一种枸橼酸舒芬太尼合成原料及杂质的检测方法

摘要

本发明提供一种枸橼酸舒芬太尼合成原料及杂质的检测方法，利用气相色谱，提供保留时间确定杂质种类，利用面积归一化法确定杂质含量。具体为即将标准溶液及标准溶液的混合溶液分别进样，对各个物质标准溶液进行色谱分析；再将供试样品进样，记录色谱图，将该色谱图上杂质保留时间和标准样品的保留时间进行对照，对杂质进行定性，再根据各有关物质的峰面积采用面积归一化法对杂质进行定量，对合成原料及杂质进行定性及定量检测。该方法简单，为枸橼酸舒芬太尼成品中杂质的控制提供了良好保障。

权利要求

1.一种枸橼酸舒芬太尼合成原料及杂质的检测方法，其特征在于，采用气相色谱进行检测，包括如下步骤：

2- 噻吩乙醇试剂：取2- 噻吩乙醇试剂，直接进样；

3- 噻吩乙醇试剂：取3- 噻吩乙醇试剂，直接进样；

2- 噻吩乙基溴试剂：取2- 噻吩乙基溴试剂，直接进样；

3- 噻吩乙基溴试剂：取3- 噻吩乙基溴试剂，直接进样；作为标准品进行气相色谱检测；

气相色谱的条件

色谱柱：CP8770，100% 二甲基聚硅氧烷，30m*0.25mm*1.0μm ；

载气：氮气；

分流比1:200 ；

柱压力：15psi ；

检测器：氢火焰离子检测器，检测器温度为300℃；

检测器灵敏度为：20 ；

进样口温度：250℃；

程序升温：柱温起始150℃保持5min，然后再以每分钟5.0℃升温至250℃ ；

进样量：1μL；

混合对照溶液

取1mL 2- 噻吩乙醇、1mL 3- 噻吩乙醇、1mL 2- 噻吩乙基溴、1mL 3- 噻吩乙基溴至

50mL 量瓶中，乙醇稀释至刻度，直接进样，空白对照组直接用乙醇进样；

取供试品，直接进样，记录色谱图，将该色谱图上杂质保留时间和对照品杂质保留时间进行对照，对杂质进行定性，再根据各有关物质的峰面积采用面积归一化法对杂质进行定量，对合成原料及杂质进行定性及定量检测。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述的杂质为3- 噻吩乙醇及3- 噻吩乙基溴。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：混合对照溶液中，气相色谱分离的分离度大于1.5。

说明书

一种枸橼酸舒芬太尼合成原料及杂质的检测方法

技术领域

[0001] 本发明涉及药物杂质检查方法，具体涉及枸橼酸舒芬太尼合成原料及其中间体杂质检查方法。背景技术：

[0002] 枸橼酸舒芬太尼是枸橼酸芬太尼(Fentanyl)的衍生物，为阿片类强效镇痛药。枸橼酸舒芬太尼是一个强μ阿片受体激动剂，对μ-受体亲和力比枸橼酸芬太尼大7-10倍左右。本品镇痛强度是吗啡的75-125倍，枸橼酸芬太尼5～10倍。本品为高亲脂性药物，静脉注射后起效快，T1/2π、T1/2α、T1/2β分别为0.73-1.2、13.7-17和140-158min。血浆蛋白结合率为
92％，主要是同α1-酸性糖蛋白结合。表观分布容积Vd为1.7L/kg，清除率CL为12.7ml/min/kg，大部分在肝内代谢，形成N-去烷基和O-去甲基的代谢产物，随尿和胆汁排出，以原形从尿中排出的不到2％。其代谢产物去甲基枸橼酸舒芬太尼也有药理活性，效价约为枸橼酸舒芬太尼的1/10。枸橼酸舒芬太尼降低吸入麻醉药的MAC；使EEG振幅增大，频率减慢；血流动力学比枸橼酸芬太尼、吗啡更稳定；对插管刺激的应激反应抑制作用更强；安全范围大于枸橼酸芬太尼与阿芬太尼。作为麻醉性镇痛药,枸橼酸舒芬太尼临床广泛应用于心脏外科、神经外科、大腹部外科、妇产科等。不良反应的发生率与程度均比枸橼酸芬太尼低。虽然枸橼酸舒芬太尼的分布与消除半衰期比阿芬太尼长，但从短于6-8小时的手术观察，枸橼酸舒芬太尼恢复时间短于阿芬太尼。

[0003] 临床药用为其枸橼酸盐，即枸橼酸舒芬太尼，其化学名称为propanamide,N-[4-(methoxymethyl)-1-[2-(2-thienyl)ethyl]-4-piperidinyl]-N-phenyl-,2-hydroxy-1,2,3-propanetricarboxylate(1:1)，分子式为C22H30N2O2S·C6H8O7。分子量578.66，结构式： 开发单位为Janssen(比利时)，1983年首次在荷兰上市，
其性状为白色结晶或结晶性粉末。易溶于水、乙醇，不溶于三氯甲烷、乙醚。枸橼酸舒芬太尼被用作镇痛药。在平衡麻醉的维持时间内作为镇痛剂。在麻醉的诱导和维持时作为麻醉剂。

[0004] 枸橼酸舒芬太尼的原料，合成时用到了2-噻吩乙醇、2-噻吩乙基溴，研究发现，当合成2-噻吩乙基溴的2-噻吩乙醇中含有杂质3-噻吩乙醇时，就会在溴化反应过程中生成3-噻吩乙基溴，3-噻吩乙基溴的引入就会导致枸橼酸舒芬太尼合成产物中引入杂质，从而影响公司产品枸橼酸舒芬太尼注射液的质量。

[0005] 现在枸橼酸舒芬太尼原料药的质量标准采用国家食品药品监督管理局标准YBH06742005及补充申请批件：鄂B200800188。标准中采用液相色谱法测定有关物质，不足之处在于杂质分离效果不佳，并只用于枸橼酸舒芬太尼原料药成品杂质的检测，无法从源头上控制杂质的含量。

[0006] 国食药监注[2011]430号文件发布了关于做好2011年中央补助地方开展药品标准修订工作的通知，对957项药品标准的提高工作提出了要求，其中就包括枸橼酸舒芬太尼注射液。

[0007] 提高枸橼酸芬太尼注射液质量标准的工作，关键在于提高枸橼酸芬太尼原料药的质量标准。研究发现，要提高枸橼酸舒芬太尼原料药的质量标准，控制枸橼酸舒芬太尼合成原料及中间体杂质含量尤为关键。

发明内容

[0008] 本发明的目的在于，提供一种枸橼酸舒芬太尼合成原料及其中间体杂质的检查方法，该方法能够有效地控制枸橼酸芬太尼合成原料及中间体杂质的含量，从而为枸橼酸舒芬太尼成品中杂质的控制提供良好保障。

[0009] 枸橼酸舒芬太尼原料合成过程可能会发生以下反应：

[0010]

[0011] 从上述反应过程可以看出，控制枸橼酸舒芬太尼原料杂质的关键在于控制原料药中3-噻吩乙醇及对应产物3-噻吩乙基溴的含量。由于2-噻吩乙醇、3-噻吩乙醇、2噻吩乙基溴、3-噻吩乙基溴这四种物质的分子结构和理化性质都很相似，要取得良好的分离效果并不容易，必须要

[0012] 优化到合适的色谱条件。

[0013] 提供分析以上杂质的形成过程，本发明的主要目的就是提供一种操作简单的杂质检测方法，利用气相色谱(GC)进行检查的，具体包括如下步骤：

[0014] 标准溶液配制

[0015] 2-噻吩乙醇溶液：取2-噻吩乙醇试剂，直接进样。

[0016] 3-噻吩乙醇溶液：取3-噻吩乙醇试剂，直接进样。

[0017] 2-噻吩乙基溴溶液：取2-噻吩乙基溴，直接进样。

[0018] 3-噻吩乙基溴溶液：取3-噻吩乙基溴，直接进样。

[0019] 色谱条件

[0020] 色谱柱：CP8770(100％二甲基聚硅氧烷)30m*0.25mm*1.0um

[0021] 载气：氮气

[0022] 分流比1:200

[0023] 柱压力：15psi

[0024] 检测器：氢火焰离子检测器(温度为300℃)

[0025] 检测器灵敏度为：20

[0026] 进样口温度：250℃

[0027] 程序升温：柱温起始150℃保持5min，然后再以每分钟5.0℃升温至250℃[0028] 进样量：1ul。

[0029] 混合对照溶液：取1ml2-噻吩乙醇，1ml3-噻吩乙醇，1ml2-噻吩乙基溴，1ml3-噻吩乙基溴至50ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，直接进样。

[0030] 空白：直接用乙醇进样。

[0031] 混合对照溶液中主成分峰的分离度应大于1.5。

[0032] 取上述6种分别取1ul直接注入气相色谱仪。

[0033] 本发明的关键点在于：利用保留时间确定杂质种类，利用面积归一化法确定杂质含量。

[0034] 结果如表1所示，气象色谱图如图1所示。

[0035]

[0036]

[0037] 结论：混合对照溶液中4种物质分离度均大于1.5，符合规定。

[0038] 杂质含量比较小，不易通过色谱峰对杂质进行定性，所以本发明通过确定各待测物质标准品的主峰保留时间对各待测物质进行定性测定。上述四种物质主峰保留时间分别定为T1、T2、T3、T4。通过面积归一化法对各物质进行定量。标准规定：3-噻吩乙醇杂质含量不得高于0.1％，3-噻吩乙基溴杂质含量不得高于0.05％。

[0039] 说明书附图

[0040] 图1为2-噻吩乙醇，3-噻吩乙醇，2-噻吩乙基溴，3-噻吩乙基溴4中混合物的气象色谱图。

[0041] 图2为140801批次供试品2-噻吩乙醇气相色谱图。

[0042] 图3为140801批次供试品经溴化反应后2-噻吩乙基溴的气相色谱图。

[0043] 图4为140802批次供试品2-噻吩乙醇气相色谱图。

[0044] 图5为140802批次供试品经溴化反应后2-噻吩乙基溴的气相色谱图。

[0045] 图6为140901批次供试品2-噻吩乙醇气相色谱图。

[0046] 图7为140901批次供试品经溴化反应后2-噻吩乙基溴的气相色谱图。

具体实施方式

[0047] 实施例1

[0048] 取140801批次的2-噻吩乙醇适量，作为供试品，然后直接进样，记录色谱图。将色谱图上杂质保留时间和对照品杂质保留时间进行对照，对杂质进行定性。再根据各有关物质的峰面积采用面积归一化法对杂质进行定量。本发明可以对2-噻吩乙醇原料中3-噻吩乙醇杂质进行定性和定量，从而控制枸橼酸舒芬太尼合成原料2-噻吩乙醇的质量。检测结果见附图2，其检测数据如表2。

[0049] 表2.140801批次中的2-噻吩乙醇供试品气相检测数据

[0050]

[0051]

[0052] 取上述140801批次的2-噻吩乙醇通过溴化反应之后的中间体2-噻吩乙基溴适量，作为供试品，直接进样，记录色谱图。检测结果见附图3，其检测数据如表3。

[0053] 表3.140801批次中的中间体2-噻吩乙基溴中间体的气相检测数据

[0054]

[0055] 实施例2

[0056] 取140802批次的2-噻吩乙醇适量，作为供试品，然后直接进样，记录色谱图。将色谱图上杂质保留时间和对照品杂质保留时间进行对照，对杂质进行定性。再根据各有关物质的峰面积采用面积归一化法对杂质进行定量。本发明可以对2-噻吩乙醇原料中3-噻吩乙醇杂质进行定性和定量，从而控制枸橼酸舒芬太尼合成原料2-噻吩乙醇的质量。检测结果见附图4，其检测数据如表4。

[0057] 表4.140802批次中的2-噻吩乙醇供试品气相检测数据

[0058]

[0059] 取上述140802批次的2-噻吩乙醇通过溴化反应之后的中间体2-噻吩乙基溴适量，作为供试品，直接进样，记录色谱图。检测结果见附图5，其检测数据如表5。

[0060] 表5.140802批次中的中间体2-噻吩乙基溴中间体的气相检测数据

[0061]

[0062]

[0063] 实施例3

[0064] 取140901批次的2-噻吩乙醇适量，作为供试品，然后直接进样，记录色谱图。将色谱图上杂质保留时间和对照品杂质保留时间进行对照，对杂质进行定性。再根据各有关物质的峰面积采用面积归一化法对杂质进行定量。本发明可以对2-噻吩乙醇原料中3-噻吩乙醇杂质进行定性和定量，从而控制枸橼酸舒芬太尼合成原料2-噻吩乙醇的质量。检测结果见附图6，其检测数据如表6。

[0065] 表6.140901批次中的2-噻吩乙醇供试品气相检测数据

[0066]

[0067] 取上述140901批次的2-噻吩乙醇通过溴化反应之后的中间体2-噻吩乙基溴适量，作为供试品，直接进样，记录色谱图。检测结果见附图7，其检测数据如表7。

[0068] 表7.140901批次中的中间体2-噻吩乙基溴中间体的气相检测数据

[0069]

[0070]