一种富含萝卜硫素青花菜芽的培育方法

摘要

本发明公开了一种富含萝卜硫素青花菜芽的培育方法，特点是包括费菜粗黄酮的提取、自制培养液的制备的步骤，青花菜种子的选择及处理的步骤，青花菜种子的萌发直至青花菜种子露白的步骤，最后将露白的青花菜种子置于用自制培养液浸湿的纱布上，在一定光照条件，温度为20～25℃，湿度为80～90%的环境下培育，并每隔24小时喷洒自制培养液，直至青花菜芽长至8～10mm或者青花菜根10～12mm即可采收，得到富含萝卜硫素青花菜芽，优点是具有抗腐性强、产量高、萝卜硫素含量高且培育方法简单、见效快。

权利要求

1.一种富含萝卜硫素青花菜芽的培育方法，其特征在于包括以下步骤：(1)青花菜种子的选择和处理

挑选当年产收、无霉变和破损、无杂质、颗粒饱满的青花菜种子，将挑选好的青花菜种子置于质量浓度为7～9％的费菜粗黄酮水溶液中浸泡8～12小时后，用清水冲洗3遍；

所述的费菜粗黄酮制备方法如下：将新鲜费菜于70～80℃干燥24～36小时后用药用粉碎机粉碎并过80目筛得到费菜粉，将费菜粉与30％乙醇溶液按料液比1:50的比例混合后，在50～60℃下浸提4～5小时，再在3000r/min转速下离心10min后，取上清液真空抽滤后得到费菜粗黄酮浸提液，将费菜粗黄酮浸提液冷冻干燥得到费菜粗黄酮；

(2)青花菜种子的萌发

将清洗后的青花菜种子置于玻璃容器或塑料容器中，采用经清水浸湿的多层纱布将青花菜种子覆盖后，将青花菜种子置于温度为25～30℃、湿度为80～90％的环境下进行培养萌芽直至青花菜种子露白；

(3)富含萝卜硫素青花菜芽的培育

将露白的青花菜种子置于用自制培养液浸湿的纱布上，在一定光照条件，温度为20～

25℃，湿度为80～90％的环境下培育，并每隔24小时喷洒自制培养液，直至青花菜芽长至

8～10mm或者青花菜根长10～12mm即可采收，得到富含萝卜硫素青花菜芽。

2.根据权利要求1所述的一种富含萝卜硫素青花菜芽的培育方法，其特征在于所述的自制培养液原料及其重量份数如下：

3.根据权利要求1所述的一种富含萝卜硫素青花菜芽的培育方法，其特征在于步骤(3)光照条件为设置如下：

00:00≤黑暗＜06:00

06:00≤白光＜12:00

12:00≤紫外UV-C＜12:05或者12:00≤紫外UV-A＜12:05

12:05≤白光＜18:00

18:00≤黑暗＜24:00。

说明书

一种富含萝卜硫素青花菜芽的培育方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种青花菜芽的培育方法，尤其是涉及一种富含萝卜硫素青花菜芽的培育方法。

背景技术

[0002] 萝卜硫素是一种多功能酶诱导物，可诱导机体产生Ⅱ型解毒酶-谷胱甘肽转移酶（GST）、醌还原酶（QR），此酶能中和可疑致癌物质，防止致癌物质破坏健康细胞内的遗传因子，从而起到抗癌作用。

[0003] 青花菜又名绿菜花、青花菜、嫩茎花椰菜等，属十字花科芸薹属甘蓝种的一个变种，为一、二年生草本植物，原产于意大利，约19世纪初引进到中国。青花菜中的营养成分，不仅含量高，而且十分全面，其中的萝卜硫素含量居所有蔬菜之首，英国科学家在1997年初的一次抗癌蔬菜研究结果表明，西兰花中含有葡萄糖异硫氰酸盐类的辅助化合物，从葡萄糖异硫氰酸盐中分解出了萝卜硫素，并从西兰花中分离出了带有萝卜硫素生长基因的DNA物质。青花菜中萝卜硫素的含量较低，难以实现工业化生产，并且目前国内对青花菜的研究主要集中在青花菜的贮藏保鲜、品种选育等方面，但是针对青花菜中萝卜硫素等具有生理活性物质的富集及强化方面的研究较少，因此找到一种提高青花菜中萝卜硫素含量的方法成为青花菜资源进一步开发利用的关键。

发明内容

[0004] 本发明所要解决的技术问题是提供一种具有抗腐性强、产量高、萝卜硫素含量高且培育方法简单、见效快的富含萝卜硫素青花菜芽的培育方法。

[0005] 本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种富含萝卜硫素青花菜芽的培育方法，包括以下步骤：

[0006] （1）青花菜种子的选择和处理

[0007] 挑选当年产收、无霉变和破损、无杂质、颗粒饱满的青花菜种子，将挑选好的青花菜种子置于质量浓度为7～9%的费菜粗黄酮水溶液中浸泡8～12小时后，用清水冲洗3遍；

[0008] （2）青花菜种子的萌发

[0009] 将清洗后的青花菜种子置于玻璃容器或塑料容器中，采用经清水浸湿的多层纱布将青花菜种子覆盖后，将青花菜种子置于温度为25～30℃、湿度为80～90%的环境下进行培养萌芽直至青花菜种子露白；

[0010] （3）富含萝卜硫素青花菜芽的培育

[0011] 将露白的青花菜种子置于用自制培养液浸湿的纱布上，在一定光照条件，温度为20～25℃，湿度为80～90%的环境下培育，并每隔24小时喷洒自制培养液，直至青花菜芽长至8～10mm或者青花菜根10～12mm即可采收，得到富含萝卜硫素青花菜芽。

[0012] 所述的费菜粗黄酮制备方法如下：将新鲜费菜于70～80℃干燥24～36小时后用药用粉碎机粉碎并过80目筛得到费菜粉，将费菜粉与30%乙醇溶液按料液比1:50的比例混合后，在50～60℃下浸提4～5小时，再在3000r/min转速下离心10min后，取上清液真空抽滤后得到费菜粗黄酮浸提液，将费菜粗黄酮浸提液冷冻干燥得到费菜粗黄酮。

[0013] 所述的自制培养液原料及其重量份数如下：

[0014] 蔗糖 0.3份

[0015] 葡萄糖 0.3份

[0016] 甘露糖 0.1份

[0017] MS培养基（不含琼脂和蔗糖） 0.3份

[0018] 费菜粗黄酮 3.0份

[0019] 蒸馏水 96.0份。

[0020] 步骤（3）光照条件为设置如下：

[0021] 00:00～06:00黑暗

[0022] 06:00～12:00白光

[0023] 12:00～12:05紫外UV-C或者UV-A

[0024] 12:05～18:00白光

[0025] 18:00～24:00黑暗。

[0026] 与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明公开了一种富含萝卜硫素青花菜芽的培育方法，包括费菜粗黄酮的提取、培养液的制备、青花菜种子的选择及处理、青花菜种子的萌发、富含萝卜硫素青花菜芽的培育，对青花菜种子的处理采用费菜粗黄酮具有一定的抑菌作用可以有效的防止青花菜芽培育过程中细菌及腐败菌的侵蚀，并且费菜粗黄酮可以刺激青花菜种子的发芽，有利于提高种子的发芽率。

[0027] 现代研究表明：青花菜芽的次生代谢产物—4-甲基硫氧丁烷芥子油苷是萝卜硫素生成的前体物质，葡萄糖、蔗糖、甘露糖可能促进了青花菜芽的次生代谢，使得青花菜芽中4-甲基硫氧丁烷芥子油苷的量增加；另外非生物环境光照、温度、水分等条件会影响青花菜芽中萝卜硫苷的代谢。因此，含有一定比例葡萄糖、蔗糖、甘露糖的培养液及光照、湿度条件可以有效地提高青花菜芽中萝卜硫素的含量。

[0028] 普通方法（MS培养基+避光）培育与本发明培育的青花菜芽萝卜硫素含量测定结果如下表：芽长(mm) 0 2 4 6 8 10
对照组(mg/g) 0.23±0.06 0.62±0.08 1.36±0.11 1.78±0.09 3.52±0.17 3.48±0.12处理组(mg/g) 0.26±0.02 0.92±0.12* 1.94±0.07** 3.29±0.13** 5.86±0.16** 5.57±0.05**[0029] 注：*与对照组具有显著性差异，**与对照组具有极显著性差异。

[0030] 由上表可知：青花菜芽中的萝卜硫素含量随着芽长的增加而逐渐升高，而当芽长大于8mm时青花菜芽中萝卜硫素的含量略有降低；与对照组相比，处理组青花菜芽中的萝卜硫素含量有显著性升高，且青花菜芽越长显著性越强，当芽长为8mm时处理组青花菜芽中萝卜硫素含量相对于对照组可提高60.06%。

附图说明

[0031] 图1为本发明富含萝卜硫素青花菜芽的培育方法流程图；

[0032] 图2为对照组和处理组中青花菜芽中萝卜硫素含量比较图。

具体实施方式

[0033] 以下结合附图实施例对本发明作进一步详细描述。

[0034] 一、具体实施例

[0035] 实施例1

[0036] 一种富含萝卜硫素青花菜芽的培育方法，包括以下具体步骤：

[0037] 1、青花菜种子的选择及处理

[0038] 挑选当年产收、无霉变和破损、无杂质、颗粒饱满的青花菜种子置于质量浓度为7～9%的费菜粗黄酮水溶液中浸泡10小时后用清水冲洗3遍；

[0039] 其中费菜粗黄酮的制备方法如下：将新鲜费菜在75℃干燥30小时后用药用粉碎机粉碎并过80目筛，将费菜粉和30%乙醇溶液按照1:50的料液比混合后在55℃下浸提4.5小时，然后将上述浸提液在3000r/min转速下离心10min后取上清液真空抽滤后，得到费菜黄酮浸提液，最后将浸提液冷冻干燥得到费菜粗黄酮；

[0040] 2、青花菜种子的萌发

[0041] 将清洗后的青花菜种子放在玻璃容器或塑料容器中，用经清水浸湿的多层纱布将青花菜种子覆盖，放在28℃、85%湿度的环境下进行培养、萌芽直至青花菜种子露白；

[0042] 3、富含萝卜硫素青花菜芽的培育

[0043] 将露白的青花菜种子置于用自制培养液浸湿的纱布上，在一定光照条件，温度为22.5℃，湿度为85%的环境下培育，并每隔24小时喷洒自制培养液，直至青花菜芽长至8～
10mm或者青花菜根10～12mm即可采收，得到富含萝卜硫素青花菜芽。

[0044] 其中自制培养液的制备方法如下：将蔗糖、葡萄糖、甘露糖、MS培养基（不含琼脂和蔗糖）、费菜粗黄酮和蒸馏水按以下重量分数混合均匀：蔗糖 0.3份 ，葡萄糖 0.3份，甘露糖 0.1份，MS培养基（不含琼脂和蔗糖） 0.3份，费菜粗黄酮 3.0份，蒸馏水 96.0份；

[0045] 光照条件为设置如下：

[0046] 00:00～06:00黑暗

[0047] 06:00～12:00白光

[0048] 12:00～12:05紫外UV-C或者UV-A

[0049] 12:05～18:00白光

[0050] 18:00～24:00黑暗。

[0051] 经该实施方法培育出的青花菜芽中萝卜硫素含量为5.81mg/g。

[0052] 实施例2

[0053] 基本同上述实施例1，其区别在于：

[0054] 1）青花菜种子的选择及处理：将挑选青花菜种子置于质量浓度为7%的费菜粗黄酮水溶液中浸泡12小时；将新鲜费菜在70℃干燥36小时后用药用粉碎机粉碎并过80目筛，然后将费菜粉和30%乙醇溶液混合后在50℃下浸提5小时；

[0055] 2）青花菜种子的萌发：将青花菜种子置于25℃、80%湿度的环境下进行培养、萌芽直至青花菜种子露白；

[0056] 3）富含萝卜硫素青花菜芽的培育：将露白的青花菜种子在温度为20℃，湿度为80%的环境下培育直至青花菜芽长至8～10mm或者青花菜根10～12mm即可采收。

[0057] 经该实施方法培育出的青花菜芽中萝卜硫素含量为5.86mg/g。

[0058] 实施例3

[0059] 基本同上述实施例1，其区别在于：

[0060] 1）青花菜种子的选择及处理：将挑选青花菜种子置于质量浓度为9%的费菜粗黄酮水溶液中浸泡8小时；将新鲜费菜在80℃干燥24小时后用药用粉碎机粉碎并过80目筛，然后将费菜粉和30%乙醇溶液混合后在60℃下浸提4小时；

[0061] 2）青花菜种子的萌发：将青花菜种子置于30℃、90%湿度的环境下进行培养、萌芽直至青花菜种子露白；

[0062] 3）富含萝卜硫素青花菜芽的培育：将露白的青花菜种子在温度为25℃，湿度为90%的环境下培育直至青花菜芽长至8～10mm或者青花菜根10～12mm即可采收。

[0063] 经该实施方法培育出的青花菜芽中萝卜硫素含量为5.77mg/g。

[0064] 二、对比试验

[0065] 1、对照组和处理组防腐效果比较（补充具体内容）

[0066] 对照组：青花菜种子→蒸馏水浸泡8～12小时→蒸馏水冲洗3遍→25～30℃、80～90%湿度条件下种子萌发→用0.3份MS培养基+99.7份蒸馏水在避光、25～30℃、
80～90%湿度条件下培育→待青花菜芽芽长至8～10mm（根10～12mm）采收；

[0067] 处理组：青花菜种子→7～9%粗黄酮溶液浸泡8～12小时→蒸馏水冲洗3遍→25～30℃、80～90%湿度条件下种子萌发→用配制培养液在一定光照条件、25～30℃、80～90%湿度条件下培育→待青花菜芽芽长至8～10mm（根10～12mm）采收。

[0068] 从青花菜种子萌芽到青花菜芽采收，对青花菜芽腐败率进行记录统计，统计结果如下表：

[0069]

[0070] 由上表可知：对照组青花菜芽的腐败率在生长过程中不断升高且采收时高达57%，而处理组青花菜芽的腐败率一直抑制在较低的范围内。

[0071] 2、对照组和处理组结果比较

[0072] 从青花菜种子萌芽到青花菜芽采收，对青花菜芽中萝卜硫素含量进行记录统计，统计结果如下图2所示，由图2可知：随着青花菜芽的生长，其中的萝卜硫素含量不断升高，当芽长为8mm时萝卜硫素含量最高，当芽长大于8mm时萝卜硫素含量有所降低；处理组青花菜芽中萝卜硫素含量明显高于对照组，且当芽长为8mm时处理组青花菜芽中萝卜硫素含量比对照组高达60.06%。

[0073] 上述说明并非对本发明的限制，本发明也并不限于上述举例。本技术领域的普通技术人员在本发明的实质范围内，作出的变化、改型、添加或替换，也应属于本发明的保护范围。