2标准曲线制备与线性范围

[0138] 于空白血浆中，加入适量富马酸卢帕他定的系列工作液,分别配制成含卢帕他定为12.5、10.0、5.0、2.5、1.0、0.5、0.25、0.1、0.05g/L的标准系列；按血浆样品处理项操作，用LC-ESI-MS/MS内标法测定血药浓度，以卢帕他定与内标的峰面积比对药物浓度进行线性回归，计算标准曲线。计算结果为：

[0139] Y（A/AIS）=0.118692×X Conc.（μg/L）+0.00211934（r=0.9981，n=9），线性范围为0.05～12.5μg/L，定量下限浓度为0.05μg/L。

[0140] 2.1平均血药浓度-时间曲线本试验共入选40名受试者，试验期间无人退出，40人全部完成了研究。20名健康受试者交叉给与实验例和对比例药物后的血药浓度-时间曲线见图2。

[0141] 由图2可以看出，本发明制备得到的富马酸卢帕他定片的最大血药浓度Cmax大于对比药物，并且血药浓度曲线下面积AUC值大于对比药物。说明本发明制备的富马酸卢帕他定化合物的生物利用度高于现有技术。