抗病毒化合物

摘要

本发明提供了用于治疗丙型肝炎病毒(HCV)感染的式I化合物、组合物和方法。还公开了含所述化合物的药物组合物和在HCV感染的治疗中使用这些化合物的方法。

权利要求

1.式I化合物或其可药用盐

其中:

A是CH或N；

n是1或2；

R1是C1-6烷基、C3-8环烷基或苯基；

R2是–C(＝O)OR2’、–C(＝O)N(R2’)2、或者杂芳基，所述杂芳基任选地被一个或多个R2’所取代，其中所述杂芳基是 唑基或苯并 唑基；

R2’各自独立地是H或C1-6烷基；

R3是H或C1-6烷基；

R4是羟基或氨基；且

X是CH2或C(＝O)。

2.权利要求1的化合物或其可药用盐，其中R3是H且X是CH2。

3.权利要求2的化合物或其可药用盐，其中n是2。

4.权利要求2的化合物或其可药用盐，其中n是1。

5.权利要求4的化合物或其可药用盐，其中R2是–C(＝O)N(R2’)2。

6.权利要求4的化合物或其可药用盐，其中R2是 唑基或苯并 唑基，其任选地被一个或多个R2’所取代。

7.权利要求4的化合物或其可药用盐，其中R2是–C(＝O)OR2’。

8.权利要求7的化合物或其可药用盐，其中R2’是C1-6烷基。

9.权利要求8的化合物或其可药用盐，其中R1是C1-6烷基或C3-8环烷基。

10.权利要求9的化合物或其可药用盐，其中R1是环己基。

11.选自以下的化合物或其可药用盐:

(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸叔丁酯；

(2S,4S)-1-(3,3-二甲基-丁基)-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯；

(2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-哌啶-2-甲酸乙酯；

(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯；

1-羟基-萘-2-甲酸((3S,5S)-5-苯并 唑-2-基-1-环己基甲基-吡咯烷-3-基)-酰胺；

(2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-哌啶-2-甲酸甲酯；

1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-1-环己基甲基-5-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-3-基]-酰胺；

1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-1-环己基甲基-5-(5-苯基- 唑-2-基)-吡咯烷-3-基]-酰胺；

1-羟基-萘-2-甲酸((3S,5S)-1-环己基甲基-5- 唑-2-基-吡咯烷-3-基)-酰胺；

(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯；

(2S,4S)-1-苄基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯；

(2S,4S)-1-环戊基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯；

(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸苄基酰胺；

(2S,4S)-1-环己烷羰基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯；

(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸异丙基酰胺；

(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸丙基酰胺；

(2S,4S)-1-环丁基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯；

(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙基酰胺；

(2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-哌啶-2-甲酸乙基酰胺；

(2R,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯；

(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯；

(2S,4S)-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-1-异丁基-吡咯烷-2-甲酸乙酯；

(2S,4S)-4-[(1-氨基-萘-2-羰基)-氨基]-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯；

(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(8-羟基-喹啉-7-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯；

(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸酰胺；

1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-1-环己基甲基-5-(吡咯烷-1-羰基)-吡咯烷-3-基]-酰胺；

(2S,4R)-1-苄基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯；

(2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯；和

1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-5-(氮杂环丁烷-1-羰基)-1-环己基甲基-吡咯烷-3-基]-酰胺。

12.依据权利要求1至11中任意一项的化合物或其可药用盐在制备药物中的应用，所述药物用于治疗或预防丙型肝炎病毒感染。

13.药物组合物，其包含依据权利要求1-11中任意一项的化合物或其可药用盐和可药用赋形剂。

说明书

抗病毒化合物

发明领域

[0001] 本发明提供了式I化合物及其某些衍生物，其可用作丙型肝炎病毒(HCV)复制抑制剂以及用于治疗丙型肝炎感染。

[0002] 丙型肝炎病毒(HCV)感染是在相当数量的感染个体中导致慢性肝病(例如肝硬化和肝细胞癌)的主要的健康问题。目前对于HCV感染的标准治疗是聚乙二醇化干扰素-α(PEG-IFNα)与利巴韦林(RBV)的组合，其在～80％的HCV基因型2和3感染患者中及40-50％的基因型1患者中导致持续病毒应答(SVR)(Ghany MG等.2009.Hepatology 49(4):1335-1374)。IFN的全身施用伴有众多副作用，现在正为开发无IFNα的疗法而做出巨大努力，大多数是通过直接靶向涉及病毒复制的HCV蛋白(直接作用性抗病毒药，DAA)。然而已显示当DAA、诸如NS3蛋白酶和NS5A抑制剂与PEG-IFNα一起施用时增加SVR，这些类型的化合物在体内诱导耐药病毒的快速选择(Soriano V等.2011.Antimicrob.Chemother.66:1673-1686)。
因此，HCV治疗的其它选择是发展对耐药性具有更高屏障的药物、诸如病毒NS5B聚合酶的核苷类似物或靶向病毒复制所需的宿主因素的那些或二者的组合。宿主因素是非常保守的，因此，预期干扰这些因素的药物对不同基因型具有活性，而且不太可能诱导耐药病毒的出现(Bühler S&Bartenschlager R.2012.Liver Int.doi:10.1111/j.1478-3231)。

[0003] DAA的发展和成功是由于支持自主复制HCV RNA的强大的细胞培养系统。被称为复制子的该系统包含病毒复制所需的HCV基因组部分。该复制子系统提供了用于筛选靶向HCV RNA复制的抗病毒剂和用于确认直接针对重组体病毒酶、诸如NS3蛋白酶的化合物的第一个基于细胞的功能性平台。同样地，复制子系统可以用于发现作用于HCV复制所需的宿主靶点的新的化合物。

[0004] 对于开发用于治疗HCV感染的有效的治疗法有明确的和长期以来的需要。特别是需要开发可用于治疗HCV-感染患者的化合物和选择性抑制HCV病毒复制的化合物。

[0005] 发明概述

[0006] 本申请提供了式I化合物

[0007]

[0008] 其中:

[0009] n是1或2；

[0010] Q是被一个或多个Q’取代的苯基或萘；

[0011] Q’是羟基、低级烷基或卤素；

[0012] R1是低级烷基、环烷基、苯基或杂环烷基；

[0013] R2是–C(＝O)OR2’、–C(＝O)R2’、–C(＝O)ON(R2’)2、单环或二环杂芳基，其任选地被一个或多个R2’所取代；

[0014] R2’各自独立地是H、低级烷基或杂环烷基；

[0015] R3是H或低级烷基；且

[0016] X是CH2或C(＝O)；

[0017] 或其可药用盐。

[0018] 本申请提供了治疗丙型肝炎病毒(HCV)感染的方法，所述方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的式I化合物。

[0019] 本申请提供了含式I化合物和可药用赋形剂的组合物。

[0020] 发明详述

[0021] 定义

[0022] 本文中使用的单数形式的实体是指一个或多个该实体；例如化合物是指一种或多种化合物或者至少一种化合物。因此，单数形式的术语、“一种或多种”和“至少一种”在本文中可以互换使用。

[0023] 短语“如本文上面所定义”是指如本发明概述中或范围最大的权利要求中所提供的各基团的范围最宽的定义。在下面提供的所有其它实施方案中，可存在于各实施方案中并且没有被清楚定义的取代基保留了本发明概述中提供的范围最宽的定义。

[0024] 如本说明书中所用的那样，不管是在连接短语中还是在权利要求中，术语“包括”、“含有”和“包含”应被解释为具有一种开放的含义。即，该术语应被解释为与“至少具有”或“至少包括”同义。当用于一种方法的上下文中时，术语“包括”意指该方法至少包括所列举的步骤，但也可以包括另外的步骤。当用于化合物或组合物的上下文中时，术语“包括”、“含有”和“包含”意指该化合物或组合物至少包括所列举的特征或组分，但是也可以包括其他特征或组分。

[0025] 除非另外清楚说明，否则本文所用的措辞“或”是以“和/或”的“包括在内”含义而非“两者择一”的“排他性”含义进行应用的。

[0026] 本文所用的术语“独立地”是指一个变量可用于任何一种情形而不考虑在相同的化合物中是否存在具有相同或不同定义的变量。因此，在其中R"出现两次并且被定义为“独立地是碳或氮”的化合物中，两个R"可以均是碳、两个R"可以均是氮，或者一个R"可以是碳且另一个是氮。

[0027] 当任何变量在描绘和描述本发明所用的或所要求保护的化合物的任何基团或结构式中出现多于一次时，其在每次出现时的定义与其每次在其它时候出现时的定义是独立的。此外，只有当该化合物产生稳定的化合物时，取代基和/或变量的组合才是允许的。

[0028] 在键的末端的符号“*”或穿过键的符号“------”各自是指官能团或其它化学基团与包含其作为一部分的分子的其余部分的连接点。因此，例如：

[0029] MeC(＝O)OR4其中 或

[0030] 画到环系内的键(与连接到明确的顶点的键不同)表示该键可以连接在任何适宜的环原子上。

[0031] 本文中使用的术语“任选的”或“任选地”表示随后所述的事件或情况可以但不是必需发生，并且该表述包括其中事件或情况发生的情形和其中它们不发生的情形。例如，“任选被取代的”表示任选被取代的部分可以接合氢原子或取代基。

[0032] 短语“任选的键”意指该键可存在或不存在，并且该描述包括单键、双键或三键。如果一种取代基被称为“键”或“不存在”，则与该取代基相连的原子直接进行连接。

[0033] 本文所用的术语“约”用来表示近似地、在一定区域内、大约地或左右。当术语“约”与数值范围一起使用时，其通过使边界值由所给出的数值向上和或向下扩展来对该范围进行修饰。通常，本文所用的术语“约”在数值上以20％的偏离值向上和向下修饰所述的数值。

[0034] 某些化合物可表现出互变异构现象。互变异构的化合物可以以两种或多种可相互转化的物质的形式存在。质子移变互变异构体源于两个原子之间共价键合的氢原子的迁移。互变异构体一般以平衡形式存在，尝试分离单一互变异构体时通常产生一种化学和物理性质与化合物的混合物一致的混合物。平衡的位置取决于分子内的化学特征。例如，在很多脂族醛和酮如乙醛中，酮型占优势；而在酚中，烯醇型占优势。常见的质子移变互变异构体包括酮/烯醇酰胺/亚胺酸和脒 互变异构体。后两种在杂芳基和杂环中特别
常见，本发明包含化合物的所有互变异构形式。

[0035] 除非另外定义，否则本文中使用的技术和科学术语具有本发明所属领域技术人员通常所理解的含义。可以参考本领域技术人员已知的各种方法和材料。解释药理学基本原理的标准参考著作包括Goodman和Gilman的The Pharmacological Basis of Therapeutics,第10版,McGraw Hill Companies Inc.,纽约(2001)。可以用本领域技术人员已知的任何适宜材料和/或方法来实施本发明。然而，对优选的材料和方法进行了描述。
除非特别说明，否则在以下描述和实施例中所提到的材料、试剂等可以得自商业来源。

[0036] 可对本文所述的定义进行附加从而形成化学相关的组合，如“杂烷基芳基”、“卤代烷基杂芳基”、“芳基烷基杂环基”、“烷基羰基”、“烷氧基烷基”等。当术语“烷基”在另一个术语后用作后缀时，如在“苯基烷基”或“羟基烷基”中，其意指被一至两个选自具体指明的其它基团的取代基取代的如上面所定义的烷基。因此，例如，“苯基烷基”是指具有一至两个苯基取代基的烷基，因此包括苄基、苯基乙基和联苯基。“烷基氨基烷基”是具有一至两个烷基氨基取代基的烷基。“羟基烷基”包括2-羟基乙基、2-羟基丙基、1-(羟基甲基)-2-甲基丙基、2-羟基丁基、2,3-二羟基丁基、2-(羟基甲基)、3-羟基丙基等。因此，如本文所用的那样，用术语“羟基烷基”来定义下面所定义的杂烷基的子集。术语-(芳)烷基是指未被取代的烷基或芳烷基。术语(杂)芳基是指芳基或杂芳基。

[0037] 本文所用的术语“螺环烷基”意指螺环的环烷基，例如，螺环[3.3]庚烷。本文所用的术语螺杂环烷基是指螺环的杂环烷基，例如，2,6-二氮杂螺环[3.3]庚烷。

[0038] 本文所用的术语“酰基”是指式-C(＝O)R的基团，其中R是氢或如本文所定义的低级烷基。本文所用的术语“烷基羰基”表示式C(＝O)R的基团，其中R是本文所定义的烷基。术语C1-6酰基是指包含6个碳原子的-C(＝O)R基团。本文所用的术语“芳基羰基”是指式C(＝O)R的基团，其中R是芳基；本文所用的术语“苯甲酰基”是指其中R是苯基的“芳基羰基”。

[0039] 本文所用的术语“酯”表示式-C(＝O)OR的基团，其中R是本文所定义的低级烷基。

[0040] 本文所用的术语“烷基”表示包含1至10个碳原子的、无支链或有支链的饱和单价烃基团。术语“低级烷基”表示包含1至6个碳原子的直链或支链烃基团。本文所用的“C1-10烷基”是指由1至10个碳组成的烷基。烷基的实例非限制性地包括低级烷基，包括甲基、乙基、丙基、异-丙基、正-丁基、异-丁基、叔-丁基或戊基、异戊基、新戊基、己基、庚基和辛基。

[0041] 当术语“烷基”在另一个术语后用作后缀时，如在“苯基烷基”或“羟基烷基”中，其意指被一至两个选自具体指明的其它基团的取代基取代的如上面所定义的烷基。因此，例如，“苯基烷基”表示基团R'R"-，其中R'是苯基，R"是如本文所定义的亚烷基，应当清楚的是，该苯基烷基的连接点将位于亚烷基上。芳基烷基的实例非限制性地包括苄基、苯基乙基、3-苯基丙基。术语“芳基烷基”或“芳烷基”具有类似解释，只是R'是芳基。术语“(杂)芳基烷基”或“(杂)芳烷基”具有类似解释，只是R'任选地是芳基或杂芳基。

[0042] 术语“卤代烷基”或“卤代-低级烷基”或“低级卤代烷基”是指其中一个或多个碳原子被一个或多个卤素原子取代的包含1至6个碳原子的直链或支链烃基团。

[0043] 除非特别说明，否则本文所用的术语“亚烷基”表示1至10个碳原子的二价饱和直链烃基(例如，(CH2)n)或2至10个碳原子的支链饱和二价烃基(例如，-CHMe-或-CH2CH(i-Pr)CH2-)。除亚甲基外，亚烷基的开放价键不连接在同一个原子上。亚烷基的实例非限制性地包括亚甲基、亚乙基、亚丙基、2-甲基-亚丙基、1,1-二甲基-亚乙基、亚丁基、2-乙基亚丁基。

[0044] 本文所用的术语“烷氧基”意指其中烷基如上面所定义的-O-烷基，如甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、异-丙氧基、正-丁氧基、异-丁氧基、叔-丁氧基、戊氧基、己氧基，包括它们的异构体。本文所用的“低级烷氧基”表示具有如前面所定义的“低级烷基”的烷氧基。本文所用的“C1-10烷氧基”是指其中烷基是C1-10的-O-烷基。

[0045] 术语“PCy3”是指被三个环状基团三取代的膦。

[0046] 术语“卤代烷氧基”或“卤代-低级烷氧基”或“低级卤代烷氧基”是指其中一个或多个碳原子被一个或多个卤素原子取代的低级烷氧基。

[0047] 本文所用的术语“羟基烷基”或“羟基低级烷基”表示其中一至三个位于不同碳原子上的氢原子被羟基替代的如本文所定义的烷基或“低级烷基”。

[0048] 本文所用的术语“烷基磺酰基”和“芳基磺酰基”是指式-S(＝O)2R的基团，其中R分别是烷基或芳基并且烷基和芳基如本文所定义。本文所用的术语“杂烷基磺酰基”表示其中R是本文所定义的“杂烷基”的式-S(＝O)2R的基团。

[0049] 本文所用的术语“烷基磺酰基氨基”和“芳基磺酰基氨基”是指式-NR'S(＝O)2R的基团，其中R分别是烷基或芳基，R'是氢或C1-3烷基，且烷基和芳基如本文所定义。

[0050] 本文所用的术语“环烷基”是指包含3至8个碳原子的饱和碳环，即，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基或环辛基。本文所用的“C3-7环烷基”是指在碳环中包含3至7个碳的环烷基。

[0051] 术语“羧基”是指–CO2H基团。

[0052] 本文所用的术语“杂芳基”或“杂芳族的”意指具有至少一个芳族环或部分不饱和的环、每个环包含4至8个原子的混有一个或多个N、O或S杂原子、其余的环原子为碳的5至12个环原子的单环或二环基团，应当清楚的是，该杂芳基的连接点位于芳族环或部分不饱和环上。如本领域技术人员众所周知的那样，杂芳基环比其全碳的对应物的芳族特性低。因此，对于本发明的目的而言，杂芳基仅需要具有一定程度的芳族特性。杂芳基基团的实例包括具有5至6个环原子和1至3个杂原子的单环的芳族杂环，非限制性地包括吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、 嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、 唑基、4,5-二氢- 唑基、5,6-二氢-4H-[1,3]唑基、异 唑、噻唑、异噻唑、三唑啉、噻二唑和 二唑啉(oxadiaxoline)，它们可任选地被一个或多个，优选一或两个选自羟基、氰基、烷基、烷氧基、硫代、低级卤代烷氧基、烷硫基、卤素、低级卤代烷基、烷基亚硫酰基、烷基磺酰基、卤素、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、氨基烷基、烷基氨基烷基和二烷基氨基烷基、硝基、烷氧基羰基和氨基甲酰基、烷基氨基甲酰基、二烷基氨基甲酰基、芳基氨基甲酰基、烷基羰基氨基和芳基羰基氨基的取代基取代。二环基团的实例非限制性地包括喹啉基、异喹啉基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并 唑、苯并异 唑、苯并噻唑、萘啶基、5,6,7,8-四氢-[1,6]萘啶基和苯并异噻唑。二环基团可任选地在任何一个环上被取代，但连接点位于包含杂原子的环上。

[0053] 除非另外指明，否则本文所用的术语“杂环基”、“杂环烷基”或“杂环”表示由每环3至8个原子的一个或多个环、优选一至两个环(包括螺环环系)组成的混有一个或多个环杂原子(选自N、O或S(O)0-2)的单价饱和环状基团，其可任选地独立地被一个或多个、优选一或两个选自羟基、氧代、氰基、低级烷基、低级烷氧基、低级卤代烷氧基、烷硫基、卤素、低级卤代烷基、羟基烷基、硝基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、烷基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、以及其离子形式的取代基所取代。杂环基团的实例非限制性地包括吗啉基、哌嗪基、哌啶基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、六氢氮杂 基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、 唑烷基、噻唑烷基、异 唑烷基、四氢吡喃基、硫代吗啉基、奎宁环基和咪唑啉基、以及其离子形式。其实例还可以是二环，例如3,8-二氮杂-二环[3.2.1]辛烷、2,5-二氮杂-二环[2.2.2]辛烷或八氢-吡嗪并[2,1-c][1,4] 嗪。

[0054] HCV NS5A抑制剂

[0055] 本申请提供了式I化合物

[0056]

[0057] 其中:

[0058] n是1或2；

[0059] Q是被一个或多个Q’取代的苯基或萘；

[0060] Q’是羟基、低级烷基或卤素；

[0061] R1是低级烷基、环烷基、苯基或杂环烷基；

[0062] R2是–C(＝O)OR2’、–C(＝O)R2’、–C(＝O)ON(R2’)2、单环或二环杂芳基，其任选地被一个或多个R2’所取代；

[0063] R2’各自独立地是H、低级烷基或杂环烷基；

[0064] R3是H或低级烷基；且

[0065] X是CH2或C(＝O)；

[0066] 或其可药用盐。

[0067] 本申请提供了式I化合物，其中n是1。

[0068] 本申请提供了式I化合物，其中R3是H。

[0069] 本申请提供了式I化合物，其中R3是H，且n是1。

[0070] 本申请提供了式I化合物，其中X是CH2。

[0071] 本申请提供了式I化合物，其中X是CH2，且R3是H。

[0072] 本申请提供了式I化合物，其中X是CH2，且n是1。

[0073] 本申请提供了式I化合物，其中X是CH2，R3是H，且n是1。

[0074] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)N(R2’)2。

[0075] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)N(R2’)2，且n是1。

[0076] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)N(R2’)2，且R3是H。

[0077] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)N(R2’)2，且X是CH2。

[0078] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)N(R2’)2，X是CH2，R3是H，且n是1。

[0079] 本申请提供了式I化合物，其中R2是单环或二环杂芳基，其任选地被一个或多个R2’所取代。

[0080] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)OR2’。

[0081] 本申请提供了式I化合物，其中R2’是低级烷基。

[0082] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)OR2’，且R2’是低级烷基。

[0083] 本申请提供了式I化合物，其中R2是单环或二环杂芳基，其任选地被一个或多个R2’取代，X是CH2，R3是H，且n是1。

[0084] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)OR2’，X是CH2，R3是H，且n是1。

[0085] 本申请提供了式I化合物，其中R2’是低级烷基，X是CH2，R3是H，且n是1。

[0086] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)OR2’，R2’是低级烷基，X是CH2，R3是H，且n是1。

[0087] 本申请提供了式I化合物，其中R1是低级烷基或环烷基。

[0088] 本申请提供了式I化合物，其中R1是环己基。

[0089] 本申请提供了式I化合物，其中R1是低级烷基或环烷基，R2是–C(＝O)OR2’，R2’是低级烷基，X是CH2，R3是H，且n是1。

[0090] 本申请提供了式I化合物，其中R1是环己基，R2是–C(＝O)OR2’，R2’是低级烷基，X是CH2，R3是H，且n是1。

[0091] 本申请提供了式I化合物，其中n是1。

[0092] 本申请提供了式I化合物，其中R3是H。

[0093] 本申请提供了式I化合物，其中R3是H，且n是1。

[0094] 本申请提供了式I化合物，其中X是CH2。

[0095] 本申请提供了式I化合物，其中X是CH2，且R3是H。

[0096] 本申请提供了式I化合物，其中X是CH2，且n是1。

[0097] 本申请提供了式I化合物，其中X是CH2，R3是H，且n是1。

[0098] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)N(R2’)2。

[0099] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)N(R2’)2，且n是1。

[0100] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)N(R2’)2，且R3是H。

[0101] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)N(R2’)2，且X是CH2。

[0102] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)N(R2’)2，X是CH2，R3是H，且n是1。

[0103] 本申请提供了式I化合物，其中R2是单环或二环杂芳基，其任选地被一个或多个R2’取代。

[0104] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)OR2’。

[0105] 本申请提供了式I化合物，其中R2’是低级烷基。

[0106] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)OR2’，且R2’是低级烷基。

[0107] 本申请提供了式I化合物，其中R2是单环或二环杂芳基，其任选地被一个或多个R2’取代，X是CH2，R3是H，且n是1。

[0108] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)OR2’，X是CH2，R3是H，且n是1。

[0109] 本申请提供了式I化合物，其中R2’是低级烷基，X是CH2，R3是H，且n是1。

[0110] 本申请提供了式I化合物，其中R2是–C(＝O)OR2’，R2’是低级烷基，X是CH2，R3是H，且n是1。

[0111] 本申请提供了式I化合物，其中R1是低级烷基或环烷基。

[0112] 本申请提供了式I化合物，其中R1是环己基。

[0113] 本申请提供了式I化合物，其中R1是低级烷基或环烷基，R2是–C(＝O)OR2’，R2’是低级烷基，X是CH2，R3是H，且n是1。

[0114] 本申请提供了式I化合物，其中R1是环己基，R2是–C(＝O)OR2’，R2’是低级烷基，X是CH2，R3是H，且n是1。

[0115] 本申请提供了选自以下的化合物:

[0116] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸叔丁酯；

[0117] (2S,4S)-1-(3,3-二甲基-丁基)-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯；

[0118] (2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-哌啶-2-甲酸乙酯；

[0119] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯；

[0120] 1-羟基-萘-2-甲酸((3S,5S)-5-苯并 唑-2-基-1-环己基甲基-吡咯烷-3-基)-酰胺；

[0121] (2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-哌啶-2-甲酸甲酯；

[0122] 1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-1-环己基甲基-5-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-3-基]-酰胺；

[0123] 1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-1-环己基甲基-5-(5-苯基- 唑-2-基)-吡咯烷-3-基]-酰胺；

[0124] 1-羟基-萘-2-甲酸((3S,5S)-1-环己基甲基-5- 唑-2-基-吡咯烷-3-基)-酰胺；

[0125] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯；

[0126] (2S,4S)-1-苄基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯；

[0127] (2S,4S)-1-环戊基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯；

[0128] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸苄基酰胺；

[0129] (2S,4S)-1-环己烷羰基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯；

[0130] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸异丙基酰胺；

[0131] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸丙基酰胺；

[0132] (2S,4S)-1-环丁基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯；

[0133] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙基酰胺；

[0134] (2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-哌啶-2-甲酸乙基酰胺；

[0135] (2R,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯；

[0136] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯；

[0137] (2S,4S)-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-1-异丁基-吡咯烷-2-甲酸乙酯；

[0138] (2S,4S)-4-[(1-氨基-萘-2-羰基)-氨基]-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯；

[0139] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(8-羟基-喹啉-7-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯；

[0140] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸酰胺；

[0141] 1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-1-环己基甲基-5-(吡咯烷-1-羰基)-吡咯烷-3-基]-酰胺；

[0142] (2S,4R)-1-苄基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯；

[0143] (2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯；和[0144] 1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-5-(氮杂环丁烷-1-羰基)-1-环己基甲基-吡咯烷-3-基]-酰胺。

[0145] 本申请提供了治疗丙型肝炎病毒(HCV)感染的方法，其包括向有需要的患者施用治疗有效量的式I化合物。

[0146] 本申请提供了上述方法，其还包括施用免疫系统调节剂或抑制HCV复制的抗病毒剂、或其组合。

[0147] 本申请提供了上述方法，其中所述免疫系统调节剂是干扰素或化学衍生化的干扰素。

[0148] 本申请提供了上述方法，其中所述抗病毒药物选自HCV蛋白酶抑制剂、HCV聚合酶抑制剂、HCV解旋酶抑制剂、HCV引发酶抑制剂、HCV融合抑制剂及其组合。

[0149] 本申请提供了在细胞中抑制HCV复制的方法，该方法包括施用式I的任何一种化合物。

[0150] 本申请提供了包含式I化合物和可药用赋形剂的组合物。

[0151] 本申请提供了式I化合物在制备药物中的应用，所述药物用于治疗HCV。

[0152] 本申请提供了本文所述的化合物、组合物或方法。

[0153] 化合物

[0154] 在下表中提供了本发明所包括的在本发明范围内的代表性化合物的实例。以下所提供的这些实施例和制备例使得本领域技术人员能够更清楚地理解和实施本发明。不应将它们理解为对本发明范围的限制，它们仅仅是本发明的说明性和代表性的实例。

[0155] 本申请所用的命名法通常是基于AUTONOMTM 4.0版，一种用于生成IUPAC系统命名的Beilstein Institute计算机化系统。如果所画的结构和命名给出的结构存在不一致时，以所画的结构为重。此外，如果结构式或结构式的一部分的立体化学未用例如粗线或虚线指明时，结构式或结构式的一部分应理解为包括其所有的立体异构体。

[0156] 表I描述了通式I的化合物的实例：

[0157] 表I

[0158]

[0159]

[0160]

[0161]

[0162]

[0163]

[0164]

[0165]

[0166]

[0167] 合成

[0168] 通用流程

[0169] 合成–通用反应流程

[0170] 流程1

[0171]

[0172] 可以根据流程1中概述的反应合成化合物5。可以在标准条件下用对甲苯磺酰氯处理商购可得的(2S,4R)-4-羟基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯，得到化合物1(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准条件下用叠氮化钠处理化合物1，形成化合物2(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的Boc-基团脱保护条件下用三氟乙酸处理化合物2，得到化合物3(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的还原性胺化反应条件下用环己烷甲醛和三乙酰氧基硼氢化钠处理化合物3，得到化合物4(参见例如，PCT WO2008/
148689)。可以在标准的叠氮化物还原反应条件下处理化合物4，得到化合物5(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0173] 流程2

[0174]

[0175] 可以根据流程2中概述的反应合成化合物10。可以在标准条件下用对甲苯磺酰氯处理商购可得的(2S,4R)-4-羟基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-乙酯，得到化合物6(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准条件下用叠氮化钠处理化合物6，形成化合物7(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的Boc-基团脱保护条件下用三氟乙酸处理化合物7，得到化合物8(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的还原性胺化反应条件下用环己烷甲醛和三乙酰氧基硼氢化钠处理化合物8，得到化合物9(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的叠氮化物还原反应条件下处理化合物9，得到化合物10(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0176] 流程3

[0177]

[0178] 可以根据流程3中概述的反应合成化合物12。可以在标准的还原性胺化反应条件下用苯甲醛和三乙酰氧基硼氢化钠处理化合物3，得到化合物11(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的叠氮化物还原反应条件下处理化合物11，得到化合物12(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0179] 流程4

[0180]

[0181] 可以根据流程4中概述的反应合成化合物14。可以在标准的还原性胺化反应条件下用3,3-二甲基-丁醛和三乙酰氧基硼氢化钠处理化合物3，得到化合物13(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的叠氮化物还原反应条件下处理化合物13，得到化合物14(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0182] 流程5

[0183]

[0184] 可以根据流程5中概述的反应合成化合物16。可以在标准的还原性胺化反应条件下用环戊烷甲醛和三乙酰氧基硼氢化钠处理化合物8，得到化合物15(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的叠氮化物还原反应条件下处理化合物15，得到化合物16(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0185] 流程6

[0186]

[0187] 可以根据流程6中概述的反应合成化合物18。可以在标准的还原性胺化反应条件下用环丁烷甲醛和三乙酰氧基硼氢化钠处理化合物8，得到化合物17(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的叠氮化物还原反应条件下处理化合物17，得到化合物18(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0188] 流程7

[0189]

[0190] 可以根据流程7中概述的反应合成化合物20。可以在标准的还原性胺化反应条件下用异丁醛和三乙酰氧基硼氢化钠处理化合物8，得到化合物19(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的叠氮化物还原反应条件下处理化合物19，得到化合物20(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0191] 流程8

[0192]

[0193] 可以根据流程8中概述的反应合成化合物22。可以在标准的酰胺偶联反应条件下用环己烷羰基氯处理化合物8，得到化合物21(参见例如，Zanardi,F.；Burreddu,P.；Rassu,G.；Auzzas,L.；Battistini,L.；Curti,C.；Sartori,A.；Nicastro,G.；Menchi,G.；Cini,N.；Bottonocetti,A.；Raspanti,S.；Casiraghi,G.J.Med.Chem.2008,51,1771)。可以在标准的叠氮化物还原反应条件下处理化合物21，得到化合物22(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0194] 流程9

[0195]

[0196] 可以根据流程9中概述的反应合成化合物27。可以在标准条件下用对甲苯磺酰氯处理商购可得的(2S,4S)-4-羟基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯，得到化合物23(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准条件下用叠氮化钠处理化合物23，形成化合物24(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的Boc-基团脱保护条件下用三氟乙酸处理化合物24，得到化合物25(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的还原性胺化反应条件下用环己烷甲醛和三乙酰氧基硼氢化钠处理化合物25，得到化合物26(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的叠氮化物还原反应条件下处理化合物26，得到化合物27(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0197] 流程10

[0198]

[0199] 可以根据流程10中概述的反应合成化合物32。可以在标准条件下用对甲苯磺酰氯处理商购可得的(2R,4R)-4-羟基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯，得到化合物28(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准条件下用叠氮化钠处理化合物28，形成化合物29(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的Boc-基团脱保护条件下用三氟乙酸处理化合物29，得到化合物30(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的还原性胺化反应条件下用环己烷甲醛和三乙酰氧基硼氢化钠处理化合物30，得到化合物31(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的叠氮化物还原反应条件下处理化合物31，得到化合物32(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0200] 流程11

[0201]

[0202] 可以根据流程11中概述的反应合成化合物37。可以在标准条件下用对甲苯磺酰氯处理商购可得的(2S,4S)-4-羟基-哌啶-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯，得到化合物33(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准条件下用叠氮化钠处理化合物33，形成化合物34(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的Boc-基团脱保护条件下用三氟乙酸处理化合物34，得到化合物35(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的还原性胺化反应条件下用环己烷甲醛和三乙酰氧基硼氢化钠处理化合物35，得到化合物36(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的叠氮化物还原反应条件下处理化合物36，得到化合物37(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0203] 流程12

[0204]

[0205] 可以根据流程12中概述的反应合成化合物44。可以在标准的酰胺偶联反应条件下将商购可得的(2S,4R)-4-叔丁氧基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-苄基酯偶联于2,2-二甲氧基-乙胺，得到化合物38(参见例如，US 2007/0167426)。可以在标准条件下用盐酸处理化合物38，形成化合物39(参见例如，PCT WO2004/113353)。可以在标准条件下用六氯乙烷和三苯基膦处理化合物39，得到化合物40(参见例如，PCT WO2007/077004)。可以在标准条件下用三氟乙酸处理化合物40，形成化合物41(参见例如，PCT WO2007/106670)。可以在标准条件下用对甲苯磺酰氯处理化合物41，得到化合物42(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准条件下用叠氮化钠处理化合物42，形成化合物43(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的叠氮化物还原反应条件下处理化合物43，得到化合物44(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0206] 流程13

[0207]

[0208] 可以根据流程13中概述的反应合成化合物50。可以在标准的酰胺偶联反应条件下将商购可得的(2S,4R)-4-叔丁氧基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-苄基酯偶联于1-氨基-丙-2-酮，得到化合物45(参见例如，US 2007/0167426)。可以在标准条件下用六氯乙烷和三苯基膦处理化合物45，得到化合物46(参见例如，PCT WO2007/077004)。可以在标准条件下用三氟乙酸处理化合物46，形成化合物47(参见例如，PCT WO2007/106670)。可以在标准条件下用对甲苯磺酰氯处理化合物47，得到化合物48(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准条件下用叠氮化钠处理化合物48，形成化合物49(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的叠氮化物还原反应条件下处理化合物49，得到化合物50(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0209] 流程14

[0210]

[0211] 可以根据流程14中概述的反应合成化合物56。可以在标准的酰胺偶联反应条件下将商购可得的(2S,4R)-4-叔丁氧基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-苄基酯偶联于1-氨基-3,3-二甲基-丁-2-酮，得到化合物51(参见例如，US 2007/0167426)。可以在标准条件下用六氯乙烷和三苯基膦处理化合物51，得到化合物52(参见例如，PCT WO2007/077004)。可以在标准条件下用三氟乙酸处理化合物52，形成化合物53(参见例如，PCT WO2007/106670)。可以在标准条件下用对甲苯磺酰氯处理化合物53，得到化合物54(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准条件下用叠氮化钠处理化合物54，形成化合物55(参见例如，PCT WO2008/
148689)。可以在标准的叠氮化物还原反应条件下处理化合物55，得到化合物56(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0212] 流程15

[0213]

[0214] 可以根据流程15中概述的反应合成化合物62。可以在标准的酰胺偶联反应条件下将商购可得的(2S,4R)-4-叔丁氧基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-苄基酯偶联于2-氨基-1-苯基-乙酮，得到化合物57(参见例如，US 2007/0167426)。可以在标准条件下用六氯乙烷和三苯基膦处理化合物57，得到化合物58(参见例如，PCT WO2007/077004)。可以在标准条件下用三氟乙酸处理化合物58，形成化合物59(参见例如，PCT WO2007/106670)。可以在标准条件下用对甲苯磺酰氯处理化合物59，得到化合物60(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准条件下用叠氮化钠处理化合物60，形成化合物61(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的叠氮化物还原反应条件下处理化合物61，得到化合物62(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0215] 流程16

[0216]

[0217] 可以根据流程16中概述的反应合成化合物68。可以在标准的酰胺偶联反应条件下将商购可得的(2S,4R)-4-叔丁氧基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-苄基酯偶联于2-溴-苯胺，得到化合物63(参见例如，US 2007/0167426)。可以用碘化亚铜(I)和1,10-菲咯啉处理化合物63，得到化合物64(参见例如，Evindar,G.；Batey,R.A.J.Org.Chem.2006,71,1802)。可以在标准条件下用三氟乙酸处理化合物64，形成化合物65(参见例如，PCT WO2007/106670)。可以在标准条件下用对甲苯磺酰氯处理化合物65，得到化合物66(参见例如，PCT WO2008/
148689)。可以在标准条件下用叠氮化钠处理化合物66，形成化合物67(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的叠氮化物还原反应条件下处理化合物67，得到化合物68(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0218] 流程17

[0219]

[0220] 可以根据流程17中概述的反应合成化合物74。可以用二异丙基氨基锂和碘甲烷处理商购可得的(2S,4R)-4-羟基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯，得到化合物69(参见例如，Noe,C.R.；Knollmueller,M.；Voellenkle,H.；Noe-Letsching,M.；Weigand,A.；Muehl,J.Pharmazie,1996,51,800)。可以在标准条件下用对甲苯磺酰氯处理化合物69，得到化合物70(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准条件下用叠氮化钠处理化合物
70，形成化合物71(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的Boc-基团脱保护条件下用三氟乙酸处理化合物71，得到化合物72(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的还原性胺化反应条件下用环己烷甲醛和三乙酰氧基硼氢化钠处理化合物72，得到化合物73(参见例如，PCT WO2008/148689)。可以在标准的叠氮化物还原反应条件下处理化合物73，得到化合物74(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0221] 流程18

[0222]

[0223] 可以根据流程18中概述的反应合成实施例1-7。可以在标准的酰胺偶联反应条件下(例如HATU、HBTU)用不同的胺(例如5、12、14、16、18、20和22)处理商购可得的1-羟基-萘-2-甲酸，得到实施例1-7(参见例如，PCT WO2010/009196)。

[0224] 流程19

[0225]

[0226] 实施例8-16可以根据流程19中概述的反应合成。可以在标准的酰胺偶联反应条件下(例如HATU、HBTU)用(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯(化合物5)处理商购可得的1-羟基-萘-2-甲酸，得到实施例1(参见例如，PCT WO2010/009196)。可以在标准的酯水解条件下用氢氧化锂处理实施例1，得到化合物75(参见例如，WO2008/046527)。可以在标准的酯化反应条件下处理化合物75，得到实施例8-9(参见例如，Bellis,E.；Kokotos,G.Tetrahedron 2005,61,8669)。可以在标准的酰胺偶联反应条件下(例如HATU,HBTU，参见例如PCT WO2010/009196)处理化合物75，得到实施例10-16。

[0227] 流程20

[0228]

[0229] 实施例17-20可以根据流程20中概述的反应合成。商购可得的1-羟基-萘-2-甲酸可以用不同的胺(例如27、32和74)在标准的酰胺偶联反应条件下(例如HATU、HBTU)处理，得到实施例17-20(参见例如，PCT WO2010/009196)。

[0230] 流程21

[0231]

[0232] 可以根据流程19中概述的反应合成实施例21-22。可以在标准的酰胺偶联反应条件下(例如HATU、HBTU)用商购可得的1-氨基-萘-2-甲酸或8-羟基-喹啉-7-甲酸处理(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯(化合物5)，得到实施例21-22(参见例如，PCT WO2010/009196)。

[0233] 流程22

[0234]

[0235] 可以根据流程22中概述的反应合成实施例23-25。可以在标准的酰胺偶联反应条件下(例如HATU、HBTU)用(2S,4R)-4-氨基-1-环己基甲基-哌啶-2-甲酸甲酯(化合物37)处理商购可得的1-羟基-萘-2-甲酸，得到实施例23(参见例如，PCT WO2010/009196)。可以在标准的酯水解条件下用氢氧化锂处理实施例23，得到化合物76(参见例如，PCT WO2008/046527)。可以在标准的酯化反应条件下处理化合物76，得到实施例24(参见例如，Bellis,E.；Kokotos,G.Tetrahedron 2005,61,8669)。可以在标准的酰胺偶联反应条件(例如HATU、HBTU，参见例如PCT WO2010/009196)下处理化合物76，得到实施例25。

[0236] 流程23

[0237]

[0238] 可以根据流程23中概述的反应合成实施例26-29。可以在标准的酰胺偶联反应条件下(例如HATU、HBTU)用不同的胺(例如化合物44、50、56、62和68)处理商购可得的1-羟基-萘-2-甲酸，得到化合物77(参见例如，PCT WO2010/009196)。可以在标准的金属催化的脱保护条件下用氢处理化合物77，得到化合物78(参见例如，Chang,D.；Heringa,M.F.；Witholt,B.；Li,Z.J.Org.Chem.2003,68,8599)。可以在标准的还原性胺化反应条件下用环己烷甲醛和三乙酰氧基硼氢化钠处理化合物78，得到实施例26-29(参见例如，PCT WO2008/148689)。

[0239] 药物组合物和施用

[0240] 根据本实施例所述，制备了用于通过多种途径给药的主题化合物的药物组合物。

[0241] 口服给药的组合物(A)

[0242]

[0243] 将这些成分混合，分装到胶囊中，每粒胶囊含有约100mg；一粒胶囊接近于一个总的日剂量。

[0244] 口服给药的组合物(B)

[0245]

[0246] 将这些成分合并，用溶剂(如甲醇)制粒。然后将该制剂干燥，用适当的压片机制成片剂(含有约20mg活性化合物)。

[0247] 口服给药的组合物(C)

[0248]

[0249] 将这些成分混合，制成用于口服给药的混悬剂。

[0250] 胃肠外制剂(D)

[0251]

[0252] 将活性成分溶于一部分注射用水中。然后，在搅拌下加入足量的氯化钠以使该溶液等渗。向该溶液中加入剩余的注射用水至所需重量，用0.2微米滤膜过滤，在无菌条件下进行包装。

[0253] 剂量和施用:

[0254] 本发明化合物可以配制在多种口服给药剂型和载体中。口服给药可以是片剂、包衣片、锭剂、硬和软明胶胶囊、溶液剂、乳剂、糖浆剂或混悬剂的形式。本发明化合物在通过其它给药途径给药时也是有效的，包括连续(静脉内滴注)、局部、胃肠外、肌内、静脉内、皮下、经皮(可以含有渗透增强剂)、颊、鼻、吸入和栓剂给药。优选的给药方式通常是采用方便的日给药方案的口服方式，其可以根据疾病程度和患者对活性成分的响应来调节。

[0255] 本发明化合物以及它们的可药用盐与一种或多种常规赋形剂、载体或稀释剂一起可以被制成药物组合物和单位剂量的形式。该药物组合物和单位剂量形式可以包含常规比例的常规成分，可以含有或不含另外的活性化合物或成分，并且单位剂量形式可以含有任何适宜的与所采用的预期日剂量范围相称的有效量的活性成分。该药物组合物可以以如下形式应用：用于口服使用的固体，如片剂或填充胶囊、半固体、粉末、缓释制剂，或液体，例如溶液剂、混悬剂、乳剂、酏剂或填充胶囊；或者供直肠或阴道给药的栓剂；或者供胃肠外使用的无菌可注射溶液。典型的制剂含有约5％至约95％的活性化合物(w/w)。术语“制剂”或“剂型”意欲包括活性化合物的固体和液体制剂，本领域技术人员可以理解，根据靶器官或组织和所需的剂量以及药代动力学参数，活性成分可以存在于不同的制剂中。

[0256] 本文所用的术语“赋形剂”是指可用于制备药物组合物的化合物，其通常是安全无毒的，既非生物学也非其它方面所不期望的，并且包括对于兽医学用途以及人类药用而言可接受的赋形剂。本发明的化合物可以单独给药，但是通常与一种或多种根据预期给药途径和标准药学实践选择的适宜药用赋形剂、稀释剂或载体一起给药。

[0257] “可药用的”是指可以用于制备药用组合物的物质，它们通常是安全、无毒的并且既非生物学也非其它方面所不期望的，并且包括对于兽用和人类药用可接受的物质。

[0258] 活性成分的“可药用盐”形式还可以赋予活性成分其非盐形式所不存在的所需药代动力学性质，并且甚至可以就其体内治疗活性而言积极地影响活性成分的药效学。措辞化合物的“可药用盐”表示可药用的、并且具备母体化合物的所需药理活性的盐。此类盐包括：(1)与无机酸或有机酸形成的酸加成盐，所述无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；所述有机酸例如醋酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1,2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基二环[2.2.2]辛-2-烯-1-甲酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等；或者(2)当母体化合物中存在的酸性质子被金属离子(例如碱金属离子、碱土金属离子或铝离子)替代时形成的盐；或者当与有机碱例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨基丁三醇、N-甲基葡糖胺等配位时形成的盐。

[0259] 固体形式制剂包括粉末、片剂、丸剂、胶囊、扁囊剂、栓剂和可分散颗粒剂。固体载体可以是一种或多种还可以作为稀释剂、矫味剂、增溶剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、防腐剂、片剂崩解剂或包囊材料的物质。在粉末中，载体通常为细分的固体，其是与细分的活性组分的混合物。在片剂中，活性组分通常与具有所需粘合能力的载体按适宜比例混合并被压制成所需的形状和大小。适宜的载体非限制性地包括碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、西黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可脂等。除活性组分外，固体形式的制剂还可以包含着色剂、矫味剂、稳定剂、缓冲剂、人工和天然甜味剂、分散剂、增稠剂、增溶剂等。

[0260] 液体制剂也适宜于口服给药，包括乳剂、糖浆剂、酏剂、水溶液、水性混悬剂。它们包括意欲在临用前转化为液体形式制剂的固体形式制剂。乳剂可以在溶液(例如丙二醇水溶液)中制备，或者可以含有乳化剂，例如卵磷脂、脱水山梨醇单油酸酯或阿拉伯胶。水溶液可以通过将活性组分溶于水中并加入适宜的着色剂、矫味剂、稳定剂和增稠剂来制备。水性混悬剂可以通过将细分的活性组分分散在具有粘性材料的水中来制备，所述粘性材料如天然或合成树胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和其它众所周知的助悬剂。

[0261] 本发明化合物可以被制成胃肠外给药(例如通过注射，例如推注或连续输注)的形式，并且可以以在安瓿、预填充注射器、小体积输液或添加有防腐剂的多剂量容器中的单位剂量形式存在。该组合物可以采取诸如位于油性或水性载体中的混悬剂、溶液剂或乳剂的形式，例如位于含水聚乙二醇中的溶液。油性或非水性载体、稀释剂、溶剂或赋形剂的实例包括丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄榄油)和可注射的有机酯(例如油酸乙酯)，并且可含有制剂用物质，如防腐剂、润湿剂、乳化剂或助悬剂、稳定剂和/或分散剂。或者，活性成分可以为通过无菌分装被灭菌的固体或者通过将溶液冷冻干燥而得的、用于在临用前用适宜的载体如无菌无热原的水进行复溶的粉末形式。

[0262] 本发明化合物可以制备成局部给药于表皮的形式如软膏剂、霜剂或洗剂或者经皮贴剂。软膏剂和霜剂可以例如采用加有适当的增稠剂和/或凝胶剂的水性或油性基质配制。洗剂可以采用水性或油性基质制备，并且通常还包含一或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、助悬剂、增稠剂或着色剂。适用于在口腔内局部给药的制剂包括在矫味基质(通常为蔗糖和阿拉伯胶或西黄蓍胶)中含有活性成分的锭剂；在惰性基质(如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶)中含有活性成分的软锭剂；在适当的液体载体中含有活性成分的漱口剂。

[0263] 本发明的化合物还可被制备成以栓剂形式进行给药。首先，将低熔点蜡(如脂肪酸甘油酯的混合物或可可脂)熔化并将活性成分通过例如搅拌均匀分散。然后将熔化的均匀混合物倾至适宜大小的模具中，冷却并固化。

[0264] 本发明的化合物可以制备成用于阴道给药的形式。除活性成分以外还含有本领域已知的载体的阴道栓剂、棉塞、霜剂、凝胶剂、糊剂、泡沫剂或喷雾剂是适宜的。

[0265] 本发明化合物可以制成鼻腔给药的形式。溶液剂或混悬剂可以通过常规方法直接应用于鼻腔，例如，采用滴管、吸管或喷雾的形式。该制剂可以是单剂量或多剂量形式。在滴管或吸管的情况下，可以通过给予患者适当的、预定体积的溶液或混悬液来实现。在喷雾的情况下，这可以例如通过计量雾化喷雾泵来实现。

[0266] 本发明化合物可以制备为气雾剂给药的形式，特别是应用于呼吸道，包括鼻腔内给药。该化合物通常具有较小的粒度，例如5微米或更小的粒度。该粒度可以用本领域已知的方法获得，例如用微粉化获得。活性成分可以在含有适当抛射剂的加压容器中提供，所述抛射剂如氯氟烃类(CFC)，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷或二氧化碳或其它适宜的气体。气雾剂也可以方便地含有表面活性剂如卵磷脂。药物的剂量可以用计量阀控制。或者，活性成分可以以干粉的形式提供，例如化合物在适当的粉末基质如乳糖、淀粉、淀粉衍生物(如羟丙基甲基纤维素)和聚乙烯吡咯烷(PVP)中的粉末混合物。粉末载体将在鼻腔中形成凝胶。粉末组合物可以以单位剂型存在，例如位于例如明胶胶囊或药筒或者泡罩包装中，粉末可以从其中通过吸入器进行给药。

[0267] 当需要时，可以采用适用于活性成分缓释或控释给药的肠包衣材料制备制剂。例如，可以将本发明化合物配制到经皮或皮下药物传递装置中。当需要化合物缓释并且患者对治疗方案的依从性至关重要时，这些传递系统是有利的。经皮传递系统中的化合物通常附着在皮肤粘着性固体支撑物上。也可以将感兴趣的化合物与渗透促进剂例如氮酮(1-十二基氮杂环庚烷-2-酮)合用。可以通过手术或注射将缓释传递系统皮下插入到皮下层。皮下植入物将化合物包封在脂溶性膜例如硅橡胶或者生物可降解聚合物如聚乳酸中。

[0268] 在Remington：The Science and Practice of Pharmacy 1995.E.W.Martin编辑,Mack Publishing Company,第19版,Easton,Pennsylvania中对适宜的制剂以及药物载体、稀释剂和赋形剂进行了描述。制剂领域技术人员可以在说明书的教导范围内改变制剂，从而提供大量用于特定给药途径且不会使得本发明的组合物不稳定或者损害它们的治疗活性的制剂。

[0269] 为了使本发明化合物在水或其它载体中具有更大的溶解性而对其进行的修饰可以容易地通过较小的修饰(成盐、酯化等)来完成，这些完全在本领域的普通技能范围内。同样完全在本领域普通技能范围内的是改变特定化合物的给药途径和剂量方案以便控制本发明化合物的药代动力学，从而在患者中达到最大的有益效果。

[0270] 本文所用的术语“治疗有效量”是指减轻个体疾病症状所需的量。剂量在各具体病例中可以根据个体需要进行调节。该剂量可以在较宽范围内根据各种因素进行改变，例如所治疗疾病的严重性、患者的年龄与一般健康状况、正用于治疗患者的其它药物、给药途径和形式以及参与的医务人员的偏爱与经验。就口服给药而言，在单一疗法和/或在组合疗法中，约0.01至约1000mg/kg体重/天的日剂量应当是适当的。优选的日剂量为约0.1至约500mg/kg体重/天，更优选为0.1至约100mg/kg体重/天，最优选1.0至约10mg/kg体重/天。因而，对于70kg的人的给药而言，剂量范围将为约7mg至0.7g/天。日剂量可以以单一剂量或者分剂量形式进行给药，通常每天1至5次剂量。一般而言，以低于化合物的最佳剂量的较小剂量开始治疗。然后，以较小增量逐渐增加剂量，直至达到个体患者的最佳效果。普通技术人员在治疗本文所述疾病时，无需过多的实验，根据个人的知识、经验以及本申请的公开内容即能够确定本发明化合物对于特定疾病和患者而言的治疗有效量。

[0271] 药物制剂优选为单位剂型。在该类形式中，制剂被细分为包含适宜量活性组分的单位剂量。该单位剂型可以是进行了包装的制剂、包含离散数量制剂的包装如进行了包装的片剂、胶囊和位于小瓶或安瓿中的粉末。单位剂型也可以是胶囊、片剂、扁囊或锭剂本身，或者其可以是适宜数量的包装形式的这些形式中的任何一种。

[0272] 适应症和治疗方法

[0273] 适应症

[0274] 本发明的化合物以及其异构形式和可药用盐可用于治疗和预防HCV感染。

[0275] 本申请提供了一种治疗丙型肝炎病毒(HCV)感染的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I化合物。

[0276] 本申请提供了一种抑制细胞中HCV复制的方法，其包括施用式I化合物。

[0277] 组合治疗

[0278] 本发明的化合物及其异构形式和可药用盐可单独或者与靶向于HCV生命周期中涉及的病毒或细胞元素或功能的其它化合物组合用于治疗和预防HCV感染。可用于本发明的化合物类别非限制性地包括所有类别的HCV抗病毒剂。

[0279] 对于组合治疗而言，可用于与本发明化合物组合使用的活性剂的机理类型包括例如HCV聚合酶的核苷和非-核苷抑制剂、蛋白酶抑制剂、解旋酶抑制剂、NS4B抑制剂和功能性抑制内部核糖体进入位点(IRES)的药学活性剂以及抑制HCV细胞附着或病毒进入、HCV RNA翻译、HCV RNA转录、复制或HCV成熟、装配或病毒释放的其它药物。这些类别中的可用于本发明的具体化合物非限制性地包括大环、杂环和线型HCV蛋白酶抑制剂如特拉普韦(VX-950)、波西普韦(SCH-503034)、纳拉普韦(narlaprevir)(SCH-9005 18)、ITMN-191(R-
7227)、TMC-435350(a.k.a.TMC-435)、MK-7009、BI-201335、BI-2061(西鲁普韦
(ciluprevir))、BMS-650032、ACH-1625、ACH-1095(HCV NS4A蛋白酶辅因子抑制剂)、VX-
500、VX-813、PHX-1766、PHX2054、IDX-136、IDX-316、ABT-450EP-013420(和同类物质)和VBY-376；可用于本发明的核苷类HCV聚合酶(复制酶)抑制剂非限制性地包括R7128、PSI-
7851、IDX-184、IDX-102、R1479、UNX-08 189、PSI-6130、PSI-938和PSI-879以及各种其它核苷和核苷类似物和HCV抑制剂，包括(但不限于)以2'-C-甲基修饰的核苷(酸)、4'-氮杂修饰的核苷(酸)和7'-去氮杂修饰的核苷(酸)形式衍生出来的那些物质。可用于本发明的非核苷类HCV聚合酶(复制酶)抑制剂非限制性地包括HCV-796、HCV-371、VCH-759、VCH-916、VCH-
222、ANA-598、MK-3281、ABT-333、ABT-072、PF-00868554、BI-207127、GS-9190、A-837093、JKT-109、GL-59728和GL-60667。

[0280] 此外，本发明化合物还可以与下列物质组合：环菲林(cyclophyllin)和亲免素(immunophyllin)拮抗剂(例如但不限于，DEBIO化合物、NM-811以及环孢菌素及其衍生物)、激酶抑制剂、热休克蛋白抑制剂(例如，HSP90和HSP70)、其它免疫调节剂，非限制性地包括干扰素(-α、-β、-ω、-γ、-λ或合成的)如Intron A、Roferon-A、Canferon-A300、Advaferon、Infergen、Humoferon、Sumiferon MP、Alfaferone、IFN-β、Feron等；聚乙二醇衍生的(PEG化)干扰素化合物，如PEG干扰素-α-2a(Pegasys)、PEG干扰素-α-2b(PEGIntron)、PEG化IFN-α-con1等；干扰素化合物的长效制剂和衍生物如白蛋白-融合的干扰素、Albuferon、Locteron,等；使用各类受控传递系统的干扰素(例如，ITCA-638，由DUROS皮下传递系统传递的ω-干扰素)；刺激细胞中干扰素合成的化合物，如雷西莫特等；白介素类；增强1型辅助T细胞响应的化合物，如SCV-07等；TOLL-样受体激动剂如CpG-10101(actilon)、isotorabine、ANA773等；胸腺素α-1；ANA-245和ANA-246；组胺二盐酸盐；丙帕锗(propagermanium)；Tetrachlorodecaoxide；安普利近；IMP-321；KRN-7000；抗体,如civacir、XTL-6865等以及预防和治疗性疫苗如InnoVac C、HCV E1E2/MF59等。此外，可通过施用有效量TNF-α拮抗剂来增强涉及施用NS5A抑制剂、I型干扰素受体激动剂(例如，IFN-α)和II型干扰素受体激动剂(例如，IFN-γ)的上述方法中的任何一种。适用于该类组合治疗的非限制的TNF-α拮抗剂的例子包括ENBREL、REMICADE和HUMIRA。

[0281] 此外，本发明化合物也可与抗原虫药和认为可有效治疗HCV感染的其它抗病毒剂、例如但不限于前药硝唑尼特联用。硝唑尼特可以以与本发明化合物组合的活性剂以及与用于治疗HCV感染的其它活性剂如peg干扰素α-2a和利巴韦林组合的活性剂的形式进行应用。

[0282] 本发明化合物还可以与下列物质一起使用：干扰素和PEG化干扰素的其它形式、利巴韦林或其类似物(例如，tarabavarin、levoviron)、microRNA、小干扰RNA化合物(例如，SIRPLEX-140-N等)、核苷酸或核苷类似物、免疫球蛋白、肝脏保护剂、抗炎剂和其它NS5A抑制剂。HCV生命周期的其它靶点的抑制剂包括NS3解旋酶抑制剂；NS4A辅因子抑制剂；反义寡核苷酸抑制剂,如ISIS-14803、AVI-4065等；载体编码的短发卡RNA(shRNA)；HCV特异性核糖酶如heptazyme、RPI、13919等；进入抑制剂如HepeX-C、HuMax-HepC等；α葡糖苷酶抑制剂如西戈斯韦、UT-231B等；KPE-02003002和BIVN 401以及IMPDH抑制剂。其它示例性HCV抑制剂化合物包括在下面公开物中公开的那些化合物:US专利号5,807,876；6,498,178；6,344,465和6,054,472；PCT专利申请公开号WO97/40028；WO98/40381；WO00/56331,WO02/04425；
WO03/007945；WO03/010141；WO03/000254；WO01/32153；WO00/06529；WO00/18231；WO00/
10573；WO00/13708；WO01/85172；WO03/037893；WO03/037894；WO03/037895；WO02/100851；
WO02/100846；WO99/01582；WO00/09543；WO02/18369；WO98/17679,WO00/056331；WO98/
22496；WO99/07734；WO05/073216、WO05/073195和WO08/021927。

[0283] 此外，例如利巴韦林和干扰素的组合可以以与至少一种本发明化合物一起使用的多重组合治疗的形式进行施用。本发明并不限于上述类型的化合物，而是考虑已知的和新化合物以及生物活性剂的组合。本发明的组合治疗还包括本发明化合物与本发明其它化合物或除本发明化合物外的其它化合物的任何化学可相容的组合，只要该组合不会消除本发明化合物的抗病毒活性或该药物组合物本身的抗病毒活性即可。

[0284] 组合治疗可以是顺序进行的，即首先用一种活性剂来进行治疗，然后使用第二种活性剂来进行治疗(例如，在各治疗包含不同本发明化合物的情况中，或者在一种治疗包含本发明化合物而另一种治疗包含一种或多种生物学活性剂的情况中)，或者，可以同时用两种活性剂来进行治疗(同时的)。顺序治疗在第一种治疗结束后、第二种治疗开始前，可以包括一段合理的时间。用两种活性剂同时进行治疗可以以相同的日剂量或分开的剂量进行。组合治疗不限于两种活性剂，可以包括三种或更多种活性剂。用于同时或顺序组合治疗的剂量都将取决于组合治疗组分的吸收、分布、代谢和排泄速率以及本领域技术人员已知的其它因素。剂量值还将根据所缓解情况的严重程度来变化。应进一步理解的是，对于任何特定个体而言，可以根据个体的需要和施用该组合治疗或监督该组合治疗的施用的本领域技术人员的判断，随着时间的进行调整具体的剂量方案和时间表。

[0285] 本申请提供了治疗丙型肝炎病毒(HCV)感染的方法，其包括向有需要的患者施用治疗有效量的式I-IIII中任意一种的化合物。

[0286] 本申请提供了上述方法，其还包括施用免疫系统调节剂或抑制HCV复制的抗病毒剂、或其组合。

[0287] 本申请提供了上述方法，其中所述免疫系统调节剂是干扰素或化学衍生化的干扰素。

[0288] 本申请提供了上述方法，其中所述抗病毒药物选自HCV蛋白酶抑制剂、HCV聚合酶抑制剂、HCV解旋酶抑制剂、HCV引发酶抑制剂、HCV融合抑制剂及其组合。实施例

[0289] 缩写

[0290] 常用的缩写包括:乙酰基(Ac)、偶氮二异丁腈(AIBN)、大气压(Atm)、9-硼杂二环[3.3.1]壬烷(9-BBN或BBN)、2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘(BINAP)、叔-丁氧基羰基(Boc)、二-叔-丁基焦碳酸酯或boc酐(BOC2O)、苄基(Bn)、丁基(Bu)、化学文摘登记号(CASRN)、苄氧基羰基(CBZ或Z)、羰基二咪唑(CDI)、1,4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷(DABCO)、三氟化二乙基氨基硫(DAST)、二亚苄基丙酮(dba)、1,5-二氮杂二环[4.3.0]壬-5-烯(DBN)、1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)、N,N'-二环己基碳二亚胺(DCC)、1,2-二氯乙烷(DCE)、二氯甲烷(DCM)、2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(DDQ)、偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)、偶氮二甲酸二异丙酯(DIAD)、氢化二-异丁基铝(DIBAL或DIBAL-H)、二-异丙基乙基胺(DIPEA)、N,N-二甲基乙酰胺(DMA)、4-N,N-二甲基氨基吡啶(DMAP)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)、1,1'-二-(二苯基膦基)乙烷(dppe)、1,1'-双-(二苯基膦基)二茂铁(dppf)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)、2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氢喹啉(EEDQ)、乙基(Et)、乙酸乙酯(EtOAc)、乙醇(EtOH)、2-乙氧基-2H-喹啉-
1-甲酸乙酯(EEDQ)、乙醚(Et2O)、乙基异丙基醚(EtOiPr)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲六氟磷酸盐醋酸(HATU)、醋酸(HOAc)、1-N-羟基苯并三唑(HOBt)、高压液相色谱法(HPLC)、异丙醇(IPA)、异丙基氯化镁(iPrMgCl)、六甲基二硅烷基胺(HMDS)、液相色谱-质谱(LCMS)、双(三甲基硅基)氨基锂(LiHMDS)、间-氯过氧苯甲酸(m-CPBA)、甲醇(MeOH)、熔点(mp)、MeSO2-(甲磺酰基或Ms)、甲基(Me)、乙腈(MeCN)、间-氯过苯甲酸(MCPBA)、质谱(ms)、甲基叔-丁基醚(MTBE)、甲基四氢呋喃(MeTHF)、N-溴琥珀酰亚胺(NBS)、正-丁基锂(nBuLi)、N-羧基酐(NCA)、N-氯琥珀酰亚胺(NCS)、N-甲基吗啉(NMM)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、吡啶氯铬酸盐(PCC)、二氯-((双-二苯基膦基)二茂铁基)钯(II)(Pd(dppf)Cl2)、醋酸钯(II)(Pd(OAc)2)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(Pd2(dba)3)、吡啶重铬酸盐(PDC)、苯基(Ph)、丙基(Pr)、异-丙基(i-Pr)、磅/平方英寸(psi)、吡啶(pyr)、1,2,3,4,5-五苯基-1'-(二-叔-丁基膦基)二茂铁(Q-Phos)、室温(环境温度、rt或RT)、仲-丁基锂(sBuLi)、叔-丁基二甲基甲硅烷基或叔-BuMe2Si(TBDMS)、氟化四正丁基铵(TBAF)、三乙胺(TEA或Et3N)、2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧基(TEMPO)、三氟甲磺酸盐或CF3SO2-(Tf)、三氟醋酸(TFA)、1,1'-二-2,2,6,6-四甲基庚烷-2,6-二酮(TMHD)、O-苯并三唑-1-基-N,N,N',N'-四甲基脲四氟磷酸盐(TBTU)、薄层色谱法(TLC)、四氢呋喃(THF)、三甲基甲硅烷基或Me3Si(TMS)、对-甲苯磺酸单水合物(TsOH或pTsOH)、4-Me-C6H4SO2-或甲苯磺酰基(Ts)和N-尿烷-N-羧基酐(UNCA)。当与烷基部分一起使用时，包括前缀正(n)、异(i-)、仲(sec-)、叔(tert-)和新(neo)在内的常规命名法具有其常规含义。(J.Rigaudy和D.P.Klesney,有机化学命名法(Nomenclature in Organic Chemistry),IUPAC 1979 Pergamon Press,牛津大学)。

[0291] 通用条件

[0292] 本发明化合物可以用下面实施例部分所述的说明性合成反应中所述的多种方法来进行制备。

[0293] 在制备这些化合物时所用的起始材料和试剂通常可容易地从供应商如Aldrich Chemical Co.获得，或者按照文献中所述的操作用本领域技术人员已知的方法来进行制备，所述文献如Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis；Wiley&Sons:纽约,1991,第1-15卷；Rodd's Chemistry of Carbon Compounds,Elsevier Science Publishers,1989,第1-5卷和增刊；和Organic Reactions,Wiley&Sons:纽约,1991,第1-40卷。应当意识到，在实施例部分所示的合成反应流程仅是可由其合成本发明化合物的一些方法的示例，可以对这些合成反应流程进行各种修改，参阅本申请包含的公开内容的本领域技术人员将能意识到这些修改。

[0294] 如果需要，可以用常规技术对合成反应流程的起始材料和中间体进行分离和纯化，包括但不限于过滤、蒸馏、结晶、色谱法等。可以用包括物理常数和光谱数据在内的常规手段对该类物质进行定性。

[0295] 除非特别作出相反说明，否则本文所述的反应通常是在惰性气氛下、在大气压下、在约-78℃至约150℃，通常约0℃至约125℃，更通常和方便地在约室温(或环境温度)，例如约20℃的反应温度下进行的。

[0296] 本发明化合物上的各种取代基可以存在于起始化合物中、被加入到任何一种中间体上或者在终产物形成后用已知的取代方法或转化反应加入。如果取代基本身有反应性，则可以用本领域已知的技术对取代基本身进行保护。各种保护基团是现有技术中已知的，且都可以被使用。在“有机合成中的保护基团(Protective Groups in Organic Synthesis)”，Green等,John Wiley和Sons,1999中可以找到许多可能基团的实例。例如，可以通过硝化来引入硝基，并且硝基可被转换成其它基团，例如通过还原被转换成氨基，通过氨基的重氮化和用卤素替代重氮基来引入卤素。可以通过Friedel-Crafts酰化来引入酰基。然后，可以用各种方法将酰基转换成相应的烷基，所述方法包括Wolff-Kishner还原和Clemmenson还原。可以将氨基烷基化从而形成单-和二-烷基氨基；可以将巯基和羟基烷基化，从而形成相应的醚。可以用本领域已知的氧化剂对伯醇进行氧化从而形成羧酸或醛，并且可以将仲醇氧化形成酮。因此，可以用取代或变更反应来在包括分离产物在内的起始材料、中间体或终产物分子中提供各种取代基。

[0297] 制备实施例

[0298] (2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备

[0299]

[0300] 步骤1:(2S,4R)-4-(甲苯-4-磺酰基氧基)-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯的制备

[0301]

[0302] 在0℃向(2S,4R)-4-羟基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(10g，40.77mmol)在二氯甲烷(56mL)中的溶液中加入吡啶(30mL)，随后滴加对甲苯磺酰氯(9.4g，49.30mmol)在二氯甲烷中的溶液。将该反应混合液温至室温，然后回流16h。将该反应混合液浓缩，在溶于二氯甲烷中，并用水和盐水洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤，并浓缩，得到(2S,4R)-4-(甲苯-4-磺酰基氧基)-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(14.4g，88.4％收率)，为淡黄色粘性固体。将该粗品未经进一步纯化地用于下一步骤。MS C18H26NO7S[(M+H)+]的计算值400.0，实测值400.0。

[0303] 步骤2:(2S,4S)-4-叠氮基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯的制备

[0304]

[0305] 向(2S,4R)-4-(甲苯-4-磺酰基氧基)-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(14.4g，36.09mmol)在干燥的N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液中加入叠氮化钠(4.7g，
72.18mmol)，并将该反应混合液在60℃搅拌16h。将该反应混合液用乙酸乙酯稀释，用水、盐水洗涤，并经无水硫酸钠干燥。过滤和浓缩，得到粗品，将其经柱色谱纯化(15％己烷中的乙酸乙酯作为洗脱剂)，得到(2S,4S)-4-叠氮基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(7.8g，
80％收率)，为浅棕色液体。MS C11H19N4O4[(M+H)+]的计算值271.0，实测值271.0。

[0306] 步骤3:(2S,4S)-4-叠氮基-吡咯烷-2-甲酸甲酯三氟乙酸盐的制备

[0307]

[0308] 向(2S,4S)-4-叠氮基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(7.8g，28.8mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液中加入三氟乙酸和二氯甲烷(1:5,20mL)的混合液，并将该反应混合液在室温搅拌16h。将该反应混合液减压浓缩，得到(2S,4S)-4-叠氮基-吡咯烷-2-甲酸甲酯三氟乙酸盐(9.6g，粗品)，为浅棕色油状物。将该化合物未经进一步纯化地用于下一个步骤中。MS C6H11N4O2[(M+H)+]的计算值171.0，实测值171.2。

[0309] 步骤4:(2S,4S)-4-叠氮基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备

[0310]

[0311] 向(2S,4S)-4-叠氮基-吡咯烷-2-甲酸甲酯三氟乙酸盐(9.6g，33.08mmol)在60mL二氯甲烷中的溶液中加入环己烷甲醛(2.6g，23.66mmol)、乙酸(2.5mL)和三乙酰氧基硼氢化钠(14.2g，66.16mmol)，并将该反应混合液在室温搅拌20h。将该反应混合液用二氯甲烷稀释，用水洗涤，经无水硫酸钠干燥，并浓缩，得到(2S,4S)-4-叠氮基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯(11.2g，粗品)，为浅棕色液体。将该化合物未经进一步纯化地用于下一个步骤中。MS C13H23N4O2[(M+H)+]的计算值267.0，实测值267.2。

[0312] 步骤5:(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备

[0313]

[0314] 向(2S,4S)-4-叠氮基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯(11.2g，42.1mmol)在四氢呋喃(140mL)中的溶液中加入三苯基膦(22g，83.87mmol)和水(1.9mL)，并将该反应混合液在75℃回流6h。将该反应混合液用醚稀释，用HCl(0.15N)淬灭，搅拌5min，并用醚萃取。将水层用碳酸氢钠溶液处理直至pH～10，然后用二氯甲烷萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并浓缩，得到(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯(3g，29.6％收率)，为淡黄色油状物。将该化合物未经进一步纯化地用于下一个步骤中。MS C13H25N2O2[(M+H)+]的计算值241.0，实测值240.8。

[0315] (2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸乙酯的制备

[0316]

[0317] 以(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备中所用的相似的反应流程由(2S,4S)-4-叠氮基-吡咯烷-2-甲酸乙酯三氟乙酸盐制备(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸乙酯。MS C14H27N2O2[(M+H)+]的计算值255，实测值255。

[0318] (2S,4S)-4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备

[0319]

[0320] 以(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备中所用的相似的反应流程由(2S,4S)-4-叠氮基-吡咯烷-2-甲酸甲酯三氟乙酸盐制备(2S,4S)-4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-甲酸甲酯。MS C13H19N2O2[(M+H)+]的计算值235，实测值235。

[0321] (2S,4S)-4-氨基-1-(3,3-二甲基-丁基)-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备

[0322]

[0323] 以(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备中所用的相似的反应流程由(2S,4S)-4-叠氮基-吡咯烷-2-甲酸甲酯三氟乙酸盐制备(2S,4S)-4-氨基-1-(3,3-二甲基-丁基)-吡咯烷-2-甲酸甲酯。MS C12H25N2O2[(M+H)+]的计算值229，实测值229。

[0324] (2S,4S)-4-氨基-1-环戊基甲基-吡咯烷-2-甲酸乙酯的制备

[0325]

[0326] 以(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备中所用的相似的反应流程由(2S,4S)-4-叠氮基-吡咯烷-2-甲酸乙酯三氟乙酸盐制备(2S,4S)-4-氨基-1-环戊基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯。MS C13H25N2O2[(M+H)+]的计算值241，实测值241。

[0327] (2S,4S)-4-氨基-1-环丁基甲基-吡咯烷-2-甲酸乙酯的制备

[0328]

[0329] 以(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备中所用的相似的反应流程由(2S,4S)-4-叠氮基-吡咯烷-2-甲酸乙酯三氟乙酸盐制备(2S,4S)-4-氨基-1-环丁基甲基-吡咯烷-2-甲酸乙酯。MS C12H23N2O2[(M+H)+]的计算值227，实测值227。

[0330] (2S,4S)-4-氨基-1-异丁基-吡咯烷-2-甲酸乙酯的制备

[0331]

[0332] 以(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备中所用的相似的反应流程由(2S,4S)-4-叠氮基-吡咯烷-2-甲酸乙酯三氟乙酸盐制备(2S,4S)-4-氨基-1-异丁基-吡咯烷-2-甲酸乙酯。MS C11H23N2O2[(M+H)+]的计算值215，实测值215。

[0333] (2S,4S)-4-氨基-1-环己烷羰基-吡咯烷-2-甲酸乙酯的制备

[0334]

[0335] 以(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备中所用的相似的反应流程由(2S,4S)-4-叠氮基-吡咯烷-2-甲酸甲酯三氟乙酸盐制备(2S,4S)-4-氨基-1-环己烷羰基-吡咯烷-2-甲酸乙酯。MS C14H25N2O3[(M+H)+]的计算值269，实测值269。

[0336] (2S,4R)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备

[0337]

[0338] 以(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备中所用的相似的反应流程由(2S,4S)-4-羟基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯制备(2S,4R)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯。MS C13H25N2O2[(M+H)+]的计算值241，实测值241。

[0339] (2R,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备

[0340]

[0341] 以(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备中所用的相似的反应流程由(2R,4R)-4-羟基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯制备(2R,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯。MS C13H25N2O2[(M+H)+]的计算值241，实测值241。

[0342] (2S,4R)-4-氨基-1-环己基甲基-哌啶-2-甲酸甲酯的制备

[0343]

[0344] 以(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备中所用的相似的反应流程由(2S,4S)-4-羟基-哌啶-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯制备(2S,4R)-4-氨基-1-环己基甲基-哌啶-2-甲酸甲酯。MS C14H27N2O2[(M+H)+]的计算值255，实测值255。

[0345] (2S,4S)-4-氨基-2- 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备

[0346]

[0347] 步骤1:(2S,4R)-4-叔丁氧基-2-(2,2-二甲氧基-乙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备

[0348]

[0349] 向(2S,4R)-4-叔丁氧基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-苄基酯(500mg，1.56mmol)和2,2-二甲氧基-乙胺(163mg，1.56mmol)在二氯甲烷(5mL)中的搅拌过的溶液中加入EDC-HCl(298mg，1.56mmol)、HOBt(210mg，1.56mmol)和三乙胺(157mg，1.56mmol)。将该混合液在室温搅拌24h，用水稀释，用乙酸乙酯萃取，并用水和盐水洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，并经柱色谱纯化(使用15％在己烷中的EtOAc作为洗脱剂)，得到(2S,4R)-4-叔丁氧基-2-(2,2-二甲氧基-乙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯(200mg，31.6％收率)，为浅棕色液体。MS C21H33N2O6[(M+H)+]的计算值409.0，实测值409.0。

[0350] 步骤2:(2S,4R)-4-叔丁氧基-2-(2-氧代-乙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备

[0351]

[0352] 将(2S,4R)-4-叔丁氧基-2-(2,2-二甲氧基-乙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯(1.8g，4.41mmol)和HCl(1M,30mL)在丙酮(30mL)中的混合液在室温搅拌8h。然后将该反应混合液用乙酸乙酯萃取，并用水和盐水洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤，并浓缩，得到(2S,4R)-4-叔丁氧基-2-(2-氧代-乙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯(1.4g，粗品)，为粘性液体。将该化合物未经进一步纯化地用于下一个步骤中。MS C19H27N2O5[(M+H)+]的计算值363.0，实测值363.2。

[0353] 步骤3:(2S,4R)-4-叔丁氧基-2- 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备

[0354]

[0355] 向(2S,4R)-4-叔丁氧基-2-(2-氧代-乙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯(4.5g，12.43mmol)和六氯乙烷(5.88g，24.86mmol)在二氯甲烷(30mL)中的搅拌过的溶液中加入三苯基膦(6.52g，24.86mmol)，将该混合液在0℃搅拌15min，然后加入三乙胺(2.5g，24.86mmol)，并将该混合液在室温搅拌14h。然后将该反应混合液用二氯甲烷萃取，并用水和盐水洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，并浓缩。将残余物经柱色谱纯化(使用15％在己烷中的EtOAc作为洗脱剂)，得到(2S,4R)-4-叔丁氧基-2- 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯(2g，46.6％收率)，为黄色液体。MS C19H25N2O4[(M+H)+]的计算值345.0，实测值345.2。

[0356] 步骤4-7:(2S,4S)-4-氨基-2- 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备

[0357]

[0358] 以(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备中所用的相似的反应流程由(2S,4R)-4-叔丁氧基-2- 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯制备(2S,4S)-4-氨基-2- 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯。MS C15H18N3O3[(M+H)+]的计算值288，实测值288。

[0359] (2S,4S)-4-氨基-2-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备

[0360]

[0361] 步骤1:(2S,4R)-4-叔丁氧基-2-(2-氧代-丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备

[0362]

[0363] 向(2S,4R)-4-叔丁氧基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-苄基酯(10.78g，33.54mmol)和1-氨基-丙-2-酮(2.45g，crude,33.54mmol)在二氯甲烷(56mL)中的搅拌过的溶液中加入EDC.HCl(6.405g，33.54mmol)、HOBt(5.128g，33.54mmol)和三乙胺(12.67mL，100.62mmol)。将该混合液在室温搅拌24h。然后将该反应混合液用水稀释，用二氯甲烷萃取，并用水和盐水洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤，并浓缩。然后将粗品经柱色谱纯化，得到(2S,
4R)-4-叔丁氧基-2-(2-氧代-丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯(7g，55.4％收率)，为浅棕色液体。MS C20H29N2O5[(M+H)+]的计算值377.0，实测值377.4。

[0364] 步骤2:(2S,4R)-4-叔丁氧基-2-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备

[0365]

[0366] 向(2S,4R)-4-叔丁氧基-2-(2-氧代-丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯(2.5g，6.65mmol)和六氯乙烷(3.148g，13.3mmol)在二氯甲烷(16mL)中的搅拌过的溶液中加入三苯基膦(3.458g，13.3mmol)。将该混合液在0℃搅拌20min。然后加入三乙胺(1.36mL，13.3mmol)，并将该反应混合液在室温搅拌14h。然后将水加入该反应混合物中，用二氯甲烷萃取，并将合并的有机层用水和盐水洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，并浓缩。然后将粗品经柱色谱纯化，得到(2S,4R)-4-叔丁氧基-2-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯(1g，42％收率)，为类白色固体。MS C20H27N2O4[(M+H)+]的计算值359.0，实测值359.0。

[0367] 步骤3:(2S,4R)-4-羟基-2-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备[0368]

[0369] 在0℃向(2S,4R)-4-叔丁氧基-2-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯(2g，5.59mmol)在二氯甲烷(15mL)中的搅拌过的溶液中加入在二氯甲烷中的三氟乙酸(1.57mL)溶液(1:5)，然后将该混合液在室温搅拌16h。将该反应混合液用饱和的碳酸氢钠溶液中和，并用二氯甲烷萃取。将有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，并减压浓缩。然后将粗品经柱色谱纯化，得到(2S,4R)-4-羟基-2-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯(1.1g，65.1％收率)，为类白色固体。MS C16H19N2O4[(M+H)+]的计算值303.0，实测值303.4。

[0370] 步骤4-6:(2S,4S)-4-氨基-2-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备[0371]

[0372] 以(2S,4S)-4-氨基-2- 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备中所用的相似的反应流程由(2S,4R)-4-羟基-2-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯制备(2S,4S)-+4-氨基-2-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯。MS C16H20N3O3[(M+H)]的计算值
302，实测值302。

[0373] (2S,4S)-4-氨基-2-(5-叔-丁基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备

[0374]

[0375] 以(2S,4S)-4-氨基-2- 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备中所用的相似的反应流程由(2S,4R)-4-叔丁氧基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-苄基酯制备(2S,4S)-4-氨基-2-(5-叔-丁基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯。MS C19H26N3O3[(M+H)+]的计算值344，实测值344。

[0376] (2S,4S)-4-氨基-2-(5-苯基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备

[0377]

[0378] 以(2S,4S)-4-氨基-2- 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备中所用的相似的反应流程由(2S,4R)-4-叔丁氧基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-苄基酯制备(2S,4S)-4-氨基-2-(5-苯基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯。MS C21H22N3O3[(M+H)+]的计算值364，实测值364。

[0379] (2S,4S)-4-氨基-2-苯并 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备

[0380]

[0381] 步骤1:(2S,4R)-2-(2-溴-苯基氨基甲酰基)-4-叔丁氧基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备

[0382]

[0383] 根据为(2S,4R)-4-叔丁氧基-2-(2-氧代-丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯所述的方法由1g(2S,4R)-4-叔丁氧基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-苄基酯合成(2S,4R)-2-(2-溴-苯基氨基甲酰基)-4-叔丁氧基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯(290mg，19.6％纯度)。

[0384] 步骤2:(2S,4R)-2-苯并 唑-2-基-4-叔丁氧基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备[0385]

[0386] 在25℃向在密封管中的(2S,4R)-2-(2-溴-苯基氨基甲酰基)-4-叔丁氧基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯(900mg，1.89mmol)在DME(20mL)中的搅拌过的溶液中加入CuI(36mg，0.19mmol)、1,10-菲咯啉(68mg，0.38mmol)和Cs2CO3(1.847g，5.68mmol)。将该反应混合液回流14h。反应完成后，加入水，然后将该混合液用二氯甲烷萃取。将有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，并减压浓缩。然后将粗品经柱色谱纯化，得到(2S,4R)-2-苯并 唑-2-基-4-叔丁氧基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯(430mg，57.5％收率)，为微黄色液体。MS C23H27N2O4[(M+H)+]的计算值395，实测值395。

[0387] 步骤3-6:(2S,4S)-4-氨基-2-苯并 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备

[0388]

[0389] 以(2S,4S)-4-氨基-2- 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备中所用的相似的反应流程由(2S,4R)-2-苯并 唑-2-基-4-叔丁氧基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯制备(2S,4S)-4-氨基-2-苯并 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯。MS C19H20N3O3[(M+H)+]的计算值338，实测值338。

[0390] (2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备

[0391]

[0392] 步骤1:(2S,4R)-4-羟基-2-甲基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯的制备[0393]

[0394] 在-40℃向(2S,4R)-4-羟基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(500mg，2.04mmol)和MeI(1.2g，8.45mmol)在四氢呋喃中的溶液中加入二异丙基氨基锂在四氢呋喃中的溶液(1.5M溶液,5mL，7.47mmol)。将该反应混合液温至室温，并搅拌4h。反应完成后，将该混合液再冷却至-30℃，并用饱和的氯化铵水溶液淬灭。然后将该反应混合液用乙酸乙酯萃取，并用水和盐水洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤，并浓缩。将该粗品经制备型HPLC纯化，得到两种立体异构体；(2S,4R)-4-羟基-2-甲基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(200mg，37.7％收率)和(2R,4R)-4-羟基-2-甲基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(100mg，18.9％收率)。MS C12H22NO5[(M+H)+]的计算值260，实测值260。

[0395] 步骤2-5:(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备[0396]

[0397] 以(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备中所用的相似的反应流程由(2S,4R)-4-羟基-2-甲基-吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯制备(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯。

[0398] 实施例1

[0399] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯[0400]

[0401] 向(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯(150mg，0.62mmol)和1-羟基-萘-2-甲酸(90mg，0.75mmol)在DMF(2mL)中的搅拌过的溶液中加入HATU(285mg，0.75mmol)和N,N-二异丙基乙胺(96mg，0.75mmol)。将该混合液在室温搅拌24h。然后将该反应混合液用乙酸乙酯萃取，并用水和盐水洗涤。将有机层然后经无水硫酸钠干燥，浓缩，并经柱色谱纯化，得到(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯。MS C24H31N2O4[(M+H)+]的计算值411.0，实测值411.0。

[0402] 实施例2

[0403] (2S,4S)-1-苄基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯

[0404]

[0405] 以与实施例1类似的方式由(2S,4S)-4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-甲酸甲酯和1-羟基-萘-2-甲酸制备(2S,4S)-1-苄基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯。+
MS C24H25N2O4[(M+H)]的计算值405.0，实测值405.0。

[0406] 实施例3

[0407] (2S,4S)-1-(3,3-二甲基-丁基)-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯

[0408]

[0409] 以与实施例1类似的方式由(2S,4S)-4-氨基-1-(3,3-二甲基-丁基)-吡咯烷-2-甲酸甲酯和1-羟基-萘-2-甲酸制备(2S,4S)-1-(3,3-二甲基-丁基)-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯。MS C23H31N2O4[(M+H)+]的计算值399.0，实测值399.0。

[0410] 实施例4

[0411] (2S,4S)-1-环戊基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯[0412]

[0413] 以与实施例1类似的方式由(2S,4S)-4-氨基-1-环戊基甲基-吡咯烷-2-甲酸乙酯和1-羟基-萘-2-甲酸制备(2S,4S)-1-环戊基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯。MS C24H31N2O4[(M+H)+]的计算值411.0，实测值411.2。

[0414] 实施例5

[0415] (2S,4S)-1-环丁基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯[0416]

[0417] 以与实施例1类似的方式由(2S,4S)-4-氨基-1-环丁基甲基-吡咯烷-2-甲酸乙酯和1-羟基-萘-2-甲酸制备(2S,4S)-1-环丁基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯。MS C23H29N2O4[(M+H)+]的计算值397.0，实测值397.2。

[0418] 实施例6

[0419] (2S,4S)-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-1-异丁基-吡咯烷-2-甲酸乙酯

[0420]

[0421] 以与实施例1类似的方式由(2S,4S)-4-氨基-1-异丁基-吡咯烷-2-甲酸乙酯和1-羟基-萘-2-甲酸制备(2S,4S)-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-1-异丁基-吡咯烷-2-甲酸乙酯。MS C22H29N2O4[(M+H)+]的计算值385.0，实测值385.4。

[0422] 实施例7

[0423] (2S,4S)-1-环己烷羰基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯[0424]

[0425] 以与实施例1类似的方式由(2S,4S)-4-氨基-1-环己烷羰基-吡咯烷-2-甲酸乙酯和1-羟基-萘-2-甲酸制备(2S,4S)-1-环己烷羰基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯。MS C25H31N2O5[(M+H)+]的计算值439.0，实测值439.4。

[0426] 实施例8

[0427] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯[0428]

[0429] 步骤1:(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸的制备

[0430]

[0431] 向(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯(350mg，0.85mmol)在甲醇(8mL)中的搅拌过的溶液中加入氢氧化锂(204mg，8.53mmol)，并将该混合液在室温搅拌24h。然后将该反应混合液用稀盐酸酸化，用乙酸乙酯萃取，并用水和盐水洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，并经柱色谱纯化(使用15％在己烷中的EtOAc作为洗脱剂)，得到(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(250mg，74.0％收率)，为白色固体。MS C23H29N2O4[(M+H)+]的计算值397.0，实测值397.6。

[0432] 步骤2:(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯

[0433]

[0434] 向(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(50mg，0.13mmol)在乙醇(3mL)中的搅拌过的溶液中加入浓硫酸(0.1mL)，并将该反应混合液在95℃搅拌14h。然后将该反应混合液在真空下浓缩，用水稀释，用乙酸乙酯萃取，并用水和盐水洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，并经柱色谱纯化(使用5％在己烷中的EtOAc作为洗脱剂)，得到(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯+烷-2-甲酸乙酯(28mg，52.3％收率)，为蓝色粘性液体。MS C25H33N2O4[(M+H)]的计算值
425.0，实测值425.2。

[0435] 实施例9

[0436] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸叔丁酯[0437]

[0438] 将(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(50mg，0.13mmol)和2,2,2-三氯-乙亚氨酸叔丁酯(70mg，0.33mmol)在THF(1mL)中的混合液在0℃搅拌数分钟。然后在0℃滴加BF3.OEt2(20mg，0.13mmol)，并将该反应混合液温至室温，并搅拌2h。然后将该反应混合液用盐水溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取，并用水和盐水洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，浓缩，并经柱色谱纯化(使用5％在己烷中的EtOAc作为洗脱剂)，得到(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸叔丁酯(20mg，35.0％收率)，为淡蓝色粘性液体。MS C27H37N2O4[(M+H)+]的计算值453.0，实测值453.2。

[0439] 实施例10

[0440] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙基酰胺

[0441]

[0442] 以与实施例1类似的方式由(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸和乙胺制备(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-+吡咯烷-2-甲酸乙基酰胺。MS C25H34N3O3[(M+H)]的计算值424.0，实测值424.0。

[0443] 实施例11

[0444] 1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-5-(氮杂环丁烷-1-羰基)-1-环己基甲基-吡咯烷-3-基]-酰胺

[0445]

[0446] 以与实施例1类似的方式由(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸和氮杂环丁烷制备羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-5-(氮杂环丁烷-1-羰基)-1-环己基甲基-吡咯烷-3-基]-酰胺。MS C26H34N3O3[(M+H)+]的计算值436.0，实测值436.0。

[0447] 实施例12

[0448] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸丙基酰胺

[0449]

[0450] 在氩气气氛下在密封管中向(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯(150mg，0.37mmol)和44mg正丙胺的混合液中加入Me3Al(催化剂量，2M在甲苯中)，并将该混合液在100℃加热16hr。然后将该反应混合液用水淬灭，并用乙酸乙酯萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，并浓缩。然后将粗品经硅胶柱色谱纯化，得到(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸丙基酰胺(30mg，18.7％收率)，为白色固体。MS C26H36N3O3[(M+H)+]的计算值438.0，实测值438.2。

[0451] 实施例13

[0452] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸异丙基酰胺

[0453]

[0454] 以与实施例12类似的方式由(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯和异丙胺制备(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸异丙基酰胺。MS C26H36N3O3[(M+H)+]的计算值438.0，实测值437.8。

[0455] 实施例14

[0456] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸苄基酰胺

[0457]

[0458] 以与实施例12类似的方式由(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯和苄胺制备(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸苄基酰胺。MS C30H36N3O3[(M+H)+]的计算值486.0，实测值486.4。

[0459] 实施例15

[0460] 1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-1-环己基甲基-5-(吡咯烷-1-羰基)-吡咯烷-3-基]-酰胺

[0461]

[0462] 以与实施例12类似的方式由(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯和吡咯烷制备羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-1-环己基甲基-5-(吡咯烷-1-羰基)-吡咯烷-3-基]-酰胺。MS C27H36N3O3[(M+H)+]450.0的计算值，实测值450.2。

[0463] 实施例16

[0464] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸酰胺[0465]

[0466] 在密封管中向(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯(50mg)在四氢呋喃(7mL)中的溶液中加入氢氧化铵水溶液(15mL)，并将该混合液在95℃加热24小时。将该反应混合液浓缩，并将水层用乙醚萃取，用盐水洗涤，干燥，浓缩，并将经柱色谱纯化，得到(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯+
烷-2-甲酸酰胺(8mg，16％收率)，为浅棕色固体。MS C23H30N3O3[(M+H)]的计算值396，实测值396。

[0467] 实施例17

[0468] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯

[0469]

[0470] 以与实施例1类似的方式由(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯和1-羟基-萘-2-甲酸制备(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯。MS C25H33N2O4[(M+H)+]的计算值425，实测值425。

[0471] 实施例18

[0472] (2R,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯[0473]

[0474] 以与实施例1类似的方式由(2R,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯和1-羟基-萘-2-甲酸制备(2R,4S)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯+烷-2-甲酸甲酯。MS C24H31N2O4的计算值[(M+H)]411，实测值411。

[0475] 实施例19

[0476] (2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯[0477]

[0478] 以与实施例1类似的方式由(2S,4R)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯和1-羟基-萘-2-甲酸制备(2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯。MS C24H31N2O4的计算值[(M+H)+]411，实测值411。

[0479] 实施例20

[0480] (2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯[0481]

[0482] 以与实施例8类似的方式由(2S,4R)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯制备(2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯。MS C25H33N2O4[(M+H)+]的计算值425，实测值425。

[0483] 实施例21

[0484] (2S,4S)-4-[(1-氨基-萘-2-羰基)-氨基]-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯[0485]

[0486] 以与实施例1类似的方式由(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯和1-氨基-萘-2-甲酸制备(2S,4S)-4-[(1-氨基-萘-2-羰基)-氨基]-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯。MS C24H32N3O3[(M+H)+]的计算值410，实测值410。

[0487] 实施例22

[0488] (2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(8-羟基-喹啉-7-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯[0489]

[0490] 以与实施例1类似的方式由(2S,4S)-4-氨基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯和8-羟基-喹啉-7-甲酸制备(2S,4S)-1-环己基甲基-4-[(8-羟基-喹啉-7-羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸乙酯。MS C24H32N3O4[(M+H)+]的计算值426，实测值426。

[0491] 实施例23

[0492] (2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-哌啶-2-甲酸甲酯[0493]

[0494] 以与实施例1类似的方式由(2S,4R)-4-氨基-1-环己基甲基-哌啶-2-甲酸甲酯和1-羟基-萘-2-甲酸制备(2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-哌啶-2-甲酸甲酯。MS C25H33N2O4[(M+H)+]的计算值425，实测值425。

[0495] 实施例24

[0496] (2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-哌啶-2-甲酸乙酯[0497]

[0498] 以与实施例8类似的方式由(2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-哌啶-2-甲酸甲酯制备(2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-哌啶-2-甲酸乙酯。MS C26H35N2O4[(M+H)+]的计算值439，实测值439。

[0499] 实施例25

[0500] (2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-哌啶-2-甲酸乙基酰胺[0501]

[0502] 以与实施例10类似的方式由(2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-哌啶-2-甲酸甲酯制备(2S,4R)-1-环己基甲基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-哌啶-2-甲酸乙酯。MS C26H36N3O3[(M+H)+]的计算值438，实测值438。

[0503] 实施例26

[0504] 1-羟基-萘-2-甲酸((3S,5S)-1-环己基甲基-5- 唑-2-基-吡咯烷-3-基)-酰胺[0505]

[0506] 步骤1:(2S,4S)-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-2- 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备

[0507]

[0508] 以与实施例1类似的方式由(2S,4S)-4-氨基-2- 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯和1-羟基-萘-2-甲酸制备(2S,4S)-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-2- 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯。MS C26H24N3O5[(M+H)+]的计算值458，实测值458。

[0509] 步骤2:1-羟基-萘-2-甲酸((3S,5S)-5- 唑-2-基-吡咯烷-3-基)-酰胺的制备[0510]

[0511] 向(2S,4S)-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-2- 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯(30mg，0.06mmol)在甲醇(2mL)中的溶液中加入20％Pd(OH)2(20mg)，并使用含H2气的气球将该混合液在室温搅拌16h。然后将该反应混合液过滤，并减压浓缩，得到1-羟基-萘-2-甲酸((3S,5S)-5- 唑-2-基-吡咯烷-3-基)-酰胺(15mg)，为浅棕色液体。MS C18H18N3O3[(M+H)+]的计算值324，实测值324。

[0512] 步骤3:1-羟基-萘-2-甲酸((3S,5S)-1-环己基甲基-5- 唑-2-基-吡咯烷-3-基)-酰胺的制备

[0513]

[0514] 以与(2S,4S)-4-叠氮基-1-环己基甲基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的合成类似的方式由1-羟基-萘-2-甲酸((3S,5S)-5- 唑-2-基-吡咯烷-3-基)-酰胺和环己烷甲醛制备羟基-萘-2-甲酸((3S,5S)-1-环己基甲基-5- 唑-2-基-吡咯烷-3-基)-酰胺。MS C25H30N3O3[(M+H)+]的计算值420，实测值419.8。

[0515] 实施例27

[0516] 1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-1-环己基甲基-5-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-3-基]-酰胺

[0517]

[0518] 步骤1:(2S,4S)-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-2-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备

[0519]

[0520] 以与实施例1类似的方式由(2S,4S)-4-氨基-2-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯和1-羟基-萘-2-甲酸制备(2S,4S)-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-2-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯。MS C27H26N3O5[(M+H)+]的计算值472，实测值472。

[0521] 步骤2:1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-5-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-3-基]-酰胺的制备

[0522]

[0523] 以与实施例26类似的方式由(2S,4S)-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-2-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯制备1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-5-(5-甲基-唑-2-基)-吡咯烷-3-基]-酰胺。MS C19H20N3O3[(M+H)+]的计算值338，实测值338。

[0524] 步骤3:1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-1-环己基甲基-5-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-3-基]-酰胺的制备

[0525]

[0526] 以与实施例26类似的方式由1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-5-(5-甲基- 唑-2-基)-吡咯烷-3-基]-酰胺制备1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-1-环己基甲基-5-(5-甲基-+唑-2-基)-吡咯烷-3-基]-酰胺。MS C26H32N3O3[(M+H)]的计算值434，实测值434。

[0527] 实施例28

[0528] 1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-1-环己基甲基-5-(5-苯基- 唑-2-基)-吡咯烷-3-基]-酰胺

[0529]

[0530] 步骤1:(2S,4S)-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-2-(5-苯基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备

[0531]

[0532] 以与实施例1类似的方式由(2S,4S)-4-氨基-2-(5-苯基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯和1-羟基-萘-2-甲酸制备(2S,4S)-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-2-(5-苯基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯。MS C32H28N3O5[(M+H)+]的计算值534，实测值534。

[0533] 步骤2:1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-5-(5-苯基- 唑-2-基)-吡咯烷-3-基]-酰胺的制备

[0534]

[0535] 以与实施例26类似的方式由(2S,4S)-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-2-(5-苯基- 唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸苄基酯制备1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-5-(5-苯基-唑-2-基)-吡咯烷-3-基]-酰胺。MS C24H22N3O3[(M+H)+]的计算值400，实测值400。

[0536] 步骤3:1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-1-环己基甲基-5-(5-苯基- 唑-2-基)-吡咯烷-3-基]-酰胺的制备

[0537]

[0538] 以与实施例26类似的方式由1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-5-(5-苯基- 唑-2-基)-吡咯烷-3-基]-酰胺制备1-羟基-萘-2-甲酸[(3S,5S)-1-环己基甲基-5-(5-苯基-+唑-2-基)-吡咯烷-3-基]-酰胺。MS C31H34N3O3[(M+H)]的计算值496，实测值496。

[0539] 实施例29

[0540] 1-羟基-萘-2-甲酸((3S,5S)-5-苯并 唑-2-基-1-环己基甲基-吡咯烷-3-基)-酰胺

[0541]

[0542] 步骤1:(2S,4S)-2-苯并 唑-2-基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-1-甲酸苄基酯的制备

[0543]

[0544] 以与实施例1类似的方式由(2S,4S)-4-氨基-2-苯并 唑-2-基-吡咯烷-1-甲酸苄基酯和1-羟基-萘-2-甲酸制备(2S,4S)-2-苯并 唑-2-基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-1-甲酸苄基酯。MS C30H26N3O5[(M+H)+]的计算值508，实测值508。

[0545] 步骤2:1-羟基-萘-2-甲酸((3S,5S)-5-苯并 唑-2-基-吡咯烷-3-基)-酰胺的制备

[0546]

[0547] 以与实施例26类似的方式由(2S,4S)-2-苯并 唑-2-基-4-[(1-羟基-萘-2-羰基)-氨基]-吡咯烷-1-甲酸苄基酯制备1-羟基-萘-2-甲酸((3S,5S)-5-苯并 唑-2-基-吡咯烷-3-基)-酰胺。MS C22H20N3O3[(M+H)+]的计算值374，实测值374。

[0548] 步骤3:1-羟基-萘-2-甲酸((3S,5S)-5-苯并 唑-2-基-1-环己基甲基-吡咯烷-3-基)-酰胺的制备

[0549]

[0550] 以与实施例26类似的方式由1-羟基-萘-2-甲酸((3S,5S)-5-苯并 唑-2-基-吡咯烷-3-基)-酰胺制备1-羟基-萘-2-甲酸((3S,5S)-5-苯并 唑-2-基-1-环己基甲基-吡咯烷-3-基)-酰胺。MS C29H32N3O3[(M+H)+]的计算值470，实测值470。

[0551] 生物学实施例

[0552] 用复制子荧光素酶报告基因试验测定化合物的HCV GT1b抑制复制子活性

[0553] 如之前所述的那样，在Roche通过用GT-1b Con1亚基因组双顺反子复制子稳定转染肝瘤细胞系Huh-7来建立2209-23细胞系。在得自R.Bartenschlager(J Virol.2003 Mar；77(5):3007-19)的治愈Huh7细胞中建立亚基因组复制子细胞系。通过用H77株中的非结构区域替代GT-1b Con1亚基因组复制子的非结构区域(GT-1b Con1株的NS3蛋白的前75个氨基酸除外)来产生GT-1a H77亚基因组复制子载体pRLuc H77 1b 75 S/I(J Virol.2001 
77:5352-59)。在得自R.Bartenschlager的治愈Huh7细胞中建立GT-1a pRLuc H77 1b 75 S/I亚基因组复制子细胞系(J Virol.2003 Mar；77(5):3007-19)。

[0554] 将所有的亚基因组复制子细胞系在Dulbecco’s改良的伊格尔培养基(DMEM-GlutamaxTM-I；Invitrogen Cat#10569-010)中进行培养。向该培养基补加10％胎牛血清(Invitrogen Cat#10082-147)、1％青霉素/链霉素(Mediatech Cat#30-002-CI)和500μg/ml G418(Mediatech Cat#30-234-CI)。将细胞在37℃下维持在潮湿的5％CO2气氛中。

[0555] 将2209-23细胞以每孔5000个细胞的细胞密度涂到96孔板(Becton Dickinson,TMCat#353296)中。将细胞涂到90μl Dulbecco’s改良的伊格尔培养基(DMEM-Glutamax -I),(Invitrogen Cat#10569-010)中，该培养基补加有5％胎牛血清(Invitrogen Cat#10082-
147)、1％青霉素/链霉素(Mediatech Cat#30-002-CI)。将pRluc H77 1b 75 S/I细胞以
3000个细胞/孔涂到96-孔板中在90μl的终体积中包含5％FBS和1％青霉素/链霉素的DMEM-TM
Glutamax -I中。使这些细胞在37℃和5％CO2下平衡24小时，然后加入化合物。以10μl体积以3倍稀释液的形式在涂24小时后加入化合物(或作为对照的培养基)，DMSO的终浓度为
1％。在加入化合物后72小时，用Renilla荧光素酶试验系统(Promega,cat#E2820)对Renilla荧光素酶报告基因信号进行读数。EC50值被定义为在其下观察到与不存在化合物的对照样品相比，Renilla荧光素酶报告基因水平降低50％的化合物浓度，其是通过化合物剂量-响应数据的非线性拟合来测定的。如果最大抑制百分比低于90％且高于70％，则EC50是近似值。

[0556] 利用HCV GT1b复制子细胞系测定来检测化合物的细胞毒性

[0557] 将WST12209-23细胞以每孔5000个细胞的细胞密度涂到用于进行细胞活力研究的透明的平底96孔板(Becton Dickinson,Cat#35 3075)中。用WST-1细胞增殖试验(Roche Diagnostic,Cat#11644807001)来测定细胞活力。试验板的格式被设定为与复制子试验中相同。在与化合物培养3天后，按照制造商的说明向各孔中加入10μl WST-1试剂并在37℃和5％CO2下培养2小时。用MRX Revelation微量滴定板读数器(Lab System)测定450nm下的吸收读数(参考滤光器位于650nm)。CC50值被定义为与不存在化合物的未处理对照相比，使细胞活力降低50％所需的化合物浓度，其是通过化合物剂量-响应数据的非线性拟合来测定的。在下面的表II中可以找到代表性的试验数据:

[0558] 表II.

[0559] 化合物# GT-1a-EC50(nM)

[0560]