2-甲基-9-吖啶（对甲氧基苯甲酰胺基）硫脲及其制备方法和用途

摘要

本发明属于医药技术领域，涉及一种吖啶衍生物，具体涉及2-甲基-9-吖啶(对甲氧基苯甲酚胺基)硫脲及其制备方法和用途，结构式:本发明的吖啶衍生物在吖啶母核上连接活性基团酚胺基硫脲，具有更强的潜在生物活性。体外抗肿瘤试验表明该吖啶衍生物对多种肿瘤细胞均有较强的抑制作用，可作为抗肿瘤药物或先导化合物进一步开发。

权利要求

1.2-甲基-9-吖啶硫脲，其特征在于，所述2-甲基-9-吖啶硫脲具有式I所示的结构式：。

2.如权利要求1所述的2-甲基-9-吖啶硫脲的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

1)以邻溴苯甲酸和对甲基苯胺为原料，碳酸钾和铜粉为催化剂，加入异戊醇作为溶剂，经乌尔曼反应得到式II所示化合物N-(对甲基苯基)邻氨基苯甲酸；

2)将式II所示化合物以三氯氧磷关环，制得式III所示化合物2-甲基-9-氯吖啶；

3)将式III所示化合物在相转移催化剂四丁基溴化铵的作用下，与NaSCN发生亲核取代反应，制得式IV所示化合物2-甲基-9-吖啶异硫氰酸酯；

4)将式IV所示化合物溶于溶剂后加入对甲氧基苯甲酰肼，析出大量橙黄色粉末固体，回流30min后停止反应，冷却抽滤制得式I所示的目标产物2-甲基-9-吖啶硫脲。

3.如权利要求2所述的2-甲基-9-吖啶硫脲的制备方法，其特征在于，步骤4)中所述反应的反应温度为室温～100℃，所述溶剂为无水乙醇或乙腈。

4.如权利要求1所述的2-甲基-9-吖啶硫脲作为制备抗肿瘤药物的用途， 其特征在于，所述抗肿瘤药物可用来治疗胃癌、肝癌、肺大细胞癌或膀胱癌。

说明书

2-甲基-9-吖啶（对甲氧基苯甲酰胺基）硫脲及其制备方法

和用途

技术领域

[0001] 本发明涉及抗肿瘤药物技术领域，具体涉及2-甲基-9-吖啶(对甲氧基苯甲酰胺基)硫脲及其制备方法与用途。

背景技术

[0002] 癌症是严重威胁大众健康的恶性疾病。大多数肿瘤预后差，生存时间短，缺乏可治愈的手段，存在高度未满足的临床需求，近年已经逐步上升为导致死亡的首要原因。因为疾病的难治性，临床需求的迫切性，抗肿瘤药物一直都是创新药研发的热点，而在近几年更是成为了热点中的“热点”。据报道，吖啶及其衍生物对癌细胞具有良好的抑制作用，可作为抗癌先导化合物等应用于新药研究中。且酰氨基硫脲类化合物同时具有很多重要的生物活性，如抗病毒、抗菌、抗结核、抗癌、除草、杀虫以及促进植物生长等。但目前为止，上述二者结合的双重抗肿瘤活性的衍生物并未有文献报道。

发明内容

[0003] 本发明通过在吖啶环的9-位上连接酰胺基硫脲结构，提供一种具有双重抗肿瘤活性的吖啶酰胺基硫脲类衍生物2-甲基-9-吖啶(对甲氧基苯甲酰胺基)硫脲，其结构式如式I所示：

[0004]

[0005] 本发明还提供所述2-甲基-9-吖啶(对甲氧基苯甲酰胺基)硫脲的制备方法，包括如下步骤：

[0006] 1)以邻溴苯甲酸和对甲基苯胺为原料，碳酸钾和铜粉为催化剂，加入异 戊醇作为溶剂，经乌尔曼反应得到式II所示化合物N-(对甲基苯基)邻氨基苯甲酸；

[0007] 2)将式II所示化合物以三氯氧磷关环，制得式III所示化合物2-甲基-9-氯吖啶；

[0008] 3)将式III所示化合物在相转移催化剂四丁基溴化铵的作用下，与NaSCN发生亲核取代反应，制得式IV所示化合物2-甲基-9-吖啶异硫氰酸酯；

[0009] 4)将式IV所示化合物溶于无水乙醇后加入对甲氧基苯甲酰肼，析出大量橙黄色粉末固体，回流30min后停止反应，冷却抽滤制得式I所示的目标产物2-甲基-9-吖啶硫脲。

[0010]

[0011] 其中，步骤4)中所述反应的反应温度为室温～100℃，所述溶剂为无水乙醇或乙腈。

[0012] 本发明制备的2-甲基-9-吖啶(对甲氧基苯甲酰胺基)硫脲经过1H NMR核磁共振谱、FT-IR红外光谱、熔点等测试后，解析确证其化学结构为式I所示的化合物。

[0013] 本发明还提供所述2-甲基-9-吖啶(对甲氧基苯甲酰胺基)硫脲在制备抗肿瘤药物中的应用。所述抗肿瘤药物可以制成药学上的常见剂型，包括注射剂、片剂、丸剂、胶囊、悬浮剂或乳剂。

[0014] 本发明制备的2-甲基-9-吖啶硫脲经过多种肿瘤细胞株测试(包括胃癌细胞MGC-803、肝癌细胞BEL-7404、大细胞肺癌细胞NCI-H460和膀胱癌细胞T24)，证明式I所示的化合物具有较强的抗肿瘤活性。本发明提供的2-甲基-9-吖啶(对甲氧基苯甲酰胺基)硫脲制备方法简单，原料易得，抗癌效果良好，在抗肿瘤药物设计研发领域具有广泛的临床应用前景。

具体实施方式

[0015] 下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明，但本发明并不局限于此。

[0016] 实施例1 2-甲基-9-吖啶(对甲氧基苯甲酰胺基)硫脲的制备

[0017] 1)在250mL三颈 瓶中，加入 邻溴苯 甲酸5.20g(26mmoL)、对 甲基苯 胺3.64g(34mmoL)、碳酸钾7.5g(36.2mmoL)和铜粉0.3g(4.7mmoL)，再加入30mL异戊醇作为溶剂，140℃回流搅拌2h。反应结束后，减压蒸除溶剂，所得残留物加600mL水，80℃下反应
20min，趁热过滤，洗涤滤饼，合并水层，水层用浓盐酸酸化至pH＝2，析出大量淡黄色沉淀，抽滤，所得固体用氯仿重结晶，得到化合物N-(对甲基苯基)邻氨基苯甲酸(式II)，产率
77％；

[0018] 2)在100mL圆底烧瓶中，加入式II所示化合物(18moL)及14.37mL三氯氧磷，于15min内油浴上将反应物加热至85～90℃。当发生剧烈反应时，立即撤去热浴。若反应过于猛烈，可用冷水冷却烧瓶，待沸腾趋缓，油浴温度升高至135～140℃，反应2h。反应结束后，减压蒸除过量三氯氧磷，剩余物在冷却后倾入充分搅拌的浓氨水、碎冰和氯仿的混合物中，用氯仿和氨水混合物洗涤烧瓶，30min后不再有未溶解的固体物，分离出氯仿层，水层继续用氯仿萃取，合并氯仿提取液，无水氯化钙干燥过夜，过滤，蒸除溶剂，得到化合物2-甲基-9-氯吖啶(式III)，产率98％；

[0019] 3)在100mL圆底烧瓶中，加入式III所示化合物(5mmoL)及50mL丙酮，回流溶解后加入0.81g NaSCN(10mmoL)和0.15g四丁基溴化铵(0.5mmoL)，反应1h后，有黄色针状晶体析出，抽滤，水洗涤后得到化合物2-甲基-9-吖啶异硫氰酸酯(式IV)，产率77％；

[0020] 4)在100mL圆底烧瓶中，加入式IV所示化合物(2mmoL)及60mL无水乙醇，后加入对甲氧基苯甲酰肼(2mmoL)，反应过程中有大量固体析出，80℃回流30min后停止反应，冷却抽滤得橙黄色固体即为2-甲基-9-吖啶(对甲氧基苯甲酰胺基)硫脲(式I)，产率60％。

[0021] 实施例2本发明所述化合物的鉴定及分析

[0022] 按上述方法制得的2-甲基-9-吖啶(对甲氧基苯甲酰胺基)硫脲经过1H NMR核磁共振谱、FT-IR红外光谱、熔点等测试后，解析确证其化学结构。

[0023] 理化性质如下：

[0024] 1)外观：橙黄色粉末

[0025] 2)熔点：200～206℃

[0026] 3)分子量：416.50

[0027] 4)分子式：C23H20N4O2S，结构式如下式所示：

[0028]

[0029] 5)1H NMR核磁共振谱：样品溶于氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)中，在400MHz下进行测定，所得谱图数据为：δ：11.26(br，s，1H，-NH)，10.41(br，s，1H，-NH)，10.22(br，s，1H，-NH)，8.80(s，2H，ArH)，8.05～8.15(m，3H，ArH)，7.93(s，2H，ArH)，7.77(t，1H，ArH)，
7.63(t，1H，ArH)，8.15(d，1H，J ＝ 8.40Hz，ArH)，8.04(s，1H，ArH)，7.83(t，1H，ArH)，
7.53(d，1H，J＝9.20Hz，ArH)，7.45(s，1H，ArH)，4.02(s，3H，-OCH3)。

[0030] 6)红外吸收光谱：KBr压片，所得谱图数据为：v：3108，2948(N-H，芳杂环-C-H伸缩振动)，1695(-C＝O)，1403～1632(芳杂环的伸缩振动)，1291(C＝S)。

[0031] 实施例3体外抗肿瘤活性实验

[0032] 采用MTT方法，进行体外细胞毒性测定。实验中采用以下四种细胞株：胃癌细胞MGC-803、肝癌细胞BEL-7404、大细胞肺癌细胞NCI-H460和膀胱癌细胞T24。采用5-FU和顺铂作为对照品。数据分析使用Origin软件进行数据处理。

[0033] 实验方法：

[0034] 1)所选细胞株均置于37℃、5％CO2充分湿化条件下的培养箱中，接种于含10％灭活新生牛血清的PPMI1640培养液中培养。用倒置显微镜观察细胞生长情况，每周更换2～3次培养基，6～7天传代一次，接种时以0.25％胰蛋白酶消化传代，通常取传代3～4次，处于对数生长期细胞用于实验。

[0035] 2)准确称取被测样品，加到灭菌的1.5mL离心管中，加入DMSO配成 2mM化合物储备液，-20℃冷冻保存。临用前融化后用适量D-hanks稀释成相应浓度应用。实验测定选用的化合物浓度分别为20μM。

[0036] 3)取处于对数生长期的细胞，每孔180μL(约4500～5000个细胞)含细胞的培