一种利用体外酶消化法测定玉米家禽代谢能的方法

摘要

本发明涉及一种利用体外酶消化法测定玉米家禽代谢能的方法；首先通过两步酶法(胃蛋白酶-胰酶)体外消化玉米，进行玉米体外干物质消失率(DMD)、粗蛋白消失率(CPD)与其家禽代谢能的回归分析，建立了玉米体外干物质消失率、粗蛋白消失率与家禽代谢能的数学模型，可以用于快速评定玉米的家禽代谢能。本发明可以快速评定玉米家禽代谢能且适于生产应用的方法，为更准确地配制家禽日粮提供保障。

权利要求

1.一种利用体外酶消化法测定玉米家禽代谢能的方法，其特征在于包括以下步骤：

1)玉米样品粉碎，过40～60目筛，105±2℃烘至恒重，按GB/T 6432方法测定玉米体外消化前粗蛋白含量CP0；准确称取粉碎后玉米样品M01.0g，加入浓度为1.0mg/mL pH＝

1.5～3.5的胃蛋白酶水溶液10～15mL，密封，35～42℃水浴恒温振荡100～180r/min消化4小时；将上述消化4小时后的玉米样品中加入浓度为1.0mol/L NaOH溶液0.1～0.5ml中和；向上述中和后的玉米样品中加入浓度为2.5mg/mL胰蛋白酶水溶液10～15mL，混合均匀后转移到12000～14000D的透析袋中封口；将透析袋放入300～500mL pH＝6.5～

9.0的磷酸缓冲液中，35～42℃水浴恒温振荡100～180r/min消化20小时；取出透析袋，用蒸馏水反复冲洗透析袋内消化残渣，105±2℃将残渣烘至恒重，准确称取烘至恒重残渣的质量M1，并按GB/T 6432方法测定残渣的粗蛋白含量即玉米体外消化后粗蛋白含量CP1；

分别通过以下公式计算玉米的体外干物质消失率DMD和粗蛋白消失率CPD：其中，DMD为玉米干物质消失率；

M0为玉米体外消化前的质量，单位g；

M1为玉米体外消化后的质量，单位g；

其中，CPD为玉米粗蛋白消失率；

CP0为玉米体外消化前粗蛋白含量；

CP1为玉米体外消化后粗蛋白含量；

2)将需测定玉米样品的体外干物质消失率DMD和粗蛋白消失率CPD代入数学模型AME(kcal/kg)＝4122.24－1591.43×DMD+365.70×CPD，得出玉米的家禽代谢能。

说明书

一种利用体外酶消化法测定玉米家禽代谢能的方法

(一)技术领域

[0001] 本发明涉及一种利用体外两步酶消化法评定玉米家禽代谢能的方法，属于饲料技术领域。(二)背景技术

[0002] 能量饲料是饲料的重要组成部分，饲料能量水平决定动物的采食量和正常生产性能的发挥。玉米是我国畜禽饲料生产中使用的最主要的能量饲料，其有效能值是制约饲料转化效率的主要因素。但是，在实际饲料生产中，玉米有效能值(例如家禽的代谢能)作为衡量其饲用价值的主要指标却因测定所需时间较长、对仪器的要求较高等诸多原因，除进行专门研究外基本无法进行测定，只能根据饲料成分数据库中标定的代谢能值进行配方设计。而玉米的代谢能与其品种、种植区域、加工方式等显著相关，有较大的变异范围，生产中根据数据库中固定值进行配方设计，很容易引起所配制饲料中能量过剩或不足，造成生产损失。因此，准确评定玉米的代谢能值是合理配制家禽饲料的关键，是能量饲料的合理利用的基础，对提高家禽的生产效率、节约饲料资源具有重要意义。(三)发明内容

[0003] 为了解决上述问题，本发明提供了一种利用体外酶消化法测定玉米家禽代谢能的方法；目的是：提供一种通过体外酶消化法快速评定玉米家禽代谢能且适于生产应用的方法，可以为更准确地配制家禽日粮提供保障。

[0004] 本发明通过两步酶法(胃蛋白酶-胰酶)体外消化玉米，进行玉米体外干物质消失率(DMD)、粗蛋白消失率(CPD)与其家禽代谢能的回归分析，建立了 玉米体外干物质消失率、粗蛋白消失率与家禽代谢能的数学模型，可以用于快速评定玉米的家禽代谢能。建立的玉米家禽代谢能(AME)估测数学模型如下：

[0005] AME(kcal/kg)＝4122.24－1591.43×DMD+365.70×CPD

[0006] 一种利用体外酶消化法测定玉米家禽代谢能的方法，包括以下步骤：

[0007] 1、玉米样品粉碎，过40～60目筛，105±2℃烘至恒重，按GB/T 6432方法测定玉米体外消化前粗蛋白含量(CP0)；准确称取粉碎后玉米样品1.0g(M0，精确到0.0001g)，加入浓度为1.0mg/mL胃蛋白酶水溶液10～15mL(pH＝1.5～3.5)，密封，35～42℃水浴恒温振荡(100～180r/min)消化4小时；将上述消化4小时后的玉米样品中加入浓度为1.0mol/L NaOH溶液0.1～0.5ml中和；向上述中和后的玉米样品中加入浓度为2.5mg/mL胰蛋白酶水溶液10～15mL，混合均匀后转移到12000～14000D的透析袋中封口；将透析袋放入300～500mL磷酸缓冲液(pH＝6.5～9.0)中，35～42℃水浴恒温振荡(100～180r/min)消化
20小时；取出透析袋，用蒸馏水反复冲洗透析袋内消化残渣，105±2℃将残渣烘至恒重，准确称取烘至恒重残渣的质量(M1)，并按GB/T 6432方法测定残渣的粗蛋白含量(即玉米体外消化后粗蛋白含量，CP1)；分别通过以下公式计算玉米的体外干物质消失率(DMD)和粗蛋白消失率(CPD)：

[0008]

[0009] 其中，DMD为玉米干物质消失率；

[0010] M0为玉米体外消化前的质量，单位g；

[0011] M1为玉米体外消化后的质量，单位g；

[0012]

[0013] 其中，CPD为玉米粗蛋白消失率；

[0014] CP0为玉米体外消化前粗蛋白含量；

[0015] CP1为玉米体外消化后粗蛋白含量。

[0016] 2、将需测定玉米样品的体外干物质消失率(DMD)和粗蛋白消失率(CPD)代入数学模型AME(kcal/kg)＝4122.24－1591.43×DMD+365.70×CPD，得出玉米的家禽代谢能。

[0017] 本发明的使用效果是：作为一种评定玉米家禽代谢能的方法，适用于生产中玉米代谢能值的快速测定，能有效提高饲料配方计算的准确性，提高能量利用率，节约饲料资源。(三)具体实施方式

[0018] 实施例1

[0019] 1、采集5个玉米样品，分别编号为1、2、3、4和5号；按照本发明的方法分别测定每个玉米样品的体外干物质消失率(DMD)和粗蛋白消失率(CPD)，将所测定的结果代入构建的数学模型AME(kcal/kg)＝4122.24－1591.43×DMD+365.70×CPD中，得到玉米代谢能的评定值(表1)。

[0020] 为验证评定值与玉米代谢能真实值的吻合程度，按照以下方法测定五种玉米代谢能的实测值：用健康、体重相近的成年海兰褐公鸡，置于环控代谢测定室内单笼单只饲养，舍温为24℃±3℃，光照强度20LX，每日光照时间为16h。在非试验期，饲喂能够满足公鸡生理需要的全价配合日粮，自由饮水和采食。试验开始前，试验鸡随机分为5个组(分别测定5个玉米样品)，每组4个重复，每个重复3只，正常饲喂适应7天后，试验鸡禁食、自由饮水，连续排空32小时，之后强饲40g粉碎的玉米样品，连续收集32小时的排泄物。分别测定单位质量玉米样品及对应排泄物的能值，二者之差即为玉米代谢能的实测值(表1)。

[0021] 2.试验结果

[0022] 试验结果表明，玉米代谢能评定值和实测值差异较小，5个样品的变异幅度为0.17％～1.70％，评定模型的测定结果准确(表1)。

[0023] 表1 玉米样品代谢能实测值与评定值对比(kcal/kg)

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