用于治疗丙型病毒性肝炎的药剂

摘要

本发明涉及医药，并且包括用于治疗丙型肝炎病毒的戊二酸单酰基组胺或其可药用盐形式的药剂。该药剂还可与聚乙二醇化干扰素和利巴韦林组合引入。本发明还涉及用于治疗丙型肝炎病毒的药物组合物。本发明解决了提供有效治疗丙型肝炎病毒并可产生持续病毒学应答之新药剂的问题。

权利要求

1.对抗病毒作用有效之量的戊二酸单酰基组胺或其可药用盐用于制备用于在丙型病毒性肝炎的治疗中产生持续病毒学应答的药物组合物的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述丙型病毒性肝炎是急性丙型肝炎。

3.根据权利要求1所述的用途，其中所述丙型病毒性肝炎是慢性丙型肝炎。

4.根据权利要求1所述的用途，其中所述戊二酸单酰基组胺或其可药用盐的剂量为0.1至10mg/kg体重。

5.根据权利要求1所述的用途，其中所述戊二酸单酰基组胺的单次剂量为100mg。

6.根据权利要求1所述的用途，其中施用所述戊二酸单酰基组胺的持续时间为3周至12个月。

7.根据权利要求1所述的用途，其中丙型肝炎的所述治疗提供了抗病毒治疗之副作用的降低。

8.根据权利要求7所述的用途，其中抗病毒治疗的所述副作用是流感样综合征、关节痛、肌痛、慢性胰腺炎的恶化、抑郁和/或脱发。

9.根据权利要求7所述的用途，其中抗病毒治疗的所述副作用是白细胞减少或中性粒细胞减少。

说明书

用于治疗丙型病毒性肝炎的药剂

技术领域

[0001] 本发明涉及医药领域，特别地涉及戊二酸单酰基组胺或其可药用盐用于治疗丙型病毒性肝炎的用途。

背景技术

[0002] 丙型病毒性肝炎仍是全世界医疗保健中最实际的问题之一。大量被感染人(差不多2亿人)、发生慢性感染(其导致肝硬化或肝细胞癌(15％-25％))的高风险(60％-80％)、发生人体器官和组织的全身性肝外病变以及缺乏用于预防感染的发生和传播的疫苗是开发对丙型肝炎的有效治疗的原因(Abdurakhmanov D.T.Prospects of the treatment of chronic hepatitis C.//The Clinical Hepatology,2010；3：3-11)。

[0003] 现代使用与利巴韦林组合的聚乙二醇化干扰素(pegylated interferon)α2a或α2b治疗丙型肝炎使得可以在54％-73％的病例中产生持续病毒学应答(sustained virologic response，SVR)(Ivashkin V.T.，Lobsin Ju.V，Storozhakov G.I.等)。在新入院的慢性丙型肝炎患者中证明了使用聚乙二醇化干扰素α2a和利巴韦林进行的48周治疗的有效性和安全性(Clin.Pharm.Ther.，2007，16(1)，1-5)。在感染了流行于俄罗斯的1b亚型的丙型肝炎病毒(HCV)的情况下，有效治疗的百分比大幅降低，为40％-50％。

[0004] 因此，需要开发更有效、负担得起并且经济上可行的具有更少副作用的治疗丙型肝炎的药剂和方案。

[0005] 本发明人意外地发现戊二酸单酰基组胺可用于治疗丙型肝炎。因此，在单独使用以及与聚乙二醇化干扰素和利巴韦林组合使用两种情况下，戊二酸单酰基组胺对丙型肝炎病毒具有抗病毒作用。

[0006] 以前，未提出将戊二酸单酰基组胺用于治疗病毒性肝炎。而且，以前不知道戊二酸单酰基组胺与聚乙二醇化干扰素和利巴韦林的组合。

[0007] 因此，本发明目的是提供用于治疗丙型肝炎的新药剂，以及与在本发明之前所使用的最有效的药物组合相比在治疗丙型病毒性肝炎上具有增强效力的药物组合。

发明内容

[0008] 以权利要求为特征的本发明的主题解决了上述目的。

[0009] 本发明涉及医药领域，包括用于治疗丙型病毒性肝炎药剂，所述药剂包含戊二酸单酰基组胺或其可药用盐。

[0010] 本发明还包括用于在丙型病毒性肝炎的治疗中产生持续病毒学应答的药剂，所述药剂包含戊二酸单酰基组胺或其可药用盐。

[0011] 在本发明的一个优选实施方案中，戊二酸单酰基组胺被包含在二卡巴胺(，Diearbamine)制剂中。戊二酸单酰基组胺或其可药用盐的剂量为0.1至10mg/kg体重。戊二酸单酰基组胺的单次剂量可以为100mg。施用戊二酸单酰基组胺的持续时间可以为3周至12个月。丙型病毒性肝炎治疗的进程提供了抗病毒治疗之副作用的降低，所述副作用例如流感样综合征、关节痛、肌痛、慢性胰腺炎的恶化、抑郁、脱发、白细胞减少或中性粒细胞减少。

[0012] 用于治疗丙型病毒性肝炎的药剂戊二酸单酰基组胺或其可药用盐还可以与有效量的聚乙二醇化干扰素和利巴韦林一起使用。

[0013] 本发明还涉及用于在丙型病毒性肝炎的治疗中产生持续病毒学应答的药剂，所述药剂包含戊二酸单酰基组胺或其可药用盐。

[0014] 戊二酸单酰基组胺具有以下结构式：

[0015]

[0016] 此外，本发明涉及用于治疗丙型肝炎的药物组合物，所述药物组合物包含有效量的戊二酸单酰基组胺或其可药用盐。戊二酸单酰基组胺或其可药用盐的有效量可以为0.1至10mg/kg体重。

[0017] 本发明还涉及用于治疗丙型肝炎的药物组合，所述药物组合包含聚乙二醇化干扰素、利巴韦林和戊二酸单酰基组胺或其可药用盐。

[0018] 另外，本发明涉及用于治疗丙型肝炎的药盒，所述药盒包含聚乙二醇化干扰素、利巴韦林、戊二酸单酰基组胺或其可药用盐以及使用说明书。

[0019] 本发明还涉及戊二酸单酰基组胺或其可药用盐用于制备用于治疗丙型病毒性肝炎的药物组合物的用途。

[0020] 此外，本发明包括戊二酸单酰基组胺或其可药用盐与聚乙二醇化干扰素和利巴韦林组合用于治疗丙型肝炎的用途。

[0021] 根据本发明，待治疗的丙型病毒性肝炎可以是急性丙型肝炎或慢性丙型肝炎。

[0022] 根据本发明，用于治疗丙型肝炎的药剂提供了抗病毒治疗之副作用的降低。抗病毒治疗的这些所述副作用可以是流感样综合征、关节痛、肌痛、慢性胰腺炎的恶化、抑郁和/或脱发。

[0023] 优选地，将戊二酸单酰基组胺作为二卡巴胺制剂的成分施用。戊二酸单酰基组胺或其可药用盐的剂量为0.1至10mg/kg体重。

[0024] 与戊二酸单酰基组胺和利巴韦林组合使用的聚乙二醇化干扰素可以是聚乙二醇化干扰素α2a或聚乙二醇化干扰素α2b。

[0025] 在本发明的一个优选实施方案中，当每天一次施用时，戊二酸单酰基组胺的剂量为100mg；当每周一次施用时，聚乙二醇化干扰素的剂量为100μg或1.5μg/kg；并且在每天施用时，利巴韦林的剂量为每天1000mg。

[0026] 施用戊二酸单酰基组胺的持续时间优选为3周至12个月。

[0027] 戊二酸单酰基组胺可以以可药用盐的形式使用，其使用在文献中广泛描述的常规方法通过与例如氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸镁、氢氧化锂或碳酸钙的反应产生。

[0028] 本发明还涉及用于治疗丙型肝炎的方法，所述方法包括向患者施用有效量的戊二酸单酰基组胺或其可药用盐。

[0029] 本发明还包括用于治疗丙型病毒性肝炎的方法，所述方法包括向患者施用有效量的聚乙二醇化干扰素、利巴韦林和戊二酸单酰基组胺或其可药用盐。

[0030] 另外，本发明涉及用于在丙型病毒性肝炎的治疗中取得持续病毒学应答的方法，所述方法包括向患者施用有效量的聚乙二醇化干扰素、利巴韦林和戊二酸单酰基组胺或其可药用盐。

[0031] 通过实施本发明所取得的积极效果如下。出人意料的是，发现用于治疗丙型肝炎的新药物具有明显的抗病毒效果。另外，开发了用于治疗丙型病毒性肝炎的强大的药物组合。同样出人意料的是，在最重要的抗病毒治疗的效力参数中取得了显著改进，例如患有慢性丙型肝炎的患者中的快速病毒学应答(在治疗开始后4周，当使用敏感测试系统进行研究时，血清中不存在HCV RNA)、早期病毒学应答(在治疗开始后12周，当使用敏感测试系统进行研究时，血清中不存在HCV RNA)、即时病毒学应答(在治疗开始后24和48周，当使用敏感测试系统进行研究时，血清中不存在HCV RNA)以及持续病毒学应答(在治疗结束后24周，当使用敏感测试系统进行研究时，血清中不存在HCV RNA)。

[0032] 另外，根据本发明的HCV治疗示出抗病毒治疗的副作用具有显著降低的发生率，所述副作用例如，白细胞减少、中性粒细胞减少、流感样综合征、关节痛、肌痛、慢性胰腺炎的恶化、抑郁和脱发。

具体实施方式

[0033] 迄今一个不能克服的困难是在丙型肝炎病毒造成的感染的实验模型中进行药物筛选。

[0034] 为了这个目的，开发了对HCV复制敏感的原代细胞和传代细胞的培养物的体外丙型肝炎病毒感染的实验模型。因此，具有分离并且被鉴别的属于不同基因型的致细胞病变的HCV变体，包括1b基因型，其在俄罗斯最普遍、最致病、并且其感染难以使用干扰素进行治疗。重现了不同来源的细胞培养物的急性和慢性丙型肝炎性病毒感染。因此，对于丙型肝炎，不仅在筛选化合物中，还在制剂的抗病毒活性的临床前评估中出现了独特机会。

[0035] 实施例1

[0036] 本研究目的是在细胞培养物的丙型肝炎病毒感染的实验模型中确定戊二酸单酰基组胺的抗病毒活性。

[0037] 本研究在致细胞病变的1b亚型的丙型肝炎病毒(HCV)毒株中进行。所述毒株分离自患有慢性丙型肝炎的患者的血清，并被鉴定为丙型肝炎病毒。所使用的感染性HCV剂量等于10.0组织致细胞病变剂量(TCID50)/20μL。

[0038] 所使用的对HCV的致细胞病变作用高度敏感的原代成纤维细胞在对9日龄的鸡胚(FEC)进行胰蛋白酶消化后获得，所使用的猪胚肾细胞(SPEV)培养物获自Collection of Cell Cultures of the Institute of Virology RAMS。它们以生长在24孔塑料平板中的1天细胞单层的形式使用。将SPEV和FEC细胞培养物培养在具有10％胎牛血清、补充有谷氨酰胺和抗生素(100U/ml)的培养基199中。

[0039] 在用于培养被感染的细胞培养物的培养基的基础上制备在本研究中所使用的戊二酸单酰基组胺溶液。为了研究药物的抗病毒活性，将其在多个稀释度下取得的50μL的溶液在感染时、细胞感染前24小时和细胞感染后24小时后添加到FEC培养物中。

[0040] 根据SPEV细胞培养物中流体样品的滴定结果对HCV的感染活性进行评估，其中培养物流体来源于感染后2天和5天的HCV感染的FEC或SPEV培养物。通常记录感染后6或7天的结果，此时病毒致细胞病变作用达到最大值，使用Reed和Muench公式以确定HCV滴度。

[0041] 获得的结果在表1至4中示出。

[0042] 表1

[0043] 被HCV感染的FEC细胞培养物模型中戊二酸单酰基组胺的抗病毒活性。在感染并利用药物处理细胞后，于第2天对样品进行评估

[0044]

[0045] 表2

[0046] 被HCV感染的猪胚肾细胞(SPEV)培养物模型中戊二酸单酰基组胺的抗病毒活性。在感染并利用药物处理细胞后，于第3天对样品进行评估

[0047]

[0048]

[0049] 表3

[0050] 被HCV感染的猪胚肾细胞(SPEV)培养物模型中戊二酸单酰基组胺的抗病毒活性。在感染并利用药物处理细胞后，于第4天对样品进行评估

[0051]

[0052] 表4

[0053] 被HCV感染的猪胚肾细胞(SPEV)培养物模型中戊二酸单酰基组胺的抗病毒活性。在感染并利用药物处理细胞后，于第5天对样品进行评估

[0054]

[0055] 表明当在感染后24小时将戊二酸单酰基组胺添加到FEC培养物中时，在利用戊二酸单酰基组胺处理FEC细胞后的早期阶段观察到了药物的最明显的抗病毒性质。细胞感染后48小时得到的培养物流体样品的研究表明，在这些条件下戊二酸单酰基组胺完全抑制FEC培养物中HCV的感染活性。在这段时间，对照未处理的FEC细胞中的HCV滴度达到6.5lg TCID50/20μl。在感染后立即引入戊二酸单酰基组胺也使HCV滴度降低1.0-1.5lg。当在感染前24小时用戊二酸单酰基组胺处理细胞时，HCV滴度降低2.0lg。

[0056] 利用致细胞病变的HCV变体C-13感染SPEV(猪胚肾细胞)培养物，并在感染前24小时、感染后立刻以及感染后24小时利用多个10倍稀释的戊二酸单酰基组胺进行处理。在感染后第3天、第4天和第5天取得培养基样品并在新鲜SPEV细胞培养物中进行滴定。

[0057] 获得的结果在表2至4中示出。表中的数据表明，与被HCV感染的FEC细胞类似，当在感染后24小时向培养物中添加戊二酸单酰基组胺时，其显著抑制SPEV细胞培养物中HCV的复制。无论流体样品从利用药物处理的SPEV细胞培养物中收集的时间，这些结果保持稳定。在感染的同时利用药物处理细胞后，于第5天检测到了戊二酸单酰基组胺使HCV感染活性被抑制2.2-2.7lg TCID50/20μg的能力。在感染后第5天收集的培养基样品表明，与对照相比，戊二酸单酰基组胺显著抑制HCV的产生：被抑制2.2lg TCID50/20μg。

[0058] 因此，在被感染的9日龄的鸡胚培养物中，戊二酸单酰基组胺具有抑制丙型肝炎病毒的复制的能力，导致显著降低病毒感染活性的滴度。已表明在使用其他来源的HCV感染的培养物SPEV-HCV细胞系时，戊二酸单酰基组胺的抗病毒效力未降低。不仅在感染后24小时，而且当在感染前24小时向培养物中添加戊二酸单酰基组胺时，在被感染的SPEV-HCV细胞培养物模型中表现出了对HCV感染的有效抑制。获得的结果表明戊二酸单酰基组胺对丙型肝炎病毒具有显著的抗病毒活性。

[0059] 实施例2

[0060] 本研究目的是在与聚乙二醇化干扰素和利巴韦林的组合抗病毒治疗(AVT)中确定戊二酸单酰基组胺在患有丙型病毒性肝炎的患者中的临床和实验室效力。

[0061] 患者入选标准如下：1)在患者中存在HCV感染的症状——通过酶免疫测定(EIA)检测抗HVC抗体；在血清中存在1b基因型的HCV RNA(定性测试)；2)一般血液测试中白细胞水9 9 9 9
平为3.9×10 /L至3.0×10/L，中性粒细胞水平为2.0×10/L至1.5×10/L；3)不存在乙型肝炎表面抗原；4)不存在人类免疫缺陷病毒抗体；5)不存在其他临床重大的肝疾病(酒精性肝病、施用肝毒性药物制剂、自身免疫性慢性肝炎、血色素沉着病)；以及6)不存在肝硬化。

[0062] 向患者每周一次地皮下施用100μg(或1.5μg/kg)剂量的peg-干扰素-α2b并且每天施用1000mg剂量的利巴韦林，施用48周。在治疗过程中，对患者进行临床和生物化学评估。在治疗开始后1个月以及然后在治疗过程中每三个月一次确定HCV RNA。在治疗开始前以及然后每六个月一次对全部患者进行腹腔器官的超声波透腹扫描。进行的研究通过了伦理委员会的批准，并且所有患者对参与研究给出了知情同意书。

[0063] 按照随机原则(通过包迹法进行)，根据治疗方案将全部患者分成具有可比较的性别和年龄的三个组：组1(n＝52)施用peg-干扰素-α2b+利巴韦林；组2(n＝58)施用peg-干扰素-α2b+利巴韦林+二卡巴胺(每天一次100mg)，从治疗开始时起施用21天。另外，根据类似方案，在治疗过程中每三个月一次施用二卡巴胺。

[0064] 根据现代计算机辅助分析方法，在具有在Microsoft Windows 7Professional操作系统下运行的Office 2007的Microsoft Excel应用程序和Statistica(StatSoft)v.6的IBM兼容计算机上进行数据的统计分析和图示表示。

[0065] 结果和讨论 观察的患者总数为110位，具体地为69(63％)位患有丙型肝炎的男性，41(37％)位患有丙型肝炎女性，年龄为19至52岁(平均年龄32.2±5.1岁)。平均体重为76.4±8.1(从55至84kg)。从表现出至少一种风险因素的时间起确定，感染时间为2.5至8年(表5)。未记录到可靠的组间差异。

[0066] 表5

[0067] 观察的患者的特征(M±m)

[0068]参数 组1 组2
患者人数 52 58
男性(人) 34 35
女性(人) 18 23
平均年龄 30.1±4.2 31.4±3.1
体重，kg 73.4±3.2 72.8±2.9
患病时间，年 4.5±1.7 3.9±2.2
初始ALT活性，U/L 115.21±7.24 112.41±8.04
初始碱性磷酸酶活性(ALP)，U/L 247.24±12.5 257.34±16.3
百里酚测试(TT)，U 5.8±0.9 6.1±1.1
胆红素一般水平，μmol/L 23.94±0.82 24.01±0.71

[0069]白蛋白，％ 51.98±0.87 52.01±0.74
γ-球蛋白，％ 23.69±0.71 23.45±0.84
白细胞水平，109/L 3.4±0.08 3.3±0.17
中性粒细胞水平，109/L 1.9±0.11 1.8±0.14

[0070] 患有丙型肝炎的全部患者中的基础综合征是在75(67.95％)位患者中观察到的asteno-vegetative综合征(睡眠障碍、疲劳、多汗、食欲不振、情绪波动)和在62(56.3％)位患者中观察到的消化不良综合征(恶心、嗳气、爆裂感、上腹部和右季肋部沉重感、便秘和/或腹泻)。疾病最频繁的临床表现是在94(85.2％)位患者中发生的肝肿大。在35(31.95％)位患者中发生了脾肿大。不同组患者中基础临床综合征的发生率在表6中示出。表6中的数据表明在治疗之前两组患者没有显著差异。

[0071] 表6

[0072] 治疗之前在患者中观察到的临床综合征的发生率，％

[0073]症状 组1 组2 p
消化不良综合征 54.2 58.4 0.701
Asteno-vegetative综合征 66.2 69.7 0.839
肝肿大 80.8 89.6 0.279
脾肿大 29.5 34.4 0.546
皮肤苍黄和巩膜黄疸 14.5 20.2 0.622

[0074] 在38％的患者中记录了高酶血症，并且超过正常水平3至4倍，其相当于弱的和中等的转氨酶活性。在其余患者中，ALT水平不超过正常水平或比正常水平高1.5至2倍。一些患者具有轻微的高胆红素血症，胆红素水平比正常值升高2倍，优选是由于非辍合级分。进行比较的组的患者没有表现出显著差异。在34％-36％的患者中观察到了具有高丙球蛋白血症的蛋白异常血症。

[0075] 观察的患者的组在性别、年龄、营养状况、生活条件和工作活动以及居住地方面是均匀的。

[0076] 与组2的患者不同，组1患者对治疗的耐受更差，并且更频繁地检测到副作用。数据在表7中示出。

[0077] 表7

[0078] 抗病毒治疗的副作用的发生率，％

[0079]副作用 组1 组2 p
流感样综合征 72.4 50.3 0.019
关节痛 62.1 44.6 0.089
肌痛 58.3 32.4 0.012
慢性胰腺炎的恶化 6.2 3 0.666
抑郁 36.1 12.4 0.003
脱发 38.4 14.1 0.004
血细胞减少综合征 63.8 25.9 0.045
体重减轻 44.8 34.8 0.332

[0080] 记录的副作用的百分比低于组1中患者的百分比(p＜0.05)，所述副作用例如流感样综合征、肌痛的发生率、抑郁、脱发和血细胞减少综合征。

[0081] 另外，观察表明，62.2％接受抗病毒组合治疗+二卡巴胺的患者被报道感觉健康改善(表现改善和疲劳消失)，相比之下组1中为15.4％，p＜0.05。

[0082] 在抗病毒治疗期间观察到表示为白细胞和中性粒细胞的总量减少的以下副作用(表8)。在AVT期间，在治疗早期(治疗4周)71％的组1患者具有白细胞减少症，69％的患者具有中性粒细胞减少症，与组2相比(p＜0.05)，这些值在整个治疗过程中保持在显著降低的水平。在组2患者中，在35％病例中检测到了白细胞减少症，在46％的患者中观察到了中性粒细胞减少症。在所述组患者中，未记录白细胞和中性粒细胞水平的急剧降低，而所述降低可能导致调整剂量或终止AVT。

[0083] 表8

[0084] 治疗期间的血液学因子(M±m)

[0085]

[0086]

[0087] 注：这里以及下文的＊-组1和组2的参数之间差异的有效性为p＜0.5。

[0088] 通过评估在患有慢性丙型肝炎(CHC)的患者的复合治疗中施用二卡巴胺的效力来研究其对生化参数和病毒学应答的影响。最重要的数据在表9和10中示出。

[0089] 表9

[0090] 患有慢性HCV感染的患者的治疗中肝代谢的参数(M±m)

[0091]

[0092]

[0093] 表9中的数据表明组2的患者在细胞溶解和胆汁淤积的参数中具有更显著的改善。

[0094] 在79.3％的额外接受二卡巴胺的组2患者中观察到了即时病毒学应答(HCV RNA水平降低至不确定水平)，其与仅接受组合抗病毒治疗的组1患者的结果相比是统计学上显著的(p＝0.035)。这些数据提供在表10中。由表10可见，组2的患者还更频繁地具有统计学上显著的早期病毒学应答(p＜0.05)。

[0095] 表10

[0096] 抗病毒治疗的效力，％

[0097]应答变体 组1 组2 p
快速病毒学应答 82.9 89.7 0,405
早期病毒学应答 65.9 86.2 0.013
即时病毒学应答 60.3 79.3 0.035

[0098] 因此，患有丙型病毒性肝炎的患者的包含peg-干扰素、利巴韦林和戊二酸单酰基组胺(作为二卡巴胺的成分)的组合治疗在治疗丙型肝炎上更有效。注意到，根据所提议方案，患有丙型病毒性肝炎的患者良好地耐受抗病毒治疗。

[0099] 实施例3

[0100] 本研究目的是确定戊二酸单酰基组胺(二卡巴胺)对患有慢性1b基因型丙型肝炎病毒感染患者的抗病毒治疗效力的影响，所述患者白细胞和中性粒细胞水平初始降低。

[0101] 对86位患有CHC(抗-HCV“+”、HCV RNA“+”，基因型1b)的年龄在20至52岁之间(平均年龄32±1.2岁)的患者进行观察。其中，46(53.5％)位患者为男性，40(46.5％)位患者为女性。

[0102] 为了实现前述目的，将所有患者根据治疗方案分成具有可比较的性别和年龄的两个组：组1(n＝44)施用peg-干扰素-α2b+利巴韦林；组2(n＝42)接受peg-干扰素-α2b+利巴韦林+二卡巴胺。每周一次以100μg(或1.5μg/kg)的剂量皮下施用Peg-干扰素-α2b，以1000mg的剂量每日施用利巴韦林，施用48周。按照随机原则(通过包迹法进行)，在从开始抗病毒治疗起的9周以及治疗结束前的另外9周，每天一次以100mg的剂量施用二卡巴胺。

[0103] 根据在治疗结束后的第24个观察周的持续病毒学应答来评估治疗效力。在治疗前和AVT对照点(4、8、12、24、36和48周)测量白细胞和中性粒细胞的血液水平。未记录到可靠的组间差异。在开始两个AVT之前，所有患者具有白细胞减少症和中性粒细胞减少症的实验室症状(一般血液测试中的白细胞水平为3.5×109/L至3.0×109/L，中性粒细胞水平为2.0×109/L至1.5×109/L)。研究经伦理委员会批准，并且所有患者都对参与研究给出了知情同意书。

[0104] 根据现代计算机辅助分析方法，在具有在Microsoft Windows 7Professional操作系统下运行的Office 2007的Microsoft Excel应用程序和Statistica(StatSoft)v.6的IBM兼容计算机上进行数据的统计分析和图示表示。

[0105] 表11示出了在AVT开始之前观察的不同组CHC患者的特征

[0106] 表11

[0107] 观察的患者的特征(M±m)

[0108]参数 组1 组2
患者人数 44 42
男性(人) 22 24
女性(人) 22 18
平均年龄 31.1±2.02 32.4±2.01
体重，kg 70.4±1.2 69.8±2.9
患病时间，年 6.8±1.7 7.1±1.1
初始ALT活性，U/L 125.21±7.11 122.13±8.15
初始ALP，U/L 267.44±14.6 271.34±15.2
TT，U 6.8±0.9 6.9±1.1
胆红素一般水平，μmol/L 23.81±1.81 24.04±1.78
白蛋白 ％ 52.23±0.51 52.01±0.54
γ-球蛋白 ％ 24.22±0.41 24.78±0.39

[0109]9
白细胞水平，10/L 3.1±0.16 3.2±0.12
中性粒细胞水平，109/L 1.8±0.13 1.7±0.12
HCV RNA水平 3.8x106 3.7x106

[0110] 全部CHC患者具有检测的以下综合征：98％患者具有asteno-vegetative综合征(疲劳提高、兴奋增强、睡眠障碍、表现下降、全身无力、呕吐、情绪波动、头痛)，90.9％的患者具有消化不良综合征(食欲不振、腹部不适、恶心、腹部饱胀、嗳气以及在一些患者中的呕吐)，81％的患者具有上腹部和/或右季肋部(右季肋部综合征)沉重感和/或疼痛，其主要为疼痛和迟钝性。在该组的81％患者中检测到肝肿大，其中大的肝重量并伴随有其稠度的硬化和中度触诊性触痛。在大部分患者(88.2％)中，同时观察到这些基础综合征。不同组患者中基础临床综合征的发生率示出在表12中。在治疗开始之前，未记录到组1和组2患者之间的显著差异。

[0111] 表12

[0112] 治疗之前在患者中观察到的临床综合征的发生率，％

[0113]症状 组1 组2 p
Asteno-vegetative综合征 75.6 76.2 0.852
消化不良综合征 58.8 57.9 0.720
肝肿大 86.8 88.1 0.226
脾肿大 34.4 35.1 0.525
右季肋部综合征 92.8 93.4 0.651

[0114] 无论治疗方案，在AVT的过程中CHC患者的白细胞和中性粒细胞的血液动力学分析显示在治疗前有1级白细胞减少症和中性粒细胞减少症的患者的百分比为83.7％。随着AVT的继续，具有低水平白细胞和中性粒细胞的患者数量根据所选择的治疗方案而提高。表13示出了根据治疗方案患者中白细胞和中性粒细胞的绝对值的动力学。不同治疗方式的比较表明与施用利巴韦林的患者组相比，使用peg-干扰素与利巴韦林的组合导致测试参数显著更突出地降低。因此，在组1中，白细胞最低水平为2.1±0.16×109/L，中性粒细胞的最低水平为1.0±0.03×109/L，而在组2中，白细胞和中性粒细胞的最低水平分别为3.4±0.11×9 9
10/L和1.9±0.05×10/L(p＜0.05)。

[0115] 表13

[0116] 根据治疗方案，CHC患者中白细胞和中性粒细的绝对值的动力学(M±m)[0117]

[0118] 对抗病毒治疗的效力进行的数据分析表明，与组1相比，在组2中获得了最佳治疗结果(p＜0.05)。数据在表14中提供。

[0119] 表14

[0120] 抗病毒治疗的效力，％

[0121]应答变体 组1 组2 p
快速病毒学应答 80.7 88.5 0,405
早期病毒学应答 66.2 85.8 0.013
即时病毒学应答 61.1 73.7 0.035
持续病毒学应答 44.8 65.5 0.028

[0122] 因此，可假设在与AVT组合时，可通过二卡巴胺加强抗病毒效果。进行的治疗的长期结果的分析揭示了二卡巴胺的该性质，即持续病毒学应答。

[0123] 还比较了两组CHC患者在AVT之前和AVT结束后24周的基础生化参数的特征。最重要的数据在表15中示出。

[0124] 表15

[0125] 治疗前和AVT结束后24周时CHC患者的肝代谢参数(M±m)

[0126]

[0127] 注意：＊-组1和组2因素之间差异的有效量为p＜0.05

[0128] 表15中的数据表明，在进行治疗后24周，组2患者的细胞溶解和胆汁淤积参数显著改善。向组2患者是施用二卡巴胺表现为肝代谢参数恢复的统计学上显著的长期结果。

[0129] 因此，与双抗病毒治疗组合的二卡巴胺的处方是治疗HCV感染的新方法。

[0130] 向组合的抗病毒治疗中添加二卡巴胺导致患有慢性丙型肝炎(CHC)的患者中的持续病毒学应答比率提高，因此使治疗效力提高了20.7％。

[0131] 实施例4

[0132] 本研究目的是确定使用二卡巴胺的治疗对CHC原发性患者的抗病毒治疗效力的影响，以取得持续病毒学应答。

[0133] 对142位患者(66位男性和76位女性，年龄在18至62岁，平均年龄为36.5±1.4岁)进行观察。患者入选标准为：在患者中存在确诊(通过回忆的和临床检验数据)的复制阶段的CHC(HCV RNA+)，病毒基因型为1b和3a；不存在人类免疫缺陷病毒抗原；不存在其他临床重大的肝疾病(酒精性肝病、施用肝毒性药物制剂、自身免疫性慢性肝炎、血色素沉着病)；以及不存在肝硬化。通过临床实验室测定方法对所有患者进行综合观察。通过揭示的丙型肝炎病毒抗原的特异性抗体(抗-HCVIgG，总抗-HCV)和通过聚合酶链式反应(PCR)方法确定血清中的HCV RNA以及确定病毒的基因型和量来支持CHC诊断。在治疗期间，对患者每月进行临床和生物化学评估。在治疗开始后一个月时以及然后在治疗过程中每三个月检验HCV RNA。在治疗开始前以及然后每六个月对全部患者进行腹腔器官的超声波透腹扫描。另外，也对56位体重指数低于25kg/m2、不具有丙型肝炎标记、免疫生化参数正常的明显健康人进行了检查，作为对照组。

[0134] 参与研究的全部患者的体重指数为18-25kg/m2。在54.9％的患者中显示为基因型1b，其余患者(45.1％)为基因型3a。病毒载量从240×103至12×106 IU/ml不等。

[0135] 对84位患者进行了肝钻取活组织检查以确定更精确的疾病活动度和状态程度：根据Rnodell的组织活动指数(histological activity index，HAI)的平均值为6.02±0.71分，根据Desmet的纤维化指数为1.08±0.92分。

[0136] 患者接受剂量为1.5μg/kg/周的peg-干扰素-α2b，并且每天接受利巴韦林(800-1200mg/天)。在治疗过程中，对于基因型3a，快速病毒学应答为24周，对于基因型1b，早期病毒学应答为48周。

[0137] 进行的研究经伦理委员会批准，并且所有患者对参与研究给出了知情同意书。

[0138] 按照随机原则(通过包迹法进行)，根据治疗方案的将全部患者分成具有可比较的性别和年龄的三个组：第一组(n＝74)施用peg-干扰素-α2b+利巴韦林；第二组(n＝68)施用peg-干扰素-α2b+利巴韦林+二卡巴胺(每周一次100mg)，从治疗开始起施用12周。另外，在AVT的最后12周，以相同剂量施用二卡巴胺。

[0139] 比较组具有可比较的性别、年龄、病毒基因型和生化参数(表16和17)。

[0140] 根据现代计算机辅助分析方法，在具有在Microsoft Windows XP Professional操作系统下运行的Office 2007的Microsoft Excel应用程序和Statistica(StatSoft)v.7.0的IBM兼容计算机上进行数据的统计分析和图示表示。

[0141] 表16

[0142] 观察的患者的特征(M±m)

[0143]

[0144] 表17

[0145] 根据生化参数的观察的患者的特征(M±m)

[0146]参数 健康 组1 组2
初始ALT活性，U/L 22.74±0.69 125.31±5.19 126.84±8.22
初始ALP活性，U/L 119.59±1.83 259.56±7.13 237.11±6.22
TT，U 2.11±0.06 2.69±0.14 3.59±0.11
一般胆红素，μmol/L 17.13±0.28 24.51±0.69 26.04±0.61
白蛋白，％ 62.44±0.36 51.81±0.69 53.24±0.59
γ-球蛋白，％ 18.07±0.15 22.58±0.40 21.57±0.31

[0147] 对于所有患者，利用二卡巴胺进行同步治疗是可耐受的。通过peg-干扰素和利巴韦林造成的副作用确定组2患者的不良反应的发生率。根据治疗方案，在AVT期间CHC患者的白细胞和中性粒细胞的血液水平的评估提供在表18中。

[0148] 表18

[0149] 治疗期间的血液学因素(M±m)

[0150]

[0151]

[0152] 注意到，在治疗4周后，两组患者的绝对血液参数(白细胞和中性粒细胞)在统计学上显著降低。但是，在所有对照测试点，在组2中记录的这些参数的降低比组1较不明显(p＜0.05)。

[0153] 生化参数的分析证明，组2患者的结果在统计学上显著优于组1。结果在表19中给出。

[0154] 表19

[0155] 治疗结束后6个月，根据生化参数观察的患者的特征(M±m)

[0156]

[0157] 注意：在此处及下文：p-错误地接受备择假设表明存在组间差异的概率，p0是错误地接受备择假设表明与对照组(健康)的参数之间存在的差异的概率，p1-2是错误地接受备择假设表明组1和组2患者的参数之间存在差异的概率

[0158] 表19中的数据表明，在组1患者中，明显的细胞溶解综合征是稳定的。ALT水平从30.4U/L提高到183.2U/L，在36％患者中超过正常水平。该参数的平均值为118.32±5.88U/L，其在统计学上显著(p0＜0.001，p1-2＜0.001)不同于对比组中的类似参数。组2患者的平均ALT值为21.89±1.45U/L，在88％的患者中未超过正常值。组1和组2患者彼此的ALP和TT值也在统计学上显著不同(表19)。注意到，组1患者中的百里酚测试和ALP值升高，分别为
86.4％和65.5％。

[0159] 根据病毒基因型，本研究的主要结果通过取得快速、早期和持续病毒学应答比率的差异表示(表20和21)。

[0160] 表20

[0161] 在多个治疗方案中，对于1b基因型丙型肝炎病毒的病毒学应答率

[0162]

[0163] 表21

[0164] 在多个治疗方案中，对于3a基因型丙型肝炎病毒的病毒学应答率

[0165]

[0166] 二卡巴胺的施用伴随着更高比率地实现全部类型的病毒学应答。因此，组2患者对于基因型1b取得快速病毒学应答(RVR，在AVT的4周中)的比率为75％，对于基因型3a为98.93％，相比之下在不施用其的组中为52.63％和83.33％。取得早期病毒学应答(EVR，在AVT的12周中)和持续病毒学应答(SVR，治疗结束后的6个月中)的比率也比不施用二卡巴胺的组高：基因型1b的RVR、EVR和SVR分别为82.5％、82.5％和67.5％，进行3a的分别为
99.14％、86.86％和89.29％，相比之下分别为78.95％、71.05％、47.37％以及76.89％、
74.33％、71.33％。

[0167] 与组1患者不同，组2患者更好地耐受治疗，更少地检测到副作用。患者观察数据示出在表22中。

[0168] 表22

[0169]副作用 组1 组2 p
流感样综合征 78.38 51.47 0.001
关节痛 63.51 44.12 0.028
肌痛 58.11 32.35 0.003
慢性胰腺炎的恶化 6.76 32.94 0.444
抑郁 36.49 11.76 0.001
脱发 37.84 13.24 0.001
血细胞减少综合征 63.51 25 0.000
体重减轻 44.59 33.82 0.230

[0170] 因此，二卡巴胺可被视为增强同时施用的peg-干扰素和利巴韦林的抗病毒作用的制剂，其明显地使基因型1b的SVR比率提高20.13％，使基因型3a的比率提高17.96％。

[0171] 因此，发现利用与二卡巴胺组合的聚乙二醇化干扰素-α2b+利巴韦林治疗CHC患者在患者的生化参数上具有积极的效果，其明显改善肝细胞的功能活动。另外，在CHC治疗中使用二卡巴胺与在具有基因型1b和3a的患者的AVT过程中取得可靠地更高比率的SVR相关联。另外，使用二卡巴胺(基因型1b和3a)的治疗伴随着AVT不利副作用的比率在统计学上显著的降低。

[0172] 实施例5

[0173] 戊二酸单酰基组胺的剂型

[0174] 为了治疗丙型肝炎，可经口、肌内或静脉内施用包含无毒的可药用载体的单位剂型的戊二酸单酰基组胺。

[0175] 可每天一次或多次地向患者施用0.1至10mg/kg体重剂量，优选0.5至5mg/kg，更优选1mg/kg剂量的戊二酸单酰基组胺。

[0176] 另外，需要注意的是，特定患者的特定剂量取决于多种因素，例如患者的年龄、体重、性别、总体健康状况和饮食，施用药物的方案和途径及药物从体内排泄的速率，以及被治疗患者的疾病严重程度。

[0177] 药物组合物包含在丙型肝炎的治疗中有效地提供预期结果的量的戊二酸单酰基组胺，并且可以以单位剂型(例如，固体、半固体或液体形式)施用，所述单位剂型包含与适于经口、肌内或静脉内施用的载体或赋形剂组合的作为活性剂的戊二酸单酰基组胺。活性成分可以与适合于制备溶液剂、片剂、丸剂、胶囊剂、丸粒剂及任何其他剂型的常规无毒的可药用载体一起存在于组合物中。

[0178] 多种化合物可用作赋形剂，例如糖类，如葡萄糖、乳糖或蔗糖；甘露醇或山梨醇；纤维素衍生物；和/或磷酸钙，例如磷酸三钙或酸性磷酸氢钙。对于粘合剂，可使用淀粉糊(例如，玉米、小麦、大米或马铃薯淀粉)、明胶、西黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮。如必要的话，可使用崩解剂，例如前述淀粉和羧甲基淀粉、交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、或者海藻酸或其盐，例如海藻酸钠。

[0179] 还可使用任选的添加剂，例如流动性控制剂和润滑剂，例如二氧化硅、滑石、硬脂酸及其盐，例如硬脂酸镁或硬脂酸钙，和/或丙二醇。

[0180] 还可使用稳定剂、增稠剂、着色剂和芳香剂作为添加剂。

[0181] 在单位剂型中，与载体组合的所使用活性剂的量可根据被治疗患者和治疗剂的施用途径而不同。

[0182] 例如，当戊二酸单酰基组胺以注射用溶液剂的形式使用时，该溶液中活性剂的量为0.01wt.％至5wt.％。对于稀释剂，可使用0.9％氯化钠溶液、蒸馏水、注射用Novocaine溶液、林格液、葡萄糖溶液和特定的增溶辅料。当戊二酸单酰基组胺以片剂形式施用时，其量为每单位剂型5.0至500mg。

[0183] 根据本发明使用的戊二酸单酰基组胺的剂型通过标准方法制备，例如，混合、造粒、形成丸剂、溶解和冻干的方法。

[0184] 片剂形式

[0185] 使用以下成分制备片剂形式：

[0186]戊二酸单酰基组胺或其可药用盐 1-100mg
马铃薯淀粉 20-50mg

[0187]硬脂酸镁 3mg
微粉硅胶 1mg
乳糖 至300mg

[0188] 可将成分混合并压缩以形成每个重300mg的片剂。

[0189] 栓剂

[0190] 栓剂制剂的实例

[0191]戊二酸单酰基组胺或其可药用盐 1-100mg
可可油 栓剂所需量

[0192] 可利用相应赋形剂任选地制备经直肠、经阴道和经尿道栓剂。

[0193] 注射用溶液

[0194] 注射用溶液制剂的实例：

[0195]戊二酸单酰基组胺或其可药用盐 1-50mg
注射用水 2ml