一种杏鲍菇生产种高效繁育方法

摘要

本发明公开了一种杏鲍菇菌种高效繁育方法，属于食用菌类栽培技术领域，该方法是在自制培养液中添加红薯、马铃薯，为菌种的生长提供糖分和维生素B1，同时加入的表面活性剂保证菌种和氧气充分接触，培养液经过灭菌后，接种杏鲍菇母菌种，经过2次种菌接种，便可培育出生产菌种，培养时间仅为20天左右，与常规菌种繁殖方法相比，菌种培育时间可缩短50天，菌种生产种的接种成功率达98-99%。

权利要求

1.一种杏鲍菇生产种的高效繁育方法，其特征在于包括如下步骤：

步骤（1），培养液原料的称量：按照质量百分数计，称取红薯10-20%，马铃薯10-15%，玉米粉1-3%，酵母粉0.5%，磷酸二氢钾0.1-0.5%，硫酸镁0.01-0.1%，麸皮5-10%，表面活性剂

0.01-0.1%，余量为水；

步骤（2），培养液的配制；将步骤（1）称取的红薯和马铃薯去皮后充分加热煮烂

1.9-2.1h，粉碎后，与玉米粉、酵母粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、麸皮、表面活性剂和水充分混合均匀，得到的混合液分装至小口容器中，盖好盖子进行灭菌；

步骤（3），一级菌种接种：在无菌条件下在经灭菌的小口容器中接入为培养液质量7%的母菌块，在23-25℃的黑暗条件下，在振荡器中振荡7-10天，得到一级液态菌种；

步骤（4），二级菌种接种：在无菌条件下将步骤（3）得到的一级液态菌种接种到另外的经灭菌的小口容器中，一级菌种重量占培养液质量的7%，在22-25℃的黑暗条件下，在振荡器中振荡7-10天便得到生产用液态菌种；

步骤（5），生产种接种培养：生产种接种过程中，每个菌包接种20-30ml步骤（4）得到的液态菌种，充分浸润菌包内生产基质材料，在23-25℃避光的条件下培养23-27天，菌丝体扩展到整个菌包里面的基质，证明液体菌种配置成功；最后通过子实体生产，即得杏鲍菇。

2.根据权利要求1所述的杏鲍菇生产种的高效繁育方法，其特征在于步骤（2）所述的灭菌为于灭菌锅中初始要打开放气阀进行排冷气，待压力回到零刻度时关上放气阀继续加3

温，压力达到 1.0-1.5kg/cm 时开始计时灭菌 1.5 小时。

3.根据权利要求1所述的杏鲍菇生产种的高效繁育方法，其特征在于步骤（5）所述的子实体生产方法为将菌包放置到出菇房，控制空气湿度在80%以上，光照保持400-450勒克斯，生长初期温度调至13-14℃，经过70-74h，将温度调节到16-18℃，3d后再次降温

14-17℃，培养到第15天时疏蕾，在出菇房培养总时间为17-18天，培养结束后采摘。

4.根据权利要求1所述的杏鲍菇生产种的高效繁育方法，其特征在于所述的表面活性剂为乙氧基改性三硅氧烷。

说明书

一种杏鲍菇生产种高效繁育方法

技术领域

[0001] 本发明属于食用菌类栽培技术领域，具体涉及一种杏鲍菇菌种的高效繁育方法。

背景技术

[0002] 杏鲍菇[Pleurot us eryngii (DC.et Fr.)Quèl.]属于担子菌亚门，层菌纲，无隔担子菌亚纲，伞菌目，侧耳科，侧耳属，杏鲍菇具有能提高人体免疫体、抗癌的功效，深受消费者欢迎的食用菌，市场需求旺盛，目前杏鲍菇在我国产业化开发初具规模。传统杏鲍菇栽培种菌种质量难以保证，菌种的培养包括母种、原种、栽培种、生产种的繁殖，生产环节较多，污染率高。杏鲍菇传统栽培，由母种繁育为生产种需要80天左右的时间，生产种从接种到子实体采收需要45天左右，整个周期需要125天；传统方法工序繁琐，培养时间较长，且杏鲍菇的收获指数不高，因此如何克服现有技术的不足是目前食用菌类栽培技术领域亟需解决的问题。

发明内容

[0003] 本发明的目的是为了解决现有技术的不足，提供一种杏鲍菇菌种高效繁育方法，将母菌种加入到含多种营养成分的营养液，并加入表面活性剂，在发酵罐培养成液体生产菌种。

[0004] 本发明采用的技术方案如下：

[0005] 一种杏鲍菇生产种的高效繁育方法，包括如下步骤：

[0006] 步骤（1），培养液原料的称量：按照质量百分数计，称取红薯10-20%，马铃薯10-15%，玉米粉1-3%，酵母粉0.5%，磷酸二氢钾0.1-0.5%，硫酸镁0.01-0.1%，麸皮5-10%，表面活性剂0.01-0.1%，余量为水；

[0007] 步骤（2），培养液的配制；将步骤（1）称取的红薯和马铃薯去皮后充分加热煮烂1.9-2.1h，粉碎后，与玉米粉、酵母粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、麸皮、表面活性剂和水充分混合均匀，得到的混合液分装至小口容器中，盖好盖子进行灭菌；

[0008] 步骤（3），一级菌种接种：在无菌条件下在经灭菌的小口容器中接入为培养液质量7%的母菌块，在23-25℃的黑暗条件下，在振荡器中振荡7-10天，得到一级液态菌种；

[0009] 步骤（4），二级菌种接种：在无菌条件下将步骤（3）得到的一级液态菌种接种到另外的经灭菌的小口容器中，一级菌种重量占培养液质量的7%，在22-25℃的黑暗条件下，在振荡器中振荡7-10天便得到生产用液态菌种；

[0010] 步骤（5），生产种接种培养：生产种接种过程中，每个菌包接种20-30ml步骤（4）得到的液态菌种，充分浸润菌包内生产基质材料，在23-25℃避光的条件下培养23-27天，菌丝体扩展到整个菌包里面的基质，证明液体菌种配置成功；最后通过子实体生产，即得杏鲍菇。

[0011] 本发明技术方案中步骤（2）所述的灭菌为于灭菌锅中初始要打开放气阀进行排冷3
气，待压力回到零刻度时关上放气阀继续加温，压力达到 1.0-1.5kg/cm 时开始计时灭菌
1.5 小时。

[0012] 本发明技术方案中步骤（5）所述的子实体生产方法为将菌包放置到出菇房，控制空气湿度在80%以上，光照保持400-450勒克斯，生长初期温度调至13-14℃，70-74h后将温度调节到16-18℃，3d后再次降温14-17℃，培养到第15天时疏蕾，在出菇房培养总时间为17-18天，培养结束后便可采摘。

[0013] 本发明技术方案中所述的表面活性剂为乙氧基改性三硅氧烷，产品型号IOTA-2000，安徽艾约塔硅油有限公司生产。起到增加液体气泡，提高氧气含量的功效[0014] 本发明与现有技术相比，其有益效果为：

[0015] 第一，本发明公开了一种杏鲍菇菌种高效繁育方法，主要是在自制培养液中，经过灭菌后，接种杏鲍菇母菌种，经过2次种菌接种，即可培育出生产菌种；

[0016] 第二，本发明的培养液采用马铃薯和红薯组合，无需加蔗糖和葡萄糖，充分利用马铃薯、红薯VB1含量高的特性为杏鲍菇菌种提供生长所需维生素；红薯糖分含量4%，能为种菌生长提供了充足的能量。其中在培养液中红薯占10-20%，马铃薯占10-15%；

[0017] 第三，本发明培养液添加了可降解的表面活性剂，能够增加培养液中的气泡，有利于菌种与氧气充分接触；

[0018] 第四，本发明方法省去了菌种扩繁过程中的复杂工序，由杏鲍菇母种直接培育为生产种，可以缩短菌种培养时间，提高了杏鲍菇的收获指数；

[0019] 第五，本发明培养液经过灭菌后，接种杏鲍菇母菌种，经过2次种菌接种，便可培育出生产菌种，培养时间仅为20天左右，与常规菌种繁殖方法相比，菌种培育时间可缩短50天，菌种生产种的接种成功率达98-99%。

具体实施方式

[0020] 下面结合实施例对本发明作进一步的详细描述。

[0021] 灭菌锅：型号YXQ-LS-50SII，容积60L，深圳市瑞鑫达化玻仪器有限公司；

[0022] 杏鲍菇母菌种：山东省科学食用菌研究所；

[0023] 酵母粉：北京拜尔迪生物技术有限公司;

[0024] 磷酸二氢钾（分析纯AR 99%）：天津市恒兴化学试剂制造有限公司；

[0025] 硫酸镁（分析纯AR 99%）：天津市博迪化工有限公司；

[0026] 表面活性剂：乙氧基改性三硅氧烷，产品型号IOTA-2000，安徽艾约塔硅油有限公司生产；

[0027] 豆粕粉、红薯、马铃薯、玉米粉、麸皮在饲料市场购买；

[0028] 所述的母菌块在24℃售恒温箱中，黑暗条件下保存。

[0029] 实施例1

[0030] 一种杏鲍菇生产种的高效繁育方法，包括如下步骤：

[0031] 步骤（1），培养液原料的称量：按照质量百分数计，称取红薯15%、马铃薯10%、玉米粉1%、酵母粉0.5%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.01%、麸皮5%、表面活性剂0.05%，余量为水；

[0032] 步骤（2），培养液的配制；将步骤（1）称取的红薯和马铃薯去皮后充分加热煮烂1.9h，粉碎后，与玉米粉、酵母粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、麸皮、表面活性剂和水充分混合均匀，得到的混合液分装至小口容器中，盖好盖子进行灭菌，于灭菌锅中初始要打开放气阀进
3
行排冷气，待压力回到零刻度时关上放气阀继续加温，压力达到 1.0kg/cm 时开始计时灭菌 1.5 小时；

[0033] 步骤（3），一级菌种接种：在无菌条件下在经灭菌的小口容器中接入为培养液质量7%的母菌块，在23℃的黑暗条件下，在振荡器中振荡7天，得到一级液态菌种；

[0034] 步骤（4），二级菌种接种：在无菌条件下将步骤（3）得到的一级液态菌种接种到另外的经灭菌的小口容器中，一级菌种重量占培养液质量的7%，在22℃的黑暗条件下，在振荡器中振荡7天便得到生产用液态菌种；

[0035] 步骤（5），生产种接种培养：生产种接种过程中，每个菌包接种20ml步骤（4）得到的液态菌种，充分浸润菌包内生产基质材料，在23℃避光的条件下培养23天，菌丝体扩展到整个菌包里面的基质，证明液体菌种配置成功；最后通过子实体生产，即得杏鲍菇。

[0036] 所述的子实体生产方法为将菌包放置到出菇房，控制空气湿度在80%以上，光照保持400勒克斯，生长初期温度调至13℃，70h后将温度调节到16℃，3d后再次降温14℃，培养到第15天时疏蕾，在出菇房培养总时间为17天，培养结束后便可采摘；

[0037] 其中，所述的表面活性剂为乙氧基改性三硅氧烷。

[0038] 实施例2

[0039] 一种杏鲍菇生产种的高效繁育方法，包括如下步骤：

[0040] 步骤（1），培养液原料的称量：按照质量百分数计，称取红薯10%、马铃薯15%、玉米粉2%、酵母粉0.5%、磷酸二氢钾0.2%、硫酸镁0.02%、麸皮9%、表面活性剂0.02%，余量为水；

[0041] 步骤（2），培养液的配制；将步骤（1）称取的红薯和马铃薯去皮后充分加热煮烂2.1h，粉碎后，与玉米粉、酵母粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、麸皮、表面活性剂和水充分混合均匀，得到的混合液分装至小口容器中，盖好盖子进行灭菌，于灭菌锅中初始要打开放气阀进
3
行排冷气，待压力回到零刻度时关上放气阀继续加温，压力达到 1.5kg/cm 时开始计时灭菌 1.5 小时；

[0042] 步骤（3），一级菌种接种：在无菌条件下在经灭菌的小口容器中接入为培养液质量7%的母菌块，在25℃的黑暗条件下，在振荡器中振荡10天，得到一级液态菌种；

[0043] 步骤（4），二级菌种接种：在无菌条件下将步骤（3）得到的一级液态菌种接种到另外的经灭菌的小口容器中，一级菌种重量占培养液质量的7%，在25℃的黑暗条件下，在振荡器中振荡10天便得到生产用液态菌种；

[0044] 步骤（5），生产种接种培养：生产种接种过程中，每个菌包接种30ml步骤（4）得到的液态菌种，充分浸润菌包内生产基质材料，在25℃避光的条件下培养27天，菌丝体扩展到整个菌包里面的基质，证明液体菌种配置成功；最后通过子实体生产，即得杏鲍菇。

[0045] 所述的子实体生产方法为将菌包放置到出菇房，控制空气湿度在80%以上，光照保持450勒克斯，生长初期温度调至14℃， 74h后将温度调节到18℃，3d后再次降温17℃，培养到第15天时疏蕾，在出菇房培养总时间为18天，培养结束后便可采摘；

[0046] 其中，所述的表面活性剂为乙氧基改性三硅氧烷。

[0047] 实施例3

[0048] 一种杏鲍菇生产种的高效繁育方法，包括如下步骤：

[0049] 步骤（1），培养液原料的称量：按照质量百分数计，称取红薯18%、马铃薯15%、玉米粉2%、酵母粉0.5%、磷酸二氢钾0.3%、硫酸镁0.05%、麸皮6%、表面活性剂0.01%，余量为水；

[0050] 步骤（2），培养液的配制；将步骤（1）称取的红薯和马铃薯去皮后充分加热煮烂2h，粉碎后，与玉米粉、酵母粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、麸皮、表面活性剂和水充分混合均匀，得到的混合液分装至小口容器中，盖好盖子进行灭菌，于灭菌锅中初始要打开放气阀进行
3
排冷气，待压力回到零刻度时关上放气阀继续加温，压力达到 1.3kg/cm 时开始计时灭菌
1.5 小时；

[0051] 步骤（3），一级菌种接种：在无菌条件下在经灭菌的小口容器中接入为培养液质量7%的母菌块，在24℃的黑暗条件下，在振荡器中振荡8天，得到一级液态菌种；

[0052] 步骤（4），二级菌种接种：在无菌条件下将步骤（3）得到的一级液态菌种接种到另外的经灭菌的小口容器中，一级菌种重量占培养液质量的7%，在24℃的黑暗条件下，在振荡器中振荡8天便得到生产用液态菌种；

[0053] 步骤（5），生产种接种培养：生产种接种过程中，每个菌包接种25ml步骤（4）得到的液态菌种，充分浸润菌包内生产基质材料，在24℃避光的条件下培养25天，菌丝体扩展到整个菌包里面的基质，证明液体菌种配置成功；最后通过子实体生产，即得杏鲍菇。

[0054] 所述的子实体生产方法为将菌包放置到出菇房，控制空气湿度在80%以上，光照保持430勒克斯，生长初期温度调至13.5℃，72h后将温度调节到17℃，3d后再次降温15℃，培养到第15天时疏蕾，在出菇房培养总时间为17.5天，培养结束后便可采摘；

[0055] 其中，所述的表面活性剂为乙氧基改性三硅氧烷。

[0056] 实施例4

[0057] 一种杏鲍菇生产种的高效繁育方法，包括如下步骤：

[0058] 步骤（1），培养液原料的称量：按照质量百分数计，称取红薯16%、马铃薯10%、玉米粉1.5%、酵母粉0.5%、磷酸二氢钾0.5%、硫酸镁0.05%、麸皮8%、表面活性剂0.01%，余量为水；

[0059] 步骤（2），培养液的配制；将步骤（1）称取的红薯和马铃薯去皮后充分加热煮烂2h，粉碎后，与玉米粉、酵母粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、麸皮、表面活性剂和水充分混合均匀，得到的混合液分装至小口容器中，盖好盖子进行灭菌，于灭菌锅中初始要打开放气阀进行
3
排冷气，待压力回到零刻度时关上放气阀继续加温，压力达到 1.5kg/cm 时开始计时灭菌
1.5 小时；

[0060] 步骤（3），一级菌种接种：在无菌条件下在经灭菌的小口容器中接入为培养液质量7%的母菌块，在24℃的黑暗条件下，在振荡器中振荡10天，得到一级液态菌种；

[0061] 步骤（4），二级菌种接种：在无菌条件下将步骤（3）得到的一级液态菌种接种到另外的经灭菌的小口容器中，一级菌种重量占培养液质量的7%，在23℃的黑暗条件下，在振荡器中振荡8天便得到生产用液态菌种；

[0062] 步骤（5），生产种接种培养：生产种接种过程中，每个菌包接种24ml步骤（4）得到的液态菌种，充分浸润菌包内生产基质材料，在24℃避光的条件下培养25天，菌丝体扩展到整个菌包里面的基质，证明液体菌种配置成功；最后通过子实体生产，即得杏鲍菇。

[0063] 所述的子实体生产方法为将菌包放置到出菇房，控制空气湿度在80%以上，光照保持420勒克斯，生长初期温度调至13℃，71h后将温度调节到17℃，3d后再次降温16℃，培养到第15天时疏蕾，在出菇房培养总时间为17天，培养结束后便可采摘；

[0064] 其中，所述的表面活性剂为乙氧基改性三硅氧烷。

[0065] 实施例5

[0066] 一种杏鲍菇生产种的高效繁育方法，包括如下步骤：

[0067] 步骤（1），培养液原料的称量：按照质量百分数计，称取红薯20%，马铃薯12%，玉米粉3%，酵母粉0.5%，磷酸二氢钾0.4%，硫酸镁0.1%，麸皮10%，表面活性剂0.1%，余量为水[0068] 步骤（2），培养液的配制；将步骤（1）称取的红薯和马铃薯去皮后充分加热煮烂2h，粉碎后，与玉米粉、酵母粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、麸皮、表面活性剂和水充分混合均匀，得到的混合液分装至小口容器中，盖好盖子进行灭菌，于灭菌锅中初始要打开放气阀进行
3
排冷气，待压力回到零刻度时关上放气阀继续加温，压力达到 1.4kg/cm 时开始计时灭菌
1.5 小时；

[0069] 步骤（3），一级菌种接种：在无菌条件下在经灭菌的小口容器中接入为培养液质量7%的母菌块，在24℃的黑暗条件下，在振荡器中振荡8天，得到一级液态菌种；

[0070] 步骤（4），二级菌种接种：在无菌条件下将步骤（3）得到的一级液态菌种接种到另外的经灭菌的小口容器中，一级菌种重量占培养液质量的7%，在23℃的黑暗条件下，在振荡器中振荡9天便得到生产用液态菌种；

[0071] 步骤（5），生产种接种培养：生产种接种过程中，每个菌包接种28ml步骤（4）得到的液态菌种，充分浸润菌包内生产基质材料，在24℃避光的条件下培养26天，菌丝体扩展到整个菌包里面的基质，证明液体菌种配置成功；最后通过子实体生产，即得杏鲍菇。

[0072] 所述的子实体生产方法为将菌包放置到出菇房，控制空气湿度在80%以上，光照保持440勒克斯，生长初期温度调至14℃，73h后将温度调节到17℃，3d后再次降温16℃，培养到第15天时疏蕾，在出菇房培养总时间为18天，培养结束后便可采摘；

[0073] 其中，所述的表面活性剂为乙氧基改性三硅氧烷。

[0074] 对比例1

[0075] 对比例1与实施例5的区别在于：不含有表面活性剂。

[0076] 对比例2

[0077] 对比例2与实施例5的区别在于：不含有红薯。

[0078] 对比例3

[0079] 对比例3与实施例5的区别在于：不含有马铃薯。

[0080] 本发明随机调查了实施例1~5、对比例1~3及常规方法接种的菌包各100个，菌种接种成功率见表1所示。

[0081] 表1

[0082]