一种米尔贝霉素类似物及其制备方法和在农药中的应用转让专利
申请号 : CN201410137531.5
文献号 : CN103936755B
文献日 : 2016-03-23
发明人 : 胡冠芳 , 刘映前 , 赵晓博 , 余海涛 , 南祥 , 刘敏艳 , 牛树君 , 李玉奇
申请人 : 甘肃省农业科学院植物保护研究所
摘要 :
一种米尔贝霉素类似物及其制备方法和在农药中的应用。本发明公开一类米尔贝霉素类似物，该类化合物具有如下结构式：其中，R1选自2-萘基、对甲基苯基、甲基、2,4-二氟苯基或对氯苯基；R2选自对甲氧基苯基、对甲基苯基或苯基。该类化合物对朱砂叶螨（Tetranychus cinnabarinus）和豆蚜（Aphis craccivora）具有与伊维菌素相当或更高的触杀活性，可用于防治此类农业害虫（螨）。
权利要求 :
1.一种米尔贝霉素类似物，具有如下结构式：
其中，所述R1为2,4-二氟苯基；所述R2为对甲氧基苯基或苯基。
2.权利要求1所述米尔贝霉素类似物在农药中的应用，用于防治农业害虫和/或害螨，所述害虫为豆蚜A. craccivora，所述害螨为朱砂叶螨T. cinnabarinus。
说明书 :
一种米尔贝霉素类似物及其制备方法和在农药中的应用
技术领域
[0001] 本发明属于农药化合物领域，具体涉及一种米尔贝霉素类似物及其制备方法和在农药中的用途。
背景技术
[0002] 阿维菌素（avermectins）是由日本北里大学大村智等和美国Merck公司首先开发的一类具有杀虫、杀螨、杀线虫活性的十六元大环内酯双糖类化合物。其作为一类重要的抗生素，已经成为一种农用和兽用的高效生物源杀虫剂。而伊维菌素（ivermectin）是由美国Merck公司对AVM Bl的C22与C23之间的双键还原加氢处理后得到的第1个阿维菌素衍生物。与阿维菌素相比，伊维菌素的杀虫活性基本不变，但对哺乳动物的机体组织有更强的渗透性和安全性，持效期更长，而且伊维菌素由于双键加氢还原成饱和状态后，具有较强的稳定性和抗氧化能力，药效更加可靠[(1) Awasthi, A. et al. Chem. Pharm. Bull.2012, 60, 931–944; (2) Wolstenholme, A. J. Invert. Neurosci. 2010, 10, 5–10.）]。而生物农药米尔贝霉素（milbemycins），也称弥拜霉素，其结构与伊维菌素相类似，在C-13位少了两个糖基，因此其活性在继承伊维菌素稳定性和长效性的同时，比伊维菌素有较高的脂溶性。
该天然产物对农业害虫具有广谱的杀虫活性，如蚜、螨、黄褐天幕毛虫、肠道寄生虫以及其他危害作物及家畜的寄生虫。米尔贝霉素对害虫作用强烈，用药量少，对人畜安全，不污染环境，对天敌安全，害虫不易产生抗性，是目前最具开发前景的广谱、高效、新型无交互抗性的生物杀虫剂。由于米尔贝霉素的作用机理与阿维菌素的作用机理不同，即其可以引起谷氨酸门控氯离子通道（Glutamate-gated chloride）的开放，从而使氯离子内流增加，使正常的动作电位不能释放，致使昆虫麻痹死亡，使其对已产生抗性的害螨仍有非常好的杀灭效果，这正是阿维菌素与伊维菌素所不能比拟的[（1） Fisher, M. H. Pure &Appl. Chem.1990,62, 1231-1240; （2）Pitterna,T.,et al. Bioorg. Med. Chem.2009, 17,
4085–4095]，但米尔贝霉素在国内市场来源有限，成本高。
该天然产物对农业害虫具有广谱的杀虫活性，如蚜、螨、黄褐天幕毛虫、肠道寄生虫以及其他危害作物及家畜的寄生虫。米尔贝霉素对害虫作用强烈，用药量少，对人畜安全，不污染环境，对天敌安全，害虫不易产生抗性，是目前最具开发前景的广谱、高效、新型无交互抗性的生物杀虫剂。由于米尔贝霉素的作用机理与阿维菌素的作用机理不同，即其可以引起谷氨酸门控氯离子通道（Glutamate-gated chloride）的开放，从而使氯离子内流增加，使正常的动作电位不能释放，致使昆虫麻痹死亡，使其对已产生抗性的害螨仍有非常好的杀灭效果，这正是阿维菌素与伊维菌素所不能比拟的[（1） Fisher, M. H. Pure &Appl. Chem.1990,62, 1231-1240; （2）Pitterna,T.,et al. Bioorg. Med. Chem.2009, 17,
4085–4095]，但米尔贝霉素在国内市场来源有限，成本高。
发明内容
[0003] 本发明的目的是提供一类新的米尔贝霉素类似物及其制备方法，以及其在农药中的应用。
[0004] 本发明实现上述目的所采用的技术方案如下：
[0005] 一种米尔贝霉素类似物，具有如下结构式：
[0006]
[0007] 其中，R1选自2-萘基、对甲基苯基、甲基、2,4-二氟苯基或对氯苯基；R2选自对甲氧基苯基、对甲基苯基或苯基。
[0008] 进一步，所述R1为2-萘基或2,4-二氟苯基；所述R2为对甲氧基苯基、对甲基苯基或苯基。
[0009] 更进一步，所述R1为2,4-二氟苯基；所述R2为对甲氧基苯基或苯基。
[0010] 所述米尔贝霉素类似物的制备方法，包括
[0011] 将 与 和 混合，在碘化亚铜和三乙胺的催化作用下，反应得到所述米尔贝霉素类似物；
[0012] 其中，R1选自2-萘基、对甲基苯基、甲基、2,4-二氟苯基或对氯苯基；R2选自对甲氧基苯基、对甲基苯基或苯基。
[0013] 进 一 步 ，所 述 与 和的摩尔比可以控制在1：(1～2)：(1～2)。
[0014] 进一步，催化剂碘化亚铜和三乙胺按 摩尔量的0.1～2倍加入。
[0015] 合成过程：以伊维菌素（结构式如1）为起始反应物，经脱除13位的糖基，4位羟基保护后，再在13位C上引入氨基，再脱除去4位的羟基保护基团，得到的母体（结构式如6）再与磺酸叠氮衍生物及炔反应得到所述的米尔贝霉素类似物。
[0016] 具体如下：
[0017]
[0018] 本发明所述的磺酸叠氮衍生物可由相应的磺酰氯和叠氮化钠在醇溶剂中搅拌得到，也可采用市售产品。
[0019] 所述米尔贝霉素类似物在农药中的用途，用于防治农业害虫和/或害螨。
[0020] 进一步，所述害虫为豆蚜（A. craccivora）；所述害螨为朱砂叶螨（T. cinnabarinus）。
[0021] 本发明以廉价易得的伊维菌素为原料，降低了米尔贝霉素类似物的合成成本，将伊维菌素的13位糖基用磺酰脒基取代后，得到的米尔贝霉素类似物对朱砂叶螨和豆蚜具有与伊维菌素相当或更高的触杀活性。
具体实施方式
[0022] 以下结合实施例对本发明做进一步说明。
[0023] 实施例1
[0024] (7a)的合成
[0025] 具体过程如下：
[0026] 中间体2的合成：取伊维菌素2g (2.25mmol) 溶于39.6mL干燥的甲醇中，在冰浴条件下逐滴加入0.4mL的浓硫酸，待滴加完全后在0℃下反应30min，随后在室温下搅拌约16h后，TLC检测反应完全。用二氯甲烷稀释，用5%NaHCO3水溶液洗，随后水层用CH2Cl2反复萃取，合并有机层，有机层接着依次用水、饱和食盐水洗，收集有机层，用无水硫酸镁干燥，过滤浓缩后得粗产品。粗产物经硅胶柱层析（200～300目）纯化，得1.4g所需纯品。
[0027] 中间体3的合成：取5.86g (10mmol) 中间体2溶于15mL干燥的二氯甲烷中，加入6.8g(100mmol)咪唑，待原料溶解完后，随后加入3.31g (22mmol) 叔丁基二甲基氯硅烷（TBDMSCl），在室温下搅拌约2.5h后，TLC检测反应完全。用乙醚稀释，水洗，水层用乙醚反复萃取，合并有机层，有机层再依次用水、饱和食盐水洗，收集有机层，用无水硫酸镁干燥，过滤浓缩后用柱层析分离，得到5.4g所需纯品。
[0028] 中间体4的合成：在氮气保护下将3.84mL（44mmol）草酰氯溶于干燥的二氯甲烷中，在氮气保护下，在-60℃条件下逐渐滴加6.2mL（88mmol）的二甲基亚砚（DMSO）的二氯甲烷稀释溶液，滴加完毕2min后，向反应体系中滴加14g（20mmol）中间体3的二氯甲烷稀释溶液，保持-60℃反应30min后，加入28mL三乙胺，滴加完毕后室温搅拌45min，TLC检测反应完全。用CH2Cl2稀释，水洗有机相，随后用饱和食盐水洗，收集有机层，用无水硫酸镁干燥，合并有机层，过滤浓缩后得粗产品，粗产物经硅胶柱层析（200～300目）纯化，得9.2g目标产物。
[0029] 中间体5的合成：取6.69g (10mmol)中间体4溶于150mL干燥的甲醇中，随后依次加入7.71g (100mmol) 醋酸铵，570mg (9.1mmol ) 氰基硼氢化钠在室温下搅拌约48h，TLC检测反应完全。NaHCO3的水溶液洗，用乙酸乙酯反复萃取(30mL×3)，合并有机层并用水洗(30mL)，无水硫酸镁干燥，过滤浓缩后用柱层析分离，得到2.6g所需纯品。
[0030] 中间体6的合成：取0.12g (0.17mmol)中间体5在冰浴条件下溶于12mL的浓度为1%的对甲苯磺酸的甲醇溶液，在冰浴条件下反应约2.5h，TLC检测反应完全。NaHCO3的水溶液洗，用乙酸乙酯反复萃取(12mL×3)，合并有机层并依次用水(15mL×3)、饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，过滤浓缩后用柱层析分离，得到89mg所需纯品。
[0031] 将117mg (0.2mmol)中间体6溶于10mL二氯甲烷，加入0.24mmol对甲苯磺酰叠氮和0.26 mmol苯乙炔，氮气保护下，加入3.8mg(0.02mmol) 碘化亚铜和0.035mL (0.25mmol) 三乙胺，室温搅拌1.5h，反应结束后，用氯仿稀释，加入饱和的氯化铵溶液在室温下搅拌
30min，然后用氯仿反复萃取，合并有机层，用无水硫酸镁干燥，过滤，减压蒸除溶剂后，粗产物经硅胶柱层析（200～300目）纯化，用体积比为20:1的二氯甲烷-甲醇洗脱，得目标产物
7a。
30min，然后用氯仿反复萃取，合并有机层，用无水硫酸镁干燥，过滤，减压蒸除溶剂后，粗产物经硅胶柱层析（200～300目）纯化，用体积比为20:1的二氯甲烷-甲醇洗脱，得目标产物
7a。
[0032] 产物（7a）的检测数据如下：产率：63%；白色固体，熔点：142-144℃； 1H NMR(400MHz, CDCl3) δ: 7.79-7.82(m, 2H, Ar-H), 6.97-7.14(m, 7H, Ar-H), 5.654-5.70(m, 1H, 10-H), 5.43-5.46(m, 1H, 9-H), 5.26-5.32 (m, 3H, 3-H, 11-H, 19-H), 4.51-4.64(m, 3H, 8a-H, 15-H), 4.46-4.49(m, 1H, -CH2C=N-), 4.30-4.37(m, 2H, 5-H, -CH2C=N-), 4.29(s, 1H, 13-H), 3.79(m, 1H, 6-H), 3.49(s, 3H, Ar-CH3), 3.33(s, 1H, 7-OH), 3.27-3.30(m, 1H, 17-H), 3.20-3.22(m, 2H, 2-H, 25-H), 2.59-2.61(m, 1H, 12-H), 2.18-2.44(m, 4H, 5-OH, 16-H, 24-H), 1.25-1.99(m, 17H, 4-Me,
14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H, 18-H), 0.69-1.07(m, 12H, 12-Me, 27-Me,
24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/z : 857.4[M+H]+。
14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H, 18-H), 0.69-1.07(m, 12H, 12-Me, 27-Me,
24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/z : 857.4[M+H]+。
[0033] 实施例2
[0034] (7b)的合成
[0035] 实验步骤与实施例1同，仅以对氯苯基磺酰叠氮代替对甲苯磺酰叠氮，以对甲基苯乙炔(CAS：766-97-2)代替苯乙炔。反应所得产物检测数据如下：
[0036] 产率：61%；白色固体，熔点：137-139℃； 1H NMR(400MHz, CDCl3) δ: 7.85(d, 2H, J=8.4, Ar-H), 7.43(d, 2H, J=8.4, Ar-H), 7.18(d, 2H, J=8.4, Ar-H), 7.01(d, 2H, J=8.4, Ar-H), 5.67-5.70(m, 1H, 10-H), 5.52-5.55(m, 1H, 9-H), 5.30-5.41(m, 3H, 3-H, 11-H, 19-H), 4.56-4.67(m, 3H, 8a-H, 15-H), 4.38-4.43(m, 1H, -CH2C=N-),
4.25-4.30(m, 2H, 5-H , -CH2C=N-), 4.20(s, 1H, 13-H), 3.93(d, 1H, J=6.0, 6-H),
3.89(s, 3H, Ar-CH3), 3.78(s, 1H, 7-OH), 3.51-3.53(m, 1H, 17-H), 3.20-3.23(m,
2H, 2-H, 25-H), 2.62-2.63(m, 1H, 12-H), 2.17-2.31(m, 4H, 5-OH, 16-H, 24-H),
1.25-1.87(m, 17H, 4-Me, 14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H, 18-H), 0.70-1.19(m, 12H, 12-Me, 27-Me, 24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/z : 891.3[M+H]+。
4.25-4.30(m, 2H, 5-H , -CH2C=N-), 4.20(s, 1H, 13-H), 3.93(d, 1H, J=6.0, 6-H),
3.89(s, 3H, Ar-CH3), 3.78(s, 1H, 7-OH), 3.51-3.53(m, 1H, 17-H), 3.20-3.23(m,
2H, 2-H, 25-H), 2.62-2.63(m, 1H, 12-H), 2.17-2.31(m, 4H, 5-OH, 16-H, 24-H),
1.25-1.87(m, 17H, 4-Me, 14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H, 18-H), 0.70-1.19(m, 12H, 12-Me, 27-Me, 24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/z : 891.3[M+H]+。
[0037] 实施例3
[0038] (7c)的合成
[0039] 实验步骤与实施例1同，仅以甲基磺酰叠氮代替对甲苯磺酰叠氮。反应所得产物检测数据如下：
[0040] 产率：49%；白色固体，熔点：133-135℃； 1H NMR(400MHz, CDCl3) δ: 7.40-7.49(m, 2H, Ar-H), 7.32-7.39(m, 3H, Ar-H), 5.67-5.74(m, 1H, 10-H), 5.53-5.55(m, 1H,
9-H), 5.11-5.42(m, 3H, 3-H, 11-H, 19-H), 4.57-4.67(m, 3H, 8a-H, 15-H), 4.40-
4.48(m, 1H, -CH2C=N-), 4.27-4.35(m, 2H, 5-H , -CH2C=N-), 4.11-4.13(m, 1H, 13-H), 3.92-3.98(m, 1H, 6-H), 3.50(s, 3H, -SO2CH3), 3.20-3.23(m, 1H, 7-OH), 3.07-
3.12(m, 1H, 17-H), 3.02-3.04(m, 2H, 2-H, 25-H), 2.64-2.65(m, 1H, 12-H), 2.19-
2.32(m, 4H, 5-OH, 16-H, 24-H), 1.26-1.90(m, 17H, 4-Me, 14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H, 18-H), 0.70-1.05(m, 12H, 12-Me, 27-Me, 24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/z : 781.6[M+H]+。
9-H), 5.11-5.42(m, 3H, 3-H, 11-H, 19-H), 4.57-4.67(m, 3H, 8a-H, 15-H), 4.40-
4.48(m, 1H, -CH2C=N-), 4.27-4.35(m, 2H, 5-H , -CH2C=N-), 4.11-4.13(m, 1H, 13-H), 3.92-3.98(m, 1H, 6-H), 3.50(s, 3H, -SO2CH3), 3.20-3.23(m, 1H, 7-OH), 3.07-
3.12(m, 1H, 17-H), 3.02-3.04(m, 2H, 2-H, 25-H), 2.64-2.65(m, 1H, 12-H), 2.19-
2.32(m, 4H, 5-OH, 16-H, 24-H), 1.26-1.90(m, 17H, 4-Me, 14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H, 18-H), 0.70-1.05(m, 12H, 12-Me, 27-Me, 24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/z : 781.6[M+H]+。
[0041] 实施例4
[0042] (7d)的合成
[0043] 实验步骤与实施例1同，仅以甲基磺酰叠氮代替对甲苯磺酰叠氮，以对甲基苯乙炔代替苯乙炔。反应所得产物检测数据如下：
[0044] 产率：52%；白色固体，熔点：136-138℃； 1H NMR(400MHz, CDCl3) δ: 7.13-7.31(m, 4H, Ar-H), 5.67-5.73(m, 1H, 10-H), 5.49-5.52(m, 1H, 9-H), 5.13-5.32(m, 3H, 3-H, 11-H, 19-H), 4.53-4.67(m, 3H, 8a-H, 15-H), 4.41-4.50(m, 1H, -CH2C=N-), 4.29-4.38(m, 2H, 5-H , -CH2C=N-), 4.17-4.24(m, 1H, 13-H), 3.93-3.97(m,
1H, 6-H), 3.46-3.56(m, 3H, Ar-CH3), 3.23-3.27(m, 3H, 2-H, 25-H, 17-H), 3.20-
3.23(m, 1H, 7-OH), 3.01-3.07(m, 3H, -SO2CH3), 2.62-2.64(m, 1H, 12-H), 2.17-
2.45(m, 4H, 5-OH, 16-H, 24-H), 1.26-1.98(m, 17H, 4-Me, 14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H, 18-H), 0.68-1.06(m, 12H, 12-Me, 27-Me, 24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/+
z : 750.8[M+H]。
1H, 6-H), 3.46-3.56(m, 3H, Ar-CH3), 3.23-3.27(m, 3H, 2-H, 25-H, 17-H), 3.20-
3.23(m, 1H, 7-OH), 3.01-3.07(m, 3H, -SO2CH3), 2.62-2.64(m, 1H, 12-H), 2.17-
2.45(m, 4H, 5-OH, 16-H, 24-H), 1.26-1.98(m, 17H, 4-Me, 14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H, 18-H), 0.68-1.06(m, 12H, 12-Me, 27-Me, 24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/+
z : 750.8[M+H]。
[0045] 实施例5
[0046] (7e)的合成 (Me表示甲基)
[0047] 实验步骤与实施例1同，仅以甲基磺酰叠氮代替对甲苯磺酰叠氮，以对甲氧基苯乙炔(CAS：768-60-5)代替苯乙炔。反应所得产物检测数据如下：
[0048] 产率：56%；白色固体，熔点：135-137℃； 1H NMR(400MHz, CDCl3) δ: 7.22(d, 2H, J=8.4, Ar-H), 7.01(d, 2H, J=8.0, Ar-H), 5.68-5.74(m, 1H, 10-H), 5.53-5.56(m, 1H, 9-H), 5.20-5.42(m, 3H, 3-H, 11-H, 19-H), 4.56-4.68(m, 3H, 8a-H, 15-H),
4.40-4.44(m, 1H, -CH2C=N-), 4.29-4.31(m, 2H, 5-H , -CH2C=N-), 4.20-4.22(m, 1H,
13-H), 3.95-3.97(m, 1H, 6-H), 3.88(s, 3H, Ar-CH3), 3.80(s, 1H, 7-OH), 3.56-
3.66(m, 1H, 17-H), 3.21-3.23(m, 2H, 2-H, 25-H), 3.03(s, 3H, -SO2CH3), 2.64-
2.65(m, 1H, 12-H), 2.19-2.32(m, 4H, 5-OH, 16-H, 24-H), 1.26-1.90(m, 17H, 4-Me, 14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H, 18-H), 0.70-1.05(m, 12H, 12-Me, 27-+
Me, 24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/z : 811.9[M+H]。
4.40-4.44(m, 1H, -CH2C=N-), 4.29-4.31(m, 2H, 5-H , -CH2C=N-), 4.20-4.22(m, 1H,
13-H), 3.95-3.97(m, 1H, 6-H), 3.88(s, 3H, Ar-CH3), 3.80(s, 1H, 7-OH), 3.56-
3.66(m, 1H, 17-H), 3.21-3.23(m, 2H, 2-H, 25-H), 3.03(s, 3H, -SO2CH3), 2.64-
2.65(m, 1H, 12-H), 2.19-2.32(m, 4H, 5-OH, 16-H, 24-H), 1.26-1.90(m, 17H, 4-Me, 14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H, 18-H), 0.70-1.05(m, 12H, 12-Me, 27-+
Me, 24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/z : 811.9[M+H]。
[0049] 实施例6
[0050] (7f)的合成
[0051] 实验步骤与实施例1同，仅以2-萘基磺酰叠氮代替对甲苯磺酰叠氮。反应所得产物检测数据如下：
[0052] 产率：61%；白色固体，熔点：137-139℃； 1H NMR(400MHz, CDCl3) δ: 8.49(s, 1H, Ar-H), 7.89-7.96(m, 4H, Ar-H), 7.59-7.64(m, 2H, Ar-H), 7.57(s, 2H, Ar-H), 7.48-7.49(m, 1H, Ar-H), 7.07-7.16(m, 2H, Ar-H), 5.65-5.71(m, 1H, 10-H), 5.51-
5.53(m, 1H, 9-H), 5.24-5.40(m, 3H, 3-H, 11-H, 19-H), 4.55-4.65(m, 3H, 8a-H,
15-H), 4.47-4.49(m, 1H, -CH2C=N-), 4.32-4.40(m, 2H, 5-H , -CH2C=N-), 4.28(s,
1H, 13-H), 3.92(d, 1H, J=6.0, 6-H), 3.60(s, 1H, 7-OH), 3.48-3.50(m, 1H, 17-H), 3.16-3.22(m, 2H, 2-H, 25-H), 2.61-2.63(m, 1H, 12-H), 2.15-2.37(m, 4H, 5-OH, 16-H, 24-H), 1.20-1.91(m, 17H, 4-Me, 14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H,
18-H), 0.71-1.25(m, 12H, 12-Me, 27-Me, 24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/z : 893.3[M+H]+。
5.53(m, 1H, 9-H), 5.24-5.40(m, 3H, 3-H, 11-H, 19-H), 4.55-4.65(m, 3H, 8a-H,
15-H), 4.47-4.49(m, 1H, -CH2C=N-), 4.32-4.40(m, 2H, 5-H , -CH2C=N-), 4.28(s,
1H, 13-H), 3.92(d, 1H, J=6.0, 6-H), 3.60(s, 1H, 7-OH), 3.48-3.50(m, 1H, 17-H), 3.16-3.22(m, 2H, 2-H, 25-H), 2.61-2.63(m, 1H, 12-H), 2.15-2.37(m, 4H, 5-OH, 16-H, 24-H), 1.20-1.91(m, 17H, 4-Me, 14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H,
18-H), 0.71-1.25(m, 12H, 12-Me, 27-Me, 24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/z : 893.3[M+H]+。
[0053] 实施例7
[0054] (7g)的合成
[0055] 实验步骤与实施例1同，仅以2-萘基磺酰叠氮代替对甲苯磺酰叠氮，对甲基苯乙炔代替苯乙炔。反应所得产物检测数据如下：
[0056] 产率：67%；白色固体，熔点：140-142℃； 1H NMR(400MHz, CDCl3) δ: 8.49(s, 1H, Ar-H), 7.90-7.96(m, 5H, Ar-H), 7.59-7.62(m, 2H, Ar-H), 6.96-7.14(m, 3H, Ar-H), 5.65-5.71(m, 1H, 10-H), 5.47-5.50(m, 1H, 9-H), 5.29-5.31(m, 3H, 3-H, 11-H, 19-H), 4.54-4.66(m, 3H, 8a-H, 15-H), 4.44-4.49(m, 1H, -CH2C=N-), 4.15-4.19 (m, 2H, 5-H , -CH2C=N-), 4.04-4.13(m, 1H, 13-H), 3.92(d, 1H, J=6.0, 6-H), 3.48-3.49(m, 4H, 7-OH, Ar-CH3), 3.17-3.23(m, 3H, 17-H, 2-H, 25-H), 2.60-2.62(m, 1H, 12-H), 2.16-2.44(m, 4H, 5-OH, 16-H, 24-H), 1.28-1.97(m, 17H, 4-Me,
14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H, 18-H), 0.67-1.25(m, 12H, 12-Me, 27-Me,
24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/z :907.7[M+H]+。
14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H, 18-H), 0.67-1.25(m, 12H, 12-Me, 27-Me,
24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/z :907.7[M+H]+。
[0057] 实施例8
[0058] (7h)的合成
[0059] 实验步骤与实施例1同，仅以2,4-二氟苯基磺酰叠氮代替对甲苯磺酰叠氮。反应所得产物检测数据如下：
[0060] 产率：40%；白色固体，熔点：142-144℃； 1H NMR(400MHz, CDCl3) δ: 7.98-8.06(m, 1H, Ar-H), 7.50-7.52 (m, 2H, Ar-H), 7.32-7.38(m, 2H, Ar-H), 6.89-7.20(m, 3H, Ar-H), 5.65-5.71(m, 1H, 10-H), 5.51-5.54(m, 1H, 9-H), 5.24-5.33(m, 3H, 3-H, 11-H, 19-H), 4.51-4.63(m, 3H, 8a-H, 15-H), 4.33-4.39(m, 1H, -CH2C=N-),
4.26-4.28(m, 2H, 5-H, -CH2C=N-), 4.11-4.13(m, 1H, 13-H), 3.95-3.97(m, 1H, 6-H), 3.64(s, 1H, 7-OH), 3.19-3.22(m, 3H, 17-H, 2-H, 25-H), 2.58-2.60(m, 1H,
12-H), 2.13-2.30(m, 4H, 5-OH, 16-H, 24-H), 1.21-1.98(m, 17H, 4-Me, 14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H, 18-H), 0.67-1.15(m, 12H, 12-Me, 27-Me, 24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/z : 879.8[M+H]+。
4.26-4.28(m, 2H, 5-H, -CH2C=N-), 4.11-4.13(m, 1H, 13-H), 3.95-3.97(m, 1H, 6-H), 3.64(s, 1H, 7-OH), 3.19-3.22(m, 3H, 17-H, 2-H, 25-H), 2.58-2.60(m, 1H,
12-H), 2.13-2.30(m, 4H, 5-OH, 16-H, 24-H), 1.21-1.98(m, 17H, 4-Me, 14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H, 18-H), 0.67-1.15(m, 12H, 12-Me, 27-Me, 24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/z : 879.8[M+H]+。
[0061] 实施例9
[0062] (7i)的合成
[0063] 实验步骤与实施例1同，仅以2,4-二氟苯基磺酰叠氮代替对甲苯磺酰叠氮,对甲氧基苯乙炔代替苯乙炔。反应所得产物检测数据如下：
[0064] 产率：43%；白色固体，熔点：144-146℃； 1H NMR(400MHz, CDCl3) δ: 7.97-8.03(m, 1H, Ar-H), 7.21-7.23 (m, 2H, Ar-H), 6.88-7.04(m, 4H, Ar-H), 5.65-5.72(m, 1H, 10-H), 5.51-5.54(m, 1H, 9-H), 5.23-5.31(m, 3H, 3-H, 11-H, 19-H), 4.56-
4.63(m, 3H, 8a-H, 15-H), 4.44-4.49(m, 1H, -CH2C=N-), 4.18-4.28(m, 2H, 5-H, -CH2C=N-), 4.11-4.13(m, 1H, 13-H), 3.95(m, 1H, 6-H), 3.81(s, 3H, Ar-CH3), 3.66(s, 1H, 7-OH), 3.21-3.23(m, 3H, 17-H, 2-H, 25-H), 2.60-2.62(m, 1H, 12-H),
2.14-2.31(m, 4H, 5-OH, 16-H, 24-H), 1.25-1.97(m, 17H, 4-Me, 14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H, 18-H), 0.68-1.19(m, 12H, 12-Me, 27-Me, 24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/z : 909.2[M+H]+。
4.63(m, 3H, 8a-H, 15-H), 4.44-4.49(m, 1H, -CH2C=N-), 4.18-4.28(m, 2H, 5-H, -CH2C=N-), 4.11-4.13(m, 1H, 13-H), 3.95(m, 1H, 6-H), 3.81(s, 3H, Ar-CH3), 3.66(s, 1H, 7-OH), 3.21-3.23(m, 3H, 17-H, 2-H, 25-H), 2.60-2.62(m, 1H, 12-H),
2.14-2.31(m, 4H, 5-OH, 16-H, 24-H), 1.25-1.97(m, 17H, 4-Me, 14-Me, 20-H, 26-H, 27-H, 22-H, 23-H, 18-H), 0.68-1.19(m, 12H, 12-Me, 27-Me, 24-Me, 26-Me)；MS-ESI m/z : 909.2[M+H]+。
[0065] 实施例10：化合物7a-7i的生物活性
[0066] 1、供试昆虫（螨）
[0067] （1）朱砂叶螨：朱砂叶螨（T. cinnabarinus）雌成螨，采自甘肃省农业科学院田间未施药的黄豆苗上；
[0068] （2）豆蚜：豆蚜（A. craccivora）成蚜，采自甘肃省农业科学院田间的龙葵上，为未接触任何农药的敏感品系。
[0069] 2、供试药剂
[0070] 化合物7a-7i（按照实施例1制备），伊维菌素作为对照药剂。
[0071] 3、生物活性测定方法
[0072] （1）对朱砂叶螨触杀作用的测定
[0073] 参照FAO（联合国粮农组织）推荐的测定螨类的标准方法—玻片浸渍法并加以改进（Wang Y. J., et al. Agrochemical Research Application. 2006, 10, 20–23.）。将双面胶带剪成2～3cm长，贴在显微镜载玻片的一端，用镊子揭去胶带上的纸片，用零号毛笔挑选大小一致、体色鲜艳、行动活泼的雌成螨，将其背部粘在双面胶带上（注意：不要粘住螨足、螨须和口器），每片粘3行，每行粘10 头。在温度（25±1）℃、相对湿度85%左右的生化培养箱中放置4h 后，用双目镜观察，剔除死亡或不活泼个体。将化合物溶解在含有10%蒸馏水的丙酮液中，配成1g/L的母液。在预试的基础上用蒸馏水将母液稀释成5个不同浓度溶液，将带螨玻片的一端浸入溶液中，轻轻摇动5s 后取出，迅速用吸水纸吸干螨体及其周围多余的药液。置于上述生化培养箱中，24h 后用双目镜检查死亡数，计算死亡率。用毛笔轻触螨体，以螨足不动者为死亡。以蒸馏水浸渍作为对照。对照组死亡率在10%以下为有效测定，用Abbott 公式对处理组死亡率进行校正。化合物5个浓度测定平行进行3次，取其平均值。试验结果分析采用SPSS统计软件（版本13.0）进行，计算致死中浓度LC50。
[0074] （2）对豆蚜触杀作用的测定
[0075] 参照已报道权威经典测试方法—点滴法（Zhao Q. Q., Li Y. Q., Xiong L. X., et al. J. Agric.Food Chem. 2010, 58, 4992−4998.）。将化合物溶解在含有10%蒸馏水的丙酮液中，配成1g/L的母液，再用含吐温20的蒸馏水溶液将母液稀释成5个不同浓度。用微量点滴器将药液点滴在豆蚜腹部背部，每虫点滴量为0.03μL。点滴完毕后，各处理分别放入温度（25±1）℃、相对湿度85%左右的生化培养箱中，24h后检查死亡数，计算死亡率。含10%蒸馏水的丙酮液用含吐温20的蒸馏水溶液稀释成同样的浓度，点滴豆蚜作为溶剂对照。
对照组死亡率在10%以下为有效测定，用Abbott 公式对处理组死亡率进行校正。化合物5个浓度测定平行进行3次，取其平均值。试验结果分析采用SPSS统计软件（版本13.0）进行，计算致死中浓度LC50。
对照组死亡率在10%以下为有效测定，用Abbott 公式对处理组死亡率进行校正。化合物5个浓度测定平行进行3次，取其平均值。试验结果分析采用SPSS统计软件（版本13.0）进行，计算致死中浓度LC50。
[0076] 生物测定结果表明（表1），本发明制备的9个米尔贝霉素类似物对朱砂叶螨和豆蚜具有很强的触杀活性，其中7b、7c对朱砂叶螨的触杀活性与伊维菌素活性相当，7f、7h和7i的触杀活性高于伊维菌素，毒力分别为伊维菌素的2.65、2.88和1.92倍；7b、7c、7d、7e、7f和7g对豆蚜的触杀活性与伊维菌素相当，7h、7i的触杀活性高于伊维菌素，毒力分别为伊维菌素的1.62和2.66倍。
[0077] 表1 化合物7a-7i对朱砂叶螨（T.cinnabarinus）和豆蚜（A. craccivora）的生物活性