盐酸莫西沙星中残留溶剂醋酸的测定方法

摘要

本发明公开了一种盐酸莫西沙星中残留溶剂醋酸的测定方法，它包括以下步骤：A.供试品溶液的制备：取莫西沙星样品，用二甲亚砜溶解并稀释成0.1g/ml的溶液，作为供试品溶液；B.对照品溶液的制备：取冰醋酸适量，用二甲亚砜溶解并稀释成0.5mg/ml的溶液，作为对照品溶液；C.测定：采用气相色谱法，精密量取供试品溶液和对照品溶液各1.0～2.0μl，注入气相色谱仪，记录色谱图；D.计算：按外标法计算醋酸含量。本发明提供的盐酸莫西沙星中残留溶剂醋酸的测定方法，该方法具有准确度高、专属性强、重现性良好的优点，可定性或定量检测出盐酸莫西沙星中残留的醋酸，保证了盐酸莫西沙星的质量，从而提高了临床用药的安全性。

权利要求

1.盐酸莫西沙星中残留溶剂醋酸的测定方法，其特征在于，它包括以下步骤：A. 供试品溶液的制备：取莫西沙星样品，用二甲亚砜溶解并稀释成0.1g/ml的溶液，作为供试品溶液；

B. 对照品溶液的制备：取冰醋酸适量，用二甲亚砜溶解并稀释成0.5mg/ml的溶液，作为对照品溶液；

C. 测定：采用气相色谱法，精密量取供试品溶液和对照品溶液各1.0～2.0µl，注入气相色谱仪，记录色谱图；

D. 计算：按外标法计算醋酸含量；

其中，所述气相色谱条件为：

色谱柱：以6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱，柱长30m，内径

0.32mm，液膜厚度1.8µm；

检测器：氢火焰离子化检测器；

进样口温度：200℃；

检测器温度：200～250℃；

载气：氮气；

载气流速：0.8～1.2ml/min；

柱温：程序升温；

其中，所述程序升温的具体方法为：初温30～50℃，维持3～7分钟，以每分钟30～

50℃的速率升温至100℃，维持3～7分钟，再以每分钟40～60℃的速率升温至200～

250℃，维持3～7分钟。

说明书

盐酸莫西沙星中残留溶剂醋酸的测定方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种残留溶剂的测定方法，具体涉及一种盐酸莫西沙星中残留溶剂醋酸的测定方法。

背景技术

[0002] 盐酸莫西沙星(Moxifloxacin hydrochloride)，如式(Ⅰ)所示，化学名为1-环丙基-7-(S,S-2,8-二氮杂二环[4.3.0]壬烷-8-基)-6-氟-8-甲氧基-1,4-二氢-4-氧代-3-喹啉羧酸盐酸盐，是第四代喹诺酮类光谱抗菌药。盐酸莫西沙星在体外显示出对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、厌氧菌、抗酸菌、非典型性微生物(如支原体、衣原体)具有光谱抗菌活性。盐酸莫西沙星于1999年首先在德国上市，同年12月在美国上市，目前在我国上市的剂型包括注射液和片剂，主要用于治疗患有上呼吸道感染和下呼吸道感染的患者。

[0003]

[0004] 盐酸莫西沙星的合成中，使用到有机溶剂醋酸，人用药品注册技术要求国际协调会(ICH)在关于有机溶剂残留量的指导原则中，将醋酸列为第三类低毒性溶剂，限度要求为5000ug/g。溶剂的残留不仅降低了产品的质量，同时会对药品的安全性带来影响，因此，建立盐酸莫西沙星中残留溶剂醋酸的检测方法，并规定合理的限定，对确保盐酸莫西沙星的安全用药具有重要的意义。

发明内容

[0005] 本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种盐酸莫西沙星中残留溶剂醋酸的测定方法，本发明方法具有准确度高、专属性强、重现性良好，保证了盐酸莫西沙星的质量，从而提高了临床用药的安全性。

[0006] 本发明的目的通过以下技术方案来实现：盐酸莫西沙星中残留溶剂醋酸的测定方法，它包括以下步骤：

[0007] A.供试品溶液的制备：取莫西沙星样品，用二甲亚砜溶解并稀释成0.1g/ml的溶液，作为供试品溶液；

[0008] B.对照品溶液的制备：取冰醋酸适量，用二甲亚砜溶解并稀释成0.5mg/ml的溶液，作为对照品溶液；

[0009] C.测定：采用气相色谱法，精密量取供试品溶液和对照品溶液各1.0～2.0μl，注入气相色谱仪，记录色谱图；

[0010] D.计算：按外标法计算醋酸含量：醋酸含量＝(C对×A样)/C供×A对)×100％[0011] 式中：C对：对照品溶液浓度；C供：供试品溶液浓度；A对：对照品溶液峰面积；A供：供试品溶液峰面积。

[0012] 其中，所述气相色谱条件为：

[0013] 色谱柱：以6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱(柱长30m，内径0.32mm，液膜厚度1.8μm)；

[0014] 检测器：氢火焰离子化检测器；

[0015] 进样口温度：200℃；

[0016] 检测器温度：200～250℃；

[0017] 载气：氮气；

[0018] 载气流速：0.8～1.2ml/min；

[0019] 柱温：程序升温。

[0020] 进一步地，所述程序升温的具体方法为：初温30～50℃，维持3～7分钟，以每分钟30～50℃的速率升温至100℃，维持3～7分钟，再以每分钟40～60℃的速率升温至200～250℃，维持3～7分钟。

[0021] 进一步地，所述检测器温度为250℃，载气流速为1.0ml/min。

[0022] 本发明具有以下优点：本发明提供的盐酸莫西沙星中残留溶剂醋酸的测定方法，该方法具有准确度高、专属性强、重现性良好的优点，可定性或定量检测出盐酸莫西沙星中残留的醋酸，保证了盐酸莫西沙星的质量，从而提高了临床用药的安全性。

附图说明

[0023] 图1为实施例1中醋酸检测限色谱图；

[0024] 图2为实施例1中醋酸定量限色谱图；

[0025] 图3为实施例2中醋酸的线性图；

[0026] 图4为实施例6中醋酸对照品溶液色谱图；

[0027] 图5为实施例6盐酸莫西沙星中残留溶剂醋酸的检测图谱。

具体实施方式

[0028] 下面结合附图及实施例对本发明做进一步的描述，本发明的保护范围不局限于以下所述。

[0029] 实施例1：检测限与定量限

[0030] 1.色谱条件：以6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱(柱长30m，内径0.32mm，液膜厚度1.8μm)为色谱柱；程序升温：初温40℃，维持约5分钟，以每分钟约40℃的速率升温至100℃，维持约5分钟，再以每分钟约50℃的速率升温至250℃，维持约5分钟；进样口温度200℃，检测器为氢火焰离子化检测器，检测器温度250℃；载气为氮气，载气流速为每分钟1.0ml。

[0031] 2.实验方法：精密称取醋酸107.48g，用二甲基亚砜为溶剂，稀释成10个不同浓度的溶液，见表1。精密量取各浓度下溶液1μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图。

[0032] 表1：醋酸浓度表

[0033]编号 浓度(mg/ml)
1# 1.07480
2# 0.85986
3# 0.64488
4# 0.42993
5# 0.34391
6# 0.21496
7# 0.17195
8# 0.10748
9# 0.04299
10# 0.02149

[0034] 3.实验结果：实验结果表明：10#样品溶液浓度为0.02149mg/ml时峰高为0.188，基线噪音为0.048，信噪比约为3，醋酸的检测限为17.34ng；9#样品溶液浓度为0.04299mg/ml时峰高为0.429，基线噪音为0.042，信噪比约为10，计算得定量限为
41.42ng。检测限和定量限图谱分别见图1、图2。

[0035] 实施例2：线性实验

[0036] 1.色谱条件：同实施例1。

[0037] 2.实验方法：取表1中定检限试验项下1#～8#号样品溶液各1ul注入气相色谱仪，记录色谱图。

[0038] 3.实验结果：如表2、图3所示：

[0039] 表2：醋酸线性实验结果

[0040]编号 溶液浓度(mg/ml) 峰面积
8 0.10748 4.227
7 0.17195 6.872
6 0.21496 8.648
5 0.34391 13.715
4 0.42993 17.007
3 0.64488 25.241
2 0.85986 33.296
1 1.07480 41.940

[0041] 由表2、图3可知：醋酸在0.10748mg/ml～1.0748mg/ml浓度范围内，相关系数R2为0.9999，其峰面积与供试品溶液浓度呈良好的线性关系。

[0042] 实施例3：准确度试验

[0043] 1.色谱条件：同实施例1。

[0044] 2.实验方法：

[0045] (1)精密称取醋酸，用二甲基亚砜作溶剂，按表3稀释制备贮备液；

[0046] 表3：醋酸浓度表

[0047]编号 1# 2# 3# 4#
浓度(mg/ml) 0.40500 0.31008 0.38760 0.46512

[0048] (2)取二甲基亚砜作为空白溶液。

[0049] (3)取1#储备液作为醋酸对照品溶液。

[0050] (4)精密称盐酸莫西沙星2份，各约1g，分置于10ml容量瓶中加二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品①、②号。

[0051] (5)取盐酸莫西沙星约100mg，精密称定，平行配制九份，编号 ③～⑤号样品分别加入2#贮备液1ml，⑥～⑧号样品分别加入3#贮备液1ml， 号样品分别加入4#贮备液1ml，溶解。分别精密量取以上对照溶液，空白溶液，和 号供试品溶液各1ul注入气相色谱仪，记录色谱图。计算醋酸的回收率。

[0052] 表4：醋酸回收率

[0053]

[0054]

[0055] 由表4可知：醋酸的回收率符合定量测定的要求，该色谱条件可以用于本品中乙酸的定量测定。

[0056] 实施例4：溶液稳定性试验

[0057] 1.色谱条件：同实施例1。

[0058] 2.实验方法：取盐酸莫西沙星约200mg，加回收率项下3#乙酸储备液2ml溶解，摇匀，作为供试品溶液，分别于第0h、2h、4h、8h、12h、24h各取1ul进样测定，考察供试品溶液的稳定性。

[0059] 3.实验结果：如表5所示：

[0060] 表5：稳定性试验结果

[0061]时间 0h 2h 4h 8h 12h 24h 平均 RSD
峰面积 14.229 13.64 13.727 14.066 13.669 13.956 13.881 1.58％

[0062] 由表5可知：该色谱条件下，供试品溶液的稳定性良好，符合定量测定的要求。

[0063] 实施例5：耐用性试验

[0064] 通过对色谱条件进行微调(进样口检测器温度±5℃，载气流速±0.2ml/min，色谱柱温度±2℃、检测器温度±2℃)，考察方法的耐用性。

[0065] (1)色谱条件：

[0066] 色谱柱：DB-624毛细管柱(30m×530μm×3μm)。固定液为6％氰丙基苯基-94％聚二甲基硅氧烷；

[0067] 进样口温度：200℃ 检测器温度FID(250℃) 载气流速1.0ml/min[0068] 柱温：40℃(5min)→ 100℃(5min) → 250℃(5min)

[0069] (2)实验结果：供试品溶液制备方法见回收率实验项下6号供试品溶液。结果见下表6。

[0070] 表6：耐用性试验结果

[0071]色谱条件 乙酸峰面积
气相色谱条件 14.773
进样口温度-5℃ 14.969
进样口温度+5℃ 14.855
载气流速+0.02ml/min 14.918
载气流速-0.02ml/min 14.504

[0072]检测器-2℃ 14.784
检测器+2℃ 14.648
平均值 14.779
RSD 1.08％

[0073] 由表6可知：该色谱条件的微小变化，各溶剂峰的峰面积变化不大，RSD符合定量测定的要求，该色谱条件的耐用性良好。

[0074] 实施例6：盐酸莫西沙星中残留溶剂醋酸的测定

[0075] A.供试品溶液的制备：取莫西沙星样品100.5mg，用二甲亚砜1ml溶解，密封、摇匀，作为供试品溶液；

[0076] B.对照品溶液的制备：取冰醋酸5.7mg，置10ml容量瓶，加二甲亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；

[0077] C.测定：采用气相色谱法，精密量取供试品溶液和对照品溶液各1.0μl，注入气相色谱仪，记录色谱图；

[0078] D.计算：按外标法计算醋酸含量。

[0079] 色谱条件：

[0080] 色谱柱：DB-624毛细管柱(30m×530μm×3μm)。固定液为6％氰丙基苯基-94％聚二甲基硅氧烷；

[0081] 检测器：FID(氢火焰离子化检测器)

[0082] 柱温：40℃(5min)→100℃(5min)→250℃(5min)

[0083] 进样口温度：200℃

[0084] 检测器温度：250℃

[0085] 载气：氮气

[0086] 载气流速：1.0ml/min

[0087] D.计算：按外标法计算醋酸含量。

[0088] 醋酸含量＝(C对×A样)/C供×A对)×100％

[0089] 式中：C对：对照品溶液浓度；C供：供试品溶液浓度；A对：对照品溶液峰面积；A供：供试品溶液峰面积。

[0090] 醋酸对照品溶液的图谱如图4所示，盐酸莫西沙星中残留溶剂的醋酸检测图谱如图5所示，从图4、图5可知，供试品溶液的色谱图中，未检测出醋酸峰，经计算，盐酸莫西沙星中醋酸的残留量为0％。

[0091] 实施例7：盐酸莫西沙星中残留溶剂醋酸的测定

[0092] A.供试品溶液的制备：取莫西沙星样品101.2mg，用二甲亚砜1ml溶解，密封、摇匀，作为供试品溶液；

[0093] B.对照品溶液的制备：取冰醋酸5.1mg，置10ml容量瓶，加二甲亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；

[0094] C.测定：采用气相色谱法，精密量取供试品溶液和对照品溶液各2.0μl，注入气相色谱仪，记录色谱图；

[0095] D.计算：按外标法计算醋酸含量。

[0096] 色谱条件：

[0097] 色谱柱：DB-624毛细管柱(30m×530μm×3μm)。固定液为6％氰丙基苯基-94％聚二甲基硅氧烷；

[0098] 检测器：FID(氢火焰离子化检测器)

[0099] 柱温：30℃(3min)→100℃(3min)→200℃(3min)

[0100] 进样口温度：200℃

[0101] 检测器温度：200℃

[0102] 载气：氮气

[0103] 载气流速：0.8ml/min

[0104] D.计算：按外标法计算醋酸含量。

[0105] 醋酸含量＝(C对×A样)/C供×A对)×100％

[0106] 式中：C对：对照品溶液浓度；C供：供试品溶液浓度；A对：对照品溶液峰面积；A供：供试品溶液峰面积。

[0107] 供试品溶液的色谱图中，未检测出醋酸峰，经计算，盐酸莫西沙星中醋酸的残留量为0％。

[0108] 实施例8：盐酸莫西沙星中残留溶剂醋酸的测定

[0109] A.供试品溶液的制备：取莫西沙星样品102.3mg，用二甲亚砜1ml溶解，密封、摇匀，作为供试品溶液；

[0110] B.对照品溶液的制备：取冰醋酸5.4mg，置10ml容量瓶，加二甲亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；

[0111] C.测定：采用气相色谱法，精密量取供试品溶液和对照品溶液各1.0μl，注入气相色谱仪，记录色谱图；

[0112] D.计算：按外标法计算醋酸含量。

[0113] 色谱条件：

[0114] 色谱柱：DB-624毛细管柱(30m×530μm×3μm)。固定液为6％氰丙基苯基-94％聚二甲基硅氧烷；

[0115] 检测器：FID(氢火焰离子化检测器)

[0116] 柱温：50℃(7min)→100℃(7min)→230℃(7min)

[0117] 进样口温度：200℃

[0118] 检测器温度：230℃

[0119] 载气：氮气

[0120] 载气流速：1.2ml/min

[0121] D.计算：按外标法计算醋酸含量。

[0122] 醋酸含量＝(C对×A样)/C供×A对)×100％

[0123] 式中：C对：对照品溶液浓度；C供：供试品溶液浓度；A对：对照品溶液峰面积；A供：供试品溶液峰面积。

[0124] 供试品溶液的色谱图中，未检测出醋酸峰，经计算，盐酸莫西沙星中醋酸的残留量为0％。