一种4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物及其制备方法和应用。所述的4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物结构通式为：本发明的4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物可用于制备微管蛋白抑制剂、蛋白激酶抑制剂、治疗对细胞毒活性有反应的各种癌症如乳腺癌或结肠以及与异常血管生成相关的疾病癌的药物，具有高效、低毒、多重抑制效果的特点。

权利要求

1.一种4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物，其特征在于，所述衍生物结构通式如下(I)所示：所述的4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物为下列中的一种：。

2.权利要求1所述的4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物的药学上可接受的盐。

3.根据权利要求2所述的药学上可接受的盐，其特征在于，所述药学上可接受的盐为无机盐、有机盐或氨基酸盐；

其中无机盐为：盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、二磷酸盐、氢溴酸盐或硝酸盐；

其中有机盐为：乙酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、乳酸盐、对甲苯磺酸盐、水杨酸盐、草酸盐；

其中氨基酸盐为：精氨酸盐、鸟氨酸盐、赖氨酸盐、亮氨酸盐、异亮氨酸盐、甘氨酸盐、胱氨酸盐、半胱氨酸盐、酪氨酸盐、丙氨酸盐、苯丙氨酸盐、组氨酸盐、丝氨酸盐、苏氨酸盐、蛋氨酸盐、色氨酸盐、谷氨酸盐、天冬氨酸盐、缬氨酸盐、甲硫氨酸盐、脯氨酸盐或羟脯氨酸盐。

4.一种药物组合物，其特征在于，它包含a)权利要求书1所述4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物、权利要求2所述的4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物的药学上可接受的盐的一种或几种，和b)其药学上可接受的载体。

5.权利要求1所述的4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物，权利要求2所述的4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物的药学上可接受的盐，或权利要求4所述的药物组合物在制备药物中的用途，其特征在于，所述的药物用于：a)抑制微管蛋白；

b)抑制蛋白激酶；

c)治疗细胞毒活性有反应的癌症；

d)治疗结肠癌、肺癌、乳腺癌或白血病；

所述b)中激酶为AKT1、GSK3β、c-MET激酶；所述c)中细胞为肺癌细胞A549、结肠癌细胞HCT116或乳腺癌细胞MDA-MB-23。

说明书

一种4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物及其制备方法和

应用

技术领域

[0001] 本发明涉及医药技术领域，具体地说，是一种4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物及其制备方法和应用。

背景技术

[0002] 近年来，恶性肿瘤已成为我国城乡居民的首位死因，死亡率呈增长趋势。当今化疗药物是治疗肿瘤的主要方法，其中，分子靶向药物具有比传统的细胞毒类抗肿瘤药物作用机制更明确、特异性更高、毒性低的特点，是当今抗肿瘤药物研究的主要方向。由于肿瘤是多基因参与、多种信号影响的多阶段性复杂疾病，在肿瘤临床治疗过程中，单靶点抗肿瘤药物表现出抑瘤谱单一、易出现耐药等问题。而作用于多个靶点的抗肿瘤药物能有效切断多条肿瘤发生途径，具有更好的治疗优势，同时可避免单靶点药物易产生耐药性等问题，已成为目前抗肿瘤药物研究的热点领域。

[0003] 微管蛋白是肿瘤血管靶向治疗的重要靶标。在微管蛋白的三个主要药物结合位点中，秋水仙碱位点因结合腔的体积较小，且相应抑制剂的结构简单，相比于紫杉醇位点和长春碱位点更适合开展小分子抑制剂的研究。

[0004] 随着细胞信号转导通路逐渐被揭示，研究发现靶向作用于与肿瘤分化增殖相关的通路可有效抑制肿瘤生长并降低对正常细胞的伤害，因此在通路中发挥关键作用的蛋白激酶成了药物筛选重要靶点，为发现高效、低毒的靶向抗肿瘤药物研究指明了方向。

[0005] 微管蛋白抑制剂和蛋白激酶抑制剂是目前抗肿瘤药物研究的两大热点领域。微管蛋白抑制剂和多种蛋白激酶抑制剂的研究经验表明，一些作用机制不同的抑制剂具有相似的结构，甚至某些微管蛋白抑制剂显示出一定的激酶抑制活性。因此设计发现既作用于微管蛋白又能抑制激酶的抗肿瘤化合物是有可能的，开发全新、高效、低毒的具有微管蛋白和蛋白激酶的多重抑制剂也是十分必要的。

发明内容

[0006] 本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物。

[0007] 本发明的再一的目的是，提供所述4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物的药学上可接受的盐、溶剂化物、前体化合物或多晶型物。

[0008] 本发明的另一的目的是，提供所述4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物的制备方法。

[0009] 本发明的第四个目的，提供一种药物组合物。

[0010] 本发明的第五个目的，提供所述4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物、其药学上可接受的盐、溶剂化物、前体药物或多晶型物的在制备药物中的用途。

[0011] 为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：

[0012] 一种4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物，其结构通式为：

[0013]

[0014] 其中，取代基R1位于2、3、4、5、6位，可以是未取代、单取代、双取代或多取代，取代基R1选自下列基团中的一种、两种或多种：氢、卤素、腈基、硝基、羟基、取代或未取代的氨基、取代或未取代的C1-8烷基、取代或未取代的C1-8烷氧基，当R1为双或三取代时，取代基可以相同或不同；

[0015] 优选的，取代基R1位于2、3、4、5或6位，可以是未取代的、单取代的、双取代的、或多取代的，所述的取代基选自下列基团中的一种、两种或多种：硝基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、氟、氯、溴、碘、氰基、氨基、羟基、单氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、单氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、单溴甲基、二溴甲基、三溴甲基，当R1为双或三取代时，取代基可以相同或不同。

[0016] 更优的，取代基R1位于2、3、4、5、6位，是单取代的、双取代或多取代，所述取代基选自下列基团中的一种、两种或多种：2-NO2，3-NO2，4-NO2，2-CH3，3-CH3，4-CH3，2-OCH3，3-OCH3，4-OCH3，2-F，3-F，4-F，2-CF3，3-CF3，4-CF3，2-CN，3-CN，4-CN，2-NH2，3-NH2，4-NH2，
2-OH，3-OH，4-OH，当R1为双或三取代时，取代基可以相同或不同；

[0017] 最优选的，取代基R1位于2、3、4、5或6位，是单取代的、双取代或多取代，所述的取代基选自下列基团中的一种、两种或多种：2-NO2、3-NO2、4-NO2、2-CH3、3-CH3、4-CH3、2-OCH3、3-OCH3、4-OCH3、2-F、3-F、4-F、2-CF3、3-CF3、4-CF3、2-CN、3-CN、4-CN、2-NH2、3-NH2、4-NH2、
2-OH、3-OH、4-OH、3，5- OCH3、2，4-F、2，4-CH3、2，5-F、3，5-F、2，5- OCH3、2，3-CH3；

[0018] 取代基R2位于2’、3’、4’、5’、6’位，是未取代、单取代、双取代或多取代，取代基R2选自下列基团中的一种、两种或多种：氢、卤素、腈基、硝基、羟基、取代或未取代的氨基、取代或未取代的C1-8烷基、取代或未取代的C1-8烷氧基，当R2为双或三取代时，取代基可以相同或不同；

[0019] 优选的，R2位于2’、3’、4’、5’、6’位，是未取代、单取代、双取代或多取代，所述取代基选自下列基团中的一种、两种或多种：直链或支链烷氧基、氨基、羟基、直链或支链酰氧基、直链或支链酰氨基，当R2为双取代或三取代时，取代基可以相同或不同；

[0020] 更优的，取代基R2位于2’、3’、4’、5’、6’位，是单取代、双取代或多取代，所述取代基选自下列基团中的一种、两种或多种：甲氧基、羟基、氨基、乙酰氧基、乙酰氨基、氨基乙酰氧基，当R2为双或三取代时，取代基可以相同或不同。

[0021] 最优选的，取代基R2位于2’、3’、4’、5’、6’位，是单取代、双取代或多取代，所述取代基选自下列基团中的一种、两种或多种：4-OCH3、2-NH2、3-NH2、4-NH2、3-OH-4-OCH3、2-NCOCH3、3- NCOCH3、4- NCOCH3、3-OCOCH3-4-OCH3、3-OCOCH2NH2-4-OCH3。

[0022] 除非另有说明，本发明所述的C1-8的直链或支链烷氧基是指含有1-8个碳原子的烷氧基，包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基、庚氧基或辛氧基。

[0023] 除非另有说明，本发明所述的C1-8的直链或支链烷基是指含有1-8个碳原子的烷基，包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、庚基或辛基。

[0024] 除非另有说明，术语卤素为卤族元素取代基，包括但不限于氟、氯、溴或碘。

[0025] 其中，本发明中的术语“多取代”和“多种”指三种或三种以上，以下出现的也为相同含义。

[0026] 作为最佳的实施方式之一，本发明所述4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物为如下表1的具体化合物：

[0027] 表1 4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物

[0028]

[0029]

[0030]

[0031] 为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：

[0032] 所述4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物的药学上可接受的盐、溶剂化物、前体化合物或多晶型物。

[0033] 所述药学上可接受的盐为无机盐、有机盐或氨基酸盐。

[0034] 其中，无机盐的例子包括：盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、二磷酸盐、氢溴酸盐或硝酸盐。

[0035] 其中，有机盐的例子包括：乙酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、乳酸盐、对甲苯磺酸盐、水杨酸盐、草酸盐。

[0036] 其中，氨基酸盐的例子包括：精氨酸盐、鸟氨酸盐、赖氨酸盐、亮氨酸盐、异亮氨酸盐、甘氨酸盐、胱氨酸盐、半胱氨酸盐、酪氨酸盐、丙氨酸盐、苯丙氨酸盐、组氨酸盐、丝氨酸盐、苏氨酸盐、蛋氨酸盐、色氨酸盐、谷氨酸盐、天冬氨酸盐、缬氨酸盐、甲硫氨酸盐、脯氨酸盐或羟脯氨酸盐。

[0037] 为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：

[0038] 所述4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物制备方法，包括如下步骤：

[0039] （1）制备4-乙酰基-1，1’-联苯

[0040] 将对乙酰苯硼酸和溴苯溶于水和二氧六环，加入二（三苯基磷）氯化钯、碳酸铯，回流，反应生成4-乙酰基-1，1’-联苯。

[0041] （2）制备4-乙酰基-1，1’-联苯对甲苯磺酰腙

[0042] 将4-乙酰基-1，1’-联苯和对甲苯磺酰肼在无水乙醇中回流，放冷析出4-乙酰基-1，1’-联苯对甲苯磺酰腙。

[0043] （3）制备4-(1-取代苯基乙烯基)联苯

[0044] 将4-乙酰基-1，1’-联苯对甲苯磺酰腙和溴苯溶于二氧六环中，加入二(乙腈)氯化、3-双(二苯基磷)丙烷和碳酸铯，氮气保护搅拌回流，生成4-(1-取代苯基乙烯基)联苯。

[0045] 其中，4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物药学上可接受的盐的制备方法可以按照本领域常规方法进行制备，例如与无机盐、有机盐或氨基酸盐在常规条件下进行反应而得。

[0046] 为实现上述第四个目的，本发明采取的技术方案是：

[0047] 一种药物组合物，它包含a）权利要求书1-5任一所述4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物、权利要求6所述的4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物的药学上可接受的盐、溶剂化物、前体化合物或多晶型物，和b）其药学上可接受的载体。

[0048] 所述药物组合物可以是固体形式或是液体形式的药物制剂，所述药物剂型包括但不限于片剂、胶囊、粉末剂、颗粒剂、混悬剂或注射剂。

[0049] 为实现上述第五个目的，本发明采取的技术方案是：

[0050] 所述的4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物、其药学上可接受的盐、溶剂化物、前体药物、多晶型物或药物组合物在制备药物中的用途，所述的药物用于：

[0051] a) 抑制微管蛋白；

[0052] b）抑制蛋白激酶；

[0053] c）治疗细胞毒活性有反应的癌症；

[0054] d）治疗与异常血管生成有关的疾病；

[0055] e）治疗结肠癌、肺癌、乳腺癌或白血病。

[0056] 除非另有说明，本发明中所说的蛋白激酶为肿瘤生长相关的蛋白激酶，包括但不限于AKT、C-met或GSK3β。

[0057] 本发明通过对秋水仙碱晶体复合物结构中结合位点的性质进行分析并进行对接模拟实验，发现本发明所述4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物具有微管蛋白抑制活性，并验证了其对多种肿瘤细胞具有生物活性。

[0058] 更进一步，本发明还提供了所述4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物或其药学可接受的盐在制备治疗细胞毒活性有反应的癌症的药物中的应用。

[0059] 更进一步，本发明还提供了所述4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物或其药学可接受的盐在制备治疗与异常血管生成有关的疾病的药物中的应用。

[0060] 更进一步，本发明还提供了所述4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物或其药学可接受的盐在制备治疗肿瘤类型疾病的药物中的应用。

[0061] 最佳地，本发明还提供了所述4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物或其药学可接受的盐在制备用于治疗结肠癌、肺癌、乳腺癌或白血病药物中的应用。

[0062] 另外，本发明还提供了所述4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物或其药学可接受的盐用于治疗的癌症包括但不限于食道、胃、肠、直肠、口腔、咽、喉、肺、结肠、乳腺、子宫、子宫内膜、卵巢、前列腺、膀胱、肾、肝、胰腺、骨、结缔组织、皮肤、眼、脑、和中枢神经系统等部位发生的癌症，以及甲状腺癌、白血病、霍杰金氏病和骨髓瘤等。

[0063] 本发明优点在于：

[0064] 提供了一种高效、低毒、具有多重抑制效果的抗肿瘤、尤其是针对结肠癌瘤株的药物。本发明的化合物4-(1-取代苯基乙烯基)联苯衍生物不仅能抑制微管蛋白，又能抑制蛋白激酶，具有更好的治疗优势。

具体实施方式

[0065] 本发明通过以下实施例和实验例进一步阐述本发明，但本发明并不受限于此。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商建议的条件。

[0066] 实施例1 4'-(1-(4-甲氧基苯基)乙烯基)-2-硝基联苯的制备（表1中化合物1）[0067]

[0068] (1) 制备中间体：2-硝基-4’-乙酰基-1，1’-联苯(Ⅱ)

[0069] 对乙酰苯硼酸(0.23g，1.4mmol)、2-硝基溴苯(Ⅰ)(0.20g，1mmol)、碳酸铯（0.489g，1.5mmol）溶于水（0.75ml）和二氧六环（2.2ml），再加入二（三苯基磷）氯化钯（0.02g，0.03mmol），氮气保护，100℃回流搅拌1hr，反应液呈棕色清液。把反应液慢慢加入碎冰（400g）中，然后搅拌1h。加15ml水，用乙酸乙酯（10ml×3）萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤后减压蒸馏浓缩，柱层析分离(PE: EtOAc = 20：1)，得白色固体，收率86%。
得到中间体(Ⅱ)；

[0070] (2) 制备中间体：2-硝基-4’-乙酰基-1，1’-联苯对甲苯磺酰腙(Ⅲ)

[0071] 将中间体(Ⅱ) (0.25g，1.28mmol）和对甲苯磺酰肼(0.2g，1.53mmol）溶于无水乙醇（10ml），氮气保护，110℃回流。TLC检测反应。反应结束后放冷，系出白色固体，收率89%。得到中间体(Ⅲ)；

[0072] (3) 制备目标产物：2-硝基-4’- (1-（4-甲氧基苯基）-1-乙烯基)联苯(Ⅴ)[0073] 将中间体(Ⅲ)（0.49g，1.2mmol）、二（乙腈）氯化钯（0.013g、0.05mmol）和1，3-双（二苯基磷）丙烷（0.04g，10mol%）溶解在10ml干燥的二氧六环中，氮气保护，室温搅拌5分钟。加入浓盐酸碳酸铯（0.98g，3mmol），氮气保护，于室温下搅拌1分钟。加入对甲氧基溴苯(Ⅳ)（0.1g，0.5mmol），氮气保护，90℃加热回流，搅拌。TLC检测反应，待反应结束，放冷至室温，加乙酸乙酯过滤，减压蒸馏浓缩，柱层析分离(PE：EtOAc = 5:1)，得白色固体，产率71%。得标题化合物(Ⅴ)。

[0074] 实施例2-7

[0075] 重复实施例1，不同点在于：使用不同的原料，从而制得化合物2-7。具体如下：

[0076] 将3-甲基溴苯、2-甲氧基溴苯、3-甲氧基溴苯、4-硝基溴苯、3-硝基溴苯、2-甲基溴苯分别与对乙酰苯硼酸制备成相应取代的对乙酰联苯，再和对甲苯磺酰肼制成相应的取代4’-乙酰基-1，1’-联苯对甲苯磺酰腙，最后分别再和对甲氧基溴苯反应生成表1中化合物2、3、4、5、6、7。

[0077] 实施例8：4'-(1-(3-乙酰氧基-4-甲氧基苯基)乙烯基)-3，5-二甲氧基联苯的制备（表1中化合物8）

[0078]

[0079] (1) 制备中间体：3，5-二甲氧基-4’-乙酰基-1，1’-联苯(Ⅶ)

[0080] 对乙酰苯硼酸(0.23g，1.4mmol)、3，5-二甲氧基溴苯(Ⅵ)(0.22g，1mmol)、碳酸铯（0.489g，1.5mmol）溶于水（0.75ml）和二氧六环（2.2ml），再加入二（三苯基磷）氯化钯（0.02g，0.03mmol），氮气保护，100℃回流搅拌1hr，反应液呈棕色清液。把反应液慢慢加入碎冰（400g）中，然后搅拌1h。加15ml水，用乙酸乙酯（10ml×3）萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤后减压蒸馏浓缩，柱层析分离(PE：EtOAc = 20：1)，得白色固体，收率86%。得到中间体(Ⅶ)；

[0081] (2) 制备中间体：3，5-二甲氧基-4’-乙酰基-1，1’-联苯对甲苯磺酰腙(Ⅷ)[0082] 将中间体(Ⅶ) (0.25g，1.28mmol）和对甲苯磺酰肼(0.2g，1.53mmol）溶于无水乙醇（10ml），氮气保护，110℃回流。TLC检测反应。反应结束后放冷，系出白色固体，收率89%。得到中间体(Ⅷ)；

[0083] (3) 制备目标产物：3，5-二甲氧基-4’- (1-（3-乙酰氧基-4-甲氧基苯基）-1-乙烯基)联苯(Ⅹ)

[0084] 将中间体(Ⅷ)（0.49g，1.2mmol）、二（乙腈）氯化钯（0.013g、0.05mmol）和1，3-双（二苯基磷）丙烷（0.04g，10mol%）溶解在10ml干燥的二氧六环中，氮气保护，室温搅拌5分钟。加入浓盐酸碳酸铯（0.98g，3mmol），氮气保护，于室温下搅拌1分钟。加入3-乙酰氧基-4甲氧基溴苯(Ⅸ)（0.1g，0.5mmol），氮气保护，90℃加热回流，搅拌。TLC检测反应，待反应结束，放冷至室温，加乙酸乙酯过滤，减压蒸馏浓缩，柱层析分离(PE：EtOAc = 5：
1)，得白色固体，产率31%。得标题化合物(Ⅹ)。

[0085] 实施例9-35：

[0086] 重复实施例8，不同点在于：使用不同的原料，从而制得化合物9-35。具体如下：

[0087] 将2-硝基溴苯、2，4-二氟溴苯、4-三氟甲氧基溴苯、3-甲基溴苯、2-甲氧基溴苯、4-甲氧基溴苯、2，4-二甲基溴苯、2-氰基溴苯、3-三氟甲氧基溴苯、2，5-二氟溴苯、3，5-二氟溴苯、2-三氟甲氧基溴苯、3-氰基溴苯、3-甲氧基溴苯、4-硝基溴苯、3-硝基溴苯、
2，5-二甲氧基溴苯、4-甲基溴苯、3-氟溴苯、4-氟溴苯、2-甲基溴苯、2-氨基溴苯、3-氨基溴苯、4-氨基溴苯、2，3-二甲基溴苯、2-三氟甲基溴苯、4-氰基溴苯分别与对乙酰苯硼酸制备成相应取代的对乙酰联苯，再和对甲苯磺酰肼制成相应的取代4’-乙酰基-1，1’-联苯对甲苯磺酰腙，最后分别再和3-乙酰氧基-4甲氧基溴苯反应生成表1中化合物9、10、11、
12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35。

[0088] 实施例36：4'-(1-(3-羟基-4-甲氧基苯基)乙烯基)-3，5-二甲氧基联苯的制备（表1中化合物36）

[0089]

[0090] (1) 制备中间体：3，5-二甲氧基-4’-乙酰基-1，1’-联苯(Ⅶ)

[0091] 对乙酰苯硼酸(0.23g，1.4mmol)、3，5-二甲氧基溴苯(Ⅵ)(0.22g,1mmol)、碳酸铯（0.489g，1.5mmol）溶于水（0.75ml）和二氧六环（2.2ml），再加入二（三苯基磷）氯化钯（0.02g，0.03mmol），氮气保护，100℃回流搅拌1hr，反应液呈棕色清液。把反应液慢慢加入碎冰（400g）中，然后搅拌1h。加15ml水，用乙酸乙酯（10ml×3）萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤后减压蒸馏浓缩，柱层析分离(PE：EtOAc = 20：1)，得白色固体，收率86%。得到中间体(Ⅶ)；

[0092] (2) 制备中间体：3，5-二甲氧基-4’-乙酰基-1，1’-联苯对甲苯磺酰腙(Ⅷ)[0093] 将中间体(Ⅶ) (0.25g，1.28mmol）和对甲苯磺酰肼(0.2g，1.53mmol）溶于无水乙醇（10ml），氮气保护，110℃回流。TLC检测反应。反应结束后放冷，系出白色固体，收率89%。得到中间体(Ⅷ)；

[0094] (3) 制备目标产物：3，5-二甲氧基-4’- (1-（3-乙酰氧基-4-甲氧基苯基）-1-乙烯基)联苯(Ⅺ)

[0095] 将中间体(Ⅷ)（0.49g，1.2mmol）、二（乙腈）氯化钯（0.013g，0.05mmol）和1，3-双（二苯基磷）丙烷（0.04g，10mol%）溶解在10ml干燥的二氧六环中，氮气保护，室温搅拌5分钟。加入浓盐酸碳酸铯（0.98g，3mmol），氮气保护，于室温下搅拌1分钟。加入3-乙酰氧基-4甲氧基溴苯(Ⅸ)（0.1g，0.5mmol），氮气保护，90℃加热回流，搅拌。TLC检测反应，待反应结束，放冷至室温，加乙酸乙酯过滤，减压蒸馏浓缩，柱层析分离(PE：EtOAc = 5：
1)，得白色固体，产率37%。得标题化合物(Ⅺ)。

[0096] 实施例37-67：

[0097] 重复实施例36，不同点在于：使用不同的原料，从而制得化合物37-67。具体如下：

[0098] 将2-硝基溴苯、2，4-二氟溴苯、4-三氟甲氧基溴苯、4-三氟甲基溴苯、3-甲基溴苯、2-甲氧基溴苯、3-三氟甲基溴苯、4-甲氧基溴苯、2，4-二甲基溴苯、2-氰基溴苯、3-三氟甲氧基溴苯、2，5-二氟溴苯、3，5-二氟溴苯、2-三氟甲氧基溴苯、3-氰基溴苯、3-甲氧基溴苯、4-硝基溴苯、3-硝基溴苯、2，5-二甲氧基溴苯、4-甲基溴苯、3-氟溴苯、4-氟溴苯、2-甲基溴苯、2-氨基溴苯、3-氨基溴苯、4-氨基溴苯、2，3-二甲基溴苯、2-三氟甲基溴苯、
4-氰基溴苯、3-溴苯酚、4-溴苯酚分别与对乙酰苯硼酸制备成相应取代的对乙酰联苯，再和对甲苯磺酰肼制成相应的取代4’-乙酰基-1，1’-联苯对甲苯磺酰腙，最后分别再和
3-乙酰氧基-4甲氧基溴苯反应生成表1中化合物36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、
47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67。

[0099] 实施例68：4'-(1-(4-氨基苯基)乙烯基)-4-三氟甲基联苯的制备（表1中化合物68）

[0100]

[0101] 将表1化合物37 (0.57g，1.82mmol)溶于20ml二氯甲烷，于冰浴条件下加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(0.76g，4.00mmol)和N-甲基吗啉(0.65ml，6.00ml)、Boc-甘氨酸(0.35g，2.01mmol)，氮气保护，室温搅拌。3小时反应结束，加入100ml二氯甲烷，水洗(50ml×3)，饱和氯化钠洗(50ml×3)，无水硫酸钠干燥，减压蒸馏，柱层析分离(PE: EtOAc = 20:1)，得化合物(XVIII)。

[0102] 将饱和盐酸乙醚加入化合物(XVIII)中，室温搅拌，溶解，10分钟后析出黄色固体，加入无水乙醚过滤，固体即为如标题所示的化合物(XIX)。收率78%。

[0103] 实施例69-75

[0104] 重复实施例68，不同点在于：使用不同的原料，从而制得化合物69-75。具体如下：

[0105] 以表1中化合物41、56、44、52、53、54、59分别和Boc-甘氨酸反应，再进行脱Boc反应，生成表1中化合物69、70、71、72、73、74、75。

[0106] 实施例76：4'-(1-(4-氨基苯基)乙烯基)-4-三氟甲基联苯的制备（表1中化合物76）

[0107]

[0108] 将化合物(XVI)(0.2g，0.5mmol)和氢氧化钾(0.35g，6mmol)溶于5ml水和10ml甲醇，55℃搅拌，TLC监测反应，至反应结束，减压蒸馏，加15ml水，用乙酸乙酯（10ml×3）萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤后减压蒸馏，得白色固体，即为如题化合物，收率90%。

[0109] 实施例77-90：

[0110] 重复实施例76，不同点在于：使用不同的原料，从而制得化合物77-90。具体如下：

[0111] 将表1中化合物92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105分别用甲醇进行水解，反应相应生成表1中化合物77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90。

[0112] 实施例91：4'-(1-(4-乙酰氨基苯基)乙烯基)-4-三氟甲基联苯的制备（表1中化合物91）

[0113]

[0114] (1) 制备中间体：4-三氟甲基-4’-乙酰基-1，1’-联苯(XIII)

[0115] 对乙酰苯硼酸(0.23g，1.4mmol)、3，5-二甲氧基溴苯(XII)(0.22g，1mmol)、碳酸铯（0.489g，1.5mmol）溶于水（0.75ml）和二氧六环（2.2ml），再加入二（三苯基磷）氯化钯（0.02g，0.03mmol），氮气保护，100℃回流搅拌1hr，反应液呈棕色清液。把反应液慢慢加入碎冰（400g）中，然后搅拌1h。加15ml水，用乙酸乙酯（10ml×3）萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤后减压蒸馏浓缩，柱层析分离(PE：EtOAc = 20：1)，得白色固体，收率86%。得到中间体(XIII)；

[0116] (2) 制备中间体：4-三氟甲基-4’-乙酰基-1，1’-联苯对甲苯磺酰腙(XIV)

[0117] 将中间体(XIII) (0.25g，1.28mmol）和对甲苯磺酰肼(0.2g，1.53mmol）溶于无水乙醇（10ml），氮气保护，110℃回流。TLC检测反应。反应结束后放冷，系出白色固体，收率89%。得到中间体(XIV)；

[0118] (3) 制备目标产物：4-三氟甲基-4’- (1-（2-乙酰氨基苯基）-1-乙烯基)联苯(Ⅺ)

[0119] 将中间体(XIV)（0.49g，1.2mmol）、二（乙腈）氯化钯（0.013g，0.05mmol）和1，3-双（二苯基磷）丙烷（0.04g,10mol%）溶解在10ml干燥的二氧六环中，氮气保护，室温搅拌5分钟。加入浓盐酸碳酸铯（0.98g，3mmol），氮气保护，于室温下搅拌1分钟。加入3-乙酰氧基-4甲氧基溴苯(XV)（0.1g，0.5mmol），氮气保护，90℃加热回流，搅拌。TLC检测反应，待反应结束，放冷至室温，加乙酸乙酯过滤，减压蒸馏浓缩，柱层析分离(PE：EtOAc = 5：
1)，得白色固体，产率70%。得标题化合物(XVI)。

[0120] 实施例92-95：

[0121] 重复实施例91，不同点在于：使用不同的原料，从而制得化合物92-95，具体如下：

[0122] 将2-甲基溴苯、2-氨基溴苯、2-三氟甲基溴苯、3-三氟甲基溴苯分别与对乙酰苯硼酸制备成相应取代的对乙酰联苯，再和对甲苯磺酰肼制成相应的取代4’-乙酰基-1，1’-联苯对甲苯磺酰腙，最后分别再和2-乙酰氨基溴苯反应生成表1中化合物92、93、94、
95。得白色固体，产率70%。得标题化合物(XVI)。

[0123] 实施例96-100：

[0124] 重复实施例91，不同点在于：使用不同的原料，从而制得化合物96-100。具体如下：

[0125] 将4-三氟甲基溴苯、2-甲基溴苯、2-氨基溴苯、2-三氟甲基溴苯、3-三氟甲基溴苯分别与对乙酰苯硼酸制备成相应取代的对乙酰联苯，再和对甲苯磺酰肼制成相应的取代4’-乙酰基-1，1’-联苯对甲苯磺酰腙,最后分别再和3-乙酰氨基溴苯反应生成表1中化合物96、97、98、99、100。

[0126] 实施例101-105：

[0127] 重复实施例91，不同点在于：使用不同的原料，从而制得化合物101-105。具体如下：

[0128] 将4-三氟甲基溴苯、2-甲基溴苯、2-氨基溴苯、2-三氟甲基溴苯、3-三氟甲基溴苯分别与对乙酰苯硼酸制备成相应取代的对乙酰联苯，再和对甲苯磺酰肼制成相应的取代4’-乙酰基-1，1’-联苯对甲苯磺酰腙，最后分别再和4-乙酰氨基溴苯反应生成表1中化合物101、102、103、104、105。

[0129] 本发明已合成的目标产物的化学结构见表1。核磁氢谱、质谱系统表征了目标产物1
的化学结构，合成的部分化合物化学结构和 H-NMR 数据见表2，质谱、熔点数据见表3。

[0130] 表2 部分化合物的化学结构和1H-NMR 数据

[0131]

[0132]

[0133]

[0134]

[0135] NT= 未测定；

[0136] 化合物1-105分别为实施例1-105中制备的化合物。

[0137] 表3 部分化合物的化学结构和质谱、熔点数据

[0138]

[0139]

[0140]

[0141]

[0142]

[0143]

[0144]

[0145]

[0146]

[0147]

[0148]

[0149] 实施例106:本发明化合物的抑酶活性生物测定

[0150] 1.实验材料

[0151] 表4 实验材料

[0152]

[0153] 2．测试方法：

[0154] 利用Mobility Shift Assay的方法在Km ATP的情况下，在AKT1、GSK3β、c-MET激酶上对化合物进行筛选。

[0155] 测试化合物浓度均为20μM时的抑制率。

[0156] 实验方法及结果均由上海睿智化学提供。

[0157] 3．激酶活性测试结果：

[0158] 表5 激酶活性测试结果

[0159]

[0160] 实施例107:本发明化合物的抑制微管蛋白活性实验

[0161] 一、实验材料和方法

[0162] 1．实验材料：牛微管蛋白（生产厂家：Cytoskeleton）。缓冲液General Tubulin Buffer：80mM PIPES pH=6.9，2mM MgCl2，0.5mM EGTA。Tubulin Glycerol Buffer：60% glycerol。GTP：100mM。DMSO（Merck）。96孔半面积培养板。仪器：Synergy 4型全自动酶标仪（生产厂商：BioTek）。

[0163] 2．实验方法：

[0164] 步骤一：用DMSO溶解样品，加入缓冲液General Tubulin Buffer配成浓度为40μM的溶液。

[0165] 步骤二：将配好的待测化合物加入96孔培养板中，每孔10μL，置酶标仪中，平衡温度至37℃。

[0166] 步骤三：将微管蛋白溶于聚合缓冲液，加入待测化合物中，每孔100μL，双复孔，37℃，每分钟测340nmOD值。绘制吸光度曲线。

[0167] 步骤四：计算IC50，微管蛋白聚合抑制率％ =（空白孔ODmax-测试孔ODmax）/空白孔ODmax×100 %。

[0168] 二、实验结果

[0169] 表6 抑制微管蛋白活性测试结果

[0170]

[0171] 上述的实验结果显示，该类化合物在 40μM时具有微管蛋白聚合抑制活性，可以作为抗肿瘤药物进行深入研究。

[0172] 实施例108:该系列化合物抑制肿瘤细胞增殖实验

[0173] 一、试验方法

[0174] 1. 样品配制：

[0175] 用DMSO（Merck）溶解后，加入PBS(-)配成1000mg/ml的溶液或均匀的混悬液，然后用含DMSO的PBS(-)稀释。阳性对照药采用阿霉素(DOX)。

[0176] 2. 细胞株

[0177] 1）A549（人肺癌细胞）；

[0178] 2）HCT116（人结肠癌细胞）；

[0179] 3）MDA-MB-23（人乳腺癌细胞）；

[0180] 测试肿瘤细胞株均由上海医药工业研究院药理研究室提供。

[0181] 3. 培养液

[0182] DMEM+5-10%FBS+双抗。

[0183] 4. 其他材料

[0184] 全自动酶标仪：

[0185] 型号：WellscanMK-2。

[0186] 生产厂商：Labsystems。

[0187] 进口96孔培养板等。

[0188] 5. 试验方法

[0189] MTT法。96孔板每孔加入浓度为4～5×104个/ml的细胞悬液100ml，置37℃，5% CO2培养箱内。24h后，加入样品液，10ml/孔，设双复孔，37℃，5% CO2作用72h。每孔加入5mg/ml的MTT溶液20ml，作用4h后加入溶解液，100ml/孔，置培养箱内，溶解后用MK-2全自动酶标仪测570nm OD值。

[0190] 二、活性数据

[0191] 表7 化合物对肿瘤细胞抑制作用

[0192]

[0193]