一种检测盐酸决奈达隆的方法

摘要

本发明提供了一种检测N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的方法，对N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐进行高效液相色谱检测，在本发明提供的高效液相色谱条件下，N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐能够较好地与共存的杂质分离，而且各杂质间也能够较好地分离，本发明提供的方法还具有较高的灵敏度，因此，本发明提供的方法实现了对N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐较准确地测定。

权利要求

1.一种检测N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的方法，包括以下步骤：对待测样品进行高效液相色谱检测，得到待测样品的高效液相色谱图；

根据所述高效液相色谱图和预先获得的标准曲线，得到待测样品中N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的含量；

所述高效液相色谱检测中的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；

所述高效液相色谱检测中的流动相为甲醇、乙腈和磷酸盐缓冲液的混合物；

所述高效液相色谱检测中的柱温不高于40℃；

所述高效液相色谱检测中待测溶液的流速为1.3mL/min～1.7mL/min；

所述高效液相色谱检测中磷酸盐缓冲液的pH值为7.0～8.0；

所述高效液相色谱检测的检测波长为210mm～230nm；

所述磷酸盐缓冲溶液中磷酸二氢钾的摩尔浓度为(0.0005～0.005)mol/L；

所述流动相中甲醇的体积分数不大于32％；

所述流动相中乙腈的体积分数不大于50％。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相中磷酸盐缓冲溶液为磷酸二氢钾和碱性化合物的混合溶液。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述柱温为35℃～40℃。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述pH值为7.5。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述进行高效液相色谱检测前还包括以下步骤：将待测样品用流动相溶解，得到待测溶液。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述标准曲线按照以下方法获得：将N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐标准品配制成系列浓度标准溶液；

将所述系列浓度的标准溶液进行高效液相色谱检测，分别得到系列浓度标准溶液的高效液相色谱图；

根据得到的高效液相色谱图得到标准品峰的峰面积；

根据所述峰面积和标准溶液的浓度，得到标准曲线。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括以下步骤：将待测样品进行显氯化物鉴别和紫外光谱鉴别，得到待测样品中含有盐酸决奈达隆的鉴别结果。

说明书

一种检测盐酸决奈达隆的方法

技术领域

[0001] 本发明涉及药品监测技术领域，尤其涉及一种检测N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的方法。

背景技术

[0002] 盐酸决奈达隆（Dronedarone hydrochloride），其为N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的通用名，为抗心律失常药物。该药与胺碘酮具有类似的电生理作用，但它不含碘，故不会引起与碘相关的不良反应，为胺碘酮的替代更新药物。本品适用于心房颤动和心房扑动患者的心率控制、维持窦性心律和减慢室性心律，临床主要用于治疗心率失常。

[0003] 心房纤颤是一种有着潜在生命威胁的疾病，由于人口老龄化，全球心房纤颤发病率不断走高，并成为新的公共卫生难题。美国的心房纤颤患者人数达250万人，欧盟的患者人数达450万人。Multaq（决奈达隆）是赛诺菲-安万特用了20年时间研发成功的。研究表明，作为一种抗心律失常药物，它适用于患有阵发性或持续性房颤或房扑或者；有房颤或房扑病史并合并心血管危险因素的患者，无论当前为窦性心律或即将实施心脏复律，均能有效降低因心血管事件住院的风险。相关研究结果发表在2008年和2009年的《新英格兰医学杂志》上。

[0004] 由于盐酸决奈达隆具有较好的治疗心房颤动和/或心房扑动的疗效，现有技术致力于其合成方法的研究，关于盐酸决奈达隆的合成报道较多，如李素义等（李素义,钟启星,陈国华,李楠.盐酸决奈达隆的合成,中国医学工业杂志,2011,42(3):161～164.）以硝基苯酚为原料，经多聚甲醛/盐酸进行氯甲基化得到2-羟基-5-硝基氯苄，2-羟基-5-硝基氯苄与三苯膦反应得到2-羟基-5-硝基苄基三苯基氯化鏻，2-羟基-5-硝基苄基三苯基氯化鏻与正戊酰氯发生酯化反应、Wittig反应得到2-正丁基-5-硝基苯并呋喃，2-正丁基-5-硝基苯并呋喃经三氯化铝脱甲基得到2-正丁基-5硝基-3-(4-羟基苯甲酰基)苯并呋喃，2-正丁基-5硝基-3-(4-羟基苯甲酰基)苯并呋喃与N-(3-氯丙基)二正丁胺反应得到2-正丁基-3-[4-(3-二正丁胺基丙氧基)苯甲酰基]-5-硝基苯并呋喃，2-正丁基-3-[4-(3-二正丁胺基丙氧基)苯甲酰基]-5-硝基苯并呋喃经催化氢化得到5-氨基-2-正丁基-3-[4-(二正丁胺基丙氧基)苯甲酰基]苯并呋喃，5-氨基-2-正丁基-3-[4-(二正丁胺基丙氧基)苯甲酰基]苯并呋喃经甲磺酰化得到决奈达隆，在成盐酸盐得到盐酸决奈达隆。何晓清等（何晓清,吴泰志,张福利,谢美华.盐酸决奈达隆合成路线图解.中国医药工业杂志,2010,41(2):148～152.）综述了盐酸决奈达隆及其重要中间体4-(3-二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰氯盐酸盐、2-正丁基-5硝基苯并呋喃的合成路线。

[0005] 在这些合成方法中，原料中会带入去丙基杂质，随着后续反应的进行会产生杂质2-甲基-3-[4-(3-二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5-甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐；原料中带入去甲基杂质，随着后续反应的进行会产生杂质2-正丙基-3-[4-(3-二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5-甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐；合成过程中的甲磺酰化反应会产生副反应产物2-正丁基-3-[4-(3-二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5-二甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐；在合成的过程中，还会产生中间体5-氨基-3-[4-(3-二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-2-正丁基苯并呋喃二草酸盐，另外还会产生降解产物和未知杂质，这些物质的存在会对盐酸决奈达隆的品质产生影响，现有技术中对于盐酸决奈达隆的检测，得到的结果准确度不高，不利于生产和疾病的治疗。

发明内容

[0006] 本发明的目的在于提供一种N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的检测方法，本发明提供的方法能够将N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐与其他杂质分离，能够较好的反映出盐酸决奈达隆的品质。

[0007] 本发明提供了一种检测N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的方法，包括以下步骤：

[0008] 对待测样品进行高效液相色谱检测，得到待测样品的高效液相色谱图；

[0009] 根据所述高效液相色谱图和预先获得的标准曲线，得到待测样品中N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的含量；

[0010] 所述高效液相色谱检测中的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；

[0011] 所述高效液相色谱检测中的流动相为甲醇、乙腈和磷酸盐缓冲液的混合物；

[0012] 所述高效液相色谱检测中的柱温不高于40℃；

[0013] 所述高效液相色谱检测中待测溶液的流速为1.3mL/min～1.7mL/min；

[0014] 所述高效液相色谱检测中磷酸盐缓冲液的pH值为7.0～8.0；

[0015] 所述高效液相色谱检测的检测波长为210mm～230nm。

[0016] 优选的，所述流动相中磷酸盐缓冲溶液为磷酸二氢钾和碱性化合物的混合溶液。

[0017] 优选的，所述磷酸盐缓冲溶液中磷酸二氢钾的摩尔浓度为（0.0005～0.005）mol/L。

[0018] 优选的，所述流动相中甲醇的体积分数不大于32%。

[0019] 优选的，所述流动相中乙腈的体积分数不大于50%。

[0020] 优选的，所述柱温为35℃～40℃。

[0021] 优选的，所述pH值为7.5。

[0022] 优选的，所述进行高效液相色谱检测前还包括以下步骤：

[0023] 将待测样品用流动相溶解，得到待测溶液。

[0024] 优选的，所述标准曲线按照以下方法获得：

[0025] 将N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐标准品配制成系列浓度标准溶液；

[0026] 将所述系列浓度的标准溶液进行高效液相色谱检测，分别得到系列浓度标准溶液的高效液相色谱图；

[0027] 根据得到的高效液相色谱图得到标准品峰的峰面积；

[0028] 根据所述峰面积和标准溶液的浓度，得到标准曲线。

[0029] 优选的，所述将待测样品进行高效液相色谱检测前还包括以下步骤：

[0030] 将待测样品进行显氯化物鉴别和紫外光谱鉴别，得到待测样品中含有盐酸决奈达隆的鉴别结果。

[0031] 本发明提供了一种检测N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的方法，包括以下步骤：对待测样品进行高效液相色谱检测，得到待测样品的高效液相色谱图；根据所述高效液相色谱图和预先获得的标准曲线，得到待测样品中N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的含量；所述高效液相色谱检测中的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；所述高效液相色谱检测中的流动相为甲醇、乙腈和磷酸盐缓冲液的混合物；所述高效液相色谱检测中的柱温不高于40℃；所述高效液相色谱检测中待测溶液的流速为1.3mL/min～1.7mL/min；所述高效液相色谱检测中磷酸盐缓冲液的pH值为7.0～8.0，在上述检测条件下，得到N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的检测结果。本发明提供的方法能够将N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐与其他杂质分离，并且也能够较好的区分各杂质，在本发明提供的检测条件下，N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐与各杂质以及各杂质之间的分离均较好，出峰时间较为合适，而且本发明提供的方法具有较高的灵敏度，因此本发明提供的方法能够较好地实现对N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐品质的测定，而且有利于指导生产过程中对杂质的控制，得到高品质的N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐。
附图说明）

[0032] 图1为本发明实施例5得到的盐酸决奈达隆片的紫外光谱图；

[0033] 图2为本发明实施例6得到的盐酸决奈达隆片的紫外光谱图；

[0034] 图3为本发明实施例7得到的盐酸决奈达隆片的紫外光谱图；

[0035] 图4为本发明实施例8得到的盐酸决奈达隆片的紫外光谱图；

[0036] 图5为本发明实施例9得到的空白辅料的紫外光谱图；

[0037] 图6为本发明实施例10中流动相的液相色谱图；

[0038] 图7为本发明实施例11中空白溶液的液相色谱图；

[0039] 图8为本发明实施例12中待测溶液的液相色谱图；

[0040] 图9为本发明实施例13中待测溶液的液相色谱图；

[0041] 图10为本发明实施例14中待测溶液的液相色谱图；

[0042] 图11为本发明实施例15中待测溶液的液相色谱图；

[0043] 图12为本发明实施例16中待测溶液的液相色谱图；

[0044] 图13为本发明实施例17中待测溶液的液相色谱图；

[0045] 图14为本发明实施例18中待测溶液的液相色谱图

[0046] 图15为本发明实施例19中待测溶液的液相色谱图；

[0047] 图16为本发明实施例20中待测溶液的液相色谱图；

[0048] 图17为本发明实施例21中待测溶液的液相色谱图；

[0049] 图18为本发明实施例22中待测溶液的液相色谱图；

[0050] 图19为本发明实施例23得到的杂质D的液相色谱图；

[0051] 图20为本发明实施例23得到的杂质C的液相色谱图；

[0052] 图21为本发明实施例23得到的杂质A和杂质B的液相色谱图；

[0053] 图22为本发明实施例23得到的盐酸决奈达隆的液相色谱图；

[0054] 图23为本发明实施例24中柱温为35℃时待测溶液的液相色谱图；

[0055] 图24为本发明实施例24中柱温为45℃时待测溶液的液相色谱图；

[0056] 图25为本发明实施例25中流速为1.3mL/min时待测溶液的液相色谱图；

[0057] 图26为本发明实施例25中流速为1.7mL/min时待测溶液的液相色谱图；

[0058] 图27为本发明实施例26中流动相为体积比为32:52:16的甲醇-乙腈-缓冲盐溶液时待测溶液的液相色谱图；

[0059] 图28为本发明实施例26中流动相为体积比为32:48:20的甲醇-乙腈-缓冲盐溶液时待测溶液的液相色谱图；

[0060] 图29为本发明实施例27中流动相为体积比为30:50:20的甲醇-乙腈-缓冲盐溶液时待测溶液的液相色谱图；

[0061] 图30为本发明实施例27中流动相为体积比为34:50:16的甲醇-乙腈-缓冲盐溶液时待测溶液的液相色谱图；

[0062] 图31为本发明实施例28中流动相中缓冲溶液的pH为7.0时待测溶液的液相色谱图；

[0063] 图32为本发明实施例28中流动相中缓冲溶液的pH为8.0时待测溶液的液相色谱图；

[0064] 图33为本发明实施例24～28得到的流动相为体积比为32:50:18的甲醇-乙腈-pH值7.5磷酸盐缓冲盐溶液、柱温为40℃、流速为1.5mL/min时待测溶液的液相色谱图；

[0065] 图34为本发明实施例29得到的酸破坏的待测溶液的液相色谱图；

[0066] 图35为本发明实施例30得到的碱破坏的待测溶液的液相色谱图；

[0067] 图36为本发明实施例31得到的氧化破坏的待测溶液的液相色谱图；

[0068] 图37为本发明实施例32得到的高温破坏的待测溶液的液相色谱图；

[0069] 图38为本发明实施例33得到的强光破坏的待测溶液的液相色谱图；

[0070] 图39为本发明实施例34得到的未破坏的待测溶液的液相色谱图；

[0071] 图40为本发明实施例35辅料被酸破坏的待测溶液的液相色谱图；

[0072] 图41为本发明实施例36辅料被碱破坏的待测溶液的液相色谱图；

[0073] 图42为本发明实施例37辅料被氧化破坏的待测溶液的液相色谱图；

[0074] 图43为本发明实施例38辅料被高温破坏的待测溶液的液相色谱图；

[0075] 图44为本发明实施例39辅料被强光破坏的待测溶液的液相色谱图；

[0076] 图45为本发明实施例40辅料未破坏的待测溶液的液相色谱图；

[0077] 图46为本发明实施例41得到的静置时间为0h的对照溶液的液相色谱图；

[0078] 图47为本发明实施例41得到的静置时间为1h的对照溶液的液相色谱图；

[0079] 图48为本发明实施例41得到的静置时间为2h的对照溶液的液相色谱图；

[0080] 图49为本发明实施例41得到的静置时间为4h的对照溶液的液相色谱图；

[0081] 图50为本发明实施例41得到的静置时间为6h的对照溶液的液相色谱图；

[0082] 图51为本发明实施例41得到的静置时间为8h的对照溶液的液相色谱图；

[0083] 图52为本发明实施例41得到的静置时间为0h的待测溶液的液相色谱图；

[0084] 图53为本发明实施例41得到的静置时间为1h的待测溶液的液相色谱图；

[0085] 图54为本发明实施例41得到的静置时间为2h的待测溶液的液相色谱图；

[0086] 图55为本发明实施例41得到的静置时间为4h的待测溶液的液相色谱图；

[0087] 图56为本发明实施例41得到的静置时间为6h的待测溶液的液相色谱图；

[0088] 图57为本发明实施例41得到的静置时间为8h的待测溶液的液相色谱图；

[0089] 图58为本发明实施例42得到的第一份对照溶液的液相色谱图；

[0090] 图59为本发明实施例42得到的第二份对照溶液的液相色谱图；

[0091] 图60为本发明实施例42得到的第三份对照溶液的液相色谱图；

[0092] 图61为本发明实施例42得到的第四份对照溶液的液相色谱图；

[0093] 图62为本发明实施例42得到的第五份对照溶液的液相色谱图；

[0094] 图63为本发明实施例42得到的第六份对照溶液的液相色谱图；

[0095] 图64为本发明实施例42得到的第一份待测溶液的液相色谱图；

[0096] 图65为本发明实施例42得到的第二份待测溶液的液相色谱图；

[0097] 图66为本发明实施例42得到的第三份待测溶液的液相色谱图；

[0098] 图67为本发明实施例42得到的第四份待测溶液的液相色谱图；

[0099] 图68为本发明实施例42得到的第五份待测溶液的液相色谱图；

[0100] 图69为本发明实施例42得到的第六份待测溶液的液相色谱图；

[0101] 图70为本发明实施例43得到的对照溶液的液相色谱图；

[0102] 图71为本发明实施例44得到的对照溶液的液相色谱图；

[0103] 图72为本发明实施例45得到的对照溶液的液相色谱图；

[0104] 图73为本发明实施例46得到的对照溶液的液相色谱图；

[0105] 图74为本发明实施例43得到的待测溶液的液相色谱图；

[0106] 图75为本发明实施例44得到的待测溶液的液相色谱图；

[0107] 图76为本发明实施例45得到的待测溶液的液相色谱图；

[0108] 图77为本发明实施例46得到的待测溶液的液相色谱图；

[0109] 图78为本发明实施例61中空白辅料的液相色谱图；

[0110] 图79为本发明实施例61中待测溶液的液相色谱图；

[0111] 图80为本发明实施例63得到的不同溶出时间的待测溶液溶出度图；

[0112] 图81为本发明实施例63～67得到的待测溶液溶出度图；

[0113] 图82为本发明实施例68得到的盐酸决奈达隆的标准曲线。

具体实施方式

[0114] 本发明提供了一种检测N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的方法，包括以下步骤：

[0115] 对待测样品进行高效液相色谱检测，得到待测样品的高效液相色谱图；

[0116] 根据所述高效液相色谱图和预先获得的标准曲线，得到待测样品中N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的含量；

[0117] 所述高效液相色谱检测中的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；

[0118] 所述高效液相色谱检测中的流动相为甲醇、乙腈和磷酸盐缓冲液的混合物；

[0119] 所述高效液相色谱检测中的柱温不高于40℃；

[0120] 所述高效液相色谱检测中待测溶液的流速为1.3mL/min～1.7mL/min；

[0121] 所述高效液相色谱检测中磷酸盐缓冲液的pH值为7.0～8.0；

[0122] 所述高效液相色谱检测的检测波长为210mm～230nm。

[0123] 本发明提供了一种检测N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的方法，本发明提供的方法对N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐进行高效液相色谱检测，在本发明提供的高效液相色谱检测的条件下，N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐能够较好地与共存的杂质分离，而且各杂质之间也能够较好地分离，本发明提供的方法还具有较好的灵敏度，因此，本发明提供的方法能够实现对N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐准确地测定，有利于鉴定N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐商品的质量，也有利于指导生产，生产出高品质的N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐。

[0124] N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的通用名为盐酸决奈达隆，在以下描述中，N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐均采用盐酸决奈达隆代替。

[0125] 本发明对待测样品进行高效液相色谱检测，优选在进行高效液相色谱检测前先对待测样品进行定性测定，判定待测样品中含有盐酸决奈达隆。在本发明中，所述定性测定包括显氯化物的鉴别反应和紫外-可见分光光度法测定，本发明对所述显氯化物的鉴别反应和紫外-可见分光光度法没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的显氯化物的鉴别反应和紫外-可见分光光度法即可，本发明优选采用中国药典2010年版二部附录III所述的显氯化物的鉴别反应的方法对待测样品进行鉴别，采用中国药典2010年板二部附录IV A所述的紫外-可见分光光度法对待测样品进行测定，具体为：

[0126] 向待测样品中加入乙醇、水和氨试液，得到混合溶液，将所述混合溶液过滤后得到滤液，将得到的滤液按照中国药典2010年版二部附录III记载的方法进行操作，若结果均呈正反应，阴性无干扰，则说明待测样品为盐酸决奈达隆。在本发明中，所述氨试液按照中国药典2010年版二部附录中记载的氨试液的方法进行配制，所述待测样品与乙醇和水的质量比优选为（0.005～0.015）:（10～15）:15，更优选为（0.008～0.012）:（11～13）:15，在本发明中，按照中国药典2010年版二部附录中记载的氨试液的方法配制得到氨试剂后，待测样品的质量与所述氨试剂的体积比优选为（0.005～0.015）g:（1～10）mL，更优选为（0.008～0.012）g:（3～8）mL。

[0127] 本发明还将待测样品进行紫外-可见分光光度法的测定，具体为：

[0128] 将待测样品采用无水乙醇溶解，得到待测样品的乙醇溶液；

[0129] 向所述待测样品的乙醇溶液中加入盐酸溶液，得到待测溶液；

[0130] 将所述待测溶液进行紫外-可见分光光度法检测，得到检测结果。

[0131] 本发明将待测样品用无水乙醇溶解，优选将得到的溶液进行过滤，然后向得到的滤液中加入盐酸溶液，得到待测溶液。在本发明中，所述待测样品的乙醇溶液的质量浓度优选为（0.1～1）mg/mL，更优选为（0.3～0.8）mg/mL；所述盐酸溶液的摩尔浓度优选为（0.05～0.5）mol/L，更优选为（0.08～0.2）mol/L；所述待测溶液中盐酸决奈达隆的质量浓度优选为（5～15）μg/mL，更优选为（8～12）μg/mL。得到待测溶液后，本发明按照中国药典2010年版二部附录IV A记载的方法对所述待测样品进行紫外-可见分光光度法的检测。若得到的紫外-可见光谱图中在214nm和290nm左右的波长处有最大吸收峰，则说明待测样品为盐酸决奈达隆。

[0132] 完成对所述待测样品的定性鉴别后，本发明对待测样品进行高效液相色谱检测，得到待测样品中盐酸决奈达隆的含量。在本发明中，将所述待测样品进行高效液相色谱检测前，优选将所述待测样品溶解，得到待测溶液，在本发明中，所述溶解待测样品的溶剂优选为高效液相色谱检测中的流动相，在本发明中，所述流动相为甲醇、乙腈和磷酸盐缓冲溶液的混合溶液，在所述流动相中，所述甲醇的体积分数优选不大于32%，更优选为30%～32%；所述乙腈的体积分数优选不大于50%，更优选为48%～50%；所述磷酸盐缓冲溶液的pH值为7.0～8.0，所述磷酸盐缓冲溶液优选为磷酸二氢钾和碱性化合物的混合溶液，所述碱性化合物优选为氢氧化钠或氢氧化钾，更优选为氢氧化钠，在本发明中，所述磷酸盐缓冲溶液优选按照以下方法配制：

[0133] 将磷酸二氢钾溶解，得到磷酸二氢钾的水溶液；

[0134] 向所述磷酸二氢钾的水溶液中加入碱性化合物调节其pH值为7.0～8.0，得到磷酸盐缓冲溶液。

[0135] 本发明将磷酸二氢钾溶于水中，得到磷酸二氢钾的水溶液，然后优选向得到的磷酸二氢钾水溶液中加入碱性化合物溶液，将其pH值调至7.0～8.0，优选为7.5，得到磷酸盐缓冲溶液。在本发明中，所述磷酸二氢钾水溶液的摩尔浓度优选为（0.001～0.01）mol/L，更优选为（0.003～0.008）mol/L；本发明对所述碱性化合物溶液的浓度没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的碱性化合物溶液即可；本发明将所述磷酸二氢钾水溶液的pH值调至7.0～8.0后，优选将得到的溶液进行稀释，使其中磷酸二氢钾的摩尔浓度为（0.0005～0.005）mol/L，更优选为（0.0008～0.002）mol/L，得到磷酸盐缓冲溶液。

[0136] 得到待测溶液后，本发明将所述待测溶液注入高效液相色谱仪中进行检测，得到待测溶液的高效液相色谱图。本发明对所述高效液相色谱仪没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的高效液相色谱仪即可。在本发明中，所述高效液相色谱检测中的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；所述高效液相色谱检测中的流动相为上述技术方案所述的流动相；所述高效液相色谱检测中的柱温不高于40℃，优选为35℃～40℃；所述高效液相色谱检测中待测溶液的流速为1.3mL/min～1.7mL/min，更优选为1.5mL/min；所述高效液相色谱检测中磷酸盐缓冲液的pH值为7.0～8.0，更优选为7.5；所述高效液相色谱检测的检测器为紫外-可见分光检测器，检测波长为210nm～230nm，优选为215nm～225nm，最优选为220nm。

[0137] 得到待测溶液的高效液相色谱图后，本发明根据所述高效液相色谱图和预先获得的标准曲线，得到待测样品中盐酸决奈达隆的含量。在本发明中，所述标准曲线优选按照以下方法获得：

[0138] 将盐酸决奈达隆标准品配制成系列浓度标准溶液；

[0139] 将所述系列浓度的标准溶液进行高效液相色谱检测，分别得到系列浓度标准溶液的高效液相色谱图；

[0140] 根据所述高效液相色谱图和标准溶液的浓度，得到标准曲线。

[0141] 本发明将盐酸决奈达隆标准品配制成系列浓度的标准溶液，本发明对所述标准溶液的配制方法没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的溶液的配制方法即可。本发明优选先配制较高质量浓度的盐酸决奈达隆标准品母液，再将所述母液稀释成系列浓度的标准溶液，在本发明中所述母液的质量浓度优选为（80～120）μg/mL，更优选为（90～110）μg/mL。在本发明中，配制所述标准溶液的溶剂为上述技术方案所述的流动相，所述标准溶液的质量浓度优选为（0.1～15）μg/mL，更优选为（0.5～10）μg/mL，最优选为0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL、6μg/mL、8μg/mL和10μg/mL。

[0142] 得到标准溶液后，本发明将系列浓度的标准溶液分别注入高效液相色谱仪中进行检测，分别得到系列浓度的标准溶液的高效液相色谱图。本发明按照上述技术方案所述的待测样品的高效液相色谱检测技术方案对所述标准溶液进行高效液相色谱检测。

[0143] 得到高效液相色谱图后，本发明根据所述标准溶液的高效液相色谱图和其对应的标准溶液的质量浓度，得到标准曲线。本发明优选计算得到所述标准溶液的高效液相色谱图中盐酸决奈达隆色谱峰的峰面积，以所述峰面积为纵坐标，以其对应的标准溶液的质量浓度为横坐标，得到标准曲线。

[0144] 本发明实验结果表明，本发明提供的方法得到标准曲线的相关系数R为0.9999，这说明本发明提供的方法中，盐酸决奈达隆的峰面积与其质量浓度间存在良好的线性关系，从而使得到的盐酸决奈达隆含量的检测结果具有较高的准确度。

[0145] 得到标准曲线后，本发明根据上述技术方案得到的待测溶液的高效液相色谱图和所述标准曲线，得到待测样品中盐酸决奈达隆的含量。本发明优选根据上述技术方案得到的待测溶液的高效液相色谱图计算得到待测样品中盐酸决奈达隆对应的色谱峰的峰面积，从而根据所述峰面积的值和所述标准曲线，得到待测溶液的质量浓度，然后根据所述待测溶液的质量浓度和待测溶液的进样体积，得到待测溶液中盐酸决奈达隆的质量，从而根据待测样品的质量和盐酸决奈达隆的质量得到待测样品中盐酸决奈达隆的含量。

[0146] 由于在将待测样品溶解时得到的待测溶液中盐酸决奈达隆的含量会受到其溶出度的影响，因此，为了得到更加准确地的盐酸决奈达隆在活性物质中的含量，更加准确的判断待测样品的品质，本发明在计算待测样品中盐酸决奈达隆含量前测定待测样品的溶出度。溶出度是指活性药物从片剂、胶囊剂或颗粒剂等制剂在规定条件下溶出的速率和程度。在本发明中，所述待测样品的溶出度是指盐酸决奈达隆从盐酸决奈达隆片中溶出的速率和程度。本发明对所述溶出度的检测方法没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的溶出度检测的技术方案即可。本发明优选采用2010版药典二部附录X C中的第二法进行检测，得到待测样品的溶出度，具体为：

[0147] 将待测样品与溶出介质混合，在不小于75转/min的转速下进行溶出，根据2010版药典二部附录X C中的第二法所述的技术方案得到待测样品的溶出度。在本发明中，所述溶出介质优选为水或醋酸-醋酸钠缓冲溶液，更优选为pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液；所述转速优选为75转/min～100转/min，更优选为75转/min；所述溶出的时间优选不小于30分钟，更优选不小于45分钟。

[0148] 得到待测样品的溶出度后，本发明计算得到待测样品中活性物质溶出的质量，从而根据所述活性物质溶出的质量和上述技术方案得到的盐酸决奈达隆的质量，计算得到待测样品中盐酸决奈达隆的含量。

[0149] 本发明考察了本发明提供的检测方法的抗干扰性能，本发明考察了酸、碱、氧化、高温、强光和辅料对该方法的干扰，具体过程为：

[0150] 本发明向上述技术方案得到的标准溶液中加入酸性物质，将得到的混合溶液按照上述技术方案所述的高效液相色谱检测方法进行测定，本发明对所述酸性物质没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的酸性物质即可，在本发明中，所述酸性物质优选为摩尔浓度为（0.5～5）mol/L的盐酸溶液，更优选为（1～2）mol/L；得到混合溶液后，本发明优选将所述混合溶液在90℃～100℃的水浴条件下加热后再将其pH值调至中性，再进行检测，更优选为95℃～98℃，所述加热的时间优选为0.5小时～2小时，更优选为0.8小时～1.5小时。结果表明，本发明提供的方法具有较强的抗酸干扰性能；

[0151] 本发明向上述技术方案得到的标准溶液中加入碱性物质，将得到的混合溶液[0152] 本发明向上述技术方案得到的标准溶液中加入氧化剂，将得到的混合溶液按照上述技术方案所述的高效液相色谱检测方法进行测定，本发明对所述氧化剂没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的氧化剂即可，在本发明中，所述氧化剂优选为过氧化氢，更优选为质量分数为5%～15%的过氧化氢溶液，更优选为8%～12%；得到混合溶液后，本发明优选将所述混合溶液在90℃～100℃的水浴条件下加热后再进行检测，更优选为95℃～98℃，所述加热的时间优选为20分钟～50分钟，更优选为25分钟～40分钟。结果表明，本发明提供的方法具有较强的抗氧化干扰性能；

[0153] 本发明将上述技术方案得到的标准溶液在100℃～120℃下进行加热，将得到的溶液冷却后按照上述技术方案所述的高效液相色谱检测方法进行测定，更优选为105℃～110℃，所述加热的时间优选为10小时～15小时，更优选为11小时～13小时，结果表明，本发明提供的方法具有良好的抗高温干扰性能；

[0154] 本发明将上述技术方案得到的标准溶液在光照度为（4000～5000）lx下进行照射，然后将得到的溶液按照上述技术方案所述的高效液相色谱方法进行检测，所述光照度更优选为（4300～4700）lx，所述照射的时间优选为3天～10天，更优选为5天～8天，结果表明，本发明提供的方法具有良好的抗强光干扰性能；

[0155] 本发明按照现有技术公开的盐酸决奈达隆片的配方，向上述技术方案得到的标准溶液中加入辅料，将得到的混合溶液按照上述技术方案所述的高效液相色谱方法进行检测，结果表明，本发明提供的方法能够抗辅料的干扰。

[0156] 本发明考察了本发明提供的检测方法的适用性、重复性和稳定性，具体过程为：

[0157] 本发明配制含有杂质的盐酸决奈达隆溶液，得到混合溶液；将所述混合溶液在设置有不同色谱柱的高效液相色谱仪上进行检测，所述检测的技术方案为上述技术方案所述的待测溶液的高效液相色谱检测方法，结果表明，本发明提供的方法不会受色谱柱的限制，能够较好地实现盐酸决奈达隆和杂质，以及杂质间的分离，实现对盐酸决奈达隆的测定，这说明，本发明提供的方法具有较好的适用性；

[0158] 本发明将上述技术方案得到的含有杂质的混合溶液按照上述技术方案所述的检测技术方案进行平行测定，考察本发明提供方法的重复性，结果表明，平行测定的相对标准偏差符合规定，本发明提供的方法具有较好的重复性；

[0159] 本发明将上述技术方案得到的含有杂质的混合溶液放置一定时间后再按照上述技术方案所述的检测方法进行测定，考察本发明提供方法的稳定性，结果表明，在放置8小时后对混合溶液进行检测，结果依然较准确，本发明提供的方法具有较好的稳定性。

[0160] 本发明提供了一种检测盐酸决奈达隆的方法，包括以下步骤：对待测样品进行高效液相色谱检测，得到待测样品的高效液相色谱图；根据所述高效液相色谱图和预先获得的标准曲线，得到待测样品中盐酸决奈达隆的含量；所述高效液相色谱检测中的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；所述高效液相色谱检测中的流动相为甲醇、乙腈和磷酸盐缓冲液的混合物；所述高效液相色谱检测中的柱温不高于40℃；所述高效液相色谱检测中待测溶液的流速为1.3mL/min～1.7mL/min；所述高效液相色谱检测中磷酸盐缓冲液的pH值为7.0～8.0，在上述检测条件下，得到盐酸决奈达隆的检测结果。本发明提供的方法能够将盐酸决奈达隆与其他杂质分离，并且也能够较好的区分各杂质，在本发明提供的检测条件下，盐酸决奈达隆与各杂质以及各杂质之间的分离均较好，出峰时间较为合适，而且本发明提供的方法具有较高的灵敏度，因此本发明提供的方法能够较好地实现对盐酸决奈达隆品质的测定，而且有利于指导生产过程中对杂质的控制，得到高品质的盐酸决奈达隆。

[0161] 为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种检测盐酸决奈达隆的方法进行详细地说明，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。

[0162] 在以下实施例中，药物溶出仪为天大天发生产的型号为D-800ls与天大天发生产的型号为RCZ-8M，高效液相色谱仪为Agilent生产的型号为1100与Agilent生产的型号为1200，天平为Sartorius生产的型号为BP211D。

[0163] 盐酸决奈达隆对照品来自于江苏康缘药业股份有限公司、批号为101201-1、纯度为99.7%；盐酸决奈达隆片来自于江苏康缘药业股份有限公司、规格为400mg、批号分别为110401、110402和110403；市售盐酸决奈达隆片购自赛诺菲-安万特（Sanofi-Aventis）、批号为58。空白辅料中的乳糖购自常州市朗生生物工程有限公司、批号为20110211，淀粉来自于曲阜市天利药用辅料有限公司、批号为101226；泊洛沙姆188购自南京威尔化工有限公司、批号为20101201；羟丙甲纤维素购自安徽山河药用辅料股份有限公司、批号为
100508；交联聚维酮购自安徽山河药用辅料股份有限公司、批号：20101103；硬脂酸镁购自湖南尔康制药有限公司、批号：20101101；薄膜包衣粉（白）购自天津爱勒易医药材料有限公司、批号为101101A1060。杂质对照品购自上海医药工业研究院，其中2-甲基-3-[4-(3-二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5-甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐的批号为110101，在本发明中，将2-甲基-3-[4-(3-二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5-甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐命名为杂质A；2-正丙基-3-[4-(3-二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5-甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐的批号为110101，在本发明中，将2-正丙基-3-[4-(3-二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5-甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐命名为杂质B；2-正丁基-3-[4-(3-二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5-二甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐的批号为101001，在本发明中，将
2-正丁基-3-[4-(3-二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5-二甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐命名为杂质C；5-氨基-3-[4-(3-二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-2-正丁基苯并呋喃二草酸盐的批号为100901，在本发明中，将5-氨基-3-[4-(3-二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-2-正丁基苯并呋喃二草酸盐命名为杂质D。乙腈和甲醇购自美国天地，为色谱纯；磷酸二氢钾、氢氧化钠、冰醋酸和醋酸钠均购自国药集团化学试剂有限公司；水为超纯水。

[0164] 实施例1～4

[0165] 根据中国药典2010年版二部附录III的记载进行显氯化物的鉴别。精密称取10mg批号为110401、110402和110403的购自江苏康缘药业股份有限公司盐酸决奈达隆样品和购自赛诺菲-安万特（Sanofi-Aventis）的盐酸决奈达隆片，分别加入乙醇和水各15mL和氨试液5mL，进行振摇、静置、过滤，将得到的滤液按照药典中的方法进行操作进行显氯化物的鉴别。

[0166] 结果表明，实施例1～4中样品的检查结果均呈正反应，阴性无干扰。

[0167] 实施例5～9

[0168] 精密称定25mg批号为110401、110402和110403的购自江苏康缘药业股份有限公司盐酸决奈达隆样品、和购自赛诺菲-安万特（Sanofi-Aventis）的盐酸决奈达隆片和空白辅料，将其分别置于50mL的量瓶中，向其中加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，静置，过滤；精密量取续滤液1mL，将其置于50mL的量瓶中，向其中加入摩尔浓度为0.1mol/L盐酸溶液溶解并稀释成每1mL含盐酸决奈达隆10μg的溶液，按照中国药典2010年版二部附录IV A记载的紫外-可见分光光度法对其进行测定。

[0169] 结果如图1～5所示，图1～4分别为本发明实施例5～8得到的盐酸决奈达隆片的紫外光谱图，图5为本发明实施例9得到的空白辅料的紫外光谱图，根据得到的图1～5得到盐酸决奈达隆片的最大吸收波长，结果如表1所示，表1为本发明实施例5～8中盐酸决奈达隆的紫外最大吸收波长。

[0170] 表1本发明实施例5～8中盐酸决奈达隆的紫外最大吸收波长

[0171]

[0172] 由图1～5和表1的结果可以看出，实施例5～8的盐酸决奈达隆样品在214nm和290nm的波长处有最大吸收，这说明三批样品与市售样品的检查均符合相关规定，阴性无干扰。

[0173] 实施例10～12

[0174] 将盐酸决奈达隆对照品加入到流动相中，进行超声溶解，配制成每1mL中约含盐酸决奈达隆1mg的溶液，得到待测溶液。所述流动相为甲醇-乙腈-磷酸盐缓冲溶液的混合溶液，其中磷酸盐缓冲溶液按下述方法配制：取磷酸二氢钾0.136g，加200mL水溶解，用氢氧化钠试液调节pH值至7.5，加水至1000mL，摇匀，在流动相中甲醇-乙腈-磷酸盐缓冲溶液的体积比为32:50:18。

[0175] 称取空白辅料约30mg，置50mL量瓶中，加上述流动相溶解并稀释至刻度，摇匀得到空白溶液。

[0176] 分别精密量取上述流动相、空白溶液和待测溶液各10μL注入液相色谱仪进行检测，柱温为40℃，流速为1.5mL/min，检测波长为220nm。

[0177] 结果如图6～8所示，图6～8分别为本发明实施例10～12中流动相、空白溶液和待测溶液的液相色谱图，由图6～8可以看出，空白溶液和本发明采用的流动相对盐酸决奈达隆的检测无干扰。

[0178] 实施例13～17

[0179] 分别精密称取杂质A、杂质B、杂质C、杂质D各10mg，将其同置于10mL量瓶中，向其中加入实施例10中的流动相溶解并稀释至刻度，摇匀作为混合杂质溶液。精密称取研细的批号为的110401盐酸决奈达隆片粉末适量将其置于20mL量瓶中，然后向其中精密加入上述混合杂质溶液2mL，再加实施例10中的流动相超声溶解并定量稀释制成每1mL中含1mg盐酸决奈达隆和100μg杂质A、100μg杂质B、100μg杂质C和100μg杂质D的混合溶液，作为待测溶液。

[0180] 精密量取上述待测溶液10μL注入液相色谱仪中进行检测，色谱柱分别为Agilent Eclipse XDB-C18(150×4.6mm)、DIONEX Acclaim120(150×4.6mm)、Phenomenex Luna(150×4.6mm)、Global Chromatography SP-120-3-ODS-①和Global Chromatography SP-120-3-ODS-②，柱温为40℃，流速为1.5mL/min，检测波长为220nm。

[0181] 检测结果如图9～13所示，图9～13为本发明实施例13～17中待测溶液的液相色谱图，由图9～13可以看出，实施例15中采用的色谱柱对杂质C和杂质D的分离度不合格；实施例14中采用的色谱柱得到的液相色谱图中杂质A的峰形较差。这表明实施例13～17采用的色谱柱中有4根色谱柱的分离度均符合规定，只有实施例15中的色谱柱对杂质C和杂质D的分离度不合格，所以该色谱条件适应于多数色谱柱，重现性良好。又因采用实施例14中的色谱柱考察时，杂质A峰形差，所以杂质A的理论板数定为不小于3000；
杂质B、盐酸决奈达隆、杂质C、杂质D的理论板数均定为不小于4000。

[0182] 本发明根据实施例13～17得到的液相色谱图计算得到了各杂质和盐酸决奈达隆的理论板数和分离度，结果如表2所示，表2为本发明实施例13～17中杂质和盐酸决奈达隆理论板数和分离度的考察结果。

[0183] 表2本发明实施例13～17中杂质和盐酸决奈达隆理论板数和分离度的考[0184] 察结果

[0185]

[0186] 实施例18～22

[0187] 采用实施例17中的色谱柱（Global Chromatography SP-120-3-ODS-②），精密量取实施例17中的待测溶液10μL注入液相色谱仪中，连续进样5次，记录色谱图，结果如图14～18所示，图14～18为实施例18～22中待测溶液的液相色谱图。由图14～18可以看出，本发明提供的检测方法具有较好的重复性，得到较理想的检测结果。

[0188] 本发明计算实施例18～22得到的液相色谱图中峰面积的相对标准偏差，结果如表3所示，表3为本发明实施例18～22得到的盐酸决奈达隆和杂质的峰面积。

[0189] 表3本发明实施例18～22得到的盐酸决奈达隆和杂质的峰面积

[0190]

[0191]

[0192] 实施例23

[0193] 将实施例17中的待测样品进行稀释，得到系列浓度的待测溶液，精密量取10μL待测溶液将其注入液相色谱仪中，在柱温为40℃，流速为1.5mL/min，检测波长为220nm的条件下进行检测，结果如图19～22所示，图19～22分别为本发明实施例23得到的杂质D、杂质C、杂质A和杂质B、盐酸决奈达隆的液相色谱图，由图19～22可以看出，本发明提供的方法对杂质D、杂质C、杂质A和杂质B、盐酸决奈达隆的检测限较低，能够较好的实现杂质和盐酸决奈达隆的分离，从而得到更加准确的盐酸决奈达隆的检测结果。

[0194] 本发明计算得到的液相色谱图中峰高与噪声的比值，得到对各组分的检测限，结果如表4所示，表4为本发明实施例23得到的各组分的检测限。

[0195] 表4本发明实施例23得到的各组分的检测限

[0196]

[0197] 由表4可以看出，本发明提供的方法对盐酸决奈达隆的检测限可达1.0ng，能够有效地实现对盐酸决奈达隆的检测，而且在如此低的浓度下杂质组分不会对盐酸决奈达隆的检测造成影响，因此，本发明提供的方法能够更加准确和灵敏地实现对盐酸决奈达隆的检测。

[0198] 实施例24

[0199] 精密量取10μL实施例17中的待测溶液，将其注入液相色谱仪中进行检测，色谱柱为实施例17中的色谱柱，柱温分别为35℃、40℃和45℃，流速为1.5mL/min，检测波长为220nm，得到待测溶液的液相色谱图。

[0200] 检测结果如图23～24和图33所示，图23、24和33分别为本发明实施例24中柱温为35℃、40℃和45℃时待测溶液的液相色谱图；本发明根据得到的液相色谱图计算得到杂质组分和盐酸决奈达隆色谱峰的出峰时间（tR）、拖尾因子（TF）及分离度（R）随柱温改变的变化，结果如表5所示，表5为本发明实施例24得到的杂质组分和盐酸决奈达隆的出峰时间（tR）、拖尾因子（TF）及分离度（R）随柱温改变的变化。

[0201] 表5本发明实施例24得到的杂质组分和盐酸决奈达隆的出峰时间（tR）、[0202] 拖尾因子（TF）及分离度（R）随柱温改变的变化

[0203]

[0204] 由图23～24和33以及表5中的计算结果可以看出，盐酸决奈达隆与杂质C的分离度随着柱温的升高，逐渐增加；但是杂质C与杂质D的分离度随温度的升高，逐渐降低，且最终分离度不合格。因柱温在40℃时，盐酸决奈达隆与各杂质及各杂质之间的分离均较好，出峰时间较为合适。综上，柱温应不高于40℃。

[0205] 实施例25

[0206] 精密量取10μL实施例17中的待测溶液，将其注入液相色谱仪中进行检测，色谱柱为实施例17中的色谱柱，柱温为40℃，流速分别为1.3mL/min、1.5mL/min和1.7mL/min，检测波长为220nm，得到待测溶液的液相色谱图。

[0207] 检测结果如图25～26和图33所示，图25、26和33分别为本发明实施例25中流速为1.3mL/min、1.5mL/min和1.7mL/min时待测溶液的液相色谱图；本发明根据得到的液相色谱图得到杂质组分和盐酸决奈达隆色谱峰的出峰时间（tR）、拖尾因子（TF）及分离度（R）随流速改变的变化，结果如表6所示，表6为本发明实施例25得到的杂质组分和盐酸决奈达隆的出峰时间（tR）、拖尾因子（TF）及分离度（R）随流速改变的变化。

[0208] 表6本发明实施例25得到的杂质组分和盐酸决奈达隆的出峰时间（tR）、拖尾因子（TF）及分离度（R）随流速改变的变化

[0209]

[0210] 由图25～26和33以及表6中的计算结果可以看出，随着流速的增加，盐酸决奈达隆与杂质的出峰时间加快，且盐酸决奈达隆与杂质C的分离度随着流速的升高，逐渐降低；因流速在1.5mL/min时，盐酸决奈达隆与各杂质之间的分离较好，且出峰时间较为合适。综上，流速在1.3mL/min～1.5mL/mi均可以准确的进行杂质分析。

[0211] 实施例26

[0212] 将实施例17中流动相中乙腈的体积比例改为48、50和52，配制得到待测溶液。精密量取10μL该待测溶液，将其注入液相色谱仪中进行检测，色谱柱为实施例17中的色谱柱，柱温分别为40℃，流速为1.5mL/min，检测波长为220nm，得到待测溶液的液相色谱图。

[0213] 检测结果如图27～28和图33所示，图27、28和33分别为本发明实施例26中流动相中乙腈的比例为48、50和52时待测溶液的液相色谱图；本发明根据得到的液相色谱图得到杂质组分和盐酸决奈达隆色谱峰的出峰时间（tR）、拖尾因子（TF）及分离度（R）随流动相中乙腈体积分数改变的变化，结果如表7所示，表7为本发明实施例26得到的杂质组分和盐酸决奈达隆的出峰时间（tR）、拖尾因子（TF）及分离度（R）随流动相中乙腈体积分数改变的变化。

[0214] 表7本发明实施例26得到的杂质组分和盐酸决奈达隆的出峰时间（tR）、拖尾因子（TF）及分离度（R）随流动相中乙腈体积分数改变的变化

[0215]

[0216] 由图27～28和33以及表7中的计算结果可以看出，随着乙腈在流动相中体积分数的增加，盐酸决奈达隆与杂质的保留时间均加快，且盐酸决奈达隆与杂质C的分离度逐渐增加，但杂质C与杂质D分离度逐渐降低且最终不合格。因流动相为体积比为32:50:18的甲醇-乙腈-缓冲液时，盐酸决奈达隆与各杂质及各杂质之间的分离较好，出峰时间较为合适。综上，乙腈在流动相中的体积分数应不高于50%。

[0217] 实施例27

[0218] 将实施例17中流动相中甲醇的体积比改为30、32和34，配制得到待测溶液。精密量取10μL该待测溶液，将其注入液相色谱仪中进行检测，色谱柱为实施例17中的色谱柱，柱温分别为40℃，流速为1.5mL/min，检测波长为220nm，得到待测溶液的液相色谱图。

[0219] 检测结果如图29～30和图33所示，图29、30和33分别为本发明实施例27中流动相中甲醇的体积比为30、32和34时待测溶液的液相色谱图；本发明根据得到的液相色谱图得到杂质组分和盐酸决奈达隆色谱峰的出峰时间（tR）、拖尾因子（TF）及分离度（R）随流动相中甲醇体积分数改变的变化，结果如表8所示，表8为本发明实施例27得到的杂质组分和盐酸决奈达隆的出峰时间（tR）、拖尾因子（TF）及分离度（R）随流动相中甲醇体积分数改变的变化。

[0220] 表8本发明实施例27得到的杂质组分和盐酸决奈达隆的出峰时间（tR）、拖尾因子（TF）及分离度（R）随流动相中甲醇体积分数改变的变化

[0221]

[0222] 由图29～30和33以及表8中的计算结果可以看出，随着甲醇体积比例的增加，盐酸决奈达隆与杂质的保留时间均加快，且盐酸决奈达隆与杂质C的分离度逐渐增大，但杂质C与杂质D分离度逐渐降低且最终不合格。因流动相为体积比为32:50:18的甲醇-乙腈-缓冲液时，盐酸决奈达隆与各杂质之间的分离较好，且出峰时间较为合适。综上，甲醇的体积分数应不高于32%。

[0223] 实施例28

[0224] 将实施例17中流动相中缓冲溶液的pH改为7.0、7.5和8.0，配制得到待测溶液。精密量取10μL该待测溶液，将其注入液相色谱仪中进行检测，色谱柱为实施例17中的色谱柱，柱温分别为40℃，流速为1.5mL/min，检测波长为220nm，得到待测溶液的液相色谱图。

[0225] 检测结果如图31～33所示，图31～33分别为本发明实施例28中流动相pH为7.0、7.5和8.0时待测溶液的液相色谱图；本发明根据得到的液相色谱图得到杂质组分和盐酸决奈达隆色谱峰的出峰时间（tR）、拖尾因子（TF）及分离度（R）随流动相pH值改变的变化，结果如表9所示，表9为本发明实施例28得到的杂质组分和盐酸决奈达隆的出峰时间（tR）、拖尾因子（TF）及分离度（R）随流动相pH值改变的变化。

[0226] 表9本发明实施例28得到的杂质组分和盐酸决奈达隆的出峰时间（tR）、拖尾因子（TF）及分离度（R）随流动相pH值改变的变化

[0227]

[0228]

[0229] 由图31～33和表9的计算结果可以看出，盐酸决奈达隆与杂质C的分离度随着流动相pH值的升高，逐渐增加；在pH值为7.5时，因盐酸决奈达隆与各杂质之间的分离较好，且峰形较好，出峰时间适中，考虑到色谱柱的pH值耐受性（2.0-8.0），所以选择流动相pH值为7.5。

[0230] 由实施例24～28的实验结果可以看出，盐酸决奈达隆与杂质C及杂质C与杂质D的分离均受到柱温，流速、缓冲盐pH和流动相比例等影响，但是柱温和流动相比例对分离度的影响更加明显。因此在样品检查中要控制柱温和流动相比例。

[0231] 实施例29～34

[0232] 精密称取批号为110401的盐酸决奈达隆细粉50mg，将其置于50mL量瓶中，向其中加入10mL摩尔浓度为1mol/L的盐酸、10mL摩尔浓度为1mol/L的氢氧化钠溶液、5mL质量分数为10%的过氧化氢溶液，将得到的混合溶液分别在98℃的水浴条件加热10小时、1小时、30分钟，然后调节混合溶液的pH值至中性，观察到有固体析出，然后再进行超声溶解，用实施例17中的流动相稀释至刻度，摇匀，作为待测溶液；

[0233] 或将批号为110401的盐酸决奈达隆在105℃下加热12小时后放冷，将得到的盐酸决奈达隆配制成每1mL含盐酸决奈达隆1mg的溶液，将其作为待测溶液；

[0234] 或将批号为110401的盐酸决奈达隆用实施例17中的流动相配制成每1mL含盐酸决奈达隆1mg的溶液，然后将得到的溶液在强光4500lx下照射5天，得到待测溶液；

[0235] 或将批号为110401的盐酸决奈达隆用实施例17中的流动相配制成每1mL含盐酸决奈达隆1mg的溶液，将其作为待测溶液。

[0236] 分别精密量取上述待测溶液10μL，注入液相色谱仪，在柱温为40℃，流速为1.5mL/min，检测波长为220nm的条件下进行检测，记录色谱图。

[0237] 结果如图34～39所示，图34～39分别为本发明实施例29～34得到的酸破坏、碱破坏、氧化破坏、高温破坏、强光破坏和未破坏的待测溶液的液相色谱图。本发明根据得到的液相色谱图计算得到经酸破坏后杂质和盐酸决奈达隆的百分含量，结果如表10所示，表10为本发明实施例29～34得到的待测溶液的检测结果。

[0238] 表10本发明实施例29～34得到的待测溶液的检测结果

[0239]

[0240] 注：物料平衡（%）= 总杂质的百分含量（%）+盐酸决奈达隆的百分含量（%）。

[0241] 由图34～39和表10的结果可以看出，本发明提供的检测方法在对经酸破坏的待测溶液进行检测时，摩尔浓度为1mol/L的盐酸、高温和光照的条件对待测溶液的破坏不明显，能够抵抗酸、高温和光照的破坏；在摩尔浓度为1mol/L氢氧化钠溶液、质量分数10%过氧化氢溶液条件下均破坏明显；在上述色谱条件下，降解产物与样品的色谱峰均能达到有效分离。而且，酸、碱、氧化、高温、光照破坏性试验的样品物料平衡均在95%～105%，提示本品在上述条件下物料平衡好。因此，在上述的酸、碱、氧化、高温、光照的条件下能够准确地实现对盐酸决奈达隆及与其共存的杂质检测。

[0242] 实施例35～40

[0243] 按处方称取空白辅料，按照实施例29～34所述的酸破坏、碱破坏、氧化破坏、高温破坏、强光破坏和未破坏的技术方案分别得到酸破坏、碱破坏、氧化破坏、高温破坏、强光破坏和未破坏的待测溶液，并精密量取上述待测溶液10μL，注入液相色谱仪，在柱温为40℃，流速为1.5mL/min，检测波长为220nm的条件下进行检测，记录色谱图。

[0244] 结果如图40～45所示，图40～45分别为实施例35～40辅料被酸破坏、碱破坏、氧化破坏、高温破坏、强光破坏和未破坏的待测溶液的液相色谱图，由图35～40可以看出，辅料的破坏不干扰盐酸决奈达隆的检测。

[0245] 实施例41

[0246] 精密称取批号为110401的盐酸决奈达隆细粉50mg，将其置于50mL量瓶中，向其中加入实施例17中的流动相进行超声溶解并定容至刻度，摇匀制成每1mL中约含1mg盐酸决奈达隆的溶液作为待测溶液。精密量取该溶液续滤液适量，加实施例17中的流动相稀释成每1mL中约含盐酸决奈达隆10μg的溶液作对照溶液。精密取上述溶液各10μL在静置0h、1h、2h、4h、6h和8h后注入液相色谱仪，在柱温为40℃，流速为1.5mL/min，检测波长为
220nm的条件下进行检测，记录色谱图。

[0247] 结果如图46～57所示，其中图46～51分别为本发明实施例41得到的不同静置时间的对照溶液的液相色谱图，图52～57分别为本发明实施例41得到的不同静置时间的待测溶液的液相色谱图；本发明根据得到的液相色谱图计算得到单个杂质和杂质总含量在不同静置时间内的稳定性，结果如表11所示，表11为本发明实施例41得到的盐酸决奈达隆稳定性考察结果。

[0248] 表11本发明实施例41得到的盐酸决奈达隆稳定性考察结果

[0249]

[0250] 由图46～57和表11的结果可以看出，待测溶液在8小时内能够稳定存在。

[0251] 实施例42

[0252] 精密称取批号为110401的盐酸决奈达隆细粉50mg，将其置于50mL量瓶中，向其中加入实施例17中的流动相超声溶解并定容至刻度，摇匀制成每1mL中约含盐酸决奈达隆1mg的溶液作待测溶液。精密量取该溶液续滤液适量，加实施例17中的流动相稀释制成每
1mL中约含盐酸决奈达隆10μg的溶液作为对照溶液。平行制备6份待测溶液和对照溶液，分别取待测溶液和对照溶液10μL注入液相色谱仪，在柱温为40℃，流速为1.5mL/min，检测波长为220nm的条件下进行检测，记录色谱图。

[0253] 结果如图58～69所示，其中图58～63为本发明实施例42得到的6份对照溶液的液相色谱图，图64～69为本发明实施例42得到的6份待测溶液的液相色谱图。本发明根据得到的液相色谱图计算得到单个杂质和杂质总含量在平行测定时的准确度，结果如表12所示，表12为本发明实施例42得到的检测盐酸决奈达隆重复性的考察结果。

[0254] 表12本发明实施例42得到的检测盐酸决奈达隆重复性的考察结果

[0255]

[0256] 由图58～69和表12的结果可以看出，本发明提供的方法盐酸决奈达隆共存杂质重复性的考察符合规定。通过上述考察结果与其他文献的参考，盐酸决奈达隆的共存杂质暂定为不大于1.0%，单个最大杂质定为不大于0.2%。

[0257] 实施例43～46

[0258] 精密称取批号为110401、110402、110403和市售的盐酸决奈达隆50mg，将其置于50mL量瓶中，加实施例17中的流动相超声溶解，并定容至刻度，摇匀，过滤，取续滤液作为待测溶液。精密量取续滤液适量，加流动相稀释成每1mL中约含盐酸决奈达隆10μg的溶液作为对照溶液。精密量取对照溶液10μL注入液相色谱仪中，在柱温为40℃，流速为1.5mL/min，检测波长为220nm的条件下进行检测，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20～25%。再精密量取上述溶液各10μL，分别注入液相色谱仪，在柱温为40℃，流速为1.5mL/min，检测波长为220nm的条件下进行检测，记录色谱图至主峰保留时间的2倍。
待测溶液的色谱图中若显杂质峰，各杂质峰的面积和不得大于对照溶液主峰面积（1.0%），单个最大杂质的峰面积不得大于对照溶液的峰面积五分之一（0.2%）。

[0259] 结果如图70～77所示，图70～73分别为本发明实施例43～46得到的对照溶液的液相色谱图，图74～77分别为本发明实施例43～46得到的待测溶液的液相色谱图。本发明根据得到的液相色谱图计算得到单个杂质和杂质总量在盐酸决奈达隆片中的含量，结果如表13所示，表13为本发明实施例43～46得到的检测结果。

[0260] 表13本发明实施例43～46得到的检测结果

[0261]

[0262]

[0263] 根据图70～77和表13的结果可以看出，本公司生产的盐酸决奈达隆片和市售的盐酸决奈达隆片中杂质的含量均符合上述实施例制定的标准。

[0264] 实施例47～50

[0265] 采用2010版药典二部附录X C第二法对溶出度进行检测。将同一批次的盐酸决奈达隆分别用水、摩尔浓度为0.1mol/L的盐酸溶液、上述实施例中pH为6.8的磷酸盐缓冲溶液和pH为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液各1000mL作为溶出接枝，以转速为75转/min溶出45分钟。将得到的溶液按照2010版药典二部附录X C第二法检测得到其溶出度，每个样品平行测定6次，取其平均值，结果如表14所示，表14为本发明实施例47～54得到的不同溶出介质下得到的盐酸决奈达隆片的溶出度。

[0266] 实施例51～54

[0267] 采用2010版药典二部附录X C第二法对溶出度进行检测。将盐酸决奈达隆的市售商品分别用水、摩尔浓度为0.1mol/L的盐酸溶液、上述实施例中pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液和pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液各1000mL作为溶出介质，以转速为75转/min溶出45分钟。将得到的溶液按照2010版药典二部附录X C第二法检测得到其溶出度，每个样品平行测定6次，取其平均值，结果如表14所示，表14为本发明47～54得到的不同溶出介质下得到的盐酸决奈达隆片的溶出度。

[0268] 表14本发明47～54得到的不同溶出介质下得到的盐酸决奈达隆片的溶出度[0269]

[0270] 由表14可以看出，以摩尔浓度为0.1mol/L盐酸溶液及pH值为6.8的磷酸盐缓冲液作溶出介质溶出效果不好。以水、pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液作为溶出介质，溶出结果都超过80%，但是以pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液作为溶出介质，溶出效果比水好，所以采用pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液作为溶出介质。

[0271] 实施例55

[0272] 将批号为110201的盐酸决奈达隆片采用1000mL pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液为溶出介质，在75转/min转速下分别溶出30min和45min，将得到的溶液采用实施例50中的检测方法进行6次平行检测，得到其溶出度结果如表15所示，表15为实施例55得到的不同溶出时间下得到的盐酸决奈达隆片的检测结果。

[0273] 表15实施例55得到的不同溶出时间下得到的盐酸决奈达隆片的溶出度[0274]

[0275] 由表15可以看出，溶出时间为45分钟比溶出时间为30分钟的检测效果好，所以选择45分钟作为溶出时间。

[0276] 实施例56

[0277] 将批号为110201的盐酸决奈达隆片采用采用1000mL pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液为溶出介质，分别在50转/min、75转/min和100转/min的转速下溶出45min，将得到的溶液采用实施例50中的检测方法进行6次平行检测，得到其溶出度，结果如表16所示，表16为实施例56得到的不同转速下溶出得到的盐酸决奈达隆片的溶出度。

[0278] 表16实施例56得到的不同转速下溶出得到的盐酸决奈达隆片的溶出度[0279]

[0280] 由表16可以看出，转速为75转/min和100转/min时，溶出结果高于50转/min的溶出结果；75转/min和100转/min溶出结果无明显差异。综合考察，选择75转/min作为溶出检查的转速。

[0281] 实施例57～59

[0282] 根据处方设计，分别按标示量的50%、80%、100%精密称取盐酸决奈达隆对照品各三份，各加入相同处方量的辅料同置1000mL量瓶中，加pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液溶解后并稀释至刻度，摇匀，过滤，精密量取续滤液1mL，置10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。按实施例50中的检测方法测定盐酸决奈达隆的含量并计算回收率，平行测定3次，结果如表17所示，表17为本发明实施例57～59得到的回收率的考察结果。

[0283] 表17本发明实施例57～59得到的回收率的考察结果

[0284]

[0285] 由表17可以看出，盐酸决奈达隆的回收率考察合格。

[0286] 实施例60

[0287] 将批号为110201的盐酸决奈达隆片约42mg置于100mL量瓶中，向其中加入pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液溶解并稀释至刻度，摇匀，过滤，精密取续滤液1mL，置25mL量瓶中，加pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为待测溶液，将得到的待测溶液分别在0、1、2、4、6、8小时后按照实施例50所述的测定方法进行测定，得到其溶出度，结果如表18所示，表18为本发明实施例60得到的稳定性的考察结果。

[0288] 表18本发明实施例60得到的稳定性的考察结果

[0289]

[0290] 由表18可以看出，本发明提供的方法在8小时内对待测溶液进行测定均能得到理想的检测结果，这说明本发明提供的方法具有较好的稳定。

[0291] 由实施例47～60的测试结果可以看出，本发明提供的方法在对溶出度进行检测时所采用的参数分别为：溶出介质为1000mL pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液；转速为75转/min；溶出时间为45分钟。

[0292] 实施例61

[0293] 取1片批号为110201的盐酸决奈达隆片，照溶出度测定法（中国药典2010版二部附录X C第二法），以1000mL pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液为溶出介质，转速为每分钟75转，依法操作，溶出时间为45分钟，得到盐酸决奈达隆的溶液。将该溶液进行过滤，精密量取续滤液1mL，置10mL量瓶中，加实施例17中的流动相稀释至刻度，摇匀得到待测溶液。

[0294] 按处方称取约30mg辅料，将其置于100mL量瓶中，加pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液超声溶解并稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液1mL，置10mL量瓶中加实施例17中的流动相溶解并定容至刻度，摇匀得到空白溶液。

[0295] 分别精密量取待测溶液和空白溶液各10μL注入液相色谱仪，按照实施例50中的方法进行液相色谱法检测。结果如图78～79所示，图78～79分别为本发明实施例61中空白辅料和待测溶液的液相色谱图，由图78～79可以看出，空白溶液对盐酸决奈达隆溶出度的检查无干扰。

[0296] 实施例62

[0297] 取批号为110401的盐酸决奈达隆1片、2片、3片、4片、5片和6片，按照实施例61中待测溶液的制备和检测方法进行6次平行检测，结果如表19所示，表19为本发明实施例62得到的溶出度重复性考察结果。

[0298] 表19本发明实施例62得到的溶出度重复性考察结果

[0299]

[0300] 由表19可以看出，本发明提供的方法具有良好的重复性。

[0301] 实施例63

[0302] 取批号为110401的盐酸决奈达隆片1片，照溶出度测定法（中国药典2010版二部附录X C第二法），以1000mL pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液为溶出介质，转速为每分钟75转，溶出时间分别在5、10、15、20、30、45分钟，分别将得到的溶液进行过滤，精密量取得到的滤液1mL，将其置于10mL量瓶中，加实施例17中的流动相稀释至刻度，摇匀得到待测溶液。精密量取10μL该待测溶液注入液相色谱仪，按照实施例50中的检测方法进行高效液相色谱检测，得到盐酸决奈达隆的含量。重复检查6次，考察6次检查结果的精密度，结果如图80所示，图80为本发明实施例63得到的不同溶出时间的待测溶液溶出度图，图中NO.1～NO.6分别是溶出时间为5、10、15、20、30、45分钟的溶出度曲线。

[0303] 根据图80和公式 公式中的f2为相似度，Rt和Tt分别为参比和受试制剂第t时间点的平均累计释放度，n为测试点数，计算得出溶出曲线的相似度，以第一批检查的溶出曲线作为参照曲线，结果如表20所示，表20为本发明实施例63得到的精密度考察结果。

[0304] 表20本发明实施例63得到的精密度考察结果

[0305]

[0306] 由表20可以看出，f2值均大于50，相似度考察合格。

[0307] 实施例64～67

[0308] 将批号为110401、110402、110403和市售盐酸决奈达隆片按照实施例63所述的待测溶液的配制方法和检测方法，检测得到盐酸决奈达隆片的溶出度，结果如图81所示，图80为本发明实施例63～67得到的待测溶液溶出度图。

[0309] 根据图81和公式 公式中的f2为相似度，Rt和Tt分别为参比和受试制剂第t时间点的平均累计释放度，n为测试点数，计算得出溶出曲线的相似度，以第一批检查的溶出曲线作为参照曲线，结果如表21所示，表21为本发明实施例64～67得到的精密度考察结果。

[0310] 表21本发明实施例64～67得到的精密度考察结果

[0311]

[0312] 由表21可以看出，得到的f2的值均大于50，这说明相似度考察合格。

[0313] 实施例68～71

[0314] 取批号为110401、110402、110403和市售盐酸决奈达隆各1片、2片、3片、4片、5片和6片，照溶出度测定法（中国药典2010版二部附录X C第二法），以1000mL pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液为溶出介质，转速为每分钟75转，依法操作，溶出时间为45分钟，将得到的溶液过滤，精密量取得到的滤液1mL，置10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀作为供试品溶液。另取盐酸决奈达隆对照品适量，精密称定，向其中加入实施例17中的流动相超声溶解，并稀释制成每1mL中约含42μg盐酸决奈达隆的溶液作为对照溶液。按照实施例64所述的检测方法进行检测，计算每片的溶出度，限度为标示量的80%，应符合规定。结果如表22所示，表22为本发明实施例68～71得到的溶出度的检测结果。

[0315] 表22本发明实施例68～71得到的溶出度的检测结果

[0316]

[0317] 由表22可以看出，本发明提供的方法对样品的溶出度进行考察得到的结果符合规定。

[0318] 实施例72

[0319] 精密称取盐酸决奈达隆标准品适量，置100mL量瓶中，加入实施例17中的流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为103μg/mL的母液。分别精密量取10mL、8mL、6mL、4mL、2mL、1mL和0.5mL各置于10mL量瓶中，向其中加入实施例17中的流动相稀释至刻度，摇匀，分别得含盐酸决奈达隆为103μg/mL、82.4μg/mL、61.8μg/mL、41.2μg/mL、20.6μg/mL、
10.3μg/mL和5.2μg/mL的标准品溶液。分别精密量取上述标准品溶液各10μL注入液相色谱仪中按照实施例50中的方法进行检测，记录得到标准溶液的液相色谱图。

[0320] 根据得到的液相色谱图，得到不同浓度的标准溶液的峰面积，结果如表23所示，表23为本发明实施例68得到的不同浓度的标准溶液的峰面积。

[0321] 表23本发明实施例68得到的不同浓度的标准溶液的峰面积

[0322]

[0323] 根据表23的结果，以标准溶液浓度为横坐标（x），标准品的峰面积为纵坐标（y），绘制得到标准曲线，结果如图82所示，图82为本发明实施例68得到的盐酸决奈达隆的标准曲线。由图82可以看出，本发明得到的标准曲线的线性方程为：y=36.158x-15.649，其中y为峰面积，x为标准溶液浓度、单位为μg/mL，相关系数R为0.9999，这说明，本发明提供的方法对盐酸决奈达隆进行检测得到的标准曲线具有良好的线性关系，能够实现对盐酸决奈达隆的准确检测。

[0324] 实施例69

[0325] 取实施例68中摩尔浓度为41.2μg/mL的标准品溶液，精密量取10μL注入液相色谱仪，连续进样6次，按照实施例68中的方法进行液相色谱法的检测，记录得到标准溶液的液相色谱图。

[0326] 本发明根据得到的液相色谱图计算得到6次峰面积的相对标准偏差（RSD值），结果如表24所示，表24为本发明实施例69得到的计算结果。

[0327] 表24本发明实施例69得到的计算结果

[0328]

[0329] 由表24可以看出，本发明提供的方法对盐酸决奈达隆的检测具有较高的精密度。

[0330] 实施例70

[0331] 精密称取批号为110401的盐酸决奈达隆25mg，用实施例17中的流动相溶解并定量稀释制成每1mL中约含50μg盐酸决奈达隆的溶液，滤过，作为待测溶液。精密量取10μL所述待测溶液注入液相色谱仪，每间隔0h、1h、2h、4h、6h和8h的时间进样1次，根据实施例68所述的检测方法对所述待测溶液进行检测，记录得到液相色谱图。

[0332] 本发明根据得到的液相色谱图和实施例68得到的标准曲线，计算得到不同进样时间的待测溶液中盐酸决奈达隆的浓度，根据得到的浓度计算得到每片盐酸决奈达隆片中盐酸决奈达隆的含量，并计算得到相对标准偏差（RSD）。结果如表25所示，表25为本发明实施例70得到的试验结果。

[0333] 表25本发明实施例70得到的试验结果

[0334]

[0335] 由表25可以看出，本发明提供的检测方法具有良好的稳定性。

[0336] 实施例71

[0337] 精密称取批号为110401的盐酸决奈达隆25mg，用实施例17中的流动相溶解并定量稀释制成每1mL中约含50μg盐酸决奈达隆的溶液，滤过，作为待测溶液。平行制备6份盐酸决奈达隆的待测溶液。精密取6份待测溶液各10μL注入液相色谱仪，根据实施例68所述的检测方法进行检测，记录得到液相色谱图。

[0338] 本发明根据得到的液相色谱图和实施例68得到的标准曲线，计算得到6份待测溶液中盐酸决奈达隆的摩尔浓度，根据得到的摩尔浓度计算得到每片盐酸决奈达隆片中盐酸决奈达隆的含量，并计算RSD值，结果如表26所示，表26为本发明实施例71得到的试验结果。

[0339] 表26本发明实施例71得到的试验结果

[0340]

[0341] 由表26可以看出，本发明提供的方法具有良好的重复性。

[0342] 实施例72～74

[0343] 在同一实验室，由三名不同的试验人员在三台不同的仪器和不同的时间下进行测试，以批号为110401和110402的盐酸决奈达隆片为检测对象，按照实施例71所述的方法对所述检测对象进行含量测定，记录得到该样品的含量，结果如表27所示，表27为本发明实施例72～74得到的试验结果。

[0344] 表27本发明实施例72～74得到的试验结果

[0345]

[0346]

[0347] 由表27可以看出，本发明提供的方法，由不同的实验人员、在不同的时间和不同的液相色谱仪上得到的检测结果没有明显的差别，具有普遍的实用性，能够满足盐酸决奈达隆含量的测定。

[0348] 实施例75～77

[0349] 根据处方设计，分别按标示含量的80%、100%、120%精密称取盐酸决奈达隆对照品各三份，分别加入相同处方量的辅料，将它们同置于50mL量瓶中，向其中加入实施例17中的流动相超声溶解后并稀释至刻度，摇匀，过滤，精密量取得到的滤液1mL，将其置于20mL的量瓶中，向其中加入实施例17中的流动相稀释至刻度，摇匀，得到待测溶液。按照实施例71所述的方法平行测定3次得到盐酸决奈达隆的含量并计算回收率，结果如表28所示，表
28为本发明75～77得到的实验结果。

[0350] 表28本发明75～77得到的实验结果

[0351]

[0352] 由表28可以看出，本发明提供的方法得到的回收率考察合格，适用于实际样品的测定。

[0353] 实施例78～81

[0354] 分别精密称定批号为110401、110402、110403和市售盐酸决奈达隆片20片，研将其细，精密称取得到盐酸决奈达隆片粉末50mg，将其置于50mL的量瓶中，向其中加入实施例17中的流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，过滤；精密量取得到的滤液1mL，将其置于20mL量瓶中，用实施例17中的流动相稀释至刻度，摇匀得到待测溶液。另取盐酸决奈达隆对照品适量，精密称定，用实施例17中的流动相溶解并稀释制成每1mL中约含50μg盐酸决奈达隆的溶液作对照品溶液。精密量取待测溶液与对照品溶液各10μL注入液相色谱仪，按照实施例68所述的检测方法进行测定，记录得到液相色谱图。

[0355] 本发明根据得到的液相色谱图和实施例68得到的标准曲线，并按照外标法以峰面积计算，并将结果与0.9385相乘，得到盐酸决奈达隆的含量，结果如表29所示，表29为本发明实施例78～81得到的检测结果。

[0356] 表29本发明实施例78～81得到的检测结果

[0357]

[0358] 由表29可以看出，本发明提供的方法能够准确地实现对盐酸决奈达隆实际样品的测定。

[0359] 由以上实施例可知，本发明提供了一种检测盐酸决奈达隆的方法，包括以下步骤：对待测样品进行高效液相色谱检测，得到待测样品的高效液相色谱图；根据所述高效液相色谱图和预先获得的标准曲线，得到待测样品中盐酸决奈达隆的含量；所述高效液相色谱检测中的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；所述高效液相色谱检测中的流动相为甲醇、乙腈和磷酸盐缓冲液的混合物；所述高效液相色谱检测中的柱温不高于40℃；所述高效液相色谱检测中待测溶液的流速为1.3mL/min～1.7mL/min；所述高效液相色谱检测中磷酸盐缓冲液的pH值为7.0～8.0，在上述检测条件下，得到盐酸决奈达隆的检测结果。本发明提供的方法能够将盐酸决奈达隆与其他杂质分离，并且也能够较好的区分各杂质，在本发明提供的检测条件下，盐酸决奈达隆与各杂质以及各杂质之间的分离均较好，出峰时间较为合适，而且本发明提供的方法具有较高的灵敏度，因此本发明提供的方法能够较好地实现对盐酸决奈达隆品质的测定，而且有利于指导生产过程中对杂质的控制，得到高品质的盐酸决奈达隆。

[0360] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。