一种宫颈细胞保存液及宫颈细胞标本的制片方法

摘要

本发明公开了一种宫颈细胞保存液及宫颈细胞标本的制片方法，宫颈细胞保存液包括下列组分：N-乙酰-3-巯基丙氨酸、无水酒精、氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、冰醋酸、浓盐酸和蒸馏水；制作宫颈细胞标本的方法，包括将取出的宫颈细胞浸泡于如上所述的宫颈细胞保存液的收集管中，振荡均匀后加入涂片装置中，将涂片装置置于离心机中离心，取出带有均匀薄层细胞涂片的载玻片；将得到的带有细胞涂片的载玻片使用固定液固定、染色、脱水和透明，最后封片得到用于诊断的标本涂片。本发明的宫颈细胞保存液和宫颈细胞标本的制作方法可靠实用、成本低效果好，适宜大规模推广。

权利要求

1.一种宫颈细胞标本的制作方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一，将取出的宫颈细胞浸泡于盛有宫颈细胞保存液的收集管中；

步骤二，将步骤一中装有宫颈细胞的收集管振荡10～20min，取出5～10mL溶解后的宫颈细胞标本混合液加入涂片装置中；

步骤三，将步骤二中的所述涂片装置置于离心机中，2500～3000rpm离心3～5min，取出带有均匀薄层细胞涂片的载玻片；

步骤四，将步骤三得到的带有细胞涂片的载玻片使用固定液固定后，进行苏木素-伊红或巴氏染色，然后用无水酒精脱水，再使用二甲苯透明，最后用中性树胶封片得到所需要的用于诊断的标本涂片；

其中，所述宫颈细胞保存液包括下列组分：

N-乙酰-3-巯基丙氨酸，其含量按质量百分比计为0.11％；

无水酒精，其含量按体积百分比计为49.38％；

氯化钠，其含量按质量百分比计为0.420％；

磷酸氢二钠，其含量按质量百分比计为0.173％；

磷酸二氢钠，其含量按质量百分比计为0.012％；

冰醋酸，其含量为按体积百分比计为0.59％；

浓盐酸，其含量为按体积百分比计为0.062％；

蒸馏水，其含量为按体积百分比补足100％；

所述涂片装置包括第一壳体和位于所述第一壳体内的第二壳体，所述第二壳体的内侧壁上设置有第一对弹性部件和第二对弹性部件，所述第一对弹性部件和所述第二对弹性部件与所述第二壳体的内侧壁限定出一凹槽，所述凹槽将所述第二壳体的内部空间分隔为第一腔室和第二腔室，所述第二对弹性部件的前端和后端均设置有吸水垫，所述第一壳体和所述第二壳体上开设有相对应的第一插口和加样孔，先将载玻片从所述第一插口处插入并限制在所述凹槽中，再从所述加样孔加入所述步骤一中的所述5～10mL溶解后的宫颈细胞标本混合液通入所述第二腔室中，并且，所述第一壳体的内部顶端还设置有依次连接的微控制器、微型驱动机构和微型气缸，所述微型气缸的活塞端与一推片支撑板的一端枢接，所述推片支撑板通过开设在所述第二壳体上的第二插口沿所述第二壳体的纵向伸缩；

所述步骤三离心过程中，所述载玻片在离心力的作用下离开所述凹槽进入所述第一腔室中，所述推片支撑板延伸进所述第一腔室并作用于所述载玻片上。

2.如权利要求1所述的宫颈细胞标本的制作方法，其特征在于，将步骤一中装有宫颈细胞的收集管振荡15min，取出6mL溶解后的宫颈细胞标本混合液置于所述涂片装置中。

3.如权利要求1所述的宫颈细胞标本的制作方法，其特征在于，所述步骤四中使用的所述固定液由冰醋酸和质量体积浓度95％的酒精组成，所述冰醋酸与所述95％酒精的体积比为1：100。

4.如权利要求1所述的宫颈细胞标本的制作方法，其特征在于，所述微控制器的开关设置在所述第一壳体的外部，所述微控制器的开关还设置有延时装置，所述延时装置用于所述开关打开后，延迟3～5min再启动所述微型气缸。

5.如权利要求1所述的宫颈细胞标本的制作方法，其特征在于，所述第一壳体的内壁上设置有至少一道滑槽，所述第二壳体的外壁设置有至少一道突起，所述突起位于所述滑槽内。

6.如权利要求1所述的宫颈细胞标本的制作方法，其特征在于，所述第二插口的纵向中心线与所述第一插口的纵向中心线有一夹角α，30°≤α≤45°。

说明书

一种宫颈细胞保存液及宫颈细胞标本的制片方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种宫颈细胞保存液及宫颈细胞标本的制片方法。

背景技术

[0002] 宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，因此对宫颈癌的筛查一直受到人们的普遍关注。传统的巴氏直接涂片法为早期筛查宫颈癌的主要方法，已应用50余年，然而，传统的巴氏直接涂片法存在以下缺点：样本采集采用棉签或软木片，易污染运送人员和工具；采用直接涂片所收集的细胞只有20％涂在了玻片上，细胞诊断性成份过少；制片质量差，涂片厚薄不均，细胞重叠严重，检查者阅片时易于疲劳；涂片时用力过猛使细胞变形；容易干片，造成细胞破裂，难以诊断；丢弃采样器，约有80％的细胞样本被留在取样器上被丢掉，可能被发现的异常细胞也被丢掉；细胞标本无法保存，不能再制片；有大量的粘液、红细胞和白细胞覆盖在涂片上，导致涂片背景不清晰和染色不佳，不利于诊断，使检出率受到一定影响。针对传统巴氏直接涂片法存在的问题，细胞学专家近年来又推出了一种新的细胞学制片技术，即液基细胞学制片技术。它是一种崭新的宫颈癌检查技术，该技术有别于传统巴氏直接涂片法，在制片之前需要将宫颈细胞样本放在“宫颈细胞保存液”中，以防细胞变性并对样本进行前期处理，然后，采用先进的液基薄层细胞制片系统(如：细胞离心涂片机或膜式超薄细胞制片机)进行制片，它使制片质量和诊断检出率显著提高。液基细胞学制片技术目前已逐步取代传统巴氏直接涂片法。但该技术所用的“宫颈细胞保存液”现多从国外引进，价格非常昂贵，来源不便，无法普及，不能作为广泛宫颈癌筛查用。该技术中的细胞离心涂片机或膜式超薄细胞制片机也是价格非常昂贵，一些中小型医院负担不起。

发明内容

[0003] 本发明的研究人员根据宫颈组织的结构特点，经大量实验，研制出了一种新型的国产宫颈细胞保存液，新型国产宫颈细胞保存液使用常见药物组分，成本低且效果良好，同时，本发明也提供一种使用该宫颈细胞保存液制作标本的方法，方法中提供一种涂片装置，使用所述涂片装置可以使用普通离心机完成制片。

[0004] 本发明提供的技术方案为：

[0005] 一种宫颈细胞保存液，所述宫颈细胞保存液包括下列组分：

[0006] N-乙酰-3-巯基丙氨酸，其含量按质量百分比计为0.05％～0.15％；

[0007] 无水酒精，其含量按体积百分比计为45％～55％；

[0008] 氯化钠，其含量按质量百分比计为0.3％～0.5％；

[0009] 磷酸氢二钠，其含量按质量百分比计为0.1％～0.2％；

[0010] 磷酸二氢钠，其含量按质量百分比计为0.007％～0.014％；

[0011] 冰醋酸，其含量为按体积百分比计为0.4％～0.8％；

[0012] 浓盐酸，其含量为按体积百分比计为0.04％～0.08％；

[0013] 蒸馏水，其含量为按体积百分比补足100％。

[0014] 优选的是，所述宫颈细胞保存液包括下列组分：

[0015] N-乙酰-3-巯基丙氨酸，其含量按质量百分比计为0.11％；

[0016] 无水酒精，其含量按体积百分比计为49.38％；

[0017] 氯化钠，其含量按质量百分比计为0.420％；

[0018] 磷酸氢二钠，其含量按质量百分比计为0.173％；

[0019] 磷酸二氢钠，其含量按质量百分比计为0.012％；

[0020] 冰醋酸，其含量为按体积百分比计为0.59％；

[0021] 浓盐酸，其含量为按体积百分比计为0.062％；

[0022] 蒸馏水，其含量为按体积百分比补足100％。

[0023] 一种宫颈细胞标本的制作方法，包括如下步骤：

[0024] 步骤一，将取出的宫颈细胞浸泡于盛有所述的宫颈细胞保存液的收集管中；

[0025] 步骤二，将步骤一中装有宫颈细胞的收集管振荡10～20min，取出5～10mL溶解后的宫颈细胞标本混合液加入涂片装置中；

[0026] 步骤三，将步骤二中的所述涂片装置置于离心机中，2500～3000rpm离心3～5min，取出带有均匀薄层细胞涂片的载玻片；

[0027] 步骤四，将步骤三得到的带有细胞涂片的载玻片使用固定液固定后，行苏木素-伊红或巴氏染色，然后用无水酒精脱水，再使用二甲苯透明，最后用中性树胶封片得到所需要的用于诊断的标本涂片。

[0028] 优选的是，所述的宫颈细胞标本的制作方法中，所述涂片装置包括第一壳体和位于所述第一壳体内的第二壳体，所述第二壳体的内侧壁上设置有第一对弹性部件和第二对弹性部件，所述第一对弹性部件和所述第二对弹性部件与所述第二壳体的内侧壁限定出一凹槽，所述凹槽将所述第二壳体的内部空间分隔为第一腔室和第二腔室，所述第二对弹性部件的前端和后端均设置有吸水垫，所述第一壳体和所述第二壳体上开设有相对应的第一插口和加样孔，

[0029] 先将载玻片从所述第一插口处插入并限制在所述凹槽中，再从所述加样孔加入所述步骤一中的所述5～10mL溶解后的宫颈细胞标本混合液通入所述第二腔室中，[0030] 并且，所述第一壳体的内部顶端还设置有依次连接的微控制器、微型驱动机构和微型气缸，所述微型气缸的活塞端与一推片支撑板的一端枢接，所述推片支撑板通过开设在所述第二壳体上的第二插口沿所述第二壳体的纵向伸缩；

[0031] 所述步骤三离心过程中，所述载玻片在离心力的作用下离开所述凹槽进入所述第一腔室中，所述推片支撑板延伸进所述第一腔室并作用于所述载玻片上。

[0032] 优选的是，所述的宫颈细胞标本的制作方法中，将取出的宫颈细胞浸泡于盛有权利要求2所述的宫颈细胞保存液的收集管中。

[0033] 优选的是，所述的宫颈细胞标本的制作方法中，将步骤一中装有宫颈细胞的收集管振荡15min，取出6mL溶解后的宫颈细胞标本混合液置于所述涂片装置中。

[0034] 优选的是，所述的宫颈细胞标本的制作方法中，所述步骤四中使用的所述固定液由冰醋酸和质量体积浓度95％的酒精组成，所述冰醋酸与所述95％酒精的体积比为1∶100。

[0035] 优选的是，所述的宫颈细胞标本的制作方法中，所述微控制器的开关设置在所述第一壳体的外部，所述微控制器的开关还设置有延时装置，所述延时装置用于所述开关打开后，延迟3～5min再启动所述微型气缸。

[0036] 优选的是，所述的宫颈细胞标本的制作方法中，所述第一壳体的内壁上设置有至少一道滑槽，所述第二壳体的外壁设置有至少一道突起，所述突起位于所述滑槽内。

[0037] 优选的是，所述的宫颈细胞标本的制作方法中，所述第二插口的纵向中心线与所述第一插口的纵向中心线有一夹角α，30°≤α≤45°。

[0038] 本发明的有益效果为：

[0039] 本发明宫颈细胞保存液中的N-乙酰-3-巯基丙氨酸能有效地分解粘液，N-乙酰-3-巯基丙氨酸分解粘液的效率能达到90％以上，使制片时背景清晰透亮；冰醋酸和浓盐酸主要用于去除红细胞、同时也和无水酒精一起减少了炎症细胞的影响，无水酒精主要作为固定剂，另加入缓冲剂磷酸氢二钠和磷酸二氢钠作为缓冲剂，氯化钠调节离子强度，经本发明宫颈细胞保存液处理的标本，几乎100％保存了细胞的形态结构和数量，常温下可保存3周，可重复制片且制片效果好；细胞形态完整、结构清晰、集中均匀分布，染色鲜艳，细胞不易重叠，观察省时省力，不易漏诊；并且涂片背景清晰干净，为宫颈细胞普查提供了高质量的细胞涂片，从而大大提高了宫颈癌的诊断，可提高宫颈癌10％的检出率；

[0040] 本发明的宫颈细胞保存液在室温下5分钟内彻底杀灭所有病菌及微生物的活性，确保了操作人员的健康；

[0041] 本发明的宫颈细胞保存液中原料组分价格非常便宜，所用试剂易于购买，制片快捷方便，易于普及推广；

[0042] 本发明中的涂片装置的第一壳体和第二壳体可拆卸，可将第二壳体拆卸清洗灭菌，重复使用；

[0043] 本发明中将载玻片限制在弹性部件组成的凹槽中，在不离心的状态下，载玻片处在所述凹槽中，当离心时，由于离心力的作用，弹性部件发生形变载玻片也受到离心力而滑入第二腔室内并贴在第二壳体的内壁上，这样吸水垫露出将带有细胞的宫颈细胞保存液的水分和杂质吸走，而细胞留在载玻片上完成制片，涂片装置设计新颖实用，且本涂片装置可在医院没有液基薄层细胞制片系统的装置下(如：细胞离心涂片机或膜式超薄细胞制片机)完成制片，提供医护人员的工作效率；

[0044] 本发明提供的宫颈细胞保存液和宫颈细胞标本的制作方法可靠实用、成本低效果好，适用于大规模推广。

附图说明

[0045] 图1为本发明所述的宫颈细胞标本的制作方法的流程图；

[0046] 图2为本发明所述的传统巴氏直接涂片法制作的宫颈细胞涂片的显微照片之一；

[0047] 图3为本发明所述的传统巴氏直接涂片法制作的宫颈细胞涂片的显微照片之二；

[0048] 图4为采用本发明所述的宫颈细胞标本的制作方法制作的宫颈细胞涂片的显微照片之一；

[0049] 图5为采用本发明所述的宫颈细胞标本的制作方法制作的宫颈细胞涂片的显微照片之二；

[0050] 图6为本发明所述的涂片装置的结构示意图。

具体实施方式

[0051] 下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

[0052] 实施例一：

[0053] 1材料与方法

[0054] 1.1样本来源：选取2012年1月～2013年1月北京军区总医院门诊就诊行宫颈癌筛查的妇科标本共1450例，分别进行传统巴氏直接涂片和液基细胞学制片，比较二种制片方法的阳性病变检出率及制片质量。

[0055] 1.2宫颈细胞保存液的配制

[0056] 分别称取N-乙酰-3-巯基丙氨酸9g，氯化钠34g，磷酸氢二钠14g，磷酸二氢钠1g，量取无水酒精4000mL，冰醋酸48mL，浓盐酸5mL，蒸馏水4000M1，溶解后使用。

[0057] 1.3仪器震荡仪、离心机和涂片装置。

[0058] 1.4样本采集与制片方法

[0059] 1.41传统巴氏直接涂片方法：暴露宫颈，将宫颈刮板插入子宫颈管内，用刮板轻刮，取出后均匀的涂于载玻片上，95％酒精固定0.5h，行巴氏染色，使用酒精脱水，然后用二甲苯透明，最后用树胶封片后镜下阅片。

[0060] 1.4.2宫颈细胞保存液的液基细胞学制片方法

[0061] 如图1所示，依照如下步骤制作标本：

[0062] 步骤一，妇科医生在阴道扩张器直视下，用棉签拭去宫颈和阴道表面的分泌物，然后用宫颈刷沿子宫颈外口插入子宫颈管内，顺时针旋转3圈，取出宫颈刷后，将刷头浸泡于盛有宫颈细胞保存液的收集管中，旋紧管盖后贴上标签，和对应的申请单一起送往病理科检查；

[0063] 步骤二，病理科将装有所述收集管在振荡器上充分振荡15min，对宫颈细胞标本进行固定及消化等处理，取出6mL溶解好的宫颈细胞标本混合液从涂片装置的加样孔8加入第二腔室6内，

[0064] 如图6所示，所述涂片装置包括第一壳体1和位于所述第一壳体1内的第二壳体2，所述第二壳体2的内侧壁上设置有第一对弹性部件3和第二对弹性部件4，所述第一对弹性部件3和所述第二对弹性部件4与所述第二壳体2的内侧壁限定出一凹槽，所述凹槽将所述第二壳体的内部空间分隔为第一腔室5和第二腔室6，所述第二对弹性部件4的前端和后端均设置有吸水垫7，所述第一壳体1和所述第二壳体2上开设有相对应的第一插口9和所述加样孔8，

[0065] 先将载玻片从所述第一插口9处插入并限制在所述凹槽中，再从所述加样孔8加入所述6mL溶解后的宫颈细胞标本混合液通入所述第二腔室6中，

[0066] 并且，所述第一壳体1的内部还设置有依次连接的微控制器、微型驱动机构和微型气缸，所述微型气缸的活塞端与一推片支撑板的一端枢接，所述推片支撑板通过开设在所述第二壳体2上的第二插口10沿所述第二壳体2的纵向伸缩；所述第二插口的纵向中心线与所述第一插口的纵向中心线有一30°的夹角α

[0067] 步骤三，将步骤二中的所述涂片装置置于离心机中并打开所述开关，2800rpm离心4min，取出带有均匀薄层细胞涂片的载玻片；离心过程中，弹性部件发生形变，所述载玻片在离心力的作用下离开所述凹槽进入所述第一腔室5中，所述推片支撑板延伸进所述第一腔室5并将推片放出作用于所述载玻片上；所述微控制器的开关设置在所述第一壳体1的外部，所述微控制器的开关还设置有延时装置，所述延时装置用于所述开关打开后，延迟4min再启动所述推片支撑板，延迟的时间为等待载玻片进入到所述第一腔室5内的时间。

[0068] 步骤四，将步骤三得到的带有细胞涂片的载玻片使用固定液固定后，行苏木素-伊红或巴氏染色，然后用无水酒精脱水，再使用二甲苯透明，最后用中性树胶封片得到所需要的用于诊断的标本涂片。

[0069] 所述步骤四中使用的所述固定液由冰醋酸和质量体积浓度95％的酒精组成，所述冰醋酸与所述95％酒精的体积比为1∶100。

[0070] 所述的宫颈细胞标本的制作方法中，所述第一壳体1的内壁上设置有至少一道滑槽，所述第二壳体2的外壁设置有至少一道凸起，所述凸起位于所述滑槽内。

[0071] 1.5细胞学诊断：采用TBS(the bethesda system)分级系统。即正常范围(WNL)、意义不明的不典型鳞状细胞(ASCUS)、鳞状上皮内病变(SIL)和鳞状细胞癌(SCC)。SIL包括鳞状上皮内低度病变(LSIL)和鳞状上皮内高度病变(HSIL)。腺上皮不正常为意义不明的不典型腺细胞(AGUS)和腺癌。

[0072] 2结果

[0073] 2.1宫颈细胞保存液的制片方法与传统巴氏直接涂片方法的阳性检出率结果比较[0074] 1450例妇科细胞学标本经宫颈细胞保存液处理后，制作的液基薄层涂片共检出异常者585例(包括HSIL 121例，LSIL 109例，ASCUS 171例，AGUS118例，SCC 66例)，检出率为40.3％(585/1450)。而传统巴氏直接涂片法在1450例妇科标本中共检出异常者451例(包括HSIL 99例，LSIL 97例，ASCUS 150例，AGUS 80例，SCC 25例)，检出率为31.1％(451/1450)。宫颈细胞保存液的液基细胞学制片法的检出率高于巴氏直接涂片法。

[0075] 2.2宫颈细胞保存液的制片方法与传统巴氏直接涂片方法的制片质量比较[0076] 如图2和图3所示，传统巴氏直接涂片中粘液丝较多，背景污秽，细胞结构显示不清晰，涂片厚薄不均，细胞易重叠，细胞需仔细寻找辨认，而如图4和图5所示，经宫颈细胞保存液处理后制作的液基细胞学涂片，镜下粘液丝溶解，背景较干净，细胞结构显示清晰，细胞数量明显增多，细胞分布薄层均匀分布，无重叠，容易辨认，阳性细胞不易漏诊[0077] 实施例二：

[0078] 本实施例二中宫颈细胞保存液的配制：

[0079] 分别称取N-乙酰-3-巯基丙氨酸5g，氯化钠30g，磷酸氢二钠10g和磷酸二氢钠0.7g溶于少量水中，再量取无水酒精4500mL，冰醋酸40mL和浓盐酸4mL，最后定容至10000mL备用。

[0080] 使用上述配方的宫颈细胞保存液依照如下的方法制作宫颈细胞标本：

[0081] 步骤一，妇科医生在阴道扩张器直视下，用棉签拭去宫颈和阴道表面的分泌物，然后用宫颈刷沿子宫颈外口插入子宫颈管内，顺时针旋转3圈，取出宫颈刷后，将刷头浸泡于盛有宫颈细胞保存液的收集管中，旋紧管盖后贴上标签，和对应的申请单一起送往病理科检查；

[0082] 步骤二，病理科将装有所述收集管在振荡器上充分振荡10min，对宫颈细胞标本进行固定及消化等处理，取出5mL溶解好的宫颈细胞标本混合液从涂片装置的加样孔8加入第二腔室6内，

[0083] 如图6所示，所述涂片装置包括第一壳体1和位于所述第一壳体1内的第二壳体2，所述第二壳体2的内侧壁上设置有第一对弹性部件3和第二对弹性部件4，所述第一对弹性部件3和所述第二对弹性部件4与所述第二壳体2的内侧壁限定出一凹槽，所述凹槽将所述第二壳体的内部空间分隔为第一腔室5和第二腔室6，所述第二对弹性部件4的前端和后端均设置有吸水垫7，所述第一壳体1和所述第二壳体2上开设有相对应的第一插口9和所述加样孔8，

[0084] 先将载玻片从所述第一插口9处插入并限制在所述凹槽中，再从所述加样孔8加入所述5mL溶解后的宫颈细胞标本混合液通入所述第二腔室6中，

[0085] 并且，所述第一壳体1的内部还设置有依次连接的微控制器、微型驱动机构和微型气缸，所述微型气缸的活塞端与一推片支撑板的一端枢接，所述推片支撑板通过开设在所述第二壳体2上的第二插口10沿所述第二壳体2的纵向伸缩；所述第二插口的纵向中心线与所述第一插口的纵向中心线有一45°的夹角α；

[0086] 步骤三，将步骤二中的所述涂片装置置于离心机中并打开所述开关，2500rpm离心5min，取出带有均匀薄层细胞涂片的载玻片；离心过程中，弹性部件发生形变，所述载玻片在离心力的作用下离开所述凹槽进入所述第一腔室5中，所述推片支撑板延伸进所述第一腔室5并将推片作用于所述载玻片上；所述微控制器的开关设置在所述第一壳体1的外部，所述微控制器的开关还设置有延时装置，所述延时装置用于所述开关打开后，延迟5min再启动所述推片支撑板，延迟的时间为等待载玻片进入到所述第一腔室5内的时间。

[0087] 步骤四，将步骤三得到的带有细胞涂片的载玻片使用固定液固定后，行苏木素-伊红或巴氏染色，然后用无水酒精脱水，再使用二甲苯透明，最后用中性树胶封片得到所需要的用于诊断的标本涂片。

[0088] 所述步骤四中使用的所述固定液由冰醋酸和质量体积浓度95％的酒精组成，所述冰醋酸与所述95％酒精的体积比为1∶100。

[0089] 依照本实施例二制作的宫颈细胞的标本制片清晰、杂质少、细胞数量多，易于观察，提高了8％的阳性检出率。

[0090] 实施例三：

[0091] 分别称取N-乙酰-3-巯基丙氨酸15g，氯化钠50g，磷酸氢二钠20g和磷酸二氢钠1.4g溶于少量水中，再量取无水酒精5500mL，冰醋酸80mL和浓盐酸8mL，最后定容至10000mL制成宫颈细胞保存液备用。

[0092] 使用上述配方的宫颈细胞保存液依照如下的方法制作宫颈细胞标本：

[0093] 步骤一，妇科医生在阴道扩张器直视下，用棉签拭去宫颈和阴道表面的分泌物，然后用宫颈刷沿子宫颈外口插入子宫颈管内，顺时针旋转5圈，取出宫颈刷后，将刷头浸泡于盛有宫颈细胞保存液的收集管中，旋紧管盖后贴上标签，和对应的申请单一起送往病理科检查；

[0094] 步骤二，病理科将装有所述收集管在振荡器上充分振荡20min，对宫颈细胞标本进行固定及消化等处理，取出10mL溶解好的宫颈细胞标本混合液从涂片装置的加样孔加入第二腔室内，

[0095] 如图6所示，所述涂片装置包括第一壳体1和位于所述第一壳体1内的第二壳体2，所述第二壳体2的内侧壁上设置有第一对弹性部件3和第二对弹性部件4，所述第一对弹性部件3和所述第二对弹性部件4与所述第二壳体2的内侧壁限定出一凹槽，所述凹槽将所述第二壳体的内部空间分隔为第一腔室5和第二腔室6，所述第二对弹性部件4的前端和后端均设置有吸水垫7，所述第一壳体1和所述第二壳体2上开设有相对应的第一插口9和所述加样孔8，

[0096] 先将载玻片从所述第一插口9处插入并限制在所述凹槽中，再从所述加样孔8加入所述10mL溶解后的宫颈细胞标本混合液通入所述第二腔室6中，

[0097] 并且，所述第一壳体1的内部还设置有依次连接的微控制器、微型驱动机构和微型气缸，所述微型气缸的活塞端与一推片支撑板的一端枢接，所述推片支撑板通过开设在所述第二壳体2上的第二插口10沿所述第二壳体2的纵向伸缩；

[0098] 步骤三，将步骤二中的所述涂片装置置于离心机中并打开所述开关，3500rpm离心3min，取出带有均匀薄层细胞涂片的载玻片；离心过程中，弹性部件发生形变，所述载玻片在离心力的作用下离开所述凹槽进入所述第一腔室5中，所述推片支撑板延伸进所述第一腔室5并将推片作用于所述载玻片上；所述微控制器的开关设置在所述第一壳体1的外部，所述微控制器的开关还设置有延时装置，所述延时装置用于所述开关打开后，延迟3min再启动所述推片支撑板，延迟的时间为等待载玻片进入到所述第一腔室5内的时间。

[0099] 步骤四，将步骤三得到的带有细胞涂片的载玻片使用固定液固定后，行苏木素-伊红或巴氏染色，然后用无水酒精脱水，再使用二甲苯透明，最后用中性树胶封片得到所需要的用于诊断的标本涂片。

[0100] 所述步骤四中使用的所述固定液由冰醋酸和质量体积浓度95％的酒精组成，所述冰醋酸与所述95％酒精的体积比为1∶100。

[0101] 依照本实施例三制作的宫颈细胞的标本制片清晰、杂质少、细胞数量多，易于观察，提高了9％的阳性检出率。

[0102] 经过本发明研究人员进行了大量的临床实际应用证实，本发明的宫颈细胞保存液效果理想，涂片装置使用方便快捷，均适用于液基学细胞制片。本发明的宫颈细胞保存液除用于宫颈细胞样本的保存和处理外，还适用于各种临床样本的保存和处理，如：尿液、胸腹水、乳头溢液、脑脊液、渗出液、灌洗液、穿刺液细胞的保存等。制片后剩余的标本可进一步直接做免疫组化及分子生物学检测(如HPV-DNA、衣原体、淋病、PCR检测)，这种一个样本两个测试报告的方法极大地方便了对患者病情的掌握。

[0103] 尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和描述的实施例。