离心力和剪切力应答蛋白1（RECS1）在治疗心肌肥厚中的功能及应用

摘要

本发明公开了一种离心力和剪切力应答蛋白1（RECS1）在治疗心肌肥厚中的功能及应用，属于基因的功能与应用领域。本发明以RECS1基因敲除小鼠和心脏特异性RECS1转基因小鼠为实验对象，通过主动脉弓缩窄手术模拟心肌肥厚疾病模型研究RECS1基因的表达与心肌肥厚之间的关系，结果表明RECS1基因敲除显著促进了心肌肥厚、纤维化，恶化心功能；RECS1基因过表达显著抑制了心肌肥厚及其纤维化，改善心功能，即RECS1基因具有能够保护心脏功能和抑制心肌肥厚的作用。基于RECS1基因的作用，RECS1可用于制备保护心脏功能和/或预防、缓解和/或治疗心肌肥厚的药物，为心肌肥厚的治疗提供了一条有效的新途径。

权利要求

1.RECS1在制备预防、缓解和/或治疗心肌肥厚的药物中的应用。

说明书

离心力和剪切力应答蛋白1（RECS1）在治疗心肌肥厚中的

功能及应用

技术领域

[0001] 本发明属于基因的功能与应用领域，特别涉及一种离心力和剪切力应答蛋白1（RECS1）在治疗心肌肥厚中的功能和应用，具体是在制备预防、缓解和/或治疗心肌肥厚药物中的应用。

背景技术

[0002] 心血管系统疾病是目前世界的头号杀手之一，在我国目前心血管系统疾病的发生率已提高至各种主要疾病的首位。心肌肥厚在当今社会中十分普遍，心肌肥厚是持续性压力或者容量负荷过重引起的适应性变化，是猝死、心肌梗死、充血性心力衰竭的独立危险因素，能增加住院率和死亡率。心肌肥厚由多种因素调节，且是一种复杂的动态过程。研究表明持续的压力和/或容量负荷过度，可增加室壁应力，导致心肌肥厚。其特征大体可见心脏重量明显增加、心室结构改变；细胞水平上可见，心肌细胞长度和/或宽度增大，肌节数量增加、排列紊乱，胶原含量增加，纤维组织过度增生，细胞排列紊乱松散；分子水平上，转化生长因子-β（TGF-β）、血管紧张素II（AngII）、内皮素、儿茶酚胺等各种胞外刺激信号可激活信号转导，诱导胚胎型基因的表达，从而促使细胞发生肥大表型变化，最终导致心肌细胞肥大。左室肥厚是公认的心血管疾病死亡率的危险因素，如果未经治疗，其可以导致收缩和舒张功能不全并最终导致心力衰竭。然而，现有的研究并不能完全诠释心肌肥厚的发生机制。因此，寻找抑制心肌肥厚的特异性分子，对于进一步阐述心肌肥厚的发生发展机制，具有重大的理论意义，可为临床防治心肌肥厚提供新靶点和新策略。

[0003] RECS1（responsive to centrifugal force and shear stress gene 1）是血液剪切力应答蛋白，属于Bax抑制子-1（BI-1）家族的新成员，即Tmbim1（transmembrane Bax inhibitor motif-containing protein 1）。BI-1家族是一组具有抗细胞凋亡等生物功能的多次跨膜小分子蛋白，主要包括BI-1、Lifeguard、GAAP（高尔基发病蛋白质）和RECS1等。层流剪切应力使RECS1的表达增高，以保持血管系统的稳定状态，避免血管长期暴露于血流应力和各种生物活性物质而造成的损伤。Nojima实验室最早报道血液剪应力诱导RECS1的转录表达，并克隆得到RECS1的cDNA和氨基酸序列【1】。人RECS1是1个有311个氨基酸的7次跨膜蛋白，与Lifeguard 和谷氨酸结合蛋白具有很高的同源性。在心肌肥厚过程中，一般伴随着炎症和心肌细胞的凋亡，NF-κB信号通路主要作为介导炎性反应的细胞内信号转导通路。研究证实NF-κB的激活是心肌细胞肥大所必需的，最近的研究提示NF-κB信号通路可能在心肌肥厚的发生发展中起着重要作用【2，3】；Fas基因是备受关注的促凋亡基因，刘继东等发现自发性高血压大鼠早期心肌肥厚时心肌Fas表达已经升高，可能参与后期心衰的发生【4】。有报道表明稳定表达RECS1的小鼠成纤维细胞对TNFR2特异的激动性抗体表现出一定的耐受性，显示RECS1可能参与TNF-α信号的调控【5】。RECS1结合TNFR1，并抑制过量表达TNFR1诱导的核转录因子-κB (NF-κB)活化【6】，从而负调控TNF-α信号。RECS1基因敲除的小鼠年老时易患主动脉囊性中层坏死并表现有大动脉扩张症，表明RECS1可能参与调控血管的发育重塑。免疫组化分析发现，RECS1基因敲除的小鼠主动脉基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达水平明显提高【7，8】。近期的研究结果显示，RECS1可减少细胞表面Fas的表达，从而保护Fas配体（FasL）诱导的凋亡【9】。因此推测，RECS1可能在心肌肥厚中起到重要作用，为心肌肥厚引起的心脏疾病的治疗研究提供的新的思路。

[0004] 【参考文献】

[0005] 1、H.Yoshisue，K.Suzuki，A.Kawabatal, Atherosclerosis 162，323(Jun,2002).

[0006] 2、Freund C, Schmidt-Ullrich R, Baurand A, et al. Requirement of nuclear factor-NF-κB in angiotensin Ⅱ and isoproterenol-induced cardiac hypertrophy in vivo. Circulation, 2005, 111(18):2319-2325.

[0007] 3、Young D, Popovic ZB, Jones WK, et al. Blockade of NF-kappa B using I kappa B alpha dominant-negative mice ameliorates cardiac hypertrophy in myotrophin-overexpressed transgenic mice. J Mol Biol, 2008, 381(3):559-568.[0008] 4、刘继东，鹿克风，张欣等。自发性高血压大鼠心肌fas 基因表达与左室肥厚关系探讨。高血压杂志，2003.

[0009] 5、蔡慈峰，吴明江，廖志勇．中国生物化学与分子生物学报26，36（Jan, 2010）[0010] 6、廖志勇．中国生物化学与分子生物学报27，412（May, 2011）.[0011] 7、Zhao H, Ito A, Sakai N, Matsuzawa Y, Yamashita S, Nojima H. RECS1 is a negative regulator of matrix metalloproteinase-9 production and aged RECS1 knockout mice are prone to aortic dilation. Circulation Journal. 2006;70(5):615-24.

[0012] 8、Zhao H, Ito A, Kimura SH, Yabuta N, Sakai N, Ikawa M, Okabe M, Matsuzawa Y, Yamashita S, Nojima H. RECS1 deficiency in mice induces susceptibility to cystic medial degeneration. Genes Genet Syst. 2006;81(1):41-50.

[0013] 9、Shukla S, Fujita K, Xiao Q, Liao Z, Garfield S, Srinivasula SM. A shear stress responsive gene product PP1201 protects against Fas-mediated apoptosis by reducing Fas expression on the cell surface. Apoptosis.2011;16(2):162-73。

发明内容

[0014] 为解决上述现有技术的缺陷和不足，本发明的目的在于确定RECS1的表达和心肌肥厚的相互关系，提供一种RECS1在筛选保护心脏功能和/ 或预防、缓解和/治疗心肌肥厚的药物中的应用，提供一个用于保护心脏功能和/或预防、缓解和/或治疗心肌肥厚的靶基因RECS1的新用途。

[0015] 本发明的目的通过下述技术方案实现：

[0016] 本发明通过试验确定RECS1表达与心肌肥厚之间的关系：

[0017] 1、RECS1基因敲除显著促进了心肌肥厚、纤维化，恶化心功能

[0018] 本发明选用野生型小鼠、RECS1基因敲除小鼠进行试验，并将每种小鼠分成假手术组和手术组，每组10只小鼠。手术组给予主动脉弓缩窄手术，假手术组不予主动脉弓缩窄，然后通过对假手术组和手术组的各组小鼠进行心心脏心肌肥厚、纤维化及心功能的测定，研究RECS1基因敲除对主动脉弓缩窄诱导的心肌肥厚的影响。结果表明敲除RECS1基因所致的RECS1缺陷显著恶化心肌肥厚、纤维化及心功能（图1、图2、图3、图7）。

[0019] 2、RECS1基因过表达显著抑制了心肌肥厚及其纤维化，改善心功能[0020] 本发明选用心脏特异性RECS1转基因小鼠和非转基因小鼠进行试验，并将每种小鼠分成假手术组和手术组，每组10只小鼠。手术组给予主动脉弓缩窄手术，假手术组不予主动脉弓缩窄，然后通过对假手术组和手术组的各组小鼠进行心心脏心肌肥厚、纤维化及心功能的测定，研究RECS1基因过表达对主动脉弓缩窄诱导的心肌肥厚的影响。结果表明过表达RECS1基因显著抑制心肌肥厚及纤维化，保护心功能（图4、图5、图6、图8）。

[0021] 由以上结果可知RECS1基因缺陷显著促进了心肌肥厚、纤维化，恶化心功能，RECS1基因过表达显著抑制了心肌肥厚、纤维化，保护心功能。因此RECS1基因具有保护心功能和抑制心肌肥厚及纤维化的作用，特别是RECS1基因能够抑制主动脉弓缩窄引起的心肌肥厚相关疾病发生的作用。

[0022] 一种RECS1在心肌肥厚中的功能，主要体现在RECS1基因具有保护心功能和抑制心肌肥厚的作用，特别是RECS1基因能够抑制主动脉弓缩窄引起的心肌肥厚发生的作用。

[0023] 针对RECS1的上述功能，提供一种RECS1的应用，主要体现为RECS1在保护心脏和治疗心肌肥厚中的应用，特别是RECS1在制备保护心脏功能和/或预防、缓解和/或治疗心肌肥厚的药物中的应用。

[0024] 一种保护心脏功能的药物，包含RECS1。

[0025] 一种预防、缓解和/治疗心肌肥厚的药物，包含RECS1。

[0026] 本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：

[0027] （1）本发明发现RECS1基因的新功能，即RECS1基因具有能够保护心脏功能和抑制心肌肥厚的作用。

[0028] （2）基于RECS1在保护心脏功能和抑制心肌肥厚疾病中的作用，其可以用于制备保护心脏功能和/或预防、缓解和/或治疗心肌肥厚的药物。

附图说明

[0029] 图1是WT和RECS1-KO小鼠AB模型4周后HW/BW、LW/BW及HW/TL的统计柱状图，结果显示RECS1敲除显著促进HW/BW、LW/BW及HW/TL（*：p＜0.05 vs WT Sham组，#：p＜0.05 vs WT AB组）。

[0030] 图2是WT和RECS1-KO小鼠AB模型4周后心脏组织HE染色及心肌细胞横截面积统计柱状图，结果显示RECS1敲除显著促进心肌细胞肥大（*：p＜0.05 vs WT Sham组，#：p＜0.05 vs WT AB组）。

[0031] 图3是WT和RECS1-KO小鼠AB模型4周后心脏组织天狼星红染色图，结果显示RECS1敲除显著促进心脏的纤维化。

[0032] 图4是NTG和TG小鼠AB模型4周后HW/BW、LW/BW及HW/TL的统计柱状图，结果显示RECS1过表达会抑制HW/BW、LW/BW及HW/TL（*：p＜0.05 vs NTG Sham组，#：p＜0.05 vs NTG AB组）。

[0033] 图5是NTG和TG小鼠AB模型4周后心脏组织HE染色及心肌细胞横截面积统计柱状图，结果显示RECS1过表达会抑制心肌细胞肥大（*：p＜0.05 vs NTG Sham组，#：p＜0.05 vs NTG AB组）。

[0034] 图6是NTG和TG小鼠AB模型4周后心脏组织天狼星红染色图，结果显示RECS1过表达会抑制心脏的纤维化。

[0035] 图7是WT和RECS1-KO小鼠AB模型4周后超声检测心功能结果统计柱状图，结果显示RECS1敲除显著恶化心功能；其中，LVEDD为左室舒张末期内径、LVESD为左室收缩末期内径、EF为射血分数、FS为短轴缩短率（*：p＜0.05 vs WT Sham组，#：p＜0.05 vs WT AB组）。

[0036] 图8是NTG和TG小鼠AB模型4周后超声检测心功能结果统计柱状图，结果显示RECS1过表达显著保护心功能；其中，LVEDD为左室舒张末期内径、LVESD为左室收缩末期内径、EF为射血分数、FS为短轴缩短率（*：p＜0.05 vs NTG Sham组，#：p＜0.05 vs NTG AB组）。

具体实施方式

[0037] 下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

[0038] 实验用动物及饲养

[0039] 实验动物：选用8-10周龄、体重在23.5-27.5g，雄性，心脏特异性Cre小鼠（α-MHC-Cre（命名WT），背景为C57BL/6，购自Jackson Laboratory，货号005650）、RECS1基因敲除小鼠（RECS1-KO，购自 日本RIKEN公司，货号：RIKEN01772）、心脏特异性RECS1转基因小鼠（TG，心脏特异性RECS1转基因小鼠由武汉大学心血管病研究所李红良教授实验室构建）及非转基因小鼠（NTG，同龄同窝对照非转基因小鼠）为实验对象。

[0040] 心脏特异性RECS1转基因小鼠的构建：

[0041] 用 引 物（上 游 引 物：GTTGTCGACGCCACCATGTCCAATCCCAGTGCCCC；下 游 引 物：GCCAAGCTTAGTCTCTACTTCCTACGAGC）扩增小鼠RECS1全长基因（NCBI，Gene ID：69660，NM_027154），把扩增的RECS1全长基因连接于心肌肌球蛋白重链（α-MHC）启动子下游，将构建的序列通过显微注射构造成受精胚胎（C57BL/6J背景），得到心脏特异性RECS1转基因老鼠。（上述的转基因小鼠参照下述文献制备：Jiang DS, Bian ZY, Zhang Y, Zhang SM, Liu Y, Zhang R et al. Role of interferon regulatory factor 4 in the regulation of pathological cardiac hypertrophy. Hypertension 2013; 61:1193-1202.）[0042] 饲养环境：所有实验小鼠均饲养在武汉大学心血管病研究所SPF级实验动物中心。SRF级大小鼠饲料购自北京华阜康生物科技有限公司。饲养条件：室温在22-24℃之间，湿度在40-70%之间，明暗交替照明时间为12h，自由饮水摄食。

[0043] 实施例1 心肌肥厚（AB）模型获得

[0044] 1. 实验动物分组：雄性背景C57BL/6野生型小鼠（WT）、RECS1基因敲除小鼠（RECS1-KO）及心脏特异性RECS1转基因小鼠（TG）和非转基因小鼠（NTG），通过主动脉缩窄术建立心肌肥厚模型。随机分为8组，分组如下：C57BL/6背景野生型小鼠假手术组（WT Sham）及AB术组（WT AB）、RECS1基因敲除小鼠假手术组（RECS1-KO Sham）及AB术组（RECS1-KO AB）、非转基因小鼠假手术组（NTG Sham）及AB术组（NTG AB）、心脏特异性RECS1转基因小鼠假手术组（TG Sham）及AB术组（TG AB）。

[0045] 2. 心肌肥厚模型采用主动脉弓缩窄手术，模型操作流程：

[0046] 2.1 术前准备

[0047] （1）麻醉：先给小鼠称重，按照90mg/kg体重计算所需麻药（3%戊巴比妥钠）量，通过腹腔注射，并记录注射时间点。夹尾、夹趾无明显反应且小鼠状态良好为麻醉成功标准（一般注射后约10min无明显反应，以麻醉后约50min小鼠夹趾有反应，麻醉后30min左右为最佳手术时间）。

[0048] （2）术区准备：将小鼠左胸部、左侧胸部及左前肢腋下的皮肤去毛。剃毛后用湿纱布擦拭术区去除鼠毛，以不影响手术视野为宜。

[0049] （3）气管插管：用橡皮筋将小鼠上门齿固定于V形板斜面上，并迅速将气管插管经声门准确插入气管内，随后右侧卧位置于加热垫上（加热垫需提前预热），然后将气管插管与呼吸机连接，固定小鼠。若小鼠的胸廓起伏与呼吸机频率一致，说明气管插管成功。

[0050] 2.2 主动脉弓降支结扎术

[0051] 取右侧卧位，小鼠左前肢置于右前肢上方，并用医用胶带将两前肢固定。右胸部下方垫入棉签，抬高胸廓，依次用碘酒及体积分数为75%酒精对手术区域皮肤消毒。左手持眼科镊将左胸部皮肤捏起，右手持眼科剪剪开皮肤约1cm，依次分离肌肉及软组织，于第2-3肋水平打开胸腔，用棉签稍拨开左肺，游离主动脉弓降支，将7-0手术缝线穿过血管，并在血管上方平行放置一段26G（25.0-27.5g小鼠）或者27G（23.5-25.0g）注射器针头，将血管及针头一起结扎好，再抽出针头即可达到相应程度的血管缩窄。结扎完毕后依次缝合，关闭胸腔，用注射器从缝口处插入胸腔并抽出1cc气体以恢复胸腔内负压，拔出注射器后迅速缝合皮肤切口。假手术组（Sham）在游离出主动脉降支后只穿线不结扎，其余步骤同心肌肥厚（AB）模型组。

[0052] 2.3 术后护理

[0053] 主动脉弓降支结扎术后，待小鼠出现自主呼吸、夹趾出现强烈反应，拔出气管插管，并将小鼠放入装有高压灭菌过的垫料、饲料和饮用水的饲养笼内，于饲养室继续饲养观察。RECS1基因敲除小鼠及野生型小鼠术后4周、非转基因小鼠及心脏特异性RECS1转基因小鼠术后4周分别进行各项指标的检测。

[0054] 实施例2 小鼠心肌肥厚（AB）模型心肌肥厚及纤维化检测

[0055] 1. 取材

[0056] （1）前期工作：预先准备装有20mL的体积分数10%甲醛的尿杯，并贴好标签（小鼠编号、组别、手术类型及取材日期）。将倒满质量分数10% KCl溶液的培养皿置于取材处。打开分析天平，调零备用。再称重处死小鼠。

[0057] （2）取材：眼科弯镊夹住心耳下方的血管蒂，剪下心脏，迅速置于质量分数10% KCl溶液中。待心脏停跳在舒张期后，置于灭菌纱布上，轻轻挤压心腔内液体，蘸干表面液体后，称重并记录，将心脏放入相应的尿杯中，固定48h后用于病理学检测。

[0058] （3）相关测量及计算：取出小鼠肺脏，修剪后滤纸吸干，称重并记录。剪开小鼠后肢胫骨处皮肤，测量并记录胫骨长度。计算心重与体重的比值（HW/BW），肺重与体重的比值（LW/BW）以及心重与胫骨长度的比值（HW/TL）。

[0059] 2. 病理学检测

[0060] 2.1 制备石蜡标本切片

[0061] 主要操作程序包括修剪心脏→包埋框处理→流水冲洗→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→摊片→晾干或烘烤后备用。

[0062] 2.2 苏木精-伊红（HE）染色

[0063] 主要步骤为：55℃烘烤30min→二甲苯5min，3次→100%酒精1min→95%酒精1min→70%酒精1min→双蒸水1min→苏木素溶液（珠海贝索，BA-4021）5min→水洗1min→1%盐酸酒精（取3mL浓盐酸与297mL 70%酒精充分混合均匀）1-3s→水洗1min→Scott液（碳酸氢钠0.35g，七水硫酸镁2g，两者溶于100mL蒸馏水）1min→水洗
1min→伊红溶液（珠海贝索，BA-4024）3-5min→蒸馏水洗去浮色→70%酒精1s→95%酒精1s→100%酒精30s，3次→二甲苯2min，3次→趁二甲苯未干立即封片→通风橱内吹干，显微镜拍照。

[0064] HE染色图片统计：每张图片选择3个以上边界清楚，核大致位于中央的细胞，用Image-Pro Plus 6.0软件圈细胞面积。

[0065] 2.3 天狼星红（PSR）染色

[0066] 主要步骤为：55℃烘烤30min→二甲苯2min，3次→100%酒精1min→95%酒精1min→70%酒精1min→流水冲洗10min→双蒸水1min→质量分数0.2%磷钼酸2min→0.1%天狼猩红苦味酸溶液滴于组织上，湿盒中染色90min→去除残液→0.01N盐酸4s→70%酒精1次→90%酒精1次→100%酒精30s，3次→二甲苯2min，3次→趁二甲苯未干立即盖玻片封片，显微镜拍照。

[0067] 心肌组织由心肌细胞和间质组织组成，心脏是一终末分化器官，心肌细胞失去增殖能力，各种生理或病理性刺激引起的心肌细胞反应，只能是单个细胞的体积增大而不能在数量上增殖。因此，在心肌肥厚的病理生理过程中，主要表现为心肌细胞体积增大，肌节数量增多，细胞排列紊乱，心脏间质改变包括心肌成纤维细胞的增殖与转化，胶原纤维密度增加，胶原分泌增加，胶原比例平衡失调等。

[0068] WT和RECS1-KO小鼠AB模型后的表型结果见图1、图2、图3。Sham（假手术）组中WT小鼠和RECS1-KO小鼠的HW/BW、LW/BW及HW/TL之间的差异均无统计学意义；WT小鼠AB术后4周的HW/BW、LW/BW、HW/TL高于其Sham组；AB术后4周，RECS1-KO小鼠的HW/BW、LW/BW及HW/TL均较WT小鼠升高（图1）。HE染色切片可观察到：Sham组心脏无明显差异，AB组较Sham组的心脏均增大，RECS1-KO小鼠的心脏明显大于WT组小鼠；Sham组心肌肌原纤维细胞排列整齐、致密，形态完整，胞核及核仁结构清晰；AB组肌丝排列紊乱、松散，心肌细胞体积明显增大，形态不规整，胞核深染、增大、畸形，核仁模糊，RECS1-KO组则比WT组细胞肥大明显，差异有统计学意义（图2）。PSR染色后，发现AB组心室心肌间质胶原含量较Sham组增加，动脉血管周围胶原增加更为明显，胶原增粗，排列紊乱成网络状；AB术后RECS1-KO小鼠胶原含量及血管周围胶原含量大于WT组小鼠（图3）。以上结果说明经AB模型后，小鼠发生明显的心肌肥厚，RECS1-KO小鼠的心肌肥厚程度大于WT小鼠。

[0069] 图4、图5、图6是NTG和RECS1-TG小鼠AB模型后的表型结果。同样NTG小鼠AB术后4周的HW/BW、LW/BW及HW/TL高于其Sham组；AB术后4周TG小鼠的HW/BW、LW/BW及HW/TL增大的程度明显小于NTG小鼠（图4）。心脏表型，AB组较Sham组的心脏均增大，且AB术后TG小鼠心脏增大的程度远小于NTG小鼠。HE染色切片可观察到：TG小鼠AB术后心肌细胞横截面积大于Sham组，显著小于NTG小鼠AB组（图5）。PSR染色可见，TG小鼠AB术后心肌间质胶原含量及血管周围胶原含量均小于NTG小鼠AB组（图6）。以上结果说明经AB模型后，小鼠发生明显的心肌肥厚，RECS1-TG小鼠的心肌肥厚程度小于NTG小鼠。

[0070] 实施例3 心肌肥厚（AB）模型小鼠超声检测心功能

[0071] 1 前期准备

[0072] （1）麻醉机准备：先连接氧气瓶和麻醉机上的进气接口，再拧开麻醉机上加药口密封盖，迅速加入异氟烷至安全刻度后拧紧密封盖。拧开氧气瓶上总阀门，调整流量控制阀的旋钮，出气压力维持在0.2-0.3mPa。

[0073] （2）待测小鼠准备：待检测小鼠用异氟烷迅速麻醉后，左胸前区剃毛，将处理好的小鼠头部伸入麻醉剂导管套头内，以1.5-2.0%异氟烷维持小鼠稳定的麻醉状态。

[0074] 2 心功能检测

[0075] 小鼠取左侧卧位或仰卧位，并在剃毛区均匀涂抹超声耦合剂（天津成信公司）。采用高频超声诊断仪，频率为15MHz，选取标准左心室乳头肌短轴切面，测量左室舒张末期内径（LVEDD）、左室收缩末期内径（LVESD）、射血分数（EF）及短轴缩短率（FS）。

[0076] 本实施例运用M型超声心动图检测评价心肌肥厚和心功能。图7是WT和RECS1-KO小鼠AB模型后心功能检测结果图。与WT Sham组相比，WT小鼠AB术后4周表现出心功能减弱和心肌肥厚，主要表现为心肌肥厚的指标LVEDD、LVESD均不同程度的增加，而反映心功能的指标EF、FS则下降。AB术后4周，RECS1-KO小鼠心肌肥厚的指标增大的程度及反映心功能的指标下降的程度比WT小鼠明显。说明RECS1-KO小鼠的心功能更显著恶化、心肌肥厚程度更严重，这些结果均与RECS1-KO小鼠心肌肥厚更为显著的结果一致。

[0077] 图8是NTG和RECS1-TG小鼠AB模型后的超声检测结果。与NTG Sham组相比，NTG小鼠AB术后4周表现出心功能减弱和心肌肥厚。主要表现为心肌肥厚的指标LVEDD、LVESD增大，而反映心功能的指标EF、FS则下降。AB术后4周，与NTG小鼠相比，TG小鼠心肌肥厚的指标增大的程度及反反映心功能的指标下降的程度则小于NTG组。这些结果与TG小鼠心肌肥厚被抑制的结果一致。

[0078] 由以上结果可知，在主动脉弓缩窄引起的心肌肥厚疾病模型中，RECS1基因缺陷显著促进了心肌肥厚、纤维化，恶化心功能，RECS1基因过表达显著抑制了心肌肥厚、纤维化，保护心功能。因此RECS1基因具有保护心功能和抑制心肌肥厚及纤维化的作用，特别是RECS1基因能够抑制主动脉弓缩窄引起的心肌肥厚相关疾病发生的作用。

[0079] 上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。