一种改进的水中总氮测定方法转让专利
申请号 : CN201410403320.1
文献号 : CN104155258A
文献日 : 2014-11-19
发明人 : 张玉良 , 陈凯松
申请人 : 广州衡创测试技术服务有限公司
摘要 :
本发明提出了一种改进的水中总氮测定方法，分别取比色管，加入硝酸钾标准使用液，加水稀释至10.00ml，再加入过硫酸钾溶液，塞紧管塞后扎紧管塞后干燥冷却比色管；对比色管进行测定吸光度，分别于220nm和275nm处测定吸光度，得出校正吸光度Ar；得出校正吸光度后，求出标准系列的校正吸光度与空白溶液校正吸光度的差值A，然后根据A与对应的硝酸盐中氮质量浓度绘制标准曲线：进行污水样品中总氮含量检测。本发明采用电热恒温干燥箱进行消解时操作简便、温度容易控制，且也能满足实验要求，因此，用恒温干燥箱进行消解解决了高压灭菌锅消解存在的问题；另外，恒温干燥箱空间大，可以同时处理多个样品。
权利要求 :
1.一种改进的水中总氮测定方法，其特征在于包括以下步骤：（1）消解
取若干25ml比色管，分别加入10 mg/L的硝酸钾标准使用液0，0.3, 0.5, 0.7, 1.0,
3.0, 10.0mL，对应的硝酸钾浓度为：0，0.12, 0.20, 0.28, 0.40, 1.20, 4.00mg/L；加水稀释至10.00mL，再加入5.0mL过硫酸钾溶液，塞紧管塞后用锡箔纸捏紧管塞，或用纱布和棉线扎紧管塞；放入电热恒温干燥箱中干燥，稍冷后取出比色管；
（2）测定吸光度
向比色管中加入盐酸和水的体积比为1:9的盐酸溶液1mL，用无氨水稀释至25ml，并放置30min；使用10mm石英比色皿，在紫外分光光度计上，以水为参比，分别于220nm和275nm处测定吸光度，得出校正吸光度Ar：Ar=A220-2A275；
（3）标准曲线的绘制
得出校正吸光度后，按下式求出标准系列的校正吸光度与空白溶液校正吸光度的差值A，然后根据A与对应的硝酸盐中氮质量浓度绘制标准曲线：A=As－Ab
式中：As—标准系列溶液的校正吸光度；Ab—空白溶液的校正吸光度；
（4）样品检测
抽取污水水样，用电热恒温干燥箱消解后测定污水水样的吸光度，根据标准曲线得到污水中氮含量。
2.根据权利要求1所述的改进的水中总氮测定方法，其特征在于：所述步骤（1）中干燥操作为电热恒温干燥箱温度设置为124℃，当达到温度时开始计时，60min后关闭干燥箱。
3.根据权利要求2所述的改进的水中总氮测定方法，其特征在于：所述步骤（1）中过硫酸钾溶液的制备步骤为：称取40g 过硫酸钾、15g氢氧化钠溶于无氨水中，稀释至1000mL，贮于聚乙烯瓶中，可储存一周。
4.根据权利要求3所述的改进的水中总氮测定方法，其特征在于：所述步骤（4）中水样吸光度平行测定6次。
说明书 :
一种改进的水中总氮测定方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种总氮测定方法，特别是指一种改进的水中总氮测定方法。
背景技术
[0002] 水中的总氮含量是衡量水质的重要指标之一。其测定有助于评价水体被污染和自净状况。地表水中氮、磷物质超标时，微生物大量繁殖，浮游生物生长旺盛，出现富营养化状态。
[0003] 原有标准HJ 636-2012利于碱性过硫酸钾紫外分光光度法检测废水中总氮含量，以高压灭菌锅作为消解工具，高压灭菌锅容量小，不能测定大批量样品，分批次检测不仅浪费时间而且浪费能源，对于条件相对不好的实验室而言，无专用的压力蒸汽灭菌锅，需要与微生物共用，造成不便，而且配置蒸汽灭菌锅需要一笔不菲的开支。
发明内容
[0004] 有鉴于此，发明提出了一种改进的水中总氮测定方法，该方法不仅操作简便、温度容易控制，且能满足实验要求，可以同时处理多个样品。
[0005] 为解决上述技术问题，本发明的技术采用以下技术方案：一种改进的水中总氮测定方法，包括以下步骤：
（1）消解
取若干25ml比色管，分别加入10 mg/L的硝酸钾标准使用液0，0.3, 0.5, 0.7, 1.0,
3.0, 10.0mL，对应的硝酸钾浓度为：0，0.12, 0.20, 0.28, 0.40, 1.20, 4.00mg/L；加水稀释至10.00mL，再加入5.0mL过硫酸钾溶液，塞紧管塞后用锡箔纸捏紧管塞，或用纱布和棉线扎紧管塞；放入电热恒温干燥箱中干燥，稍冷后取出比色管；
（2）测定吸光度
向比色管中加入盐酸和水的体积比为1:9的盐酸溶液1mL，用无氨水稀释至25ml，并放置30min；使用10mm石英比色皿，在紫外分光光度计上，以水为参比，分别于220nm和275nm处测定吸光度，得出校正吸光度Ar：Ar=A220-2A275；
（3）标准曲线的绘制
得出校正吸光度后，按下式求出标准系列的校正吸光度与空白溶液校正吸光度的差值A，然后根据A与对应的硝酸盐中氮质量浓度绘制标准曲线：
A=As－Ab
式中：As—标准系列溶液的校正吸光度；Ab—空白溶液的校正吸光度；
（4）样品检测
抽取污水水样，用电热恒温干燥箱消解后测定污水水样的吸光度，根据标准曲线得到污水中氮含量。
（1）消解
取若干25ml比色管，分别加入10 mg/L的硝酸钾标准使用液0，0.3, 0.5, 0.7, 1.0,
3.0, 10.0mL，对应的硝酸钾浓度为：0，0.12, 0.20, 0.28, 0.40, 1.20, 4.00mg/L；加水稀释至10.00mL，再加入5.0mL过硫酸钾溶液，塞紧管塞后用锡箔纸捏紧管塞，或用纱布和棉线扎紧管塞；放入电热恒温干燥箱中干燥，稍冷后取出比色管；
（2）测定吸光度
向比色管中加入盐酸和水的体积比为1:9的盐酸溶液1mL，用无氨水稀释至25ml，并放置30min；使用10mm石英比色皿，在紫外分光光度计上，以水为参比，分别于220nm和275nm处测定吸光度，得出校正吸光度Ar：Ar=A220-2A275；
（3）标准曲线的绘制
得出校正吸光度后，按下式求出标准系列的校正吸光度与空白溶液校正吸光度的差值A，然后根据A与对应的硝酸盐中氮质量浓度绘制标准曲线：
A=As－Ab
式中：As—标准系列溶液的校正吸光度；Ab—空白溶液的校正吸光度；
（4）样品检测
抽取污水水样，用电热恒温干燥箱消解后测定污水水样的吸光度，根据标准曲线得到污水中氮含量。
[0006] 进一步地，所述步骤（1）中干燥操作为电热恒温干燥箱温度设置为124℃，当达到温度时开始计时，60min后关闭干燥箱。
[0007] 进一步地，所述步骤（1）中过硫酸钾溶液的制备步骤为：称取40g 过硫酸钾、15g氢氧化钠溶于无氨水中，稀释至1000mL，贮于聚乙烯瓶中，可储存一周。
[0008] 进一步地，所述步骤（4）中水样吸光度平行测定6次。
[0009] 本发明与现有技术相比具有的有益效果为：本发明采用电热恒温干燥箱进行消解时操作简便、温度容易控制，且也能满足实验要求，因此，用恒温干燥箱代替高压蒸汽灭菌器进行消解解决了高压灭菌锅消解存在的问题；另外，恒温干燥箱空间大，可以同时处理多个样品。
附图说明
[0010] 图1为本发明蒸汽灭菌器消解的标准曲线及其回归方程示意图；图2为本发明恒温干燥箱消解的标准曲线及其回归方程示意图。
具体实施方式
[0011] 为让本领域的技术人员更加清晰直观的了解本发明，下面将对本发明作进一步的说明。
[0012] 一种改进的水中总氮测定方法，包括以下步骤：（1）消解
干燥箱法
分别取7支25ml比色管，依次加入硝酸钾标准使用液0，0.3, 0.5, 0.7, 1.0, 3.0,
10.0ml，对应的硝酸钾浓度为：0，0.12, 0.20, 0.28, 0.40, 1.20, 4.00mg/L，比色管中不足10mL的向比色管中加水稀释至10.00ml，再加入5.0ml过硫酸钾溶液，塞紧管塞，用锡箔纸捏紧，或用纱布和棉线扎紧管塞，将比色管放入电热恒温干燥箱中，设置干燥箱为124℃，当达到温度时开始计时，60min后关闭干燥箱，稍冷时取出比色管，放至室温；
高压灭菌锅法
另外分别取7支25ml比色管，依次加入硝酸钾标准使用液0，0.3, 0.5, 0.7, 1.0,
3.0, 10.0ml，对应的硝酸钾浓度为：0，0.12, 0.20, 0.28, 0.40, 1.20, 4.00mg/L，比色管中不足10mL的向比色管中加水稀释至10.00ml，再加入5.0ml过硫酸钾溶液，塞紧管塞，用锡箔纸捏紧，或用纱布和棉线扎紧管塞，然后放入蒸汽灭菌器中，设置灭菌器为124℃，压
5
力（1.1 -1.4）×10 Pa，当达到温度和压力时开始计时，60min后关闭高压锅，冷却，放气，然后取出比色管放至室温；
（2）测定吸光度
向所有比色管中都加入1mL盐酸（1+9），用无氨水稀释至25mL，放置30min，使用10mm石英比色皿，在紫外分光光度计上，以水为参比，分别于220nm和275nm处测定吸光度，得出校正吸光度Ar=A220-2A275；
（3）标准曲线的绘制
在空白溶液和硝酸钾标准使用溶液制得的标准系列完成分光光度测量后，得出校正吸光度，按下式求出标准系列的校正吸光度与空白溶液校正吸光度的差值A，并根据A与对应的硝酸盐氮质量浓度绘制标准曲线：
A=As－Ab
式中：As—标准系列溶液的校正吸光度；Ab—空白溶液的校正吸光度，分别用压力蒸汽灭菌器和电热恒温干燥箱进行消解，测定5 次，测定结果如表1所示：
表1
硝酸钾（mg/L） 0 0.12 0.20 0.28 0.40 1.20 2.80
蒸汽灭菌器消解吸光度A1 0.000 0.032 0.050 0.061 0.081 0.2150.492恒温干燥箱消解吸光度A2 0.000 0.031 0.049 0.059 0.082 0.2110.485（4）样品检测
抽取污水水样两份，分别用压力蒸汽灭菌器和电热恒温干燥箱消解后测定污水水样的吸光度，根据标准曲线得到污水中氮含量，每个水样平行测定6 次，精密度结果如表2所示：
表2
从表2可见，电热恒温干燥箱消解法与压力蒸汽灭菌器消解法测得的数值基本一致，准确度和精密度都符合要求，结果表明，用碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法测定水中总氮含量时，可以用电热恒温干燥箱代替压力蒸汽灭菌器进行消解；
（5）检测限
用10 mL无氨水进行空白试验，采用完全相同的试剂和步骤进行平行操作，分别用压力蒸汽灭菌器和电热恒温干燥箱进行消解，检测10次结果如表3 所示。
干燥箱法
分别取7支25ml比色管，依次加入硝酸钾标准使用液0，0.3, 0.5, 0.7, 1.0, 3.0,
10.0ml，对应的硝酸钾浓度为：0，0.12, 0.20, 0.28, 0.40, 1.20, 4.00mg/L，比色管中不足10mL的向比色管中加水稀释至10.00ml，再加入5.0ml过硫酸钾溶液，塞紧管塞，用锡箔纸捏紧，或用纱布和棉线扎紧管塞，将比色管放入电热恒温干燥箱中，设置干燥箱为124℃，当达到温度时开始计时，60min后关闭干燥箱，稍冷时取出比色管，放至室温；
高压灭菌锅法
另外分别取7支25ml比色管，依次加入硝酸钾标准使用液0，0.3, 0.5, 0.7, 1.0,
3.0, 10.0ml，对应的硝酸钾浓度为：0，0.12, 0.20, 0.28, 0.40, 1.20, 4.00mg/L，比色管中不足10mL的向比色管中加水稀释至10.00ml，再加入5.0ml过硫酸钾溶液，塞紧管塞，用锡箔纸捏紧，或用纱布和棉线扎紧管塞，然后放入蒸汽灭菌器中，设置灭菌器为124℃，压
5
力（1.1 -1.4）×10 Pa，当达到温度和压力时开始计时，60min后关闭高压锅，冷却，放气，然后取出比色管放至室温；
（2）测定吸光度
向所有比色管中都加入1mL盐酸（1+9），用无氨水稀释至25mL，放置30min，使用10mm石英比色皿，在紫外分光光度计上，以水为参比，分别于220nm和275nm处测定吸光度，得出校正吸光度Ar=A220-2A275；
（3）标准曲线的绘制
在空白溶液和硝酸钾标准使用溶液制得的标准系列完成分光光度测量后，得出校正吸光度，按下式求出标准系列的校正吸光度与空白溶液校正吸光度的差值A，并根据A与对应的硝酸盐氮质量浓度绘制标准曲线：
A=As－Ab
式中：As—标准系列溶液的校正吸光度；Ab—空白溶液的校正吸光度，分别用压力蒸汽灭菌器和电热恒温干燥箱进行消解，测定5 次，测定结果如表1所示：
表1
硝酸钾（mg/L） 0 0.12 0.20 0.28 0.40 1.20 2.80
蒸汽灭菌器消解吸光度A1 0.000 0.032 0.050 0.061 0.081 0.2150.492恒温干燥箱消解吸光度A2 0.000 0.031 0.049 0.059 0.082 0.2110.485（4）样品检测
抽取污水水样两份，分别用压力蒸汽灭菌器和电热恒温干燥箱消解后测定污水水样的吸光度，根据标准曲线得到污水中氮含量，每个水样平行测定6 次，精密度结果如表2所示：
表2
从表2可见，电热恒温干燥箱消解法与压力蒸汽灭菌器消解法测得的数值基本一致，准确度和精密度都符合要求，结果表明，用碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法测定水中总氮含量时，可以用电热恒温干燥箱代替压力蒸汽灭菌器进行消解；
（5）检测限
用10 mL无氨水进行空白试验，采用完全相同的试剂和步骤进行平行操作，分别用压力蒸汽灭菌器和电热恒温干燥箱进行消解，检测10次结果如表3 所示。
[0013] 表3结论：试验结果表明，电热恒温干燥箱消解和压力蒸汽灭菌器消解的测定结果均满足实验室质量控制的要求，测定结果准确，采用电热恒温干燥箱进行消解时操作简便、温度容易控制，且也能满足实验要求。
[0014] 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
[0015] 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。